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FUNGOSIS DE LAS ABEJAS (Ascosphaera apis y Aspergilus flavus)MVZ Adriana Correa Bnitez

I. INTRODUCCION Los hongos son vegetales carentes de clorofila, la mayora son saprofitos, es decir, que viven sobre materia orgnica muerta. Solo algunos son patgenos parsitos estrictos que se alimentan a expensas de un organismo vivo y pueden producir enfermedades que se conocen como micosis. Varias decenas de hongos microscpicos pueden desarrollarse como saprofitos de la colmena sin provocar daos econmicamente medibles, solo Ascosphaera alvei, que puede ocasionar prdidas en las reservas de polen en primaveras hmedas y frescas. En lo que respecta a la micosis, se conocen dos que son nocivas para la cra, la Ascosferosis y la Aspergilosis.

II. DESARROLLO ASCOSPHEROSIS (Ascosphaera apis) Comnmente son saprfitos de colmenas y abejas. La cra de piedra esta considerada de menor importancia en la produccin apcola. Sin embargo la incidencia de Ascosferosis a aumentado en los ltimos aos y puede causar mayores problemas econmicos si continua. La Ascosferosis es una enfermedad infectocontagiosa de origen fungal, afecta nicamente a las cras de abejas meliferas y de algunas especies de abejas silvestres como las del gnero Megachile. Afecta a las tres castas de abejas meliferas, siendo mas recurrente en la cra de znganos. Se presenta con ms frecuencia durante las lluvias y poca de fro. Esta enfermedad es conocida en todo el mundo con diferentes sinonimias, entre las que tenemos: cra de cal, enfermedad de tiza, cra de yeso, cra yesificada, cra encalada, cra calcificada, cra de tiza, cra de gis, cra calcrea. La Ascosferosis ha sido reportada en todos los pases europeos y en otros pases como Nueva Zelandia, Canad, Estados Unidos, Australia, Sudamrica. La mortalidad de la cra generalmente es baja, pero hay ocasiones en que llega a sobrepasar el 30%. Maasen en 1913, public en Alemania la primer observacin de la enfermedad. Esta micosis es causada por Ascosphaera apis, segn Maasen ex Clausen, es un organismo heterotlico que se reproduce solo cuando los nicelios (hifas) de sexos opuestos (designados + y -) entran en contacto entre si, lo que da lugar a la formacin de esporas de color obscuro siendo la forma contaminante del hongo, desarrollando los micelios o hifas que son la forma de crecimiento del hongo caracterizados por ser de color blanco. Existen dos variedades de Ascosphaera apis que no pueden procrear entre si, la variedad mayor con esporas de 3-4 micras de dimetro y la variedad menor con esporas que miden de 1-2 micras de dimetro. Los esporas se agrupan en pelotas de esporas que miden de 9-19 micras de dimetro, estas pelotitas a su vez se encuentran englobadas en un quiste que tiene un dimetro de entre 47-140 micras. La ms comn de las variedades es la menor. La larva enferma puede momificarse, las momias son de color blanco debido a los micelios del hongo. Los cuerpos fructferos que se forman en la momia dan un aspecto de color gris obscuro a negro, la enfermedad es usualmente transitoria y no es considerada como seria, aunque las infecciones endmicas pueden ser persistentes y dainas.

