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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA FACULTAD DE AGRONOMIA DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA

Ing. Amelia Wite Huaringa Joaqun Ing. Elas Hugo Huanuqueo Coca
La Molina, Julio 2011

INDICE

PRCTICA N 01: Organizacin de un programa de mejoramiento gentico de plantas ...................... 2 PRCTICA N 02: Sistemas de reproduccin de las plantas ................................................................. 77 PRCTICA N03: Reproduccin Asexual ............................................................................................... 12 PRCTICA N04: Bases de variacin en la poblacin .......................................................................... 15 PRCTICA N05: Determinacin de la variabilidad en una poblacin ................................................. 17 PRCTICA N06: Estimacin de la viabilidad polnica .......................................................................... 20 PRCTICA N07: Poblaciones en equilibrio Hardy-Weinberg ..22 PRCTICA N08: Biotecnologa vegetal ................................................................................................ 25 PRCTICA N09: Mutaciones ............................................................................................................... 26 PRCTICA N10: Recursos genticos vegetales ................................................................................... 29 PRCTICA N11: Tcnicas de polinizacin controlada en autgamas ................................................. 32 PRCTICA N12: Tcnicas de polinizacin controlada en algamas .................................................... 34 PRCTICA N13: Mtodos de mejoramiento gentico: Seleccin ....................................................... 36 PRCTICA N14: Planeamiento de experimentos ................................................................................ 43

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Prctica N 01 Organizacin de un programa de mejoramiento gentico de plantas


I. Importancia
Las instituciones que realizan actividades de mejoramiento gentico en el pas y el mundo son los centros internacionales como el Centro Internacional de la Papa en el Per, el Instituto Internacional de Investigaciones en Zonas ridas (ICARDA) en Siria, el Instituto Internacional de Investigaciones en Zonas Semi ridas (ICRISAT) en India, el Centro Internacional de Mejoramiento de Maz y Trigo (CIMMYT)en Mxico, el centro Internacional de la Papa (CIP) en el Per, el Centro Internacional de Agricultura Tropical(CIAT)en Cali Colombia, el Instituto Internacional de Agricultura Tropical(IITA)en Nigeria, el Instituto Internacional de Investigaciones en Arroz (IRRI) en Filipinas y Bioversity Internacional que est en Roma encargada de los recursos genticos, las universidades estatales, los consorcios internacionales como Monsanto, Pionner International, Agrognesis Negocios, etc. A nivel del pas se encuentra el Instituto Nacional de Innovacin Agraria (INIA) en sus estaciones experimentales que se encuentran en la costa, sierra y selva, y las universidades nacionales y privadas a travs de los institutos y programas de investigacin y proyeccin social. Para la organizacin de la mejora de plantas deben considerarse dos aspectos interdependientes: (1) La organizacin del trabajo del propio mejorador y (2) La estructuracin de la labor de mejora de plantas en cuanto a actividad bsica en la agricultura moderna. En la actualidad el trabajo del mejorador se realiza en equipo. El fitogenetista o mejorador se encuentra apoyado por agrnomos, fisilogos, fitopatlogos, entomlogos, bilogos moleculares, estadsticos, nutricionistas, meteorlogos, etc. El mejorador es elemento clave en tal equipo puesto que debe ser l quien trace las lneas fundamentales de accin, esto es, los objetivos del programa y los problemas a resolver. El mejorador es el elemento crucial y central en las operaciones que conducen a la obtencin de una nueva variedad. Un plan de mejora puede ser muy simple y sin embargo el punto crtico a resolver puede caer lejos del conocimiento profesional del mejorador, por ejemplo, un problema de fisiologa vegetal, de diseo estadstico etc. Es evidente que el mejorador debe estar familiarizado con las diversas tcnicas que estn implicadas en el trabajo. Su responsabilidad consiste en detectar problemas y decidir el sistema de mejora idnea, pero con el convencimiento que eso no es condicin suficiente para lograr el xito. Fases para la elaboracin de un plan de mejora gentica:

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1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Estudio detallado del problema a resolver. Fijar el tipo de planta que se precisa. Inventario del material existente. Decisin sobre el plan de mejora a seguir. Ejecucin del plan. Obtencin de un nuevo cultivar. Produccin de semilla.

Ejemplo de un programa de mejora gentica por hibridacin: El mejoramiento gentico realizado por hibridacin se utiliza cuando se desea introducir genes que condicionan caracteres como resistencia, calidad, alto contenido proteico en la variedad criolla o variedad que utiliza en agricultor, el proceso se puede realizar en cuatro fases: Estado Estado Estado Estado I: Planeamiento e hibridizacin (Mejora) II: Evaluacin de generaciones tempranas (Seleccin) III: Evaluacin de lneas (Evaluacin) IV: Lanzamiento de la variedad (Liberacin)

Los problemas difciles y mayormente no resueltos del mejoramiento de plantas caen en los primeros dos estados. En el estado I son como sigue: 1. El alineamiento y la sincronizacin de los objetivos y los procedimientos. 2. La escogencia de los parentales. 3. El apropiado uso de los recursos del germoplasma. 4. La escogencia de los mtodos de mejoramiento. 5. La evaluacin de la prediccin de la informacin disponible de la habilidad del parental y del valor de la poblacin de hbridos diferentes. 6. La eficiencia de la hibridacin y el nmero de cruzas a realizar. En el estado II se evala las generaciones F2, F3 y F4, seleccionando las familias con caracteres recombinados. En el estado III las mejores familias promisorias en ambientes usando diseos experimentales. En el estado IV se instala en campos de agricultores para la validacin con variedades comerciales, se hacen das de campo y con semilla comercial y los trpticos o manuales se lanza la variedad o cultivar.

II. Objetivos
1. Familiarizar al estudiante con las actividades que realizan dentro de un Programa de Investigacin en la UNALM mediante una visita Pgina 3

guiada a la dependencia. 2. Describir la organizacin de un programa de mejoramiento gentico en una especie vegetal para un caso. 3. Realizar un listado de la estructura gentica de los cultivares formados por mejoramiento gentico.

III. Materiales
. . . Diapositivas en power point. Exposicin del tema de prctica. Boletn informativo de un Programa de Investigacin y Proyeccin Social (PIPS) de la Universidad Nacional Agraria La Molina (UNALM).

IV. Procedimiento
1. Realizar visita guiada a un programa de investigacin de la UNALM. 2. Exposicin de la organizacin de un programa de investigacin de la UNALM impartida por un personal responsable del PIPS.

V.

Cuestionario
1. Visite la pgina web de un centro internacional, en ella investigue los cultivos con la que trabaja y cul es la contribucin al desarrollo agrcola mundial. www.africaricecenter.org www.bioversityinternational.org www.ciat.cgiar.org www.cimmyt.org www.cipotato.org www.icarda.org www.icrisat.org www.iita.org www.irri.org

2. Liste las variedades mejoradas por el programa de mejoramiento gentico de la UNALM. Cul es la naturaleza genotpica de esta y mencione los caracteres modificados genticamente.

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3. Complete el siguiente cuadro:

PIPS: Creacin: Cultivos: REAS DE INVESTIGACIN Mejoramiento Gentico N Integrantes/rea Laboratorio Mejoramiento Germoplasma Agronmico Semillero Estudios Especiales

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VI. Bibliografa
1. Acquaah, G. 2007. Principles of plant genetic and breeding. Blackwell Publishing Oxford U.K. 569 p. 2. Allard, R.W. 1978. Principios de la mejora gentica de las plantas. Omega, Barcelona. 3. Chopra, V.L. 2000. Plant breeding. Theory and Practice. Oxford & IBH Publishing Co. Pvt. Ltd. New Delhi, Calcutta. 490 p. 4. Cubero, J.I. 2003. Introduccin a la mejora gentica vegetal. Segunda edicin. Ediciones Mundi-Prensa. Madrid, 567 p 5. Poehlman. J.M. 2003. Mejoramiento gentico de las cosechas. Mxico, D.F. 6. Robles S. Ral. 1986. Gentica elemental y Fitomejoramiento prctico. Editorial LIMUSA, S.A. de C. V. Mxico D.F. 477 p. 7. Vallejo, C. F. y Estrada, S. E. 1992. Fundamentos genticos del mejoramiento vegetal. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias Agropecuarias Palmira. 169 p. 8. http://www.actionbioscience.org/esp/genomica/soltis.html. Soltis, P. Curadora del Laboratorio de Sistemtica Molecular y Gentica Evolucionaria en la Universidad de la Florida, en Gainesville. Plantas con Flores: Claves para la Evolucin de la Tierra y Para el Bienestar Humano.

