Apoptosis en el Sistema Nervioso

Junying Yuan & Bruce A. Yankner

Departamento de Biologa celular, Harvard Medical School, 240 Longwood Avenue, Boston, Massachusetts 02115, USA (email: junying_yuan@hms.harvard.edu) Departamento de Neurologa, Harvard Medical School and Division of Neuroscience, Childrens Hospital, Enders 260, 300 Longwood Avenue, Boston, Massachusetts 02115, USA (e-mail: yankner@a1.tch.harvard.edu) La apoptosis neuronal esculpe el cerebro en desarrollo y tiene un rol potencialmente importante en enfermedades neurodegenerativas. Los principales componentes del programa de apoptosis en las neuronas incluye Apaf-1 (Apoptotic proteaseactivating factor1) y protenas del Bcl- y familias de caspasa. Las neurotrofinas regulan la apoptosis neuronal a trav!s de la acci"n de la crtica protena de cascadas de #uinasas$ como %osfoinositol &-#uinasa'A(t y vas de protena #uinasa activadas por mit"genos. Similares vas de se)ali*aciones de muerte celular pueden ser activadas en enfermedades neurodegenerativas por estructuras anormales de protenas$ como fibrillas amiloides en la enfermedad de Al*+eimer. La elucidaci"n de los mecanismos de muerte celular en las neuronas promete proveer m,ltiples puntos de intervenci"n terap!utica en enfermedades neurodegenerativas.

Aunque las neuronas maduras estn entre los tipos de clulas que ms viven en los mamferos, las neuronas inmaduras mueren en grandes nmeros durante el desarrollo. Adems, la muerte celular neuronal es la caracterstica cardinal de las enfermedades neurodegenerativas tanto agudas como crnicas. Cmo mueren las neuronas? Esta es una pregunta difcil !emos comen"ado slo recientemente a entender los mecanismos #sicos. Como todas las clulas, la supervivencia neuronal requiere apo o trfico. $i%tor &am#urger 'ita (evi)*ontalcini descri#ieron en un importante estudio que la supervivencia de las neuronas en desarrollo est directamente relacionada con la disponi#ilidad de sus o#+etivos que inervan. Esto sent las #ases para la !iptesis de la neurotrofina, la cual propuso que las neuronas inmaduras compiten por factores trficos derivados de los o#+etivos, que tienen un suministro limitado, slo aquellas neuronas que tienen -ito en esta#lecer cone-iones sinpticas correctas o#tendran el apo o del factor trfico para permitir su so#revivencia. (a !iptesis de la neurotrofina predice correctamente la so#revivencia neuronal requiere una se.al positiva de supervivencia, no #rind, sin em#argo, una !iptesis concreta so#re cmo las neuronas mueren en ausencia del apo o trfico. Esta#a asumido !asta recientemente que las neuronas moran simplemente de inanicin pasiva en la ausencia de factores trficos. En /011, usando neuronas simpticas en cultivo como un sistema modelo, 2o!nson colegas mostraron que la in!i#icin de '3A sntesis de protena #loquearon la muerte celular de neuronas simpticas, inducida por la privacin de un factor de crecimiento nervioso 43567, #rindando la primera evidencia tangi#le de que las neuronas de !ec!o podran instigar su propio fallecimiento. (a identificacin de los genes de la muerte celular programada ced)8, ced)9 ced)0, en el nematodo Caenor!a#ditis elegans sus mamferos !omlogos, a#rieron una ventana a la oportunidad de e-aminar el mecanismo de la muerte de la clula neuronal a un nivel molecular. :ronto fue descu#ierto que la muerte celular neuronal verte#rada inducida por la privacin del factor trfico, requiere la participacin de proteasas de cistena, ms tarde denominadas caspasas, que son los !omlogos mamferos de la C. elegans del producto CE;)8, del gen de la muerte celular. Esta fue la primera evidencia funcional de que la privacin del factor trfico activa un programa suicida en neuronas verte#radas. Cules son los componentes crticos de este programa neuronal suicida? Cmo es activado por la falta de apo o trfico durante el desarrollo, por condiciones patolgicas en enfermedades neurodegenerativas? Estas preguntas !an sido intensamente estudiadas durante la dcada pasada son el tema de esta revisin. -ol!culas clave en la apoptosis neuronal. (a apoptosis mamfera es regulada por la familia de protenas <cl)=, la protena adaptadora Apaf)/ 4para activador protector apopttico 6actor /7, las proteasas de cistena de la familia de caspasas, que son !omlogos de C. elegans de los productos CE;)0, CE;)9, CE;)8, del gen de la muerte celular, respectivamente. (a neuronas comparten el mismo programa #sico apopttico con todos los dems tipos de clulas. >in em#argo, diferentes tipos de neuronas, neuronas en una etapa de desarrollo distinta, e-presan diferentes com#inaciones de <cl)= miem#ros de la familia de caspasas, lo cual es una forma de proveer la especificacin de regulacin. .l papel de la familia Bcl- en la muerte celular neuronal.

