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Determinacin Fotomtrica del Hierro 1.

Introduccin Hasta ahora hemos realizado determinaciones analticas en base a la masa y el volumen del analito para saber cuantitativamente la presencia de este en una muestra problema, pudimos ver la existencia de un sinfn de mtodos analticos para el tipo de analito que se desea determinar, y son un buen manejo de estas tcnicas podremos calcular de una forma precisa y exacta la cantidad de volumen, pero sin embargo, cuando la cantidad del analito en una muestra es muy pequea o es dificultoso de separarlo por medios convencionales (por lo menos por los aprendidos hasta ahora , es en estos casos que se busca la manera de poder determinarlos, y se utilizan las otras propiedades fsicas de los analitos! "as otras propiedades que se pueden utilizar para la determinaci#n cuantitativa del analito son la intensidad luminosa y$o carga elctrica del analito, cuando se hace uso de estas propiedades de los elementos se usan otros mtodos de determinaci#n, como ser, el mtodo electroanalticos que miden propiedades elctricas como voltaje, corriente, resistencia y cantidad de carga elctrica% pero tambin se utilizan los mtodos espectrosc#picos que se basan en la medici#n de la interacci#n entre un tipo de radiaci#n electromagntica y los &tomos o molculas la carga de las molculas por espectrometra de masas, entre otras! 'n esta experiencia veremos los principios generales de la radiaci#n electromagntica como tambin sus principales propiedades, que nos ayudaran para la determinaci#n de una concentraci#n del analito en una muestra dada!

2. Objetivos 2.1. Objetivo General 'l objetivo general de esta pr&ctica es( )ealizar la determinaci#n fotomtrica del hierro!

2.2. Objetivos Espec icos "os objetivos especficos de la pr&ctica son( *onocer un espectrofot#metro! *onocer el espectro electromagntico! *onocer las diferencias entre absorci#n y transmitancia!

+plicaci#n de la ley de "ambert y ,eer! )elacionar la absorbancia con la concentraci#n!

!. Fundamento terico Introduccin a los mtodos espectromtricos "os mtodos espectromtricos son un amplio grupo de mtodos analticos que se basan en las espectroscopias at#mica y molecular! "a espectroscopia es un trmino general para la ciencia que trata de las distintas interacciones de la radicaci#n con la materia! Hist#ricamente, las interacciones de inters se producan entre la radiaci#n electromagntica y la materia, sin embargo, ahora el termino espectroscopia se ha ampliado para incluir las interacciones entre la materia y otras formas de materia! "a espectrometra y los mtodos espectromtricos hacen referencia a la medida de la intensidad de la radiaci#n mediante un detector fotoelctrico o con otro tipo de dispositivo! "os mtodos espectromtricos m&s ampliamente utilizados son los relacionados con la radiaci#n electromagntica, que es un tipo de energa que toma varias formas, de las cuales las m&s f&cilmente reconocibles son la luz y el calor radiante! -us manifestaciones m&s difcilmente reconocibles incluyen los rayos gamma y los rayos ., as como las radiaciones ultravioleta, de microondas y de radiofrecuencia! "ropiedades #enerales de la radiacin electroma#ntica $%E&'. /uchas de las propiedades de la )'/ se explican adecuadamente con un modelo cl&sico de onda sinusoidal, que utiliza par&metros como la longitud de onda, la frecuencia, la velocidad y la amplitud! + diferencia de otros fen#menos ondulatorios, como el sonido, la )'/ no necesita un medio de apoyo para transmitirse y, por tanto, se propaga f&cilmente a travs del vacio! 'l modelo ondulatorio falla al intentar explicar fen#menos asociados con la absorci#n o la emisi#n de energa radiante! 0ara comprender estos procesos, hay que acudir a un modelo corpuscular en el que la )'/ se contempla como un flujo de partculas discretas, o paquetes ondulatorios, de energa denominados fotones, en los que la energa de un fot#n es proporcional a la frecuencia de la radicaci#n! 'ste doble punto de vista de la radiaci#n como partcula y como onda no es mutuamente excluyente, sino complementario! 1e hecho la dualidad onda2corp3sculo se aplica al comportamiento de haces de electrones, y se racionaliza completamente por medio de la mec&nica ondulatoria! "ropiedades de onda