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Prctica N 02 Sistemas de reproduccin de las plantas


I. Introduccin
La reproduccin en plantas implica la formacin de clulas germinales y unin de gametos. El conocimiento de las formas de reproduccin de las plantas cultivadas es fundamental para la aplicacin de las tcnicas y mtodos de mejoramiento. Si se conoce la forma de reproduccin de una especie, se puede conocer la composicin de la poblacin en las especies cultivadas, o sea si estn formadas por individuos homocigotos o heterocigotos; el grado de variabilidad gentica de la poblacin; el tipo de variancia gentica; el efecto de la endocra o heterosis. Las poblaciones autgamas se caracterizan porque los individuos son homocigotos, las poblaciones pueden ser homogneas o heterogneas, pero si han estado sujetas a seleccin, generalmente son homogneas. Mientas que en las poblaciones algamas los individuos son heterocigotas y la poblacin es generalmente muy heterognea. La variabilidad gentica es generalmente muy alta, la endocra produce generalmente prdida de vigor.

Perpetuacin de las especies por reproduccin sexual

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Clasificacin de las plantas segn por su sistema de reproduccin Algamas


Abetos (Abies spp.)

Autgamas
Ajonjol (Sesamun oficinale L.)

Alfala (Medicago sativa L.) Algodn (Gossypium barbadense L., G. spp.) Calabaza (Cucurbita spp.) Cebolla (Allium cepa L.) Coco (Coccus nucifera L.)

Arroz (Oryza sativa L.) Avena (Avena sativa L.)

Caf (Coffea arbiga L.) Man (Arachis hipogea L.) Cebada (Hordeum vulgare L.) Frijol comn, juda (Phaseolus vulgaris L.) Ctricos (Citrus spp.)

Frijol ayocote (Phaseolus coccineus L.) Girasol L.) (Helianthus annuun

Higuerilla (Ricinus comunis L.) Maz (Zea mays L.) Manzano (Malus spp.)

Durazno (Prunus persica L.)

Arveja (Pisum sativum L.) Garbanzo (Cicer arietinum L.) Lino (Linum usitatissimun L.) Soya (Glycine max L.) Tabaco (Nicotiana tabacum L.)

Meln (Cucumis melo L.) Peral (Pyrus spp.) Sanda (Citrullus vulgaris L.) Zanahoria (Daucus carota L.)

Tomate (Lycopersicum esculentum L.) Lenteja (Lens culinaris L.) Trbol (Trifolium spp.) Aj (Capsicum spp.)

Papayo

(Carica papaya L..)

Cacao (Theobroma cacao L.) Remolacha L.) ( Beta vulgaris

Lpulo (Humulus lupulus L.) Esprrago (Asparagus officinale L.)

Pimiento (Capsicum annuun L.) Pallar (Phaseolus lunatus L.)

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II.Objetivos:
1. Describir la morfologa floral de las especies cultivadas. 2. Clasificar a las plantas segn el sistema de polinizacin, los tipos de flores y la produccin de semilla por planta. 3. Revisar el nmero cromosmico de la especie mecanismos reguladores de fertilidad en la especie. y los

III. Materiales:
. Material vegetal (botn floral, flor, fruto y semillas de diferentes especies cultivadas) . Lupas (10X) . Pinza . Tijeras, Bistur . Lpiz, colores

V.

Procedimiento
1. El estudiante debe realizar un examen minucioso de muestras de flores de plantas alimenticias asignadas. las

2. Describir las partes del botn floral, la flor, el fruto y la semilla de cada muestra y diferenciar los verticilos florales en cada caso. 3. Dibujar las estructuras de la flor. 4. Determine el diagrama floral de las especies examinadas. 5. Completar el siguiente cuadro segn el desarrollo de la prctica.

VI.

Bibliografa
1. Cubero, J.I. 2003. Introduccin a la mejora gentica vegetal. Segunda edicin, Ediciones Mundi-Prensa. Madrid, 567 p. 2. Poehlman, J. M. y Sleeper, D. A. 2003. Mejoramiento gentico de las cosechas. Editorial Limusa, S. A. grupo Noriega Editores. Mxico, 511 pg. 3. Richards, J. 1996. Breeding systems in flowering plants

and the control (3): 283-293.


4. Richards, A.J.

of variability
1997. Plant

Folia Geobotnica 31
Garland

Breeding Systems.

Pgina 9

Science

544 pag.

Pgina 10

Completar el siguiente cuadro segn el desarrollo de la prctica.


Nombre Mecanismos Tipo de planta Tipo de flores Semillas cientfico N de Flores Flores en reguladores Familia por de la Cromosomas Autgama Algama Masculina Femenina Hermafrodita solitarias infloresc. de la fruto especie fertilidad

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Prctica N 03 Reproduccin asexual


I. Introduccin
Reproduccin asexual: proceso de multiplicacin en el que no hay unin de gametos y toda la progenie de una planta reproducida asexualmente constituye un clon. La principal consecuencia de la reproduccin asexual es que no hay segregacin, o sea todos los individuos progenie de una planta que se reproduce asexualmente son genticamente iguales y el conjunto se denomina clon. Todas las plantas que forman un clon son idnticas en herencia y tienen las caractersticas de la planta original.

II. Objetivos
1. Conocer y describir los rganos vegetativos especializados: Rizomas, Tubrculos, Bulbos, etc. 2. Conocer y describir los rganos vegetativos no especializados: Esquejes, Rama, Yema, etc. 3. Analizar las ventajas y desventajas de la reproduccin asexual. Pgina 12

III. Materiales
. Material vegetal (rizoma, tubrculo, bulbo, esquejes, etc. de diferentes especies cultivadas) . Lupas (10X) . Pinza . Tijeras . Lpiz, colores . Bistur . Ambiente de propagacin . Plantas madre productor de patrones y de yemas . Ambiente de micropropagacin

IV. Procedimiento
1. Realice un examen minucioso de las muestras. 2. Describa las vegetativos. partes internas y externas de los rganos

3. Dibujar las estructuras de los rganos vegetativos. 4. Buscar el nmero de cromosomas (indicando el nivel de ploida), as mismo, indagar si presenta reproduccin sexual, adems de la asexual y si en la reproduccin sexual es algama o autgama. 5. Investigar cultivada sobre el ndice reproductivo de la con la que trabajo en la prctica. especie

V.

Bibliografa
1. Chopra, V.L. 2000. Plant breeding . Theory and Practice. Oxford & IBH Publishing Co. Pvt. Ltd. New Delhi, Calcutta. 490 p. 2. Cubero, J.I. 2003. Introduccin a la mejora gentica vegetal. Segunda edicin. Ediciones Mundi-Prensa. Madrid,567 p. 3. Robles S. Ral. 1986. Gentica elemental y Fitomejoramiento prctico. Editorial LIMUSA, S.A. de C.V. Mxico D.F. 477 p.

4. Richards, J. 1996. Breeding systems in flowering plants


and the control of variability Folia Geobotnica 31(3): 283-293. Richards, A.J. Science 1997. Plant Breeding Systems. Garland 544 pag.

http://redalyc.uaemex.mx/pdf/613/61312094003.pdf. - Apomixis y su importancia en la seleccin y el mejoramiento de gramneas forrajeras tropicales. Revisin. Tec. Pecu Meex.2010;
48(1): 25.

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Completar el siguiente cuadro segn el desarrollo de la prctica.