(a familia de protenas <cl)= tiene un rol crucial en la transduccin de se.al apopttica intracelular. Esta familia de genes inclu e tanto protenas anti)apoptticas como pro)apoptticas, que contienen / o ms dominios de !omologa <cl)=. (os ma ores miem#ros anti)apoptticos de la familia <cl)=. <cl)= <cl)-, estn locali"ados en la mem#rana mitocondrial e-terna, en el retculo endoplsmico la mem#rana perinuclear. 5arcia et al, mostraron que la <cl)= puede apo ar la so#revivencia de las neuronas simpticas en ausencia de 356, #rindando la primera evidencia funcional de que la so#re)e-presin de <cl)= puede anular la se.al de muerte inducida por la retirada del factor trfico. >u#secuentemente, ratones transgnicos e-presando <cl)= en el sistema nervioso fueron descu#iertos de estar protegidos contra la muerte celular neuronal durante el desarrollo, as como lo fueron modelos de lesiones neuronales, tales como oclusin de la arteria cere#ral media la a-otoma del nervio facial. Estos resultados sugieren que la supresin de la apoptosis podra proteger las neuronas contra los insultos, que van desde la privacin del factor trfico a los estmulos patolgicos. (a e-presin de <cl)= es alta en el sistema nervioso central durante el desarrollo es regulada descendientemente despus del nacimiento, mientras que la e-presin de <cl)= en el sistema nervioso perifrico es mantenida a lo largo de la vida. Aunque el desarrollo del sistema nervioso en ratones con <cl)= eliminado es normal, !a una prdida su#siguiente de neuronas motoras, sensoriales, simpticas despus del nacimiento, lo que sugiere que <cl)= es crucial para el mantenimiento de la supervivencia neuronal. <cl)- est e-presado en el cere#ro en desarrollo, pero a diferencia de la de <cl)=, la e-presin de <cl)contina incrementando !acia la vida adulta. (os ratones con nulo <cl)-, mueren alrededor del da em#rionario nmero /8, con muerte celular masiva en el sistema nervioso en desarrollo. (a muerte celular ocurre ante todo en neuronas inmaduras que no !an esta#lecido cone-iones sinpticas. En consecuencia, <cl)- de#era ser crucial para la so#revivencia de las neuronas inmaduras, antes de que esta#le"can cone-iones sinpticas con sus o#+etivos.
%igura 1/ Activacin de la apoptosis en neuronas simpticas por disminucin del factor trfico. (a disminucin del factor trfico induce la activacin de 23? la fosforilacin de c)2un, lo cual a su ve" induce la e-presin de ;:@A&r%, perteneciente slo al dominio <&8 mime#ro de la familia <cl)=. ;:@ puede activar <a-, causando da.o mitocondrial, lo cual resulta en la li#eracin de citocroma c. (a formacin del comple+o citocroma cAApaf)/Acaspasa)0 induce la activacin de caspasa)0. (a caspasa) activada por su parte activa la caspasa)8, resultando en apoptosis. Bna falta de se.ali"acin del factor trfico tam#in induce una va con la posi#ilidad de muerte no)nuclear que facilita la formacin del comple+o citocroma cAApaf) /Acaspasa)0, resultando en una activacin dela caspasa.

<cl)= <cl)C( actan in!i#iendo miem#ros pro)apoptticos de la familia <cl)= a travs de la !eterodimeri"acin. <a- es un miem#ro de pro)apopttico de la familia <cl)=, que es ampliamente e-presado en el sistema nervioso. En ratones con deficiencia de <a-, el ganglio cervical superior el ncleo facial muestran un nmero incrementado de neuronas. Adems, las neuronas simpticas neonatales neuronas motoras faciales de ratones con deficiencia de <a- son ms resistentes a la muerte celular inducida por privacin de 356 a-otoma, respectivamente. As, la activacin de <a- podra ser un evento crucial para la muerte celular neuronal inducida por el retiro del factor trfico, as tam#in como lesin. Apaf-1 y caspasas en la muerte celular neuronal

Apaf)/ es un !omologo mamfero del producto CE;)9 del gen de muerte celular C. elegans transmite se.ales apoptticas de da.o mitocondrial para activar caspasas. Apaf)/ forma un comple+o con el c toc!roma c li#erado por las mitocondrias la caspasa)0 para mediar la activacin de la pro)caspasa)0 46ig. /7 (a caspasa)0 activada por su parte se escinde activa la caspasa)8. 'atones con Apaf)/ nulo mueren durante el desarrollo em#rionario tardo, e-i#iendo una apoptosis reducida en el cere#ro con una marcado aumento de la "ona periventricular proliferativa. Es as como Apaf)/ es indispensa#le en la apoptosis de las clulas neuronales pogenitoras. (a !a#ilidad de los in!i#idores de caspasa de #loquear la muerte celular neuronal inducida por la privacin de factor trofico otras condiciones citoto-icas !a provisto indiscuti#le evidencia so#re el rol crucial de las caspasas en la muerte celular neuronal. :ero !a sido ms desafiante el determinar el rol de caspasas especficas, puesto que los mamferos tienen al menos /9 differentes tipos de caspasas. Como cualquier otro tipo de clula, las neuronas pueden e-presar variados simultneamente. Esto !a descartado el modeli simplista en el que la muerte celular neuronal es regulada por caspasas especficas a las neuronas. En cam#io, un anlisis #ioqumico gentico de ratones con caspasas mutantes sugiere que las caspasas estn organi"adas en caminos paralelos e incluso superpuestos especiali"ados para responder a diferentes estmulos. (as caspasas son representadas como proen"imas catalticamente inactivas compuestas por un pro)dominio amino) terminal, una su#unidad grande una su#unidad peque.a. (as caspasas se clasifican so#re la #ase de la secuencia de motivos en sus prodominios. (as caspasas con el dominio efector de muerte, que inclu e la caspasa 1 caspasa)/D, se activan mediante la interaccin con los dominios intracelulares de los receptores de muerte tales como el receptor C;0@ 4Apo)/A6as7 el factor de necrosis tumoral 4E367 (as caspasas con dominios de reclutamiento activadores de caspasa 4CA';>7, que inclu en la caspasa)/, )=, )9, )@, )0, )// )/=, son mu pro#a#lemente activadas a travs de un comple+o intracelular de activacin e+emplificado por el citocromo c A comple-/0 Apaf)/Acaspase)0. Considerando que las caspasas con :ro)dominios cortos, tales como la caspasa) 8, pueden ser activados por la ma ora, si no todas, las vas de caspasa, datos recientes indican que algunas caspasas, como la caspasa)// la caspasa)/=, se activan slo en condiciones patolgicas. Esto ofrece la posi#ilidad de ser capa" de in!i#ir la muerte celular patolgica teraputicamente sin molestar a la apoptosis en el desarrollo la !omeostasis 4ver rese.a en este nmero por 3ic!olson, pginas 1/D)1/F7. (as dos principales caspasas implicadas en la muerte celular neuronal son caspasa)8 caspasa)0, en las que esta ltima activa a la primera 4fig. /7. Eanto los ratones caspasa)8)nula caspasa)0)nula muestran defectos graves similares en el desarrollo de la muerte celular neuronal. *asas celulares ectpicas aparecen en la corte"a cere#ral, el !ipocampo el cuerpo estriado de los ratones caspasa)8)nulos caspasa)0)nula con una marcada e-pansin de la "ona periventricular, un fenotipo mu similar al de los ratones de Apaf)/)nulos. (os prominentes defectos de la apoptosis neuronal en ratones con Apaf)/ nulo, caspasa)8)nula caspasa)0)nula 4Ea#la /7 sugieren que esta va es importante en la regulacin de la muerte celular neuronal en el cere#ro en desarrollo. Neurotrofinas/ un asunto de vida o muerte
-anteniendose con vida con neurotrofinas

