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Dorelly A BONILLA Q, Luisa F PEUELA B, Noralba SIERRA M, Josas E DAZ F, Jaime H ROJAS B DESARROLLO Y VALIDACIN DE UNA METODOLOGA ANALTICA POR ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA PARA LA DETERMINACIN DE COCANA EN UN POLMERO SINTTICO Vitae, vol. 15, nm. 1, enero, 2008, pp. 103-112, Universidad de Antioquia Colombia
Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=169815394012

Vitae, ISSN (Versin impresa): 0121-4004 vitae@udea.edu.co Universidad de Antioquia Colombia

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VITAE, REVISTA DE LA FACULTAD DE QUMICA FARMACUTICA ISSN 0121-4004 Volumen 15 nmero 1, ao 2008. Universidad de Antioquia, Medelln, Colombia. pgs. 103-112

DESARROLLO Y VALIDACIN DE UNA METODOLOGA ANALTICA POR ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA PARA LA DETERMINACIN DE COCANA EN UN POLMERO SINTTICO
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF AN ANALYTICAL METHODOLOGY FOR COCAINE HYDROCHLORIDE DETERMINATION IN A SYNTHETIC POLYMER BY ULTRAVIOLET SPECTROMETRY
Dorelly A. BONILLA Q.1, Luisa F. PEUELA B.1, Noralba SIERRA M. 1, Josas E. DAZ F.2, Jaime H. ROJAS B. 1*

RESUMEN
Se presentan en este artculo los resultados del desarrollo y validacin de una metodologa analtica para la determinacin de clorhidrato de cocana en un polmero de ltex sinttico. El procedimiento consiste en la extraccin de la cocana con cido sulfrico 0,5 N y medida de la absorcin a 233 nm. El mtodo desarrollado es selectivo, lineal y preciso. La linealidad se obtiene entre 4 y 20 ppm, con lmites de deteccin y de cuantificacin de 1,6 y 4,0 ppm, respectivamente. La robustez de la metodologa es igualmente estudiada, as como la estabilidad de la cocana en cido sulfrico 0,5 N, requisito para el almacenamiento de muestras y estndares. Estas caractersticas, junto con su sencillez y exactitud, permiten que el mtodo sea de fcil aplicacin y adecuado para el objetivo propuesto. El mtodo validado se aplica para la determinacin del clorhidrato de cocana en un polmero incautado por las autoridades legales. Palabras Clave: Cocaina, polmero, cromatografa lquida, C18, deteccin ultravioleta, validacin.

ABSTRACT
An ultraviolet spectrometry method was developed for the quantitative assay of cocaine hydrochloride in a latex plastic polymer. The absorption was determined in sulfuric acid 0,5N at 233 nm, after substance extraction using the same acid. Selectivity, linearity between 4 and 20 ppm and good reproducibility were shown by this method. Detection and quantification limits were 1,6 and 4,0 ppm, respectively. Method robustness was also verified, as well as cocaine hydrochloride stability in sulfuric acid 0,5N, medium where the samples and reference standards were stored. These properties, besides its simplicity and accuracy, make it suitable for achieving proposed objectives. The validated method was applied to the determination of cocaine hydrochloride in polymer confiscated by the law. Keywords: Cocaine, polymer, reverse high performance liquid chromatography, C18, UV detection validation.

1 Seccin de Analtica, Departamento de Farmacia, Universidad Nacional de Colombia, A.A. 14490, Bogot, Colombia 2 Laboratorio de Qumica, Fiscala General de la Nacin, Bogot, Colombia * Autor a quin debe dirigirse la correspondencia: jhrojasb@unal.edu.co

