C ap T U l O

26

La ruta de las pentosas fosfato

26.1 La ruta de las pentosas fosfato genera NADPH y azcares de cinco tomos de carbono 26.2 El metabolismo en su contexto: la glicolisis y la ruta de las pentosas fosfato se controlan deforma coordinada 26.3 La glucosa 6-fosfato deshidrogenasa disminuye elestrs oxidativo

El crecimiento es una proeza bioqumica formidable. Dos de los componentes bioqumicos clave necesarios para el crecimiento el azcar ribosa y el poder reductor bioqumico son suministrados por la ruta de las pentosas fosfato. [Comstock Images/AgeFotostock.]

asta ahora, hemos considerado el metabolismo del glucgeno centrndonos en la produccin y almacenamiento de energa. Otro destino importante del producto nal de la degradacin del glucgeno la glucosa 6-fosfato es el de servir como sustrato para la ruta de las pentosas fosfato, un conjunto de reacciones extraordinariamente verstil. La ruta de las pentosas fosfato es una importante fuente de NADPH, el poder reductor para la biosntesis. Adems, la ruta cataliza la inter-

451

452 26 La ruta de las pentosas fosfato

conversin entre los intermediarios de la glicolisis de tres y seis tomos de carbono y los carbohidratos con cinco tomos de carbono. Estas interconversiones permiten la sntesis de las pentosas necesarias para fabricar DNA y RNA, as como el metabolismo de los azcares de cinco tomos de carbono ingeridos en la dieta. Comenzaremos estudiando la generacin de NADPH y, despus, analizaremos las interconversiones entre carbohidratos. Por ltimo, veremos la versatilidad de las reacciones de la ruta de las pentosas fosfato.

6 Identificar las dos etapas de la ruta de las pentosas fosfato y explicar cmo se coordina la ruta con la glicolisis y con la gluconeognesis.

26.1  La ruta de las pentosas fosfato genera NADPH yazcares de cinco tomos de carbono
Recordemos que el NADPH es un producto clave de las reacciones luminosas de la fotosntesis. En todos los organismos, el NADPH es la fuente de poder reductor biosinttico y se utiliza en un gran nmero de procesos bioqumicos (Tabla 26.1). Cmo generan NADPH las clulas y organismos no fotosintticos? En estos organismos, el NADPH se genera a partir del metabolismo de la glucosa 6-fosfato por medio de la ruta de las pentosas fosfato. Esta ruta consta de dos fases: (1) la generacin oxidativa de NADPH y (2)la interconversin no oxidativa de los azcares (Figura 26.1). Durante la fase oxidativa, el NADPH se genera cuando la glucosa 6-fosfato se oxida a ribulosa 5-fosfato. Glucosa 6-fosfato + 2 NADP1 + H2O h ribulosa 5-fosfato + 2 NADPH + 2 H1 + CO2 Posteriormente, la ribulosa 5-fosfato se convierte en ribosa 5-fosfato, un precursor del RNA y del DNA, as como del ATP, NADH, FAD y la coenzima A. En la fase no oxidativa, la ruta cataliza la interconversin de azcares con tres, cuatro, cinco, seis y siete tomos de carbono mediante una serie de reacciones no oxidativas. El exceso de azcares de cinco tomos de carbono se puede convertir en intermediarios de la ruta glicoltica. Todas estas reacciones tienen lugar en el citoplasma.

Tabla 26.1 Rutas que necesitan NADPH

Sntesis Biosntesis de cidos grasos Biosntesis de colesterol Biosntesis de neurotransmisores Biosntesis de nucletidos Destoxificacin Reduccin del glutatin oxidado Citocromo P450 monooxigenasas

Durante la conversin de glucosa 6-fosfato en ribulosa 5-fosfato segeneran dos molculas de NADPH
La fase oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato comienza con la oxidacin del carbono 1 de la glucosa 6-fosfato, una reaccin catalizada por la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa (Figura 26.2, p. 454). Esta enzima es muy especca para el NADP1 y lo reduce a NADPH al tiempo que deshidrogena la glucosa 6-fosfato. El producto de la deshidrogenacin es la 6-fosfoglucono-d-lactona, que tiene un enlace ster entre el grupo carboxilo del C-1 y el grupo hidroxilo del C-5. El siguiente paso consiste en la hidrlisis de la 6-fosfoglucono-d-lactona mediante una lactonasa especca para generar 6-fosfogluconato. A continuacin, este azcar de seis tomos de carbono se descarboxila oxidativamente por medio de la 6-fosfogluconato deshidrogenasa produciendo ribulosa 5-fosfato. De nuevo, el aceptor de electrones es el NADP1. Esta reaccin completa la fase oxidativa.

