LICEO BOLIVARIANO SANTIAGO MARIO IRAPA ESTADO SUCRE
Trabajo de Biologa
Profesora: Integrantes: RITZE NGEL TOLEDO RONALD MOERNO
Irapa, Marzo de 2014 INTRODUCCIN
Los cidos nucleicos son el cido desoxirribonucleico (ADN) y el cido ribonucleico (ARN). El ADN porta la informacin gentica que comanda la formacin de un organismo completo y, junto con el ARN, determinan las bases del funcionamiento celular a travs de la expresin de la informacin que contienen.
Actualmente no se sabe con certeza cul es la macromolcula ms antigua, si el ADN, el ARN o las protenas que constituyen el producto de expresin de estos. De hecho, uno de los mayores desafos es dilucidar la historia posible de cmo el ADN, el ARN y las protenas aparecieron y se vincularon entre s.
Tanto el ADN como el ARN son molculas orgnicas (las molculas orgnicas poseen en su estructura C y por lo menos un tomo de H). En las clulas procariotas, el ADN se encuentra en una regin denominada nucleoide y en las clulas eucariotas, en el interior del ncleo celular. La posicin del ARN en la clula depende de la variedad de la que se trate, as hay tres tipos de ARN: mensajero, de transferencia y ribosomal.
CIDO NUCLEICO Los cidos nucleicos son grandes polmeros formados por la repeticin de monmeros denominados nucletidos, unidos mediante enlaces fosfodister. Se forman, as, largas cadenas; algunas molculas de cidos nucleicos llegan a alcanzar tamaos gigantescos, con millones de nucletidos encadenados. Los cidos nucleicos almacenan la informacin gentica de los organismos vivos y son los responsables de la transmisin hereditaria. Existen dos tipos bsicos, el ADN y el ARN. Formula de los acidos nucleicos X+Y- xy X y + pn =
CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (ADN) El cido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, es un cido nucleico que contiene instrucciones genticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su transmisin hereditaria. El papel principal de la molcula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de informacin. Muchas veces, el ADN es comparado con un plano o una receta, o un cdigo, ya que contiene las instrucciones necesarias para construir otros componentes de las clulas, como las protenas y las molculas de ARN. Los segmentos de ADN que llevan esta informacin gentica son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propsitos estructurales o toman parte en la regulacin del uso de esta informacin gentica.
DESCUBRIMIENTO DEL ADN. Hasta mediados del siglo 20 no se sospechaba que el cido disoxirribonucleico, ADN, fuera la molcula capaz de asegurar la transmisin de los caracteres hereditarios de clula a clula, generacin tras generacin. Su limitada variedad qumica no permita suponer que poseyera la versatilidad y ductilidad necesarias para almacenar la informacin gentica de los seres vivos.
En 1869 un bilogo suizo Johann Friedrich Miesscher, utilizo primero alcohol caliente y luego una pepsina enzimatica, que separa la membrana celular y el citoplasma de la clula, el cientfico quera aislar el ncleo celular, concretamente en los ncleos de las clulas del pus obtenidas de los vendajes quirrgicos desechados y en la esperma del salmn, someti a este material a una fuerza centrifuga para aislar a los ncleos del resto y luego someti solo a los ncleos a un anlisis qumico.
De esta manera Miescher identifico a un nuevo grupo de substancias celulares a las que denomino nuclenas, observo la presencia de fsforo, luego Richard Altmann las identifico como cidos y les dio el nombre de cidos nucleicos. Robert Feulgen, en 1914, describi un mtodo para revelar por tincin el ADN, basado en el colorante fucsina. Se encontr, utilizando este mtodo, la presencia de ADN en el ncleo de todas las clulas eucariotas, especficamente en los cromosomas.