Nombre Mecanismos Tipo de planta Tipo de flores Problemas de cientfico N de Flores Flores en Semillas reguladores Formas de Familia degeneracin de la cromosomas Autgama Algama Masculina Femenina Hermaf. solitarias infloresc. por fruto de la propagacin varietal especie fertilidad Tcnicas de limpieza

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Prctica N 04 Bases de variacin en la poblacin


I. Introduccin
La variabilidad gentica es la fuente importante para obtener ganancias en el programa de mejoramiento gentico de los cultivos y sta se origina por las recombinaciones genticas producto de la hibridacin, por las mutaciones naturales e inducidas y por la poliploidizacin natural y dirigida. La variabilidad es un hecho esencial en los seres vivientes y las plantas que se reproducen sexualmente pueden generar nuevas estirpes. Por ello se dice que no existe en la naturaleza dos organismos que sean exactamente iguales. Las diferencias pueden tener causas genticas o ambientales. Los individuos pertenecientes a una misma familia o a una misma poblacin pueden ser genticamente iguales, como los gemelos idnticos, individuos de un mismo clon o una misma lnea pura; sin embargo, a pesar de ser genticamente iguales no son exactamente similares en apariencia, debido a causas ambientales. La variacin fenotpica total se descompone en tres efectos, los cuales se muestran a continuacin: Vf = Vg + Va + Vgxa

El fenotipo es la expresin de un determinado carcter en un medio dado debido a los efectos de Vg, Va y Vgxa. El genotipo es la expresin o carga gentica del individuo (es intrnseco), El ambiente influye con efectos diversos en los caracteres de las plantas.

II. Objetivos
1. Describir el fenotipo de las poblaciones de cultivadas visitadas en el campus de la UNALM. 2. Definir los componentes de la variacin fenotpica. 3. Conocer las causas de la variacin fenotpica: variacin hereditaria y variacin ambiental. 4. Conocer la importancia de la variacin mejoramiento gentico de plantas. gentica en el especies

III. Materiales
. . . . Gua de la prctica Muestra de semilla o de frutos de variedades diferentes de una especie Campo de cultivo Parcelas experimentales con varios genotipos Pgina 15

Parcela comercial con un solo genotipo.

IV. Procedimiento
Visitar las parcelas de experimentacin, parcelas de cultivos diversos en la que se observe la variacin fenotpica (Vf), variacin gentica (Vg), variacin ambiental(Va) y variacin de la interaccin genotipo medioambiente (Vga) de los caracteres de las plantas en campos de la UNALM.

V.

Cuestionario:
1. De la variacin fenotpica total Vf = Vg + Va + Vgxa, Qu componente cree usted sea de mayor utilidad para el mejorador de plantas? 2. Qu importancia tiene la variabilidad gentica en el mejoramiento de plantas? 3. Cmo saber si la variacin fenotpica observada se debe a la variacin ambiental o a la variacin gentica?

VI.

Bibliografa
1. Allard, R.W. 1978. Principios de la mejora gentica de las plantas. Omega, Barcelona. 2. Cubero, J.I. 2003. Introduccin a la mejora gentica vegetal. Segunda edicin . Ediciones Mundi-Prensa. Madrid, 567 p 3. Poehlman. J.M. 2003. Mejoramiento gentico de las cosechas. Mxico, D.F. 4. Robles S. Ral. 1986. Gentica elemental y Fitomejoramiento prctico. Editorial LIMUSA , S.A. de C. V. Mxico D.F. 477 p. 5. Vallejo, C. F. y Estrada, S. E. 1992. Fundamentos genticos del mejoramiento vegetal. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias Agropecuarias Palmira. 169 p. 6. http://www.actionbioscience.org/esp/genomica/soltis.html.
7. http://www.infoagro.com/agricultura_ecologica/mejora_genetic

a_plantas.

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Completar el siguiente cuadro segn el desarrollo de la prctica.

Campo Experimental

Especie

Carcter

Variacin Gentica Ambiental G x A

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Prctica N 05 Determinacin de la variabilidad en una poblacin


I. Introduccin
La diversidad gentica de una especie est constituida por todas las variaciones genticas, producto de la diferencia de las especies. No debemos confundir la diversidad gentica con la variabilidad gentica, que es caracterstica de poblaciones dentro de una especie. La variacin entre poblaciones de una especie, ms la variacin dentro de poblaciones es la diversidad gentica total de una especie. Todas las variaciones (caractersticas) se pueden cuantificar. Si no hay variacin gentica para una caracterstica dentro de una poblacin, el carcter no puede ser modificado por seleccin. Altura de planta y mazorca: Las observaciones para estos dos caracteres se efectuarn despus de haberse completado la floracin en todas las parcelas. Se evala tomando la altura de planta o la altura de mazorca en promedio de 10 plantas por parcela de 10 golpes en completa competencia elegidos al azar. La altura de planta se registrar midiendo desde la base de la planta hasta el punto de nacimiento de la panoja; y la altura de mazorca desde la base de la planta hasta el nudo donde nace la mazorca superior, ambos valores se expresan en centmetros.

II. Objetivos
Determinar la variabilidad de una poblacin de plantas de maz, en base a sus caracteres cualitativos y cuantitativos.

III. Materiales
Poblacin de una variedad de maz. Muestreo de 60 plantas de maz tomadas al azar Regla graduada de tres metros. Libreta de apuntes Caracteres cualitativos y cuantitativos.

IV. Procedimiento.
1. Tomar datos de una poblacin de 60 plantas de maz. Caractersticas a evaluar: 1.1 Altura de planta 1.2 Altura de mazorca 1.3 Nmero de mazorcas por planta 1.4 Color del tallo 1.5 Color de la panoja 2. Para cada caracterstica cuantitativa evaluada se obtendr: 2.1 Tabla de frecuencias. 2.1 Histogramas de las frecuencias. 2.3 Polgono de frecuencias. Pgina 18

V.

Cuestionario

1. Calcule la media, rango, desviacin estndar y coeficiente de variabilidad para los caracteres cuantitativos.. 2. Cul ser el nmero de plantas inferiores a la media menos 1 desviacin estndar para altura de planta. 3. Determine el nmero de plantas inferiores a la media menos 2 desviaciones estndar para altura de mazorca. 4. Hall el nmero de plantas superiores a las medias ms 2 desviaciones estndar para nmero de mazorcas por planta. 5. Establecer el nmero de clases para los caracteres cualitativos (color del tallo y el color de la panoja). 6. Qu importancia tiene la variabilidad gentica en el mejoramiento gentico de las plantas?

VI. Bibliografa
1. Allard, R.W. 1978. Principios de la mejora gentica de las plantas. Omega, Barcelona. 2. Cubero, J.I. 2003. Introduccin a la mejora gentica vegetal. Segunda edicin. Ediciones Mundi-Prensa. Madrid, 567 p 3. Robles S. Ral. 1986. Gentica elemental y Fitomejoramiento prctico. Editorial LIMUSA, S.A. de C. V. Mxico D.F. 477 p. 4. Poehlman. J.M. 2003. Mejoramiento gentico de las cosechas. Mxico, D.F. 5. Vallejo, C. F. y Estrada, S. E. 1992. Fundamentos genticos del mejoramiento vegetal. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias Agropecuarias Palmira. 169 p. 6. http://www.actionbioscience.org/esp/genomica/soltis.html.Pla ntas con Flores: Claves para la Evolucin de la Tierra y Para el Bienestar Humano.

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Prctica N 06 Estimacin de la viabilidad polnica

I.

Introduccin

Las hibridaciones constituyen una va para la generacin de la variabilidad. El xito de las hibridaciones est determinado por la funcionalidad de los rganos reproductivos tanto masculino (grano de polen) como femenino (vulo). Los mejoradores utilizan las hibridaciones artificiales para controlar y generar caracteres deseables en un genotipo seleccionado. Es entonces, importante asegurar que el grano de polen este viable y que el estigma este receptivo para que haya xito en las hibridaciones. Existen distintos mtodos para determinar la viabilidad del polen, de los cuales uno de ellos, el mtodo de tincin, ser el mtodo desarrollado en la prctica.

II.

Objetivos
1. Familiarizar con la tcnica de determinacin de la viabilidad del polen. 2. Reconocer las partes del grano de polen. 3. Diferenciar morfolgicamente los granos de polen de las especies utilizadas en la prctica. 4. Determinar la viabilidad del polen por el mtodo de tincin.

III. Materiales
. . . . . Material vegetal: Botones florales flores de cuatro o ms especies cultivadas. Aceto carmn al 4%, Lacto- propinico- orcena o Aceto orcena. Porta y cubre objetos. Placas petri. Microscopio electrnico.

