Está en la página 1de 16

Grupo: 2

Laboratorio de Qumica Analtica II


DETERMINACIN

DE FSFORO EN AGUAS POR


ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCIN
MOLECULAR

Integrantes:
Apellidos

Nombres

Mauricio Valdivia

Vctor Ral

Mena Crespn

Solano Francisco

ahui Muoz

Jhonatan Ivn

Saccatoma
Yupanqui

Miriam Lucia

2011-I

Proyecto de laboratorio: Analtica II

[Ao]

Seccin: B

1. Objetivos:
Aplicar nuestros conocimientos adquiridos a lo largo del curso en el
desarrollo de una metodologa de anlisis.

Realizar un procedimiento para el uso correcto del espectrofotmetro


UV/Visible.

Determinar concentracin de fsforo en una muestra de agua de ro


mediante espectrofotometra UV/visible, por el mtodo del cido
ascrbico.

2. Fundamento terico:
El fsforo se encuentra en las aguas naturales y residuales casi
exclusivamente en forma de fosfatos, clasificados en ortofosfatos, fosfatos
condensados, piro, meta y otros polifosfatos, y los ligados orgnicamente. Se
presentan en solucin, partculas o detritus, o en los cuerpos de organismos
acuticos.
Estas formas del fosfato surgen de una diversidad de fuentes:
Cantidades pequeas de algunos fosfatos condensados se aaden a
algunos suministros de agua durante el tratamiento, y se puede aadir
cantidades mayores de los mismos compuestos cuando el agua se utiliza
para lavar ropa u otras limpiezas, ya que son los componentes principales
de muchos preparados comerciales para la limpieza.
Los fosfatos se utilizan ampliamente en el tratamiento de aguas de calderas
adems los ortofosfatos aplicados como fertilizantes a la tierra cultivada
agrcola o residencial son arrastrados a las aguas superficiales con las
lluvias y, en menor proporcin, con la nieve derretida.
El fsforo es esencial para el crecimiento de los organismos y puede ser el
nutriente limitador de los micro-macroorganismos acuticos fotosintticos
que pueden llegar a presentar en grandes cantidades por medio de los
drenados agrcolas aguas tratadas al estar aqu los fosfatos.
Los fosfatos pueden aparecer tambin en los sedimentos de fondos y en
cienos biolgicos, tanto en formas inorgnicas precipitadas como
incorporados a compuestos orgnicos.
En aguas naturales contienen normalmente cantidades de fosfatos por debajo
de 1 mg/l, cantidades superiores de estos nutrientes favorecen el crecimiento
de algas que consumen el oxgeno del medio acutico y provocan la
desaparicin de especies vegetales y animales.

[Ao]

MUESTRA LQUIDA
Sin filtracin
[Ao]

Filtracin por filtro de


membrana de 0.45 m
Colorimetra
directa
Fsforo reactivo
total

Hidrlisis H2SO4
Colorimetra

Digestin
Colorimetra

A+ B

C. Fsforo total

( A + B) - A

C ( A + B)

B. Fsforo hidrolizable
con acido total

D. Fsforo
orgnico total

Filtrado

Colorimetra
directa
Fsforo
reactivo
disuelto

Hidrlisis H2SO4
Colorimetra

Digestin
Colorimetra

E+F

C. Fsforo
disuelto total

( E + F) - E

G ( E + F)

B. Fsforo hidrolizable
con cido disuelto

D. Fsforo
orgnico disuelto

El anlisis del fsforo incluye dos pasos generales en los mtodos; a


continuacin se presenta los pasos y los mtodos que se pueden emplear:
a) Conversin de la forma fosforada en ortofosfato disuelto.

b) Determinacin colorimtrico del ortofosfato disuelto.


Mtodo

Rango de trabajo

Cloruro estannoso

1 - 20 mg P/l

cido ascrbico
(mtodo a usar).

