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UNFV/FIIS/EPIA MICROBIOLOGIA GENERAL

V. CUESTIONARIO

1. En qu se diferencian los Erlenmeyer y los kitasatos?

Los erlenmeyer son recipientes de forma cnica y fondo plano, que se caracteriza por tener
un dimetro 3 5 veces mayor en su porcin inferior con respecto a su porcin superior.

Aunque los erlenmeyer pueden emplearse para la preparacin de diferentes reactivos, esta
cristalera est diseada especficamente para la preparacin de compuestos que requieran
ser sometidos a la accin del calor, como por ejemplo, la preparacin de medios de cultivo,
debido a que su forma cnica, hace que los vapores se condensen en el cuello, lo que
propicia que no afecte significativamente el volumen de la preparacin. Los erlenmeyer se
fabrican de diferentes tamaos. Los ms empleados en el laboratorio de microbiologa son
los de: 100, 250, 300,500 y 1 000 ml.

Los Kitasatos, son similares a los erlenmeyer con la diferencia de que en el cuello tiene
insertado un pequeo tubo corto en direccin horizontal abierto en su porcin distal siendo
las paredes de vidrio ms gruesas, para soportar las diferencias de presiones externas e
internas provocadas por las tcnicas de filtracin al vaco para los que bsicamente son
empleados. Al igual que los erlenmeyer se fabrican de diferentes tamaos.

2. Cul es la finalidad de utilizar materiales limpios y estriles en el laboratorio?

Los microorganismos pueden producir enfermedades cuando infectan personas, animales y
plantas y cuya gravedad oscila entre una infeccin dbil, intoxicacin e incluso la muerte.
Pueden contaminar los alimentos y producir cambios fsicos y qumicos en ellos,
hacindolos en algunos casos incomibles e incluso venenosos. Los microorganismos son
responsables tambin de la alteracin de muchos otros materiales, generando graves
prdidas econmicas. Por ello es indispensable disponer de procedimientos para controlar la
contaminacin y el crecimiento microbiano. Las principales razones para controlar la
contaminacin y el crecimiento microbiano. Las principales razones para controlar a los
microorganismos pueden resumirse de la siguiente forma:

Para evitar la transmisin de las enfermedades y las infecciones.
Para eliminar los microorganismos de un hospedador que est infectado.
Para eliminar microorganismos de diferentes materiales y as evitar su deterioro y
alteracin.

3. Cul es la finalidad de las incubadoras?

En biologa, una incubadora es un dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer
cultivos microbiolgicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la temperatura, la
humedad y otras condiciones en grado ptimo, tales como el contenido de dixido de
carbono (CO2) y de oxgeno en su atmsfera interior. Las incubadoras son esenciales para
una gran cantidad de trabajos experimentales en biologa celular, la microbiologa y en
biologa molecular y se utilizan para cultivos celulares, tanto bacterianos como de clulas
eucariotas. Existen 3 tipos de incubadoras y son las siguientes:

Incubadora seca.
Incubadora hmeda de CO
2

Incubadora roller.


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4. En qu se diferencian los hornos microondas de los hornos convencionales utilizados
en laboratorio?

Horno microondas: Puede causar un exceso de calentamiento en algunos materiales con
baja conductividad trmica, que tambin tienen constantes dielctricas que aumentan con la
temperatura. Un ejemplo es el vidrio, que puede exhibir embalamiento trmico en un horno
de microondas hasta el punto de fusin. Adems, las microondas pueden derretir algunos
tipos de rocas, produciendo pequeas cantidades de lava sinttica. Algunas cermicas
tambin se pueden fundir, e incluso pueden llegar a aclararse enfriarse.

Hornos convencionales utilizados en laboratorio: Horno de esterilizacin. La
esterilizacin por calor seco produce la destruccin de los microorganismos por oxidacin
de sus componentes celulares Entre las ventajas de este mtodo de esterilizacin estn que
no deja residuos, y es un mtodo rpido y econmico. Adems permite la esterilizacin de
materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas. Su
principal desventaja es que slo debe emplearse para esterilizar materiales termoestables.


5. Por qu calibrar los equipos utilizados en el laboratorio, cuales son los riesgos de no
hacerlo?

El laboratorio debe contar con un programa de calibracin, verificacin y mantenimiento de
sus equipos de medicin. La calibracin es la comparacin de un sistema de medicin
frente a estndares conocidos. Calibrar es comparar, no es ajustar, aunque de una
calibracin se pueda concluir que un equipo deba ser ajustado o corregido. La calibracin
proporciona la seguridad de que los instrumentos crticos de medida y los equipos
especficos utilizados en un proceso miden con la exactitud y precisin requeridas en las
especificaciones de los procedimientos.

Se deduce entonces su importancia clave, porque la utilizacin de un equipo que no cumple
con los requisitos especificados puede arrojar mediciones inexactas, que a su vez podran
llevar a tomar decisiones equivocadas y muy costosas.

6. Qu diferencia existe tanto en equipos, finalidad y proceso entre la incineracin y el
quemar una muestra o sustancia?

Potencialmente la incineracin puede destruir cualquier material conteniendo carbono
orgnico, incluyendo por tanto a los microorganismos patgenos.
La incineracin reduce la masa y el volumen del material tratado entre un 80 a un
95 %.
Es ventajosa dado que a los residuos patolgicos los transforma en irreconocibles.
Para reducir riesgos presentes en el manipuleo, es importante prever un sistema de
carga automtica al incinerador de las bolsas y recipientes conteniendo residuos.
A los efectos de no provocar efectos indeseados, debe existir una compatibilidad entre el
tipo de material de las bolsas y recipientes y el proceso de tratamiento elegido. Por tanto
para el caso de incineracin deben emplearse recipientes de plstico no clorados, tales como
el polietileno y polipropileno.

