Revtox 28 1 2011

Revista de
Toxicologa
RGANO OFICIAL DE LA ASOCIACIN ESP AOLA DE TOXICOLOGA
Volumen 28 Nmero 1 (2011)

INDEX EDITORIAL A. Lafuente Gimnez SCIENTIFIC PROGRAM OPENING LECTURE: Metabolic approaches related to endocrine disruptors: toxicological and... JP Cravedi GENERAL LECTURE: Epigenetic regulation of the Ah receptor functions. A Puga CLOSING LECTURE: Pyrethroid insecticides, their toxicokinetic and toxicodynamic mechanisms... A Anadn LECTURES Fluoride in water and foods: The water problems in Tenerife. A Hardisson Bisphenol-A in foods and risk assessment. MR Moyano Analysis of veterinary drug residues in animal tissues. J Blanca Interpretation of post-mortem blood sample results. Alternative strategies. A Vingut Qualitative and quantitative criteria in post-mortem forensic toxicology. MA Martnez Gonzlez Toxicogenomic value in the post-mortem results interpretation. AF Hernndez Quality criteria in the post-mortem toxicological interpretation. ML Soria Snchez Problems of heavy metals in environment. P Bermejo Barrera Organic compounds toxicity: sustainable alternatives. JM Snchez Montero Effects of aquatic contaminants on fish: metabolic and neuroendocrine alterations induced... JM Mguez Safety assessment of cosmetic products. C del Caizo The REACH also affects cosmetics. E Vilanova Availability of alternatives in the cosmetics assessment. G Repetto Emerging diseases associated with xenobiotics exposure: MCS syndrome and... C Valls Llobet Endocrine disruptors exposure and obesity. RV Garca-Mayor Programmed cell death: from molecular biology to clinical process. R Balaa Fouce Risk of accidental and secondary poisonings in rodenticides application. R Mateo Diclofenac's role in driving rapid vulture decline across the Indian subcontinent. MA Taggart Development and implementation of biomarkers in occupational toxicology. F Gil Hernndez Exposome: a powerful tool for evaluating the workplace exposure to toxics. T Camacho Postgraduate education in environmental toxicology. MJ Gonzlez-Muoz Postgraduate training in food safety. A Camen Toxicology teaching in the criminological field. G Repetto Toxicology in the postgraduate studies for graduated veterinary. AJ Garca Fernndez Toxicology teaching in biomedical and health sciences in postgraduate studies. MJ Ruiz ORAL COMMUNICATIONS Food Security Forensic Toxicology and Analytical Technics in Toxicology Environmental Toxicology Alternative Methods and Experimental Toxicology Toxic action mechanisms, Genotoxicity and Carcinogenesis Pharmaceutical Toxicology and drugs abuse Clinical Toxicology Veterinary Toxicology POSTER COMMUNICATIONS Food Security Forensic Toxicology and Analytical Technics in Toxicology Environmental Toxicology Alternative Methods and Experimental Toxicology Clinical and PharmaceuticalToxicology and drug abuse Veterinary Toxicology Toxic action mechanisms, Genoyoxicity, Carcinogenity and Nanotoxicology Toxicology teaching International relations and scientific networks AUTHOR INDEX 1 4 12 12 13 13 13 14 14 15 16 17 18 19 20 21 21 21 22 22 23 24 24 25 25 26 26 26 27 27 28 29 32 34 36 37 39 41 44 51 56 62 69 76 80 89 92 93
SEMESTRAL
INDICE EDITORIAL A. Lafuente Gimnez PROGRAMA CIENTFICO CONFERENCIA INAUGURAL: Toxicologa de los perturbadores endocrinos: un enfoque metablico. JP Cravedi CONFERENCIA GENERAL: Regulacin epigentica de las funciones del receptor Ah. A Puga. CONFERENCIA DE CLAUSURA: Insecticidas piretroides, su toxicocintica y toxicodinamia en... A Anadn PONENCIAS El flur en las aguas y en los alimentos. La problemtica de las aguas de Tenerife. A Hardisson. Evaluacin del riesgo de la presencia de Bisfenol-A en los alimentos. MR Moyano Anlisis de resduos de medicamentos veterinarios en matrices de origen animal... J Blanca. Interpretacin de resultados de la muestra de sangre post-mortem. Estrategias alternativas. A Vingut. Criterios cualitativos y cuantitativos en toxicologa forense post-mortem. MA Martnez Gonzlez. Importancia de la toxicogenmica en la interpretacin de los resultados postmortem. AF Hernndez. Criterios de calidad en la interpretacin toxicolgica post-mortem. ML Soria Snchez. Problemtica de los metales pesados en el medio ambiente. P Bermejo Barrera. Toxicidad de compuestos orgnicos: altenativas sostenibles. JM Snchez Montero. Efectos de contaminantes acuticos en peces: alteraciones metablicas y neuroendocinas... JM Mguez Evaluacin de la seguridad de los productos cosmticos. C del Caizo. El REACH tambin afecta a los productos cosmticos. E Vilanova. Disponibilidad de alternativas en la evaluacin de cosmticos. G Repetto. Enfermedades emergentes relacionadas con la exposicin axenobiticos: sndrome de... C Valls Llobet Exposicin a disruptores endocrinos y obesidad. RV Garca-Mayor. Muerte celular programada: de la biologa molecular al proceso clnico. R Balaa Fouce. Riesgo de intoxicaciones accidentales y secundarias en la aplicacin de rodenticidas. R Mateo. Influencia del diclofenac en el descenso de la poblacin de buitres en India. MA Taggart. Desarrollo y aplicacin de biomarcadores en toxicologa ocupacional. F Gil Hernndez. Exposome: una poderosa herramienta para evaluar la exposicin laboral a txicos. T Camacho. Enseanza de postgrado en toxicologa ambiental. MJ Gonzlez-Muoz. Formacin de postgrado en seguridad alimentaria. AM Camen. La docencia de la Toxicologa en el mbito criminolgico. G Repetto. La toxicologa en los estudios de posgrado para egresados veterinarios. AJ Garca-Fernndez. La docencia de la toxicologa en ciencias biomdicas y de la salud en estudios de postgrado. MJ Ruiz. COMUNICACIONES ORALES Seguridad Alimentaria Toxicologa Forense y Tcnicas Analticas en Toxicologa Toxicologa Ambiental Mtodos alternativos y Toxicologa Experimental Mecanismos de accin Txica, Genotoxidad y Carcinognesis Toxicologa Farmacutica y drogas de abuso Toxicologa Clnica Toxicologa Veterinaria COMUNICACIONES POSTERS Seguridad Alimentaria Toxicologa Forense y Tcnicas Analticas en Toxicologa Toxicologa Ambiental Mtodos alternativos y Toxicologa Experimental Toxicologa Clnica, Farmacutica y drogas de abuso Toxicologa Veterinaria Mecanismos de Accin Txica, Genotxidad, Carcinognesis y Nanotoxicologa Docencia en Toxicologa Relaciones internacionales y redes cientficas NDICE DE AUTORES 1 4 12 12 13 13 13 14 14 15 16 17 18 19 20 21 21 21 22 22 23 24 24 25 25 26 26 26 27 27 28 29 32 34 36 37 39 41 44 51 56 62 69 76 80 89 92 93
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ASOCIACIN ESPAOLA DE TOXICOLOGA Rev. T oxicol. 28 (1) 1-98 2011 ISSN 0212-7113
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El envo de un manuscrito implica: que no ha sido publicado anteriormente (excepto como abstract, o como parte de una conferencia, revisin tesis); que no est considerndose su publicacin en otra revista, libro, etc.; que su publicacin ha sido aprobada por todos los coautores, si los hay; que, cuando y si el manuscrito es aceptado para su publicacin, los autores estn de acuerdo en la cesin automtica del Copyright a la editorial y que el manuscrito no ser publicado en ninguna otra parte ni en ningn otro idioma sin permiso de la editorial. Todos los artculos publicados en esta revista estn protegidos por Copyright, que cubre los derechos exclusivos de reproduccin y distribucin del artculo (p. ej. como separatas) y tambin los derechos de traduccin, Ningn contenido de la revista puede ser reproducido. fotocopiado, microfilmado o almacenado en bases de datos electrnicas, videodiscos, etc., sin el permiso escrito de los titulares del Copyright. El uso de nombres descriptivos, de marcas, marcas registradas, etc., incluso si no se identifican especialmente, no implica que estos nombres no estn protegidos por las leyes y regulaciones correspondientes. Aunque la informacin en esta revista se considera exacta y verdadera en la fecha de publicacin, ni la editorial, ni el director de la revista, ni los autores pueden aceptar ninguna responsabilidad legal por errores u omisiones que puedan acaecer. Los trabajos se enviarn por e-mail a la editora de la Revista de Toxicologa: Dra. M del Prado Mguez Santiyn Universidad de Extremadura. Avda. de la Universidad, s/n. 10071 CCERES (ESPAA) E-mail: revtoxicol@unex.es Fax: (+34) 927 257 110
La Revista de Toxicologa pretende ofrecer a sus lectores (cientficos, docentes, profesionales y estudiosos) informacin actualizada sobre los avances ms recientes en Toxicologa. Dedica especial atencin a los estudios relacionados con los efectos de las sustancias qumicas y los mecanismos de toxicidad, mediante ensayos en animales de experimentacin, mtodos alternativos in vitro y estudios en humanos. Tambin incluye estudios sobre nuevas sustancias y tcnicas analticas. Otro aspecto importante de la revista son los artculos de revisin, especialmente en temas de To x i c o l o g a F u n d a m e n t a l , To x i c o l o g a C l n i c a Genotoxicologa, Toxicologa Ambiental, etc.
ASOCIACIN ESPAOLA DE TOXICOLOGA Resumen actual de caractersticas y normativas

El objetivo fundamental de la Asociacin Espaola de Toxicologa es el de propiciar la relacin y cooperacin entre sus miembros, y coordinar sus esfuerzos a fin de contribuir al desarrollo y difusin de los conocimientos en las diferentes reas de la toxicologa. Su Estatuto fundacional fue aprobado oficialmente el 15 de enero de 1980. Toda persona interesada en pertenecer a esta Asociacin deber cumplimentar una ficha de inscripcin, refrendada por la Junta Directiva. La cuota anual (60 ) se abona por domiciliacin bancaria, Esta cuota da derecho a la recepcin de la Revista de Toxicologa. Una vez admitidos los nuevos asociados recibirn un titulo y, peridicamente, las actas de las reuniones y comunicacin de actividades con carcter nacional e internacional que pueden ser de inters. La asociacin promueve la celebracin, cada dos aos, del Congreso Espaol de Toxicologa, cuya organizacin puede delegar. Adems se ha establecido la celebracin peridica de seminarios o mesas redondas organizados por grupos de trabajo. Cada reunin de este tipo ser monotemtica y abierta a personas no pertenecientes a la Asociacin, y se desarrollar en diferentes ciudades espaolas. La Asociacin organiza tambin programas de control de calidad en Toxicologa Analtica.
