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Biologa celular y molecular

Carrera: Odontologa Profesora: Mara Martini R.(PhD)

Biologa celular y molecular 2013

Textos recomendados

BSICOS
Alberts, B., Bray, D., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Watson, J. (2007). Biologa Molecular de la Clula. (2. Ed.). Barcelona, Espaa: Omega. De Robertis y De Robertis (2008). Biologa Celular y Molecular. (15. Ed.). Buenos Aires, Argentina: El Ateneo.

COMPLEMENTARIOS

Darnell, J., Lodish, H., Baltimore, D. (2005). Biologa celular y molecular (5 ed.)Buenos Aires, Argentina: Panamericana.

Biologa celular y molecular 2013 EVALUACIONES Ctedra Tres pruebas solemnes: 25% Primera Prueba: Unidad 1 25% Segunda Prueba: Unidad 2 20% Segunda Prueba: Unidad 3 Laboratorio

70% Nota final 30% Nota examen

Fechas

4 Mayo-Prueba solemne 1 1 Junio- Prueba solemne 2 17 Junio- prueba solemne 3

DEL REGLAMENTO DEL ALUMNO


Exmenes: Eximicin: Nota 5,5 (ser nota final) Asistencia mnima exigida Derecho a E. Ordinario: Nota 3,5. Asistencia mnima exigida Derecho a E. Extraordinario: Nota 3,0. Asistencia mnima exigida. Examen ordinario reprobado Condiciones de Aprobacin: Nota examen 3,0 Nota final resultante 4,0

La nota obtenida en el examen extraordinario ser la nota final de la asignatura y no podr ser mayor a 4,0.

Qu es la biologa celular y molecular?


Es el estudio de la organizacin, estructura y funcin de las clulas. Es el anlisis de los componentes celulares con que se constituye toda forma de vida

Para que se estudian las clulas?


La clula es la unidad fundamental de la vida, por lo tanto, su estudio es la base para comprender a los seres vivos que poseen una organizacin superior. Esto convierte a la biologa celular en una disciplina fundamental para comprender como se estructura funcionalmente un organismo.

En cualquier disciplina del rea de la salud es necesario entender como funcionan las clulas para poder prevenir diagnosticar y tratar enfermedades. Es necesario tambin para entender el origen de las patologas, desarrollar tratamientos y futuros avances en el rea de la salud.

La clula es la unidad estructural, funcional y de origen de todo ser vivo Caractersticas comunes de todas las clulas
Membrana plasmtica: define la periferia de la clula separando su contenido del medio externo. Citoplasma: en el interior de la clula compuesto por una disolucin acuosa muy compleja (gel) Ncleo o nucleode: se almacena y replica el genoma (conjunto de todos los genes)

Todos los organismo vivos comparten: Caractersticas estructurales (clula) Caractersticas qumicas (forman las biomolculas a partir de las mismas subunidades monomricas)

DNA: se compone de 4 desoxiribonucleotidos RNA: 4 ribonucleotidos Protenas: 20 aminocidos Polisacridos: monosacridos

Dimensiones celulares
Unidades de longitud 1 cm= 10-2 m 1 mm= 10-3 m 1 m= 10-6 m 1 nm = 10-9 m

1 = 10-10 m
La historia de la biologa celular ha estado ligada al desarrollo tecnolgico (microscopa y tcnicas de tincin) que permiti aumentar el poder de resolucin para sustentar su estudio.

Resumen histrico del descubrimiento de la clula


Las primeras aproximaciones al estudio de la clula surgieron en el siglo XVII, tras el desarrollo de los primeros microscopios. Robert Hooke (1665): microscopio de Hooke observ una lmina de corcho y vio celdillas que se repetan como un panal bautizndolas como Clulas Anton van Leeuwenhoek (1670) : fue probablemente el primero en observar y describir bacterias, protozoos y espermatozoides gracias a los poderosos microscopios que construa (ampliacin de 275 veces) (resolucin 1,4 m).

