Está en la página 1de 2

Coloracin GIEMSA

Juego de soluciones para la coloracin de GIEMSA para microscopa






1/1 2007-08 Rev. 2

PRINCIPIO
El tpico color de los ncleos celulares, mayoritariamente rojo
prpura, se basa en la interaccin molecular entre eosina y un
complejo azur B ADN. Ambos colorantes forman el complejo. La
intensidad de la coloracin depende del contenido de azur B y de
la relacin entre azur B y eosina amarilla. El resultado de tincin
puede ser influido por diferentes factores como el valor del pH de
la solucin y de la solucin tampn, las substancias tampn
(amortiguadores), el tiempo de tincin y la fijacin.


CONTENIDOS

COLORANTE DE GIEMSA Listo para su uso
Azur eosina azul de metileno segn Giemsa 5 g/l
Glicerina 50%
Alcohol metlico R.A. 50%

BUFFER FOSFATADO GOTA GRUESA GIEMSA
-Listo para su uso
Di-Sodio hidrogenofosfato 12 H2O 14.02 g/l
Potasio Di-hidrogenofosfato 3.522 g/l
Agua desmineralizada tipo II cs

AZUL DE METILENO FOSFATADO Listo para su uso
Azul de Metileno R.A. 4 g/l
Di-sodio hidrogenofosfato anhidro 12 g/l
Potasio Di-hidrogenofosfato 4 g/l
Agua desmineralizada tipo II csp


CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Las soluciones deben almacenarse entre 15C y 30C y
protegidos de la luz. Despus de abierto el contenido
almacenado entre 15C y 30C y protegidos de la luz es
estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
Temperaturas inferiores a 15C puede precipitar co lorantes
de las soluciones colorantes.
Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.


PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS
La solucin R1 Colorante de Giemsa y la solucin R3 Azul de
Metileno Fosfatado son irritantes en contacto con piel, ojos y
mucosas.
La solucin R1 Colorante de Giemsa a causa del contenido
en metanol es txico e inflamable, por lo tanto se deben
tomar los cuidados requeridos para el manejo de productos
inflamables en el laboratorio.
Observe la simbologa en los rtulos de las soluciones.
Las soluciones usadas y las caducadas deben eliminarse
como desechos especiales, debiendo cumplir las
regulaciones locales para el desecho de compuestos
peligrosos.


MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO
SUMINISTRADOS
Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cubeta de tincin
Frasco lavador
Agua
Alcohol metlico
Cronometro y/o timer


MUESTRAS
Se deben usar lminas nuevas y prelavadas con alcohol de 96%
para quitar la grasa.
Se toman dos (2) lminas, una para la gota gruesa y la otra para
el extendido, se limpia el dedo del paciente con Alcohol, y deja
secar.
Se realiza la puncin, la primera gota se descarta y con las
lminas se recoge una sola gota en cada una de ellas. (No se
debe tocar la piel con la lmina). En una de las placas se hacen
movimientos circulares hasta alcanzar un dimetro de 1 cm para
la gota gruesa, en la otra lamina se hace un extendido delgado y
corto.

Toda muestra biolgica debe se considerada como
potencialmente infecciosa.


PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO GOTA GRUESA
1. Se deja secar la lamina durante 20 minutos.
2. Se deshemoglobiniza con Azul de Metileno Fosfatado,
sumergiendo la lamina por 5 segundos y se lava varias veces
con buffer fosfatado.
3. Se deja secar la lmina.
4. Realizar la Coloracin de Giemsa preparando 1 gota de
Colorante y 1 ml de Buffer (Aprox. 3 ml por cada lamina). Se
colorea la lmina 15 minutos boca abajo.
5. Se lava con agua del chorro y se deja secar.

PROCEDIMIENTO DEL EXTENDIDO
1. Se deja secar la lmina durante 10 minutos.
2. Se fija el extendido con alcohol metlico durante 3 a 5 minutos y
se deja secar.
3. Se realiza la Coloracin de Giemsa que se prepara 2 gotas de
Giemsa y 1 ml de Buffer Fosfatado (Aprox. 3 ml por cada
lmina).
4. Se colorea la lmina boca abajo durante 30 minutos y se lava
con agua del chorro y se deja secar.

LA GOTA GRUESA SE USA PARA VER LA CONCENTRACIN
DEL PARASITO Y EL EXTENDIDO PARA VER LA ESPECIE.


RESULTADO

Tipo de clula Resultado
Parsitos sanguneos ncleo rojo
citoplasma del protozoario azul
Linfocitos ncleo azul violeta
citoplasma azul
Monolitos ncleo (lobulado) azul violeta
citoplasma azul claro
Granulocitos neutrfilos ncleo azul oscuro
citoplasma rosa plido
grnulos tono rosado a azul claro
Granulocitos eosinfilos ncleo azul
citoplasma rosa plido
grnulos rojo ladrillo

Granulocitos basfilos ncleo purpura a azul oscuro
grnulos azul oscuro-negros
Trombocitos (Plaquetas) Azul
Eritrocitos rojizo


Coloracin GIEMSA
Juego de soluciones para la coloracin de GIEMSA para microscopa




2/2 2007-08 Rev. 2


CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad en la microscopia de extendidos sanguneos
depende directamente de la formacin y experiencia del
profesional que validara la calidad de los extendidos, coloracin,
etc.
El control debe realizarse incluyendo en cada proceso un
portaobjetos de control positivo.

NOTAS SOBRE EL EMPLEO

Los procedimientos de tincin indicados en el presente inserto
han dado resultados satisfactorios en nuestros laboratorios.
Las preferencias de color individuales pueden precisar ligeros
ajustes de los tiempos.
Agua altamente clorada puede debilitar la coloracin de
contraste.



BIBLIOGRAFA
1. Hematology: Principles and Procedures, Sixth Edition, Brown AB, Lea & Febiger,Philadelphia
1993 p101
2. Clark, George, Stains and staining (Microscopy), 4
th
edition, Williams & Wilkins, (1981).




ndice de Smbolos

Producto para
diagnstico
in-vitro

Referencia o
Cdigo

Pruebas
por Kit

Para usar
consulte las
instrucciones

Precaucin
Consultar las
instrucciones

Fabricante

Nmero de Lote

Fecha de
Caducidad

Fecha de
Fabricacin

Limite de
Temperatura

Riesgo Biolgico

ESPECIALIDADES DIAGNOSTICAS IHR Ltda.
PBX: +(2) 552 5444 / Calle 7 A No. 45-07 Santiago de Cali - Colombia
e-mail: servicioalcliente@ihrdiagnostica.com
www.ihrdiagnostica.com

También podría gustarte