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n-pentano Menor polaridad

Eter de petrleo
n-hexano
n-heptano
ciclohexano
Tetracloruro de carbono
Benceno
Diclorometano
Cloroformo
Dietileter
Acetato de etilo
Piridina
Acetona
n-propanol
Etanol
Metanol
Agua Mayor polaridad
Cromatografia de reparto
Fases mviles
Matrices
-Celulosa,
-Alumina, slice, tierras de diatomeas, etc
M EI P
Fases Estacionarias
H
2
O
PEG
Benceno,
Etc.
Mezcla
Deteccin
-Compuesto coloreado,
-Radiactividad,
-Reaccin con un colorante,
-Fluorescencia
Elucin
-En un solo paso, isocratico,
-Por pasos ,
-En gradiente (lineal, cncavo y
convexo
Cromatografa de Gases
Depende de:
-Puntos de ebullicin o presiones de vapor,
-Reparto en funcin de las Pv,
Sirve para:
-Voltiles
gases,
Compuestos convenientemente
derivatizados
Sistema para gradientes
Fase estacionaria Estructura Carcter
Polietilenglicol
(Carbowax 15-
20.000)
HO-CH
2
-CH
2
-(O-CH
2
-CH
2
)
n
-
OH
Polar
Adipato de
polietilenglicol
-CH
2
-CH
2
-O-CO-(CH
2
)
4
-O-CO-
CH
2
-CH
2
-O-
Polar
Dinonil ftalato
Fenil-(COO-C
9
H
19
)
2 Semipolar
Fluido silicona
-O-Si(CH
3
)
2
-O-Si(CH
3
)
2
-O-
Semipolar
Apiezn
C
n
H
2n+2
(n mayor de 20)
No polar
Escualeno
2,6,10,15,19,23-hexametil
tetracosano
No polar
Fases estacionarias utilizadas en cromatografa de gases.
Esquema de un detector de conductividad
trmica.
Potenciometros
Potenciometro
Registrador
F. Referencia F. Anlitico
F. Anlitico
F. Referencia
Muestra
Gas portador
Salida
Salida
Esquema de un detector de captura electrnica.
Registrador
Amplificador
Fase mvil
Fuente de
partculas
Esquema de un detector de ionizacin de llama.
Registrador
Amplificador
Hidrgeno
Fase mvil
Salida
Aire Ctodo
Anodo
Ctodo
Anodo
Capilar
~0.1 mm i.d
Pared del capilar
Columna
WCOT
Fase
estacio-
naria
Capilar
~0.5 mm i.d
Columna
SCOT
Fase
estacio-
naria
Registrador
Detector
MASAS
m/z
%
abundancia
Inyector de
muestra
Columna
Registrador
Horno
Controlador
de presin
Gas
portador
Cromatgrafo de gases
Inyector de
muestra
Columna
Registrador
Horno
Controlador
de presin
Gas
portador
Cromatgrafo de gases-Masas
Detector
EQUIPOS DE MASAS
EI-MS (Electron ionization)
CI-MS (chemical ionization)
FAB-MS (Fast atom bombardement)
ESI-MS (Electroespray ionization)
SQ-MS (Single-Stage Quadrupole Mass
Spectrometry)
TQ-MS (Triple Single-Stage
Quadrupole Mass Spectrometry)
FT-ICR-MS (Fourier Transformed-Ion
Ciclotron Resomance Mass
Spectrometry)
SPR-MS (Surface Plasmone
Resonance Mass Spectrometry)
LDI-MS (Laser desorption ionization)
MALDI-MS (Matrix Assisted Laser
desorption ionization Mass
Spectrometry)
Fuente de
ionizacin
Analizador de
masa
Detector
ESPECTROMETRO DE MASAS
m/z
%
abundancia
+
Ar
+
Ar
o
Ar
+
Ar
o
Ar
o
Ar
+
Ar
o
Ar
+
Ar
o
Ar
o
Pistola de
tomos
Cmara de colisin
Sepa
rador
Muestra
FAB-SYSTEM
Fuente de
ionizacin
Analizador
de masa
Colector
Laser
pulsado
Iones
Regilla de
extraccin
Matrix
assisted
laser
desorption
ionization
Mues
tra
Quadru-
pole time
of flight
TOF
Q1
q2
Electrospry
Ionization
(ESI)
Iones
Zona de muestra
LC
Zona
de
espray
Laser
pulsado
Zona de
mustra
Reflector
time of
flight
TOF
Time of
flight- time
of flight
(TOF-TOF)
MagnetoSuper
conductor
Celda de
colisin
Trampa
de
iones
Triple
Quadrupolo
o trampa de
iones lineal
Q1
Fourier
Transform
Ion
Ciclotron
Resonance
(FT-ICR-MS)
Q1 Q2 q1
METODOS DE ANALISIS MALDI
VOLUMEN DE
ELUCIN
(160
o
C)
Pe
o
C COMPUESTO APIEZON CARBOWAX
20M
-0.5 N-butano 19 0.6
80.1 Benceno 11.4 10.2
13.8 p-Xileno 40.0 24.8
79.6 Metil, etil cetona 4.8 7.4
99.2 Isooctano, 2,2,4-
trimetilpentano
4.3 30
210.8 Naftaleno 0.82 0.54
161.1 Ciclohexanol 35 64.1
155.65 Ciclohexanona 37.5 54.7
ESTNDAR INTERNOS DISPONIBLES EN CROMATOGRAFA DE
GASES
Vt
Vt
Ve
h/2 h
Cromatografa de
Exclusin molecular
Ve=Vo
Ve=Vo + KdVi
Ve=Vo + Vi
Grandes
Medianos Pequeos
Composicin Nombre Rango de
fraccionamiento
Dextrano entrecruzado Sephadex G-10 G-
200
50 600.000
Dextrano-poliacrilamida Sephacryl S-200 S-
1000
5.000 100.000.000
Poliacrilamida Biogel P-2 P-300 100 400.000
Agarosa Sepharose 6B, 4B y
2B
10.000 40.000.000
Biol-Gel A-0.5m A-
150m
10.000 150.000.000
Ultrogel A6, A4 y A2 25.000 50.000.000
Agarosa-poliacrilamida Ultrogel AcA202
AC22
1.000 3.000.000
Agarosa entrecruzada Sepharose CL 6B, 4B
y 2B
10.000 40.000.000
Politer entrecruzado Fractogel TSK HW40
HW75
100 50.000.000
1,2-Dihidroxi-propil
vidrio
Glycophase CPG40
CPG-500
1.000 350.000
Glyceryl CPG-75A
CPG-3000A
3.000 2.700.000.000
1,2-Dihidroxi-propil slice LiChrosorb DIOL 10.000 80.000
LiChrosper DIOL Si
100 Si 1000
10.000 1.000.000
2-Hidroxietilmetacrilato
entrecruzado
Spheron P-1 P-
10000
Hasta 10.000.000
Composicin, nombre y rango de fraccionamiento de matrices
de permeacin en gel
Vol. de Retencin (ml)
1
2
3
4
5
10
20
0,10
0,05
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a
Generacin de recta de calibrado
Peso Molecular
S-400
S-200
G-150
1
0,5
0
10
3
10
4
10
5
10
6
Curvas de Selectividad
Kav
1
2
3
4
5
5 10 15
Vol. de Retencin (ml)
10
3
10
4
10
5
10
6
PM
Protena
problema