Durante los aos 20, el bioqumico P.A. Levene analizo los componentes del ADN, los cidos nucleicos y encontr que contena cuatro bases nitrogenadas: citosina y timina (pirimidinas), adenina y guanina (purinas); el azcar desoxirribosa; y un grupo fosfato. Tambin demostr que se encontraban unidas en el orden fosfato-azcar-base, formando lo que denomino un nucletido. Levene tambin sugiri que los nucletidos se encontraban unidos por los fosfatos formando el ADN. Sin embargo, Levene pens que se trataban de cadenas cortas y que las bases se repetan en un orden determinado. En el ao 1928 Frederick Griffith investigando una enfermedad infecciosa mortal, la neumona, estudi las diferencias entre una cepa de la bacteria Streptococcus peumoniae que produca la enfermedad y otra que no la causaba. La cepa que causaba la enfermedad estaba rodeada de una cpsula (tambin se la conoce como cepa S, del ingles smooth, o sea lisa, que es el aspecto de la colonia en las placas de Petri). La otra cepa (la R, de rugosa, que es el aspecto de la colonia en la placa de Petri) no tiene cpsula y no causa neumona.
Griffith inyect las diferentes cepas de la bacteria en ratones. La cepa S mataba a los ratones mientras que la cepa R no lo haca. Luego comprob que la cepa S, muerta por calentamiento, no causaba neumona cuando se la inyectaba. Sin embargo cuando combinaba la cepa S muerta por calentamiento, con la cepa R viva, es decir con componentes individuales que no mata a los ratones e inyectaba la mezcla a los ratones, los ratones contraan la neumona y moran.
En 1952 Alfred Hershey y Martha Chase realizaron una serie de experimentos destinados a dilucidar si el ADN o las protenas era el material hereditario. Marcando el ADN y las protenas con istopos radiactivos en un cultivo de un virus, se poda seguir el camino de las protenas y del ADN en un experimento, demostrando cual de ellos entraba en la bacteria.
Ese seria el material hereditario (factor transformador de Griffith). Dado que el ADN contiene fsforo (P) pero no azufre (S), ellos marcaron el ADN con fsforo-32 radioactivo. Por otra parte, las protenas no contienen P pero si S, y por lo tanto se marcaron con azufre-35. Hershey y Chase encontraron que el S-35 queda fuera de la clula mientras que el P-32 se lo encontraba en el interior, indicando que el ADN era el soporte fsico de la herencia.
LA ESTRUCTURA DEL ADN. Cada molcula de ADN est constituida por dos cadenas o bandas formadas por un elevado nmero de compuestos qumicos llamados nucletidos. Estas cadenas forman una especie de escalera retorcida que se llama doble hlice. Cada nucletido est formado por tres unidades: una molcula de azcar llamada desoxirribosa, un grupo fosfato y uno de cuatro posibles compuestos nitrogenados llamados bases: adenina (abreviada como A), guanina (G), timina (T) y citosina (C).La siguiente figura ilustra las tres unidades, en el dibujo que esta a la izquierda, la bolita roja es oxigeno, la violeta es fosforo, la verde es carbono, la blanca es hidrogeno y la azul es nitrgeno.
La molcula de desoxirribosa ocupa el centro del nucletido y est flanqueada por un grupo fosfato a un lado y una base al otro. El grupo fosfato est a su vez unido a la desoxirribosa del nucletido adyacente de la cadena, en el siguiente dibujo se ilustra la unin del grupo fosfato y la desoxirribosa, en esta ultima los tomos de carbono no fueron escritos para simplificar el dibujo,
Estas subunidades enlazadas desoxirribosa-fosfato forman los lados de la escalera; las bases estn enfrentadas por parejas, mirando hacia el interior y forman los travesaos. Los nucletidos de cada una de las dos cadenas que forman el ADN establecen una asociacin especfica con los correspondientes de la otra cadena. Debido a la afinidad qumica entre las bases, los nucletidos que contienen adenina se acoplan siempre con los que contienen timina, y los que contienen citosina con los que contienen guanina. Las bases complementarias se unen entre s por enlaces qumicos dbiles llamados puentes de hidrgeno. El siguiente esquema muestra lo descripto en forma muy ilustrativa, el enlace dbil, puente de hidrogeno se lo representa en lneas punteadas,
FUNCIN DEL ADN La informacin gentica almacenada en la secuencia de nucletidos de ADN sirve para dos propsitos: Es la fuente de informacin para la sntesis de todas las molculas de protenas de la clula y el organismo. Provee la informacin heredada por las clulas hijas de la progenie.
