Cuestionario de Bioqumica y microbiologa Tema: El microscopio 1.- A qu llamamos poder de resolucin de un microscopio? Es la capacidad de un lente del microscopio para poder distinguir dos puntos muy cercanos entre s como unidades independientes y separadas es decir en forma ntida. El poder de resolucin est limitado por la abertura numrica de los lentes objetivos y por la longitud de onda de la luz visible. El lmite de resolucin o sea el objeto ms pequeo que puede verse ntidamente se logra cuando utilizamos la longitud de onda ms pequea de la luz visible y un objetivo que tenga la mxima abertura numrica. El poder de resolucin de un microscopio depende de la longitud de onda de luz utilizada y de una propiedad ptica del lente objetivo llamado abertura numrica (AN).En la practica el limite cercano es cercano a los 0.2 um. 2.- Qu es la apertura numrica? Es una medida que indica la capacidad del objetivo de poder captar los rayos refractados por las estructuras finas de las cuales est constituido el objeto que se observa. Esta capacidad se traduce en el poder del microscopio de formar imgenes que muestren al observador una serie de detalles del objeto que se est examinando. Cuanto mayor sea la apertura numrica de un objetivo, ste tendr una mayor capacidad de mostrar detalles finos en la imagen que forma. La apertura numrica de un objetivo se calcula empleando la frmula matemtica siguiente:
Donde: : Representa el ndice de refraccin del medio que hay entre la muestra y la superficie frontal de la lente objetivo (1,0 para el aire; 1,56 para el aceite de inmersin). : Es la mitad del ngulo de la lente objetivo. Formado por el eje ptico y los rayos de luz ms externos que son captados por el objetivo Universidad Nacional de Ingeniera Facultad de Ingeniera Qumica y Textil 3.- Cul es el trabajo del aceite de inmersin? El aceite tiene el mismo efecto que un aumento del dimetro del objetivo, es decir mejora el poder de resolucin de los lentes. Para conservar la direccin de los rayos de la luz en el mximo aumento se utiliza esta sustancia entre el portaobjetos y la lente del objetivo del inmersin, el aceite de inmersin tiene el mismo ndice de refraccin que el vidrio, de modo que el aceite se convierte en parte de la ptica del microscopio.
4.- Qu diferencias existen entre una bacteria, un virus y un hongo? Los virus son los microorganismos patgenos ms pequeos que se conocen. No son visibles al microscopio ptico y requieren para su visualizacin el microscopio electrnico. Son parsitos intracelulares obligados y tienen un slo tipo de cido nuclico (DNA RNA) pero no los dos, rodeado por una capa protica a veces recubierta por una capa lipdica; es decir contienen un plano gentico limitado y no tienen las herramientas constitutivas necesarias para su propia reproduccin. Tienen que invadir otras clulas y secuestrar su maquinaria celular para reproducirse. Universidad Nacional de Ingeniera Facultad de Ingeniera Qumica y Textil En funcin de su espectro de huspedes podemos dividirlos en virus animales, vegetales, y bacterianos (bacterifagos o fagos). Su tamao oscila entre los 20 y 300 nm (1 nm = 10 -3 m = 10 -9 m). Las bacterias son ms grandes y complejas que los virus (0.1 a 5 ms m de longitud). Contienen DNA y RNA, pero no ncleo. Poseen en general toda la maquinaria celular para su propia divisin, aunque algunos requieren el concurso de la clula husped y son por lo tanto parsitos intracelulares estrictos (p.ej. Chlamydia, rickettsias, etc.). Incluyen muchos tipos fisiolgicos distintos, y por lo tanto pueden vivir en cualquier tipo de ambiente. Los hongos son organismos ms grandes y complejos que las bacterias. Tienen su material gentico organizado dentro de una estructura nuclear o ncleo rodeado de una membrana propia. Mientras que las bacterias se reproducen por medio de la mitosis los hongos lo hacen por medio de esporas que el viento, animales u insectos se encargan de transportar; aparte de eso los organelos que contiene cada clula de un hongo son diferentes de los de las bacterias o carecen de los mismos. Muchos de ellos pueden semejarse a las plantas, pero los hongos no fabrican su propio alimento a partir de la energa solar como lo hacen las plantas.
5.- Cul es la diferencia entre el poder de resolucin y poder de aumento de una lente Que se entiende por el termino parfocal? La diferencia reside en que el poder de aumento de un microscopio permite conocer hasta cuantas veces ms grande se puede observar un objeto, es decir la imagen de un objeto puede ser aumentada pero sin que en ella pueda ser reconocida alguna figura, o sea una imagen distorsionada, mientras que el poder de resolucin hace referencia a la capacidad del microscopio para diferenciar dos puntos adyacentes entre s, es decir agrega nitidez y claridad a esa imagen aumentada.
Universidad Nacional de Ingeniera Facultad de Ingeniera Qumica y Textil El Trmino parfocal se aplica a los objetivos y oculares cuando al cambiar de aumentos no requieren volver a enfocar la muestra. Los objetivos del revlver de un microscopio son parfocales, es decir, al cambiar de un objetivo de bajos aumentos a uno de ms altos aumentos slo hay que retocar ligeramente el foco con el ajuste micromtrico. 6.- Por qu el objetivo de baja potencia es colocado en posicin cuando el microscopio se almacena? El objetivo de menor aumento es colocado en posicin de empleo al momento de almacenar el microscopio ya que si se deja con cualquier otro objetivo de mayor aumento puede impactar contra la platina daando la lente del objetivo. 7.- Cmo se puede aumentar la resolucin en el microscopio? La resolucin del microscopio se puede aumentar variando las siguientes medidas: Disminuyendo la longitud de onda de la luz empleada, esta se puede disminuir utilizando filtros selectivos.
Aumentando el ngulo en el espacio objeto, para ello se emplea otro juego de lentes denominado condensador el cual posee la misma apertura numrica que el objetivo, el diseo del objetivo tambin influye en el poder de resolucin del microscopio, ya que un objetivo capaz de aprovechar un gran cono de luz procedente de la muestra generar una mejor resolucin que un objetivo limitado a un cono de luz ms pequeo.
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Aumentar el ndice de refraccin en el espacio objeto, Si se rellena el espacio existente entre la muestra y el objetivo no con aire, sino con una sustancia de mayor ndice de refraccin (por ejemplo, aceite)