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Sistemas de Adhesin al porta: El porta debe estar bien desengrasado, para ello despus de lavarlo con agua y jabn

y enjuagarlo con agua destilada se pueden dejar en una solucin de alcohol clorhdrico formado por 1 mL de HCl en 1000 mL de alcohol etlico de 96 o bien dejarlo en alcohol ter a partes iguales durante un da. Se deja secar y se coge por los bordes (Se deja secar inclinados). Para los procedimientos ms rutinarios o procedimientos ms habituales, la adhesin del tejidos al porta queda garantizada con un desengrasado meticuloso. Para tcnicas histoqumicas inmunolgicas o de biologa molecular se necesita impregnar los portas con sustancias adhesivas que eviten que se desprendan los cortes, para ello se utilizan sustancias naturales como la albmina de huevo o gelatina o bien sistemas comerciales formados por resinas y compuestos del tipo poli - L - lisina que son mas caros pero proporcionan mayor adhesividad. Albmina glicerinada de Mayer: Los reactivos son:

Clara de huevo recin extrado ------------------------------------------50 mL Glicerol o glicerina ------------------------------------------------------- 50 mL Salicilato sdico o fenol o timol una gota o --------------------------- 1gr. Se mide la clara y se bate a punto de nieve se le aade la misma cantidad de glicerina, se mezcla se agita y se filtra y se le pone un antibacteriano que puede ser salicilato sdico, fenol o timol. Del filtrado se impregna cada parte con una pelcula y se deja secar el aire. Posteriormente, durante el desparafinado se van a coagular la albmina y se aumenta la adhesin al porta. Gelatina: se hace a una concentracin al 5%, se disuelve en agua destilada y se puede disolver primero en agua caliente sin que llegue a hervir porque perdera sus propiedades de cohesin, cuando est a temperatura ambiente se aade el fenol (antibacteriano) del preparado anterior se aade 3 o 4 cucharaditas por litro de agua al bao de flotacin. En otros sitios aaden directamente una cucharada de gelatina en polvo al bao para tcnicas de enzimologa o de inmunohistoqumica (ihq) no podemos usar protenas animales ya que pueden producirse reacciones cruzadas. Resinas: son sustancias de alto peso molecular derivadas del fenol y son el sistema que proporciona mayor adhesin, habitualmente se utiliza una solucin de resina en acetona en proporcin 1:10 antes de su uso. Tcnica de corte en material congelado: -Tcnica de corte en el criostato: por las especiales caractersticas de este instrumento, es un microtomo minot o de rotacin, situado en el interior de una cmara congeladora, es posible conseguir secciones de hasta 2 micras. -Congelacin del material: para la realizacin de tcnicas histoenzimticas o inmunoqumicas es imprescindible que el tejido no haya sido fijado y que la congelacin, no se haya realizado lentamente en la cmara fra del criostato, debido a la formacin de cristales intratisulares de hielo que esto provoca. Si el criostato dispone de un sistema de congelacin ultrarrpido a 50C con isopentano se empleara tambin isopentano enfriado en nitrgeno lquido, con ello se consigue que el tejido est suficientemente congelado cuando se coloque en la cmara de corte del criotomo incluso puede ser necesario esperar algn tiempo hasta que se alcance la temperatura idnea para el corte. La realizacin de los cortes se facilita antes de ser congelado, el tejido se coloca dentro de una gota de medio sinttico de OCT de esta forma se provoca la inhibicin del tejido en el medio, adems se favorece la fijacin al portabloques del criostato.

Hidratacin: Con ella conseguimos hidratar nuestros cortes para ellos e pasara por una batera de alcoholes con concentracin decreciente se puede hacer de diversas maneras. -1 forma: Con 2 cubetas de alcohol absoluto. Una cubeta de 96 y otra de agua. Se hacen pases rpidos en cada una de ellas. -2 forma: Cubetas de 100, 2 de 96 y 1 de 80. Despus de esta hidratacin hay que colorear. Siempre acaba en agua. Y segn la tcnica, despus de colorear habr que deshidratar aclarar y montar.
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8.- Problemas en la interpretacin de los cortes de tejido: artefactos. El vocablo artefacto significa producto artificial y denomina "los fenmenos en el preparado no existentes en el tejido, que han sido creados artificialmente durante el procesamiento". Los ms frecuentes son: 1) rotura del tejido. Consecuencia de una inadecuada obtencin del material biolgico (roturas, desgarros, compresiones, etc.) 2) fijacin defectuosa. Si no hay una buena fijacin la preservacin estructural no es la ms adecuada y consecuentemente la calidad de las secciones no es satisfactoria. 3) retraccin. Es el ms frecuente, y puede deberse por ejemplo a la fijacin con alcohol u otros medios deshidratantes (aunque a veces estos agentes sean necesarios) o por haber realizado una deshidratacin demasiado rpida. La retraccin se presenta en el tejido como grietas u orificios sin estructura biolgica alguna ("agujeros"). 4) cuchilla del microtomo estropeada. Las imperfecciones o melladuras en la cuchilla del microtomo (o ultramicrotomo) producen un defecto en el corte que se observa como una lnea recta a travs de las estructuras biolgicas, donde el tejido est desgarrado. 5) variaciones en el espesor del corte. Suelen ser consecuencia de un mal ajuste del microtomo, de la cuchilla (algn tornillo mal apretado, etc.) o de un mal encaje del bloque en su mordaza. Se aprecia como una imagen en persiana. 6) pliegues o arrugas. Los pliegues o arrugas en las secciones pueden producirse al cortar las secciones o al colocarlas extendidas sobre el portaobjetos (o sobre la rejilla). 7) precipitado de colorantes. A veces se observan sobre el corte histolgico cristales coloreados que corresponden a colorantes que han precipitado, o que no han sido "suficientemente lavados".