0ara entender los fen#menos tales como la reflexi#n, refracci#n, interferencia y difracci#n, la )'/ puede presentarse como oscilaciones sinusoidales perpendiculares de campos magnticos y elctricos! 'l campo elctrico de una onda sinusoidal que se mueve con una sola frecuencia en el espacio y el tiempo, este campo se representa como un vector cuya longitud es proporcional a la fuerza del campo! "a amplitud de la onda sinusoidal se define como la longitud del vector del campo elctrico en el punto m&ximo de la onda! 'le tiempo necesario para el paso de los sucesivos m&ximos o mnimos por un punto fijo del espacio se denomina el periodo p de la onda! "a frecuencia v es el n3mero de oscilaciones del vector del ampo por unidad de tiempo y es igual a 4$p! "a potencia P de la radiaci#n es la energa en 5atts (6 del haz que llega a un &rea dada por unidad de tiempo! "ropiedades de la partcula de la lu() los otones 'n muchos tipos de interacci#n de la )'/ con la materia, es mas adecuado considerar a la luz como paquetes de fotones o cuantos! "a energa de un fot#n puede relacionarse con la longitud de onda, frecuencia y n3mero de ondas mediante la ecuaci#n!

1onde h es la constante de 0lanc7 (8!89:4;29< = s ! *+u mediciones ,acen los espectroscopistas"os espectroscopistas utilizan las interacciones de la radiaci#n con la materia a fin de obtener informaci#n de una muestra! +lgunos de los elementos fueron descubiertos mediante el an&lisis espectrosc#pico! "a muestra se estimula de alguna forma, ya sea aplicando energa en forma de calor, de electricidad, de luz, de partculas o sometindola a alguna reacci#n qumica! +ntes de aplicar cualquiera de estos estmulos, el analito esta predominantemente en su nivel m&s bajo de energa o estado fundamental! 'l estimulo induce una transici#n de algunas especias del analito a un estado de energa superior o estado excitado! 0ara obtener informaci#n sobre el analito, se mide la )'/ emitida cuando este regresa a su estado basal, o puede medirse la cantidad de )'/ absorbida como consecuencia de la excitaci#n! .bsorcin de la lu( *ada especie molecular tiene la capacidad de absorber su propia frecuencia caracterstica de la )'/! 'ste proceso transfiere energa a la molcula y provoca una disminuci#n en la intensidad de la )'/ incidente! 0or consiguiente, la absorci#n de la radiaci#n aten3a el rayo incidente de acuerdo con la ley de la absorci#n que se describe a continuaci#n! /e0 de la absorcin

"a ley de la absorci#n, tambin conocida como ley de "ambert y ,eer, o simplemente ley de ,eer, da informaci#n cuantitativa de c#mo es que la atenuaci#n de la radiaci#n depende de la concentraci#n de las molculas que la absorben y de la distancia que recorre el rayo en el medio absorbente! *uando la luz atraviesa una soluci#n de analito, la intensidad de la radiaci#n disminuye como consecuencia de la excitaci#n del analito! *uanto mayor sea la trayectoria del rayo en la soluci#n del analito de una concentraci#n dada, habr& mas especies que absorban la radiaci#n y la atenuaci#n ser& mayor! "a atenuaci#n que experimenta una haz paralelo de radiaci#n monocrom&tica cuando pasa por una soluci#n absorbente de espesor b en cm y concentraci#n c de moles por litros! 1ebido a las interacciones que suceden entre los fotones y las partculas absorbentes la energa radiante del rayo disminuye desde 0; hasta 0! la transmitancia > de la soluci#n, es la fracci#n de radiaci#n incidente que transmite la soluci#n! "a transmitancia suele expresarse como porcentaje o porcentaje de transmitancia!