Theodor Schwann y Mathias Schleiden (1830-1838): (complementada posteriormente por Rudolf Virchow) La teora celular La clula como unidad estructural, funcional y de origen. Marca en nacimiento formal de la biologa celular. Robert Brown (1831): Ncleo celular. Kolliker (1857): Mitocondria en la clula muscular.

Flemming (1879): Describi el comportamiento de los cromosomas durante la mitosis.


Golgi (1898): Aparato de Golgi.

Cmo se estudian las clulas?


Lo que podamos aprender de las clulas va a depender de las herramientas que se utilicen. Las clulas son muy pequeas, translucidas e incoloras. Para estudiarlas como un todo se puede utilizar la microscopa. Para aislar clulas y estudiar su comportamiento, cultivo celular. Para estudiar sus componentes macromoleculares, fraccionamiento celular por ultracentrifugacin. Para seguir el rastro de alguna molcula intracelular o cuantificar, marcaje con radioistopos, fluorescencia, etc.

Microscopa

Dos principios involucrados en el uso del microscopio:


Magnificacin: capacidad de aumentar el tamao de una imagen. Resolucin: Capacidad de producir una imagen ntida imgenes bien definidas de puntos situados muy cerca uno del otro.

Resolucin del ojo humano 100 m (clula animal 20 m, bacteria 0,5 m) Resolucin del microscopio ptico 0,2 m. Lmite de resolucin: la separacin mnima a la que dos objetos pueden verse separados.

pticos: radiacin utilizada para iluminar los objetos es de Microscopios


luz visible. Resolucin de 0,2 m

Electrnicos: radiacin utilizada para iluminar los objetos es de


electrones (haz de electrones). Resolucin 0,1 nm

Microscopio ptico
Aumento de imgenes por sobre las 2000 veces *mnimo observado de 0,2 m. Para observar clulas son necesarias 3 cosas: 1. Una luz brillante sea proyectada sobre la muestra por las lentes del condensador. 2. Preparacin cuidadosa de la muestra para permitir que la luz la atraviese (fijacin, seccin, tincin) (clulas teidas o clulas vivas).

3. Un sistema de lentes apropiado (objetivo y ocular) debe estar alineado para que la muestra se forme en el ojo.
Las clulas se pueden observar con tincin o vivas sin tincin utilizando microscopio con sistemas pticos especiales.

Interferencia entre ondas luminosas


Cuando dos ondas de luz se combinan en fase, la amplitud de la onda resultante es mayor y es ms luminosa. Dos ondas de luz desfasadas se anulan parcialmente una a otra, produciendo una onda de menor amplitud, es decir menos luminosa.

Apertura numrica: es una funcin de la capacidad de los lentes de colectar luz, para lentes secos (aire n=1) valor 1, para lentes sumegidos en aceite 1,4

Microscopio ptico a) Microscopa de campo claro


Es el microscopio ptico ms comnmente utilizado. Permite observar clulas vivas, la luz pasa directamente a travs de una clula , se observan detalles como contornos o naturalmente coloreados. Tambin se puede observar clulas teidas para ver ms detalles ya que las sin tincin no tiene suficiente contraste y es difcil visualizarlas.

Fibroblasto en cultivo

Microscopio ptico b) Microscopa de contraste de fases


Aumenta el contraste entre las diferentes partes de una clula sin colorear y se fundamenta en las diferencias en la difraccin de la luz al pasa por diferentes estructuras celulares (ondas desfasadas) Se utiliza en clulas vivas, especimenes delgados clulas aisladas.

Microscopio ptico c) Microscopa de contraste de fase de interferencia o de Nomarski

Es una modificacin del anterior, utiliza un polarizador y dos prismas. Las imgenes obtenidas tienen una apariencia tridimensional y son de alto contraste.

