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Servicios de Calibracin y Cualificacin en instalaciones y equipamientos en centros de Cultivo Celular

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

Introduccin a la cualificacin de Equipos Analticos

INTRODUCCIN

Cualificacin de equipos de laboratorio


USP 31 / NF 28 (2008) General Chapter <1058>: Cualificacin de Instrumentos Analticos
Carcter de recomendacin

Etapas de cualificacin
Cualificacin del Diseo (DQ) Cualificacin C lifi i de d la l Instalacin I l i (IQ) Cualificacin de la Operacin (OQ) Cualificacin de la Ejecucin del Proceso (PQ)

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

INTRODUCCIN

Etapas de cualificacin
Cualificacin del Diseo (DQ)
Definir las especificaciones funcionales y operacionales
Equipo Software

A realizar antes de la compra del instrumento

Cualificacin lf de d l la Instalacin l (IQ)


Garantizar que el equipo se ha entregado conforme a las especificaciones de diseo Garantizar la correcta instalacin del equipo A realizar en el momento de la instalacin

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

INTRODUCCIN

Etapas de cualificacin
Cualificacin de la Operacin (OQ)
Documentar que el equipo funciona de acuerdo a sus especificaciones funcionales en el ambiente seleccionado

Cualificacin de la Ejecucin j del Proceso ( (PQ) )


Documentar el comportamiento consistente del equipo de acuerdo a su uso previsto Incluye, Incluye durante todo el tiempo de operacin de un equipo
actividades de calibracin de rutina mantenimiento preventivo y las reparaciones necesarias controles de cambios.

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INTRODUCCIN

Etapas de cualificacin
Validacin Mtodo

FAT

Especific. de Diseo (DS)

Diseo del Equipo

Fabric. del Equipo

In nstalacin n (IQ)

Seleccin del equipo (DQ)

Confirmac in de la operacin (OQ)

Funcionam. Funcionam Continuado (PQ)

SAT

Soporte Tcnico

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Exigencias de cualificacin

Exigencias de cualificacin
En funcin de la criticidad de los equipos
Exigencias documentales Exigencias de Cualificacin

D ejemplos Dos j l de d clasificacin l ifi i


Recomendacin QTI Recomendacin USP

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EXIGENCIAS DE CUALIFICACIN

Recomendacin QTI
CRIT.
Tipo I

CLASE
Equipo de medicin y ensayo

CARACTERSTICAS
Se utiliza para la generacin de un dato analtico, (dato primario) Debe ser chequeado y /o calibrado a unas frecuencias determinadas Debe mantenerse en estado validado

DOCUMENTACIN
Documentacin del suministrador URS PNTs Calibracin / cualificacin Formacin del personal Logbook de equipo Documentacin del suministrador URS PNTs Calibracin / cualificacin Formacin del p personal Logbook de equipo Documentacin del suministrador PNTs Formacin del personal PNTs (si procede) Documentacin del suministrador

EJEMPLO
Balanzas, pHmetro, HPLC, KF, IR, Neveras Neveras, Congeladores, Sist. de tto de agua, Micropipetas, estufas Pesas de referencia Registro de condiciones ambientales

Tipo I Equipo de Se utiliza para controlar o verificar un equipo de control y medicin y ensayo verificacin Debe calibrarse a unas frecuencias determinadas. Tipo II Equipo de Interviene directamente en la realizacin de un apoyo analtico ensayo pero no genera un resultado analtico Debe ser chequeado o controlado a unas frecuencias determinadas NC Equipo de Interviene en el proceso de anlisis de forma apoyo al indirecta laboratorio NO es necesario efectuar chequeos especficos, y no necesita ser validado ld d Puede tener procedimiento asociado

Bao de temperatura Centrfuga Cronmetros Placas calefactoras Agitadores Ultrasonidos

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EXIGENCIAS DE CUALIFICACIN

Recomendacin USP
CAT Criterio de Clasificacin
Equipamiento estndar de laboratorio sin capacidad de laboratorio, medicin ni requerimientos de calibracin

Exigencias de Cualificacin
Especificaciones: las del fabricante Registro documental doc mental de la verificacin erificacin de conformidad con requerimientos