1 6 mg P/l

cido
vanadomolibdofosforic
o

1 6 mg P/l

Mtodo del cido ascrbico


Este mtodo se aplica a la determinacin de P inorgnico u ortofosfatos,
este mtodo se basa en la formacin del complejo azul de fosfomolibdato,
abreviado PMB de fosfomolibdate blue. Este complejo se forma a partir de la
reaccin en medio cido entre el anin fosfato y el molibdato amnico en
presencia de tartrato de K y Sb (catalizador), para generar cido fosfomolbdico
el cual es reducido mediante cido ascrbico generando una coloracin azul
debida al Mo y susceptible de determinacin colorimtrica. La reaccin ocurre
en dos etapas.
En la primera etapa se forma el cido 12-molibdofosfrico, abreviado 12(MPA) y en la segunda etapa se reduce el cido 12-molibdofosfrico. La
estequiometria de esta reaccin, se puede representar mediante la siguiente
ecuacin inica
HPO42- +12MoO42- +23H+ = [P(Mo3O10)4]3- + 12H2O
En medio fuertemente cido, se forma el cido 12-(MPA). Una ecuacin simplificada
podra ser,
HPO42- + 12MoO42- +26H+ = H3[P(Mo3O10)4] + 12H2O

[Ao]

a. Mtodo del cido perclrico. El ms drstico y lento, se


recomienda solo para muestras especialmente difciles, como los
sedimentos.
b. Mtodo del cido ntrico- acido sulfrico: se recomienda para la
mayora de las muestras.
c. Mtodo de oxidacin por persulfato.

El complejo formado de 12-(MPA) es reducido al complejo azul PMB, mediante la


siguiente reaccin,
12-(MPA) + nRed = PMB + nOx

PMOVI12O403 - + 4e- PMOV4MoVI8O407 a) Interferencia:


Los arseniatos: reaccionan con el reactivo de molibdato y producen un color
azul similar al formado con el fosfato. Concentraciones de arseniato tan
bajas como 0.1 mg As/L interfieren en la determinacin de fosfato.
El cromo Hexavalente y NO2- interfieren y dan resultados un 3 por 100 ms
bajos a concentraciones de 1 mg/L, y del 10 al 15 por 100 ms bajos a la de
10 mg/L.
El sulfuro (Na2S) y silicato no interfieren a concentraciones de 1.0 y 10
mg/L.
b) Concentracin mnima detectable: Aproximadamente 10 g P/L.
c) Almacenamiento de muestra: no almacenar las muestras con bajas
concentraciones de fsforo en frascos de plsticos a no ser que se
mantengan congeladas por que los fosfatos pueden adsorberse sobre las
paredes del plstico.
d) Limpieza de materiales: Se debe de lavar todos los recipientes con HCl
diluido caliente, y despus varias veces con agua destilada. No usar nunca
detergentes comerciales que contengan fosfatos para limpiar el material de
vidrio utilizado en este anlisis.

3. Equipos, materiales y reactivos:

[Ao]

El color azul se debe a que el anin casi sin color, como el anin
fosfomolibdato, PMO12O403 -, puede aceptar ms electrones (es decir, reducir)
para formar un complejo con intensidad de color de valencia mixta. Esto puede
ocurrir en uno o dos pasos de electrones. El proceso de reduccin es reversible
y la estructura del anin es esencialmente sin cambios.

3.1. Equipo
Espectrofotmetro de absorcin molecular UV / Vis
[Ao]

3.2. Materiales
Materiales

Cantidad

Matraz volumtrico de 50 ml

11

Matraz volumtrico de 100 ml

Matraz

Pipeta volumtrica 3,4,5,10 ml

1 c/u

Pipeta graduada de 10 ml

Vaso de precipitado de 150 ml

Piceta

3.3. Reactivos
Reactivos

Cantidad

Caractersticas

cido sulfrico

10 ml

CC

Tartrato de antimonio potasio

0.1372 g

QP

Molibdato de amonio

2.0000 g

QP

cido ascrbico

0.8800 g

QP

Fosfato dicido de potasio

0.0219 g

QP

cido clorhdrico

20 ml

CC

Fenolftalena

0.1000 g

QP

4. Procedimientos
4.1. Procedimiento general del anlisis.

Lavado de materiales con


una solucin H2SO4 caliente

[Ao]

Preparacin de reactivos
NO

Pesar reactivos y disolver

SI

Calentar
en una
plancha

Se disuelve?

NO
Aforar a una fiola

Solucin a partir de H2SO4


5N

Preparar reactivo
combinado

Alcuota de Muestra de
agua a analizar

Preparacin de la curva de
calibracin

Fenolftalena

Rojo?