La ruta de las pentosas fosfato y la glicolisis estn conectadas mediante la transcetolasa y la transaldolasa
Las reacciones precedentes generan dos molculas de NADPH y una molcula de ribulosa 5-fosfato por cada molcula de glucosa 6-fosfato oxidada. Posteriormente, la ribulosa 5-fosfato se isomeriza a ribosa 5-fosfato por medio de la fosfopentosa isomerasa.
O O H H C C C CH2OH OH OH
2

C C C C

H OH OH OH

Fosfopentosa isomerasa

H H H

CH2OPO3

CH2OPO32
Ribosa 5-fosfato

Ribulosa 5-fosfato

26.1 La ruta de las pentosas fosfato453

CH2OPO32 H O H OH H OH H OH H

HO

Glucosa 6-fosfato
2 NADP+ 2 NADPH + CO2

FASE 1 (oxidativa)

O H H

CH2OH C C C OH OH

CH2OPO32

Ribulosa 5-fosfato

O H H H

C C C C

H OH OH OH
O HO H C C C CH2OH H OH

CH2OPO32

CH2OPO32

Ribosa 5-fosfato (C5)

Xilulosa 5-fosfato (C5)

O H

C C

H OH

O HO H H H

C C C C C

CH2OH H OH OH OH

CH2OPO32

GAP (C3)

CH2OPO32

Sedoheptulosa 7-fosfato (C7)

O HO H H

C C C C

CH2OH H OH OH O H H C C C H OH OH O HO H C C C CH2OH H OH

CH2OPO32

CH2OPO32

CH2OPO32

Fructosa 6-fosfato (C6)

Eritrosa 4-fosfato (C4)

Xilulosa 5-fosfato (C5)

O HO H

C C C C

CH2OH H OH OH

O H

C C

H OH
2

FASE 2 (no oxidativa)

CH2OPO3

Figura 26.1 La ruta de las pentosas fosfato.

Laruta consta de (1) una fase oxidativa que genera NADPH y (2) una fase no oxidativa en laque se producen interconversiones entre los azcares fosforilados.

GAP (C3)

Fructosa 6-fosfato (C6)

CH2OPO32

O CH2OPO32 H O H OH H OH H OH H
NADP+ H+ + NADPH

CH2OPO32 H O H OH H O
H2O H+

C C C C C

O OH H OH OH
2

H HO H H

O
NADP+ NADPH

CH2OH C C C OH OH + CO2

H
6-Fosfogluconato deshidrogenasa

HO

Glucosa 6-fosfato deshidrogenasa

Lactonasa

HO H OH

CH2OPO32
Ribulosa 5-fosfato

CH2OPO3

Glucosa 6-fosfato

6-Fosfogluconod-lactona

6-Fosfogluconato

Figura 26.2 La fase oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato. La glucosa 6-fosfato se oxida a 6-fosfoglucono-d -lactona generando una molcula de NADPH. La lactona producida se hidroliza a 6-fosfogluconato, que se descarboxila oxidativamente a ribulosa 5-fosfato generando una segunda molcula de NADPH.

CH2OH

Transferido por la transcetolasa

O HO

C C

CH2OH H

Transferido por la transaldolasa

Aunque la ribosa 5-fosfato es un precursor de muchas biomolculas, en muchas clulas, la necesidad de NADPH para la biosntesis reductora es mucho mayor que la necesidad de ribosa 5-fosfato para su incorporacin a nucletidos y cidos nucleicos. Por ejemplo, el tejido adiposo, el hgado y las glndulas mamarias necesitan grandes cantidades de NADPH para la sntesis de cidos grasos (captulo 28). En estos casos, la ribosa 5-fosfato se convierte en gliceraldehdo 3-fosfato y fructosa 6-fosfato gracias a la transcetolasa y a la transaldolasa. Estas enzimas crean un enlace reversible entre la ruta de las pentosas fosfato y la glicolisis catalizando estas tres reacciones sucesivas (ver la Figura 26.1). C5 1 C5 iiih C3 1 C7 C3 1 C7 iiih C6 1 C4 C4 1 C5 iiih C6 1 C3 El resultado neto de estas reacciones es la formacin de dos hexosas y una triosa a partir de tres pentosas: 3 C5 m 2 C6 1 C3 La primera de las tres reacciones que conectan la ruta de las pentosas fosfato con la glicolisis es la formacin de gliceraldehdo 3-fosfato y sedoheptulosa 7-fosfato a partir de dos pentosas.
O H + H H H OH OH OH
Transcetolasa

Transcetolasa Transcetolasa Transcetolasa

O O H H OH + HO H H H

O HO H

C C C

CH2OH H OH

C C C C

C C C C C

CH2OH H OH OH OH

C C

CH2OPO32

CH2OPO32

CH2OPO32
Ribosa 5-fosfato Gliceraldehdo 3-fosfato

CH2OPO32
Sedoheptulosa 7-fosfato

Epmeros son ismeros con mltiples centros asimtricos que se diferencian en la configuracin de un nico centro de asimetra.