Microscopio ptico d) Microscopa de campo oscuro

En este caso los rayos luminosos del sistema de iluminacin son dirigidos desde la parte lateral y la clula se ve brillante por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, sobre un fondo negro.

Microscopa de contraste de fases

Microscopa de contraste de fase interferencial

Microscopa de campo oscuro

La gran ventaja de estos tres tipos de microscopa es que permiten observar clulas vivas y movimientos implicados en mitosis, migracin, fagocitosis, etc.

e) Microscopio de Fluorescencia
Las clulas son teidas con compuestos fluorescentes (fluorocromos), que absorben luz de determinadas longitudes de onda y emiten luz en otras longitudes de onda (absorben un color y emiten otro color) (sistema de dos filtros)

f) Microscopio de barrido confocal de fluorescencia

Permite obtener imgenes ms ntidas. Enfoca slo un plano muy estrecho y no detecta la luz fuera de foco que proviene de la zona superior e inferior al plano (fina seccin ptica). Con una serie de secciones pticas de este tipo, obtenidas a distintas profundidades se puede reconstruir una imagen tridimensionales de los objetos.

Aumento de la nitidez de una imagen

Microscopio electrnico de transmisin TEM, transmission electron microscopy


El microscopio electrnico resuelve la estructura fina de las clulas. Utiliza una fuente de electrones en vez de luz y bobinas magnticas para focalizar el haz en vez de lentes de cristal. La muestra se pone en el vaco y debe ser muy delgada (60 nm de espesor)

Se tien las muestras con metales pesados electrn densos (tetrxido de osmio y citrato de plomo)
Proporciona aumento de millones de veces, y una resolucin en muestras biolgicas de unos 2 nm (nanmetros)

El microscopio electrnico resuelve la estructura fina de la clula

Microscopio electrnico de barrido SEM, scanning electron microscopy


La muestra se recubre con capa delgada de un metal pesado (no se secciona). La muestra es barrida por un haz de electrones enfocados por bobinas. Un detector mide la cantidad de electrones dispersados o emitidos cuando un haz bombardea cada uno de los puntos de la superficie de la muestra. El microscopio crea imgenes completas de objetos tridimensionales y con resolucin de entre 3 y 20 nm. Sin embargo, slo de pueden analizar detalles de la superficie celular.

Los estudios de microscopia han permitido comparar diferentes tipos de clulas y han permitido identificar diferencias entre ellas. Una de las primeras diferencias observadas fue que algunas clulas presentaban ncleo y otras no. Esto permiti realizar una primera clasificacin entre los seres vivos.
Eucariontes (eukaryon, eu=verdadero, karyon=ncleo) Procariontes (pro=antes, karyon=ncleo)

Caractersticas de las clulas procariontes y eucariontes

La clula procarionte

Muy Diversos.

Unicelulares, aunque pueden formar asociaciones (cadenas, racimos, etc).


De unos pocos micrmetros de tamao (1-10 m). No presentan ncleo ni otros organelos membranosos, aunque muchas poseen una pared celular que les confiere proteccin extra.

Reproduccin muy rpida (20 min) por mecanismos asexual, fisin.

Estructuras presentes en clula procarionte


Pared celular (de peptidoglicano) Membrana plasmtica. Citoplasma. Nucleoide (organizacin del material gentico) Ribosomas. Adicionalmente tambin puede haber: Cpsula (deposito de alimentos, protege de desecacin, fagocitosis, adhesin a clulas animales del hospedero). FLagelo(s) (movimiento) Pili (conjugacin, reproduccin parasexual). Plsmido.

La clula procarionte
Poseen una qumica muy variada y pueden aprovechar una extensa gama de hbitat: Aerobios o Anaerobios. Organotrficos, litotrficos o fotosintticos. Pueden vivir en habitats muy variados (y algo exticos!)

