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ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS CARRERA DE INGENIERA EN BIOTECNOLOGA AMBIENTAL


INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUMICA

Prctica N 1

DATOS GENERALES:

Alumnos:
Byron Andrade Vernica Moreno Carolina Martnez

Cdigos:
2148 2181 2150

NOTA INFORME:..................

Fecha de Realizacin: Martes 15 de Octubre del 2013 Fecha de Entrega:

Viernes 18 de Octubre del 201 1. TEMA:


Hidrlisis de la sacarosa y almidn.

2. OBJETIVOS: Objetivo General: Hidrolizar la sacarosa y el almidn Objetivos Especficos: Determinar la presencia de polisacridos en soluciones de almidn. Reconocer la presencia de azcares reductores mediante la prueba de Benedict. Determinar el resultado adquirido al realizar la hidrolisis de la sacarosa.

3. MARCO TERICO: Carbohidratos Los carbohidratos, tambin llamados glcidos o hidratos de carbono desde el punto de vista qumico son compuestos polihidroxidados con caractersticas aldehdicas y cetnicas; son los ms abundantes de la biosfera, y a su vez los ms diversos. Se forman por C, H y O. Sirven como fuente de energa para todas las actividades celulares vitales. Responden a la frmula general CnH2nOn. (2). Se clasifican en: Monosacridos: Formados por una sola cadena de tomos de carbono. Por el nmero de carbonos: triosa (3C), tetrosa (4C), pentosa (5C), hexosa (6C). Por el grupo funcional: aldosas y cetosas Oligosacridos: son polmeros de 2 hasta 10 unidades de monosacridos. Se clasifican en disacridos, trisacridos, tetrasacridos,, decasacridos. Disacridos: Los disacridos estn formados por la unin de dos monosacridos, generalmente hexosas; son los oligosacridos de mayor importancia biolgica y estn formados por la unin de dos hexosas. Su frmula general es C 12H22O12. Son slidos cristalinos de color blanco, sabor dulce y son solubles en agua.

Polisacridos: son carbohidratos constituidos por la unin de muchos monosacridos, que generalmente son glucosas, las que conforman largas cadenas de polmeros. (4)

FUNDAMENTO TERICO: La Sacarosa La sacarosa es uno de los disacridos ms comunes; no presenta poder reductor porque la unin glucosdica se establece entre el carbono 1 de la glucosa y el carbono 2 de la fructosa, con lo cual se estabilizan las estructuras cclicas; dando un resultado negativo frente a los reactivos de Fehling y Benedict. Pero en presencia del cido clorhdrico y en caliente la sacarosa se descompone en los dos monosacridos que la forman (glucosa y fructosa), por lo que al hacer reaccionar la muestra con el reactivo de Fehling o con el de Benedict el resultado es positivo y aparece un precipitado rojo. (1) Almidn Son polisacridos o polmeros de alto peso molecular. Estas molculas pueden ser hidrolizadas totalmente por cido o enzimas y rendir monosacridos; no son reductores aunque presentan ese extremo libre con capacidad reductora, la razn es que un grupo reductor cada cientos de molculas no es suficiente para ser visualizado a travs de las tcnicas como Fehling o Benedict usadas para determinar poder reductor. El anlisis minucioso de la estructura del almidn demuestra que es una mezcla de otros dos polisacridos: la amilosa y la amilopectina. La proporcin de ambos polisacridos vara segn la procedencia del almidn, pero por lo general, la amilopectina es la ms abundante. Los almidones constituyen la principal fuente de nutricin glicdica para la humanidad. El almidn puede ser degradado por muchas enzimas. (3) 4. MATERIALES Gradilla Tubos de ensayo (5) Vaso de precipitacin de 500 mL Reverbero Pipeta de 10 mL Pinza para tubos Esptula REACTIVOS: - Reactivo de Benedict - cido clorhdrico - Carbonato de sodio - Solucin de sacarosa - Solucin de almidn - Reactivo de Lugol

5. GRFICOS: Materiales y equipos

Pueba de Benedict

Hidrlisis de la Sacarosa y el Almidn

6. PROCEDIMIENTO: PRUEBA DE LUGOL Azcares no Hidrolizados 1. Agregar 1mL del reactivo Benedict en dos tubos de ensayo. 2. Colocar en dos tubos de ensayo 5ml de almidn y 5 ml de sacarosa respectivamente. 3. Agregar 1ml de Lugol en cada tubo de ensayo y someterlo a bao mara durante 5minutos. 4. Dejar reposar las muestras PRUEBA DE BENEDICT Azcares no Hidrolizados 1. Agregar 1ml del Reactivo de Benedict en dos tubos de ensayo. 2. En uno de los tubos colocar 5 gotas de sacarosa y en otro 5 gotas de almidn. 3. Someter a ambos tubos a bao mara durante 5minutos y dejarlos reposar.