IV. Procedimiento
Tincin de los granos de polen . . . Colectar flores abiertas en placas petri. Colocar el grano de polen en un porta objeto, agregar una gota de aceto carmn y poner un cubre objeto y dejar a T ambiente. Realizar la evaluacin contando el nmero de polen teido Pgina 20

y no teido en unos 5 campos pticos por cada flor, en un microscopio a un aumento de 100X a 400X. Se considera que los granos bien formados y teidos son frtiles o por lo menos son viables, y los granos deformes y no teidos son estriles. Se expresa en %.

IV. Cuestionario
1. Determinar el porcentaje de granos de polen viable. 2. Explicar las causas y consecuencias de su resultado. 3. Qu importancia tiene conocer la viabilidad del polen en el mejoramiento de plantas. 4. Dibujar los granos de polen de las especies utilizadas.

V.

Bibliografa
1. Agronegocios Gnesis. Catlogo de productos. Disponible en: http://www.agrogenesis.com/cat_variedades?v=2 2. Basso, C; Jauregui, D; Melendez, L; Parz, J.(2006). Cantidad, viabilidad y germinabilidad de los granos de polen de Carica papaya L. Quantity, viability and germinability of pollen grains in Carica papaya L. Caracas: Revista de la Facultad de Agronoma. Disponible en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S037878182006000200004&script=sci_arttext. 3. Benitez, R. Prueba de purezas y viabilidad de semillas de un grupo de especies forrajeras. Disponible en: http://books.google.com.pe/books?id=vVu3zrbZKacC&pg=RA1PA93IA1&dq=viabilidad+en+semillas&hl=es&ei=XE4JToTuCcK9tgfUg5SGA Q&sa=X&oi=book_result&ct=bookthumbnail&resnum=2&ved=0CC8Q6wEwAQ#v=onepage&q=viabilidad%20 en%20semillas&f=false 4. Guarn, S; ustes, C; Ospina, J. (1998). Evaluacin de la fertilidad masculina en 81 genotipos de la coleccin colombiana de Solanum phureja.Colombia. Revista Agronoma Colombiana, Volumen XV - No. 1, Pg.. 49- 57. Disponible en: http://revistas.unal.edu.co/index.php/agrocol/article/viewFi le/21495/22486 5. Guerrero, V.(2005) Polinizacin y Otros Aspectos de la Misma en Manzano. Disponible en: http://www.ciad.mx/boletin/marabr05/articulo.pdf 6. INIA (2003). Boletn I. Lima. Disponible en: http://www.inia.gob.pe/PUBLICACIONES/BoletinesII/bii_1.pdf Pgina 21

http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=18031 6951009

Prctica N 07 Poblaciones en equilibrio Hardy-Weinberg


I. Introduccin

Tambin es conocida como ley del equilibrio gentico, y mediante un conjunto de frmulas matemticas describen cmo una proporcin de genes permanecen sin cambios a lo largo del tiempo en una poblacin numerosa de individuos. Sus autores son: el matemtico britnico Godfrey Harold Hardy y el mdico Wilhelm Weinberg. Esta ley establece la frecuencia con la que determinados alelos y genotipos deberan aparecer en una poblacin. Mediante un estudio de estos cambios allicos y genotpicos se pueden saber si una poblacin est cambiando genticamente o evolucionando e incluso predecir la presencia de anomalas en las poblaciones. De acuerdo a esta ley, para lograr el equilibrio, una poblacin debe cumplir cuatro requisitos, los cuales son: 1. Los individuos deben seleccionar parejas al azar con independencia de los fenotipos. 2. Ningn genotipo puede verse favorecido en una poblacin. 3. No pueden introducirse alelos nuevos en la poblacin, sean procedentes de individuos externos o por consecuencia de una mutacin. 4. El nmero de individuos y genotipos en la poblacin debe permanecer elevado. Sin embargo, la mayora de las poblaciones no mantiene un equilibrio gentico, esto puede deberse a la mutacin genticas, deriva gnica (perdida de un alelo en una poblacin al azar), a la migracin o a la disminucin en el tamao de la poblacin. Todos estos factores pueden darse de una manera natural, con excepcin de las mutaciones, que tambin se producen por exposicin a sustancias qumicas y a materiales radioactivos. La frecuencia gnica se refiere a las proporciones que tienen los diferentes alelos en el pool gentico de una poblacin que se reproduce. La frecuencia genotpica se refiere a las proporciones de los diferentes genotipos en la poblacin. En los cultivos de polinizacin cruzada, el pool gentico es compartido por las plantas de la poblacin. La frecuencia relativa que tiene un gen en particular es determinada a partir del nmero de individuos que existen en la poblacin y los genotipos de estos. Una poblacin de plantas est compuesta por genotipos y de acuerdo a la planta si es autgama o algama los individuos que la conforman

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expresan genotipos definidos. Segn Mendel cuando el carcter es monognico los genotipos pueden homocigoto dominante, heterocigoto y homocigota recesivo. Las poblaciones de plantas autgamas pueden tener los genotipos AA aa mientras que las poblaciones algamas los genotipos son Aa. Si los genotipos presente en poblaciones algamas determinar cul ser la frecuencia del los gametos. se debe

Una poblacin, segn Hardy y Weinberg se mantiene en equilibrio si se cumplen las asunciones siguientes: la poblacin es grande, la especie es diploide, no hay seleccin, no hay mutacin, apareamiento es en pammixia o al azar, no hay deriva gentica y no hay migracin la poblacin se mantiene en equilibrio y las frecuencias gnicas y genotpicas se mantienen constantes. La poblacin est constituida por el binomio (p + q)2 y los genotipos p2 + 2pq + q2 representados por las letras P H y Q respectivamente. La frecuencia de los genes son las letras minsculas p para el gen dominante y q para el gen recesivo. Las frecuencias de los genotipos P + H +Q = 1 y los gametos p + q = 1.

Cuando se realiza la seleccin la frecuencia del gen se modifica y se incrementa el valor del gen del carcter involucrado.

II. Objetivo
1. Lograr la comprensin de los principios que determinan la frecuencia de genes y los cambios de sus frecuencias en las poblaciones de plantas. 2. Hallar los clculos en los ejercicios planteados.

III. Materiales
. . . . Gua de prcticas. Ejercicios de frecuencia de genes. Tiza y pizarra. Campo de cultivo con sintomatologas de enfermedades y/o diferentes tipos de crecimiento de las plantas que se comportan como precoces, semitardas o tardas.

IV. Procedimiento
1. Resolver los problemas. 2. Registrar el nmero de genotipos susceptible a la enfermedad en el campo de cultivo. Si el carcter susceptibilidad es gobernado por un par de genes y el gen recesivo expresa reaccin de susceptibilidad. Pgina 23

3. Calcular la frecuencia gnica y genotpica del caso anterior.

V.

Ejercicios
a gentica de

Desarrollo de ejercicios en aula, referente poblaciones, cambio en la frecuencia de genes.

Problema 1: El carcter color de las flores en Boca de Dragn est gobernado por un gen con dos formas allicas en las que hay dominancia intermedia. De un total de 300 plantas: 60 tenan flores rojas (A1A1), 180 flores rosadas (A1A2) y 60 flores blancas (A2A2). En esta poblacin: (a) Calcule las frecuencias de los alelos A1 y A2. (b) Calcule las frecuencias de los genotipos A1A1, A1A2 y A2A2. (c) Compruebe si la poblacin est en equilibrio Hardy Weinberg. Problema 2: Una poblacin de plantas de arveja tiene flores moradas y flores blancas. El carcter est controlado por un gen con dos alelos con dominancia completa. Si el 84% de plantas tienen flores moradas y asumiendo que la poblacin est en equilibrio, determinar: (a) Frecuencias allica, (b) Frecuencias genotpicas. Problema 3: En una poblacin de plantas existe un locus autosmico diploide con tres alelos con las siguientes reacciones a la presencia del virus: YI = Inmune, YH = Hipersensible y YS = Susceptible. YI > (YH, YS), YH > YS. Asumir una muestra aleatoria de 2000 individuos que luego de ser tamizados segregaron de la siguiente manera: 424 inmunes, 588 hipersensibles y 988 susceptibles. (a) Calcule las frecuencias gnicas. (b) Calcule las frecuencias genotpicas y fenotpicas despus del apareamiento aleatorio.