Ambas funciones requieren que las clulas del ADN sirva como molde, en el primero de los casos para la transcripcin de informacin al ARN y en el segundo, para la replicacin de la informacin en las molculas hijas de ADN.
CIDO RIBONUCLEICO El cido ribonucleico, tambin conocido como ARN, es uno de los dos cidos nucleicos principales presentes en el cuerpo humano. El otro cido principal es el cido desoxirribonucleico, o ADN, que porta el cdigo gentico de la clula. Juntas, estas dos molculas dirigen todas las actividades del cuerpo.
ESTRUCTURA El cido ribonucleico tiene un esqueleto formado por una cadena de grupos de fosfatos y molculas de ribosa (un tipo de azcares) alternados. Cada una de las molculas de ribosa tiene una base adherida a stas. Las cuatro bases de el ARN son la adenina, uracilo, citosina y guanina. Estas bases difieren de las del ADN slo en el hecho de que tienen uracilo en vez de tiamina, una diferencia que hace al ARN de una sola cadena, mientras que el ADN consta de una hlice de cadena doble.
FUNCIONES DEL ARN Si bien el ADN contiene la informacin gentica del organismo, el ARN permite que sta se transforme en protenas. Existen tres tipos de ARN; el mensajero (ARNm), que lleva la informacin del ncleo al citoplasma; el ribosomal (ARNr), que conforma la maquinaria necesaria para la sntesis proteica (y tiene actividad cataltica), y el de transferencia (ARNt), que transporta los aminocidos necesarios para sintetizar la nueva cadena proteica.
TIPOS DE ARN ARN mensajero: El ARN mensajero (ARNm o RNAm) lleva la informacin sobre la secuencia de aminocidos de la protena desde el ADN, lugar en que est inscrita, hasta el ribosoma, lugar en que se sintetizan las protenas de la clula. Es, por tanto, una molcula intermediaria entre el ADN y la protena y apelativo de "mensajero" es del todo descriptivo. En eucariotas, el ARNm se sintetiza en el nucleoplasma del ncleo celular y donde es procesado antes de acceder al citosol, donde se hallan los ribosomas, a travs de los poros de la envoltura nuclear.
ARN de transferencia: Los ARN de transferencia (ARNt o tRNA) son cortos polmeros de unos 80 nucletidos que transfiere un aminocido especfico al polipptido en crecimiento; se unen a lugares especficos del ribosoma durante la traduccin. Tienen un sitio especfico para la fijacin del aminocido (extremo 3') y un anticodn formado por un triplete de nucletidos que se une al codn complementario del ARNm mediante puentes de hidrgeno. Estos ARNt, al igual que otros tipos de ARN, pueden ser modificados post-transcripcionalmente por enzimas. La modificacin de alguna de sus bases es crucial para la descodificacin de ARNm y para mantener la estructura tridimensional del ARNt. ARN ribosmico o ribosomal:
ARN de interferencia: Los ARN interferentes (ARNi o iRNA) son molculas de ARN que suprimen la expresin de genes especficos mediante mecanismos conocidos globalmente como ribointerferencia o interferencia por ARN. Los ARN interferentes son molculas pequeas (de 20 a 25 nuclotidos) que se generan por fragmentacin de precursores ms largos. Se pueden clasificar en tres grandes grupos:
Micro ARN: Los micro ARN (miARN o RNAmi) son cadenas cortas de 21 22 nucletidos hallados en clulas eucariotas que se generan a partir de precursores especficos codificados en el genoma. Al transcribirse, se pliegan en horquillas intramoleculares y luego se unen a enzimas formando un complejo efector que puede bloquear la traduccin del ARNm o acelerar su degradacin comenzando por la eliminacin enzimtica de la cola poli A.