La larva de abeja melifera es ms susceptible a la cra de cal, si ingieren las aperas de Ascosphaera apis cuando ellas tienen 3-4 das de edad, dos das antes de ser selladas sus celdas para la metamorfosis, para la etapa de pupa. Debido al factor de enfriamiento las larvas ms susceptibles se encuentran normalmente en la periferia de la cra, por esta razn alguna vez se crey que solo las larvas de los znganos eran afectadas ya que los daos son mas frecuentes en la periferia del nido de cra. En larvas de 3-4 das de edad, se ha observado un mayor susceptibilidad a enfermarse. Los esporas contenidos en el alimento, llegan al tracto digestivo de la larva o se adhieren a su piel cuando el huevo es colocado por la reina en las celdillas contaminadas, posteriormente con la influencia de los factores predisponentes los micelios del hongo empiezan a crecer a partir del esporo en el intestino de la larva o en su piel. Ya en intestino, atraviesan el lumen intestinal y los tejidos corporales de la cra hasta envolverla completamente como si fueran races en desarrollo. A partir de la piel los micelios tambin envuelven a la larva dndole un aspecto de momia. La cra puede morir en una celdilla abierta o recin operculada; despus de morir se seca y endurece, adquiriendo la consistencia y el color de un pedazo de yeso, stas se llegan a observar en celdillas abiertas y operculadas, en el suelo frente a las piqueras de la colonia enferma (debido a que las obreras limpiadoras las sacan de los paneles). Los micelios del hongo le dan un color blanquecino a la larva; cuando los hongos estn reproducindose las cras se observan duras y de un color verde obscuro debido a los esporas. Cuando la infeccin es severa, si se agita el panal, en ocasiones suena como maraca debido a que las larvas muertas no estn perfectamente bien adheridas a las celdillas y golpean con las paredes. Entonces las esporas germinan en el intestino de las larvas que es anaerbico, Sin embargo, el micelio es aerbico y por lo tanto sobrevive en la larva de 3-4 das mejor que en la cra joven debido a que es privada de oxigeno un tiempo ms corto. Las esporas germinan particularmente en el extremo posterior del intestino. Cuando la larva llega a estar sellada en su celda hacia la etapa de pupa, el micelio rompe el extremo posterior del cuerpo. Al principio las larvas muertas estn cubiertas comn velloso crecimiento de micelios blancos al tamao de la celda. Ms tarde, las larvas muertas se secan hasta endurecerse encogerse y parecer trozos de gis, los que pueden llegar a estar grises o negros, si los cuerpos fructferos se forman. Muchas de las celdas en colonias fuertemente infectadas pueden permanecer selladas y las momias golpearan si el marco es agitado. Sin embargo, los restos de larvas pueden encontrarse en celdas selladas y sin sellar. La mayora de las larvas mueren en el estado vertical. Tambin las abejas adultas generalmente remueven a las momias, las que pueden encontrarse a la entrada de la colonia o en el fondo del piso. La infestacin natural poda ocurrir en dos formas, ya sea por ingestin de esporas en el alimento, o por va de la superficie del cuerpo a partir de esporas que se adhieren a las paredes de la colmena. Furgala y Shimanuki (1975), postularon que una vez que una colonia queda infestada, las esporas pueden permanecer viables en la colmena y finalmente germinar cuando las condiciones sean favorables y la enfermedad podra entonces reaparecer. Pueden sobrevivir en el suelo, encontrar su camino en la cadena alimenticia de las abejas y ser transmitidas a las larvas va alimento de cra contaminado, si bien la habilidad de la infeccin para difundirse es probablemente baja, las esporas son bastante resistentes y permanecen infecciosas por al menos 15 aos (Toumanoff, 1951). Maurizio (1934), report que el organismo invern en abejas y miel. Morse (1976=, encontr Ascosphaera apis en el contenido del buche de miel de obreras adultas de colonias infestadas y mostr que las esporas pasaron de abeja en abeja en el intercambio de alimento. Las reinas pueden transmitir la enfermedad. Los resultados de Mehr, Menapace, Wilson y Sakett (1976), sugieren que la enfermedad puede ser transmitida por el polen. Bailey (1967), encontr que las larvas de abejas son ms susceptibles a la infeccin cuando tienen de tres a cuatro das y son enfriadas brevemente dos das ms tarde, inmediatamente despus de que son selladas las celdas en etapa de pupa. Por lo tanto, es ms probable que las cras sean enfriadas en primavera cuando la Ascosferosis es ms evidente debido a que las colonias estn creciendo rpidamente y la relacin de cra a adulto es mas grande. El postul que el enfriamiento permite que el oxigeno se difunda en el intestino y reactive el micelio, el cual continua creciendo cuando la temperatura de la cra sea restaurada a 35% C

