19/5/2014 Cultivo de Spirulina mxima

http://www.fao.org/ag/aga/AGAP/frg/lrrd/lrrd1/1/gloria.htm 1/8
LivestockResearchforRuralDevelopment Volume1,Number1,November1989
CultivodeSpirulinamaximaparasuplementacinproteica
GloriaXimenaPedraza
FundacinCIPAV,AA20591,Cali,Colombia
Summary
ExperimentswerecarriedoutintheInstitutoMayorCampesino(IMCA),Buga,Valle(Meantemperature
21C1000mabovesealevel),toevaluatelocalsourcesofmediaforthecultureofSpirulinamaxima.
Biodigesteranddistilleryeffluentswerecomparedatdilutions(volumeseffluent:water)of0.25:0.75,0.5:0.5,
0.75:0.25y1.0:0.0.Aninoculumofspirulina(aproximately192cells/ml)wasaddedattherateof200mlper
1,000mlofmedia.Thetreatmentsforthedistilleryeffluentwere:0.5:0.5,0.6:0.4and0.7:0.3(effluent:water).
Sodiumbicarbonatewasaddedinconcentrationsof17and34g/litreofmediaforthebiodigesterand
distilleryeffluenttreatments,respectively.Themediawereculturedinrectangularglasscontainersandagitated
bybubblingairwithamicrocompressor.
Fastestgrowthoftheculturewaswithdilutionsof0.5:0.5volumesofeffluent:waterforbothsubstrates.
Concentrationsofspirulinacellswere530,1380and9500/mlafter2,15and30daysofincubationwith
biodigestereffluent.Correspondingvaluesfordistilleryeffluentwere1170,2190and10,460.
MajorcontaminantsinthebiodigestereffluentmediawereChlorella,AmoebaandParameciumspp.The
temperatureofthemediarangedfrom23to29C,butappearedtohavenomarkedeffectonthegrowthrate
ofthespirulina.
Keywords:Spirulina,biodigester,distillery,effluent,protein,animal,bicarbonate,culture.
Resumen
EnelInstitutoMayorCampesinoenBugaconunatemperaturade21Cyunaalturade1000msnm,se
llevaronacaboensayosparaevaluarmediosdecultivoapropiadosparalacianobacteriaSpirulinamaxima
usandoefluentedebiodigestoresyvinaza,desechoprovenientedelafermentacinalcohlicadelasmieles
despusdelaadicindecidosulfrico,suplementandoconbicarbonatodesodioparacumplirlos
requerimientosencarbonoyestabilizarelpH.Enprimerainstanciasereprodujolasemillaenmedioqumico
conuntiempodedoblajedebiomasade20a30das.Luegoserealizaronensayosusandoproporciones
(volmenes)deefluente:aguade0.25:0.75,0.5:0.5,0.75:0.25y1.0:0.0.Aestasmezclasseagregun
inculodespirulinaenproporcionesde200mldeinculoporcadalitrodelamezcla.Elinculocontena
192clulas/ml,dandoasunaconcentracininicialdeclulasenlosdistintosmediosdeaproximadamente32
clulasporml.Paralavinaza,lasproporciones(vinaza:agua)fueron:0.5:0.5,0.6:0.4y0.7:0.3,agregndose
lasmismascantidadesdeinculodespirulina.Paraelefluentedebiodigestorseagreg17gdebicarbonato
desodioporlitrodelmedioyenelcasodelavinaza34gdebicarbonato.Losmediossecolocaronen
estanquesrectangularesdevidrio,yfueronagitadosconairedeunmicrocompresor.
Seobtuvolamayortasadereproduccindelcultivoconeltratamientode0.5:0.5(efluente:agua)tantopara
eldelbiodigestorcomoeldeladestilera.Laslecturasfueron530,1380y9500clulas/mlalos2,15y30
dasdespus.Losvalorescorrespondientesparalavinazafueron1170,2190y10,460respectivamente.La
mayorcontaminacinquepresentelcultivofuedebidaaChlorellasp.yprotozoarioscomoAmoebasp.y
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Parameciumsp.Loscambiosdetemperaturaregistradosentreeldiaylanochefueronconsiderables