Xilulosa 5-fosfato

En esta reaccin, el donador de la unidad de dos tomos de carbono es la xilulosa 5-fosfato, un epmero de la ribulosa 5-fosfato. La ribulosa 5-fosfato se convierte en el epmero apropiado para la reaccin de la transcetolasa gracias a la fosfopentosa epimerasa.

454

26.1 La ruta de las pentosas fosfato455

CH2OH C H H C C O OH OH
2

CH2OH C
Fosfopentosa epimerasa

O H OH

HO H

C C

CH2OPO3

CH2OPO32
Xilulosa 5-fosfato

Ribulosa 5-fosfato

En la segunda reaccin que conecta la ruta de las pentosas fosfato con la glicolisis, el gliceraldehdo 3-fosfato y la sedoheptulosa 7-fosfato reaccionan formando fructosa 6-fosfato y eritrosa 4-fosfato.
O HO H + H H C C C C C CH2OH H OH OH OH
Transaldolasa

O HO H H

O H

C C

H OH

C C C C

CH2OH H OH OH +

O H H

C C C

H OH OH

CH2OPO32

CH2OPO32
Gliceraldehdo 3-fosfato Sedoheptulosa 7-fosfato

CH2OPO32
Fructosa 6-fosfato

CH2OPO32
Eritrosa 4-fosfato

Esta sntesis de un azcar de 4 tomos de carbono y uno de seis est catalizada por la transaldolasa. En la tercera reaccin, la transcetolasa cataliza la sntesis de fructosa 6-fosfato y gliceraldehdo 3-fosfato a partir de eritrosa 4-fosfato y xilulosa 5-fosfato.
O OH OH HO H CH2OH H OH
Transcetolasa

O H H

O HO H H

C C C

C C C

C C C C

CH2OH H OH OH O + H C C H OH

CH2OPO32
Eritrosa 4-fosfato

CH2OPO32
Xilulosa 5-fosfato

CH2OPO32

CH2OPO32
Fructosa 6-fosfato Gliceraldehdo 3-fosfato

La suma de estas reacciones es 2 Xilulosa 5-fosfato 1 ribosa 5-fosfato m 2 fructosa 6-fosfato 1 gliceraldehdo 3-fosfato La xilulosa 5-fosfato se puede formar a partir de ribosa 5-fosfato mediante la accin secuencial de la fosfopentosa isomerasa y la fosfopentosa epimerasa y, por tanto, la reaccin global cuando se parte de la ribosa 5-fosfato es 3 Ribosa 5-fosfato m 2 fructosa 6-fosfato 1 gliceraldehdo 3-fosfato De este modo, el exceso de ribosa 5-fosfato que se forma durante la ruta de las pentosas fosfato se puede convertir completamente en intermediarios de la glicolisis. Adems, mediante esta ruta, toda la ribosa ingerida en la dieta se puede convertir en intermediarios glicolticos. Evidentemente, los esqueletos carbonados de los azcares se pueden reorganizar de muchas maneras para satisfacer las necesidades siolgicas (Figura26.2).

cmo se conectan la glicolisis y la ruta de las pentosas fosfato por medio de la transaldolasa y la transcetolasa.

PREGUNTA RPIDA 1 Describa

Tabla 26.2 La ruta de las pentosas fosfato

Reaccin Fase oxidativa Glucosa 6-fosfato 1 NADP1 h 6-fosfoglucono-d-lactona 1 NADPH 1 H1 6-Fosfoglucono-d-lactona 1 H2O h 6-fosfogluconato 1 H
1 1

Enzima Glucosa 6-fosfato deshidrogenasa Lactonasa 6-Fosfogluconato deshidrogenasa Fosfopentosa isomerasa Fosfopentosa epimerasa Transcetolasa Transaldolasa Transcetolasa

6-Fosfogluconato 1 NADP h ribulosa 5-fosfato 1 CO2 1 NADPH Fase no oxidativa Ribulosa 5-fosfato m ribosae 5-fosfato Ribulosa 5-fosfato m xilulosa 5-fosfato Xilulosa 5-fosfato 1 ribosa 5-fosfato m sedoheptulosa 7-fosfato 1 gliceraldehdo 3-fosfato Sedoheptulosa 7-fosfato 1 gliceraldehdo 3-fosfato m fructosa 6-fosfato 1 eritrosa 4-fosfato Xilulosa 5-fosfato 1 eritrosa 4-fosfato m fructosa 6-fosfato 1 gliceraldehdo 3-fosfato

7 Identificar la enzima que controla la ruta de las pentosas fosfato.

26.2  El metabolismo en su contexto: la glicolisis y la ruta de las pentosas fosfato se controlan de forma coordinada
La glucosa 6-fosfato se metaboliza tanto por la ruta glicoltica como por la ruta de las pentosas fosfato. Cmo se canaliza el metabolismo de este importante metabolito entre estas dos rutas metablicas? La concentracin citoplasmtica de NADP1 desempea un papel crucial a la hora de determinar el destino de la glucosa 6-fosfato.

La velocidad de la ruta de las pentosas fosfato se controla mediante el nivel de NADP1

La primera reaccin de la rama oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato, la deshidrogenacin de la glucosa 6-fosfato por parte de la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, es prcticamente irreversible. De hecho, en condiciones siolgicas, esta reaccin es la que determina la velocidad y sirve como punto de control. El factor regulador ms importante es la concentracin de NADP1, el aceptor de electrones en los pasos de oxidacin de la ruta de las pentosas fosfato. Cuando hay un exceso de NADPH la cantidad de NADP1 en las clulas es pequea. A concentraciones bajas de NADP1, la actividad de las tres enzimas que participan en el paso de oxidacin es reducida porque hay menos agentes oxidantes que impulsen la reaccin hacia delante. El efecto inhibidor de los niveles reducidos de NADP1 se intensica por el hecho de que el NADPH, que en el citoplasma del hgado se encuentra a una concentracin 70 veces mayor que el NADP1, compite con el NADP1 a la hora de unirse a la enzima, evitando as la oxidacin de la glucosa 6-fosfato. El efecto del nivel de NADP1 sobre la velocidad de la fase oxidativa garantiza que la generacin de NADPH est estrechamente acoplada a su uso en las biosntesis reductoras. La fase no oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato est controlada fundamentalmente por la disponibilidad de los sustratos.

El destino de la glucosa 6-fosfato depende de las necesidades de NADPH, ribosa 5-fosfato y ATP
Si analizamos el metabolismo de la glucosa 6-fosfato en cuatro situaciones metablicas distintas (Figura 26.3) podemos hacernos una idea de la versatilidad de la ruta de las pentosas fosfato, que es similar a la de una navaja suiza, as como de sus interacciones con la glicolisis y la gluconeognesis.

456

Modo 1

Glucosa 6-fosfato (C6)

Fructosa 6-fosfato (C6)

Ribosa 5-fosfato (C5)

Modo 2 2 NADP+ 2 NADPH

Fructosa 1,6-bisfosfato (C6)

Glucosa 6-fosfato (C6)

CO2

Ribulosa 5-fosfato (C5)

Dihidroxiacetona fosfato (C3)

Modo 3

Gliceraldehdo 3-fosfato (C3)

2 NADP+ 2 NADPH Modo 4 2 NADP+ 2 NADPH

Ribosa 5-fosfato (C5)

Glucosa 6-fosfato (C6)

CO2

Ribulosa 5-fosfato (C5)

Glucosa 6-fosfato (C6)

CO2

Ribulosa 5-fosfato (C5)

Fructosa 6-fosfato (C6)

Ribosa 5-fosfato (C5)

Fructosa 6-fosfato (C6)

Ribosa 5-fosfato (C5)

Fructosa 1,6-bisfosfato (C6)

Fructosa 1,6-bisfosfato (C6)

Dihidroxiacetona fosfato (C3)

Gliceraldehdo 3-fosfato (C3)

Dihidroxiacetona fosfato (C3)

Gliceraldehdo 3-fosfato (C3)

2 ATP Cdigo: Fase oxidativa Fase no oxidativa Glicolisis Gluconeognesis Piruvato (C3)

Figura 26.3 Las cuatro modalidades de la ruta de las pentosas fosfato. Los productos
principales se muestran coloreados.

Modo 1. La necesidadAde ribosa 5-fosfato Timoczko: Biochemistri: Short Course, 2E es mayor que la de NADPH. Por ejemplo, las clulas que se estn dividiendo rpidamente necesitan ribosa 5-fosfato para sintetiPerm. Fig.: 26004 New Fig.: 26-03 PUAC: 2011-08-22 zar los nucletidos precursores del DNA. La mayor parte de la glucosa 6-fosfato se 2nd Pass: 2011-08-31

convierte en fructosa 6-fosfato y gliceraldehdo 3-fosfato mediante la ruta glicoltica. Despus, la fase no oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato convierte dos molculas de fructosa 6-fosfato y una molcula de gliceraldehdo 3-fosfato en tres molculas de ribosa 5-fosfato invirtiendo las reacciones descritas anteriormente. La estequiometra del modo 1 es 5 glucosa 6-fosfato 1 ATP h 6 ribosa 5-fosfato 1 ADP 1 H1 Modo 2. Las necesidades de NADPH y ribosa 5-fosfato estn equilibradas. En estas condiciones, la reaccin predominante es la formacin de dos molculas de NADPH y una molcula de ribosa 5-fosfato (generada por la isomerizacin de la ribulosa 5-fosfato) a partir de una molcula de glucosa 6-fosfato durante la fase oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato. Es decir, bsicamente, la ruta de las pentosas fosfato se detiene al nal de la fase oxidativa. La estequiometra del modo 2 es Glucosa 6-fosfato 1 2 NADP1 1 H2O h ribosa 5-fosfato 1 2 NADPH 1 2 H1 1 CO2