Los procarionte se dividen en dos dominios: eubacterias y Archaea


Anlisis de los genomas y estudios moleculares de los procariontes han permitido establecer una clara divisin en dos dominios. Eubacterias y Archaea.

La clula eucarionte
Clulas complejas, presentan ncleo y organelos membranosos. Los organismos eucariontes pueden ser unicelulares (protistas, levaduras) o multicelulares (plantas, animales, hongos) Tamao vara ( clula animal tpica, diametro 20 m), ovocito (130 m)

La clula procarionte
Unicelulares bacterias Arqueas

La clula eucarionte
Unicelulares Protozoos Pluricelulares

La clula eucarionte
Organelos de las clulas eucariontes

La clula eucarionte
Organelos de las clulas eucariontes NUCLEO
Prominente Rodeado de 2 membranas concntricas que generan la envoltura nuclear Presentan nucleolo (sntesis de ribosomas) Contiene la informacin gentica (DNA)

nucleolo

La clula eucarionte
Organelos de las clulas eucariontes MITOCONDRIAS Doble membrana. Tiene su propio DNA. Reproduccin por biparticin. Generadores de energa qumica para las clulas. Oxidan molculas del alimento producen ATP (adenosina trifosfato) Consumen oxgeno y liberan dixidos de carbono RESPIRACIN CELULAR

La clula eucarionte
Origen endosimbionte de las mitocondrias

Evolucin de las clulas eucariontes

La clula eucarionte
Organelos de las clulas eucariontes RETCULO ENDOPLASMTICO

Laberinto irregular de espacios rodeados de membrana, tubos aplanados y sacos membranosos conectados. Sitio de sntesis de la mayora de los componentes de las membranas celulares, esteroles, fosfolpidos y triglicridos, destoxificacin, almacenaje de calcio, etc. Se sintetizan protenas destinadas a ser exportadas por la clula (ruta exoctica)

La clula eucarionte
Organelos de las clulas eucariontes APARATO DE GOLGI
Sacos membranosos aplanados. Reciben y modifican qumicamente las protenas sintetizadas en el ER y los enva hacia el exterior celular o hacia otras localizaciones dentro de la clula.

La clula eucarionte
Organelos de las clulas eucariontes PEROXISOMAS, LISOSOMAS Y VESCULAS
Peroxisomas Vesculas pequeas rodeadas de membrana Degradacin de reactivos qumicos peligrosos como el perxido de hidrgeno.
Lisosomas Son pequeos Digestin intracelular gracias a la presencia de enzimas. Liberacin de nutrientres y degradacin de productos de desecho.

Vesculas: Participan en el transporte de molculas entre los organelos (p.e. RE y Golgi), hacia el exterior celular (exocitosis) y en la importacin de molculas desde el exterior (endocitosis)

La clula eucarionte
Organelos de las clulas eucariontes CITOSOL
Compartimiento sencillo ms grande que forma un gel acuoso. Ocurren muchas reacciones qumicas fundamentales: 1 etapa lisis de nutrientes (glicolisis). Sntesis de protenas.

Tiene adems una gran variedad de filamentos proteicos, estructura interna, citoesqueleto.

La clula eucarionte
Citoesqueleto
Filamentos Finos: ACTINA . Ms abundantes en las clulas musculares puesto que constituyen la maquinaria que genera la fuerza contrctil. Forma y desplazamiento celular. (7nm) ILAMENTOS INTERMEDIOS. Sostn mecnico de la clula (rigidez) y sita sus organelos. (10 nm) Filamentos Gruesos: MICROTBULOS. Durante la divisin celular se reorganizan transportando los cromosomas duplicados en direcciones opuestas, distribuyndolos en las clulas hijas. Trasporte de vesculas y organelos.

Microfilamentos

Microtbulos

Filamentos Intermedios

7 nm

25 nm 10nm

Archaeas.

Fisin.

Mitosis

Membrana plasmtica

ribosomas

membrana nuclear

membrana plasmtica

Nucleoide (DNA)

Cmo se origin la primera clula?