Azcares Hidrolizados Hidrlisis de la Sacarosa 1. Realizar la prueba de Benedict con la solucin de sacarosa. 2. Agregar 5 gotas de HCl a 5 mL de la solucin de sacarosa. 3. Calentar durante 5 minutos en un bao de agua hirviendo; dejar enfriar y agregar carbonato de sodio (slido), hasta cuando no se produzca ms efervescencia. 4. Con esta solucin hidrolizada se realiza la prueba de Benedict. 5. Observe y anote los resultados. Hidrlisis de Polisacridos 1) 2) 3) 4) 5) Separar una solucin de almidn. Realizar la prueba de Benedict con sta solucin Colocar en un tubo de ensayo 10 mL de solucin de almidn. Aadir 10 gotas de HCl concentrado y hervir cuidadosamente. Con una pipeta remover una gota de la solucin cada tres minutos y mezclar con una gota del reactivo de Lugol en baldosa blanca. 6) Una vez que el color de la solucin sea el mismo que el del reactivo, retirar 8 gotas de la solucin; colocarlas en un tubo de ensayo diferente y neutralizar la muestra con carbonato de sodio (slido). 7) Agrega 2 mL de la solucin de Benedict. 8) Continuar sacando muestras durante 10 minutos, luego colocar los tubos que contiene la solucin de Benedict en un bao de agua hirviendo durante 3 minutos y se deja enfriar.

7. REACCIONES:

Hidrlisis de la sacarosa

Hidrlisis

Hidrlisis de la sacarosa.C12H22O11 + H2O C6H2O6 + C6H2O6 Sacarosa Agua Glucosa Fructosa

Hidrlisis del almidn l(C6H10O5)n + nH2O

Hidrlisis del almidn


CH2OH CH2OH H O OH H OH H OH OH OH H OH OH H

nC6H12O6

CH2OH H OH OH H O OH H

CH2OH

OH OH H OH OH

OH H

OH H

n
8. RESULTADOS:

D - Glucosa n D--Glucopiranosa

Sustancias Solucin de sacarosa Solucin de almidn Solucin hidrolizada de sacarosa Solucin hidrolizada de almidn + = Reaccin positiva - = Reaccin negativa

Prueba de Benedict + -

9. OBSERVACIONES

1. El compuesto de Benedict conserv el color azul despus de realizarse el bao Mara

2. El color de la muestra no vari al aadirle las 10 gotas de HCl

3. Una vez que la sacarosa se enfri despus de haber sido sometida al bao Mara, agregamos NaCO3, la solucin empez a efervescer.

4. Colocamos la sacarosa con NaCO3, en un mililitro de Benedict y se puede observar que


la coloracin cambi tornndose la solucin de color ladrillo, lo cual determina que la prueba de Benedict es positivo.

5. Al tomar una gota cada 3 minutos de la solucin del almidn que est sometida a bao Mara y colocar en las mismas una gota de Lugol, se pueden obtener las siguientes coloraciones que van desde un negro a un color muy parecido al Lugol. A partir de la muestra N 11 empieza a notarse la diferencia en la coloracin de cada gota obtenida.

6. La solucin de almidn se torna de color marrn rojiza pero nicamete en la superficie


y en el fondo, una vez que fue sometida a Benedict.

10. CONCLUSIONES: En un tubo de ensayo colocamos una muestra de almidn y colocamos Lugol si este cambia a un color marrn nos indica que es una muestra positiva es decir que tenemos un polisacrido, mientras que si no hay un cambio es una muestra negativa y no es un polisacrido. Mediante la experimentacin encontramos que tenemos presencia de azucares reductores cuando existe un cambio en la coloracin de la muestra y se torna color ladrillo.

La sacarosa es un disacrido que no posee carbonos anomricos por lo que carece de poder reductor y la reaccin con el reactivo de Benedict resulta negativa, tal como ha quedado demostrado en el experimento. Sin embargo una vez que la sacarosa se hidroliza al aadir HCl y NaCO3 y al ser sometido a Bendict la solucin obtuvimos un resultado positivo.

11. CUESTIONARIO: 1. Realice la reaccin de hidrlisis de la sacarosa. Cul es el producto resultante?

2. Realice la reaccin de hidrlisis del almidn

Hidrlisis del almidn


CH2OH H OH OH H O OH H OH H CH2OH OH OH H O OH H OH H CH2OH OH OH H CH2OH

OH OH H OH OH

OH H

OH H

n
3. Explique la reaccin del almidn con el yodo

- D - Glucosa

Si disolvemos yodo molecular, in yoduro y amilosa en agua, obtenemos un producto de intenso color azul oscuro. Parece que el yodo molecular y el in yoduro disueltos forman iones I3 que se quedan introducidos en el eje de la hlice de amilosa; vista de lejos, esta estructura es de color azul oscuro.

WEBGRAFA:
1. Fernandez, J. (2008). Reconocimiendo del almidon con yodo. Bogota: La ciencia para todos http://lacienciaparatodos.wordpress.com/2011/01/26/experimentoreconocimiento-de-almidon-con-yodo/

2. Licata, M. (13 de 08 de 2009). Carbohidratos, hidratos de carbono o glcidos. Recuperado el 17 de 10 de 2013, de Carbohidratos, hidratos de carbono o glcidos.: http://www.zonadiet.com/nutricion/hidratos.htm 3. Salazar, M. R. (2010). TCNICA DE LA REACCIN ALMIDN/YODO. Mexico: Vivir mejor .http://www.concitver.com/4%C2%AA%20SIC2010/1%20MIERCOLES/6%20Xochitl%20 Loredo%20Salazar.pdf

BIBLIOGRAFA
4. Tello, Leonor. Ciencias Naturales Biologa. Edunum. Riobamba