VI. Bibliografa
1. Brauer, H..O. 1973. Fitogentica aplicada.Limusa, s.a. Mexico, D.F.Publications. 2. Brigss, F.N. and P.F. Knowles. 1967. Introduction to plant breeding, reinhold publishing corporation. 3. Brauer H., oscar. Fitogentica aplicada: los conocimientos de la herencia vegetal, al servicio de la humanidad. Mexico. Limusa 4. Falconer, D.C. 1974. Introduccin a la gentica cuantitativa. Continental, Mxico. Pgina 24

5. Marquez, S. F. 1985. Genotecnia vegetal: Mtodos, teora y resultados. Editor. Mxico, Tomo I y II. 6. Pohelman, J. M. & Sleper, D.A. 1995. Breeding Field Crops. Four Edition. Iowa State University Pres/Ames. 494 pg. 7. http://mx.encarta.msn.com/encyclopedia_1121507050/HardyWeinberg.html.

Prctica N 08 Biotecnologa vegetal


I. Introduccin

las plantas son el cultivo de anteras, el rescate de embriones La biotecnologa agrcola se refiere a la manipulacin gentica de organismos para propsitos especficos al nivel molecular, directamente involucrando el ADN. La tecnologa revolucionaria de ADN recombinante (rDNA) con el cual los investigadores son capaces de transferir genes de cualquier organismo a otro ofrece una oportunidad para solucionar problemas del desarrollo agrcola. Los cultivares actuales han alcanzado altos niveles de rendimiento por medio de sistemas refinados de mejoramiento gentico por hibridacin y seleccin que ponen juntas combinaciones multignicas para el rendimiento de toda la planta. Estos mtodos de mejoramiento continuarn siendo la fuente bsica de los cultivares de alto rendimiento, si bien este carcter puede ser enriquecido aun ms por transformacin mediante los nuevos procedimientos biotecnolgicos, en esta direccin, la gentica molecular propone llevar al fitomejoramiento a un nivel de refinamiento aun mayor. Los marcadores que los mejoradores utilizan en su labor son los marcadores morfolgicos, los marcadores bioqumicos y los marcadores moleculares. Los marcadores moleculares que se utilizan son: RFLPs (Polimorfismo longitudinal de los fragmentos de restriccin),RAPDs (ADN polimrfico amplificado al azar), AFLPs (Polimorfismos longitudinales de fragmentos amplificados), SSRs (secuencias simples repetidas - microsatlites) entre otros, que se utiliza para conocer el nivel de polimorfismo en las accesiones de germoplasma, estudios de diversidad gentica. El marcador tambin se utiliza en la seleccin asistida en el proceso del mejoramiento gentico. Entre las aplicaciones de la biotecnologa al mejoramiento gentico se tienen otras herramientas biotecnolgicas como el cultivo de anteras para la obtencin de dobles haploide y el rescate de embriones cuando se realizan hibridaciones interespecficas entre acervos genticos ms distantes secundarios y terciarios. Tambin es muy utilizado el cultivo de meristemas para la obtencin de plantas libres de virus y por la multiplicacin rpida se puede generar mayor semilla para la instalacin de los cultivos comerciales con un alto potencial de rendimiento.

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II. Objetivos:
1. Familiarizar al estudiante con las tcnicas biotecnolgicos. 2. Conocer la importancia de la biotecnologa vegetal en el mejoramiento gentico de plantas. 3. Listar las investigaciones que realiza el Instituto de Biotecnologa de la UNALM y con que propsitos. 4. Conocer la utilizacin del marcador RAPDs y AFLP en obtencin de un marcador molecular.

III. Materiales
. . . . Laboratorio Equipos del Reactivos y Fotografas del Instituto de Biotecnologa-UNALM. laboratorio. muestras de tejido vegetal. de geles.

IV. Procedimiento
1. Visitar las instalaciones del Instituto de Biotecnologa de la UNALM. 2. Identificar las actividades que se desarrollar cuando se utiliza el marcador AFLP para evaluar el germoplasma de yn a especie cultivada.: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. V. Extraccin DNA Calidad de DNA PCR Pre amplificacin Amplificacin Electroforesis Anlisis de Polimorfismo

Cuestionario
1. Cules son las aplicaciones de la biotecnologa en la mejora gentica? 2. Seale las ventajas y desventajas del mejoramiento gentico convencional y el mejoramiento gentico moderno que usa como herramienta la biotecnologa?

VI. Bibliografa:
1. Ferreira, M. & D. Grattapaglia., 1998. Introduccin al uso de marcadores moleculares en el anlisis gentico, W Ed. Brasilia: EMBRAPA-CENARGEN.220p. Fisher, R.A. 1984. A quantitative theory of genetic recombination and chiasma formation. Biometrics. 4, 1-13. Roca, W. y Mroginski 1991. Cultivo de tejidos en la aagricultura. Fundamentos y aplicaciones. Centro Internacional de Agricultura Tropical Publicacin N 151, 969 p.

2. 3.

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Prctica N 09 Mutaciones
I. Introduccin
Desde los aos 1960 se han liberado en todo el mundo mas de 2250 variedades derivadas directamente como mutantes o a partir de cruzas con mutantes. En muchas variedades derivadas por mutacin, las caractersticas cambiadas han resultado en un efecto sinrgico, mejorando la calidad y el valor agronmico. Muchos mutantes han tenido un impacto a nivel internacional por el incremento del rendimiento y la calidad en cultivos propagados por semilla. Las mutaciones naturales se presentan en bajas tasas y el incremento de mutantes se puede realizar mediante el uso de mutgenos tanto fsicos como qumicos. Entre los agentes fsicos destacan los rayos x, rayos gamma, cobalto radiactivo, radioistopos, las radiaciones csmicas, radiaciones ultravioleta, neutrones, partculas alfa y beta, etc. y, entre los agentes qumicos est el gas mostaza, la colchicina, el etil metil sulfonato y la azida de sodio. La agencia internacional de energa atmica (IAEA) ubicada en Roma, reporta numerosas variedades mejorados en cultivos anuales, frutales, nuevas variaciones en especies ornamentales entre otros y, en el pas el Instituto peruano de energa nuclear (IPEN) tiene los equipos para la induccin de mutaciones con agentes fsicos.

II. Objetivos
1. Hallar la frecuencia de mutaciones de cambio de pigmentacin en las hojas (mutaciones cloroflicas) en plntulas. 2. Diferenciar los diferentes tipos de mutaciones cloroflicas usando la clasificacin de Gustafson (1941).

III. Materiales
.Poblacin de mutantes de cebada derivadas de irradiacin. .Lpiz. .Libreta de apuntes. .Calculadora.

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IV. Procedimiento
1. Establecer los tipos de mutantes. 2. Evaluar el campo contando el numero de mutantes cloroflicos del total de plantas de la poblacin. 3. Estimar la frecuencia de mutaciones cloroflicas. 4. Comparar la frecuencia de mutantes inducidas versus los mutantes naturales.

Tipos de mutaciones: Tipo de mutacin I. Albina Caracterstica

No se forma clorofila ni carotenos Prevalencia de carotenos o ausencia de II. Xantha clorofila Diferentes colores en la base y unta de las III. Alboviridis hojas 3.1 Alboxantha Base amarilla, punta blanca muy comn Base blanca o ligeramente coloreada. Punta 3.2 Xanthalba amarilla o amarillo verdoso. Puede alcanzar madurez 3.3 Alboviridis Base verde, punta blanca Grupo heterogneo, caracterstico amarillo IV. Viridis verdoso o verde claro Verde claro uniforme que gradualmente cambia a 4.1 Virescens verde oscuro. Generalmente el color adquiere el tono norma. Mutacin a menudo viable Generalmente color amarillo verdoso que puede 4.2 Chlorina permanecer durante el ciclo de la planta u oscurecerse. Viable Los pigmentos verdes originales se destruyen, 4.3 Lutescens las hojas se marchitan y se tornan amarillas Igual que lutescens pero ms pronunciado. Los 4.4 Albescens colores originales cambian a blanco o blanco amarillo Destruccin transversal de los pigmentos. Lneas transversales son generalmente marrones V. Tigrina o amarillas, delgadas y comprimidas. Muy caractersticas en cebadas Lneas longitudinales de color blanco o VI. Striata amarillo Destruccin de clorofila y /o caroteno en VII. Maculata forma de manchas distribuidas sobre las hojas VIII. Mutac. Informe descriptivo de las observaciones Indefinidas efectuadas IX. Mutac. en el plasma

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Eguiluz De la barra, A. 2011. Comunicacin personal.