Ejemplos
Agitadores magnticos Vortex Centrfugas Baos de ultrasonidos Balanzas pHmetros Termmetros Bombas Hornos Baos de agua Test de disolucin HPLC Espetrofotmetros

Instrumentos estndares con valores de medida o control de parmetros fsicos

Requerimientos de usuario dentro de las funciones del equipo Requiere Calibracin Registro documental de conformidad con requerimientos PNTs Cualificacin de la Instalacin (IQ) y la operacin (OQ) Cualificacin completa V ifi i de Verificacin d las l funciones f i especficas fi

Equipos complejos y sistemas informatizados

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Contenido del curso

CONTENIDO DEL CURSO

De qu trata este seminario?


Equipos del grupo A
Verificacin interna

Equipos del grupo B


Calibracin Cualificacin
Equipos del grupo C
Contrato de mantenimiento y servicio tcnico con la casa suministradora

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CONTENIDO DEL CURSO

Ejemplos que trataremos


Equipos susceptibles de Calibracin
pHmetro Balanzas

M Mapeos trmicos t i
Estufas Cmaras fras y congeladores Cmaras climticas

Cualificacin de equipos de esterilizacin


Autoclaves

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CALIBRACIN DE EQUIPOS ANALTICOS

Calibracin de equipos analticos


Calibracin de masa
Balanza analtica

Calibracin qumica
pHmetro

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Calibracin de pH

CALIBRACIN DE pH

pH
Medida de la acidez o basicidad de una solucin. Concentracin de cationes hidrgeno [H+] presentes en una solucin solucin.
La sigla significa peso de hidrgeno o potencial de hidrgeno (pondus Hydrogenii o potentia Hydrogenii). y g )

Logaritmo negativo de base 10 de la actividad de los iones hidrgeno. Esto es:

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CALIBRACIN DE pH

Calibracin de pH
INDICADOR PH 7 5 pH 7,5

SOLUCION PATRN pH Se pueden llevar a cabo ajustes de la recta de calibracin con soluciones patrn certificadas en casi todo el rango de medicin, entre 2 y 12 de pH.

En caso de no poder atemperarse el medio, medio se deber llevar a cabo siempre una medicin de la temperatura para poder compensar los valores de dicha solucin, muy variables con la temperatura.

MEDIO LIQUIDO ATEMPERADO APROX 23 C

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CALIBRACIN DE pH

Reacciones REDOX
Reacciones de transferencia de electrones.
REDUCTOR (forma oxidada): es aquel q elemento qumico q que q tiende a ceder electrones de su estructura qumica al medio, quedando con una carga positiva mayor a la que tena. OXIDANTE (forma reducida ): es el elemento qumico que tiende a captar esos electrones, quedando d d con carga positiva iti menor a la l que tena. t

Cuando un elemento qumico reductor cede electrones al medio se convierte en un elemento oxidado oxidado.
Forma un par redox con su precursor.

Cuando C d un elemento l qumico i capta electrones l d del l medio di se convierte i en un elemento l reducido.
Forma un par red redox ox con su precursor reducido reducido.

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CALIBRACIN pH

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Calibracin de masa

CALIBRACIN DE MASA

Calibracin de balanzas analticas


UNEEN 45501
Aspectos metrolgicos de los instrumentos de pesar en funcionamiento no automtico

GENAC13
Calibracin l b de d instrumentos de d pesaje en f funcionamiento no automtico

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CALIBRACIN DE MASA

Clases de Masas y errores mximos tolerados ( mg)


E1
50 kg 20 kg g 10 kg 5 kg 2 kg 1 kg 500 g 200 g 100 g 50 g 20 g 10 g 5g 25 10 5 2.5 1.0 0.5 0.25 0.10 0.05 0.030 0.025 0 020 0.020 0.015

