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Universidad Catlica del Norte Facultad de Ciencias Departamento de Ciencias Farmacuticas

Informe 1 laboratorio de Bioqumica Tcnica Espectrofotometra


Jaime Varas Montero
JEVM051192@GMAIL.COM 02 de Septiembre del 2013

1. INTRODUCCIN La espectrofotometra (medicin de la luz) es un mtodo instrumental analtico que nos permite cuantificar y caracterizar un compuesto en solucin. Bsicamente se est haciendo uso de las propiedades de los tomos y molculas para absorber o emitir la energa en una de las muchas reas del espectro electromagntico total. En el presente laboratorio se llev acabo la tcnica de espectrofotometra en la cual se tiene que aprender a utilizar correctamente, ocupando adecuadamente las reglas de esta misma, para que pueda ser ocupada en futuros trabajos de laboratorio. Para este fin se llevaron a cabo deferentes actividades de laboratorio. 2. Preguntas de investigacin Se podr efectuar este laboratorio de manera correcta? Los datos en la teora visto en la gua sern los mismo obtenidos durante en laboratorio?

3.1. Objetivo general Aprender a identificar y utilizar los instrumentos para realizar una tcnica de espectrofotometra correctamente. Formular una conclusin en base a la experiencia realizada.

3.2. Objetivos especficos Actividad N 1: A) Obtener en espectro de absorcin de un pigmento previamente entregado (Sn1). B) Medir en un espectrofotmetro la absorbancia a distintas longitudes de ondas de la misma solucin.

Actividad N2: A) Preparar una solucin seriada utilizando una de las soluciones previamente entregadas (Sn2). B) Medir la absorvancia de cada uno de los tubos de la serie. C) Obtener la ecuacin de la recta de calibracin. 4. MATERIALES Y MTODOS Para la prctica de este laboratorio se ocuparon los siguientes materiales y reactivos: 2 Pipetas graduada de 10 mL 2 Pipetas graduada de 5 mL 4 Pipeta graduada de 1 o 2 mL 1 Vaso de precipitado de vidrio 50-100 ml 18 Tubos de ensayo vacos 1 Tubo de ensayo con solucin (Sn1) 1 Tubo de ensayo con solucin (Sn2) 1 Piseta de agua destilada 1 Gradilla para tubos de ensayo Papel absorbente Espectrofotmetro Solucin de colorante natural color azul Papel milimetrado Para desarrollar la prctica de laboratorio se realizaron las siguientes actividades: Actividad N 1 Se procedi a trabajar en el mesn de laboratorio. Se coloc la solucin Sn1 en el espectrofotmetro, buscando la longitud de onda() donde se encuentra el mximo de absorbancia (Abs), Una vez encontrada la donde est el mximo de Abs, se continuo con medir la absorvancia en distintas movindonos en rango de 10 en 10 nm, comenzando por donde se encuentra la mxima Abs Los resultado fueron anotados en una tabla y finalmente graficados en un papel milimetrado(anexo 1)

Actividad N2 Se procedi a trabajar en el mesn de laboratorio Se prepararon dos series de la A F donde en el primero tubo de ensayo se le cocaban 3 ml de la solucin Sn2 y 3 ml de agua destilada, teniendo un volumen final de 6 ml Se procedi a seguir la serie con 3 ml del tubo de ensayo anteriores (De A hacia B y de B hacia C de esa manera sucesivamente hasta F) y 3 ml de agua destilada Se midieron las dos serie en el espectrmetro con la donde se obtuvo la mxima Abs obtenidos en la actividad N1 Se anotaron los datos respectivamente en una tabla y luego se graficaron en un papel milimetrado (anexo 2) Finalmente se calcul la curva de calibracin

5. RESULTADOS Y DISCUSIN No se tuvieron discusiones mientras se realizaban las actividades, tampoco durante la realizacin del informe Los resultados fueron los siguientes: Actividad N1: Mediante el espectrofotmetro se pudo medir la donde se encontraba la mxima absorvancia, esta se encontr entre los 600-700 nm Luego se midieron la absorvancia en distintas partiendo de 600nm y moviendo de rango de 10 en 10 nm hasta llegar a 700nm. Los datos obtenidos se anotaron en la siguiente tabla

1 2 3 4 5 6 7 9 10 600 610 620 630 640 650 660 670 680

Abs 0,527 0,756 1,079 1,208 0,936 0,493 0,194 0,050 0

Tabla N1 Como se puede observar se encontr que el mximo de Abs se encuentra en una de 630 nm Ya que a partir de una de 680 se obtuvo un Abs de 0 no se encontr necesario seguir midiendo Actividad N2: Se entreg una solucin Sn2 con una coloracin azul, donde su concentracin es de 1 Mg/ml Luego se tuvo que preparar dos soluciones seriadas de 6 tubos de ensayo cada uno estos fueron en marcado con letras de la A hasta la F y de A hasta F Se le sustrajo 3 ml a la solucin Sn2 con una pipeta de 5ml para ser agregados en A y luego se llenan con agua destilada hasta llegar a un volumen de 6ml. Se repiti este proceso hasta llegar a F. Se repiti el mismo proceso para A hasta F A continuacin se midieron las dos series en un espectrofotmetro marcando una de 630

(Dato obtenido de la actividad N1) Los resultados se anotaron en la siguiente tabla


Y finalmente se calcul la ecuacin de la recta de calibracin que viene en el anexo 2

Concentracin g/ml

500 250 125 62,5 31,25 15,625


Tabla 2.

Tubo A B C D E F

Abs 2,745 2,432 1,393 0,787 0,440 0,231

Tubo A' B' C' D' E' F'

Abs 2,758 2,521 1,452 0,824 0,463 0,232

2,7515 2,4765 1,4225 0,8055 0,4515 0,232

Abs es el promedio de la serie AF y la seria AF

6. CONCLUSIONES Como conclusin se obtuvo que fue una prctica de laboratorio muy exitosa logrando aprender a ocupar y manejar la tcnica de espectrofotometra adecuadamente. Respecto a la conclusin obtenida durante las actividades podemos observar que: La tabla N1 muestra que la donde mayor absorbancia hay del color azul es en 630 mn y en la teora se vio que el color azul tiene una entre 450 y 500 nm En la tabla N2 se puede observar que hay una diferencia entre la absorbancia de los AF y los AF esto se puede deber a un erro durante la fase de seriacin de la solucin, no se pudo encontrar erro.

7. REFERENCIAS Ninguna