457

458 26 La ruta de las pentosas fosfato

Tabla 26.3 Tejidos donde la ruta de las pentosas fosfato est activa
Tejido
Glndulas suprarrenales Hgado Testculos Tejido adiposo Ovarios Glndulas mamarias Glbulos rojos

Funcin
Sntesis de esteroides Sntesis de cidos grasos y colesterol Sntesis de esteroides Sntesis de cidos grasos Sntesis de esteroides Sntesis de cidos grasos Mantenimiento de la forma reducida del glutatin

Modo 3. La necesidad de NADPH es mayor que la de ribosa 5-fosfato. Por ejemplo, el hgado necesita un elevado nivel de NADPH para la sntesis de cidos grasos (Tabla26.3). En este caso, la glucosa 6-fosfato se oxida completamente a CO2. En esta situacin hay tres grupos de reacciones activos. En primer lugar, la fase oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato forma dos molculas de NADPH y una molcula de ribosa 5-fosfato. A continuacin, la ribosa 5-fosfato se convierte en fructosa 6-fosfato y gliceraldehdo 3-fosfato mediante la fase no oxidativa. Por ltimo, se vuelve a sintetizar glucosa 6-fosfato a partir de fructosa 6-fosfato y gliceraldehdo 3-fosfato mediante la ruta de la gluconeognesis. Bsicamente, la ribosa 5-fosfato producida por la ruta de las pentosas fosfato se recicla a glucosa 6-fosfato gracias a la fase no oxidativa de la ruta y a algunas enzimas de la ruta gluconeognica. Las estequiometras de estos tres conjuntos de reacciones son 6 Glucosa 6-fosfato 1 12 NADP1 1 6 H2O h 6 ribosa 5-fosfato 1 12 NADPH 1 12 H1 1 6 CO2 6 Ribosa 5-fosfato h 4 fructosa 6-fosfato 1 2 gliceraldehdo 3-fosfato 4 Fructosa 6-fosfato 1 2 gliceraldehdo 3-fosfato 1 H2O h 5 Glucosa 6-fosfato 1 Pi La suma de las reacciones en el modo 3 es Glucosa 6-fosfato 1 12 NADP1 1 7 H2O h 6 CO2 1 12 NADPH 1 12 H1 1 Pi Por tanto, el equivalente a una molcula de glucosa 6-fosfato se puede oxidar completamente a CO2 al tiempo que se genera NADPH. Modo 4. Se necesita NADPH y ATP. Alternativamente, cuando se necesita poder reductor y ATP, la ribosa 5-fosfato formada durante la fase oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato se puede convertir en piruvato. La fructosa 6-fosfato y el gliceraldehdo 3-fosfato procedentes de las reacciones no oxidativas de la ruta de las pentosas fosfato se incorporan a la ruta glicoltica en lugar de reconvertirse en glucosa 6-fosfato. De esta forma se generan, al mismo tiempo, ATP y NADPH, y cinco de los seis tomos de carbono de la glucosa 6-fosfato aparecen formando parte del piruvato. 3 Glucosa 6-fosfato 1 6 NADP1 1 5 NAD1 1 5 Pi 1 8 ADP h 5 piruvato 1 3 CO2 1 6 NADPH 1 5 NADH 1 8 ATP 1 2 H2O 1 8 H1 El piruvato formado mediante estas reacciones se puede oxidar para generar ms ATP o se puede utilizar como material de construccin en diversas rutas biosintticas.

26.3  La glucosa 6-fosfato deshidrogenasa disminuye elestrs oxidativo

El NADPH generado por la ruta de las pentosas fosfato desempea un papel decisivo a la hora de proteger a las clulas de las especies reactivas del oxgeno (ROS). Las especies reactivas del oxgeno generadas durante el metabolismo oxidativo provocan daos en todo tipo de macromolculas y, en ltima instancia, pueden llegar a causar la muerte celular. De hecho, las ROS estn implicadas en una serie de enfermedades humanas (p. 363). El glutatin reducido (GSH), un tripptido con un grupo sulfhidrilo libre, combate el estrs oxidativo reduciendo las ROS a formas inocuas. Una vez cumplida su tarea, el glutatin se encuentra en su forma oxidada (GSSG) y se tiene que reducir para regenerar el GSH. El poder reductor lo aporta el NADPH generado en la ruta de las pentosas fosfato gracias a la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa. De hecho, las clulas con niveles reducidos de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa son especialmente sensibles al estrs oxidativo. Este estrs es ms intenso en los glbulos rojos porque, al carecer de mitocondrias, carecen de una forma alternativa de generar poder reductor.