"a absorbancia + de una soluci#n esta relacionada con la transmitancia en forma logartmica! ?bsrvese que el aumento en la absorbancia de una soluci#n se acompaa de una disminuci#n en la transmitancia! "os primeros instrumentos venan equipados con escalas lineales de transmitancia% los instrumentos modernos traen escalas lineales de absorbancia y algunos tienen una computadora que calcula la absorbancia a partir de las mediciones!

/e0 de 1eer 1e acuerdo con la ley de ,eer, la absorbancia esta relacionada linealmente con la concentraci#n (c de las especies absorbentes y con la longitud de la trayectoria de la radiaci#n (b en el medio absorbente% y se expresa mediante la siguiente ecuaci#n(

'n este caso,

es una constante de proporcionalidad llamada absortividad! 1ado que la

absorbancia es una cantidad adimensional, la absortividad debe tener unidades que cancelen las unidades de b y c! /imitaciones de la le0 de 1eer

"a relaci#n lineal entre la absorbancia y la longitud de la trayectoria de la radiaci#n a una concentraci#n fija, es una generalizaci#n para la que hay pocas excepciones! 0or lo contrario, es muy frecuente encontrar desviaciones a la proporcionalidad directa entre la absorbancia y concentraci#n (cuando b es constante ! +lgunas de estas desviaciones, denominadas desviaciones reales de esta ley! + veces se observan desviaciones debidas a la forma en que se mide la absorbancia (desviaciones instrumentales o como resultado de los cambios qumicos asociados a las variaciones de concentraci#n (desviaciones qumicas ! /imitaciones reales de la le0 de 1eer "a ley de ,eer solo describe el comportamiento de la absorci#n en soluciones diluidas y, en este sentido, es una ley limitada! *on concentraciones superiores a ;!;4/, la distancia promedio entre los iones o molculas de las especies absorbentes disminuyen al punto en que cada partcula afecta la distribuci#n de carga (y, por tanto, la absorci#n de las partculas vecinas! *omo el grado de interacci#n depende de la concentraci#n, cuando este fen#meno se presenta se observan desviaciones de la relaci#n lineal entre la absorbancia y la concentraci#n! 'sto tambin se observa con soluciones diluidas de sustancias absorbentes que contienen concentraciones altas de otras especies, electrolitos en particular! *uando los iones est&n muy cerca del analito, alteran si absortividad molar por interacci#n electrost&tica, ocasionando desviaciones de la ley de ,eer! Desviaciones +umicas "as desviaciones de la ley de ,eer se presentan cuando las especies absorbentes experimentan asociaci#n, disociaci#n o reaccionan con el disolvente formando productos que tienen una absorci#n distinta de la del analito! "a magnitud de estas desviaciones se puede predecir conociendo las absortividades molares de las especies absorbentes y las constantes de equilibrio de las reacciones! Desviaciones debidas a los instrumentos "a necesidad de contar con fuentes de radiaci#n monocrom&tica y evitar la radiaci#n parasita son algunos factores pr&cticos que restringen la aplicaci#n de la ley de ,eer! 'strictamente, esta ley se aplica solo cuando las mediciones se hacen con una fuente de radiaci#n monocrom&tica! -in embargo, en la pr&ctica, se emplean las fuentes de radiaci#n policrom&tica junto con una rejilla o un filtro para aislar una banda de longitudes de onda que sea m&s o menos simtrica en torno a la longitud de onda que se va a utilizar! 0ara evitar estas desviaciones, es conveniente seleccionar una banda de longitudes de onda cercana a la longitud de onda donde la absorci#n sea m&xima y la absortividad del analito cambie my poco con la longitud de onda! "a radiaci#n parasita se define como la radiaci#n debida al instrumento y que esta fuera de la banda de longitud de onda seleccionada para hacer las mediciones! 'ste tipo de radiaci#n