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INTRODUCCIN
En las ltimas dcadas se ha visto aumentada la produccin, distribucin y comercializacin de sustancias psicotrpicas, tales como la cocana, cuyo consumo ilcito est sometido a fiscalizacin internacional. Este aumento se relaciona con la rpida diversificacin en la obtencin y distribucin de este alcaloide, as como con su demanda, principalmente en los pases industrializados. Para la pronta y rpida administracin de justicia, las autoridades deben, adems de ser competentes, disponer de metodologas analticas validadas, confiables y de rpida ejecucin. Entre las varias formas de camuflaje de estas sustancias ilegales, una que se ha vuelto comn es su incorporacin en algunos materiales tales como polmeros de naturaleza plstica. En Colombia es corriente el empleo de ltex natural polimerizado para tal fin. Antes de proceder a la extraccin y anlisis cuantitativo de la cocana presente en el polmero, se debe proceder a ensayos previos como pruebas de campo y cromatografa en capa delgada del polmero incautado, pruebas realizadas en el presente trabajo. Las muestras incautadas en Colombia frecuentemente se encuentran adulteradas y presentan una pureza entre 80 y 90% (1). La cocana, ster derivado del tropano, sufre reacciones de hidrlisis que dependen de la temperatura y del pH, presentando su mxima estabilidad a un pH cercano a 3,0 (2). Dentro de las diferentes tcnicas que existen para la determinacin de cocana se encuentra la espectrofotometra ultravioleta en medio cido a 233 y a 275 nm (3), la absorcin al infrarrojo (4) y la cromatografa gaseosa con detector de ionizacin de llama, acoplada o no a espectrometra de masas (4 - 9, 10, 11), tcnica que ha sido utilizada para la determinacin de cocana y de sus metabolitos en muestras de saliva (5). Por otra parte, la cromatografa lquida de alta eficiencia se ha empleado para su determinacin en plasma (12), plasma y orina (13) y otras matrices (14). La literatura reporta igualmente la determinacin de cocana y otras drogas ilcitas por cromatografa en capa delgada de alta eficiencia (15) y por electroforesis capilar (16). La revisin de la literatura no indica que se haya realizado la determinacin de cocana en una matriz constituida por el polmero derivado del ltex o caucho natural. El caucho se obtiene del rbol por un tratamiento sistemtico de sangrado, el cual consiste en hacer un corte en forma de ngulo a

travs de la corteza profundizando hasta el cambium (17). El ltex contiene entre 30 y 36 % del hidrocarburo del caucho (isopreno), 0,3 - 0,7 % de cenizas, 1 - 2% de protenas, 2% de resina y 0,5% de quebrachitol. Para la validacin de la metodologa se siguieron las pautas y recomendaciones publicadas por la FDA (18), USP (19) y otros autores (20). Para el estudio de la exactitud de la metodologa fue necesario sintetizar el polmero en el laboratorio, para lo cual se utiliz como monmero el estireno, como iniciador el perxido de hidrgeno y como estabilizadores de la emulsin, Tween 20 y lauril sulfato de sodio. En el proceso de sntesis fue necesario optimizar el sistema de mezcla y agitacin, la temperatura y el tiempo de reaccin.

DESARROLLO EXPERIMENTAL
Equipos Espectrofotmetro Unicam UV-VIS Tipo UV2-200, espectrofotmetro IR ATI Mattson Modelo Genesis Series FTIR, potencimetro Mettler Toledo MA 235 pH/Ion Analyser, balanza analtica Mettler Toledo AB204-S, cromtografo de gases acoplado a masas Agilent Series 6890. Reactivos Adems de los patrones secundarios de cocana y de clorhidrato de cocana, se emplearon los siguientes reactivos, todos de grado analtico: permanganato de potasio, cido clorhdrico, cido sulfrico, carbonato de potasio, etanol, metanol, cido actico glacial, cido ntrico, hidrxido de sodio, biftalato de potasio, cido perclrico, cloroformo, amonaco, sodio metlico, tetracloruro de carbono, diclorometano, tetrahidrofurano, tolueno, ciclohexanona, acetato de etilo, acetato de amilo, cloruro frrico, cloruro de calcio, sulfato ferroso, nitrato de plata, piridina, molibdato de amonio y acetona. Desarrollo de la metodologa El proceso de desarrollo experimental se realiz en tres etapas bsicas: caracterizacin del polmero de incautacin, estandarizacin de la tcnica de extraccin y la validacin de la metodologa analtica. Antes de proceder a la ltima etapa, se verific la idoneidad del sistema analtico. El material volumtrico y el instrumental empleado se calibraron debidamente. Para el material volumtrico se sigui