Asociacin Espaola de Toxicologa

Secretara de la AETOX Dpto. de Toxicologa y Farmacologa Facultad de Veterinaria Universidad Complutense de Madrid 28040 MADRID e-mail: arantxam@vet.ucm.es
D.L.: CO-723-83. S.V.: 91051 R. ISSN: 0212-7113
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INDEX EDITORIAL A. Lafuente Gimnez SCIENTIFIC PROGRAM OPENING LECTURE: Metabolic approaches related to endocrine disruptors: toxicological and... JP Cravedi GENERAL LECTURE: Epigenetic regulation of the Ah receptor functions. A Puga CLOSING LECTURE: Pyrethroid insecticides, their toxicokinetic and toxicodynamic mechanisms... A Anadn LECTURES Fluoride in water and foods: The water problems in Tenerife. A Hardisson Bisphenol-A in foods and risk assessment. MR Moyano Analysis of veterinary drug residues in animal tissues. J Blanca Interpretation of post-mortem blood sample results. Alternative strategies. A Vingut Qualitative and quantitative criteria in post-mortem forensic toxicology. MA Martnez Gonzlez Toxicogenomic value in the post-mortem results interpretation. AF Hernndez Quality criteria in the post-mortem toxicological interpretation. ML Soria Snchez Problems of heavy metals in environment. P Bermejo Barrera Organic compounds toxicity: sustainable alternatives. JM Snchez Montero Effects of aquatic contaminants on fish: metabolic and neuroendocrine alterations induced... JM Mguez Safety assessment of cosmetic products. C del Caizo The REACH also affects cosmetics. E Vilanova Availability of alternatives in the cosmetics assessment. G Repetto Emerging diseases associated with xenobiotics exposure: MCS syndrome and... C Valls Llobet Endocrine disruptors exposure and obesity. RV Garca-Mayor Programmed cell death: from molecular biology to clinical process. R Balaa Fouce Risk of accidental and secondary poisonings in rodenticides application. R Mateo Diclofenac's role in driving rapid vulture decline across the Indian subcontinent. MA Taggart Development and implementation of biomarkers in occupational toxicology. F Gil Hernndez Exposome: a powerful tool for evaluating the workplace exposure to toxics. T Camacho Postgraduate education in environmental toxicology. MJ Gonzlez-Muoz Postgraduate training in food safety. A Camen Toxicology teaching in the criminological field. G Repetto Toxicology in the postgraduate studies for graduated veterinary. AJ Garca Fernndez Toxicology teaching in biomedical and health sciences in postgraduate studies. MJ Ruiz ORAL COMMUNICATIONS Food Security Forensic Toxicology and Analytical Technics in Toxicology Environmental Toxicology Alternative Methods and Experimental Toxicology Toxic action mechanisms, Genotoxicity and Carcinogenesis Pharmaceutical Toxicology and drugs abuse Clinical Toxicology Veterinary Toxicology POSTER COMMUNICATIONS Food Security Forensic Toxicology and Analytical Technics in Toxicology Environmental Toxicology Alternative Methods and Experimental Toxicology Clinical and PharmaceuticalToxicology and drug abuse Veterinary Toxicology Toxic action mechanisms, Genoyoxicity, Carcinogenity and Nanotoxicology Toxicology teaching International relations and scientific networks AUTHOR INDEX 1 4 12 12 13 13 13 14 14 15 16 17 18 19 20 21 21 21 22 22 23 24 24 25 25 26 26 26 27 27 28 29 32 34 36 37 39 41 44 51 56 62 69 76 80 89 92 93
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INDICE EDITORIAL A. Lafuente Gimnez PROGRAMA CIENTFICO CONFERENCIA INAUGURAL: Toxicologa de los perturbadores endocrinos: un enfoque metablico. JP Cravedi CONFERENCIA GENERAL: Regulacin epigentica de las funciones del receptor Ah. A Puga. CONFERENCIA DE CLAUSURA: Insecticidas piretroides, su toxicocintica y toxicodinamia en... A Anadn PONENCIAS El flur en las aguas y en los alimentos. La problemtica de las aguas de Tenerife. A Hardisson. Evaluacin del riesgo de la presencia de Bisfenol-A en los alimentos. MR Moyano Anlisis de resduos de medicamentos veterinarios en matrices de origen animal... J Blanca. Interpretacin de resultados de la muestra de sangre post-mortem. Estrategias alternativas. A Vingut. Criterios cualitativos y cuantitativos en toxicologa forense post-mortem. MA Martnez Gonzlez. Importancia de la toxicogenmica en la interpretacin de los resultados postmortem. AF Hernndez. Criterios de calidad en la interpretacin toxicolgica post-mortem. ML Soria Snchez. Problemtica de los metales pesados en el medio ambiente. P Bermejo Barrera. Toxicidad de compuestos orgnicos: altenativas sostenibles. JM Snchez Montero. Efectos de contaminantes acuticos en peces: alteraciones metablicas y neuroendocinas... JM Mguez Evaluacin de la seguridad de los productos cosmticos. C del Caizo. El REACH tambin afecta a los productos cosmticos. E Vilanova. Disponibilidad de alternativas en la evaluacin de cosmticos. G Repetto. Enfermedades emergentes relacionadas con la exposicin axenobiticos: sndrome de... C Valls Llobet Exposicin a disruptores endocrinos y obesidad. RV Garca-Mayor. Muerte celular programada: de la biologa molecular al proceso clnico. R Balaa Fouce. Riesgo de intoxicaciones accidentales y secundarias en la aplicacin de rodenticidas. R Mateo. Influencia del diclofenac en el descenso de la poblacin de buitres en India. MA Taggart. Desarrollo y aplicacin de biomarcadores en toxicologa ocupacional. F Gil Hernndez. Exposome: una poderosa herramienta para evaluar la exposicin laboral a txicos. T Camacho. Enseanza de postgrado en toxicologa ambiental. MJ Gonzlez-Muoz. Formacin de postgrado en seguridad alimentaria. AM Camen. La docencia de la Toxicologa en el mbito criminolgico. G Repetto. La toxicologa en los estudios de posgrado para egresados veterinarios. AJ Garca-Fernndez. La docencia de la toxicologa en ciencias biomdicas y de la salud en estudios de postgrado. MJ Ruiz. COMUNICACIONES ORALES Seguridad Alimentaria Toxicologa Forense y Tcnicas Analticas en Toxicologa Toxicologa Ambiental Mtodos alternativos y Toxicologa Experimental Mecanismos de accin Txica, Genotoxidad y Carcinognesis Toxicologa Farmacutica y drogas de abuso Toxicologa Clnica Toxicologa Veterinaria COMUNICACIONES POSTERS Seguridad Alimentaria Toxicologa Forense y Tcnicas Analticas en Toxicologa Toxicologa Ambiental Mtodos alternativos y Toxicologa Experimental Toxicologa Clnica, Farmacutica y drogas de abuso Toxicologa Veterinaria Mecanismos de Accin Txica, Genotxidad, Carcinognesis y Nanotoxicologa Docencia en Toxicologa Relaciones internacionales y redes cientficas NDICE DE AUTORES 1 4 12 12 13 13 13 14 14 15 16 17 18 19 20 21 21 21 22 22 23 24 24 25 25 26 26 26 27 27 28 29 32 34 36 37 39 41 44 51 56 62 69 76 80 89 92 93
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COMIT DE REDACCIN
Editora Dra. M DEL PRADO MGUEZ SANTIYN Universidad de Extremadura. CCERES E-mail: mpmiguez@unex.es Editora Adjunta Dra. ADELA LPEZ DE CERAIN SALSAMENDI Universidad de Navarra. PAMPLONA E-mail: acerain@unav.es Comit Editorial Dr. RAFAEL BALAA FOUCE Universidad de Len. LEN E-mail: rbalf@unileon.es Dr. CARLOS BARRIOS GUERRA Universidad de Concepcin. CONCEPCIN (CHILE) E-mail: cbarrios@udec.cl Dra. ANA BERMEJO BARRERA Universidad de Santiago de Compostela. LA CORUA E-mail: apimlana@usc.es Dr. DARO CRDOBA PALACIO MEDELLN (COLOMBIA) Dr. DIEGO GONZLEZ MACHN CEPIS/OPS. LIMA (PER) E-mail: dgonzale@cepis.ops-oms.org Dra. M JOS GONZLEZ MUOZ Universidad de Alcal. MADRID E-mail: mariajose.gonzalez@uah.es Dra. GUILLERMINA FONT PREZ Universidad de Valencia. VALENCIA E-mail: font@uv.es Dr. CARLOS GOTELLI Centro de Investigaciones Toxicolgicas BUENOS AIRES (ARGENTINA) E-mail: dgotelli@impsatl.com.ar Dr. ANTONIO HERNNDEZ JEREZ Universidad de Granada. GRANADA. E-mail: ajerez@ugr.es Dra. M ANUNCIACIN LAFUENTE GIMNEZ Universidad de Vigo. PONTEVEDRA E-mail: lafuente@uvigo.es Dra. M ARNZAZU MARTNEZ CABALLERO Universidad Complutense de Madrid. MADRID E-mail: arantxam@vet.ucm.es Dra. EMMA MARTNEZ LPEZ Universidad de Murcia. MURCIA E-mail: emmaml@um.es Dra. ISABEL MORENO NAVARRO Universidad de Sevilla. SEVILLA E-mail: imoreno@us.es Dra. ROSARIO MOYANO SALVAGO Universidad de Crdoba. CRDOBA E-mail: r.moyano@uco.es Dra. MARA LUISA SORIA SNCHEZ Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. SEVILLA E-mail: luisa.soria@mju.es Dr. JOS RUEFF Universidad Libre de Lisboa. LISBOA (PORTUGAL) E-mail: rueff.gene@fcm.unl.pt Dra. MARA JOS RUIZ LEAL Universidad de Valencia. VALENCIA E-mail: m.jose.ruiz@uv.es
XIX Congreso Espaol de Toxicologa
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Revista de
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Vigo, 26-28 de julio de 2011
EDITORIAL
Es para m un honor redactar este editorial del nmero de la Revista de Toxicologa que recoge los resmenes de conferencias, ponencias y comunicaciones que constituyen y conforman el XIX CONGRESO ESPAOL DE TOXICOLOGA, que se celebrar en Vigo, del 26 al 28 de julio de 2011, en el Centro Social Novacaixagalicia. El motor que nos movi a presentar la candidatura de este evento cientfico, en septiembre de 2009 en Palma de Mallorca, fue aportar el trabajo necesario para poder reunirnos unos das en Vigo, trabajando en el mbito de la Toxicologa y disfrutando de la compaa y trato de amigos, colegas y conocidos. En aquel momento comenz nuestra aventura, entendida tal y como dijo Chesterton: Una aventura es, por naturaleza, algo que nos sucede. Es algo que nos escoge a nosotros, no algo que nosotros escogemos. En nombre de la ASOCIACIN ESPAOLA DE TOXICOLOGA y en el mo propio, deseo manifestar mi ms sincero agradecimiento a todas y cada una de las personas e instituciones que han colaborado en la organizacin y el desarrollo de este Congreso, ya que sin sus valiosas y acertadas aportaciones y su buen hacer, hubiera sido imposible llevarlo a cabo. Nuestro agradecimiento tambin y sobre todo, a todos y cada uno de los congresistas, que han hecho posible la realidad de este congreso. Por otro lado, es importante mencionar el apoyo de patrocinadores diversos y la ayuda inestimable de la Secretara Tcnica, que con un alto nivel profesional nos ha ido asesorando con la finalidad de conseguir en cada punto la mayor perfeccin posible. El programa cientfico ha sido diseado y preparado por la distintas Secciones Cientficas que constituyen hoy la ASOCIACIN ESPAOLA DE TOXICOLOGA y por los Comits Cientfico y Organizador de este Congreso, as como por otras muchas personas, que a travs de sus sugerencias y aportaciones han hecho posible que llegue a buen trmino esta reunin cientfica. Este programa est constituido por tres conferencias generales, 6 mesas redondas, 25 ponencias, 193 comunicaciones libres de las cuales 48 son presentaciones orales y 145 se presentan en formato poster, un simposio sobre Toxicologa Laboral y un taller de Docencia de Postgrado en Toxicologa. Este congreso ha pretendido ser un foro de excelencia en investigacin y docencia para la interaccin entre los distintos mbitos de la Toxicologa, donde se debatan las ms recientes novedades cientficas abarcando aspectos bsicos, experimentales, analticos y reguladores, ya que como apunt Ortega y Gasset, Ciencia es aquello sobre lo cual cabe siempre discusin. Hace ya algunos aos, durante la inauguracin oficial de una reunin cientfica organizada en la ciudad romana de Lugo, alguien, desde la mesa presidencial, comentaba oportunamente que aquel que sabe compaginar lo til con lo agradable es quien se lleva todos los puntos. Con esta ilusin se fue elaborando el programa social del presente congreso y se han ido concretando todas esas pequeas cosas que hacen agradables unos das de trabajo. Finalmente y para ser breve, pues como escribi Cervantes en el captulo XXI del Quijote: S breve en tus razonamientos, que ninguno hay gustoso si es largo, quiero daros la bienvenida a este evento cientfico y desearos una grata estancia, en esta ciudad de Vigo, de las Ras Baixas.