La forma de transmisin es a travs de diferentes factores como son: 1) Elevacin de la humedad dentro del nido, sta provee un ambiente adecuado para su desarrollo. 2) Mala ventilacin, la cual favorece la presencia de humedad. 3) Bajas temperaturas, sta facilita la difusin del oxigeno (medio aerbico), aportando la temperatura ideal (20 a 30 grados centgrados en el nido de cra). 4) Las colonias dbiles son susceptibles de micosis debido a que no pueden mantener la temperatura del nido de cra por arriba de los 30 grados centgrados. Indirectamente, 5) El abuso de antibiticos destruyen la flora microbiana normal del tracto digestivo de las abejas. 6) Los paneles son un foco potencial de infeccin, especialmente los viejos, debido a que son un reservorio importante de esporas. 7) El polen de las flores puede estar contaminado por las heces de abejas (sobre todo de abejas silvestres que funcionan como vectores). 8) Los apicultores tambin pueden contaminar otras colonias con la cua, paneles o miel contaminada (Matus y Sarbak, 1974), el pillaje es un factor de gran importancia en la transmisin de la enfermedad, las larvas la adquieren cuando consumen los esporas con el alimento en presencia de los factores predisponentes. Seal (1957), encontr que una colonia que esta mal ventilada y solo parcialmente ocupada durante el invierno proporciona un excelente lugar de reposo para las esporas de Ascosphaera apis. El sugiere que las razas de abejas con tendencias a un excesivo enjambramiento, son las ms susceptibles a la Ascosferosis, ya que la salida de las abejas enjambradas dejan una cmara de cra demasiado grande para las abejas que permanecen. La Ascosferosis tambin puede ocurrir en las colonias que son primero debilitadas por otra enfermedad. Deans (1940), encontr que en casi cada caso serio de Ascosferosis haba muy pocas abejas pecoreadoras, debido a un ataque de enfermedad por caros. Una vez debilitadas por otras causas, las abejas no parecen limpiar las celdas para mantener la enfermedad controlada o para erradicarla. El sugiere que en casos severos, alguna otra circunstancia ha debilitado primero la poblacin. Maurizio (1934), encontr casos secundarios de sta enfermedad en colmenas afectadas por lo que americana y europea (Guilliam y Taber, 1973), y que puede aparecer conjuntamente con la enfermedad de nosema, septicemias bacterianas y riketsias y en una posible relacin entre la enfermedad de cra ensacada y la Ascosferosis se ha presentado. Dreher (1938), observ que el hongo pareca crecer primero en la cra lastimada o herida. Se ha sugerido que otros insectos, ante todo abejas solitarias o salvajes, juegan una parte en la diseminacin de esta enfermedad (Bailey 1963, Melville y Clout 1956, Dade 1944). La mayora de las especies de abejas en un rea forrajera de las mismas cosechas y de este modo se permita el intercambio de inocul va flores. Por otra parte, recobraron el mismo hongo de los buches melarios de varias especies de abejas. La ascospora se pega a los cuerpos de las abejas conformen pasaban a travs de una celda tras otra al emerger. Por lo tanto, este es un mtodo de transferencia del organismo de una generacin a la siguiente. El diagnstico se puede realizar con base al cuadro clnico, en el laboratorio se hace obteniendo un frotis hmedo que muestre los quistes y los esporas. Se cultiva en Agar-dextrosa de Saboureaud. Realmente no hay tratamiento para este tipo de problemas, durante los ltimos aos se ha probado el uso de Nistatina (micostatin) y Tiabendazol (tiabendazole), a razn de 2g. del producto comercial por tratamiento y colmena, dndose de 3 -4 tratamientos con un intervalo de 8-14 das entre uno y otro. Los tratamientos se proporcionan en jarabe o en pasta. La anfoterimicina B, ha demostrado muy buenos resultados, pero tienen el inconveniente de ser muy cara e inestable. Tambin se han ensayado fumigaciones en los paneles con otros productos. Lo que mejores resultados han dado son: El oxido de etileno, el Thymol al 0.7% (Elbe y Weide, 1961), el formaldehdo al 4%, el paradiclorobenzeno, el amotino cuaternario y el propionato de sodio. No hay quimioterapeticos registrados para ser usados contra la enfermedad de Ascosferosis. Generalmente las perdidas causadas por la cra de cal no se consideran bastante serias para justificar la investigacin de un tratamiento (Bailey 1963), puesto que las abejas adultas generalmente llevan las cras muertas afuera de la colmena. La enfermedad desaparece despus cuando interviene el apicultor.