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la Norma Internacional ISO 4787 y para la balanza, las recomendaciones de la Norma Tcnica Colombiana NTC 2031 y la Organizacin Internacional de Metrologa Legal (OIML). La exactitud de la longitud de onda del espectrofotmetro se verific de acuerdo a la recomendaciones de la farmacopea britnica (21). La longitud de onda para la determinacin de la cocana en cido sulfrico 0,1N se estableci en 233 nm, longitud a la cual se obtiene mayor sensibilidad, respecto de 275 nm, segundo mximo de absorcin encontrado. La idoneidad del sistema se verific al inicio, hacia la mitad y al final de la validacin. Con este propsito, se determin la repetibilidad de la absorbancia (error fotomtrico), la relacin de absorbancias a longitudes de onda seleccionadas de acuerdo al espectro de absorcin de la cocana y la exactitud de la longitud de onda y de la absorbancia empleando una solucin de dicromato de potasio (21). Caracterizacin del polmero de incautacin Para la caracterizacin del polmero, identificacin y posible composicin, se realizaron las siguientes pruebas (22-24): anlisis elemental luego de fusin sdica, reaccin con piridina, ensayo de Liebermannn-Storch-Morawski y ensayos de solubilidad, as como anlisis termogravimtrico (TGA), calorimetra de barrido diferencial (DSC) y espectroscopia infrarroja de reflectancia, pruebas stas especficas para la caracterizacin de polmeros. Estabilidad de las soluciones de cocana Algunas soluciones de cocana pueden alterarse por crecimiento de hongos, aparicin de color, fermentacin y formacin de productos de degradacin, alteraciones favorecidas, entre otros, por factores tales como pH y temperatura. La estabilidad de una solucin de cocana de concentracin 300 ppm se verific por cromatografa gaseosa acoplada a masas usando tetracosano como estndar interno. Tres soluciones se almacenaron a temperatura ambiente y tres a cero grados centgrados. Validacin de la metodologa analtica Para la validacin de la metodologa analtica se procedi a la evaluacin de los siguientes parmetros: linealidad, exactitud, precisin como repetibilidad y como precisin intermedia, concentracin mnima detectable y concentracin mnima

cuantificable. Adems, se verific la robustez de la metodologa, siguiendo las recomendaciones de Youden y Steiner (25). Para esta etapa del estudio fue necesario elaborar una matriz a base de ltex natural copolimerizada con estireno, utilizando como iniciador perxido de hidrgeno y empleando Tween 20 y laurilsulfato de sodio como tensioactivos, matriz que fue enriquecida con una solucin acuosa de clorhidrato de cocana. Para fines del muestreo, la matriz obtenida se redujo a un tamao de partcula de aproximadamente 1 mm, todo con el fin de mejorar la superficie de contacto con el solvente de extraccin de la cocana. La selectividad, teniendo en cuenta los objetivos cualitativos y cuantitativos del trabajo, se comprob frente a posibles contaminantes, agregados con fines de adulteracin de la cocana, tales como lidocana, procana, fenacetina, efedrina y cafena (26). Estas sustancias pueden ser identificadas por espectrofotometria y por ensayos preliminares. Igualmente con el propsito de verificar la calidad de la muestra, se realizaron ensayos a la gota con reactivo de Tanred y Scott y cromatografa en capa delgada con tres sistemas solventes diferentes (4). En este caso se utilizaron cromatoplacas de slica gel 60 F254, como revelador el reactivo de Dragendorff y como sistemas de desarrollo ciclohexano-tolueno-dietilamina (75:14:10), cloroformo-metanol-amonaco (90:10:1) y metanol-butanol-cido clorhdrico (60:40:2,8).

