Mac Conkey Agar.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos.
Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la
familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato
de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo
de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH
(rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Frmula (en gramos por litro) Instrucciones
Peptona 17.0
Suspender 50 g del polvo por litro de agua destilada.
Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar.
Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta
disolver. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15
minutos.
Pluripeptona 3.0
Lactosa 10.0
Mezcla de sales biliares 1.5
Cloruro de sodio 5.0
Agar 13.5
Rojo neutro 0.03
Cristal violeta 0.001
pH final: 7.1 0.2
Siembra
- Sembrar en superficie.
- Utilizando la tcnica de Pour Plate: sembrar 1 ml de muestra y agregar aproximadamente 15 ml de medio de cultivo
fundido y enfriado a 45-50 C.
Incubacin
Durante 18-48 horas, a 35-37 C, en atmsfera aerbica
Manitol Salado Agar.
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de estafilococos.
Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de muestras clnicas, alimentos, productos
cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria.
Tambin, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halfilas de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados
(TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas especies pueden no desarrollar.
Fundamento
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los estafilococos coagulasa positiva
hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos
coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se repicarn en un
medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y
minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es
el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se
modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del
mismo color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o
prpura.
Frmula (en gramos por litro) Instrucciones
Extracto de carne 1.0
Suspender 111 g de polvo por litro de agua
destilada. Reposar 5 minutos y mezclar calentando a
ebullicin durante 1 o 2 minutos. Distribuir y
esterilizar en autoclave a 118-121C durante 15
minutos.
Pluripeptona 10.0
d-Manitol 10.0
Cloruro de sodio 75.0
Agar 15.0
Rojo de fenol 0.025
pH final: 7.4 0.2
Siembra
Colonias tpicas
Agar Manitol salado o siglas en ingls MSA (Mannitol salt agar) es un medio de cultivo que
se utiliza normalmente en microbiologa. Permite el crecimiento de un determinado grupo de
bacterias mientras que inhibe el crecimiento de otras. Este medio es importante en
ellaboratorio clnico debido a que es capaz de distinguir los microorganismo patognicos en un
corto periodo de tiempo. Contiene una alta concentracin (~7.5%-10%) de sal (NaCl),
hacindolo selectivo para Staphylococci (y 'Micrococcaceae) debido a que el nivel de NaCl es
inhibitorio para la mayora de las bacterias. Adems es contiene manitol y un indicador de
pH; rojo de fenol.
Coagulasa-positivo Staphylococci producen colonias amarillas con zonas amarillas, mientras
que coagulasa-negativo Staphylococciproducen colonias rojas o ligeramente rosadas sin
cambio alguno al medio. Si un organismo es capaz de fermentar el manitol, un subproducto
cido es creado que hace que el rojo de fenol cambie a amarillo. Se usa para el aislamiento
selectivo de colonias deStaphylococci sospechosas de ser patgenas.
ndice
[ocultar]
1 Posibles resultados
2 Composicin tpica
3 Referencias
4 Enlaces externos
5 Vase tambin
Posibles resultados[editar]


Una placa de agar Manitol salado con colonias de Micrococcus sp. (1), [[]](2) and S. aureus (3).
Gram - : crecimiento inhibido
1

Composicin tpica[editar]
El agar manitol salado suele tener la siguiente composicin:
2

5.0 g/L enzima digestiva de casena
5.0 g/L enzima digestiva de tejido animal
1.0 g/L extracto de carne de vaca
10.0 g/L D-manitol
75.0 g/L NaCl
0.025 g/L rojo de fenol
15.0 g/L agar
pH 7.4 0.2 at 25 C
Referencias[editar]
1. Volver arriba