Dreher (1938), recalca la importancia de quemar las momias y no dejar que estas se acumulen. Adems Deans(1940), afirma que la enfermedad no fu un problema en colonias fuertes. (Betts 1951, Gochnauer, Furgala, Shimanuki 1975, Kenward 1932), sugieren proporcionar colmenas en buen estado y exponer al sol las que estn infestadas o fumigar con humo de azufre o formalina al 40%, otros autores hallaron que la fumigacin con oxido de etilo mata a Ascosphaera apis en colmenas infectadas. Zander, seala la importancia de cubrir las colonias durante el invierno y resguardarlas en un lugar seco. Seal (1975), seala que los problemas serios de la enfermedad pueden prevenirse poniendo cubiertas a las colmenas en invierno. Uno puede adems aumentar la entrada de la colonia para aumentar la ventilacin. Seal (1957), recomienda reforzar las colonias enfermas adicionndole abejas adultas, cra y alimentar con jarabe de azcar. Lunder (1972), sugiere el uso de reinas resistentes y Tabarli (1962), report que la enfermedad decreci en colonias afectadas cuando la miel con un contenido de agua por arriba del 19% es remplazada con mas concentracin de miel conteniendo menos del 17% de agua. La decisin principal cuando se tienen este tipo de enfermedades en un apiario, es el buen manejo del mismo, para esto es necesario: colocar las colmenas en bases de 30cm de altura, por lo menos, facilitar la ventilacin, instalar los apiarios en lugares protegidos de vientos fros, colocar las colmenas inclinadas hacia las piqueras para evitar que el agua entre y se acumule en los pisos en poca de lluvia, proteger las colmenas con techos telescpicos laminados, reforzar o unir las colmenas dbiles, evitar la consanguinidad mediante un programa de mejoramiento gentico y cra de reinas, cambiar a la reina anualmente, cambiar los paneles viejos de las colmenas, evitar el uso desmedido de antibiticos, quemar las momias, tomar medidas que disminuyan el pillaje, evitar portar el hongo en el equipo quemando la cua en el ahumador y evitar el paso indiscriminado de equipo contaminado a colonias sanas. ASPERGILOSIS (Aspergillus flavus). La Aspergilosis es una enfermedad infectocontagiosa de origen fungal, que afecta tanto a las larvas como a las abejas adultas, es causada por el hongo Aspergillus flavus y el Aspergillus fumigatus. A estas micosis se les conoce tambin como cra de piedra o cra ptrea. Ha sido reportada en Europa, Norteamrica, Venezuela y Brasil y Mxico en 1992, pero se siguiere que existe en todo el mundo debido a lo comn que es encontrar hongos del genero Aspergillus en cualquier pas. La Aspergilosis de las abejas meliferas es rara y es considerada de menor importancia para los apicultores. las cras y abejas adultas son susceptibles de ser atacadas por varias especies de hongos pertenecientes al gneros Aspergillus . Aspergillus flavus esta ligado a casos de cra de piedra mas frecuentemente, aunque Aspergillus fumigatus fresenius es ocasionalmente encontrado. La infestacin en larvas es ms fcilmente reconocida que la infeccin en abejas adultas. Las pupas y larvas infectadas son transformadas en momias duras parecidas a piedras. El abdomen de las abejas adultas se momifica. La Aspergilosis fu descubierta por Maassen en 1960 en Alemania. El aisl e identifico Aspergillus flavus de las abejas muertas y notando afeccin en larvas y pupas de abejas transformndolas en duras momias. Toumanoff (1928), afirma que la mortalidad en algunos casos resulta de productos txicos elaborados por los hongos en el intestino de las abejas y liberados por los jugos digestivos del intestino. Burnside (1930), descubri que la accin patgena del hongo es tanto qumica como fsica en este genero. Los tejidos son penetrados por el micelio y son digeridos por enzimas producidas por el hongo. Burnside demostr que una substancia txica en un filtrado de Aspergillus flavus fu la causa del veneno fatal en abejas. Aspergillus flavus ataca mas frecuentemente a las abejas que otros Aspergillus, pero Aspergillus fumigatus fu sumamente patognico.