E2
75 30 3 15 7.5 3.0 1.5 0.75 0.30 0.15 0.10 0.080 0 060 0.060 0.050

F1
250 100 50 25 10 5 2.5 1.0 0.5 0.30 0.25 0 20 0.20 0.15

F2
750 300 3 150 75 30 15 7.5 3.0 1.5 1.0 0.8 06 0.6 0.5

M1
2 500 1 000 500 250 100 50 25 10 5 3 2.5 20 2.0 1.5

M2
7 500 3 000 1 500 750 300 150 75 30 15 10 8 6 5

M3
25 000 10 000 5 000 2 500 1 000 500 250 100 50 30 25 20 15 2g 1g 500 mg 200 mg 100 mg 50 mg 20 mg 10 mg 5 mg 2 mg 1 mg

E1
0.012 0.010 0.008 0.006 0.005 0.004 0.003 0.002 0.002 0.002 0.002

E2
0.040 0.030 3 0.025 0.020 0.015 0.012 0.010 0.008 0.006 0.006 0.006

F1
0.12 0.10 0.08 0.06 0.05 0.04 0.03 0.025 0.020 0.020 0.020

F2
0.4 0.3 3 0.25 0.20 0.15 0.12 0.10 0.08 0.06 0.06 0.06

M1
1.2 1.0 0.8 0.6 0.5 0.4 0.3 0.25 0.20 0.20 0.20

M2
4 3 2.5 2.0 1.5

M3
12 10

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Mtodo de calibracin
Antes de empezar
Estabilizacin (15 minutos) Comprobacin de la base de apoyo Revisin R i i visual i l del d l equipo i Identificacin y anotacin de los datos que detallen de forma inequvoca dicho equipo.

Comprobacin del cero (ausencia de peso alguno). Seleccin de las masas patrn Seleccin de 5 puntos el rango de trabajo

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CALIBRACIN DE MASA

La pesada
10 pesadas distintas en cada punto seleccionado
5 centradas 5 descentradas repartidas entre los distintos cuadrantes

E t cada Entre d repeticin: ti i la l indicacin i di i de d la l balanza b l vuelve l a cero. A la finalizacin del ensayo: la balanza vuelve al cero.

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CALIBRACIN DE MASA

Utilizacin de lastre
Hasta un mximo del mayor valor realizado con las masas patrn utilizadas Corregir el peso del lastre indicado por la balanza Registrar
Indicacin peso lastre en balanza. Peso patrn lo ms prximo al del lastre. Indicacin en balanza del peso patrn. Correccin en dicho punto a realizar en la indicacin de la balanza. Peso del lastre con la correccin correspondiente.

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CALIBRACIN DE MASA

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MAPEO TRMICO DE CMARAS

Equipos ms conflictivos
Cmaras climticas
Temperatura y Humedad

Cmaras fras, congeladores


Aislamiento l trmico Distribucin de temperatura Penetracin en la carga

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Cmaras climticas

CMARAS CLIMTICAS
Condiciones necesarias en todo el volumen de la cmara
ESTABILIDAD NORMAL
25 2 C 60 5 % HR

ESTABILIDAD ACELERADA
40 2 C 75 5 % HR

ESTABILIDAD INTERMEDIA
30 2 C 60 5 % HR

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CMARAS CLIMTICAS

Distribucin de sondas

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CMARAS CLIMTICAS

Temperatura y Humedad
30,0 29,0 28,0 27,0

Lmite Superior (27C // 65%HR)

26,0 25,0 24,0 23,0 Lmite inferior (23C // 55% HR) 22,0 21,0 20,0

Tiempo

73 72 71 70 69 68 67 66 65 64 63 62 61 60 59 58 57 56 55 54 53 52 51 50 49 48 47

Hum medad Relativ va (%HR)

Temp peratura (C)

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CMARAS CLIMTICAS

Aspectos clave
Calibracin y ajuste: muy importante Dientes de sierra ms acentuados cuanto ms extremo es el funcionamiento de la cmara (40c,75% HR), sobre todo en la variable humedad. La redistribucin de aire (ventilador) resulta otra variable crtica en el buen funcionamiento de la cmara. Influencia de la carga en las zonas en las que se dificulte la circulacin del aire, aire cuando la carga es excesiva. Ciclos de duracin variable (de 4 a 12 horas, horas segn tamao y regulacin de la cmara). cmara) Normativa reguladora: ICH guidelines.

