Está en la página 1de 17

AISLAMIENTO BACTERIANO DE MICROCOCCUS ROSEUS A

PARTIR DE UNA MUESTRA DE QUESO COSTEÑO

MARGARITA ROSA NOVOA AVILA

CARMEN LORENA MONTIEL TORRES

GABRIEL ALEJANDRO JAIMES OCHOA

JULIO CESAR GARCIA MARTINEZ

GRUPO: 02
VIDAS

ING. YENIS PASTRANA PUCHE

UNIVERSIDAD DE CÒRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS AGRÌCOLAS
PROGRAMA DE INGENIERÌA DE ALIMENTOS
SEDE- BERASTEGUI
OCTUBRE DE 2009
1.
DEFINICION DEL PROBLEMA

El contraer enfermedades infectivas inducidas (por bacterias), es cada día


un riesgo mayor; esto es una realidad en nuestros días, tanto como en
tiempos remotos, a pesar del desarrollo de numerosos estudios
microbiológicos que buscan caracterizar e identificar la mayor cantidad de
microorganismos existentes en el medio, concentrándose en aquellos que
por sus características se encuentran más cerca del ser humano.
En el desarrollo de esta tarea los científicos han descubierto que en
ocasiones un microorganismo puede no ser patógeno en un inicio, pero si
contener el potencial de causar infecciones lamentables.
Un caso específico es el Micrococcus; uno de los cuatro géneros que
hacen parte de la familia Micrococcaceae. Los Micrococcus están
relacionados genéticamente con las artrobacterias y los actinomicetes;
microorganismos que son patógenos humanos reconocidos, conformados
por varias especies que se encuentran fundamentalmente en el medio
ambiente.
Los miembros del género Micrococcus se encuentran en el ambiente y
como flora transitoria en la piel del hombre. La especie roseus produce
pigmentos carotenoides en frutas tropicales y productos lácteos, agua y
suelo.
Su presencia en la epidermis de algunas frutas (mango, papaya entre
otras) y productos lacteos (queso, mantequilla, yogurt), produce
pigmentaciones y coloraciones anormales claramente indeseables, como
rosa o rojo, para el consumo domestico como industrial y muy
especialmente afecta el comercio de estos alimentos.
En ambos casos la presencia del Micrococcus roseau no es precisamente
la más deseada. Pues en algún punto (donde la temperatura y demás
factores de crecimiento convergen), el potencial microbiológico de un
ambiente dado, puede aumentar a tal punto de sobrepasar nuestras más
exactas consideraciones clínicas sobre aquel u otro microorganismo.
Sea que se halle haciendo parte de nuestra piel o sea que se halle en la
epidermis de algunas frutas el riesgo potencial y la inaceptable presencia
del Micrococcus hace necesario su aislamiento y caracterización en busca
de un manejo preventivo del mismo.
1. JUSTIFICACION DEL PROBLEMA

Los Micrococos y las antiguas especies de Micrococos generalmente no

se identifican a nivel de especies en los laboratorios de microbiología

porque raras veces tienen la importancia microbiológica. Mediante el

empleo de las pruebas como la catalasa, Urea positiva,Vosges poscauer

positiva, pueden emitir informes de “especies de Micrococcus” sin realizar

pruebas adicionales1. Sin embargo, con el reconocimiento de que estos

microorganismos pueden funcionar como patógenos oportunistas, en

ocasiones es necesario identificarlos en la medida en que descubrimos

más de su habitad y condiciones en las que prospera, con el firme

propósito de lograr una caracterización e identificación que muestre

claramente las formas o herramientas para anular cualquier potencial

infectivo del mismo y evitar su indeseada presencia en quesos,

específicamente el queso costeño.

1
3. OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL
Aislar Micrococcus roseus a partir de una muestra de queso costeño.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Definir y caracterizar los materiales y equipos necesarios para el


aislamiento del Micrococus roseus.

• Ejecutar las siembras en un lugar apropiado de los inoculos de las cepas


y supervisar su óptimo crecimiento.