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Evaluacin de frecuencia de mutantes. N Poblacin Mutante 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 V. Tipo de Mutacin Albina Xantha Alboviridis Viridis Tigrina Striata Maculata Total Mutantes Total de plantas por poblacin

Bibliografa 1. Cubero, J. L. 2003. Introduccion a la mejora genetica vegetal. Ediciones Mundi-Prensa Madrid. P. 567pp. 2. Dich, R. 1985. Fitotecnia general. Madrid, Espaa. 24 p. 3. Williams, W. 1965. Espaa http://www.iaea.org/ Principios de gentica y mejora de las plantas. Editorial ACRIBIA, Zaragoza,

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http://www.iaea.org/Publications/Magazines/Bulletin/Bull521/Spanish/52105810405_es.pdf

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Prctica N 10 Recursos Genticos Vegetales


I. Introduccin
Los recursos genticos o germoplasma vegetal es el material gentico fuente que los fitomejoradores utilizan para producir nuevas variedades cautivadas o cultivares. Se entiende por recursos genticos como la variabilidad gentica (genes) almacenada en los cromosomas y en otras estructuras que contiene ADN. Estas caractersticas pueden ser: resistencia a factores estresantes biticos o abiticos, precocidad, la presencia o ausencia de una sustancia qumica, o cualquier otro factor de rendimiento o calidad, es decir que sea de utilidad actual o potencial y que sea trasmisible genticamente. El germoplasma se conserva en los bancos de genes o en el mismo ambiente donde prosperan. Las actividades que se llevan a cabo para disponer y manejar los recursos genticos son: Prospeccin, coleccin, evaluacin (caracterizacin segn los descriptores que se dispone para la especie), conservacin, documentacin y utilizacin de los recursos genticos que son fuente de caracteres importantes para los programas de mejoramiento gentico del cultivo.

II. Objetivos
1. Describir las caractersticas generales y la importancia de los Bancos de Germoplasma de la UNALM. 2. Revisar la literatura sobre el origen, preservacin y uso de los recursos genticos. 3. Relacionar reas agroecolgicas con la diversidad gentica vegetal.

III. Materiales
. . . . . . Diapositivas Afiches de diversidad gentica de una especie Descriptores Banco de genes Campo de regeneracin de germoplasma Muestras de tubrculos de papas

IV. Procedimiento
1. Visitar los bancos de germoplasma de la UNALM para conocer las caractersticas, la importancia, las accesiones que conservan y las actividades que vienen realizando. 2. Revisar un descriptor de planta algama. 3. Listar las caractersticas que se evalan en la caracterizacin avanzada del germoplasma (los descriptores).

V.

Cuestionario:
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1. Indicar el origen y/o diversificacin de las especies abajo listadas. Las evidencias para asignar a una especie como su centro de origen pueden ser: taxonmicas, botnicocitolgicas, culturales, histricas, arqueolgicas, lingsticas, presencia de especies relacionadas, y presencia de gran diversidad intraespecfica. Indique segn sea el caso. Solanum acaule Solanum phureja Zea mays L. Coffea arabica Coffea canephora Phaseolus vulgaris Oriza sativa Arracacia xantorriza Gossypium hirsutum Gossypium barbadense Triticum aestivum L. Bixa orellana Saccharum officinarum 2. Completar en el cuadro cuatro banco de genes adjunto las caractersticas de

VI. Bibliografa
1. Ferreira, M. & D. Grattapaglia., 1998. Introduccin al uso de marcadores moleculares en el anlisis gentico, W Ed. Brasilia: EMBRAPA-CENARGEN.220p. 2. Sevilla, P. vegetales. R. y Holle, O.M. 1993. Recursos genticos

3. Universidad Nacional Agraria La Molina. 2005. Conservacin in situ de la agrobiodiversidad y sus parientes silvestres. Escuela de Post-Grado, Maestra de Ecologa Aplicada. Editores: De la Barra A. D., Deza B.M., Garca V. A., Lazo A.S. y Parra R. F. 161 p. http://www.ciat.cgiar.org/biblioteca/biblioteca_es/revistas_ electronicas.htm

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Caractersticas de

cuatro banco de genes

Institucin

Especie que se conserva

Tipo de semilla

Humedad de la semilla

Tipo de envase

Cantidad de semilla

Temp. (C)

Humedad relativa (%)

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Prctica N 11 Tcnicas de polinizacin controlada en autgamas


I. Introduccin
Las especies autgamas estn formadas por plantas que en forma natural se autopolinizan. Cuando se hace mejoramiento gentico en esta especie es necesario efectuar cruzamiento artificial controlado con el fin de obtener progenie que combinen caractersticas deseables de los progenitores. II.

Objetivo
1. Familiarizar autgamas. al estudiante con la tcnica de hibridaciones en

III.

Materiales
. Plantas de frijol, pallar, arvejas, o cereales de dos variedades diferentes. . Pinzas de diseccin de punta aguda. . Recortes de papel servilleta de 6 X 15 mm. . Un frasco con algodn hmedo. . Plumn marcador indeleble. . Etiquetas. . Lpiz.

IV.

Procedimiento
Para realizar el cruzamiento artificial en frijol en primer lugar se debe emascular el progenitor que se va a tomar como hembra (a) y luego tomar el polen del progenitor masculino para aplicarlo sobre el progenitor femenino (b). (a) Emasculacin del progenitor femenino: Eliminar las anteras del progenitor femenino antes de que se efectuara la autopolinizacin. Para esto deben seleccionarse botones que vayan a abrir el da siguiente. Debe tomarse el botn floral elegido con los dedos ndice y pulgar de la mano izquierda, luego con la mano derecha se toma la pinza que cerrada se coloca con ligera presin sobre la sutura ventral del botn; al abrir la pinza se abre el estandarte; este se rompe ligeramente en el pice para efectuar un doblez hacia afuera de la parte izquierda del estandarte. Despus de lo anterior, quedan descubiertas las alas, que deben cortarse presionando en su base con la pinza. Una vez descubierto la quilla, la cual posee en el pice un pequeo orificio a travs del cual se toma uno de los ptalos con la punta de la pinza, jalando cuidadosamente hasta eliminar toda la quilla sin daar el estigma ni romper las anteras. Al descubrir el gineceo y androceo, deben eliminarse las anteras, cortando por su base con la pinza. Si se observa que las anteras han derramado polen, debe desecharse este botn y tomar otro. (b) Polinizacin: Despus que se emascul el progenitor femenino, se efecta la polinizacin. Para esto se cortan flores del progenitor masculino que hayan abierto al mismo da, la cual se conoce porque la flor

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muestra un aspecto turgente y color vivo. Las flores cortadas se colocan en un vaso mantenindose en un lugar fresco. Para obtener el polen, se toma una flor con la mano izquierda fijndola por el estandarte; con los dedos de la mano derecha, se presiona las alas hacia abajo observndose que el estigma emerge por el pice de la quilla. Se sostiene en esta posicin con la mano izquierda y con la derecha se toma la pinza y se corta presionando el estigma con un segmento de estilo. El estigma lleva adheridos granos de polen que van a ser utilizados para la polinizacin. El estigma del progenitor masculino se frota sobre el estigma del botn emasculado del progenitor femenino. Una vez efectuada la polinizacin es necesario cubrir el botn con un trozo de papel servilleta al cual se le aplica una gota de agua para que se adhiera. Finalmente se coloca la etiqueta sobre el pedicelo del botn. Se comprueba el xito de la polinizacin observando las plantas que se polinizaron unos diez das despus.

V.

Cuestionario:
1. Esquematice el procedimiento que usted utiliz en la prctica. 2. Describa la metodologa de hibridacin de por lo menos especies autgamas cultivadas. dos

V.