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Neveras, cmaras fras, congeladores

NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

NEVERAS
Suelen ser de pequeo/mediano tamao (1 m3 mximo). Las bandejas para soportar la carga deben permitir el paso de aire fro a travs de los espacios libres. Problemas con el exceso de carga (muy habitual) habitual). Temperatura de funcionamiento: 5C 3C. Dientes de sierra muy acusados. Se recomienda sistema de ventilacin forzada.

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

NEVERAS: Distribucin trmica


La ubicacin de las sondas pretende identificar zonas de enfriamiento preferencial preferencial, o zonas donde se acumule aire caliente. Es muy tpico que dientes de y acusados en todas las sondas coincidan con sierra muy poca dispersin trmica por existir poca densidad de carga.

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

NEVERAS: Distribucin trmica


10 9 8 7

Temp peratura (C)

6 5 4 3 2 1 0

Horas

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

Cmaras frigorficas
Tamao muy variable
Generalmente grandes o muy grandes, permitiendo el trnsito de personas (varios metros cbicos).

Las baldas p para colocar carga g se ubican en las paredes p laterales


Pasillos para la correcta distribucin de aire.

G Grupos de d f fro situados it d en el lt techo, h encima i d de l la puerta,.. t


Ventiladores de impulsin para forzar el movimiento del aire fro. Dientes de sierra muy dependientes de la ubicacin de la sonda de control y el grupo de fro.

Duracin del estudio: 24 horas

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

Cmaras frigorficas
Aislamiento trmico a travs de las paredes y puerta/s: Estudios extra:
Apertura de puertas Corte de tensin

Importante diferenciar
sondas en distribucin sondas en penetracin

Especificaciones de temperatura: definidas por el propio principio de conservacin del producto.


5 3 C

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

Cmaras frigorficas
En esta distribucin de sondas se persigue localizar puntos fros/calientes entre los termopares ubicados en cmara. Adems, se comprobar el comportamiento de la carga, en funcin de su ubicacin dentro de la cmara y la distribucin de la corriente de aire fro.

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Cmaras fras: Ubicacin de sondas

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

CMARA FRIGORFICA: Distribucin


10 9,5 9 85 8,5 8 7,5 7 6,5 6 5,5 5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0

Mx (8 C)

Tempe eratura (C)

Mn (2 C)

Horas

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

CMARA FRIGORFICA: Penetracin


10 9,5 9 85 8,5 8 7,5 7 6,5 6 5,5 5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0

Mx (8 C)

Temper ratura (C)

Mn (2 C)

Horas

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

CONGELADORES y ULTRACONGELADORES
Temperaturas
p por debajo j de 18C (congeladores) g hasta 80C (ultracongeladores).

Fuertes dispersiones trmicas entre los diferentes cajones


Muy influenciados por la cantidad de carga

F Fuentes t de d error importantes i t t


Formacin de bloques de hielo en las paredes y en la carga.

Control trmico poco preciso


Grandes dientes de sierra.

Duracin del estudio: 812 horas

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NEVERAS, CMARAS FRIGORFICAS Y CONGELADORES

CONGELADORES Y ULTRACONGELADORES
Cajn A
2

2 1

Cajn A

Cajn B
3

Cajn B
5

4 6

Cajn C

Cajn j C
4

Cajn j D Cajn D
6

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CONGELADORES Y ULTRACONGELADORES

Distribucin trmica
0 -10 -20 -30 -40 -50 -60 -70 -80 -90 -100

Temp peratura

Horas

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Almacenes

ALMACENES
Distribucin por zonas
registro g de las condiciones ambientales Verificar distribucin horizontal / vertical del aire.

Ubicacin de sondas
12 sensores por cada 200 m2 aproximadamente alturas hasta 68 metros

Duracin del estudio


72 horas
Verano e Invierno Periodos laborables y no laborables

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ALMACENES

Distribucin de sondas

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ALMACENES

Distribucin trmica
40 39 38 37 36 35 34 33 32 31 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 15 14 13 12 11 10

Temp peratura ( C) )

Horas

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ALMACENES

Temperatura cintica media (MKT)


Manera terica de ponderar el efecto de un pico/excursin de temperatura Temperaturas por encima de los 0 C C Controlar procesos
envo de productos biolgicos supervisin de equipos de temperatura controlada.