Anunciacin Lafuente Gimnez Presidenta del XIX Congreso Espaol de Toxicologa
Rev. Toxicol. (2011) 28
XIX Congreso Espaol de Toxicologa Vigo, Julio 2011 Comit de Honor Conselleira de Sanidade, Xunta de Galicia, Excma. Sra. Da. Mara Pilar Farjas Abada (Presidenta de este Comit) Excmo. Sr. Rector Mgfo. de la Universidad de Vigo, D. Salustiano Mato de la Iglesia Presidentes de las anteriores de las Juntas Directivas de la AETOX D. Manuel Repetto D. Eugenio Vilanova D. Eduardo de la Pea
Comit Organizador
Anunciacin Lafuente (Presidenta) Arturo Anadn Jess Bandn Villamarn Carlos Bendicho Toms Camacho Emma Martnez M. Aranzazu Martnez Jess M. Mguez Natividad Pereiro M. Jos Ruiz M. Jess Tabernero
Comit Cientfico
Guillermina Font (Presidenta) Rafael Balaa Ana Bermejo Ana Gloria Gil M. Jos Gonzlez Antonio Hernndez M del Prado Mguez Isabel Moreno M. Rosario Moyano Mara Luisa Soria
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Declarado de Inters Sanitario por la Consellera de Sanidade de la Xunta de Galicia
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PROGRAMA XIX CONGRESO ESPAOL DE TOXICOLOGA 26-28 de julio, Vigo MARTES, 26 DE JULIO DE 2011 09:00 h: 09:30 h: 10:00 h: INSCRIPCIONES Y ENTREGA DE DOCUMENTACIN INAUGURACIN OFICIAL CONFERENCIA INAUGURAL Metabolic approaches related to endocrine disruptors: toxicological and methodological consequences. Dr. Jean-Pierre Cravedi, INRA, Toulouse (Francia).
11:00 a 11:30 h: Pausa - caf 11:30 a 13:00 h: Auditorio: MESA REDONDA DE SEGURIDAD ALIMENTARIA Moderadora: Ana M Camean, Universidad de Sevilla. 11:30 h. El fluor en las aguas y en los alimentos. La problemtica de las aguas de Tenerife. Arturo Hardisson, Universidad de La Laguna. 12:00 h.Evaluacin del riesgo de la presencia de Bisfenol-A en los alimentos. M. Rosario Moyano, Universidad de Crdoba. 12:30 h.Investigacin de residuos de medicamentos en alimentos de origen animal. Jos Blanca Barranco. Unidad de Zoosanitarios. CNA. AESAN. 11:30 a 13:10 h: Sala de conferencias: MESA REDONDA DE TOXICOLOGA FORENSE Interpretacin de resultados analticos post-mortem. Moderadora: M. Luisa Soria, Instituto Nacional de Toxicologa, Sevilla. 11:30 h.Interpretacin de resultados de la muestra de sangre post-mortem. Estrategias alternativas. Albert Vingut. Jefe del Servicio de Qumica del Departamento de Barcelona del INTCF. 11:55 h. Criterios cualitativos y cuantitativos en toxicologa post-mortem. M. Antonia Martnez. Facultativo del Servicio de Drogas del Departamento de Madrid del INTCF. 12:20 h.Importancia de la toxicogenmica en la interpretacin de los resultados post-mortem. Antonio Hernndez, Universidad de Granada. 12:45 h.Criterios de calidad en la interpretacin toxicolgica post-mortem. M. Luisa Soria. Directora del Departamento de Sevilla del INTCF. 13:30 h: ALMUERZO
15:30 a 16:30 h: REUNIONES DE LAS DISTINTAS SECCIONES DE LA AETOX 15:30 a 16:30 h: Saln de recepciones: POSTERS DE SEGURIDAD ALIMENTARIA, TOXICOLOGA FORENSE Y TCNICAS ANALTICAS EN TOXICOLOGA Y TOXICOLOGA AMBIENTAL.
16:30 a 18:00 h: Auditorio: COMUNICACIONES ORALES DE SEGURIDAD ALIMENTARIA. Moderador: ngeles Jos, Universidad de Sevilla. 16:30 h.Prez, B; Rubio, C; Luis, G; Gutirrez AJ; Caballero, JM; Hardisson, A. Plomo y cadmio en variedades de t consumidas en la isla de Tenerife 16:45 h. Ares, I; Martnez, MA; Castellano, V; Martnez, M; Ramos, E; Romero, A; MartnezLarraaga, MR; Anadn, A. Residuos de antimicrobianos en doradas y tiempos de retirada como medida de seguridad alimentaria. 17:00 h. Berrada, H; Blesa, J; Molt JC; Font, G. Comparacin de mtodos de preparacin de muestra para el anlisis de residuos de plaguicidas en polen. 17:15 h. Ferrer, E; Font, G; Maes, J; Serrano, AB. Determinacin de micotoxinas emergentes de Fusarium en cereales por cromatografa lquida-espectrometra de masas en tandem con triple cuadrupolo. 17:30 h. Garca, S; Pauca, A; Yanicelli, M; de Pietri, D; Martin, M; Antolini, L. Botulismo intestinal en lactantes de argentina 1992-2010. 17:45 h.Vigilancia, control y anlisis de biotoxinas marinas. ngeles Moroo. Instituto Tecnolgico para el Control del Medio Marino en Galicia (INTECMAR). 16:30 a 18:00 h:Sala de conferencias: COMUNICACIONES ORALES DE TOXICOLOGA FORENSE Y TCNICAS ANALTICAS EN TOXICOLOGA. Moderadora: M. Jess Tabernero, Universidad de Santiago de Compostela. 16:30 h. Contreras, MT; Izquierdo R. La garanta de calidad en los laboratorios forenses. 16:40 h. de Castro Ros, A; Concheiro Guisn, M; Quintela Jorge, O; Lendoiro Belo, E; Cruz Landeira, A; Lpez-Rivadulla, M. El papel actual de la cromatografa de lquidos acoplada a la espectrometra de masas en toxicologa forense. 16:50 h.Carratala, F; Burillo, L; Bueno, H; Garrido-Lestache E. Aspectos forenses de la investigacin de una intoxicacin accidental por bromuro de metilo. 17:00 h. Lendoiro Belo, E; de Castro Ros, A; Concheiro Guisn, M; Quintela Jorge, O; LpezRivadulla, M; Cruz Landeira, A. Sumisin qumica con escopolamina? Importancia del estudio del lavado externo en el anlisis de pelo. 17:10 h. Matey, JM. ; Snchez S. Determinacin de ketamina, norketamina y dehidronorketamina en muestras de pelo mediante cromatografa de gases espectrometra de masas. 17:20 h. Mora, A; Snchez, M; Bueno, C; Prez, MA; Gely, C; Barbal, M; Perales, E; Arroyo, A. Determinacin cualitativa y cuantitativa de cocana en pelo mediante GC-MSMS triple cuadrupolo BRUKER 300. 17:30 h.da Fonseca, BM; Moreno, IED; Magalhes, AR; Geraldes, V; Queiroz, JA; Calheiros, J; Barroso, M; Gallardo, E. Determinacin de nicotina, cotinina y trans-hidroxicotinina en saliva por cromatografa de gases/espectrometria de masas en tndem. 18:00 a 19:00 h:Auditorio: SIMPOSIO DE TOXICOLOGA LABORAL Biomonitorizacin en Toxicologa Laboral. Moderador: Fernando Gil, Universidad de Granada 18:00 h.Desarrollo y aplicacin de biomarcadores en Toxicologa Ocupacional. Fernando Gil, Universidad de Granada. 18:30 h.Exposome: una poderosa herramienta para evaluar la exposicin laboral a txicos. Toms Camacho, Laboratorios Lema-Bandn. 19:30 h: 20:00 h: Traslado al Pazo de Castrelos para el cctel de bienvenida. Cctel de bienvenida.