ARN asociados a Piwi: Los ARN asociados a Piwi son cadenas de 29-30 nucletidos, propias de animales; se generan a partir de precursores largos monocatenarios (formados por una sola cadena), en un proceso que es independiente de Drosha y Dicer. Estos ARN pequeos se asocian con una subfamilia de las protenas "Argonauta" denominada protenas Piwi. Son activos las clulas de la lnea germinal; se cree que son un sistema defensivo contra los transposones y que juegan algn papel en la gametognesis. ARN antisentido: Un ARN antisentido es la hebra complementaria (no codificadora) de un hebra ARNm (codificadora). La mayora inhiben genes, pero unos pocos activan la transcripcin. El ARN antisentido se aparea con su ARNm complementario formando una molcula de doble hebra que no puede traducirse y es degradada enzimticamente. La introduccin de un transgen codificante para un ARNm antisentido es una tcnica usada para bloquear la expresin de un gen de inters. Un mARN antisentido marcado radioactivamente puede usarse para mostrar el nivel de transcripcin de genes en varios tipos de clulas. Algunos tipos estructurales antisentidos son experimentales, ya que se usan como terapia antisentido.
ARN largo no codificante: Muchos ARN largos no codificantes (ARNnc largo o long ncARN) regulan la expresin gnica en eucariotas; uno de ellos es el Xist que recubre uno de los dos cromosomas X en las hembras de los mamferos inactivndolo (corpsculo de Barr).
ARN pequeo nucleolar: Los ARN pequeos nucleolares (ARNpno o snoRNA), hallados en el nuclolo y en los cuerpos de Cajal, dirigen la modificacin de nucletidos de otros ARN; el proceso consiste en transformar alguna de las cuatro bases nitrogenadas tpicas (A, C, U, G) en otras. Los ARNpno se asocian con enzimas y los guan aparendose con secuencias especficas del ARN al que modificarn. Los ARNr y los ARNt contienen muchos nucletidos modificados.
ARN mitocondrial: La mitocondrias tienen su propio aparato de sntesis proteica, que incluye ARNr (en los ribosomas), ARNt y ARNm. Los ARN mitocondriales (ARNmt o mtARN) representan el 4% del ARN celular total. Son transcritos por una ARN polimerasa mitocondrial especfica.
PROTENAS La palabra protena proviene del griego protop (lo primero, lo principal, lo ms importante). Las protenas son las responsables de la formacin y reparacin de los tejidos, interviniendo en el desarrollo corporal e intelectual. Las protenas son biopolmeros (macromolculas orgnicas), de elevado peso molecular, constituidas bsicamente por carbono (C), hidrgeno (H), oxgeno (O) y nitrgeno (N); aunque pueden contener tambin azufre (S) y fsforo (P) y, en menor proporcin, hierro (Fe), cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (Y), entre otros elementos.
Estos elementos qumicos se agrupan para formar unidades estructurales (monmeros) llamados aminocidos (aa), a los cuales se consideran como los "ladrillos de los edificios moleculares proteicos". Estos edificios macromoleculares se construyen y desmoronan con gran facilidad dentro de las clulas, y a ello debe precisamente la materia viva su capacidad de crecimiento, reparacin y regulacin.
La unin de un bajo nmero de aminocidos da lugar a un pptido; si el nmero de aa que forma la molcula no es mayor de 10, se denomina oligopptido; si es superior a 10, se llama polipptido y si el nmero es superior a 50 aa, se habla ya de protena.
Las protenas son, en resumen, biopolmeros de aminocidos y su presencia en los seres vivos es indispensable para el desarrollo de los mltiples procesos vitales.
ESTRUCTURA DE LAS PROTENAS Estructura primaria: Una cadena polipeptdica consiste en una cadena lineal de aminocidos unidos por enlaces peptdicos. El primer puesto de la cadena corresponde al grupo amino terminal, y la estructura primaria es la secuencia en la que estn situados todos los constituyentes hasta llegar al carboxilo terminal. Esta secuencia est codificada genticamente.
Existen cadenas polipeptdicas de cualquier nmero de aminocidos, sin que exista una solucin de continuidad entre pptidos y protenas. Por convencin, se suele considerar protena a quellos polipptidos con un peso molecular del orden de 10.000 o ms.