Preparar solucin stock de


fosfato 50 mg/L
Aadir
una
solucin
de H2SO4
5N

Mezclar en un matraz
Erlenmeyer Muestra y
reactivo combinado

Estndares de 0, 0.2,
0.25, 0.5, y 1 mg/l

Mezclar en un matraz
Erlenmeyer Estndares y
combinado
cido sulfrico H2SO4 5N: diluir 7ml de H2SO4 reactivos
(cc) a 50 ml con agua

4.2 Preparacin de reactivos

Lectura en el equipo
espectrofotmetro UV/Vis

Solucin estndar de
fosfato 2.5 mg/L

destilada

Solucin de potasio antimonio tartrato: disolver 0.1372 g


K(SbO)C4H4O6.1/2H2O en agua destilada y llevarlo a un matraz
volumtrico de 50 ml

Solucin de molibdato de amonio: disolver 2g (NH4)6Mo7O24.4H2O en


agua destilada y llevarlo a un matraz volumtrico de 50 ml.

cido ascrbico (0.1 M): disolver 0.88g de cido ascrbico en agua


destilada y llevarlo a un matraz volumtrico de 50 ml

Reactivo combinado:
Mezclar los reactivos mencionados anteriormente en la siguiente
proporcin para 100 ml de reactivo combinado.
Orden
1
2
3
4

Reactivo
H2SO4 5N
KSb tartrato
Molibdato de NH4
Sol. cido ascrbico

Volumen (ml)
50
5
12
30

Solucin stock de 50 mg/l P-PO 4 3-: disolvemos 0.02195 g de KH 2PO4


anhidro, seco a 105 C por una hora, en un matraz aforado de 100 ml y
lo aforamos con agua destilada.

Solucin estndar de 2.5 mg/L P-PO43- : diluir 5 ml de la solucin stock y


llevamos a un matraz volumtrico de 100 ml y lo aforamos con agua
destilada.

4.3. Tratamiento de la muestra:

Pipetear 50 ml de muestra a un matraz de 125 ml y en otro matraz


realizar una dilucin X20.

Luego aadimos una gota de indicador fenolftalena. si se desarrolla un


color rojo, aadimos gota a gota H 2SO4 5N, hasta que empiece a
desaparecer el color.

Aadimos 8 ml de reactivo combinado y mezclamos completamente

Despus de mnimo 10 min. y antes de 30 min. medimos la absorbancia


de la muestra a la longitud de onda ms sensible (895 nm).

4.3. Preparacin de la curva de calibracin:

Mtodo directo:
Conc. Inicial

Alcuota

Vol. Final

Conc. Final

[Ao]

(ml)
0
3
4
5
10
20

(ml)
50
50
50
50
50
50

(mg/l)
0
0.15
0.20
0.25
0.50
1.00

Mtodo adicin de estndar:


Tomamos 4 alcuotas de 2 ml, con pipeta volumtrica de la muestra
original y llevamos a matraz volumtrico de 50 ml y antes de aforar
procedemos como indica la tabla siguiente:
Conc. Del
estandar
(mg/L)
2.5
2.5
2.5
2.5
2.5

Alcuota de
muestra
(ml)
2
2
2
2
2

Alcuota de
estndar
(ml)
0
3
4
5
10

Volumen
final (ml)
50
50
50
50
50

4.4. Anlisis Instrumental:

Colocamos los parmetros instrumentales


Elemento
Nombre del equipo

Modo de lectura
Tamao de celda
Exactitud
Repetibilidad

P
Jenway
895 nm
Absorbancia
1 cm

Leemos la absorbancia de los estndares y de la muestra a la longitud de


onda de trabajo, luego mediante la curva de calibracin (directa y adicin de
estndares) hallamos la concentracin de la muestra.

5. Resultados
5.1 Barrido espectral de la solucin de P-PO43Longitud de onda
(nm)
730

Absorbancia
0,478

[Ao]

(mg/L)
2.5
2.5
2.5
2.5
2.5
2.5

0,423
0,434
0,495
0,513
0,547
0,601
0,649
0,678
0,682
0,665
0,566

max : 895 nm
5.2. Curva de calibracin
Mtodo directo (max : 895 nm)
Estndar (mg/l)

Absorbancia

0.00
0.15

0.000
0.141

0.20
0.25
0.50
1.00

0.181
0.226
0.384
0.754

Muestra
( X 10)

0.350

A = 0.734 C + 0.0241
0.350 = 0.734C +0.0241
C = 0.4440 mg / l
C muestra = 0.4440 10 = 4.440 mg / l

Mtodo Adicin de Estndares


Concentracin P
M
M + 0.15

Absorbancia
0.137
0.275

M + 0.20

0.317

M + 0.25
M + 0.50

0.360
0.575

[Ao]

785
800
825
830
840
855
870
885
895
905
930

A = 0.8727 C + 0.1408
0 = 0.8727C +0.1408

[Ao]

