INTRODUO

A maioria dos parasitos intestinais diagnosticada pelo exame das fezes, embora outros
materiais, como urina, escarro, secrees urogenitais, aspirados, tecidos, contedo duodenal e
espcimes obtidos por bipsia, possam ser utilizados para a identificao de certas espcies. Os
estgios usuais de diagnstico so os ovos e as larvas de helmintos e os trofozotos, cistos,
oocistos e esporos de protozorios.
O uso do micrmetro ocular deve ser uma prtica padro obrigatria no diagnstico
parasitolgico. Para uma diagnose absoluta necessrio observar o parasito em um de seus
estgios de evoluo. O simples exame microscpico , em muitos casos, suficiente para o
diagnstico. Entretanto, para a obteno de melhores resultados ser necessrio o uso de
tcnicas de concentrao, ou seja, processos mecnicos e/ou biolgicos. . O tamanho uma
importante caracterstica na identificao de ovos de helmintos, cistos e oocistos de
protozorios. Os procedimentos microscpicos incluem o exame direto a fresco de preparaes,
tcnicas de concentrao, coloraes permanentes, tcnicas de cultivo e mtodos e tcnicas
especiais para certas infeces.


TCNICA SEM CONCENTRAO (MTODO DIRETO FRESCO): os ovos e as larvas de helmintos
so facilmente diagnosticados pelo exame direto a fresco de esfregaos sem colorao, enquanto
que os diferentes estgios dos protozorios so somente observados com o auxlio de diferentes
coloraes temporrias. Os ncleos dos trofozotos das amebas, como os dos cistos, so
indistinguveis ou invisveis no exame direto de esfregaos salinos. Vrias solues corantes so
indicadas para a preparao e o exame de esfregaos a fresco pelos mtodos diretos: as
coloraes para cistos, para trofozotos e para cistos e trofozotos de protozorios. As solues
de iodo recomendadas para corar cistos, so a de Lugol, de Dobell e OConnor23, de DAntoni20
e de Donaldson24. As solues de iodo no so usadas na colorao dos estgios vegetativos,
desde que todos os organismos so mortos e distorcidos pelo corante.
Princpio: Avaliar a carga parasitria dos pacientes infectados proporcionando um diagnstico
rpido dos espcimes nas infeces macias, permitindo observar os trofozotos vivos dos
protozorios
TCNICAS COM CONCENTRAO:

MTODO DE LUTZ: A tcnica de Lutz49 ou de Hoffman, Pons e Janer37 um procedimento
simples, indicado para a pesquisa de ovos, larvas e cistos. Fundamenta-se na sedimentao
espontnea em gua (combinao da gravidade e da sedimentao). Os ovos operculados e de
esquistossoma so facilmente recuperados. O uso de grande quantidade de material fecal nesse
processo, em contraste com as pequenas quantidades usadas em outras tcnicas, favorece um
diagnstico satisfatrio e seguro, mesmo quando o nmero de organismos presentes pequeno.
A grande vantagem da tcnica de sedimentao em gua para a concentrao de cistos de
protozorios e ovos e larvas de helmintos, no material fecal, a necessidade mnima de vidraria,
sendo dispensvel o uso de reagentes e da centrifugao. A desvantagem desse processo de
diagnstico coprolgico a grande quantidade de detritos fecais no sedimento, dificultando,
com freqncia, a preparao e o exame da lmina.
Princpio sedimentao espontnea em gua, utilizada para evidenciar ovos pesados de
helmintos, ovos leves de helmintos e cistos de protozorios, quando a sedimentao for por um
perodo de 24 horas (CIMERMAN,CIMERMAN, 1999).




MTODO DE WILLIS (FLUTUAO EM SOLUO SATURADA DE NACL):
fundamenta-se na dupla propriedade que apresentam certos ovos de helmintos de flutuarem na
superfcie de uma soluo de densidade elevada e de aderirem ao vidro46. Este procedimento,
simples e eficiente, est indicado para a pesquisa de ovos com densidade especfica baixa, como
os de ancilostomdeos e de Trichostrongylus orientalis, embora no seja recomendado para os
ovos pesados de trematdeos, ovos de E. vermicularis e ovos infrteis de A. lumbricoides. Os
cistos de protozorios se retraem, ficando irreconhecveis.
A tcnica de Willis a mais indicada para diagnstico de estruturas leves, como cistos de
protozorios e ovos de ancilostomdeos (REY, 2002).


OBJETIVOS

GERAL: compreender os mtodos e tcnicas de diagnstico de parasitos

ESPECFICOS

Reconhecer os diferentes mtodos e tcnicas parasitolgicas de diagnstico
Aprender a preparar lminas nas tcnicas sem concentrao
Identificar os elementos parasitrios (ovos, cistos)
Diferenciar tcnicas sem concentrao e com concentrao

MATERIAIS E MTODOS

Mtodo a fresco:
Materiais: Material biolgico (fezes); palito de churrasco; gua destilada; lmina; lamnula; base
de unha
Metodologia: Inicialmente a amostra foi tocada 15x com o palito de churrasco e ento esse
palito foi colocado dentro de um tubo de ensaio que continha gua destilada. Aps a
homogenizao da soluo, com outro palito de churrasco foi pegue alquotas dessa soluo e
ento foi colocada na lmina. A 45 foi colocada a lamnula e ento foi selada com a base
terminando a confeco da lmina. Foram confeccionadas 2 lminas.

Mtodo a fresco com lugol:
Materiais: Material biolgico (fezes); palito de churrasco; gua destilada; lmina; lamnula; base
de unha; papel filtro; lugol
Metodologia: Inicialmente a amostra foi tocada 15x com o palito de churrasco e ento esse
palito foi colocado dentro de um tubo de ensaio que continha gua destilada. Aps a
homogenizao da soluo, com outro palito de churrasco foi pegue alquotas dessa soluo e
ento foi colocada na lmina e ento foi acrescentada 1 gota de lugol na lmina. A 45 foi
colocada a lamnula e ento foi selada com a base terminando a confeco da lmina. Foram
confeccionadas 2 lminas.

Mtodo de Lutz:
Materiais: Material biolgico (fezes); palito de churrasco; gazes; clice; liga; gua destilada
Metodologia: No clice, fazer um arranjo com as gazes em forma de cruz e em cima coloca a
amostra (quantidade razovel) afim de formar uma trouxinha. Passa o palito de churrasco pelas
gazes e fecha a trouxinha com uma liga. A trouxinha fica dentro do clice segura pelo palito de
churrasco e ento coloca gua destilada no clice.

Obs: Na metodologia original desse mtodo aps esses passos descritos acima, esperaria 30
minutos e daria continuidade a metodologia, porm como o tempo da aula prtica limitados
paramos nesse passo.


Mtodo de Willis:
Materiais: material biolgico (fezes); palito de churrasco; gua destilada; lmina; lamnula; base
de unha; lugol; tubo falcon; soluo de NaCl
Metodologia: Colocou-se 1 a 2 gramas da amostra dentro do tubo falcon e adicionou gua
destilada at o comeo do rosqueamento do tubo. Com o palito de churrasco foi feita a
homogenizao do tubo. Colocou-se a lmina tapando o tubo mas com uma pequena abertura
para ento pipetar soluo de NaCl. A soluo de NaCl colocada at tocar a lmina que est
em cima do tubo. Depois de 5 min inverte a lmina, coloca-se 1 gota de lugol, e depois a 45
coloca-se a lamnula e ento sela com a base e termina a confeco da lmina. Foi feita 1
lmina.

RESULTADOS E DISCUSSES: