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Cultivo in vitro.

La tcnica de cultivo in vitro de especies vegetales fue instalada en 1988 con el fin de propagar ciertas especies cuya multiplicacin por mtodos convencionales es lenta o difcil. Se ha logrado de esta forma reproducir varias especies que son exclusivas de nuestro territorio andalu y que se encontra!an al !orde de la extincin MICROPROPAGACION DE PLANTAS Mtodo especial de propagacin en un edio asptico para o!tener plantas con caracter"sticas genticas iguales a la de sus progenitores# La icropropagacin es un siste a de ultiplicacin en un edio arti$icial % asptico % a partir de u% pe&ue'as porciones de plantas( tales co o) se illas( e !riones( tallos( !rotes de tallos % de ra"ces( clulas % polen# M*s clara ente( cual&uiera de las partes antes encionadas de!en producir una planta entera# En estudios reali+ados se ,an o!tenido partes de te-idos .corte+a/ o un rgano .ra"+/ capaces de 0i0ir inde$inida ente sin real ente crecer( es decir( antenerse en 0ida sin desarrollarse en ning1n sentido( ni en ta a'o ni en edad# Esto se logr partiendo de di$erentes co puestos &u" icos &ue $or a!an los edios en &ue estos rganos o te-idos eran su ergidos# Podr"a utili+arse potencial ente este todo de propagacin si conocira os *s so!re los re&ueri ientos ,or onales( de culti0o % ali enticios de las especies# A&uellas &ue s" $ueron estudiadas ,an !rindado resultados 0aria!les La icropropagacin ,a estado en estudio desde 2345( cuando 6a!erlandt ,i+o sus pri eros intentos $rustrados para e7traer te-ido de una planta % u!icarla en un edio asptico para &ue se desarrolle# En 2389( :,ite logr desarrollar las ra"ces de una planta de to ate( ali ent*ndola con 0ita ina ;( principal ente tia ina % otros productos &u" icos# Para 2383 los a ericanos ,a!"an logrado antener te-ido 0egetal en un edio sinttico % antes de eso( el Sr# <nudson descri!i las tcnicas para ger inar se illas de or&u"dea &ue actual ente se utili+an a ni0el co ercial# Los e !riones de las se illas &ue est*n en estado de latencia pueden ser e7tirpados del interior de la se illa % puestas a ger inar con 7ito siguiendo las tcnicas de e !riocultura &ue es una $or a de icropropagacin#

Se ,an o!tenido plantas de ta!aco a partir de te-idos e7tra"dos de las anteras de las $lores % lo *s nota!le de todo $ue ,a!er o!tenido una nue0a 0ariedad de ta!aco uniendo en un edio arti$icial dos clulas de plantas di$erentes &ue ,a!"an sido separadas o e7tra"das de sus plantas( podr"a os lla arlas = adres= en este caso( con anterioridad % antenidas en latencia durante tie po inde$inido# A,ora &ue tene os una !re0e idea de lo &ue es icropropagacin % co o se inici( ser"a interesante e7plicar co o es el = edio= en &ue se su ergen las clulas o partes de plantas para su desarrollo# Los nutrientes o ali entos &ue necesitan las plantas en este caso 0ar"an de acuerdo al tipo de planta % es tan espec"$ico &ue las adecuadas para unas puede no serlo para otras# En tr inos generales % para dar una idea de$initi0a dire os &ue el edio es se i>slido % est* $or ado por agar en una concentracin de 4(? a I @ # Ta !in la densidad del edio 0ar"a de acuerdo al tipo de te-ido o e !rin utili+ado pues en algunos casos la alta densidad retarda el creci iento# Aol0a os a la solucin de agar# Se utili+a agar re$inado puri$icado &ue se disuel0e en agua cuando se lo calienta % se solidi$ica a un punto se igelatinoso cuando se en$r"a# Natural ente( el agar es el edio % no el ali ento( pues co o le" os

potasio, calcio, magnesio y sulfuro. Estos son esenciales para todos los tejidos y rganos que crecen IN VITRO, tubo de ensayo, frasco de erlenmeyer, etc.. dem!s deben agregarse a"#car, $itaminas, reguladores de crecimiento y elementos organicos. En este #ltimo caso es utili"ada la lec%e de coco y en las orqu&deas se determin que el pur' de banana es altamente beneficioso si el microculti$o parte de semillas. (iferentes tipos de micropropagacin a partir de) E*+RIONE,) en un ambiente as'ptico se e-tirpa el embrin de la semilla y se lo coloca en un medio est'ril como el mencionado arriba. En la medida que el embrin crece, sus requerimientos de alimentos se reducen. Eso quiere decir que el medio en que se coloque el embrin ser! modificado durante el crecimiento. .os embriones se desarrollan en agar con relati$o '-ito, pero sin duda fue el m'todo m!s e-itoso. .o fa$oreci el agregado de lec%e de coco. ,e llena el tubo de ensayos %asta la mitad, en la superficie se coloca el embrin y se tapa el tubo. (ebe mantenerse cerrado y a temperatura ambiente con lu" difusa. /na $e" que las ra&ces y los brotes crecieron, pueden trasplantarse. 0ara dar un caso pr!ctico tomamos las semillas de orqu&deas. .as semillas de orqu&deas son tan peque1as que %ay unas 23.333 semillas en cada $aina de 4atleya. .as semillas pueden ser e-tra&das de una $aina a#n $erde lo

*s arri!a( cada planta o tipo de te-ido iniciador de una planta( tiene que determinar! una germinacin de re&ueri ientos especiales en 53 por ciento apro-imadamente. cuanto a su nutricin % el agar no puede cu!rir todas las e7pectati0as# A esa solucin de agar de!en agregarse inerales( o sea una serie de ele entos inorg*nicos co o nitrgeno( $s$oro(

Se colocan las se illas en un tu!o de ensa%o o erlen e%er en una solucin de 2(? a 2 @ de agar# Las se illas ger inar*n en un tr ino de 9 eses % a los B eses de!en ser trasplantadas a un nue0o en0ase# Cn a'o *s tarde las plantas son replantadas en acetas# POLEN) Capullos de $lores sin a!rir son esterili+ados# Luego se los a!re % se seccionan las anteras# Estas son colocadas en un erlen e%er conteniendo un edio inorg*nico con 0ita inas A( ; % C agregando ,ierro# PCNTA DE ;ROTE) Este siste a es utili+ado para o!tener clones li!res de agentes patgenos especial ente los culti0os tan propensos a los ,ongos co o el cla0el( crisant,e os( a-o( papa( $rutilla( da,lia( $reesia( gladiolos % or&u"deas# Este es un todo especial para ultiplicar la or&u"dea ase7ual ente % r*pida ente# Consiste en cortar el eriste a apical % las dos pri eras insinuaciones de ,o-as de los !rotes % u!icados en el edio estril de tal $or a &ue les per ita $or ar ra"ces# El eriste a no es capa+ de $or ar ra"ces a enos &ue ,a%a una o dos $or aciones in$eriores &ue luego ser"an las ,o-as# Para e7tirpar el eriste a de!en &uitarse las ,o-as &ue lo cu!ren( luego se lo secciona con un escalpelo esterili+ado ,aciendo un corte en $or a de A# La parte in$erior en $or a de A( ser* la &ue apo%are os en el papel de $iltro dentro del tu!o de ensa%o# La parte seccionada de!e tener apro7i ada ente 4(? # En el caso de los cla0eles se reco ienda u% especial ente el uso de papel de $iltro so!re el edio a $in de lograr e-or super$icie radicular#

gregando sales inorg!nicas y a"#car lograremos mejores resultados. ,i aplicamos este sistema en las orqu&deas, el resultado obtenido utili"ando el medio sugerido por 6nudson ser! entre las 7 y 5 semanas y los brotes y las ra&ces surgir!n de la misma forma que si la propagacin estu$iera %ec%a a partir de semillas. ntes que los brotes sean realmente brotes, es decir un meristema, 'ste ser! remo$ido, seccionado y replantado en diferentes frascos. (e esta manera en pocos meses siguiendo este m'todo podremos obtener una cantidad apreciable de plantas, que partieron de un primer meristema de una planta determinada cuyas caracter&sticas especiales la transforman en un ejemplar digno de ser reproducido. ,i colocamos los en$ases en aparatos que agiten o giren los frascos obtendremos brotes laterales y m!s posi8bilidades de cortar nue$as partes de tejido con el consiguiente aumento de plantas. 4ada 2 o 7 semanas, nue$os brotes aparecer!n. 4uando no se desee que ese brote 9madre9 d' meristemas, se suspende la agitacin del frasco, se lo coloca en medio de agar y as& obtendremos en : meses plantas con %ojas y ra&ces bien desarrolladas y listas para ser plantadas. TE;I(O) Todas las partes de una planta son tejidos, pero en este caso %ablamos de masa de tejido e-tirpado de la pulpa de una ra&" <"ana%oria= o de la seccin $ascular de un tallo. En este caso los medios a utili"arse y los nutrientes, $ar&an de especie en especie. Tambi'n $ar&a la intensidad de lu" y los

esti ulantes o retardadores de creci iento &ue se utilicen# Las $or as de e$ectuar las escisiones de te-ido son las siguientes# > De una ra"+ carnosa cortada longitudinal ente se cortan c"rculos trans0ersales &ue ser*n plantados en una solucin de agar# > De tallos carnosos a1n no le'osos se cortan en porciones de 2? c # de largo( se re ue0en las ,o-as % se desin$ecta con una solucin de 3? @ de alco,ol# Luego se cortan estos tro+os en secciones de ? c # % los cilindros del tallo interno son e7tirpados( cortados trans0ersal ente en discos % plantados# > De las plantas le'osas pueden o!tenerse icropropagaciones partiendo de tallos no le'osos en secciones de I a 2(? c # &ue son su ergidos de 24 a 2? c # en ,%poclorito de sodio % luego en-uagado en agua esterili+ada# Los e7tre os son eli inados % el seg ento restante es cortado en discos % plantados# En caso de tallos le'osos se pueden cortar longitudinal ente en lugar de discos % en ese caso la parte &ue tocar* el edio ser* la no cortada# A PARTIR DE CNA CELCLA) El is o todo es aplicado( pero se parte de una sola clula &ue por di0isin celular llega a $or ar una planta# DCu*l es el $in de la icropropagacinE La icropropagacin es una reproduccin ase7ual en la &ue inter0iene la di0isin celular &ue garanti+a una rplica del siste a de

cro oso as# Esto &uiere decir &ue las caracter"sticas genticas de la planta adre son trans itidas por el te-ido utili+ado para reproducirse % $or ar plantas idnticas# De esta $or a se logran clones de plantas cu%as caracter"sticas la trans$or an en un e-e plar digno de conser0arse# En estos siste as de reproduccin ase7ual( el Acido Deso7iri!onucleico -uega un papel $unda ental pues es( en de$initi0a el &ue trans>porta toda la in$or acin gentica del padre# Estos siste as son u% aplicados en 0egetales % plantas orna entales para poder o!tener clones a partir de un e-e plar &ue( de ser reproducido por se illas perder"a in ediata ente las caracter"sticas destaca!les( es decir( sus ,i-os no tendr"an esas caracter"sticas tan especiales# En ca !io los ,i-os &ue se o!tengan a partir de clulas( e !riones( partes de te-idos( etc#( s" las 0an a tener# Todas las plantas o!tenidas por icropropagacin tendr*n gentica ente la is a $or acin pero sus caracter"sticas ser*n di$erentes de acuerdo al tipo de suelo( cli a( nutri entos( etc# a &ue sean so etidos# En pocas pala!ras( icropropagacin no es *s &ue una reproduccin ase7ual en iniatura# Tiene uc,as 0enta-as( las *s destaca!les son &ue la super$icie radicular o!tenida es e-or &ue la o!tenida si parti os de ga-os plantados en tur!a % arena# Ade *s( con enos aterial o!tene os in$inita ente *s plantas#