(desde23a29C),peroalparecernoafectaronsignificativamenteeldesarrollodelcultivo.
Palabrasclaves:Spirulinamaxima,cultivo,efluente,vinaza,bicarbonatodesodio.
Introduccin
Lafaltadefuentesproteicasquepuedanreemplazarlosconcentradosconaltoscostosdeadquisicinenel
mercadoparalospequeosproductores,llevaconsiderarlaSpirulinamaximacomounafuente
alternativaconaltocontenidoproteico(65%)yconunbalancedeaminocidosexcelente,aunqueconun
contenidobajoenmetioninaparausarloenlaalimentacinanimal,especialmenteenmonogstricos.
EnpasesdesarrolladoscomoMxico,EEUUyJapnlaSpirulinamaximaesusadaenlaalimentacin
humanaparasuplirladeficienciadeprotena,peroconsistemasdeproduccin,cosechaysecadomuy
tecnificadosycostosos(ShelefySoeber1980).Sehanlogradoproduccionesmximasdehasta120
toneladas/ha/aoconunpromedioencontenidodeprotenadel50%yensistemasdeproduccinpara
nutricinencerdossehanobtenidoentre14y34gr/m/da(Lincoln1985).
Sehaempleadoenlaalimentacindeanimales,humanos,enacuaculturaparalacrademicrocrustceos,
paratratamientodeaguasresidualesycomofuenteenergtica,ademsdecontribuiralaeliminacinde
desechos.
Revisinliteraria
CaractersticasdelaSpirulinamaxima
LaSpirulinamaxima,unacianobacteriacomnmenteconsideradacomounamicroalgaporsuestructura
filamentosa,pertenecealgrupodelascianobacteriasnoheterocsticasdelgnerodelasOscillatoriaceae
(HargaravezyViquez1982).Seconsideracomountricomahelicoidaldeformacilndricaeinmvil,cuya
reproduccinserealizaporrupturaintracelular.Sutallaoscilaentre13y25micras.
LaasimilacindedixidodecarbonosehaceatravsdelciclodeCalvin,conformacindeglucgenocomo
materialdereserva.Laespirulinaescapazderealizarlafotosntesisoxignicaydefijarelnitrgenodel
medio.PuedecrecerenmediosmineralesquetenganCO
2
comofuentedecarbonoyN
2
comofuentede
nitrgenoapartirdedesechos,nitrgenoatmosfricoodelarespiracinbacteriana(Lincoln1985).Esta
cianobacteriapresentaunaltocontenidodeprotena(50%a65%)contodoslosaminocidosesencialesque
serequierennutricionalmentesegnlaFAO,peroconcontenidobajoenmetionina(Kosaricetal1974),
comopuedeobservarseenelCuadro1.
Cuadro1:ContenidodeaminocidosdelaSpirulinamaxima
Aminocidos *DatosFAO *MedioSinttico *Efluente
Isoleucina 4.2 5.8 6.7
Leucina 4.8 9.3 9.2
Lisina 4.2 5.0 4.6
Fenilalanina 2.8 4.0 4.4
Metionina 2.2 2.2 2.1
Treonina 2.8 4.9 5.3
Triptfano 1.4 nr nr
Valina 4.2 6.9 6.6
*g/100gdeprotena(Kosaricetal1974)
nr:datonoregistrado
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Comparativamenteconotrosmicroorganismoscomoalgasylevaduraselcontenidodeaminocidoses
muchomsalto(Kosaricetal1974,verCuadro2).Ensayosllevadosacaboenratasypollosdemostraron
elaltovalornutritivoqueposeeysualtadigestibilidadgraciasaqueposeeaminocidosdecadenasimpley
unaparedcelularformadapormucopolisacridosnotxicos(Shubertetal1985).
Cuadro2:Contenidodeaminocidosdeotrosmicroorganismos.
Aminocidos *Scenedesmussp *Sacharomycescereviciae
(microalga) (levadura)
Cistena 0.6 0.74
Isoleucina 3.8 4.60
Leucina 8.4 7.00
Lisina 5.7 7.70
Metionina 1.7 1.70
Fenilalanina 5.1 4.10
Treonina 5.1 4.80
Triptfano 1.5 1.00
Valina 5.7 5.30
*g/16gN(Kosaricetal1974)