Como se mencion anteriormente, la supervivencia de las neuronas inmaduras en desarrollo depende de la disponi#ilidad de factores neurotrficos. Gu es lo que !acen estos factores de supervivencia? (as neurotrofinas generalemente activan ligan los receptores Er% 4Er%A, Er%< Er%C7, los cuales son receptores celulares superficiales con actividad de tirosina quinasa intrnseca. Ellas se pueden autofosforilar, por e+emplo, despus de la unin de 356 a Er%A, el receptor fosforila diversos residuos de tirosinas dentro de su propia cola citoplasmtica. Estas fosfotirosinas a su ve" sirven como puntos de ancla+e para otras molculas como la fosfolipasa Cg, fosfoinositida) 8)quinasa 4:H487?7 protenas adaptadoras como >!c, estas molculas de transduccin de se.ales coordinan la supervivencia neuronal 46ig. =7.

%igura I $as de supervivencia neuronal inducidas por la unin de 356 con su receptor Er%A. 356 induce la autofosforilacin de Er%A, lo cual proporciona lugares de ancla+e para molculas de transduccin como la fosfolipasa Cg, fosfoinositida 8) quinasa 4:H487?7 la protena adaptadora >!c. (a :H487? activada induce la activacin de A%t a travs de 81)fosforilatado fosfatid linositol al igual que la quinasa fosfoinositido) dependiente 4:;?7, la cual por su partefosforilata activa A%t. (a fosforilacin de C'E< e H?? simula una transcripcin de factores promotores de la supervivencia, mientras que la fosforilacin de <ad, 6or%!ead la caspasa)0 in!i#en la va pro) apopttica. En una va paralela, la interaccin de >!c)5r#= >J> activa la va 'as)'af)*E?)E'?, resultando en la activacin de 's%. <ad C'E< tam#in son o#+etivos de 's% que podran actuar sinrgicamente con A%t para activar la va de supervivencia.

0amino 12(&)3-A(t. Bn rol central del camino :H487? en la supervivencia neuronal fue por primera ve" sugerido mediante la o#servacin de que los in!i#idores de :H487? #loquean el efecto de supervivencia de 356. (as en"imas :H487? se encuentran comnmente presentes en el citosol pueden ser activadas directamente por reclutamiento en un receptor Er% activado, o indirectamente a travs de un 'as activado. (as en"imas :H487? activadas catali"an la formacin del lipido 81)fosforiladofosfoinositido, el cual regula la locali"acin actividad de un componente clave en la supervivencia de la celula, la >erAE!r %inasa A%t. A%t tiene 8 isoformas celulares, de los cuales c)A%t8A'AC):?q es la especia ms a#undante en neuronas. Adicionalmente al dominio de quinasa centrali"ado, A%t contiene un dominio de !omologa plec%strin en su e-tremo 3)terminal, que media en su interaccin con protenas fosfolpidos. ;espus de la unin de lpidos, A%t se transloca desde el citoplasma a la superficie interna de la mem#rana plasmtica, lo que pone a la quinasa en estrec!a pro-imidad con sus activadores. (as quinasas que fosforilan activan el A%t, las 8 proteinas quinasas dependientes del fosfoinositol son, como sus nom#res sugieren, en si mismas reguladas por fosfolpidos. :or ende, los productos lpidos generados pos las en"imas :H487? controlan la actividad de A%t al regular su u#icacin activacin. (a protena A%t activa da soporte a la supervivencia de neuronas ante la ausencia de factores trficos, en cam#io un mutante negativo dominante de A%t in!i#e la supervivenca neuronal an en la presencia de factores de supervivencia. Estos resultados esta#lecen un rol escencial para la A%t en la supervivencia neuronal. Cmo acta la A%t? A(t en acci"n. A%t influ e a variadas protenas clave para mantener a las clulas vivas, inclu endo reguladores de apoptosis factores de transcripcin 46ig. =7. :or e+emplo, <ad es un miem#ro pro) apopttico de la familia <cl)=, el cul, en su forma infosforilatada puede unirse a <cl)-( por ende #loquear la supervivencia de una clula. :ero la activacin de A%t induce la fosforilacin de <ad promueve su interaccin con la protena c!aperona /9)8)8, la cual secuestra <ad en el citoplasma e in!i#e la actividad proapopttica de la misma. >e !a demostrado que A%t afecta, directa o indirectamente tres familias de transcriptoresI 6or%!ead, la protena de union de respuesta cA*: 4C'E<7 36)%<, las cuales estn involucradas en la regulacin de la supervivencia de las clulas, dnde la fosforilacin de los miem#ros de la familia 6or%!ead por accin de la A%t negativamente regula las se.ales promotoras de muerte, la fosforliacin de C'E< la quinasa H%< 4H??7 estimulan la supervivencia. Est claro que A%t es una potente quinasa que mantiene a las neuronas vivas de distintas maneras, que otros o#+etivos afectados por A%t sern sin dudas identificados.