O
-Glutamato

O C H

NH 3+

C HN
Cistena

H O NH

SH

Glicina

C O

Glutatin (reducido) (-Glutamilcisteinilglicina)

Aspecto clnico
La insuficiencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa provoca una anemia hemoltica causada por medicamentos
La importancia de la ruta de las pentosas fosfato se pone de maniesto en la respuesta anmala de la gente ante determinados frmacos. Por ejemplo, la pamaquina, un frmaco antimalrico desarrollado en 1926, estaba relacionada con la aparicin de misteriosas y graves dolencias. La mayora de los pacientes toleraban bien el medicamento pero unos pocos desarrollaban sntomas graves a los pocos das de haber iniciado la terapia. La orina se volva negra, desarrollaban ictericia y el contenido de hemoglobina de la sangre disminua bruscamente. En algunos casos, la destruccin masiva de los glbulos rojos provocaba la muerte. Treinta aos despus, se demostr que esta anemia hemoltica inducida por el medicamento se deba a una insuciencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, la enzima que cataliza el primer paso de la rama oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato. El resultado es la escasez de NADPH en todas las clulas, pero esta insuciencia es ms acusada en el caso de los glbulos rojos. Este defecto, que se hereda en el cromosoma X, es la enfermedad que, con ms frecuencia, da lugar a una disfuncin enzimtica, ya que afecta a cientos de millones de personas. El principal papel del NADPH en los glbulos rojos consiste en reducir la forma disulfuro del glutatin a la forma sulfhidrilo. La enzima que cataliza la regeneracin del glutatin reducido es la glutatin reductasa.
-Glu Cys S S -Glu Cys Gly
Glutatin reducido (GSH)

Gly + NADPH + H+
Glutatin reductasa

2 -Glu

Cys SH

Gly + NADP+

Glutatin oxidado (GSSG)

Los glbulos rojos con un nivel reducido de glutatin reducido son ms susceptibles a la hemolisis. Cmo podemos explicar este fenmeno desde el punto de vista bioqumico? Podemos abordar esta cuestin planteando otra: Por qu el frmaco antimalrico pamaquina destruye los glbulos rojos? La pamaquina, un glicsido de purina presente en las habas, es un agente oxidante que provoca la oxidacin de los perxidos, especies reactivas del oxgeno que pueden daar las membranas, as como otras biomolculas. Normalmente, los perxidos se eliminan mediante la enzima glutatin peroxidasa, que utiliza el glutatin reducido como agente reductor.

459

Glutatin peroxidasa

2 GSH 1 ROOH

GSSG 1 H2O 1 ROH

Figura 26.4 Glbulos rojos con cuerpos de Heinz. La micrografa ptica muestra
glbulos rojos obtenidos a partir de una persona con insuficiencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa. Las partculas oscuras, denominadas cuerpos de Heinz, presentes en el interior de las clulas son agregados de protenas desnaturalizadas que se adhieren a la membrana plasmtica y se tien con colorantes bsicos. En estas personas, los glbulos rojos son muy propensos al dao oxidativo. [Cortesa del
Dr.Stanley Schrier.]

En ausencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, los perxidos continan daando las membranas porque no se est produciendo NADPH para regenerar el glutatin. El glutatin reducido tambin es esencial para el mantenimiento de la estructura normal de los glbulos rojos, ya que preserva la estructura de la hemoglobina. La forma reducida del glutatin acta como un amortiguador de grupos sulfhidrilo que mantiene los grupos sulfhidrilo de los residuos de hemoglobina en la forma reducida. Cuando el nivel de glutatin reducido no es el adecuado, los grupos sulfhidrilo de la hemoglobina no pueden seguir estando en la forma reducida. Las molculas de hemoglobina se entrecruzan entre s formando agregados sobre la supercie celular que se conocen con el nombre de cuerpos de Heinz (Figura 26.4). Las membranas daadas por los cuerpos de Heinz y las especies reactivas del oxgeno se deforman y aumenta la probabilidad de lisis celular. Por tanto, la respuesta a nuestra pregunta es que la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa es necesaria para mantener los niveles de glutatin reducido capaces de proteger contra el estrs oxidativo. Sin embargo, en ausencia de estrs oxidativo, la insuciencia es bastante beneciosa. La sensibilidad hacia la pamaquina de las personas que presentan esta insuciencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa tambin demuestra claramente que las reacciones atpicas ante los medicamentos pueden tener una base gentica.

Aspecto biolgico
En determinadas circunstancias, una insuficiencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa confiere una ventaja evolutiva
La variante ms frecuente de la insuciencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa se caracteriza porque su actividad enzimtica en los glbulos rojos es 10 veces menor y su incidencia entre la poblacin americana de origen africano es del 11%. Esta elevada frecuencia sugiere que, en determinadas condiciones ambientales, la insuciencia puede resultar ventajosa. De hecho, la insuciencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa protege contra la malaria causada por Plasmodium falciparum (Figura 26.5). Los parsitos que provocan esta enfermedad necesitan NADPH para su crecimiento ptimo. Por tanto, la insuciencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa es un mecanismo de proteccin contra la malaria, lo que explica su elevada incidencia en las regiones del mundo infestadas por la malaria. Vemos aqu, de nuevo, la interaccin entre la herencia y el entorno a la hora de manifestarse la enfermedad.