• Reconocer y señalar las características del Micrococus roseus atraves de


la realización de las diferentes pruebas bioquímicas tinción de gram y formas
de crecimiento.
4. MARCO TEORICO
MICROCOCOS ROSEUS

Dominio Bacteria

Clase Actinobocteria
Subclase Actinobacteridae
Orden Actinocetales
Suborden Micrococcenae
Familia Eubacteriacae
Genero Micrococcus
Especie Micrococus roseus

Micrococcus es un género de bacterias del filo Actinobacteria. Se


encuentran en ambientes diversos, incluyendo agua y suelo. Son
bacterias Gram. Positivas con células esféricas de diámetro comprendido
entre 0,5 y 3 micrómetros que típicamente aparecen en tétradas.
Micrococcus tiene una gruesa pared celular que puede abarcar tanto
como el 50% de la materia celular. Su genoma es rico en guanina y
citosina (GC), típicamente en porcentaje del 65 al 75% de contenido GC.
A menudo contienen plásmidos (de tamaño comprendido entre 1 y
100MDa) que proporcionan al organismo características útiles.
Recientemente Agee y Col. Comunicaron dos casos de sepsis
relacionada con catéteres de Hickman, tres casos de peritonitis
relacionados con diálisis peritoneal ambulatoria crónica (DPAC) y un caso
de meningitis asociada con una derivación ventriculoperitonial que fueron
producidas por especies de Micrococcus. Dentro del género
micrococcus existen nueve especies: M. luteus, M. lylae, M. varians,
M. roseus, M. angitis, M.kristinae, M. nishinomiyaensis, M.
sedentarius y M. halobius.[2]

A fines de 1995 Stackebrandt y col. Realizaron análisis de secuencia de


rna ribosómico 16s de las nueve especies reconocidas de Micrococcus y
propusieron varios cambios en la taxonomía de estos microorganismos.
Según estos investigadores, la nueva clasificacación ubicaría a la especie
M. roseus en el género Kocuria como K. roseus.

Los miembros del género Micrococcus se encuentran en el ambiente y


como flora transitoria en la piel del hombre y varios otros mamíferos La
especie roseus produce pigmentos carotenoides en frutas tropicales, y
las colonias de esta especie son de color amarillo o rosa brillante en los
medios sólidos. Ciertas especies de micrococcus han sido utilizadas en la
industria como microorganismos para ensayos biológicos destinados a la
detección de agentes antimicrobianos en comidas para animales,
cosméticos y líquidos corporales. Ocasionalmente son aislados a partir de
muestras clínicas humanas, en las que generalmente representan
contaminantes de la piel o de la superficie de la mucosa o del ambiente,
auque pueden producir infecciones oportunistas en los huéspedes
adecuados.
La importancia de los distintos grupos de micrococcus de los alimentos se
debe a las siguientes propiedades:
• Algunas especies son capaz de utilizar las sales de amonio y
otros componentes nitrogenados sencillos como única fuente de
nitrógeno.
• La mayoría de las especies son capaz de fermentar a los
azucares produciendo así una mediana cantidad de acido.
• Algunas desdoblan a las proteínas produciendo de una manera
directa un respectivo acido (M. freudenreichii).
• Otras elevan elevadas concentraciones de sal, esta es la razón
por la cual son capaces de crecer en medios con valores de
humedad disponibles relativamente bajos.
• Algunas son termodúricas, es decir, resisten al tratamiento de
pasteurización a que se somete la leche comercial (M. variccus).
• Otra producen pigmentos y producen coloraciones anormales en
la coloración de los alimentos en los que se convierten en su
hábitat permanente en el cual crecen; micrococcus lacteus por
ejemplo produce un pigmento amarillo, mientras que para nuestro
interés el micrococcus roseus produce un pigmento de color
rosado.
• Algunos micrococcus son capaz de crecer bastante bien a
temperaturas próximas o inferiores a los 10 °c.
En el laboratorio de microbiología las Micrococcus células se
pueden observar bajo el microscopio como células esféricas que
forman pares o grupos. If cultured in broth or on nutrient
agar, the colonies may be red or yellow when observed
unstained. Si cultivadas en caldo o en agar nutriente, las
colonias pueden ser de color rojo o amarillo. Although these
bacteria are a common human skin contaminant, they are
relatively harmless to humans because they maintain a
saprophytic lifestyle. A pesar de que estas bacterias son un
contaminante común de la piel humana, que son relativamente
inofensivos para los seres humanos, ya que mantener un estilo
de vida saprófitos. They can also be found in freshwater
environments or in soil. También pueden ser encontrados en
ambientes de agua dulce o en el suelo. Estos micrococcus no
forman esporas, y además pueden sobrevivir claramente
periodos largos, estas bacterias se han aislado de la piel humana,
productos lácteos, de origen animal, cerveza, epidermis de frutas
tropicales, etc.