RESULTADOS Y DISCUSIN
Caracterizacin del polmero de incautacin El anlisis elemental demostr ausencia de halgenos, azufre y fsforo, por lo cual la bsqueda se orient hacia un polmero orgnico, exceptuando caucho vulcanizado con azufre o una resina de casena (ausencia de fsforo). Las pruebas de solubilidad confirman la anterior conclusin. Los anlisis trmicos y calorimtricos en el polmero de incautacin indican seales que corresponden a la cocana, a sus productos de descomposicin y al plastificante empleado. Como se observa en la grfica de calorimetra diferencial de barrido, (DSC) obtenida con el polmero incautado luego de la extraccin de la cocana con cido sulfrico 0,5N (Figura1), aparece una seal a -39.44C con un valor de Cp de 24.35J/g, pero ninguna seal en la regin de 190C, en adelante,

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indicativa de la presencia de cocana en el polmero como tal. La seal a -39.44C corresponde al plasti-

ficante empleado en su elaboracin con el propsito de conferirle propiedades de elasticidad.

Figura 1. Grfica de DSC de la matriz del polmero incautado

En el polmero incautado (Figura 2), se observa adems una seal, no encontrada en la Figura 1, que corresponde al punto de fusin de la cocana (189.68C), y que indica claramente la presencia de la droga. Las seales obtenidas a 242,88, 232,95 y 274,62C, se deben a las temperaturas de degradacin de la cocana. Se reportan tres temperaturas diferentes, pues la cocana puede presentar diferentes tamaos de cristales, resultantes de las formas de cristalizacin del alcaloide producto de su inclusin en el polmero. En este caso, la seal

por el plastificante utilizado presenta un valor de Cp que desciende a 10.01J/g, debido posiblemente a una interferencia de la cocana en la cantidad de calor absorbido por el material en este intervalo de temperatura. Las seales adicionales que se presentan a diferentes temperaturas como inflexiones en la Figura 1, demuestran que el polmero de incautacin se encuentra en el grupo de las poliolefinas y cauchos. La temperatura de transicin vtrea del ltex no se alcanza a observar, pues correspondera a -70C, valor por fuera de la curva.

Figura 2. Grfica de DSC del polmero incautado

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En el ensayo de caracterizacin por anlisis trmico diferencial (TGA) del polmero incautado (Figura 3), los valores indicados sobre la curva decreciente corresponden a la prdida de peso de la muestra por el incremento en el valor de la temperatura, con cadas que representan la volatilizacin de las sustancias presentes. El punto de inflexin a 190,81C, con una prdida de peso reducida a 94,10%, es cercano al punto de fusin de la cocana y al inicio de su volatilizacin. Una

mejor visualizacin se tiene en la curva de primera derivada. Sobre la figura, la curva sobre la que se observan picos, corresponde a la primera derivada y permite una mejor visualizacin. La seal a 231,39C correspondera a la degradacin y posterior volatilizacin, as como a la presencia de humedad o de alguna otra sustancia. La respuesta para la primera derivada a 560.86C corresponde al inicio de la degradacin del polmero.

Figura 3. Grfica de TGA para el polmero incautado

En la Figura 4, obtenida con el polmero incautado libre de cocana, no se obtienen seales por debajo de 500C, lo cual evidencia la ausencia de cocana. Se obtienen, en cambio, seales entre 599,82C y 689,08C, temperaturas de inicio de

degradacin del polmero. Esta curva demuestra que la prdida de componentes voltiles del polmero sin cocana es constante hasta que empieza su degradacin.

Figura 4. Grfica de TGA para la matriz del polmero incautado

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Estandarizacin del mtodo de extraccin La eficiencia de la extraccin de la cocana con cido sulfrico 0,1N se evalu a tiempos entre 0,5 y 6,0 horas, no observndose cambios significativos en el proceso de extraccin a partir de las 2,0 horas. Posteriormente se analiz el proceso de extraccin frente a diferentes concentraciones de cido sulfrico. No presentaron diferencias en el porcentaje de extraccin al utilizar concentraciones 0,1 y 0.5 N de cido sulfrico. Como medio de extraccin se estableci cido sulfrico 0,5 N. Estabilidad de las soluciones de cocana La cocana (benzoilmetilecgonina), por su naturaleza de ster, sufre reacciones de hidrlisis, las cuales son promovidas y catalizadas por un medio cido, medio establecido para el proceso de extraccin eficiente de la droga. La estabilidad, durante 26 das, se determin mediante cromatografa gaseosa espectrometra de masas utilizando tetracosano como estndar interno, para seis diferentes soluciones de cocana, con concentraciones entre 200 y 320 ppm. De estas soluciones, tres se mantuvieron a la