MIRCOLES, 27 DE JULIO DE 2011 09:00 a 10:30 h: Auditorio: MESA REDONDA DE TOXICOLOGA AMBIENTAL Moderadora: M. Jos Gonzlez, Universidad de Alcal. 09:00 h.Problemtica de los metales pesados en el medio ambiente. Pilar Bermejo Barrera Universidad de Santiago de Compostela. 09:30 h. Toxicidad de compuestos orgnicos: alternativas sostenibles. Jos M. Snchez Montero, Universidad Complutense de Madrid. 10:00 h.Efectos de contaminantes acuticos en peces: Alteraciones metablicas y neuroendocrinas derivadas de la exposicin a hidrocarburos aromticos policclicos en telesteos. Jess M. Mguez, Universidad de Vigo. 9:00 a 10:30 h: Sala de conferencias: MESA REDONDA DE MTODOS ALTERNATIVOS Y TOXICOLOGA EXPERIMENTAL La prohibicin del ensayo de ingredientes cosmticos en animales en 2013 Moderadores: Argelia Castao, IS Carlos III y Guillermo Repetto, Universidad Pablo de Olavide. 09:00 h.Legislacin Actual y previsible sobre productos cosmticos. Carmen Esteban, STANPA. 09:25 h.Evaluacin de la seguridad de productos cosmticos. Consuelo del Caizo, Experta en Ciencia Cosmtica 09:50 h.El REACH tambin afecta a los productos cosmticos. Eugenio Vilanova, Universidad Miguel Hernndez. 10:15 h.Disponibilidad de alternativas en la evaluacin de cosmticos. Guillermo Repetto, Universidad Pablo de Olavide. 10:30 a 11:00 h: Pausa-caf 11:00 a 12:30 h: Auditorio: COMUNICACIONES ORALES DE TOXICOLOGA AMBIENTAL Moderadora: Carmen Rubio, Universidad de La Laguna. 11:00 h Calaco, E; Ramos, A; Gil-Hernndez, M; Prez-Lpez, M; Mguez, MP. Parmetros de estrs oxidativo como biomarcadores de contaminacin por plomo en rin de conejo 11:10 h. Gil-Hernndez, M; Hernndez-Moreno, D; de la Casa Resino, I; Mguez, M.P; Soler, F; Prez-Lpez, M. Porfirinas como biomarcadores de contaminacin ambiental: niveles hepticos en conejo expuestos a diferentes dosis de plomo. 11:20 h. Ros, V; Prieto, AI; Moreno, I; Fras JE; Soria ME; Camen AM. Caracterizacin de la produccin de microcistinas por Microcystis aeruginosa PCC7806 vs Microcystis aeruginosa PCC7820 mediante CL-MS. 11:30 h.Rodrguez, P; Alonso, J; Garca, MA; Bravo, A; Cascallana, JL; Melgar, MJ. Arsnico en hgado y rin de arao y alca de la catstrofe del Prestige. 11:40 h. Domnguez-Boada, L; Luzardo, OP; Henrquez-Hernndez, LA; Valern, PF; Lara, PC; Almeida-Gonzlez, M; Losada, A; Zumbado, M; Serra-Majem, L; lvarez-Len, EE. La exposicin a bifenilos policlorados de tipo dioxin-like modula negativamente el sistema igf en sujetos adultos sanos. 11:50 h. Henrquez-Hernndez, LA; Luzardo, OP; Almeida-Gonzlez, M; lvarez-Len, EE; Serra-Majem, L; Zumbado, M; Domnguez-Boada, L. Niveles de bifenilos policlorados en la poblacin de las Islas Canarias. 12:00 h. Bar, R; Jerez, S; Conesa, J; Pereguez, JE; Gascn, JJ; Motas, M. Niveles de metales pesados en muestras de pelo de adolescentes de la regin de Murcia.
11:00 a 12:30 h:Sala de conferencias: COMUNICACIONES ORALES DE MTODOS ALTERNATIVOS Y TOXICOLOGA EXPERIMENTAL. Moderadora: Rosa Reguera, Universidad de Len. 11:00 h. Gutirrez-Praena, D; Pichardo, S; Jos, A; Camen, AM. Cilindrospermopsina pura como agente causante de efectos txicos en la lnea celular intestinal humana caco-2. 11:15 h. Juan-Garca, A; Davisson, VJ; Ruiz, MJ; Font, G; Robinson, JP. Anlisis de cambios en potencial de membrana mitocondrial en clulas HEPG2 por citometra de flujo HyperCyt. 11:30 h. Olasagasti, M; Pardo, MA; Escuredo, K; Rainieri, S. Evaluacin de los efectos txicos de nanopartculas de plata mediante anlisis transcriptmico en pez Cebra. 11:45 h. Romero, A; Ramos, E; Martnez, M.A; Castellano, V; Ares, I; Martnez, M.; MartnezLarraaga, M.R; Anadn, A. Acumulacin de deltametrin en SNC y efectos citotxicos en clulas de neuroblastoma humano SH-SY5Y. 12:00 h. Riva, MC; Rib, J; Mndez, A. Ensayos biolgicos para la evaluacin de la calidad del suelo. 12:30 a 13:30 h:Auditorio: TALLER DE DOCENCIA EN TOXICOLOGA Modereadora: M. Jos Ruiz, Universidad de Valencia. 12:30 h. Enseanza de postgrado en toxicologa ambiental. M. Jos Gonzlez, Universidad de Alcal. 12:40 h.Formacin de postgrado en seguridad alimentaria. Ana M. Camen, Universidad de Sevilla 12:50 h.La docencia de la toxicologa en el mbito criminolgico. Guillermo Repetto, Universidad Pablo de Olavide. 13:00 h.La toxicologa en los estudios de posgrado para egresados veterinarios. Antonio Juan Fernndez, Universidad de Murcia. 13:10 h.La docencia de la toxicologa en ciencias biomdicas y de la salud en estudios de postgrado. M. Jos Ruiz. Universidad de Valencia. 14:00 h: Almuerzo de trabajo
16:00 a 16:30 h: Saln de recepciones: POSTERS DE MTODOS ALTERNATIVOS Y TOXICOLOGA EXPERIMENTAL. TOXICOLOGA CLNICA, TOXICOLOGA FARMACUTICA, DROGAS DE ABUSO. 16:30 h: Auditorio: CONFERENCIA GENERAL Regulacin epigentica de las funciones del receptor Ah. Dr. lvaro Puga, Universidad de Cincinnati, EEUU.
17:15 a 18:30 h:Auditorio: COMUNICACIONES ORALES DE MECANISMOS DE ACCIN TXICA, GENOTOXICIDAD Y CARCINOGNESIS. Moderadora: Ana Gloria Gil, Universidad de Navarra. 17:15 h Hernndez, AF; Lacasaa, M; Lpez-Guarnido, O; Rodrguez, M; Gil, F; Parrn, T; Alarcn, R; Requena, M; Pla, A. Interaccin gen-ambiente: efectos del polimorfismo gentico de paraoxonasa-1 y la exposicin a plaguicidas sobre enzimas antioxidantes eritrocitarias. 17:30 h.Snchez-Gonzlez, PD; Lpez-Hernndez, FJ; Vicente-Vicente L; Lpez-Novoa, JM; Morales, AI. Efectos nefrotxicos del deferasirox, un quelante de hierro. 17:45 h.Gutirrez-Praena, D; Pichardo, S; Jord, M; Bermdez, JM, Aucejo, S; Jos, A. Citotoxicidad de la nanoarcilla cloisite 30b en la lnea celular intestinal humana CACO2.
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18:00 h. Vicente-Vicente, L; Lpez-Hernndez, FJ; Prieto, M; Lpez-Novoa, JM; Morales, AI. Utilidad de la albmina como marcador de predisposicin de nefrotoxicidad inducida por el tratamiento con cisplatino. 18:15 h. Puerto, M; Jos, A; Pichardo, S; Camen, AM. Las cianobacterias productoras y no productoras de microcistinas alteran la transcripcin gnica de enzimas antioxidantes en tilapia. 17:15 a 18:30 h: Sala de conferencias: COMUNICACIONES ORALES DE TOXICOLOGA FARMACUTICA Y DROGAS DE ABUSO. Moderador: Agustn Gonzlez Padrn. Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. 17:15 h. Mora, A; Snchez, M; Gely, C; Barbal, M; Perales, E; Arroyo, A. Patrn interno en la determinacin cuantitativa de etanol. Recomendacin, sugerencia instruccin o norma. 17:25 h. Almarza Lorente, E; Martnez Gonzlez, MA; Lora-Tamayo D'Ocon, C. Presencia de levamisol en muertes relacionadas con cocana. 17:35 h. Arroyo, A; Snchez, M; Barbal, M; Mora, A. Aplicabilidad de un inmunoensayo para deteccin de cocana y opiceos en sangre postmortem. 17:45 h.Prez-Fes, C; Barciela-Alonso, MC; Bermejo Barrera, P. Presencia de ftalatos en lentes de contacto y en soluciones de limpieza. 17:55 h. Bueno, J; Contreras, MT; Izquierdo, R. Validacin en anlisis toxicolgico forense. 18:05 h. Concheiro Guisn, M; Daz Doce, A; de Castro Ros, A; Lendoiro Belo, E; Cruz Landeira, A; Lpez-Rivadulla, M. Determinacin de opiceos, cocana, anfetaminas, metadona y metabolitos en placenta humana mediante cromatografa de lquidosespectrometra de masas. 18:30 a 20:30 h.Auditorio: ASAMBLEA GENERAL DE LA ASOCIACIN ESPAOLA DE TOXICOLOGA 22:00 h: CENA DE CLAUSURA JUEVES, 28 DE JULIO DE 2011 09:30 a 11:00 h: Auditorio: MESA REDONDA DE TOXICOLOGA CLNICA Cuestiones actuales de toxicologa clnica. Moderadora: Ana Bermejo, Universidad de Santiago de Compostela 09:30 h. Enfermedades emergentes relacionadas con la exposicin a xenobiticos: Sndrome de sensibilidad qumica mltiple. Carmen Valls Llobet, Centro de Anlisis y Programas Sanitarios de Catalua. 10:00 h.Exposicin a disruptores endocrinos y obesidad. Ricardo V. Garca-Mayor, Complejo Hospitalario Universitario de Vigo. 10:30 h. Muerte celular programada: de la Biologa Molecular al Proceso Clnico. Rafael Balaa, Universidad de Len. 09:30 a 11:00 h: Sala de conferencias: MESA REDONDA DE TOXICOLOGA VETERINARIA La Veterinaria y la Toxicologa: Los ltimos episodios de interaccin. Moderador: Antonio Juan Garca-Fernndez. 09:30 h.La implicacin de la profesin veterinaria en la problemtica de las dioxinas en los animales de granja. Juan Jos Badiola, Presidente del Consejo General de Colegios Veterinarios de Espaa. 10:00 h.Riesgo de intoxicaciones accidentales y secundarias en la aplicacin de rodenticidas. Rafael Mateo, Instituto de Recurso Cinegticos, CSIC. Ciudad Real.