Estructura secundaria: La estructura secundaria es la forma en la que la cadena polipeptidica se pliega en el espacio. En una protena, cada tramo de cadena polipeptdica tiene distinta estructura secundaria. Existen varias formas definidas de estructura secundaria, las ms importantes de las
Estructura terciaria: La estructura terciaria de la protena es la forma en la que se organizan en el espacio los diferentes tramos de la cadena polipeptdica, que pueden tener una estructura secundaria definida, como las hlices u hojas o no tenerla. La estructura terciaria est mantenida por enlaces inicos y de puentes de hidrgeno entre las cadenas laterales de los aminociodos, enlaces hidrofbicos y eventualmente puentes disulfuro.
Estructura cuaternaria: La estructura cuaternaria de una protena es la forma en la que se asocian las distintas subunidades constituyentes, si es que existen. Es decir, para poder hablar de estructura cuaternaria es necesario que la protena est formada por varias subunidades. Como ejemplos de protenas con estructura cuaternaria se puede considerar la hemoglobina, las inmunoglobulinas o la miosina. SNTESIS DE PROTENAS Se conoce como sntesis de protenas al proceso por el cual se componen nuevas protenas a partir de los veinte aminocidos esenciales. En estre proceso, se transcribe el ADN en ARN. La sntesis de protenas se realiza en los ribosomas situados en el citoplasma celular. En el proceso de sntesis, los aminocidos son transportados por ARN de transferencia correspondiente para cada aminocido hasta el ARN mensajero donde se unen en la posicin adecuada para formar las nuevas protenas.
MANIPULACIN DE LOS GENES La manipulacin gentica consiste en las tcnicas dirigidas a modificar el caudal hereditario de alguna especie, con fines variables, desde la superacin de enfermedades de origen gentico (terapia gentica) o con finalidad experimental (conseguir un individuo con caractersticas no existentes hasta ese momento).
Llegar a la posibilidad de realizar modificaciones en la composicin hereditaria de una especie requiere una serie de pasos, de los cuales unos cuantos ya han sido dados. El primero de ellos fue el descubrimiento del cromosoma humano, formado por cido cido que conforma los genes, los cules a su vez se ubican en los cromosomas.
Cada especie tiene un nmero especfico de cromosomas, los humanos contamos con 23 pares, es decir, 46 cromosomas.
Hay que conocer el hecho de que la informacin gentica es un conjunto de instrucciones que se transmiten en un nico idioma: esto quiere decir que es universal, por lo que la diferencia entre un clavel, un rinoceronte y una persona humana es la cantidad de informacin que tiene su cromosoma.
CLONACIN DE GENES Clonacin de genes, proceso mediante el cual puede aislarse un gen de entre todos los genes diferentes que existen en un organismo, lo que permite realizar su caracterizacin. La clonacin molecular es la base de la mayora de los procedimientos de ingeniera gentica y su estrategia bsica consiste en trasladar el gen deseado desde un genoma grande y complejo hasta otro pequeo y sencillo.
La clonacin molecular se puede dividir en varios pasos. En primer lugar, debe aislarse el cido desoxirribonucleico (ADN) del que se parte. Si se trata de ADN genmico debe digerirse previamente con enzimas de restriccin para obtener una mezcla de fragmentos de tamao adecuado para la clonacin. Tambin puede clonarse ADN sintetizado por transcripcin inversa (ADN copia o ADNc), a partir de la poblacin de ARN mensajeros de una clula, o incluso ADN sintetizado mediante la reaccin en cadena de la polimerasa (RCP). El segundo paso consiste en unir los fragmentos de ADN a un vector de clonacin con la enzima ADN ligasa. Los vectores de clonacin que se utilizan son plsmidos o bacterifagos (virus capaces de infectar bacterias). Los csmidos son otros vectores de clonacin construidos artificialmente que presentan caractersticas de ambos. Posteriormente, estas construcciones de ADN deben introducirse y mantenerse en un organismo hospedador, generalmente una bacteria. Una vez realizados todos estos pasos se obtiene una batera de bacterias que contiene todos los genes presentes en un organismo. Cuando se parte de ADN genmico digerido o fragmentado con enzimas de restriccin, cada bacteria contiene un fragmento del genoma original. Esta batera de bacterias recibe el nombre de genoteca genmica. Si se parte de ADNc obtenido del total de los ARN mensajeros de una clula, cada bacteria contendr una nica copia de ADNc y, por tanto, un nico gen, con la ventaja de que en este caso se ha eliminado la informacin no codificadora (intrones) presente en el ADN.