En particular los pertenecientes al género Micrococcus, como en


el estudio de el Micrococcus roseus, aunque no son patógenos
son responsables de producir pigmentos y coloraciones
anormales en la superficie de los alimentos en los que crecen.

El Micrococcus roseus es una de las especies del genero


Micrococcus del dominio de las bacterias, sus principales
características parte de la forma estructural que poseen se
encuentran por lo general unidos en tiras largas ovaladas
(diplococos), son bacterias que dan positivo en la prueba de
Gram. Poseen un porcentaje de G – C (guanina y citosina)
alrededor del 66 y 75 %. Son aerobios estrictos, su metabolismo
es respiratorio con escasa o nula producción de ácido, y crecen
bien en medios simples. Posee las características de una bacteria
gran positiva, de ello que su membrana plasmática se encargue
de una de sus principales funciones vitales la cual domina el
tráfico de sustancias o moléculas de oxigeno, en cuanto al
peptidoglucano posee un di-aminoácido llamado Lisina, y en
relación a la pared celular no posé ningún carbohidratos que
ayude a la función de la resistencia de esta. El hábitat del
micrococcus roseus esta dado en la mayor parte del ambiente
de la piel, en el aire y en las paredes de las frutas tropicales. Por
ejemplo La epidermis del mango está recubierta por ceras, las
cuales son ésteres de los ácidos grasos con alcoholes de peso
molecular elevado, lugar en el cual se puede hospedar este
microorganismo, además por poseer similitud con los aspectos de
vida de este microorganismo.[3]

Las Especies Micrococcus producen colonias características en agar


sangre. Los micrococcus en general crecen más lentamente y a menudo
se necesitan 48 horas de incubación para que pueda discernirse la
morfología típica de las colonias.

Después de este lapso las colonias de micrococcus tienen 1 a 2 mm e


diámetro, presentan un aspecto liso o mate y son marcadamente
convexas con bordes enteros. Algunas cepas producen pigmentos y son
amarillas, rosadas o rojas, anaranjadas o pardas, en tanto que otras son
de color blanco sucio o blanco hueso. La pigmentación se torna más
evidente más pronunciada si las placas se incuban a temperatura
ambiente durante varis odias.{3]

QUESO COSTEÑO

El Queso costeño es una de las opciones que los consumidores pueden


encontrar de este producto. Las grasas y las proteínas son los mayores
nutrientes energéticos que el queso le aporta al organismo.

Además, es un producto versátil en toda clase de preparaciones y platos,


por la variedad de texturas y presentaciones.
Este producto se obtiene de la coagulación de la leche. el sabor se da por
la acción de enzimas generadas por bacterias que se presentan durante
el proceso de maduración.

El queso es una proteína sólida que se clasifica según su humedad.

Una de las ventajas del queso es que aporta grandes cantidades de calcio
y sodio al cuerpo de pequeños y grandes. También es un alimento ideal
dentro de la dieta diaria y tanto en el desayuno, el almuerzo o la comida,
el queso se convierte en el mejor acompañante.

Según afirman los expertos, una porción de agua y media onzas de queso
natural proporciona la misma cantidad de calcio que una taza de leche o
yogurt.