EstacianobacteriacreceencondicionesalcalinasconunpHqueoscilaentre8.5y10.5yatemperatura
promediode25a35C.LaSpirulinaplatensispuedetolerartemperaturasbajasnocturnashastade18C.
Losmediosdecultivopuedenser:qumicos,sustratosconvencionalesynoconvencionales.Elmedioqumico
debeserricoencarbonatos,nitratosysales,peroloselementosquelocomponensonmuycostososy
usadossloengrandesproduccionesdebiomasadeprotena,contecnologaspocoaplicablesaniveldel
pequeoproductor(VerCuadro3).
Cuadro3:Composicindelmedioqumico(g/litrodesolucin)
Macroelementos Oligoelemento
NaHCO
3
*SolucinA:
K
2
HPO
4
H
3
BO
3
NaNO
3
MnCl
2
K
2
SO
4
ZnSO
4
NaCl CuSO
4
MgSO
4
MoO
3
CaCl
2
*SolucinB:
FeSO
4
NiSO
4
EDTA(Agentequelante) TiSO
4

Co(NO
3
)2
*Seagrega1mldesolucinAy1mldesolucinB,porlitrodelmedio

Laespirulinacultivadaenestemedioseutilizaespecialmenteparaconsumohumano,libredeparsitosy
sometidaasecadoparausarenformadepolvoyvenderloenformadecpsulashastaporseiscientospesos
launidad(Shubertetal1985).
Losdesechosindustrialesoaguasresidualesdelasalcantarillassonampliamenteutilizadasparalossustratos
decultivoenlaobtencindebiomasamicroalgalyparapurificacindeaguas.Sepuedenusar:materialescon
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contenidodealmidn,azcares(mielesderemolacha,caadeazcar)osueros.Entrealgunosmediosno
convencionalesqueevitanaltoscostosdeproduccinpuedeusarseeficientementeelefluentede
biodigestoresanaerbicos,evitandolacontaminacindelasfuentesdeaguaconellavadodelestircoldelos
animales,cenizadelaquemadematerialvegetalconaltocontenidodemineralesoloslodosdela
fermentacinalcohlicadelasmieles,usadosespecialmenteenBrasil(FerrazyAquarone1985).
Usosdelaespirulina
Suplementacinproteicaenhumanos
ElpolvoqueseobtienedelaSpirulinasp.esunafuenteproteicadealtovalorbiolgicosinefectostxicos.
Poseeun80%delaprotenadelhuevo,esdecir124gdeSpirulinamaximareemplazan100gdela
protenadelhuevo.Noserealizansustitucionestotalesdeprotena,sinoparcialesparasuplirlasdeficiencias
porfaltadefuentesproteicasacausadelosaltoscostosenelmercado.Endietashumanasseha
consideradocomounafuenteimportantedecidogammalinolico,comosustituyenteenlaalimentacinde
hipertensosypacientescontensionespremenstruales,resultandomaseconmicoqueotrotipodeaceites
conuncostodetrececentavosdedlarporkilogramo(Roughan1989).
EnlaFloridaexistenplantasproductorasdeSpirulinamaximaqueabastecensistemasdecradehasta
1000cerdosenbaseacultivosconefluentedebiodigestores,consistemasdebiofloculacinycon
produccionesdehasta34gMS/m/dacon60%deprotena.Igualmentesehausadoenlaalimentacinde
pollos,proporcionandolasuficienteprotenayfavoreciendolacoloracindelhuevo(Lincoln1985).
Acuacultura
Lacrademicrocrustceos,moluscosypeces,comoconsumidoresdeplancton,requiereprocesosde
reproduccinycraartificialagranescalayporlotantoesdegraninterstenerplantaspilotosde
produccindelacianobacteriaparalaalimentacindelosprimerosestadoslarvales.Semantieneenel
mediounaaltaproductividadyestostapetesbiolgicosconstituiranunaptimacalidadparaelagua,
acumulandoeloxgenotransfiriendosustanciasmetablicasproducidasporlosorganismosencultivo.
Favorecelacradepecesornamentalesespecialmenteyaquelaespirulinatienebuencontenidodecarotenos