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ALMACENES

Ecuacin de Arrhenius

TK UH R T1 a Tn N

Temperatura cintica media (K) Energa de Activacin (entre 60100 KJ/mol) Constante universal de los gases ideales (8,3 103 KJ/molK) Temperaturas de d cada d muestra (K) Nmero de ensayos de temperatura

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ALMACENES

Ejemplo
Cmara frigorfica (2,0 8,0 C) Sonda de registro de temperatura que registra datos cada minuto Min 1 2 3 4 5 6 7 MEDIA MKT T (C) 2 2 5 8 8 8 8 5,9 6,3

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ALMACENES

Conclusiones a partir de MKT


MKT es mayor que la media aritmtica
Ms sensibile a las variaciones de temperatura

Estudios prolongados
Se amortiguan excursiones puntuales l d de temperatura

MKT: justificacin de pequeas excursiones de temperatura

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CUALIFICACIN DE EQUIPOS DE ESTERILIZACIN: AUTOCLAVES

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Conceptos bsicos

CONCEPTOS GENERALES

Esterilizacin
ESTERILIDAD
Ausencia de todas las formas de vida.

ESTERILIZACIN
Proceso por el l cual l se mata o elimina l todas d las l formas f de d vida d (no slo l microorganismos).

CICLO DE ESTERILIZACIN
Secuencia automtica de las etapas de funcionamiento realizadas en un esterilizador con el fin de lograr la esterilizacin.

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CONCEPTOS GENERALES

Esterilizacin
En la prctica, se trata de un proceso peligroso para los microorganismos, ms que letal, ya que se pone a los microorganismos en Riesgo de muerte.

EJEMPLO
Tratamos una botella contaminada con Bacillus stearothermophilus con calor hmedo a 121 C durante 1 min (tomando D121=1min). 1min) Si est contaminada con 10 Mil esporas sobrevivir ~ 1 Millar Millar. 10 Millones de esporas sobrevivir ~ 1 Milln.

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CONCEPTOS GENERALES

Esterilizacin
Dicho de otro modo:
Experimentalmente se ha comprobado que los mtodos habitualmente utilizados para esterilizar consiguen una reduccin exponencial de la poblacin microbiana respecto al tiempo. Cada vez que transcurre un cierto intervalo de tiempo (denominado D, tiempo de reduccin decimal), se reduce en un 90% (una unidad logartmica) la poblacin de microorganismos.

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CONCEPTOS GENERALES

Supervivencia a 121 C
B. Stearothermophilus (tomando D121=1 minuto)
MINUTOS 0 1 2 3 4 5 6 7 8 SUPERVIVIENTES 10,000,000 1,000,000 100,000 10,000 1,000 100 10 1 0,1 Log10 7.00 6.00 5.00 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 1.00

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CONCEPTOS GENERALES

Supervivencia
Menores valores de Dt significan una mayor tasa de muerte o una muerte ms rpida. Cuando el logaritmo del nmero de supervivientes es menor a cero se habla de probabilidad de supervivencia.

Si la probabilidad es 1, significa que hay 0,1 microorganismos viables por unidad esterilizada. Dicho de otro modo: una unidad contaminada por cada 10 unidades idnticas procesadas

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CONCEPTOS GENERALES

Curva de Supervivencia a 121 C


12.000.000 10.000.000 Poblacin microb biana 8.000.000

D121=1
6.000.000 4.000.000 2.000.000 0 0 2 4 6 8 10 Minutos de esterilizacin 12 14 16

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CONCEPTOS GENERALES

Curva de Supervivencia a 121 C


10

Log Po oblacin m microbiana

8 6 4 2 0 -2 -4 -6 6 -8 -10

D121

6 7 8 9 10 Minutos de esterilizacin

11

12

13

14

15

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CONCEPTOS GENERALES

Tiempo de reduccin decimal (D)


El valor de D est estrechamente relacionado con la temperatura.
De ah que se denomine tambin DT, siendo T T el valor de la temperatura de esterilizacin.