Antes de proceder al estudio de los genes es necesario identificar las bacterias que contienen el gen o genes de inters. En primer lugar, deben identificarse aquellas bacterias que han recibido los vectores de clonacin de aquellas que no recibieron las construcciones. Cuando el vector de clonacin es un plsmido, normalmente se utiliza un marcador del vector (generalmente la resistencia a un antibitico), de tal manera que slo las bacterias que contengan el plsmido podrn crecer en el medio que contenga dicho antibitico. En el caso, por el contrario, de que las clulas contengan un fago, basta con buscar la presencia de placas de lisis. En segundo lugar, deben identificarse las bacterias que presenten los genes de inters para separarlas del resto. Para ello, se recurre a diversas estrategias que van desde la hibridacin con sondas de cidos nucleicos (tanto en genotecas genmicas como en genotecas de expresin), hasta el empleo de tcnicas de inmunodeteccin para genotecas de expresin, que permiten detectar la protena producida por el gen deseado mediante anticuerpos especficos. Entonces, se toma esta bacteria y se hace crecer para producir un clon de bacterias idnticas. Como el vector que contiene el ADN insertado se replica siempre que la clula bacteriana se divide, se produce la cantidad suficiente de ADN insertado clonado necesaria para caracterizar el gen. De esta manera, es posible estudiar los genes que codifican protenas y que tienen un inters especial, o aquellos cuya inactivacin, consecuencia de una mutacin, origina una enfermedad especfica. Por ejemplo, se puede determinar su secuencia y la naturaleza de la mutacin que da lugar a una enfermedad.
En algunos casos, el gen se puede expresar en la clula bacteriana para producir la protena especfica (a partir de una genoteca de expresin), que se puede emplear en el tratamiento de enfermedades como la diabetes mellitus (insulina) o el enanismo (hormona del crecimiento). Recientemente, se han podido introducir genes funcionales clonados en los individuos, para tratar una enfermedad de forma ms directa. Es probable que el empleo de estos procedimientos de tratamiento gentico con ADN clonado aumente en el futuro.
MANIPULACION GENTICA La manipulacin gentica es modificar la informacin gentica de la especie. Es un procedimiento cuyas tcnicas pueden ser utilizadas en benfico de la humanidad, como la curacin de enfermedades, la creacin de mejores razas de ganado, etc. Tambin, para la procreacin y la experimentacin en seres humanos.
En este proceso es muy importante conocer la informacin de un cromosoma humano, esto llev a un proyecto llamado: El Genoma Humano, con l se pudo descifrar de forma completa esa informacin cromosmica y que tipo de informacin transmite ese gen.
CONCLUSIN
El ADN se encuentra constituido por nucletidos, que son molculas orgnicas compuestas a su vez por una base nitrogenada, un azcar (la desoxirribosa) y un grupo fosfato. La informacin gentica en el ADN posibilita la sntesis del ARN y este, a su vez, la sntesis de protenas, que se constituyen como los productos de expresin de la informacin gentica. Estas protenas pueden tener una funcin estructural o enzimtica. Si tienen una funcin estructural, formarn parte de alguna de las estructuras de la clula, como la membrana plasmtica, la envoltura nuclear, las mitocondrias, etc.
En el proceso de sntesis, los aminocidos son transportados por ARN de transferencia correspondiente para cada aminocido hasta el ARN mensajero donde se unen en la posicin adecuada para formar las nuevas protenas.
Al finalizar la sntesis de una protena, se libera el ARN mensajero y puede volver a ser ledo, incluso antes de que la sntesis de una protena termine, ya puede comenzar la siguiente, por lo cual, el mismo ARN mensajero puede utilizarse por varios ribosomas al mismo tiempo.