ypermitemejorarelcoloridoyvistosidaddeestasespecies.Lacrademicrocrutceostambinseha
implementadoparaelcultivodepeces,perosehacomprobadoquelaeficienciaesmayorconlasmicroalgas
ycianobacterias.Losmoluscosproducidosenbaseaestetipodealimentacinnoconvencionalreduciran
loscostosdeproduccinyproporcionaranalmercadoalimentodealtacalidadconmayoresgananciaspara
elproductor.
Tratamientodeaguasnegras
SehantratadoaguasdedesechoenbaseaSpirulinamaxima,utilizadacomopurificadoradeaguas
residualesqueremuevelosnitratos,fosfatos,yotroselementospresentesengrancantidad.Enpiscinasde
oxidacinoestanquessepuedenobtenerdosproductosesenciales:protenavegetalcontnuayaguas
tratadasyrecuperadas,evitandolacontaminacinyeutroficacinactivadaporlaozonizacindelagualocual
permiteutilizarelaguaparaconsumohumano.
EnIsraelseaprovechanlasaguasdelascostasparaproduccindemicroalgascomoSpirulinasp.o
Scenedesmussp.,tratandodeimplementarmtodosmenoscostososyeficientesparaeltratamientode
aguasdedesechoindustrialesydomsticas.EnLondresseutilizanlasaguasdetratamientoterciariode
desechosparaproducirbiomasaypurificarlas(Kosaricetal1978).
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Fuenteenergtica
Existennumerososestudiossobreelposibleusodelaenergasolar,congranprioridadennumerosospases
queposeentecnologadealtoriesgoymuchocosto.
Lascianobacterias,comoresponsablesdelafijacindelnitrgenoyproduccindehidrgenoconaltastazas
dereproduccinatravsdelautilizacindeenergasolaryagua,mantienenelsistemacontcnicasde
produccinsimplesadicionandolaobtencindebiomasausadaenmedicina,cosmetologaynutricin.
ObjetivosdelprogramadeCIPAV
Elobjetivodelactualprogramadeinvestigacinesdesarrollarunsistemasencilloparalareproduccindela
espirulina,conbaseensustratoslocalmentedisponibles.Enprimerlugarseestudielusodelosefluentesde
losbiodigestoresydelasdestilerasdealcohol(lavinaza).
Materialesymtodos
ElensayoserealizenelInstitutoMayorCampesinoenBuga(Valle,Colombia)conunaaltitudde1000
msnm,unatemperaturamediade20Cyunaprecipitacinde1300mm.
Loscultivosdelaespirulinaserealizaronentanquesrectangulares(20cmx25cmx30cm)devidrioy
fueronagitadosconairedeunmicrocompresor(2,500cm
3
deaire/minuto).
Tratamientos
Efluentedelbiodigestor:Seutilizarontrestratamientospreliminarescorrespondientesalmedioqumico,y
efluentemezcladoconaguaanivelde0.5:0.5y0.75:0.25volmenesdeefluente:agua,agregando
bicarbonatodesodioencantidadesde17gporlitrodelmedioeinculodespirulina(192clulas/ml)de200
mlporlitrodelmediodeagua.Lasobservacionesindicaronquelareproduccinfuemseficientecuandose
hizoelmedioconpartesigualesdeefluenteyagua.
Conbaseenestainformacin,serealizaroncomparacionesdecuatrodilucionesdelefluente
correspondientesavolmenesefluente:aguade:0.25:0.75,0.5:0.5,0.75:0.25y1.0:0.0(verCuadro4).A
1,000mldelamezclaseagregaron200mldeinculodeespirulina(192clulas/ml)y17gdebicarbonato
desodio.Despusde15dasseagregaronotros1,000mldelmedio(efluente,aguaybicarbonatoenlas
concentracionesusadasenelprincipio).Elefluenteserecolectdeunbiodigestorplsticodeflujocontinuo
(Solarte1989),alimentadoconexcretadecerdos,conuntiempoderetencinde60das.Elefluente
contena(%basefresca):N0.10,P0.03,K0.07,slidostotales2.0.
Cuadro4:Nivelesdeefluenteusadoscomomediodecultivo*