El valor de D se incrementa
cuanto ms resistente sea el l microorganismo cuanto ms suave sea el proceso de esterilizacin.

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CONCEPTOS GENERALES

Tiempo de reduccin decimal (D)

N
Donde: N0

N 0 u 10

 t / DT

poblacin inicial de microorganismos

N poblacin de microorganismos en el minuto t T DT tiempo de esterilizacin, en minutos tiempo de reduccin decimal a la temperatura T

Si la contaminacin inicial es de 106 microorganismos y su valor de D121 es 1 minuto, ser necesaria una exposicin mnima de 12 minutos a 121C para conseguir la esterilidad del producto (es decir, 106).

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CONCEPTOS GENERALES

Esterilidad
Un producto se considera estril cuando la probabilidad de encontrar un microorganismo en l es inferior a uno entre un milln. Segn el modelo de reduccin exponencial de la poblacin esta probabilidad se consigue cuando la cantidad de microorganismos se ha reducido a 106 microorganismos.
Norma UNEEN 556

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Mtodos usuales de esterilizacin

Mtodos usuales de esterilizacin


Calor seco
Altas temperaturas

Calor Hmedo
Vapor, 121C

Radiacin Ionizante
Radiaciones letales para los microorganismos

Mtodos Qumicos
Empleo de xido de Etileno

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MTODOS USUALES DE ESTERILIZACIN

Parmetros crticos

Mtodo empleado p
Calor seco Calor hmedo Radiacin xido de etileno

Parmetros crticos
Temperatura, Recirculacin de aire

Temperatura, Presin, Saturacin de vapor

Dosis de irradiacin, Longitud de onda

Temperatura, Humedad, Concentracin del gas

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ESTERILIZACIN POR CALOR

ESTERILIZACIN POR CALOR

Letalidad
LETALIDAD de un proceso de esterilizacin (F)
T  To

F
Depende de:

10

u t

La intensidad del mtodo (de la temperatura en este caso) La duracin de la exposicin

La letalidad

no es la duracin del proceso de esterilizacin.

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ESTERILIZACIN POR CALOR

Letalidad
El valor de letalidad F se expresa en unidades de tiempo equivalentes
T  To

10

u t

To es la temperatura de referencia para la cual es conocida Dt. T es la temperatura de esterilizacin real para cada intervalo de tiempo t.

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ESTERILIZACIN POR CALOR

Letalidad
Z (Coeficiente de temperatura)
Nmero de grados de variacin de la temperatura que produce una variacin del valor de Dt de 10 veces.
T  To

F
D Depende d d de

10

u t

microorganismo que se desea eliminar


Bacillus stearothermophilus Bacillus subtilis

y del mtodo de esterilizacin

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

ESTERILIZACIN POR CALOR

Letalidad
El valor usual de Z en la esterilizacin a vapor es de 10C
Corresponde al microorganismo ms resistente
Bacillus estearothermophilus
T  To

10

u t

D111 = 6,2 minutos D121 = 0,62 minutos

Z = D = 10 C

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

ESTERILIZACIN POR CALOR

Relacin entre Z y D
1.5

Log D Value

0.5

0 110 -0.5

10 C
115 120 125 130

z is the number of degrees to change the D value by one log. log


-1
o Sterilising g Temperature, p C

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

AUTOCLAVES

ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Tipos de autoclaves
Pequeos o grandes
Menos o ms de un mdulo de esterilizacin:
300 x 300 x 600 mm

Generador de vapor
Independiente o propio del autoclave

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Tipos de autoclaves

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Normativa de aplicacin
Validacin y Control de rutina de la esterilizacin por vapor de agua
UNE EN 554:1995

Esterilizacin. Esterilizadores de vapor. Esterilizadores grandes


UNE EN 285:1997

Criterios de letalidad:
EP y USP

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Parmetros crticos
Temperatura
121 121C C , 134 134C C

Saturacin de vapor / calidad de vapor. Presin


muy relacionada con la temperatura

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Etapas del proceso de esterilizacin


Prevaco Calentamiento Flash Esterilizacin Secado Enfriado

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Etapas del proceso de esterilizacin


Prevaco
C l Calentamiento i Flash Esterilizacin Secado Enfriado PREVACO:
elimina el aire de la cmara del autoclave para evitar que se formen bolsas, las cuales impiden al vapor acceder a todos los puntos de la cmara. Normalmente, se alternan pulsos de vapor y vaco para acelerar la extraccin del aire.

