Centrifugacin: La centrifugacin es un procedimiento fsico que permite la separacin de partculas, bien sean clulas, orgnulos, molculas, etc.

en base a la diferente velocidad a la que sedimentan en un medio acuoso bajo la accin de un campo centrfugo. Este campo se aplica en unos aparatos denominados: centrfugas por medio de la rotacin de una de las piezas, llamada rotor, a gran velocidad dentro de una cmara acorazada en la que puede estar la temperatura controlada (para evitar la degradacin de muestras termosensibles) y en ocasiones bajo vaco (para evitar el calentamiento del rotor por el rozamiento con el aire). Tipos de Centrifugas
Los aparatos en los que se lleva a cabo la centrifugacin son las centrfugas, que son dispositivos mviles con alas en las braqueas. Una centrfuga tiene dos componentes esenciales: rotor (donde se coloca la muestra a centrifugar) y motor. Existen dos tipos de rotores:

Fijos: Los tubos se alojan con un ngulo fijo respecto al eje de giro. Se usan habitualmente para volmenes grandes. El caso extremo es el de los rotores verticales en que los tubos se sitan paralelos al eje de giro. Los rotores de ngulo fijo se emplean principalmente para sedimentar materiales hasta que formen una masa muy compacta en el fondo del tubo (pellet) y despus por decantacin, separar fcilmente el sobrenadante del sedimento. Resultan muy eficaces para este propsito debido a que el material se mueve nicamente un corto trecho hasta la pared del tubo de la centrfuga, aqu se acumula y resbala rpidamente hasta el fondo del tubo.

Basculante: Los tubos se hallan dentro de unos cestillos que cuelgan. Estos cestillos estn unidos al rotor con un eje y cuando la centrfuga gira, se quedan suspendidos en direccin perpendicular a la del rotor. Se usan en la centrifugacin zonal (o en bandas) a travs de gradientes de densidad preformados (normalmente de sacarosa o glicerol) o bien para separar partculas con coeficientes de sedimentacin muy similares. La sacarosa es el material ms comnmente usado debido a su pureza, bajo coste y su no interferencia con la mayora de las mediciones qumicas, pticas o enzimticas. Si la macromolcula en estudio es un enzima o una protena inestable, se usa con frecuencia el glicerol puesto que muchas protenas son ms estables y se desnaturalizan ms difcilmente en presencia de glicerol.

Hay diferentes tipos de centrfugas segn el rango de velocidades de giro:

Analticas: Con las que se obtienen datos moleculares (masa molecular, coeficiente de sedimentacin, etc.). Son muy caras y escasas. Preparativas: Con las que se aslan y purifican las muestras. A. Centrfugas de baja velocidad, de sobremesa o clnicas. De pequeo tamao y normalmente sin refrigeracin. Alcanzan una velocidad mxima de 6.000 rpm. tiles para la separacin de partculas grandes como clulas o precipitados de sales insolubles.

B.

Centrfugas de alta velocidad. Alcanzan velocidades mximas entre 18.000 y 25.000 rpm (pueden generar alrededor de 60.000 g). Son refrigeradas y normalmente tienen sistema de vaco para evitar el calentamiento del rotor a causa del rozamiento con el aire. Este mismo sistema de vaco permite que puedan tener un control ms exacto de la temperatura que aquellas que no hacen vaco. Son tiles en la separacin de fracciones celulares, pero insuficientes para la separacin de ribosomas, virus o macromolculas en general.

C.

Ultracentrfugas. Superan las 50.000 rpm, por lo que tienen sistemas auxiliares de refrigeracin para refrigerar no slo la cmara del rotor donde estn las muestras sino tambin el motor y adems sistemas auxiliares de vaco para alcanzar un altsimo nivel de vaco. Pueden generar ms de 600.000 g, las cuales son suficientes para separar protenas pequeas. Las ultracentrfugas se dividen en: analticas y preparativas. La diferencia ms importante entre ellas es que la analtica cuenta con un sistema ptico para visualizar la sedimentacin de la muestra en tiempo real lo que permite la obtencin de datos precisos de propiedades de sedimentacin (coeficientes de sedimentacin, pesos moleculares) siendo ste el objetivo primordial y no la purificacin de la muestra para un uso posterior, que s sera el objetivo de la preparativa, til para aislar partculas de bajo coeficiente de sedimentacin (microsomas, virus, macromolculas), siendo este tipo el inmensamente mayoritario de ultracentrfuga.