10:30 h.Diclofenacs role in driving rapid vulture decline across the Indian sub-continent. Mark Taggart. University of the Highlands and Islands, Thurso, Scotland. 11:00 a 11:30 h: Pausa-caf 11:00 a 11:30 h:Saln de recepciones: POSTERS DE TOXICOLOGA VETERINARIA, MECANISMOS DE ACCIN TXICA, GENOTOXICIDAD Y CARCINOGNESIS, CRONOTOXICOLOGA Y NANOTOXICOLOGA. 11:30 a 13:00 h: Auditorio: COMUNICACIONES ORALES DE TOXICOLOGA CLNICA. Moderador: Toms Camacho, Laboratorio Lema & Bandn, Vigo. 11:30 h. Deschamps, F; Razafindranaly, J. Occupationnal thorium exposure. 11:45 h. Echarte Pazos, JL; Torres Del Pliego, E; Rey Prez, A; Aguirre Tejedo, A; Del Bao Lpez, F; Clemente Rodrguez, C; Palls Villaronga, O; Martnez Izquierdo, MT; Mnguez Mas, S; Lpez Casanova, MJ; Campodarve Botet, I; Marzo Roche, D; Blanco Lpez, L; Skaf Peters, E; Nolla Salas J; Pedragosa Vall, A; Puente Palacios, I; Len Bertrn, N; Labordeta De La Cal, V; Molas, E; Esteve Palau, E; Vilapalana Marz, L; Superva Caparrs, A. Factores asociados a la mortalidad en los pacientes ingresados en la unidad de cuidados intensivos por intoxicacin aguda grave desde un servicio de urgencias. 12:00 h.Moreno, IED; da Fonseca, BM; Magalhes, AR; Geraldes, V; Queiroz, JA; Costa, S; Barroso, M; Gallardo, E. Determinacin de piperacinas en muestras de orina por microextraccin en adsorbente empaquetado (MEPS). 12:15 h. Guisndez, N; Carballo, J; Uroz, V. Efectos del alcohol etlico en la funcin cognitiva y sistema visual bajo estmulos auditivos y visuales. 12:30 h.Mguez Framil, M; Moreda Pieiro, A; Bermejo Barrera, P; Cocho, JA; Bermejo, AM; Tabernero, MJ. Espectrometra de masas en tndem para la determinacin directa y simultnea de opiceos y cocana en cabello humano. 12:45 h. Quintela, O; Snchez de Len, MS; Uroz, V; Anadn, MJ; Andreu, M. A propsito de un caso: intoxicacin mortal por sobredosis de colchicina. 11:30 a 13:00 h: Sala de conferencias: COMUNICACIONES ORALES DE TOXICOLOGA VETERINARIA. Moderadora: M. Rosario Moyano, Universidad de Crdoba. 11:30 h. Gmez-Ramrez, P; Martnez-Lpez, E; Mara-Mojica, P; Garca-Fernndez, AJ. Evaluacin de la exposicin a rodenticidas anticoagulantes en bho real (Bubo bubo) del sureste espaol. 11:40 h.Villarroya A; Sastre-Baixauli L; Blanquer A; Rodilla V. Intoxicacin por Thapsia villosa L. en ovejas. 11:50 h. Ibez, Y; Hernndez, D; Prez-Lpez, M; Soler, F. Estudio retrospectivo de los casos de envenenamiento en fauna en extremadura en los ltimos seis aos. 12:00 h. Carballo, M; Espern, F; Gonzlez, M; Vzquez, B; De la Torre, A. Resduos de antibiticos y resistencias bacterianas en excretas de vacuno. 12:10 h.De la Casa-Resino, I; Hernndez-Moreno, D; Lpez-Beceiro, A; Fidalgo, LE; Mguez, MP; Prez-Lpez, M. Influencia del sexo en la expresin de distintos biomarcadores hepticos en corzo (Capreolus capreolus). 12:20 h.Soler, F; Rodrguez, P; Sierra, C; Flores, L; Gargallo, A; Farias, F; Prez-Lpez, M. Intoxicacin por taninos en rumiantes africanos localizados en un Safari Park. 12:30 h Gamboa-Rodrguez, T; Gamboa-Aldeco, R; Saldivar-Osorio, L; Gmez-Cruz, R; Luna, M; Padrn-Lpez, M; Aguirre, I. DNA damage on Crocodylus moreletti from an urban lake at southern Gulf of Mexico.
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13:00 h:
Auditorio: CONFERENCIA DE CLAUSURA Insecticidas piretroides, su toxicocintica y toxicodinamia en relacin al anlisis del riesgo. Dr. Arturo Anadn, Universidad Complutense, Madrid.
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Auditorio: CLAUSURA OFICIAL DEL CONGRESO
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa CONFERENCIA INAUGURAL. Metabolic approaches related to endocrine disruptors: toxicological and methodological consequences CRAVEDI, JP; Zalko, D UMR1331 TOXALIM (Research Centre in Food Toxicology), INRA Toulouse, FRANCE. Because the toxicological properties of chemicals may be modified when the parental compound is metabolized, understanding the metabolic routes followed by xenobiotics is a necessary step for scientists trying to assess the risk associated with their use by humans. Biotransformations generally result in the detoxification of chemicals through the formation of harmless metabolites and the facilitation of residue excretion. In some instances however, metabolism can result in the formation of molecules which are biologically more active than the parent compound towards cellular targets. For example, the bioactivation of xenobiotics through the action of cytochrome P450 enzymes, resulting in the production of reactive electrophilic intermediates that can form adducts with DNA and may lead to carcinogenic effects is well documented. Of the 57 human isoforms of cytochrome P450, 15 are predominantly involved in the biotransformation of xenobiotics, among which the isoform 3A4 is the major contributor. An important feature associated with cytochromes P450 is their induction potential. They are tightly regulated by many substrates, including xenobiotics. For most of them, the regulation is transcriptional; for example the 1A1, 1A2 and 1B1 isoforms are regulated via the aryl hydrocarbon receptor (AhR), while others are regulated by the pregnane X receptor (PXR) and/or the constitutively active receptor (CAR). The result is that enhanced expression of P450 activity can greatly augment the detoxication/bioactivation rates of potentially toxic compounds. The biotransformation of endocrine disruptors may also play a significant role in the biological activity of these compounds. In that case however, the bioactivation process does not necessarily include the production of a reactive intermediate. Several chemicals are known as proestrogens since they do not bind per se with estrogen nuclear receptors, whereas corresponding metabolites are active. Today it is well known that endocrine disruption is not limited to the interaction of chemicals with estrogen receptors. The mechanisms are much broader than originally recognized: endocrine disruptors can act via several hormone receptors and transporters, but also on enzymatic pathways involved in steroid biosynthesis and/or metabolism. This presentation mainly focus on food contaminants which are not directly endocrine disruptors (or weak endocrine disruptors), but which activate through biotransformation processes. Various categories of compounds have been selected, including persistent organic pollutants, pesticides, plasticizers, flame retardants, and natural plant products. It deals not only with the interactions of metabolites with various nuclear receptors, but also with the effects of biotransformation products on steroid genesis and hormone metabolism. With compounds such as PCBs, not only several hydroxylated metabolites have been shown to exhibit estrogenic/antiestrogenic activities, or to be potent inhibitors of sulfotransferases involved in the conjugation of estradiol, but they are also able to disrupt the thyroid function. These data mean that a single metabolic pathway may induce endocrine disruption at different levels and by a variety of mechanisms. The metabolism of PCBs and of methoxychlor also provides evidence that both the enantioselectivity of the reaction and the specific activation of ER by each enantiomer, are parameters that must be taken into account in the assessment of the endocrine disrupting effects of these compounds. In most cases, the bioactivation process involves cytochrome P450-dependent enzymes. However some exceptions exist, as for instance, the formation of equol from daidzein, which implies the participation of reductases expressed by the gut microflora. Another well known example is the formation of mono ethylhexyl phthalate (which is the active compound produced from diethylhexyl phthalate), and which is catalyzed by esterases. Phase II enzymes are generally regarded as detoxication reactions, although some metabolites originating from glutathione conjugation and subsequent mercapturic acid formation, such as methylsulfonyl derivatives of PCBs, are active on different hormonal targets. In recent studies we demonstrated that the sulfation pathway, usually considered as a detoxification process, leads for bisphenol A-related compounds, to the formation of sulfate conjugates which possess a PPAR binding activity. Because some endocrine disrupting compounds are active only after biotransformation, it is important to know the metabolic competence of the models used to test their activity. Many of the cell lines used for such purposes express only part, if any, of the metabolic activities expressed in the tissue they originate from. The limited capabilities of in vitro models to metabolically activate or inactivate xenobiotics may lead to a misinterpretation of in vitro results, if such information is not taken into account. Acknowledgments: part of the data presented in this conference has been obtained with the financial support of the French Agence Nationale de la Recherche ANR CES KISMET 2008-CESA-00801. Key words: Metabolism, Bioactivation, Endocrine disruptors, Contaminants. CONFERENCIA GENERAL Regulacin epigentica de las funciones del receptor Ah PUGA, A. Departamento de Salud Medioambiental, Facultad de Medicina, Universidad de Cincinnati, Ohio 45220, EE.UU. Telfono: 513.558.0916. FAX: 513.558.0916. El receptor Ah de hidrocarburos aromticos (AHR) fue identificado hace unos veinte aos como el mediador de la toxicidad de la dioxina, uno de los compuestos qumicos ms txicos que se conocen. Activacin por ligando transforma al receptor en un factor de transcripcin que induce la expresin de los genes de varios citocromos P450 y de fase II de destoxificacin. Induccin de estos genes, entre ellos el gen del P450 CYP1A1, requiere transactivacin mediada por un heterodmero de AHR (ligado a agonista) y ARNT, enlazados a una regin de control de transcripcin en el flanco 5' del promotor de este gen. Esta regin constituye un dominio potenciador (enhancer) donde se inicia un proceso de reestructuracin de cromatina crtico para la induccin gnica, por medio de la desestabilizacin de varios nucleosomas y el ensamblaje de la maquinaria de transcripcin. Por experimentos de inmunoprecipitacin de cromatina, hemos caracterizado la arquitectura de este promotor y las modificaciones epigenticas asociadas con la transicin del estado basal al inducido durante el proceso de transcripcin. Nuestros resultados indican que una bien concertada serie de pasos de reestructuracin de cromatina es crtica para completar la transactivacin de este gen por el receptor Ah. Anlisis de todas las sedes de enlace de este receptor al nivel de todo el genoma indica que en clulas no estimuladas el receptor regula la expresin de genes involucrados en el desarrollo celular, diferenciacin y especificacin de programas morfogenticos susceptibles de ser afectados por el medio ambiente durante la diferenciacin celular. Experimentos recientes en nuestro laboratorio demuestran que activacin del