4uta de la #uinasa de las protenas activadas por mitogenos (-A1). >in em#argo !a ms so#re las neurotrofinas que slo la activacin de :H487? A%tI ellas tam#in simulan el ancla+e de la protena adaptadore >!c a los receptores Er% activados. Esto desencadena la activacin de la peque.a protena de unin 5E: 'as la cascada descendiente de quinasa *A:, la cual inclu e la su#secuente fosforilacion activacin secuencial de las quinasas 'af, quinasas *A:Aquinasas E'? 4*E?7 protenas quinasas reguladas por se.ales e-tracelulares 4E'?7 46ig. =7. El efecto del camino de la quinasa *A: so#re la supervivencia es mediadaal menos parcialmente por la activacin de los miem#ros de la familia quinasa pp0D ri#osomal >F 4'>?7. Como A%t, '>? fosforila <ad, am#as quinasas pueden actuarde forma snergtica en la in!i#icin de la actividad pro)apottica de <ad. El efecto de '>? en la supervivencia neuronal no se encuentra limitada a la fosforilacin de <ad, las '>? tam#in son potentes activadores del factor de transcripcin C'E<. Ka que C'E< es conocido como activador de la transcripcin de #cl)=, puede estimular la supervivencia de una clula directamente. Es as que, a pesar de que e-iste una divergencia en las vas de supervivencia en el flu+o descendente de los receptores de neurotrofina, am#as las vas de quinasa :H487?)A%t *A:, convergen en el mismo set de protenas, <ad C'E<, para in!i#ir la apoptosis programada. Es importante !acer notar que las neurotrofinas no son el nico factor que promueve la supervivencia neuronalI la estimulacin elctrica despolari"acin en concentraciones elevadas de ?C/ !an sido por muc!o tiempo conocidas como in!i#idoras de la muerte celular neuronal. Estudios recientes indican que la despolari"aciond e la mem#rana tam#in activa las vas de supervivencia neuronales, si es que estas son o no las mismas que aquellas activadas por las neurotrofinas es un asunto an por resolver.

%igura &I Estructuras proteicas anormales la patognesis de enfermedades neurodegenerativas. (as protenas normales pueden volverse patognicas cuando estn su+etas a mutaciones genticas o factores am#ientales que promueven la formacin de estructuras anormales, en su#po#laciones neuronales especficas.

-uriendo sin neurotrofinas. Aunque est claro que las neurotrofinas la despolari"acin de la mem#rana activan las vas de transduccin de se.ales que suprimen la apoptosis, est menos claro qu desencadena la activacin de la apoptosis en ausencia de se.ales de supervivencia. Es posi#le que las neurotrofinas simplemente supriman un programa de apoptosis por defecto. >in em#argo, una serie de procesos tiene que suceder antes de que las neuronas simpticas inmaduras cultivadas estn comprometidas a morir. (a eliminacin de 356 resulta en una disminucin de la quinasa *A: actividades :H487?, seguida por una serie de cam#io meta#licos tempranos, inclu endo la produccin incrementada de especies reactivas de o-geno, disminucin de la captacin de glucosa, disminucin de sntesis de protena '3A. En algunas clulas, la eliminacin de 356 resulta en un lento sostenido aumento en c)2un quinasa amino)terminal 423?7 en actividades de quinasa p81 *A:, en otras clulas, c) 2un, uno de los o#+etivos con flu+o descendiente de 23?, es inducido fosforilado. (a activacin del mismo 23? podra ser necesaria, pero no suficiente, para inducir la apoptosis neuronal. :arad+icamente, aunque la sntesis de protena '3A son significativamente reducidas en las etapas tempranas de muerte celular de neuronas simpticas, la muerte no puede ocurrir en la presencia de in!i#idores de sntesis de protena '3A, indicando que la sntesis continuada de ciertas molculas pro)apoptticas es requerida. En vista de esto, es interesante notar que ;:@