proviene a menudo de la dispersi#n y reflexi#n de las superficies de las rejillas, los lentes o espejos, filtros y ventanas! 2omponentes de los instrumentos para espectroscopia ptica "os instrumentos para las espectroscopias ultravioleta e infrarroja tienen las suficientes caractersticas comunes con los diseados para la regi#n visible que habitualmente se denominan instrumentos #pticos, aunque de hecho, el ojo humano no es sensible ni a la radiaci#n ultravioleta ni a la infrarroja! Dise3os #enerales de instrumentos pticos. "os mtodos espectrosc#picos #pticos se fundamentan en seis fen#menos( (4 absorci#n, (@ fluorescencia, (9 fosforescencia, (< dispersi#n, (A emisi#n y (8 quimioluminiscencia! 0ara medir cada fen#meno la mayora de los componentes b&sicos de los instrumentos son muy parecidos, aunque difieren algo en su configuraci#n! +dem&s, las propiedades necesarias de estos componentes son las mismas independientemente de si se aplican a la regi#n ultravioleta, visible o infrarroja del espectro! "os instrumentos espectrosc#picos caractersticos incluyen cinco componentes( (4 una fuente estable de energa radiante, (@ un recipiente transparente para contener la muestra, (9 un dispositivo que aisl una regi#n restringida del espectro para la medida, (< un detector de radiaci#n, que convierta la energa radiante en una seal utilizable (en general elctrica , y (A un sistema de procesamiento y lectura de la seal, que visualice la seal detectada en una escala de medida, en una pantalla de osciloscopio, en un medidor digital o en un registrador! 4. "rocedimiento E5perimental 4.1. &ateriales6 E7uipos 0 %eactivos

Baso de precipitado de @A;m"! /atraces 'rlenmeyer de @A;m"! /atraz aforado de 4;;m" /atraces volumtricos de A;m"! /atraz volumtrico de 4;;;m"! 0ipeta volumtrica de 4;m"! 0ipeta graduada de Am"!

'spectrofot#metro! 4!4; fenantrolina! *loruro de hidroxilamina! +cetato de sodio! -ulfato de amonio y hierro(CC ! +cido sulf3rico concentrado!

4.2. "rocedimiento 0reparar las siguientes soluciones( 4! 1isuelva ;!4g de 4,4; fenantrolina monohidratada en 4;;m" de agua destilada, si es necesario caliente para disolverla! @! 1isuelva 4;g de cloruro de hidroxilamina en 4;;m" de agua! 9! 1isuelva 4;g! de acetato de sodio en 4;;m" de agua destilada! <! 0ese con exactitud ;!;D;@ g de sulfato de amonio y hierro CC puro, disulvalos en agua y transfiera la soluci#n a un matraz volumtrico de 4;;m"! +gregue @!Am" de acido sulf3rico concentrado y diluya la soluci#n hasta la marca! *alcule la concentraci#n de la soluci#n en miligramos de hierro por mililitro! 0ipetee en A matraces volumtricos de A;m" ;!A, 4!;, 4!A, @!; y 9!;m" de la soluci#n est&ndar de hierro! 'n otro matraz coloque A;m" de agua destilada para que sirva de blanco y en otro matraz coloque un volumen medido de la muestra desconocida (ver nota ! + cada matraz adicione 4m" de la soluci#n de hidroxilamina, Am" de la soluci#n de fanantrolina y <m" de acetato de sodio! "uego diluya todas las soluciones hasta la marca de A;m" y deje reposar durante 4; minutos! 'mpleando el blanco de referencia y cualquiera de las soluciones que preparo, mida la absorbancia a diferentes longitudes de onda en el, intervalo de <;; a 8;;nm! >ome lecturas cada @;nm, excepto en la regi#n de la m&xima absorbancia donde se lee en intervalos de Anm! Erafique la absorbancia contra longitud de onda para obtener la curva de absorci#n! -eleccione la longitud de onda adecuada (m&ximo de absorci#n para graficar la curva de calibraci#n con las soluciones est&ndar (absorbancias versus concentraciones y mediante esta curva determinar la concentraci#n del hierro de la soluci#n problema!