Bibliografa
1. Acquaah, G. 2007. Principles of Plant Genetics and Breeding. Blackwell Publishing. USA 569 pp. 2. Allard, R.W. 1999. Principles of Plant Breeding. Jhon Willey & Sons, Inc N. Y. 254 pp. 3. Allard, R.W., 1980. Principios de la Mejora Gentica de las Plantas, IV Edc. Edit. Omega, Barcelona, 498 p. 4. Baudoin, J.P. 1985. Amlioration Gnrale des Plantes. Facult Universitaire de Science Agronomiques de Gembloux, Blgica. 155P. 5. Brauer H., O. Fitogentica aplicada: los conocimientos de la herencia vegetal, al servicio de la humanidad. Mexico. Limusa 6. Marquez, S. F. 1985. Genotecnia vegetal: Mtodos, teora y resultados. Editor. Mxico, Tomo I y II. 7. Pohelman, J. M. & Sleper, D.A. 1995. Breeding Field Crops. Four Edition. Iowa State University Pres/Ames. 494 pg. 8. Voysest, V. O. 2000. Mejoramiento Gentico del frijol (Phaseolus vulgaris l.): legado de variedades de Amrica Latina 1970 1999. Centro Internacional de Agricultura Tropical. Cali. Colombia. 195p.

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Prctica N 12 Tcnicas de polinizacin controlada en algamas


I. Introduccin
El maz es un cultivo de polinizacin cruzada natural y debido a su polinizacin no controlada, suele decirse que es de polinizacin libre. La planta de maz posee estructuras florales monoicas: las flores estaminadas se forman en la panoja y las pistiladas en un brote axilar aproximadamente a la mitad del tallo. La polinizacin se lleva a cabo al transferir polen viable o frtil de las flores estaminadas de la panoja a los largusimos estigmas, los rganos receptores de polen de las flores pistiladas.

II. Objetivo
1. Familiarizar al estudiante con la tcnica de polinizacin controlada en algamas.

III. Materiales
. . . . . . . . . Campo de cultivo de maz: Estado de floracin Bolsa de glacine Bolsa de papel kraft Engrapador Grapas Clips Lpiz Cuchilla Libro de campo

IV. Procedimiento
1. Realizar el proceso de polinizacin controlada en maz que consta de tres etapas: Jiloteo, Coleccin del polen y Polinizacin Jiloteo: consiste en cubrir la mazorca inmadura con una bolsa de glacine antes de que los estigmas emerjan, para evitar la fecundacin con polen desconocido. Para ello, la planta elegida como progenitor femenino, debe cumplir las condiciones siguientes: Tener las caractersticas del ideotipo de planta establecido. Mazorcas inmaduras con estigmas no emergidas. Coleccin de polen: consiste en colectar polen solo de la planta elegida como progenitor masculino. Se debe encerrar y

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proteger la panoja con el papel kraft, 24 horas despus se realiza la colecta de polen y polinizacin inmediata. Para ello, la planta elegida como progenitor masculino, debe cumplir las condiciones siguientes: Tener las caractersticas del ideotipo de planta establecido. La panoja debe haber iniciado la dehiscencia de polen por lo menos en la borla o en 1/3 de la panoja. Polinizacin: consiste en la transferencia de polen de la panoja de la planta

a los estigmas de la planta

Una vez polinizado los estigmas, se debe cubrir la mazorca con el papel glacine y sobre ella con el papel kraft, adems colocar en la identificacin de la polinizacin: nombre de los progenitores, fecha de polinizacin, nombre del especialista y tipo de cruzamiento o polinizacin.

V.

Cuestionario:
1. Esquematice el procedimiento que usted utilizo en la prctica. 2. Describa la metodologa de hibridacin de por lo menos dos especies algamas cultivadas.

VI. Bibliografa
1. Acquaah, G. 2007. Principles of plant genetic and breeding. Blackwell Publishing Oxford U.K. 569 p. 2. Allard, R.W. 1978. Principios de la mejora gentica de las plantas. Omega, Barcelona. 3. Chopra, V.L. 2000. Plant breeding . Theory and Practice. Oxford & IBH Publishing Co. Pvt. Ltd. New Delhi, Calcutta. 490 p. 4. Cubero, J.I. 2003. Introduccin a la mejora gentica vegetal. Segunda edicin . Ediciones Mundi-Prensa. Madrid, 567 p 5. Falconer, D.C. 1974. Introduccin cuantitativa. Continental, Mxico. a la gentica

6. Poehlman. J.M. 2003. Mejoramiento gentico de las cosechas. Mxico, D.F. 7. Robles S. R. 1986. Gentica elemental y Fitomejoramiento prctico. Editorial LIMUSA , S.A. de C. V. Mxico D.F. 477 p. 8. Vallejo, C. F. y Estrada, S. E. 1992. Fundamentos genticos del mejoramiento vegetal. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias Agropecuarias Palmira. 169 p.

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Prctica N13 Mtodos de mejoramiento gentico: Seleccin


Mejoramiento gentico del frijol comn (Phaseolus vulgaris L.)

I. Introduccin
En el pas la principal leguminosa cultivada es el frijol comn, siendo la costa donde los rendimientos de grano seco son superiores (ms de 1,600 kg/ha), seguido de la sierra y finalmente la selva y el rendimiento promedio es de 900kg/ha. Los sistemas de cultivo varan desde el monocultivo, asociado y en policultivo. Los granos secos, considerados como menestras se comercializan como frijoles canarios o amarillos, bayos, blancos o alubias, rojos, guindas blanco pequeo o panamito y frijoles moteados como la ua pavita o el caballero de la sierra con manchas rojizas alrededor del hilio. Tambin se tienen frijoles color mostaza, o con estras o jaspes alrededor de la testa o cscara. Los granos de frijol de mayor precio en el mercado nacional es el frijol canario sobre el cual se realizar un mtodo de mejora en la presente prctica y continuar en las campaas siguientes. Los limitantes de la produccin de frijol en el pas son: . . . . . . . . . Bajo rendimiento de grano seco. Falta de variedades mejoradas Escasa produccin de semilla de calidad Susceptibilidad a plagas Susceptibilidad a enfermedades Largo perodo vegetativo Siembra en suelos marginales Cultivo generalmente bajo secano Manejo agronmico deficiente

Por otro lado, las plantas de frijol son de hbito de crecimiento determinado o indeterminado y, por ello se pueden observar hasta cuatro tipos de planta que se lista a continuacin: Tipo Tipo I: II: Planta Planta II II Planta Planta de de A: B: de de crecimiento determinado crecimiento indeterminado arbustivo Con tallo muy sobresaliente o elevado Con tallo ramas basales muy desarrolladas crecimiento indeterminado rastrero crecimiento indeterminado trepador

Tipo III: Tipo IV:

Los mtodos de mejora usados en el frijol son: Introduccin, hibridacin, seleccin genealgica, seleccin masal, retrocruza o backcrosses, mutaciones as como la seleccin asistida con marcadores moleculares para resistencia al virus del mosaico dorado. Pgina 39

El Programa de Investigacin y Proyeccin Social de Leguminosas de Grano y Oleaginosas de la Universidad Nacional Agraria La Molina ha evaluado numerosas lneas de frijol canario bajo las denominaciones CIFAC 92017, CIFAC 92018 para condiciones de otoo invierno. A partir de stos se tiene est poblacin. En la presente prctica, cada estudiante deber trabajar con un genotipo definido y evaluar las plantas que renan los criterios de seleccin.

II. Objetivo
1. Seleccionar cinco plantas de frijol canario CIFAC 90017 de hbito de crecimiento determinado, buena sanidad y con buen nmero de vainas por planta y precocidad en funcin del estado de desarrollo ms avanzado (fin de formacin de vainas e inicio del llenado de grano). III. Materiales . . . . . Poblacin de frijol tipo I y tipo II Bolsas Lpiz Libro de campo Descriptores de frijol

Criterios de seleccin: La Variedad de Canario CIFAC 90017 fue sembrado el 19 de abril del 2011. Considerando que el ideotipo de la planta de frijol para las condiciones de costa y sierra baja es una planta precoz con hbito de crecimiento determinado, de buen rendimiento y granos de color amarillo semibrillante de tamao mediano y con buena sanidad. Hbito de crecimiento (determinado) Tipo de planta (I), el tallo termina en una inflorescencia o vaina. Precocidad (estado de desarrollo ms avanzado) Nmero de vainas/planta o vainas en formacin Mayor nmero de vainas por planta (mayor de 18 vainas) Sanidad de la planta Tamao de vaina (mediana a grande) Forma de vaina (recta o ligeramente curvada) Color de vaina: pajizo Color de grano amarillo

IV.