temperatura del laboratorio y las restantes a 0C. Los resultados demostraron descomposicin significativa de la cocana al tercer da de iniciado el estudio para las soluciones mantenidas a la temperatura del laboratorio y al quinto da para las soluciones almacenadas a 0C. En consecuencia se recomienda, en caso de ser necesario, mantener refrigeradas las soluciones patrn de cocana y analizarlas antes del tercer da de preparadas o, en el caso de muestras, de ser sometidas al proceso de extraccin. Validacin de la metodologa analtica Selectividad. La selectividad de la metodologa, analizada frente a las sustancias utilizadas comnmente para adulterar la cocana (efedrina, cafena, procana, fenacetina y lidocana), se estableci mediante la determinacin de los espectros de absorcin entre 200 y 350 nm. Los espectros indican absorcin variable para cada una de ellas a 233 nm, longitud de onda empleada para la cuantificacin de la cocana. En la Tabla 1 se reportan los valores de absorbancia a 233 nm de los adulterantes mencionados.

Tabla 1. Absorbancia de algunos adulterantes a 233 nanmetros


Adulterante Concentracin (ppm) 250 Efedrina 500 1000 2 Cafena 6 12 14,6 Lidocana 38 58,5 6,6 Procana 14,7 24,6 4,6 Fenacetina 9,3 18,6 Absorbancia 0,052 0,084 0,169 0,075 0,163 0,319 0,127 0,289 0,567 0,238 0,571 0,928 0,232 0,489 0,952

De acuerdo a los resultados obtenidos, la absorcin encontrada causara una interferencia en la cuantificacin de la cocana por el mtodo espectrofotomtrico, si estas sustancias llegaren a estar presentes. Por ello, se hace necesario una

identificacin previa de la muestra por pruebas de campo o por cromatografa en capa delgada. En la Tabla 2 se presentan los resultados obtenidos con los tres sistemas solventes mencionados anteriormente.

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Tabla 2. Valores de Rf para algunos adulterantes en tres sistemas cromatogrficos


Sustancia Cafena Cocana Proca+ina Procana Efedrina Fenacetina Lidocana
1 2

Rf 1 0,07 0,73 0,08 0,08 0,02

Rf 2 0,87 0,46 0,16 0,04 0,74

Rf 3 0,69 0,57 0,70 0,90 0,86

0,59

0,93

0,81

ciclohexano-tolueno-dietilamina (75:14:10) cloroformo-metanol-amonaco (90:10:1) 3 metanol-butanol-cido clorhdrico (60:40:2,8)

Los espectros de absorcin ultravioleta de los componentes de la matriz, ltex natural, estireno, Tween 20, laurilsulfato de sodio y perxido de hidrgeno a las concentraciones de ensayo, no presentaron prcticamente absorcin a 233 nm, demostrndose de esta manera la selectividad de la metodologa frente a estos compuestos.
1,4 1,2 1,0

Linealidad . La proporcionalidad de la respuesta, para el sistema y para el mtodo, se verific con concentraciones de cocana entre 4 y 20 ppm, tres rplicas para cada nivel de concentracin. Para el mtodo, la curva de calibracin, ajustada por mnimos cuadrados, se representa en la Figura 5.