4tam#in conocido como &r%7, un miem#ro pro)apopttico de la familia <cl)= de Ldominio de slo <&)8M, es inducido en neuronas simpticas privadas de 356. Gui"s es la sntesis de protenas relacionadas a ;:@ la que es vital para la e+ecucin del programa de muerte celular. ;:@ podra ser requerido para a udar a <a- a moverse desde su u#icacin en el citosol de la mitocondria, despus del cual <a- puede inducir la li#eracin de citocromo c. Como en otros tipos de clulas, la li#eracin del citocromo c desde la mitocondria induce la activacin de las caspasas en las neuronas simpticas. (a adicin de un in!i#idor pan)caspasa, pero no 356, rescata neuronas simpticas incluso despus de da.o mitocondrial la li#eracin de citocromo c. As, estas neuronas no estn determinadas a morir !asta que las capasas estn completamente activadas. Esto indica que el punto sin regreso est en, o en flu+o descendente de, la activacin de la caspasa, sugiere que la in!i#icin de la actividad caspasa podra ser suficiente para #loquear la muerte celular neuronal #a+o ciertas condiciones patolgicas. Neurotrofinas/ 56na espada de doble filo7 (a !iptesis neurotrofina predice la funcin de las neurotrofinas como se.ales de supervivencia para suprimir el programa de muerte. Aun as, la interaccin de neutrofinas con el receptor pN@3E' de neurotrofinas, puede inducir la muerte celular #a+o ciertas condiciones, sugiriendo que las nerotrofinas podran actuar como ligas de la muerte en una forma dependiente del conte-to celular. El receptor de neurotrofina pN@3E' es un miem#ro de la super familia receptora E36, que puede enla"ar todas las neurotrofinas. >u dominio intracelular contiene una regin que soporta similitud con el Ldominio de la muerteM, la cual media interacciones protena)protena est presente en otros miem#ros de la familia E36. :N@3E' fue originalmente pensado para cooperar con Er%s para modular la respuesta a las neurotrofinas. Aun as, pN@3E' podra tener un rol adicional en orquestar la muerte celular neuronal. <arde colegas encontraron que la aplicacin de anticuerpos que #loquean la atadura de 356 a pN@3E' in!i#i la muerte de las clulas ganglionares de la retina de pollo que e-presa pN@3E', pero no Er%s, indicando que la interaccin celular de 356 con pN@3E' promueve la muerte celular en este sistema. (a actividad de induccin de muerte de varias neurotrofinas !a sido a!ora documentada por diferentes tipos de clulas neuronales. (a muerte celular dependiente de pN@3E' parece ser in!i#ida por se.ali"acin Er%s. En vista de estos roles opuestos de neurotrofinas, ellos podran ser ms apropiadamente referidos como LneuromoduladoresM, que funcionan para a+ustar nmero de clulas neuronales regular diferenciacin Apoptosis patol"gica en el cerebro adulto (a apoptosis fisiolgica en el cere#ro en desarrollo la apoptosis patolgica en el cere#ro adulto comparten mecanismos moleculares similares en la fase efectora. :ero !a diferencias claves en los mecanismos mediante los cuales la apoptosis es gatillada. >i #ien es cierto la disminucin de factor trofico tiene un rol prominente en la apoptosis durante el desarrollo, !a poca evidencia que implique la disminucin de factor trfico como el mecanismo patognico principal en los desordenes neurodegenerativos en adultos. *s #ien, los residuos t-icos derivados de accidentes #ioqumicos o genticos pueden desencadenar enfermedades neurodegenerativas mediante la cooptacin de las vas de se.ali"acin de apoptosis, por e+emplo a travs de la generacin de radicales li#res o la activacin de las caspasas. Bn tema emergente en trastornos neurodegenerativos adultos es la to-icidad de las estructuras o los agregados de protenas anormales, que pueden ser importantes en la patognesis de la enfermedad de Al"!eimer, enfermedad de :ar%inson, enfermedad de &untington la esclerosis lateral amiotrfica 4fig. 87. -uerte celular debido a is#uemia (a muerte celular neuronal inducida por !eridas isqumicas !a sido tradicionalmente caracteri"ada como necrosis, en la cual las clulas sus organelos se !inc!an rompen. >in em#argo, evidencia morfolgica #ioqumica de apoptosis !a sido #ien documentada en modelos animales e-perimentales con !eridas isqumicas cere#rales. (as neuronas apoptticas son ms fciles de detectar poco tiempo despus de la formacin de una !erida isqumica, en la penum#ra, dnde la !erida es menos severa durante la reperfusin. Es posi#le que solo las neuronas que mantienen

un nivel mnimo de actividad meta#olica puedan e-perimentar la apoptosis, lo cual es consistente con su naturale"a de suicidio celular programado. (a mitocondria puede ser importante en la transmisin de se.ales apoptticas durante la isquemia para inducir la activacin de caspasa. &a evidencia contundente de actividad de caspasa)8 en cere#ros isqumicos, lo cual puede ser mediado por caspasa)// Ouna caspasa especficamente inducida por !erids isqumicas. An ms, los in!i#idores de caspasa atenan significativamente las !eridas isqumicas neuronales. A pesar de que !a contundente evidencia para validar la apoptosis en !eridas isqumicas cere#rales, no todas las clulas mueren por apoptosis. Entre las clulas con caractersticas apoptticas tpicas, !a clulas con una clara morfologa !inc!ada caractersticas vacuoladas, por ende, la muerte de un significativo nmero de neuronas en un cere#ro isqumico es pro#a#lemente causada por un mecanismo no mediado por la caspasa. 8abla 1/ %enotipo neuronal de ratones muertos por caspasa 0aspasa 9esarrollo %enotipo apopt"tico neuronal
0aspasa-1 0aspasa0aspasa-& 0aspasa-: 0aspasa-11 0aspasa-1 3ormal 3ormal (etal en el perodo perinatal 4depende de factores genticos7 (etal en perodo em#rionario 4porcenta+e #a+o so#revive a la adulte"7 3ormal 3ormal 'esistente a !eridas cere#rales isqumicas una disminucin en la incidencia severidad de encefalomielitis autoinmune. 3euronas !ipocampales resistentes a la to-icidad del amiloide)P 3o !a apoptosis en clulas progenitoras neruoepiteliales durante el desarrollo. 3o !a apoptosis en clulas progenitoras neruoepiteliales durante el desarrollo. 'esistente a apoptosis inducida por !eridas cere#rales isqumicas. 3euronas corticales son resistentes a la to-icidad del amiloide.#.