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa AHR por dioxina descarrila la expresin de los genes que regulan la diferenciacin de clulas del miocardio. Estos efectos teratognicos de la dioxina caracterizan a una encrucijada de seales moleculares que son clave del papel que este receptor juega en el desarrollo embrionario. Agradecimientos: El trabajo en nuestro laboratorio est subvencionado por los Institutos Nacionales de la Salud de los EE.UU. ES06273, ES010807, ES06096. Palabras clave: Receptor Ah, Epigentica, Clulas madre, Cardiomiocitos. CONFERENCIA DE CLAUSURA Ensecticidas piretroides, su toxicocintica y toxicodinamia en relacin al anlisis del riesgo ANADN, A. Departamento de Toxicologa y Farmacologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, 28040 Madrid. Los insecticidas piretroides son compuestos sintticos derivados de las piretrinas, sustancias naturales obtenidas de extractos de las flores del Chrysanthemum cinerariaefolium. Aunque las piretrinas naturales tienen actividad insecticida, son inestables cuando se exponen a la luz, por ello la estructura fue modificada hasta conseguir compuestos sintticos, los piretroides, compuestos ms estables reteniendo la actividad insecticida. Todos los piretroides tienen en su estructura una mitad cida con dos carbonos asimtricos por lo que los piretroides coexisten como compuestos estereoisomeros. Adems algunos tambin poseen un carbono asimtrico sobre una mitad alcohol lo que permite un total de 8 esteroenantimeros diferentes. Los insecticidas piretroides han sido utilizados durante ms de 50 aos y se corresponden con un 35% de los insecticidas presentes en el mercado. La presente conferencia se enfoca en presentar el estado actual y los datos cientficos disponibles de los insecticidas piretroides que pudieran ser utilizados para decisiones ligadas a la evaluacin del riesgo. La evaluacin cuantitativa del riesgo es un proceso que evala la asociacin de la exposicin y los efectos adversos de los compuestos qumicos con el fin de que los riesgos y los niveles aceptables de exposicin puedan ser determinados y cuantificados. Especficamente, se aborda (a) una breve revisin de la toxicidad de esta clase de compuestos; (b) los efectos sobre los canales de sodio, como el modo primario de accin, mecanismo fisiopatolgico de diversas enfermedades neurolgicas; (c) datos de toxicocintica y metabolismo de esta clase de compuestos o de compuestos individuales, imprescindibles para proporcionar datos de su penetracin y distribucin tisular; (d) los principales datos de neurotoxicidad, incluyendo neurotoxicidad del desarrollo, y biomarcadores de exposicin; e) la integracin de datos toxicocinticos (TK) de absorcin, distribucin tisular, metabolismo y eliminacin corporal, con datos toxicodinmicos (TD) tales como alteraciones tisulares que conducen a respuestas biolgicas adversas, en animales experimentales, aspectos que hasta el momento han sido muy poco considerados pero cada vez ms ganan la atencin de que deberan ser usados para extrapolar concentraciones en tejidos-target con los estimados de exposicin (la integracin TK/TD optimiza el establecimiento de directrices de guas de exposicin en relacin con una toxicidad especfica) y (f) finalmente recomendaciones de futuras investigaciones que pudieran ser tiles en la evaluacin del riesgo de esta clase de compuestos. Palabras clave: Insecticidas piretroides, Modo de accin; Toxicidad, Integracin TK/TD, Anlisis del riesgo. MESAS REDONDAS DE LAS DISTINTAS SECCIONES DE LA AETOX Mesa redonda de Seguridad Alimentaria Modera: Ana M. Camen, Universidad de Sevilla. P.1.- EL FLOR EN LAS AGUAS Y EN LOS ALIMENTOS. LA PROBLEMTICA DE LAS AGUAS DE TENERIFE Hardisson, A. rea de Toxicologa. Universidad de La Laguna El flor es una sustancia hermtica que a concentraciones bajas constituye un oligoelemento esencial y a altas, puede ser una sustancia txica y producir fluorosis endmica. Por lo general, en los alimentos el flor presenta bajas concentraciones y baja biodisponibilidad (salvo en el t). En las aguas de consumo humano la concentracin ptima para prevenir la caries dental est en torno a 1 mg/L y la concentracin mxima permitida es de 1,5 mg/L. En esta ponencia, destacaremos el problema del flor en las aguas de abastecimiento pblico, sus efectos fisiolgicos y toxicolgicos, la legislacin en las aguas, as como las ingestas recomendadas. A continuacin, analizaremos el riesgo de la ingesta de flor presente en las aguas de Tenerife. En este anlisis ponemos de manifiesto que gran cantidad de aguas de la isla superan ampliamente (>5 mg/L) la concentracin mxima permisible de 1,5 mg/L (valor paramtrico), superndose tambin las Ingestas Diarias Recomendadas. Se propone asimismo, cmo gestionar el riesgo y cmo comunicarlo a la poblacin expuesta. P.2.- EVALUACIN DEL RIESGO DE LA PRESENCIA DE BISFENOL-A EN LOS ALIMENTOS Moyano, M. R. Dpto. Farmacologa, Toxicologa, y Medicina Legal y Forense. Universidad de Crdoba. El bisfenol-A (BPA) es un contaminante habitual de alimentos que se incorpora a partir de las resinas epoxi y los policarbonatos utilizados en la fabricacin de los envases y contenedores en los que esos productos se comercializan (envases de alimentos, botellas, biberones, etc.). Al igual que otras muchas sustancias, el BPA es considerado como Disruptor Endocrino (DE). Su mecanismo de accin se basa en la unin a los receptores estrognicos, presentando actividad estrognica, al mismo tiempo que induce disfunciones en la reproduccin y desarrollo, a nivel neurolgico, en el sistema inmunolgico, y presenta actividad mutagnica y carcinognica. Esta sustancia est incluida en la lista de monmeros y otras sustancias autorizadas que figuran en el anexo II de la Directiva 2002/72/CE para la fabricacin de materiales y objetos plsticos destinados a entrar en contacto con los alimentos. Esta Directiva establece un lmite de migracin especfico para el BPA de 0,6 mg/Kg. La Unin Europea ha acordado prohibir los biberones de plstico que lleven el compuesto BPA por sus posibles efectos perjudiciales para la salud de los nios (Directiva 2011/8/UE). Esta prohibicin entra en vigor el 1 de junio de 2011, y lo hace en base a la evaluacin cientfica del riesgo que recibe la Comisin Europea de la Autoridad Europea de la Seguridad Alimentaria (EFSA). Algunos pases, como Francia y Dinamarca, ya prohibieron de forma unilateral la fabricacin y comercializacin de biberones que contengan BPA. Sin embargo, la Comisin Europea por el momento no tiene planes de restringir an ms o de prohibir la inclusin del BPA en otros materiales en contacto con los alimentos, slo afecta a los biberones fabricados con policarbonatos. Los efectos del BPA sobre la fertilidad y la reproduccin y el
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa sistema endocrino han sido objeto de un intenso debate cientfico. La EFSA reevalu en 2006 esta sustancia con objeto de considerar la nueva y extensa informacin cientfica generada desde el ao 2002. Una vez revisada toda la literatura cientfica acerca de la toxicidad del BPA por parte del Panel Cientfico, se consider que los efectos a bajas dosis en roedores no demostraron riesgo para los humanos. Incluso se plantearon serias dudas sobre el valor de estas especies como modelo de evaluacin del riesgo para el hombre. Con estos datos, se acord mantener la Ingesta Diaria Tolerable (IDT) de BPA para el hombre en 0,05 mg/Kg/da. Sin embargo, en 2008 como consecuencia de publicaciones cientficas en las que se relacionaba niveles de BPA en orina de adultos con trastornos cardiovasculares, diabetes y alteraciones de las enzimas hepticas, la Comisin Europea solicit a EFSA una nueva evaluacin. Se concluy que estas investigaciones no aportaban suficientes pruebas para modificar la actual IDT, pero se reconoca que los estudios reflejaban ciertas incertidumbres. Actualmente se plantea de nuevo una exhaustiva revisin de la literatura cientfica relativa a la toxicidad del BPA, y aunque existen abundantes estudios sobre la toxicidad y la actividad endocrina del BPA en animales, utilizando en muchos casos las Directrices de la OCDE, empleando distintas vas de administracin, diferentes dosis, y diferentes nmeros de animales utilizados, se plantea si la especie empleada y la metodologa han sido adecuadas. Esto nos hace pensar que es necesario el desarrollo de nuevas herramientas, nuevos biomarcadores y nuevos modelos que nos permitan estudiar de forma rpida y fiable la toxicidad neuroendocrina del BPA y evaluar el riesgo de su presencia en los alimentos. Uno de los modelos propuesto es el uso del zebrafish, que se ha revelado en los ltimos aos como muy adecuado para los estudios de desarrollo por poseer un embrin transparente que, en pocos das completa el plan bsico de desarrollo de los principales sistemas corporales; con homologa gentica con el hombre, (compartimos con estos peces ms del 80% del genoma), lo que permite que los resultados obtenidos de los frmacos y txicos probados en estos animales sean potencialmente extrapolables al ser humano. Para el estudio del BPA como disruptor endocrino en zebrafish se emplea: el efecto sobre la vitelogenina (Vtg), biomarcadores moleculares (ARNm de Vtg, dao a ADN cromosomal y protenas), y el estudio histopatolgico y morfomtrico. La Vtg es una protena constituyente importante del oocito maduro, se sintetiza en el hgado del pez bajo el control de regulacin endocrina a travs del eje hipotlamo-pituitariagnada-hgado y ha sido utilizada para responder preguntas de disrupcin endocrina. Su sntesis se produce por la estimulacin de los receptores estrognicos hepticos, por accin de la hormona 17-a-estradiol (E2) o bien por compuestos xenoestrgenos. En hembras maduras la Vtg es un constituyente principal de las protenas sanguneas, sin embargo en machos normalmente no est presente en cantidades apreciables, salvo que stos hayan estado expuestos a compuestos DE. Por ello, la induccin de la sntesis de Vtg en machos es considerada un biomarcador de exposicin a compuestos estrognicos. En cuanto a los marcadores moleculares se ha demostrado que el ARNm de Vtg es un buen biomarcador para medir el efecto de xenoestrgenos como el bisfenol en adultos de zebrafish. En los peces el sexo fenotpico es muy lbil, particularmente durante ciertos estadios tempranos de la ontognesis gonadal. Los efectos en peces expuestos al Bisfenol como disruptor endocrino, junto con el aumento de la Vtg, la disminucin de esteroides sexuales en plasma, el retraso de la madurez sexual y la modificacin de los ciclos ovricos, produce alteraciones y reduccin del tamao de las gnadas, aparicin de intersexos, induccin de cambios de sexo, todo ello evaluable mediante estudios histopatolgicos y morfomtricos. Los principales cambios histopatlgicos y morfomtricos observados en las gnadas de zebrafish, provocados por BPA, consisten en una degeneracin de todos los componentes celulares y aumento del porcentaje de folculos atrsicos en las hembras y; una degeneracin testicular, hipertrofia y tumefaccin de las clulas de Sertoli en los machos. El estudio de estos biomarcadores nos aporta datos de gran valor que nos permiten evaluar la posibilidad de los efectos negativos como DE del BPA como contaminante alimentario. P.3.- ANLISIS DE RESDUOS DE MEDICAMENTOS VETERINARIOS EN MATRICES DE ORIGEN ANIMAL: SITUACIN ACTUAL Blanca, J Unidad de Residuos Zoosanitarios. Centro Nacional de Alimentacin. Agencia Espaola de Seguridad Alimentaria y Nutricin. Desde que hace aproximadamente 30 aos se comenzaran a usar algunos medicamentos veterinarios como promotores de crecimiento en los animales destinados al consumo humano, tanto los controles como los mtodos analticos empleados han evolucionado para aumentar su eficacia y proporcionar una respuesta adecuada dentro del marco actual de seguridad alimentaria en la UE. En la presente ponencia, se presentar la evolucin de los mtodos analticos en lo referente a analitos, matrices diana, estrategias analticas y nuevas tcnicas de deteccin aplicadas. Asimismo, se expondr la problemtica asociada al anlisis de residuos de medicamentos veterinarios, mencionando los principales factores que condicionan los anlisis como son la contaminacin cruzada o la presencia de compuestos de origen natural. Mesa Redonda de Toxicologa Forense Interpretacin de resultados analticos post-mortem. Modera: M. Luisa Soria, Instituto Nacional de Toxicologa, Sevilla. P.4.- INTERPRETACIN DE RESULTADOS DE LA MUESTRA DE SANGRE POST-MORTEM. ESTRATEGIAS ALTERNATIVAS. Vingut, A Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses (Dpto. Barcelona). La investigacin qumico-forense en muestras biolgicas postmortem requiere de una serie de factores que deben confluir para llegar finalmente a unos resultados satisfactorios: La correcta eleccin de las muestras a analizar, en funcin de los antecedentes de cada caso concreto y de cuales de ellas estn disponibles. Disponer de instrumentacin analtica adecuada y de metodologas desarrolladas y contrastadas. Requiere tambin de profesionales cualificados y con experiencia. A partir de los anlisis realizados se obtendrn unos resultados, cualitativos y/o cuantitativos. Dichos resultados sern datos objetivos, que nicamente pueden ser cuestionados desde el punto de vista de la metodologa analtica empleada para obtenerlos. Sin embargo, en toxicologa forense, la labor no termina con la presentacin de los resultados. Los tribunales de Justicia requieren de una interpretacin de los mismos con el fin de que