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Etapas del proceso de esterilizacin


Prevaco CALENTAMIENTO
el objetivo de esta fase es alcanzar la temperatura de esterilizacin prevista (normalmente 121C o superior) utilizando para ello el vapor que penetra en la cmara elevando la temperatura de sta y su contenido. Lgicamente, al ser un recipiente cerrado aumenta la presin en el interior de la cmara.

Calentamiento
Flash Esterilizacin Secado Enfriado

El calentamiento de la recmara facilita el calentamiento y el mantenimiento de la meseta


actuando como aislante trmico con respecto al exterior evitando la formacin de condensados. condensados

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Etapas del proceso de esterilizacin


Prevaco Calentamiento Flash EQUILIBRIO
Se iguala la temperatura en todos los puntos de la cmara y de la carga. El valor de la presin en el interior de la cmara corresponde al punto de Saturacin de Vapor.
De no ser as, podran quedar residuos de aire en la cmara.

Esterilizacin
Secado Enfriado

El calentamiento de la recmara es muy importante para


correcta redistribucin de vapor igualacin trmica.

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Etapas del proceso de esterilizacin


Prevaco Calentamiento Flash MANTENIMIENTO
Aqu comienza la esterilizacin trmica propiamente dicha. Se mantienen las condiciones de temperatura y presin durante el tiempo necesario para asegurar g la letalidad Fo requerida. La duracin y temperatura de esta fase son los parmetros usados habitualmente para definir el ciclo ciclo.

Esterilizacin
Secado Enfriado

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ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Etapas del proceso de esterilizacin


Prevaco Calentamiento Flash Esterilizacin Secado
La temperatura y la presin comienzan a descender hasta las condiciones ambientales.

ENFRIAMIENTO
Cuando termina el proceso de esterilizacin, se corta el suministro de vapor.

Enfriado

Normalmente, este proceso es empleado en ciclos de esterilizacin de lquidos contenidos en recipientes.


El objetivo es evitar que la presin ejercida en el interior del envase le pueda hacer explosionar por un cambio brusco de presin.

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Etapas del proceso de esterilizacin


Prevaco Calentamiento Flash Esterilizacin SECADO
Se corta el suministro de vapor. La temperatura y la presin descienden hasta las condiciones ambientales, y al mismo tiempo se lleva a cabo la extraccin de aire de la cmara. El vaco acelera el secado de la cmara y de la carga al extraer de ella el vapor residual y el aire caliente.

Secado
Enfriado

Este paso es muy til para secar de condensados el material poroso (sobre todo textiles) La estanqueidad de la cmara es crtica en este punto, evitando que entre aire no estril una vez concluida la esterilizacin.

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ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Proceso de esterilizacin por vapor


Para la esterilizacin con vapor se define F0 como:
Tiempo que durara una esterilizacin si se hubiera realizado a 121 121C. C.

Esta temperatura de referencia se ha elegido por ser un buen compromiso entre efectividad y economa para la mayora de los materiales.

T  121

F0

10

u t

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ESTERILIZACIN POR VAPOR. AUTOCLAVES

Letalidad (F0)

La letalidad de un ciclo de 12 minutos a 121 C (para D=1 minuto y Z=10). Qu tiempo de exposicin sera necesario para conseguir la misma letalidad a una temperatura de 116 C? El tiempo de ti d exposicin i i sera: 12 = 10 (116121)/10 x t 12= 100,5 x t t = 12 / 0,32 0 32 t = 37,5 minutos

T  121

F0

10

u t

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

AUTOCLAVES: CUALIFICACIN

AUTOCLAVES. CUALIFICACIN

Fases del proceso de cualificacin


Cualificacin del diseo (DQ )
Adecuacin al uso y especificaciones del propio usuario.