4eferencias
01 FF == =8, 00 =D =/

-uerte celular neuronal en la enfermedad de Al*+eimer (a contri#ucin relativa de la apoptosis a la perdida neuronal en la enfermedad de Al"!eimer es difcil de medir de#ido a la naturale"a crnica de la condicin, es as que en cualquier momento solo un nmero limitado de neuronas apoptticas pueden ser detectadas. Algunas neuronas e-!i#en caractersticas morfolgicas de la apoptosis, pero muc!as neuronas en degeneracin no muestran evidencia alguna de apoptosis, sugiriendo que la apoptosis no sea el nico mecanismo de degeneracin en la enfermedad de Al"!eimer. (a causa pro-imal de la neurodegeneracin en la enfermedad de Al"!eimer es un tema activamente de#atido que !a sido enfocado en variadas protenas con implicaciones genticas 4'ecuadro /7. El rol central de la protena amiloide)P es fundamentado por los efectos de mutaciones genticas que causan la enfermedad de Al"!eimer familiares, las que predisponen a la deposicin de amiloide, por la o#servacin de que el amiloide)P puede ser neurot-ico in vitro e in vivo. (a to-icidad de formas estructurales anormales del amiloide)P proveen un tema uniforme con otros desordenes neurodegenerativos relacionados a la edad caracteri"ados por la aparicin de estructuras proteicas patolgicas, como es el caso de la enfermedad de :ar%inson, la enfermedad de &untington, la demencia fronto temporal la esclerosis amitropica lateral 46ig. 87. El mecanismo de la neuroto-icidad del amiloide)P su locus preciso de accin no !an sido determinados, pero !a sido demostrado que el amiloide # puede inducir estrs o-idativo elevar la concentracin intracelular de Ca= 46ig. 97. El amiloide)P puede inducir la apoptosis interactuando con receptores neuronales, inclu endo el receptor para productos finales de glicacin avan"ada 4'A5E7, que puede mediar en la produccin de radicales li#res, el receptor neurotrofino pN@, el cual puede inducir muerte celular neuronal, la protena precursora del amiloide, la cual tam#in puede inducir la muerte celular de neuronas. Estas variadas interacciones entre el amiloide)P receptores pueden activar variadas vas para la muerte celular 46ig. 97. :or e+emplo, el amiloide)P puede activar un set de genes tempranos inmediatos similares a aquellos inducidos por la disminucin de factor trfico, puede activar caspasas. An ms, las neuronas deficientes en caspasa)= caspasa)/= tiene una vulnera#ilidad disminuida a la to-icidad del amiloide)P,

sugiriendo que la in!i#icin selectiva de caspasas puede ser un acercamiento teraputico potencial en el tratamiento de la enfermedad de Al"!eimer.
%igura ;I $as celulares de la neuroto-icidad del amiloide)P en la enfermedad de Al"!eimer. 6ormas agregadas del amiloide)P interactan con variadas superficies neuronales receptoras con la microglia, gatillando cascadas transductoras de se.ales que resultan en la activacin de la caspasa, la generacin de radicales li#res un influ+o de Ca=. Bna concentracin intracelular elevada de Ca= podra activar proteasas calpainas las cuales, a su ve" pueden activar caspasas la protena quinasa tau Cd%@.

(a identificacin de mutaciones en los genes presenilinos como una de las ma ores causas de la enfermedad de Al"!eimer familiar temprana !a provisto un nuevo enfoque en el entendimiento del mecanismo de la muerte celular neuronal en la misma. *utaciones de presenilina aumentan la produccin de una forma residual de amiloide)P, el principal constitu ente de las placas en el cere#ro de la enfermedad de Al"!eimer. $arios estudios recientes sugieren que las presenilinas podran ser l)secretasas, proteasas que participan en la generacin de amiloide)P, aunque esto an no se !a esta#lecido de manera definitiva. (as mutaciones de la presenilina tam#in pueden incrementar la vulnera#ilidad neuronal a la apoptosis. >in em#argo sigue sin ser determinado si estos mecanismos contri#u en o no a la muerte celular neuronal en la enfermedad de Al"!eimer. (a activacin de las clulas microgliales es una caracterstica prominente de la respuesta inflamatoria en un cere#ro con la enfermedad de Al"!eimer que puede contri#uir a la muerte celular neuronal.(a activacin microglial est asociada a placas amiloides puede ser inducida e-perimentalmente por el amiloide)P. (a activacin microglial inducida por el amiloide)P resulta en la secrecin de E36)a otros factores t-icos que pueden inducir la apoptosis neuronal. *ecanismos microgliales similares !an sido relacionados con otros desordenes neurodegenerativos. :or e+emplo, un pptido fromador de fi#rillas derivado de la protena prion induce apoptosis neuronal a travs de la activacin microglial la generacin de un tipo de o-igeno reactivo. (a activacin microglial tam#in tiene un rol central en la muerte celular de neuronas asociada con infecciones virales del sistema nervioso central. (a microglia los macrfagos son los principales tipos de clulas infectadas por el $H& en el cere#ro, induciendo la apoptosis de neuronas astrocitos en el >H;A. Es as que, la muerte celular neuronal patolgica puede ser una consecuencia directa de la to-icidad del amiloide)P, o una consecuencia indirecta de una comple+a interaccin entre neuronas, microglia factores t-icos.