Primeras molculas orgnicas


Experimento de Miller y Urey (1952)
Se intenta reproducir atmosfera primitiva: mezcla de gases inorgnicos (metano, amoniaco, CO y vapor de agua) descarga elctrica (rayo) se condensa la mezcla generada Se generan la mayora de las principales molculas orgnicas encontradas en todos los tipos de clulas.

Las membranas definieron la primera clula


Eventos cruciales en la formacin de la primera clula 3,5-4 millones de aos :
Molcula de RNA autoreplicante y autoperpetuante.

Formacin de los primeros pptidos gracias al RNA cataltico.


Ensamblaje de las molculas lipdicas formando membranas, permitieron la seleccin de protenas y RNA ms eficientes. Aparicin de DNA que reemplaza al RNA en la funcin de conservar informacin gentica.

Se plantea que todos los organismos vivos derivan de una clula primitiva muy simple generada hace ms de 3 mil millones de aos

Se deduce por investigacin paleontolgica, similitudes moleculares, bioqumicas, metablicas y genticas

Dominios proteicos altamente conservado entre diferentes especies

Protenas y dominios altamente conservados a lo largo de la evolucin demuestran la existencia de un ancestro comn.

Esta primera clula sera similar a los procariontes actuales de los cuales habran surgido los primeros eucariontes hace aprox. 1.500 millones

Volvox (colonia de algas unicelulares)


0,5 mm-20mm

Especializacin

5 m

Volvox es un buen ejemplo de un estado de organizacin intermedio entre organismos unicelulares y organismos pluricelulares mas complejo

Los organismo ms complejos no se formaron por aumento la complejidad de una sola clula sino que las clulas simples se agruparon, ordenaron y diferenciaron (partieron por especializarse)

Eucariontes

Procariontes

Niveles de organizacin biolgico

A medida que las clulas fueron evolucionando comenzaron a aumentar los niveles de complejidad.

La materia viva tiene una organizacin que es jerrquica.


Al aumentar el grado de complejidad de cada nivel, se desarrollan funciones que los niveles anteriores no pueden realizar. Cada nivel tiene sus correspondientes propiedades emergentes.

Niveles de organizacin
sistema

organismo
Poblacin

rgano
tejido

Comunidad

vida

Clula organelo molcula

Ecosistema

tomos

Qu caracterstica distinguen lo vivo de la materia no viva?


Caractersticas comunes de todos los seres vivos:
Orden
la vida es resultado de una organizacin qumica y molecular muy precisa y compleja, deben realizarse varias actividades coordinadas unas con otras.

Homeostasis

Conjunto de mecanismos que mantienen la estabilidad del medio interno de todo ser vivo utilizando energa.

Metabolismo

Los seres vivos extraen, transforman y usan energa de su entorno para mantener sus estructuras complejas y el orden interno.

Qu caracterstica distinguen lo vivo de la materia no viva?


Irritabilidad
Capacidad de responder frente a los estmulos o cambios (fsicos o qumicos) en el medio interno y externo.

Adaptacin evolutiva

Las condiciones ambientales cambian y los organismos vivos se adaptan a esos cambios para sobrevivir.

Reproduccin

Capacidad de autoreplicarse y perpetuarse. Reproduccin asexual o sexual.

Mtodo cientfico

Mtodo cientfico
El mtodo cientfico corresponde a la manera en que los cientficos elaboran nuevos conocimientos, consta de dos aspectos, un razonamiento lgico y de la experimentacin Observacin

Pregunta
Conocimiento y estudio del tema

Hiptesis

Construccin de nueva hiptesis

Se acepta la hiptesis como una respuesta vlida.

Predicciones y experimentacin para testear la hiptesis Anlisis de resultados y conclusiones

Hiptesis cierta

Se cumple prediccin

no se cumple prediccin

Hiptesis falsa