Cualificacin de la Instalacin (IQ)


estn correctamente instalados l d los l componentes segn diseo d original? l

Cualificacin de la Operacin (OQ)


qu tal funciona el autoclave en vaco? Distribucin trmica

Cualificacin de la ejecucin j del p proceso (PQ) ( )


y que tal la carga? Penetracin trmica

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Cualificacin de la Operacin
Calibraciones / verificaciones Funcionamiento de alarmas alarmas, panel de control control, etc. etc Capacidad operacional: DISTRIBUCIN TRMICA, durante el tiempo de mantenimiento (meseta)
Temperaturas dentro de la banda de esterilizacin especificada (max: T + 3K) Fluctuaciones inferiores a 1 C (dientes de sierra) Dispersin mxima: 2C

Eficacia esterilizacin del filtro de aire

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Distribucin de sondas

ENTRADA TERMOPARES

PUERTA ZONA ESTRIL

8 39 7 6

5 2 12 1 10 11
DESAGE

PUERTA ZONA NO ESTRIL

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Distribucin de sondas
Distribucin de sondas (Puntos crticos)
Desage Zona inferior, , suelo. Paredes laterales. Confluencia de paredes con el techo. Sonda mvil. mvil

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Autoclaves grandes

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Distribucin trmica (OQ)


135

125

115 Temper ratura (C)

105

95

85

75

65 Tiempo

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Distribucin trmica (OQ)


123,0

122,5

Temper ratura (C)

122 0 122,0

121,5

121,0

120,5

120,0

Tiempo

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Distribucin trmica (OQ)


125 124 123 122 Temper ratura (C) 121 120 119 118 117 116 115 Tiempo

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Penetracin trmica (PQ)


Carga:
peor caso en cada uno de los programas (worst case)

Criterios de temperatura:
Temperatura del d l vapor se encuentra d dentro d de la l temperatura de d esterilizacin l Intervalo de tiempo entre la obtencin de la temperatura en la carga y la cmara del esterilizador: esterilizador
15 segundos (d800l) 30 segundos (t800l).

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Penetracin trmica (PQ)


Criterio de letalidad:
15 minutos (E.P.) 12 minutos (U.S.P).

Efi i microbiolgica Eficacia i bi l i


empleo de indicadores biolgicos, normalmente esporas de B. Stearothermophilus

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Letalidad acumulada
T  121

F0acumulado
t: T: Z: L: D:

10

u t

Temperatura en el instante de la lectura. Temperatura base (121,1 C para F0) Incremento de la temperatura requerido para cambiar el valor de D en una unidad logartmica (para F0 se asume Z=10) Intervalo de lectura (en minutos) minutos). Tiempo de reduccin decimal a una temperatura determinada (para para F0 se asume D=1) D=1).

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Las claves de la cualificacin


Nmero de sondas:
12 sondas / m3, suficientes por experiencia. Por cada m3 ms, varias recomendaciones.

N Nmero d de ciclos: i l
Validacin inicial: 3 ciclos (sin carga y para cada carga) Revalidaciones: 1 ciclo

Periodos de revalidacin: anual suele ser suficiente (con la misma carga).

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Ciclos con carga slida

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Ciclo con carga slida

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Ciclo con carga slida


130 129 128 127 126 Temp peratura (C) ) 125 124 123 122 121 120 119 118 117 116 115 Tiempo

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CUALIFICACIN DE AUTOCLAVES

Cargas lquidas (volmenes diferentes)

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AUTOCLAVES. CUALIFICACIN

Cargas lquidas (diferentes volmenes)


125 124 123 122 121 Temp peratura (C) ) 120 119 118 117 116 115 114 113 112 111 110 Tiempo

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

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CONCLUSIONES

CONCLUSIONES
La cualificacin de equipos de laboratorio requiere un anlisis de criticidad para determinar el alcance de la cualificacin Los procedimientos de calibracin y/o cualificacin dependen en gran medida de la naturaleza del instrumento y/o equipo La identificacin de los puntos crticos resulta vital para el establecimiento de los criterios de aceptacin y el anlisis eficaz de los resultados

Cualificacin de Equipos de Laboratorio

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Cualificacin de Equipos de Laboratorio

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