%igura <I *utaciones >J;)/ activan vas de muerte celular en esclerosis amitrpica lateral familiar. (as mutaciones >J;)/ pueden activar las caspasa)/ caspasa)8, pueden incrementar la generacin de radicales li#res, llevando a una apoptosis neuro motora. (a activacin de la caspasa) /lleva a la produccin de interlu%ina)/, la cual puede producir una respuesta inflamatoria microglial local e incrementar el nmero de neuronas afectadas.

-uerte por repeticiones de poliglutamina e=pandida (as enfermedades neurodegenerativas del adulto causadas por las protenas con tractos de poliglutamina e-pandido se caracteri"an por una prdida selectiva de su#po#laciones neuronales especficas. (as protenas con repeticiones de poliglutamina pueden agregar in vitro formar fi#rillas de tipo amiloide similares a las fi#rillas de amiloide)P en la enfermedad de Al"!eimer. Eales agregados tam#in se o#servan en los cere#ros de pacientes con la enfermedad de &untington, ata-ia espinocere#elosa tipos / 8, la atrofia dentato)ru#ro)palido)luisiana 4;':(A7. ;erivados u#iquitinada de las protenas mutantes se pueden encontrar en grandes inclusiones intranucleares, en la enfermedad de &untington el nmero de inclusiones se correlaciona con la longitud del tracto de poliglutamina. (a remocin inefica" de protenas de e-pansin de poliglutamina por la va de la u#iquitina)proteasoma podra contri#uir a la formacin de inclusiones intranucleares. (os ratones transgnicos que e-presan mutantes ampliados de la !untingtina ata-ina / que contienen poliglutaminas tam#in desarrollan inclusiones que aparecen a apro-imadamente el mismo tiempo que los dficits neurolgicos. A pesar de la correlacin de la aparicin de inclusiones neuronales con enfermedad en pacientes modelos de ratones transgnicos, varios estudios !an cuestionado su significado patolgico. :or otra parte, la in!i#icin de la formacin de inclusiones puede aumentar la apoptosis neuronal in vitro, lo que indica que la formacin de inclusiones puede ser neuroprotectora. :ero e-iste evidencia de que la e-presin de los tractos de poliglutamina e-pandida puede resultar en la formacin de peque.os agregados que inducen la apoptosis. (a apoptosis est mediada por el reclutamiento de la protena adaptadora 6A;; la caspasa)1, lo que resulta en la activacin de una cascada de caspasas. Adems, las caspasas pueden tener un papel en la generacin de fragmentos altamente t-icos de protenas con tractos de poliglutamina e-pandido. El apo o a esta idea proviene de estudios en un modelo transgnico de la enfermedad de &untington. Bn mutante dominante negativo de la caspasa)/, o la administracin intracere#roventricular de un in!i#idor de caspasa de amplio espectro, retrasa el inicio la progresin de la patologa previene la aparicin de un producto de escisin de la !untingtina. Bn tema central es la contri#ucin relativa de la apoptosis neuronal a los dficits neurolgicos en enfermedades de e-pansin de poliglutamina otras enfermedades neurodegenerativas relacionadas con la edad. (os pacientes con enfermedad en estadio temprano de &untington desarrollan dficits motores caractersticos sin evidencia de atrofia estriatal, la atrofia estriatal se !ace ms frecuente en las etapas posteriores de la enfermedad. ;e manera similar, un modelo de ratn transgnico de la enfermedad de &untington e-!i#e sntomas motores en ausencia de atrofia estriatal o apoptosis neuronal. :or otro lado, en un ratn

transgnico con !untingtina condicional, las inclusiones intranucleares dficits neurolgicos pueden ser revertidos desactivando la e-presin de los genes mutantes. :or lo tanto, la disfuncin neuronal, en lugar de la muerte celular, podra ser responsa#le de los dficits neurolgicos tempranos.
4ecuadro 1 -oleculas implicadas en la patog!nesis de la enfermedad de Al*+eimer B-amiloide protena

1. . &. ;.
8au

.ste es el principal componente de las placas seniles y los dep"sitos de amiloide cerebrovascular. 8odas las mutaciones gen!ticas conocidas #ue causan la enfermedad de Al*+eimer predisponen a la deposici"n de amiloide. Los individuos con trisoma 1$ #ue llevan una copia adicional del gen de la protena precursora de amiloide$ desarrollan tempranamente la enfermedad de Al*+eimer. Amiloide-> puede ser neurot"=ico. .l tau +iperfosforilada es el componente principal de los ovillos neurofibrilares. Las mutaciones en tau producen demencia frontotemporal con par(insonismo asociado con el cromosoma 1? (%891-1?)$ lo #ue sugiere #ue las formas aberrantes de tau pueden dar lugar a la neurodegeneraci"n. Sin embargo$ las mutaciones de tau no se +an encontrado en los casos de la enfermedad de Al*+eimer. .l n,mero y la distribuci"n de los ovillos neurofibrilares est@n correlacionadas con el grado de demencia en la enfermedad de Al*+eimer.