8ota) se puede utilizar soluciones de concentraci#n conocida como muestras problemas! *onsulte con el instructor respecto al tamao de las muestras que se debe utilizar! -i se va utilizar agua ordinaria, aseg3rese que sea incolora y libre de turbidez! 9. Datos6 2:lculos 0 %esultados 0 Discusin 0ara esta pr&ctica utilizamos el espectrofot#metro que es un equipo que nos ayudara a determinar y saber la concentraci#n de una muestra desconocida, pero antes de determinar la concentraci#n tenemos que realizar una calibraci#n del equipo, para as saber en que longitud de onda es que se debe de trabajar, debemos aclarar este equipo emite seales de transmitancia y debemos de realizar los c&lculos en base a la absorbancia es por eso que se utilizara la ley de "ambert y ,eer, para as calcular la absorbancia! + continuaci#n mostraremos la reacci#n que ocurre para determinar de la mejor manera el hierro es la siguiente( 'l hierro debe estar en el estado de oxidaci#n de F@ para formar el complejo! 0or tanto se debe utilizar un compuesto reductor como el cloruro de hidroxilamina para garantizar la formaci#n del color! "a reacci#n es(

'l pH se ajusta a un valor de 8 y G agregando acetato de sodio! "a coloraci#n que tiene la soluci#n que contiene el hierro que queremos determinar es de color anaranjado! 0ara realizar la calibraci#n utilizamos como referencia la muestra de la soluci#n de hierro que tiene mayor concentraci#n, es decir la de Dppm de hierro, pero al utilizar esta como referencia no tuvimos resultados muy buenos, en la calibraci#n del equipo, es por eso que utilizaremos la muestra de Appm de referencia para calibrar el equipo! 'n la siguiente tabla tenemos la calibraci#n del equipo con la muestra haciendo variar la longitud de onda, donde el equipo nos dio como resultado la transmitancia pero como tenemos que trabajar en absorbancia utilizaros la siguiente ecuaci#n y as determinar la absorbancia!

/on#itud onda

de ;ransmitancia .bsorbancia $<' <;; GD ;,;4 <@; G4 ;,;< <<; H;,A ;,;G <8; 8< ;,4G <H; <A,A ;,9< A;; @9 ;,8< A4; 4A ;,H@ A4A 4< ;,HA

92= 1269 A@A 48 A9; @9 A<; << A8; HA +hora mostraremos la grafica de absorbancia vs! "ongitud de onda

=6>= ;,H; ;,8< ;,98 ;,;D

"a longitud de onda en la cual se trabajara es de A@; ya que es en esa longitud que se tiene la m&xima transmitancia que es lo mismo decir la m&xima absorbancia, a continuaci#n con la longitud de onda a trabajar determinaremos la absorbancia de distintos tipos de concentraciones, de esa forma tendremos una relaci#n lineal de la absorbancia, para luego poder determinar la concentraci#n de la muestra desconocida! * ppm >ransmitancia +bsorbancia Ie ; 4;; ;,;; 4 H@ ;,;G @ 84 ;,@4 < 94 ;,A4 A 4H ;,D< . @ 4,D; *on estos datos podemos construir una recta lineal para luego poder determinar la concentraci#n de muestra problema!

"a ecuaci#n de la curva linealizada es la siguiente

*on esta ecuaci#n podremos calcular la concentraci#n reemplazando la absorbancia que se determino de la muestra problema! 0or lo que la concentraci#n de la muestra es(

?. Observaciones6 2onclusiones 0 %ecomendacin Observaciones "as observaciones de la pr&ctica son las siguientes( 'n la preparaci#n de las muestras se tiene que tener la mejor precisi#n y exactitud posible, ya que de ello depende que se tenga buenos resultados! "a soluci#n de muestras que tenan contenidas las concentraciones de Ie eran de color anaranjado rojizo, color tpico del hierro! 'l uso del espectrofot#metro es bastante sencillo, la parte clave es la calibraci#n que se debe realizar para saber a que longitud de onda se debe trabajar, se debe tener cuidado siempre cerrar los cubculos donde se colocan la referencia y la muestra!

>anto las muestras como la referencia est&n contenidos en cubetas de vidrio pyrex eso por que se trabaja en un espectro dentro del rango visible, estas cubetas se deben enjuagar bien antes de dar uso, como tambin se debe de ambientar siempre que sea posible!