En postres, entradas y ensaladas son una excelente solución. Asimismo,


para acompañar el vino o para picar.[4]
5. HIPOTESIS
Sera posible aislar el Micrococcus roseus a partir de una muestra de
queso costeño, conociendo las condiciones optimas para su
crecimiento y aplicando métodos convencionales de siembra en los
medios caldo nutritivo y Agar sangre.
6. DISEÑO METODOLOGICO

6.1. TIPO DE INVESTIGACION

El tipo de investigación con que se desarrollará este proyecto es de


tipo experimental.

6.2. UNIVERSO DE ESTUDIO

La población objeto de estudio en este proyecto es una muestra de


queso costeño proveniente del mercado publico del municipio de
Cerete-Cordoba.

6.3. LOCALIZACIÓN

Esta investigación se desarrollará en el laboratorio de Microbiología de


alimentos de la Universidad de Córdoba sede Berastegui, municipio de
Ciénaga de Oro, departamento de córdoba, Colombia, ubicada a 20
m.s.n.m, humedad relativa del 85,5% aproximadamente, una
precipitación anual de 1200 mm, temperatura promedio de 29 ° C en
las coordenadas 8 ° 53’ latitud norte, 75° 35’ longitud oeste con
respecto al meridiano de Greenwich. (Institución Geográfica Agustín
Codazzi).

6.4 VARIABLES

• VARIABLE INDEPENDIENTE: Concentración de la muestra, la


temperatura de incubación y tiempo de incubación.
• VARIABLE DEPENDIENTE: Crecimiento viable o no de la
bacteria en estudio (Micrococcus roseus).
6.5 DISEÑO EXPERIMENTAL

Para el aislamiento de la Micrococcus roseus se manejaran


diferentes temperaturas de incubación y de concentración de la
muestra en estudio. Para cada prueba se realizarán dos
repeticiones.

6.5.1 PROCEDIMIENTO

6.5.2 Procedimiento para el proceso de aislamiento de Micrococcus


roseau
Éste estudio se realizará mediante a la exposición de una muestra de
queso costeño expuesto al medio ambiente durante un periodo de 3-5
días dependiendo del estado de descomposición que observemos en la
muestra de queso, posteriormente se llevara al laboratorio y se
homogenizara la muestra utilisando 100.00 ml agua peptonada y el
Estomacher, el sustrato obtenido se someterá a incubación por 24-48
horas. Posteriormente la siembra en caldo nutritivo y Agar sangre por un
periodo de incubación de 72 horas a 37°C.

Luego se procederá a realizar las pruebas bioquímicas de Catalasa,


Ureasa, Motilidad y H2S, TSI, nitrato, Vosges poscauer, LIA y finalmente
se le aplicará de tinción de Gram.
6.5.2.1 Diagrama de Flujo para el procedimiento.

OBTENCION DE LA
MATERIA PRIMA

Al medio ambiente
de 3-5 días EXPON
ER

Solución de la EXTRA Con agua peptonada


muestra de ER

Por 24 a 48 horas INCUB


AR

HOMOGENIZ En estomacher durante 25 seg.


Aprox.
AR

SEMBR En caldo nutritivo y Agar


AR

INCUB A 37°C por 48-72 horas


AR

REALIZAR PRUEBAS
BIOQUIMICAS

OBSERVAR
7. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES.

Actividad Fecha de realización


Exposición de la muestra de queso 5 Nov.
Extracción de la muestra de queso 9 Nov.
y siembra en caldo de peptona
Siembra de la bacteria en medio 10 Nov.
Agar sangre y caldo nutritivo
Pruebas bioquímicas 11 Nov.
Observación de resultados 13 Nov.

BIBLIOGRAFIA
1. Madigan Michael, Martinko Jonh, Parker Jack. Brock. Biología de los
Microorganismos. Décima edición o Págs. 398, 399, 721, 805, 944.

2.Koneman, Elmer W. Diagnóstico Microbiológico, QUINTA EDICIÓN,


EDITORIAL MEDICA PANORAMA;.

PG 528-529.

3.Koneman, Elmer W. Diagnóstico Microbiológico, QUINTA EDICIÓN, Editorial


Medica Panorama;.

PG 528-529.

4.http://www.companiamedica.com/salud_&_belleza/lacteos_de_primera.h
tml.fecha: martes 13 de octubre, 2009.