Figura 26.5 Glbulo rojo infectado por Plasmodium falciparum. Plasmodium

falciparum es el protozoo parsito que provoca la malaria. Los glbulos rojos son unimportante lugar de infeccin para P.falciparum. En la figura, los parsitos aparecen de color verde. Al crecer, el parsito consume la protena de los glbulos rojos, especialmente la hemoglobina, lo que provoca la muerte celular y origina una anemia en el husped. [Omikron/Photo
Researchers.]

Resumen
26.1  La ruta de las pentosas fosfato genera NADPH y azcares de cinco tomos de carbono La ruta de las pentosas fosfato, presente en todos los organismos, genera NADPH y ribosa 5-fosfato en el citoplasma. El NADPH se utiliza en las biosntesis reductoras, mientras que la ribosa 5-fosfato se utiliza en la sntesis de RNA, DNA y nucletidos que actan como coenzimas. La ruta de las pentosas fosfato comienza con la deshidrogenacin de la glucosa 6-fosfato para formar una lactona que se hidroliza formando 6-fosfogluconato y, posteriormente, se descarboxila oxidativamente para generar ribulosa 5-fosfato. En ambas oxidaciones, el aceptor de electrones es el NADP1. A continuacin, la ribulosa 5-fosfato (una cetosa) se isomeriza a ribosa 5-fosfato (una aldosa). Cuando las clulas necesitan mucho ms NADPH que ribosa 5-fosfato, se activa en las clulas una modalidad distinta de la ruta. En estas condiciones, la ribosa 5-fosfato se convierte en gliceraldehdo 3-fosfato y fructosa 6-fosfato gracias a la transcetolasa y a la transaldolasa. Estas dos enzimas crean una conexin reversible entre la ruta de las pentosas fosfato y la gluconeognesis. La xilulosa 5-fosfato, sedoheptulosa 7-fosfato y eritrosa 4-fosfato son intermediarios de estas interconversiones. De esta forma, se pueden generar 12 molculas de NADPH por cada molcula de glucosa 6-fosfato que se oxida por completo a CO2.

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Problemas461

26.2  El metabolismo en su contexto: la glicolisis y la ruta de las pentosas fosfato se controlan de forma coordinada Cuando se tiene que sintetizar mucha ms ribosa 5-fosfato que NADPH solo la rama no oxidativa de esta ruta mantiene una actividad significativa. En estas condiciones, la fructosa 6-fosfato y el gliceraldehdo 3-fosfato (formados por la ruta glicoltica) se convierten en ribosa 5-fosfato sin que se produzca NADPH. Alternativamente, la ribosa 5-fosfato formada por la rama oxidativa se puede convertir en piruvato va fructosa 6-fosfato y gliceraldehdo 3-fosfato. Mediante esta modalidad, se generan ATP y NADPH y cinco de los seis tomos de carbono de la glucosa 6-fosfato aparecen formando parte del piruvato. La interaccin entre la glicolisis y la ruta de las pentosas fosfato permite que los niveles de NADPH, ATP y materiales de constriccin como la ribosa 5-fosfato y el piruvato se ajusten continuamente a las necesidades celulares. 26.3 La glucosa 6-fosfato deshidrogenasa disminuye el estrs oxidativo El NADPH generado por la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa mantiene el nivel de glutatin reducido necesario para combatir el estrs oxidativo y mantener el entorno reductor apropiado en el interior de la clula. Las clulas con actividad glucosa 6-fosfato deshidrogenasa reducida son especialmente sensibles al estrs oxidativo.

Trminos clave
ruta de las pentosas fosfato (p. 452) glucosa 6-fosfato deshidrogenasa (p.452) glutatin (p. 459) glutatin reductasa (p. 459) glutatin peroxidasa (p. 459)

Respuesta a las PREGUNTAS RPIDAS

raldehdo 3-fosfato, intermediarios de la glicolisis (y de la gluconeognesis).