1. . &.

;. La activaci"n de la protena #uinasa cd(< podra contribuir a la fosforilaci"n de tau y la apoptosis neuronal. 1resenilinas 1. . &. ;. 1. . &.
Las mutaciones en presenilina 1 y temprana.

son una causa importante de la enfermedad de Al*+eimer familiar de aparici"n

-utaciones de presenilina aumentan la producci"n de la forma de residuo de amiloide->$ #ue tiene una alta propensi"n a la formaci"n de fibrillas de amiloide. 1resenilinas son necesarios para la producci"n de b-amiloide y podra ser g-secretasa.

-utaciones de presenilina aumentan la vulnerabilidad neuronal a la apoptosis. La apolipoprotena . La +erencia del alelo e; es el factor de riesgo gen!tico conocido m@s com,n para la enfermedad de Al*+eimer despu!s de los AB a)os. .l alelo e; promueve la polimeri*aci"n de amiloide-> en fibrillas formadoras de placa. .l alelo e; podra da)ar la regeneraci"n neuronal o promover el estr!s o=idativo.

Las mutaciones en la super"=ido dismutasa y la esclerosis lateral amiotr"fica (a esclerosis lateral amiotrfica es enfermedad motora progresiva, caracteri"ada por la degeneracin de neuronas motoras en la mdula espinal el cere#ro, llevando a la parlisis. Bn salto importante en la comprensin del mecanismo de la enfermedad vino de la identificacin de mutaciones en el gen que codifica la super-ido dismutasa 4>J;)/7 en A(> familiar. (os ratones transgnicos que e-presan formas mutantes de >J;)/ muestran progresiva degeneracin de neuronas motoras, que es similar en muc!os aspectos a la de la enfermedad !umana. En contraste, los ratones deficientes o en so#ree-presin de >J;)/ de tipo salva+e, no desarrollan la enfermedad de la neurona motora. Estos !alla"gos sugieren que el >J;)/ mutante es de alguna forma t-ico para las neuronas. Aunque el mecanismo de to-icidad no est esta#lecido claramente todava, se !a mostrado que el >J;)/ mutante puede formar agregados intraneuronales e inducir estrs o-idativo, lo cual es una reminiscencia de los mecanismos patognicos de la enfermedad de Al"!eimer las enfermedades de repeticin de poliglutamina. Bn papel para la apoptosis en E(A 4A(>7 familiar se sugiere por la actividad proapopttica de la >J;)/ mutante en lneas de clulas neuronales cultivadas, el efecto neuroprotector de so#re e-presar <cl)= en ratones transgnicos con >J;)/ mutante. Es ms, caspasa)/ caspasa)8 activadas, pueden ser detectadas en mdulas espinales de pacientes E(A 4A(>7 ratones transgnicos con >J;)/ mutante. Es importante destacar que la in!i#icin de la actividad caspasa) /, retrasa la progresin de la enfermedad en ratones transgnicos con >J;)/. Caspasa)/ podra predisponer a muerte celular neuronal de = formasI incrementando la produccin de la citoquina pro)inflamatoria interleucina, activando directamente caspasa)8 46ig @7. Eoda la evidencia sugiere que la activacin de la caspasa podra ser un componente esencial para la patologa de E(A 4A(>7, ofrece la posi#ilidad que un tratamiento temprano con in!i#idores enfocados a caspasas especficas podran detener la apoptosis de las neuronas motoras.

0onclusi"n ;urante la dcada pasada !a !a#ido ma ores avances en nuestro entendimiento de los mecanismos fundamentales en muerte celular neuronal. A!ora sa#emos que los componentes claves del programa de apoptosis en neuronas, as como la de otros tipos de clulas, son Apaf)/ protenas en <cl)= familias caspasas. (a regulacin de apoptosis, a travs de interaccin de miem#ros de la familia <cl)= cascadas de caspasas, tiene un rol ma or en esculpir el cere#ro en desarrollo. A!ora estamos empe"ando a entender cmo las neurotrofinas suprimen la apoptosis mediante la regulacin de cascadas crticas de la protena quinasa, como las vas :H487?)A%t *A:. Adems, no slo las caspasas son importantes en regular la muerte celular neuronal durante el desarrollo, ellas podran mediar tam#in la muerte celular en enfermedades neurodegenerativas !umanas. Estas interesantes novedades sugieren que la in!i#icin dirigida de la apoptosis podra ser efectiva en el tratamiento de varias enfermedades neurodegenerativas. 3aturalmente, muc!as preguntas fundamentales permanecen para ser contestadas. Eodava no entendemos e-actamente cmo un estmulo t-ico, sea este privacin del factor trfico, lesin isqumica, pptido Amiloide)Q, !untingtina mutante o >J; mutante, desencadena la activacin del programa de apoptosis en neuronas. Este proceso de transduccin de la se.al podra ser #reve, como en la privacin de factor trfico la lesin isqumica, o prolongado, como en las neuronas que e-presan protenas mutantes que causan enfermedades. >era importante definir el punto molecular sin regreso, cuando las neuronas se vuelven irreversi#lemente condenadas a morir. J#viamente, la disfuncin neuronal podra ser iniciada antes de la degeneracin neuronal, desde un punto de vista teraputico una pregunta central es si acaso la in!i#icin de la muerte celular neuronal resultara en neuronas saluda#les normalmente funcionales. (as respuestas a estas preguntas el dise.o de enfoques teraputicos racionales requerirn un entendimiento detallado de cmo las neuronas so#reviven mueren en el cere#ro.