Volumenefluent:Volumenagua

0.25:0.75 0.5:0.5 0.75:0.25 1.0:0.0

Cantidaddeagua(ml) 750 500 250


Cantidaddeefluente(ml) 250 500 750 1000
*Acada1000mldelmedioseagregaron17gdebicarbonatodesodioy200mldeinculodeespirulina(192clulas/ml).

Efluentededestilera(vinaza):Seemplearontresmediosdecultivosuplementadosconvinazaresidualdela
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IndustriaLicoreraenproporcionesdel0.5:0.5,0.6:0.4y0.7:0.3volmenesvinaza:agua.Lavinazacontena
(%basehmeda):slidostotales60,Nx0.66,Kx0.27.Seadicion34gdebicarbonatoporlitrode
medioy200mldeinculodeespirulina.
Diseoexperimental
Seutilizeldiseodebloquesalazarcondosytresrepeticiones(paraefluentesdebiodigestoryvinaza,
respectivamente)ylaevaluacinsehizodurantetreintadas.Sedeterminaronalos2,15y30das,los
siguientesparmetros:conteodeclulasdecianobacteriasyconteodeclulasdemicroorganismospor
campodecubreobjetos.Alos30dassemidielpH,latemperaturayelporcentajedemateriasecadel
medio.
Anlisis
Serealizaronanlisisqumicadelefluente,lavinazaydelaespirulina.
Resultadosydiscusin
Durantelosprimeros15daslatasadereproduccindelaespirulinaserelaciondirectamenteconla
concentracindelefluenteenelmedio,enelcasodelefluentedelbiodigestor(Cuadro6).Sinembargo,
despusdeagregarotravezelmedio,fuemuchomsmarcadolarespuestaeneltratamientodemitad
efluente:mitadagua,queconconcentracionesmayores,siendoaltamentesignificativaslasdiferencias
(P<.001).Laconcentracindeclulasalcanzadaen30daseneltratamiento50:50(9x10
3
/ml)todavano
representaelpotencialdelorganismo,yaqueconcentracionesdehasta1x10
6
/mlhansidoreportadaspor
NoueyProulx(1986).
LamayorcontaminacinquepresentelcultivoconefluentedelbiodigestorfuedebidaaChlorellasp.y
protozoarioscomoAmoebasp.yParameciumsp.
Loscambiosdetemperaturaregistradosentreeldaylanochefueronconsiderables(desde23a29C),
peroalparecernoafectaronsignificativamenteeldesarrollodelcultivo.
Elporcentajedemateriasecadelproducto(6.4a6.8%)fuemsaltoqueelquereportaronNguyen(1982)
yLincoln(1985)(aproximadamente5%),probablamentedebidoalcontenidodeslidosresidualesdel
efluenteenelmaterial.
Quadro5:Efectodelaconcentracindeefluentedebiodigestorenelmediodecultivosobrelatasade
reproduccindelaespirulina

Porporcindeefluente*

0.25 0.5 0.75 1 ES Prob

Nmerodeclulasdeespirulina/ml:

Lectura
2das 800 530 540 430 110 NS
15das 1310 1380 2220 2700 280 0.16
30das 830 9500 3460 4210 510 <0.001

pH 9.30 9.57 9.35 9.60

(ES) (0.07) (0.08) (0.07) (0.18)


Slidostotales(%) 6.39 6.80 6.27 6.57

(ES) (1.51) (2.65) (2.99) (2.60

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*Reemplazandoelagua

Serealizaronanlisisdeespirulinaenbasesecayseobtuvieronlossiguientesresultados:N=7.2,P=0.24,
K=0.85,Ca=1.02,
Lavinaza
LosmediossuplementadoscondiferentesnivelesdevinazapresentarondificultadesencuantoapHy
agitacin.ElpHdelavinazaes4.2luegodepasarporuntratamientofinaldecidosulfricoparala
fermentacinalcohlicadelasmielesyporlotantoseaumentaronlosnivelesdebicarbonatodesodiopara
aumentarelpHa7.4ylaagitacinfuemuylentaporlaaltaviscosidaddelmedio.
Cuadro6:Efectodelaconcentracindeefluentededestilera(vinaza)enelmediodecultivosobrelatasade
reproduccindelaespirulina