2onclusiones "as conclusiones de la pr&ctica son( *onocimos que un espectrofot#metro es un aparato que sirve para medir la intensidad de luz que atraviesa una muestra de soluci#n del analito que se desea determinar, los espectrofot#metros com3nmente trabajan a en rangos de espectros de la luz ultravioleta y el visible, ya que para espectros infrarrojos se deben utilizar otros equipos mas sofisticados! Jn espectro electromagntico es una grafica de la potencia o intensidad de radiaci#n electromagntica en funci#n de la longitud de onda o la frecuencia! "a potencia puede estar expresada en absorbancia o transmitancia! "a absorbancia en la capacidad de incorporarse o asimilarse dentro de otra, mientras que a transmitancia es la capacidad que tiene un elemento de dejar pasar una cantidad de energa a travs de ella, es decir, la absorci#n se da en la fuente de energia, mientras que la transmisi#n se refiere al elemento o analito a estudiar! "a aplicaci#n de la ley de ,eer es mayormente para saber la absortividades de especies de concentraciones conocidas y asi poder realizar una relaci#n de lineal o el que mejor describa el comportamiento de la absorci#n y la concentraci#n de muestras, para asi poder determinar la concentraci#n de un analito de una muestra problema! "a absorbancia esta en funci#n a la concentraci#n del analito, normalmente en relaci#n lineal, pero si existiesen interferencias este comportamiento seria algo logartmico o parab#lico!

%ecomendaciones "as recomendaciones de la pr&ctica son las siguientes( *omo mencionamos antes la preparaci#n de las concentraciones de las muestras para realizar la curva de absrobancia vs concentraci#n, es fundamental ya que si no se preparan bien las muestras tal vez no se logre tener una lineal recta al relacionar las muestras!

'l manejo del espectrofot#metro es sencillo y simple sin embargo al momento de realizar la curva de calibraci#n se tienen que tener algo de paciencia y tranquilidad para poder tomar los datos, si es necesario se debe repetir las determinaciones en cada longitud de onda deseada! -e tiene que tener cuidado con este aparato (espectrofot#metro ya que es bastante caro y sensible, mas que todo con sus recipientes que son especiales!

@. 1iblio#ra a 4! Kumica +naltica, -7oog$6est$Holler$*rouch, /c Era5 Hill, /exico (@;;4 ! @! +n&lisis Kumico *uantitativo, Iischer )obert ,, 0eters 1ennis E, 'ditorial Cnteramericana, /xico (4GD; ! 9! +n&lisis Kumico *uantitativo, +yres Eilbert, 'ditorial Harla -!+! "atinoamrica (4GDA ! <! "aboratorio Kumica +naltica *uantitativa, Hamel Ionseca =aime, >exto Eua de "aboratorio (@;;D J/--! A. 2uestionario "re#untas 0 Ejercicios "revios 1. De un concepto de espectro otometra. -on las tcnicas, mtodos de medici#n de absorci#n o emisi#n de radiaci#n ultravioleta, visible e infrarroja, puede determinar analitos de forma cualitativa como cuantitativa! 2. Gra icar el espectro electroma#ntico.

!. De un concepto de absortividad molar.

*onstante de proporcionalidad en la ecuaci#n de la ley de "ambert y ,eer, +Labc, donde + es la absorbancia, b la trayectoria de la radiaci#n, y c la concentraci#n de las especies que absorben la radiaci#n! 4. De un concepto de radiacin monocrom:tica. 'n situaci#n ideal, la radiaci#n electromagntica que consta de una sola longitud de onda% en la pr&ctica, una banda muy estrecha de longitudes de onda! 9. Bn compuesto cu0o peso molecular es 1== tiene una absortividad molar de 1C1= 9. 2uantos #ramos de este compuesto se debe disolver en 1 litro de solucin para 7ue despus de diluir 2== veces la solucin ten#a una absorbancia de =.9 en una celda de 1.= cm de espesor. 0rimero hallaremos la concentraci#n que tiene el compuesto en cuesti#n de la siguiente forma