Dreher (1953), observ una severa epidemia espontanea de cra de piedra en Alemania. El afirma que una recuperacin espontnea fu imposible porque las abejas no podan mover las momias de las celdas puesto que estaban unidas a las paredes de la celda por el micelio. Bailey (1968), afirma que no hay evidencia experimental que demuestre que Aspergillus flavus y Aspergillus fumigatus son patgenos primarios aunque estos organismos se multipliquen en abejas. El Aspergillus flavus y ocasionalmente Aspergillus fumigatus y otras especies de Aspergillus infectan y matan las larvas y abejas meliferas adultas. Estos hongos son comnmente hallados en el suelo. Estos son patgenos para otros insectos y pueden causar enfermedades respiratorias en el hombre y otros animales. Las larvas infectadas se llegan a observar de un color gris-verdoso o amarillo-verdoso, con mayor nfasis en la cabeza, a diferencia de la Ascosferosis, las momias se encuentran adheridas al fondo de las celdillas, por lo que las abejas obreras las extraen en pedazos, los restos que no pueden sacar los cubren con propleo, la cra mas afectada es la que se encuentra en la periferia del panal, que en su mayora es la de zngano. Las larvas operculadas y abiertas, as como pupas son muy afectadas. Las pupas selladas son menos susceptibles. La mayora de las larvas infectadas mueren selladas en la etapa anterior a pupa y las abejas adultas tienen particular susceptibilidad en invierno. Las abejas son atacadas cuando la espora del hongo es ingerida. despus las esporas germinan dentro del canal digestivo, el micelio puede atacar todos los tejidos blandos. Las esporas no obstante pueden germinar en la cutcula y el micelio puede penetrar los tejidos, mientras el hongo invade los tejidos de la larva, el abdomen de la abeja adulta puede endurecerce. En larvas infectadas el hongo se desarrolla rpidamente, permite el paso a la cutcula y forma un caracterstico halo o collar blanco amarillento a la cabeza. Al alcanzar 1-3 das este envuelve totalmente a la larva como una falsa piel, el hongo entonces produce esporas en la parte externa de la larva muerta y el color cambia a verde. La enfermedad causa una momificacin de la cra con consistencia slida y dura, despus de tiempo las esporas del hongo son tantas que llenan las celdas de la colmena que contienen las larvas momificadas. La abeja adulta usualmente deja cra muerta o restos de ellas en el panal y solo las remueven parcialmente. Dreher (1953), hall que las momias no estaban sueltas en las celdas sino adheridas en las paredes por un micelio areo El primer signo notable en Aspergilosis es la inquietud anormal, debilidad y parlisis el abdomen generalmente dilatado, Frecuentemente muestra una momificacin similar en todo el cuerpo, el hongo forma esporas en la abeja adulta especialmente en la transmisin en las partes del trax y abdomen. El mtodo de diseminacin natural no es conocido, pero puede ser por intercambio de equipo por colmenas infectadas. Griaffet y Talicercio (1967) exponen que la diseminacin de esta enfermedad puede estar relacionada con el uso de antibiticos los cuales alteran la flora normal en la abeja, adems de la humedad, la falta de ventilacin, alimento contaminado o mucha agua y factores genticos. En campo, el diagnostico se basa en observacin del cuadro clnico, las momias son obscuras y con consistencia de piedra, adems al agitar el panal no se distingue ningn sonido debido a que los micelios causan adherencia de las larvas a la pared de las celdillas. En el laboratorio se hace identificacin de los condiloforos. No es conocida ninguna medida de control para la Aspergilosis, no obstante en casos severos se recomienda la eliminacin de la colonia. La susceptibilidad a Aspergilosis se incrementa si la temperatura de la colonia baja, si la colonia esta pobremente ventilada o si las abejas fueron confinadas por un largo tiempo. III. CONCLUSIONES

Es importante mencionar que de ninguna de estas dos enfermedades ha sido estudiada en Mxico, por lo cual, no sabemos como se comportan realmente en nuestros apiarios y en que porcentaje realmente afectan la produccin, ya que hasta ahora, no se han realizado investigaciones a fondo de su distribucin, afecciones y posibles controles, se tiene referencia de la asociacin de estas dos enfermedades en pequeos muestreos que se han realizado en los ltimos dos aos, por lo que es importante su diferenciacin y esto nos lleva a una serie de sugerencias: 1.- Capacitar al apicultor en el manejo de colonias enfermas evitando la diseminacin de estas micosis y en el caso de Aspergilosis ensear todas las medidas preventivas necesarias para evitar daos en la salud. 2.- Concientizar al apicultor en el uso de antibiticos para evitar el acceso de hongos a la colonia. 3.- Investigacin en el desarrollo de productos fungicidas capaces de controlar esta enfermedad. Y para poder cubrir estos puntos, es importante llevar a cabo estudios epizotiolgicos de las enfermedades en Mxico y as poder determinar el desarrollo de stas micosis a nivel nacional y poder dar respuesta eficaz a las necesidades de la apicultura nacional.