Proporcindeefluente*

0.5 0.6 0.7 ESmed Prob

Nmerodeclulasdeespirulina/ml
Lectura
2das 1170 370 460 160 .06
15das 2190 1630 2080 370 NS
30das 10460 4510 5740 900 .04

pH 9.04 8.81 8.93

(ES) (0.1) (0.01) (0.01)

*Reemplazandoelagua

Alparecer,ladilucindepartesigualesdevinazayaguaeslamejor,yaquenohubodiferenciassignificativas
enelnmerodeclulasalos15das,siendomenoresalos30daslasconcentracinesdelaespirulinacon
dilucionesde0.6y0.7(P=0.04)(Cuadro6).
Comopuedeverseelcontenidodenutrientesdelavinazaesmayorqueenelefluenteperoelcontenidode
potasioesmuyalto,porlotantoesmuyimportantelaasimilacindeesteelementoporpartedela
cianobacteriaparaquenoseatxicoparaconsumoenanimalesyqueanivelindustrialestedesechosea
utilizableparaotrofin.
Serevisaronlasmuestrasparaevaluarelcontenidodemicroorganismosenlosmediosperonoseencontr
ninguno,porlotantoestofavoreceelcrecimientodelasclulasdelacianobacteriapornoexistirningntipo
decompetenciafrentealosmediossuplementadosconefluentedebiodigestordondelaincidenciade
microorganismoscomoChlorellasp.,Parameciumsp.yAmoebasp.esmayor.
ElpHoscilentre7.40y9.04,loquemuestraquelaSpirulinamaximapuederesistirunpHextremocomo
lohacelaSpirulinasubsalsaOersteddeCostaRica(HargaravezyViquez1982).Lastemperaturas
tomadasparaestoscultivosmostraronmximosde29Cymnimosde23Cenlasnochesyelpromedio
calculadofuede24.6C.Nosepresentarondiferenciassignificativasentrelostratamientosrespectoala
temperatura(VerCuadro6).
Conclusiones
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Alparecer,elniveldeefluentedebiodigestormsrecomendableparaelcultivodeSpirulinamaximaesuna
combinacindepartesigualesdeefluenteydeagua(sincloro)con17gdebicarbonatodesodioporcada
litrodemedio,teniendoencuentaqueelefluentetendraunaconcentracindeslidosdeaproximadamente
2%.
Elniveldevinazamsefectivoparalareproduccindelacianobacteriafuedel50%devinazay50%de
agua.Enestecasofueusado34gdebicarbonatodesodioporcadalitrodemedio,envistadelaacidezde
lavinaza.
Lapoblacindeclulasdeespirulinaposiblamentefuafectadabsicamenteporlacompetenciade
microorganismoscuandoseuscomosustratoelefluente,deahlaventajadelasuplementacinconla
vinaza.
ElpHylatemperaturaparalosensayos,tantodeefluentecomodevinaza,novariaronsignificativamente
comoparaafectarelcultivodeespirulina.
Recomendaciones
Realizarmsensayosparatratardeaumentarlosnivelesdesuplementacinconefluenteyvinaza.
Buscarotrasalternativasparausodedesechoscomosustratoparalaespirulina,ademsdeemplear
elementosqumicoscomoelcarbonatodecalcioparasuplirlasnecesidadesdecarbono.
Hacernfasisenlaimplementacindelcultivodelacianobacteriaaniveldecampo,dandomsimportancia
alanlisisdelossustratosparaelcultivoylastecnologasaplicadasparaelpequeoproductor.
Referencias
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NoueJandProulx1986Intersdebiomassed'alguasetd'invertebresobtenuesparreciclage.Entropie131:1932
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(CIPAVCali)