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa los ilustren sobre todas aquellas cuestiones importantes para el correcto esclarecimiento de las circunstancias y causa de la muerte y, en su caso, la correcta administracin de la Justicia. Si bien los resultados obtenidos son datos objetivos, la interpretacin de los mismos suele ser ms subjetiva, y depende en gran medida de la experiencia previa y de los conocimientos de los peritos cuando estos son interpelados en los tribunales. Actualmente, en investigaciones forenses post-mortem, la muestra ms importante es la sangre. sta nos aportar informacin sobre el consumo ms reciente previo al fallecimiento y, la presencia y concentracin de las sustancias detectadas, indicar su posible afectacin y el grado de la misma momentos antes de la muerte. Para ello, en la mayora de los casos, es fundamental la eleccin de la zona de recogida de la muestra sangunea, para evitar problemas de posible contaminacin con otros compartimentos cercanos. Y en el caso de que no haya opcin, el toxiclogo forense debe conocer la procedencia anatmica de dicha muestra. Las concentraciones presentes en sangre son muy inferiores a las que pueden llegar a detectarse en orina o bilis, por esta razn es imprescindible disponer de equipos instrumentales analticos adecuados para detectar dichas sustancias a muy bajos niveles. Tambin es importante conocer que el metabolismo de muchas sustancias conlleva su conjugacin con cido glucurnico para disminuir su liposolubilidad y facilitar su eliminacin por va renal. En la muestra de sangre, si lo que nos interesa conocer es nicamente si se ha producido un consumo previo, podra ser conveniente realizar una hidrlisis previa a la extraccin de la sangre, a fin de detectar todas las formas posibles de la sustancia investigada y ver aumentada as su posibilidad de deteccin. En caso de que lo que nos interese sea el grado de afectacin de dicha sustancia en el momento de la muerte, la hidrlisis previa sera un error y no debe ser realizada ya que es nicamente la forma libre, aquella que finalmente ser detectada y/o cuantificada, la que por su mayor liposolubilidad podr atravesar la barrera hematoenceflica y actuar. Los resultados analticos obtenidos en la investigacin de una muestra de sangre, en la mayora de las ocasiones, suelen ser interpretados sin muchas dificultades. Sin embargo, todos aquellos que nos dedicamos a la toxicologa forense hemos sufrido situaciones en las que se nos han presentado grandes dificultades para contestar a las preguntas del tribunal a partir de los resultados toxicolgicos. En algunos casos, debido a que no era posible responder, con fundamentos cientficos, de manera rotunda y sin margen de error a algunas de las cuestiones formuladas, en otros casos por carecer de muestras complementarias que permitieran ampliar la informacin aportada por el anlisis de la muestra de sangre. Son muchas las preguntas que surgen en las vistas orales que pueden ser contestadas mediante la interpretacin de los resultados de los anlisis de la muestra de sangre, sin embargo, son an ms numerosas aquellas que no lo pueden ser exclusivamente con este nico resultado. Muestras post-mortem como la orina, bilis, humor vtreo, contenido gstrico, cabellos, etc... permiten, en mayor o menor medida, dependiendo de cada caso concreto y juntamente con la informacin aportada por la sangre, un mayor conocimiento de todas y cada una de las circunstancias de la muerte. Ejemplos: En la actualidad nadie discute la importancia de analizar la muestra de humor vtreo junto con la sangre en las determinaciones de alcoholemia, ni la desproteccin en la que se encuentra el perito presentando valores de alcoholemia en sangre, sin acompaar estos con los de humor vtreo, en aquellos casos en los que se cuestiona si stos pudieran haber sido producidos por una fermentacin post-mortem en lugar de ser debidos a un consumo anterior a la muerte. La deteccin de una determinada droga de abuso en sangre y su ausencia en orina y bilis puede indicar que la muerte ocurri momentos despus de su consumo, y que probablemente se trataba de una recada despus de un periodo de abstinencia. Concentraciones de alcohol etlico en sangre mayores que en humor vtreo son compatibles con un consumo reciente de dicho alcohol y que an no se haba establecido un equilibrio en la cintica de absorcin del mismo. Toda esta informacin se perdera si nicamente se dispusiera de la muestra de sangre. Adems, frente a un resultado determinado, hechos como la posible tolerancia adquirida, la deteccin de mltiples sustancias, algunas de ellas con actividades contrapuestas (etanol, cocana, benzodiazepinas, morfina...), incluso la edad o alteraciones importantes en el estado de salud, hacen mucho ms dificultosa la interpretacin del mismo. En toxicologa forense post-mortem, a pesar de que la muestra que aporta ms informacin es la sangre, desgraciadamente no siempre sta puede ser recogida. En estos casos, existen estrategias alternativas que nos permiten aportar la mayor informacin posible sobre las circunstancias de la muerte, teniendo siempre en consideracin que, los datos obtenidos a partir de stas, difcilmente podrn subsanar el hecho de la ausencia de la informacin aportada por la muestra de sangre. Los anlisis de muestras procedentes de exhumaciones judiciales son un claro ejemplo. A modo de conclusin, en investigaciones qumico-forenses post-mortem, hemos de considerar la muestra de sangre como imprescindible y la informacin que proporciona no puede ser sustituida, en la actualidad, por la aportada por otros tipos de muestra, si bien, por si sola, tampoco es suficiente para el total esclarecimiento de la muerte. P.5.- CRITERIOS CUALITATIVOS Y CUANTITATIVOS EN TOXICOLOGA FORENSE POST-MORTEM Martnez Gonzlez, MA Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Departamento de Madrid. C/ Jos Echegaray, 4; 28232-Las Rozas de Madrid, Madrid. En el anlisis cualitativo, la primera etapa consiste en la deteccin de todas las sustancias que tengan inters toxicolgico. La segunda etapa consiste en la identificacin inequvoca de las sustancias detectadas. El anlisis cuantitativo solamente se realizar cuando sea significativo para la interpretacin del caso. Dadas las connotaciones legales y sociales derivadas de los resultados analticos, cualquier aspecto o procedimiento relacionado debe ser cientficamente indiscutible y legalmente defendible. Los criterios cualitativos y cuantitativos en Toxicologa Forense Postmortem son proporcionados por prestigiosos organismos internacionales o nacionales: la Asociacin Internacional de Toxiclogos Forenses (TIAFT) con su documento Laboratory Guidelines, la Sociedad de Toxiclogos Forenses y la Academia Americana de Ciencias Forenses (SOFT/AAFS) con su documento Forensic Toxicology Laboratory Guidelines, 2006 Version y la Sociedad Alemana de Qumica y Toxicologa Forense (GTFCh) con su documento Guidelines and Recommendations of the GTFCh. Para la identificacin de compuestos mediante espectrometra de masas (MS), existe tambin normativa, aunque, en principio, hace mencin a dos campos analticos diferentes al que nos
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa ocupa. Por un lado, estara la normativa referente al anlisis de residuos en productos de origen animal recogida en el Diario Oficial de las Comunidades Europeas European Union Decision 2002/657/EC y la Guidance for Industry, Mass Spectrometry for Confirmation of the Identity of Animal Drug Residues de la Administracin Americana de Alimentos y Medicamentos (FDA). Por otro lado, estara la normativa para el control del dopaje en las prcticas deportivas elaborado por la Agencia Antidoping Mundial (WADA) recogida en el WADA Technical Document TD2003IDCR, Identification Criteria for Qualitative Assays, Incorporating Chromatography and Mass Spectrometry. Adems los requisitos generales para la Competencia de los Laboratorios de Ensayo y Calibracin que constituyen la base de la Acreditacin, recogidos en la norma UNE-EN ISO/EC 17025:2005, estn tambin presentes en la filosofa de las recomendaciones y normativas citadas. Si el objeto del anlisis cualitativo es la deteccin de uno o varios txicos en concreto, se practicar un anlisis directo. Si el objeto es la deteccin o exclusin de una amplia gama de sustancias potencialmente txicas, pero de ninguna en concreto, entonces se realizar un anlisis indirecto (general unknown) que requiere una estrategia analtica mas completa y que se conoce como Sistemtica Analtica Toxicolgica (SAT). Su objetivo es la deteccin e identificacin inequvoca de todas las sustancias que tengan inters toxicolgico. Consiste en aplicar uno o ms procedimientos analticos, de modo simultneo o secuencial, basados en principios analticos diferentes. Se determinar el alcance de deteccin del mtodo y la reproducibilidad en torno a l. Una vez detectada la presencia de uno o ms compuestos con relevancia toxicolgica, se proceder a su identificacin inequvoca (confirmacin). Bajo el mismo mtodo analtico se comparan las seales de la muestra problema con las seales de patrones autnticos de referencia y/o con las de compuestos de referencia almacenados en bases de datos. Para una seal analtica detectada, solo debe existir una nica posibilidad de concordancia con una nica sustancia candidata de referencia y las restantes sustancias candidatas de referencia deben quedar excluidas (criterio de exclusin). La SOFT /AAFS hace adems especial mencin a lo siguiente: - El anlisis de confirmacin del analito debe basarse en una tcnica analtica ms especfica que la empleada en su deteccin inicial, normalmente MS. - Un segundo inmunoensayo no es vlido para confirmar los resultados obtenidos mediante otro inmunoensayo. - Se debe confirmar la identidad de un analito sobre un extracto diferente tomado de la misma muestra, o bien en otra muestra distinta. - La cuantificacin de un analito puede aceptarse tambin como confirmacin de su identidad siempre que este se haya detectado inicialmente por un mtodo diferente. - Cuando la MS en el modo de monitoreo selectivo de iones (SIM) se utilice para la identificacin de un analito, bien sea como parte de un procedimiento cuantitativo o no, se recomienda el uso de al menos un in cualificador para el analito y otro para el patrn interno (IS) adems de otro principal para cada uno de ellos. Como criterio de aceptacin las ratio de iones deben estar comprendidas en un 20% de la ratio correspondiente del control o calibrador. Algunas ratios de iones son