Se lleva a cabo en los hornos rotatorios.



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Finalidad:

Posibilidad de recuperacin de energa.
Posibilidad de tratamiento de numerosos tipos de residuos.
Posibilidad de implantarlo cerca de ncleos urbanos.

Proceso: Se usa los hornos mediante el proceso de combustin.

7. Cmo debe realizarse el almacenamiento de los reactivos y medios de cultivo?

Medios de cultivo: El almacenamiento debe realizarse en las condiciones apropiadas.
Envases: deben estar hermticamente cerrados. (Especialmente en medios deshidratados)
No deben utilizarse medios deshidratados que presenten apelmazamiento o un cambio de
color. Se debe verificar (siempre que sea necesario) que los medios de cultivo y diluyentes
tengan caractersticas adecuadas con respecto a:

Recuperacin o supervivencia de los microorganismos de inters (productividad)
Inhibicin o supresin de microorganismos no deseados (selectividad)


Debe determinarse y verificarse el perodo de validez de los medios preparados en las
condiciones de conservacin especificadas.
En general los medios preparados se guardan:
En heladera no ms de tres meses
A temperatura ambiente no ms de un mes en condiciones que impidan que su
composicin sea modificada.
Observar cambio del color, evaporacin, la deshidratacin o el crecimiento microbiano.

Reactivos: Verifique constantemente que los recipientes contenedores de sustancias
qumicas no presenten seales de deterioro y que la etiqueta se conserve en buen estado.
No almacenar reactivos que se encuentren envasados en vidrio en el piso.
Los reactivos que requieran refrigeracin deben estar muy bien cerrados y en
refrigeradores seguros, no se debe almacenar alimentos en estas neveras.

Lo mejor es que el almacenamiento de reactivos se encuentre a una altura del nivel de los
ojos esto evitara accidentes en caso de derrame, si se encuentran a mayor altura utilizar
siempre una escalera segura para alcanzarlos esto con el fin de evitar que si el recipiente se
quiebra no caiga sobre la cara de quien este manipulando.

En los laboratorios los gabinetes donde se encuentran almacenadas las sustancias qumicas
deben estar marcados para poder separar los reactivos incompatibles y que estos se
encuentren de manera segura, todos los reactivos deben permanecer bien tapados y en
gabinetes cerrados.









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8. Explique cmo se realiza la ultra centrifugacin y que accesorios y/u otros accesorios
necesita?

Una ultracentrifugadora consiste en una cmara al vaco y refrigerada que contiene un rotor,
el cual es manejado por un motor elctrico capaz de girar a alta velocidad. Las muestras son
ubicadas en tubos que se encuentran dentro del rotor o sujetos a este. La velocidad
rotacional puede alcanzar ms de 100.000 rpm para el modelo floor, 150.000 rpm para el
modelo bench-top (Beckman Optima Max-XP), generando fuerzas centrifugas entre
800.000g y 1.000.000g. Esta fuerza causa la sedimentacin de macromolculas e incluso
puede causar una distribucin no uniforme de molculas pequeas.

Como los diferentes fragmentos de la clula tienen diferentes tamaos y densidades, cada
fragmento se va a depositar en un precipitado con diferentes fuerzas centrifugas mnimas.
De esta manera, la separacin de la muestra en diferentes capas puede realizarse mediante
un primer centrifugado de la muestra homognea original bajo fuerzas dbiles, removiendo
el precipitado, y posteriormente exponiendo las subsecuentes fases sobrenadantes a campos
centrfugos cada vez mayores.

Cada vez, una porcin de diferente densidad es precipitada a la parte inferior del tubo y es
extrada. La repetida aplicacin de este proceso produce un rango de capas que incluye
diferentes partes de la muestra original. Algunos pasos adicionales pueden realizarse para
refinar an ms cada uno de los precipitados obtenidos. La sedimentacin depende de la
masa, la forma y el volumen especfico parcial de una macromolcula, as como tambin de
la densidad del solvente, el tamao del rotor y la tasa de rotacin.

La velocidad de sedimentacin puede ser monitoreada durante el experimento para calcular
la masa molecular, as como el coeficiente de sedimentacin. Valores grandes de S (mayor
tasa de sedimentacin) corresponden a un mayor peso molecular. Partculas ms densas se
sedimentan a mayor velocidad. Las protenas largas tienen mayores coeficientes de friccin
y se sedimentan ms lentamente para asegurar mayor precisin.

BIBLIOGRAFIA

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http://es.scribd.com/doc/395622/Manual-de-laboratorio
http://es.wikipedia.org/wiki/Incubadora_(aparato_de_laboratorio)
http://www.scientificaperusac.com/aseguramiento_calidad_medios_cultivo.html
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Preparaci%C
3%B3n_de_medios_de_cultivo.pdf
http://www.unipamplona.edu.co/unipamplona/hermesoft/portalIG/home_9/recursos/01_gen
eral/contenidos/laboratorios/guiasyfichas/25022008/manualdecalidadmedios.pdf