Procedimiento
1. En la parcela de frijol canario CIFAC 92017 cada estudiante debe seleccionar cinco plantas de frijol canario correctamente identificado con la etiqueta que incluye los siguientes datos: Pgina 40

Nombre de la Variedad: Canario CIFAC 92017. N de Seleccin Apellido del seleccionador Campaa y lugar donde se ejecuta la Seleccin. N vainas/ planta

Planta H. de seleccionada crecimiento 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Tipo de planta

Sanidad de la planta

Precoz

Vigor de la planta

Hbito de crecimiento: Determinado. Tipo de planta: I (tallo termina en flor inflorescencia, II. Vainas en formacin: mayor de 18 vainas por planta. Sanidad de planta: libre de dao de insectos y patgenos. Precocidad: estado de desarrollo ms avanzado (fin de formacin de vainas e inicio del llenado de grano). Vigor de la planta: 1=muy bueno, 2=bueno, 3=regular y 4=pobre.

Pgina 41

V. Bibliografa
1. Adams, M.W. 1982. Plant Architecture and yield breeding. Iowa State Journal of Research. 56(3): 225 254. 2. Allard, R. W and Bradshaw, A.D. 1964. Implications of genotype-enviromental interactions in applied plant breeding. Crop. Sci. 4: 503 507. 3. Camarena, M. F; Chura, CH. J. y Blas, S.R. 2008. Mejoramiento gentico y Biotecnolgico de plantas. Primera Edicin. Universidad Nacional Agraria La Molina - Consejo Nacional de Ciencia, Tecnologa e Innovacin Tecnolgica. 233 pp. Compton, W.A. 1965. Conceptos bsicos de la gentica estadstica. Publ. Facultad de Ciencias de la Universidad Agraria La Molina. Cubero, J. L. 2003. Introduccion a la mejora vegetal. Ediciones Mundi-Prensa Madrid. P. 567pp. genetica

4.

5.

6. Dich, R. 1985. Fitotecnia general. Madrid, Espaa. 7. ELLIOT, F.C. 1967. Mejoramiento de plantas. Citogentica, Cecsa, Mexico, Espaa. 8. Falconer, D.C. 1974. Introduccin cuantitativa. Continental, Mxico a la gentica

9. Voysest, V. O. 2000. Mejoramiento Gentico del frijol (Phaseolus vulgaris l.): legado de variedades de Amrica Latina 1970 1999. Centro Internacional de Agricultura Tropical. Cali. Colombia. 195p.

Pgina 42

Prctica N14 Planeamiento de experimentos


I. Introduccin
La estadstica es indispensable en la mejora gentica vegetal. El mejorador conduce el material gentico en el campo bajo condiciones medioambientales variables que tienden a enmascarar efectos reales. Luego, con las evaluaciones que realiza el mejorador a menudo maneja grandes cantidades de datos que necesita sean resumidos para facilitar una correcta decisin. El software de los equipos de cmputo de toda clase est disponible para uso en el mejoramiento gentico de las plantas. El primer paso crtico es conocer que procedimiento estadstico usar para resolver un problema especfico. Asimismo, el mejorador trabaja con muestras y debe inferir acerca del comportamiento de la poblacin. Para los anlisis de sus datos puede usar las medidas de tendencia central, las medidas de dispersin, las medidas de asociacin, etc. Al instalar, manejar y cosechar un experimento, se obtiene registros de evaluaciones y esta informacin debe ser clasificada e identificada con el fin de efectuar los anlisis. El diseo experimental es la forma de recolectar la informacin para llegar a la aceptacin o al rechazo de la hiptesis. El anlisis de varianza es la base de los diseos experimentales y permite la comparacin entre tratamientos por medio del clculo de las desviaciones con respecto al promedio y de la reparticin de estas desviaciones entre las diferentes fuentes de variacin del experimento.

II. Objetivo
1. Conocer los procedimientos de experimentacin 2. Preparar la semilla para el ensayo experimental 3. Identificar, randomizar los tratamientos 4. Establecer el experimento en el campo 5. Conocer el procedimiento para el anlisis de variancia e interpretar los resultados.

III. Materiales
Para la preparacin e instalacin del experimento: Semillas de 6 genotipos de arvejas. Cordel marcador Cal Sobres de papel N 3 Bolsas de papel kraft Engrapador, Grapas Lpiz Tabla de aleatorizacin Diseo experimental Pgina 43

Lampas Caractersticas evaluadas en el experimento: Das a floracin Vainas por planta Granos por vaina Peso de 100 granos Rendimiento de grano

IV. Procedimiento
El ensayo ser conducido bajo el diseo de bloques completos al azar con 6 tratamientos y 4 repeticiones o bloques. La parcela experimental consistir de 4 surcos de 4.5 metros de largo espaciados a 80 cm., con una distancia de siembra entre golpes de 30 cm., depositando 4 semillas por golpe. La aleatorizacin de los tratamientos ser como se muestra en el cuadro siguiente: Experimento: Localidad: Genotipo (Trat.) QUANTUM USUI TARMA AFILA UTRILLO MARROWFAT Arvejas La Molina - 2011 BLOQUES I 103 106 102 104 101 105 II 201 204 203 205 202 206 III 304 302 301 305 303 306 IV 405 406 401 402 404 403

Entrada 1 2 3 4 5 6

Anlisis estadstico: El anlisis de varianza para cada carcter en estudio estar basado en el siguiente modelo aditivo lineal:

Yjk = + Bk + Gj + jk
F. de variacin Bloques Genotipos (Tratamientos) Error experimental G. L. r-1 g-1 (r-1)(g-1) E[C.M.] 2e 2e 2e + g 2 B + rG2/glG

V.

Cuestionario
1. Qu es una parcela?

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2. Cmo define el tamao de la parcela? 3. Por qu se randomizan los tratamientos? 4. Qu diseos experimentales conoce? Cuantos tratamientos puede evaluar en cada diseo? 5. Haga el esquema de la instalacin de un experimento?

VI. Bibliografa 1. Acquaah, G. 2007. Principles of Plant Genetics and Breeding. Blackwell Publishing. USA 569 pp. 2. Allard, R.W. 1999. Principles of Plant Breeding. Jhon Willey & Sons, Inc N. Y. 254 pp. 3. Allard, R.W., 1980. Principios de la Mejora Gentica de las Plantas, IV Edc. Edit. Omega, Barcelona, 498 p. 4. Baudoin, J.P. 1985. Amlioration Gnrale des Plantes. Facult Universitaire de Science Agronomiques de Gembloux, Blgica. 155P. 5. Borem, A. 1998. Melhoramento de plantas. Editora UFV. 2 edicin. Viosa. 453 p. 6. Brauer, H..O. 1973. Fitogentica aplicada.Limusa, s.a. Mexico, D.F.Publications. 7. Brigss, F.N. and P.F. Knowles. 1967. Introduction to plant breeding, Reinhold Publishing Corporation. 8. Brauer H., O. Fitogentica aplicada: los conocimientos de la herencia vegetal, al servicio de la humanidad. Mexico. Limusa 9. Compton, W.A. 1965. Conceptos bsicos de la gentica estadstica. Publ. Facultad de Ciencias de la Universidad Agraria La Molina. 10. Marquez, S. F. 1985. Genotecnia vegetal: Mtodos, teora y resultados. Editor. Mxico, Tomo I y II. 11. Pohelman, J. M. & Sleper, D.A. 1995. Breeding Field Crops. Four Edition. Iowa State University Pres/Ames. 494 pg. 12. Robles, S. R. 1986. Gentica elemental y Fitomejoramiento prctico. Editorial LIMUSA, S.A. de C. V. Mxico D.F. 477

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p.

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