1. Las enzimas catalizan la transformacin del azcar de cinco tomos de carbono formado durante la fase oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato en fructosa 6-fosfato y glice-

Problemas
1. Taxonoma bioqumica.
CH2OPO32 O H H OH H HO OH H H A OH B H HO CH2OPO32 O H OH H H C D OH O

O C H H H C C C

H OH OH OH
H

O O C H H C C CH2OH OH OH
F

C C C C C
E

O OH H OH OH

H HO H H

(a)  Identifique la 6-fosfonoglucono-d-lactona. _______ (b)  Qu reacciones producen NADPH? _______ (c)  Identifique la ribulosa 5-fosfato. _______ (d)  Qu reaccin genera CO2? _______ (e)  Identifique el 6-fosfogluconato. _______ (f)  Qu reaccin est catalizada por la fosfopentosa isomerasa? _______ (g)  Identifique la ribosa 5-fosfato. _______ (h)  Qu reaccin est catalizada por la lactonasa? _______ (i)  Identifique la glucosa 6-fosfato. _______ (j)  Qu reaccin est catalizada por la 6-fosfogluconato deshidrogenasa? _______ (k)  Qu reaccin est catalizada por la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa? _______ 2. Cambio de fase. La ruta de las pentosas fosfato se compone de dos fases distintas. Cules son y qu funcin desempean? 6

CH2OPO32
I

CH2OPO32
G

CH2OPO32

462 26 La ruta de las pentosas fosfato

3. Diseada para controlar o gobernar. Cul es la enzima reguladora clave de la ruta de las pentosas fosfato? Cul es su seal reguladora ms importante? 7 4. Sin respiracin. Normalmente, la glucosa se oxida completamente a CO2 en las mitocondrias. En qu circunstancias se puede oxidar la glucosa completamente a CO2 en el citoplasma? 6 5. Vigile su dieta, doctor. En cierta ocasin, el clebre psiquiatra Hannibal Lecter coment a la agente Starling del FBI que le encantaba el hgado con habas y un buen Chianti. Por qu esta dieta podra resultar peligrosa para algunas personas? 7 6. Vsceras o vsperas? La carne del hgado y de otros rganos contiene gran cantidad de cidos nucleicos. En el transcurso de la digestin, el RNA se hidroliza, entre otros compuestos qumicos, a ribosa. Explique cmo se puede utilizar la ribosa como combustible. 6 7. Se necesita ATP. El metabolismo de la glucosa 6-fosfato a ribosa 5-fosfato por la accin conjunta de la ruta de las pentosas fosfato y la glicolisis se puede resumir mediante la siguiente ecuacin. 5-glucosa 6-fosfato 1 ATP h 6-ribosa 5-fosfato 1 ADP Qu reaccin necesita el ATP? 8. Siguiendo el rastro de la glucosa. Se aade glucosa marcada con 14C en el C-6 a una disolucin que contiene las enzimas y cofactores de la fase oxidativa de la ruta de las pentosas fosfato. Qu destino le espera al marcaje radioactivo? 9. Sin redundancias. Por qu la insuficiencia de glucosa 6-fosfato deshidrogenasa se manifiesta frecuentemente en forma de anemia? 7
Problemas de integracin de captulos

11. Descarboxilaciones recurrentes. Qu reaccin del ciclo del cido ctrico es la que ms se parece a la descarboxilacin oxidativa del 6-fosfogluconato a ribulosa 5-fosfato?
Problemas para atrevidos

12. Haz lo que puedas. Los glbulos rojos carecen de mitocondrias. Estas clulas metabolizan la glucosa a lactato pero tambin generan CO2. Con qu fin se produce lactato? Cmo pueden los glbulos rojos generar CO2 si carecen de mitocondrias? 6 13. Mezclando los carbonos. Se aade ribosa 5-fosfato marcada con 14C en el C-1 a una disolucin que contiene transcetolasa, transaldolasa, fosfopentosa epimerasa, fosfopentosa isomerasa y gliceraldehdo 3-fosfato. Cmo se distribuye el marcaje radioactivo en la eritrosa 4-fosfato y en la fructosa 6-fosfato que se forman en esta mezcla de reaccin? 6 14. Estequiometras sintticas. Cul es la estequiometra de la sntesis de (a) ribosa 5-fosfato a partir de glucosa 6-fosfato sin que se genere al mismo tiempo NADPH? (b) NADPH a partir de glucosa 6-fosfato sin que se generen al mismo tiempo pentosas? 6 15. Poder reductor. Qu proporcin NADPH/NADP1 se necesita para mantener [GSH] 5 10 mM y [GSSG] 5 1 mM? Utilice los potenciales redox mostrados en la Tabla 20.1. 16. Recogiendo carbonos. Los experimentos con marcadores radioactivos pueden proporcionar una estimacin de cunta glucosa 6-fosfato se metaboliza por medio de la ruta de las pentosas fosfato y cunta se metaboliza por medio de la accin conjunta de la glicolisis y el ciclo del cido ctrico. Suponga que tiene muestras de dos tejidos distintos, as como dos muestras de glucosa marcada radioactivamente, una marcada con 14C en el C-1 y otra con 14C en el C-6. Disee un experimento que le permita determinar la actividad relativa del metabolismo aerbico de la glucosa en comparacin con el metabolismo a travs de la ruta de las pentosas fosfato. 6

10. A travs del espejo. Explique por qu el ciclo de Calvin y la ruta de las pentosas fosfato casi son imgenes especulares entre s.

En la direccin www.whfreeman.com/tymoczko2e se pueden encontrar lecturas recomendadas para este captulo