"a masa se calcula de la siguiente forma(

0or lo que se debe pesar ;!4 g del compuesto! 2onclusiones 1. E5pli7ue el mtodo espectro otomtrico 0 su aplicacin a los an:lisis cuantitativos. "os mtodos espectromtricos son un amplio grupo de mtodos analticos que se basan en las espectroscopias at#mica y molecular! "a espectroscopia es un trmino general para la ciencia que trata de las distintas interacciones de la radicaci#n con la materia! Hist#ricamente, las interacciones de inters se producan entre la radiaci#n electromagntica y la materia, sin embargo, ahora el termino espectroscopia se ha ampliado para incluir las interacciones entre la materia y otras formas de materia! "a espectrometra y los mtodos espectromtricos hacen referencia a la medida de la intensidad de la radiaci#n mediante un detector fotoelctrico o con otro tipo de dispositivo! "os espectroscopistas utilizan las interacciones de la radiaci#n con la materia a fin de obtener informaci#n de una muestra! +lgunos de los elementos fueron descubiertos mediante el an&lisis espectrosc#pico! "a muestra se estimula de alguna forma, ya sea aplicando energa en forma de calor, de electricidad, de luz, de partculas o sometindola a alguna reacci#n qumica!

+ntes de aplicar cualquiera de estos estmulos, el analito esta predominantemente en su nivel m&s bajo de energa o estado fundamental! 'l estimulo induce una transici#n de algunas especias del analito a un estado de energa superior o estado excitado! 0ara obtener informaci#n sobre el analito, se mide la )'/ emitida cuando este regresa a su estado basal, o puede medirse la cantidad de )'/ absorbida como consecuencia de la excitaci#n! -e puede decir que estos mtodos se basan en la ley de la absorci#n, tambin conocida como ley de "ambert y ,eer, o simplemente ley de ,eer, da informaci#n cuantitativa de c#mo es que la atenuaci#n de la radiaci#n depende de la concentraci#n de las molculas que la absorben y de la distancia que recorre el rayo en el medio absorbente! *uando la luz atraviesa una soluci#n de analito, la intensidad de la radiaci#n disminuye como consecuencia de la excitaci#n del analito! *uanto mayor sea la trayectoria del rayo en la soluci#n del analito de una concentraci#n dada, habr& mas especies que absorban la radiaci#n y la atenuaci#n ser& mayor 2. Indi7ue las limitaciones e inter erencias de este mtodo. 1esviaciones Kumicas, las desviaciones de la ley de ,eer se presentan cuando las especies absorbentes experimentan asociaci#n, disociaci#n o reaccionan con el disolvente formando productos que tienen una absorci#n distinta de la del analito! "a magnitud de estas desviaciones se puede predecir conociendo las absortividades molares de las especies absorbentes y las constantes de equilibrio de las reacciones! 1esviaciones debidas a los instrumentos, la necesidad de contar con fuentes de radiaci#n monocrom&tica y evitar la radiaci#n parasita son algunos factores pr&cticos que restringen la aplicaci#n de la ley de ,eer! 'strictamente, esta ley se aplica solo cuando las mediciones se hacen con una fuente de radiaci#n monocrom&tica! -in embargo, en la pr&ctica, se emplean las fuentes de radiaci#n policrom&tica junto con una rejilla o un filtro para aislar una banda de longitudes de onda que sea m&s o menos simtrica en torno a la longitud de onda que se va a utilizar! 0ara evitar estas desviaciones, es conveniente seleccionar una banda de longitudes de onda cercana a la longitud de onda donde la absorci#n sea m&xima y la absortividad del analito cambie my poco con la longitud de onda! "a radiaci#n parasita se define como la radiaci#n debida al instrumento y que esta fuera de la banda de longitud de onda seleccionada para hacer las mediciones! 'ste tipo de radiaci#n proviene a menudo de la dispersi#n y reflexi#n de las superficies de las rejillas, los lentes o espejos, filtros y ventanas

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