C = 0.1613 mg / l
C muestra = 0.1613 25 = 4.033 mg / l

6. Esquemas/ grficos a presentar


6.1 Espectro del P-PO43-

Espectro del P-PO4 30.800


0.700

Aborbancia

0.600
0.500
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
550

600

650

700

750

800

Longitud de onda (nm)

6.2. Curva de calibracin- Mtodo directo

850

900

950

Mtodo Directo
0.800

[Ao]

0.700
y = 0.734x + 0.0241

Absorbancia

0.600

R2 = 0.9967

0.500
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
0.00

0.20

0.40

0.60

0.80

1.00

1.20

Concentracin (mg/ l)

7.3. Curva de calibracin- Adicin de Estndares

ADICIN DE ESTANDAR
0.700
0.600

y = 0.8727x + 0.1408
2

R = 0.9997

Absorbancia

0.500
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
0.00

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

Concentracin (mg/ l)

7. Discusin de resultados
Se lava los materiales de vidrio con HCl al 20% en caliente, para
eliminar la posible presencia de fosfatos provenientes del detergente que
generaran un aumento de la seal analtica de salida.

Tomar en cuenta el tiempo de estabilidad de los reactivos (segn los


puntos que se indica debajo), para que estos no interfieran en los
resultados.
-Preparacin de H2SO4 5N: Se estandariza la solucin cada vez que se
requiera.
-Solucin de tartrato antimonio potsico: Almacenar en botella de vidrio
oscura a 4C.
-Solucin de molibdato de amonio: Almacenar en frasco de vidrio a 4C.
-cido ascrbico (0.1M): La solucin es estable por una semana si se
almacena a 4 C.
-Solucin de lavado (HCl): Se cambia despus de cada da.
-Reactivo combinado: El reactivo es estable durante 4 horas.
Se debe de leer la muestra y los estndares despus de los 10 minutos
pero antes de los 30 minutos de haber agregado el reactivo combinado,
debido a que en ese intervalo de tiempo se obtiene una mayor
intensidad de color del complejo formado y pasado los 30 minutos el
color decae.
Se agrega el H2SO4 5N para que tenga un medio cido y as el
molibdato de amonio pueda reaccionar con el fsforo y as formar el
cido 12-molibdofosfrico la cual luego esta es reducida con cido
ascrbico (vitamina C) usando como catalizador tartrato de antimonio
potasio.
La curva de calibracin por ambos mtodos nos dio una relacin lineal
obtenindose un coeficiente de correlacin de 0.9967 (curva directa) y
0.9997 (adicin de estndar), por ello usamos la ecuacin de la recta
para determinar la concentracin de la muestra problema, cumpliendo
as con la ley de Lambert - Beer.
Al determinar el contenido de fsforo por el mtodo directo nos dio una
concentracin de 4.440 mg/l y por el mtodo de adicin de estndar una
concentracin de 4.033 mg/l, la cual podemos decir que esta diferencia
se debi a la presencia de interferencia de matriz y/o al ruido
instrumental debido a que ambas curvas de calibracin se realizaron con
diferentes equipos espectrofotmetros.

[Ao]

Se debe de almacenar la muestra a -10C y si el analito se encuentra en


bajas concentraciones se sugiere no almacenar la muestra en un
recipiente de plstico debido a que el analito se puede adherir a la
superficie de esta, y por lo tanto nuestra seal decaera.

8. Conclusiones
[Ao]

9. Bibliografa
Mary Ann H. Franson. (1992). Mtodos Normalizados. J. Barvo (Ed.),
Fosforo* (pp. 4-187:204). Madrid: Ediciones Daz de Santos S.A.
Daniel C. Harris. (2007). Anlisis qumico cuantitativo. J. Chem (Ed.),
Espectrofotmetros (pp. 461-481). Barcelo: Editorial Revert S.A.
Carlos Alva (2010). Ministerio del ambiente: ECA para agua y su
implemento a nivel nacional [En Linea]. Recuperado el 26 de junio de
2011,
de:
http://www.indecopi.gob.pe/repositorioaps/0/6/jer/eve_ser_home_norma/
ECA%20AGUA%20-%20INDECOPI%202010.pdf
Antonio Jos Brack. (2009). Normas Legales: Aprueban los estndares
nacionales de calidad ambiental para agua [En lnea]. Recuperado el 25
de junio de 2011, de: http://faolex.fao.org/docs/pdf/per91588.pdf

[Ao]

[Ao]