Absorbancia

0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22

C (ppm)

Figura 5. Curva de calibracin para la linealidad del mtodo

En la Tabla 3 se reportan los valores experimentales para intercepto y pendiente, as como los valores de t para la prueba t de Student, con trece grados de libertad y una probabilidad de error del 5%. En la tabla se encuentran igualmente los lmites calculados de acuerdo al error estndar de cada uno de ellos. Los valores experimentales de

t indican convergencia al origen (t experimental < t de la tabla) y un valor de pendiente significativamente diferente de cero (t experimental > t de la tabla), tanto para el sistema como para el mtodo. Se observa que el cero se ubica dentro de los lmites calculados para los interceptos.

Tabla 3. Resultados del test de Student para intercepto y pendiente*


Sustancia Sistema Parmetro Intercepto Pendiente Intercepto Pendiente Valor 0,0057 0,0547 0,0063 0,0554 t exp. 1,61 205,32 1,42 166,89 Lmite inf. -0,002 0,0541 -0,003 0,0561 Lmite sup. 0,0133 0,0553 0,0158 0,0547

Mtodo

*t de la tabla (gl: 13, : 0,05): 2,16

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Los valores del coeficiente de determinacin para sistema y mtodo fueron respectivamente 0,9997 y 09998. Los valores experimentales de F de la prueba de Fisher para el anlisis de varianza, tanto para el sistema como para el mtodo, indican una regresin altamente significativa y un desvo de la linealidad no significativo. Precisin. La precisin a nivel de repetibilidad, para sistema y mtodo se determin realizando 10 anlisis independientes de tres rplicas de soluciones preparadas de concentracin 8, 12 y 16 ppm. Los valores del coeficiente de variacin obtenidos, en ningn caso superan el 2%, lmite establecido como coeficiente de variacin para metodologas analticas (ICH, USP). La precisin intermedia, sistema y mtodo, se analiz de acuerdo a un diseo experimental consistente en el anlisis de una solucin de cocana de concentracin 8 ppm por parte de dos analistas, durante cuatro das consecutivos, tres rplicas por analista y tres lecturas para cada anlisis. Los coeficientes de variacin ponderados para cada uno de los dos analistas fueron para el sistema 1,99 y 1,60% respectivamente. Los valores para el mtodo fueron 1,23 y 0,38%. Exactitud. Para el estudio de la exactitud del mtodo, la matriz de polmero sintetizada se enriqueci con tres niveles de concentracin de cocana, 4, 8 y 16% . Para cada nivel se realizaron tres extracciones independientes, alcanzndose un porcentaje de recuperacin promedio de 83,58 %. De acuerdo al test t de Student, la recuperacin hallada es significativamente diferente del 100%. Sin embargo, el valor puede ser considerado como aceptable si se tiene en cuenta la complejidad de la matriz de poliestireno. Igualmente se determin si la concentracin influye de alguna manera en la variabilidad de los resultados. Para ello se utiliz el test de Cochran para comparacin de varianzas. El valor de G experimental hallado fue 0,652, valor inferior a 0,898, correspondiente al obtenido de la tabla de G de Cochran para k igual a tres (niveles de concentracin), para n igual a tres (rplicas para cada nivel de concentracin) y una probabilidad de error de 0,05%. Como conclusin se establece que el nivel de concentracin no influye en la variabilidad de los resultados y que las varianzas para los distintos niveles de concentracin no son significativamente diferentes entre s.

Lmites de deteccin y de cuantificacin. Para establecer los valores de la cantidad mnima detectable (CMD) y de la cantidad mnima cuantificable (CMC) se utiliz el mtodo de la relacin seal/ruido, mtodo bastante utilizado cuando se trata de determinar estas cantidades. A 233 nm, como CMD se encontr un valor de 9,73 x 10 -3 ppm y como CMC un valor de 2,95 x 10 -2 ppm. Estos lmites se verificaron experimentalmente, encontrndose que no podan diferenciarse de la magnitud del ruido. De acuerdo a ello, se procedi a determinar los lmites siguiendo el mtodo de las diluciones seriadas o mtodo de la curva de calibracin a bajas concentraciones. Se trabajaron los siguientes niveles de concentracin: 0,4, 0,8, 1,2, 1,6 y 2,0 ppm, tres rplicas para cada nivel. Los resultados, de acuerdo a la prueba t de Student, indican una pendiente significativamente de cero y un intercepto no significativamente diferente de cero. El cero de la curva de regresin se encuentra dentro de los lmites calculados para el intercepto. Por otra parte, el anlisis de varianza permite concluir que la regresin es significativa y un desvo de la linealidad no significativo. Sin embargo, se observan elevados valores del coeficiente de variacin, principalmente para las tres primeras concentraciones. Por esta razn se propone como CMD una concentracin de 1,6 ppm, nivel al cual el coeficiente de variacin hallado fue 2,27%, y como CMC una concentracin de 4 ppm, primer punto de la curva de calibracin del sistema. Matrices del polmero se enriquecieron con concentraciones de 2 y 4 ppm. Los porcentajes de recuperacin, promedio de tres rplicas, fueron 68,95 y 71,78% para 2 y 4 ppm, respectivamente. Robustez. La robustez del mtodo se estableci de acuerdo al diseo de Placket Burtman y realizando pequeas variaciones en algunos parmetros del mtodo (Tabla 4). Al comparar los valores de diferencia obtenidos para cada factor en estudio, se encontr que la diferencia media observada para cada nivel (superior e inferior) fue menor a la diferencia del producto de la desviacin estndar de la precisin del mtodo por la raz cuadrada de 2 para el factor longitud de onda. Se concluye que el mtodo es slido frente a las pequeas variaciones realizadas en la temperatura, tiempo de lectura, concentracin de cido sulfrico y analista.

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Tabla 4. Influencia de la variacin de algunos parmetros en la respuesta


Factor 1 2 Temperatura (C) 21 21 Tiempo (min) 0 0 Longitud de onda (nm) 231 231 Normalidad H2SO4 0,1 0,1 Analista 1 2 Absorbancia 0,477 0,448 *media lmite superior media lmite inferior desviacin estndar del mtodox1.4142 = 0,0111 3 21 30 235 0,1 2 4 25 0 235 0,05 2 5 25 30 235 0,05 1 6 25 30 231 0,05 1 Diferencia* 0,0021 0,0121 0,4550 0,0059 0,0059

0,450

0,465

0,463

0,440

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CONCLUSIONES
Se implementaron y validaron algunos parmetros de una metodologa analtica para la cuantificacin de cocana en un polmero de ltex natural por espectrofotometra ultravioleta, polmero utilizado por el narcotrfico como medio de camuflaje de la droga. De acuerdo a varios mtodos de anlisis de identificacin realizados, se caracteriz la matriz en estudio como compuesta por un ltex natural copolimerizado. Para la validacin se hizo necesario sintetizar una matriz de ltex copolimerizado con caractersticas similares, tanto en estructura como en apariencia, flexibilidad y resistencia fsica. Gracias al proceso de extraccin estandarizado y al mtodo de muestreo propuesto, se obtuvieron resultados que permitieron inferir sobre el contenido del analito presente en la totalidad de la muestra incautada. Durante la etapa de validacin, la metodologa demostr ser precisa, lineal, robusta y selectiva frente a los componentes de la matriz. Los lmites de deteccin y de cuantificacin encontrados fueron 1,6 y 4 ppm, respectivamente. La metodologa es adems sencilla en su realizacin sin incurrir en costos excesivos, permite la entrega rpida de resultados y la disminucin de tiempo de trabajo de los peritos forenses, todo lo cual beneficia la pronta administracin de justicia por parte de los organismos del estado encargados de ella. Es necesario proceder a ensayos previos por cromatografa en capa delgada para detectar sustancias que se utilizan a veces para rebajar y adulterar la cocana. Si estas sustancias, como por ejemplo, lidocana, procana, fenacetina, llegaren a ser detectadas, se har necesario determinar el contenido de cocana por una metodologa selectiva (HPLC).
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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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AGRADECIMIENTOS
Se agradece a la Fiscala General de la Nacin y a su Laboratorio de Qumica por el apoyo financiero para la realizacin del presente trabajo.
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Laboratorio Especializado de Anlisis (LEA)