dependientes de la concentracin, en tales casos para establecer esta comparacin se utilizar un control o calibrador de concentracin similar. Las ratios de iones en los anlisis mediante LC/MS son ms dependientes de la concentracin y del tiempo que en GC-MS, por ello los ratio de aceptacin varan hasta 25% 30%. - La interpretacin de un anlisis en el modo de full scan se realiza en la rutina de manera semi-automtica por el software del instrumento mediante libreras, no obstante, la revisin final de la bsqueda solo debe realizarla un toxiclogo experto con juicio crtico en la interpretacin de MS. Con relacin al anlisis cuantitativo, lo ideal es realizarlo en una alcuota de la muestra diferente de la que se utiliz para la realizacin del anlisis cualitativo/screening. Los tipos de calibracin que deben emplearse en los Laboratorios Forenses son: a) Curva de calibrado multinivel: Requiere un mnimo de tres calibradores, siendo deseables al menos cinco, dos de ellos prximos al lmite de deteccin. Es necesario determinar si la calibracin se ajusta a un modelo lineal o cuadrtico. La concentracin de un calibrador calculada frente a la curva de calibrado con l generada debe estar comprendida en 20% de su valor. La curva de calibrado se verificar en cada tanda de anlisis mediante controles obtenidos de fuentes diferentes de las que se han generado los calibradores y los resultados tambin deben estar comprendidos en 20% de su valor. b) Mtodo de las adiciones estndar: Se utiliza cuando existe un efecto matriz que no es posible corregir. Se miden las respuestas de n alcuotas iguales de la muestra a las que se adicionan cantidades crecientes del analito. La propia muestra problema actuar como blanco. Se suele utilizar en mtodos espectrofotomtricos y potenciomtricos, y tambin cuando el blanco de matriz sea difcil de obtener (embalsamamientos). Se recomienda el uso del patrn interno (IS), para corregir la cuantificacin del analito, por minimizarse errores aleatorios y sistemticos, por prdida del analito o por irreproducibilidad del mtodo. Debe ser un homlogo del analito, y si no un compuesto con propiedades fsico-qumicas similares, debe eluir cerca del analito, y estar resuelto de cualquier otra sustancia que pueda estar presente. Se preparar preferentemente en disolucin acuosa y se aadir antes del anlisis. Los grficos de calibracin se construirn a partir de patrones de drogas/txicos aadidos al mismo tipo de matriz que la muestra objeto del anlisis sometidos a los mismos procedimientos de extraccin que las muestras. Los mtodos analticos deben validarse estudiando la exactitud, la precisin, el rendimiento absoluto, el rango de calibracin, la selectividad, los lmites de deteccin y cuantificacin y si es posible la robustez y la incertidumbre. Palabras clave: Cualitativo, Cuantitativo, Toxicologa forense, Postmortem. P.6.- IMPORTANCIA DE LA TOXICOGENMICA EN LA I N T E R P R E TA C I N D E L O S R E S U L TA D O S POSTMORTEM Hernndez, AF1; Pla, A1; Gil, F1; Gmez, A1; Lozano, D1; Alarcn, R2; Requena, M3; Parrn, T2 1 Departamento de Medicina Legal y Toxicologa, Universidad de Granada. 2Departamento de Neurociencias y Ciencias de la Salud, Universidad de Almera. 3Registro Provincial del Cncer, Delegacin Provincial de Salud, Almera. Introduccin. Los avances cientficos y tecnolgicos registrados en la ltima dcada han propiciado un conocimiento cada vez ms profundo de las bases genticas y moleculares de las enfermedades y de la variabilidad en la respuesta (teraputica o txica) a frmacos de unas personas a otras. As, tras la administracin de una misma dosis de frmaco o droga, la respuesta frmaco-toxicolgica y la concentracin plasmtica vara de unos individuos a otros. Este fenmeno explica por qu una importante proporcin de personas o no responden, o lo hacen de forma insuficiente o experimentan reacciones adversas. Estas diferencias pueden ser de base gentica, ambiental o
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa fisiopatolgica. Aunque solo las primeras son el objeto de esta presentacin, hay que tener en cuenta tambin la contribucin de los fenmenos de induccin e inhibicin enzimticas (especialmente de citocromos P450, CYP450) derivados de la exposicin ambiental o nutricional a sustancias qumicas (p.ej., humo de tabaco, consumo de alcohol, zumo de pomelo) o la administracin simultnea de varios medicamentos (antibiticos, antifngicos, anticonvulsivantes, etc.). Asimismo, diferencias fisiolgicas (edad, sexo, embarazo) y fisiopatolgicas (disfuncin heptica, renal o de otros rganos diana) contribuyen tambin a la variabilidad de la respuesta teraputica o txica entre individuos con similar exposicin. En general, los factores genticos suponen entre el 15 y el 30% de las diferencias interindividuales en el metabolismo y respuesta a frmacos y drogas, aunque en algunos casos pueden llegar hasta el 95%. Frmaco-toxicocintica. Los polimorfismos farmacocinticos pueden modificar la absorcin, distribucin, metabolismo y excrecin de los frmacos, pudiendo dar lugar a reacciones adversas como consecuencia del aumento de sus niveles plasmticos y, por extensin, de sus niveles tisulares. Los ms relevantes son los que afectan al metabolismo, pues cerca del 40% de reacciones metablicas de fase I se lleva a cabo por enzimas polimrficos. De los ms de 60 genes que codifican CYP450, los ms implicados en el metabolismo de frmacos y drogas de abuso pertenecen a tres familias gnicas: CYP1, CYP2 y CYP3. La principal isoforma heptica implicada en el metabolismo es el CYP3A4, seguida por CYP1A2, CYP2C9, CYP2D6, CYP2E1 y CYPC19. Las variantes allicas de estos CYP450 originan diversos fenotipos en la poblacin general: metabolizadores lentos (PM, 'poor metabolizers'), que muestran poca o nula capacidad para metabolizar un frmaco como consecuencia de deleciones gnicas o de genes defectuosos. metabolizadores rpidos (EM, 'extensive metabolizers'), que son portadores de dos genes funcionales y representan a la poblacin 'normal'. metabolizadores ultrarrpidos (UM, 'ultrarapid metabolizers'), que metabolizan un frmaco mucho ms rpidamente que la poblacin 'normal' como consecuencia de presentar ms de dos copias de genes que codifican un determinado CYP450. Por su parte, los transportadores, molculas proteicas encargadas de reconocer y transportar frmacos o drogas, tambin contribuyen a la variabilidad de sus efectos biolgicos, pues su diversidad gentica puede alterar la absorcin intestinal y la eliminacin renal y/o heptica de frmacos. Adems, al estar integrados en barreras especiales, sus polimorfismos pueden limitar el paso de los frmacos a diversos rganos crticos (cerebro, testculos, ovarios e incluso al feto). Uno de los ms conocidos es la glicoprotena P que, a su vez, puede ser objeto de induccin e inhibicin por otras sustancias qumicas, dando lugar a importantes interacciones farmacolgicas. Frmaco-toxidinmica. La mayora de los frmacos interaccionan con determinadas dianas teraputicas en el organismo, entre las que se incluyen los receptores, y de esta interaccin se espera la respuesta farmacolgica deseada. Numerosos estudios han identificado polimorfismos genticos en dichos receptores (p.ej., opioides, serotonina, dopamina) que condicionan las diferencias interindividuales en la respuesta a un determinado frmaco. En este caso, sin embargo, tales diferencias no son tan manifiestas como las observadas con las enzimas metabolizadoras. Los polimorfismos farmacodinmicos no solo afectan a receptores, sino tambin a otras dianas farmacolgicas, como enzimas o protenas de la cascada de transduccin de seales (sealizacin intracelular) y transportadores de neurotransmisores en terminales presinpticas. Las reacciones adversas a frmacos tambin pueden ser consecuencia de variabilidad gentica de los antgenos HLA y que, en casos excepcionales, pueden desencadenar respuestas de base inmunolgica, habitualmente denominadas reacciones idiosincrsicas. Todo ello puede condicionar y explicar las diferencias interindividuales en la respuesta esperada de un frmaco o droga a pesar de presentar similares concentraciones en su lugar de accin. Aplicaciones en el mbito forense. Los polimorfismos genticos de carcter toxicocintico y toxicodinmico modulan, en parte, las acciones frmaco-toxicolgicas en los pacientes tratados y, en el caso de la toxicologa forense, dificultan la interpretacin de resultados analticos. Esto reviste una especial importancia y requiere conocer aspectos analticos, farmacocinticos y farmacodinmicos, adems de las clsicas interferencias como la redistribucin postmortem de frmacos y drogas. Esta ltima es responsable, a su vez, de diferencias en la concentracin sangunea en funcin del lugar anatmico y del momento en que se realiza la toma de muestras y que complica la extrapolacin de niveles postmortem a los existentes antemortem. En el entorno forense, los estudios toxicogenmicos constituyen un progreso cientfico de gran importancia en la investigacin medicolegal moderna que, junto al anlisis qumicotoxicolgico, histopatolgico y examen macroscpico, contribuyen a mejorar la interpretacin de resultados y el esclarecimiento de la causa y mecanismo de muerte. Aunque todava no forma parte de la prctica forense rutinaria, la caracterizacin molecular de genotipos de enzimas metabolizadoras de frmacos y drogas, junto a las pruebas genticas para detectar anomalas moleculares cardiacas y hepticas, terminarn en un futuro no muy lejano hacindose rutinarias en la prctica forense dentro de la denominada autopsia molecular. El desarrollo de una base de datos que incorpore este tipo de informacin puede contribuir a reducir el riesgo de efectos adversos graves y los Institutos Nacionales de Toxicologa y Ciencias Forenses se encuentran en una posicin privilegiada en todo este proceso. P.7.- CRITERIOS DE CALIDAD EN LA INTERPRETACIN TOXICOLGICA POST-MORTEM Soria Snchez, ML Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Departamento de Sevilla. C/ Avda. Dr. Fedriani s/n. 41015 Sevilla. Disponer de datos analticos de calidad es un requisito imprescindible para la correcta interpretacin de los resultados toxicolgicos postmortem. De otro modo, el informe pericial podr ser impugnado en los Tribunales o dar lugar a consecuencias legales injustificadas. Un sistema de calidad se establece para garantizar que los resultados generados por el laboratorio son fiables. En l se describen el rgimen establecido de control de calidad y los criterios adoptados para documentar la ejecucin de los procedimientos de control, instrucciones para la preparacin de reactivos, la descripcin del mtodo de anlisis, materiales de referencia o estndares utilizados, la trazabilidad de los resultados, el estado de los equipos de medida, cualificaciones de los analistas, la integridad de las muestras y cadena de custodia, y las acciones preventivas y correctivas emprendidas en las situaciones necesarias. Los objetivos del control de calidad son garantizar que los resultados analticos tienen una adecuada exactitud y precisin, proporcionar al perito detalles sobre los factores medibles, y establecer los procedimientos que deben adoptarse para medir y controlar todas las fuentes de errores aleatorios y sistemticos.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Los controles solo pueden ser efectivos cuando todos los factores relacionados con la calidad analtica han sido claramente definidos y cuidadosamente llevados a cabo. Una vez obtenidos los resultados, AAFS, SOFT y TIAFT recomiendan que antes de la interpretacin de los resultados, el personal cualificado revise y documente la cadena de custodia, validez y clculo de los resultados y datos del control de calidad. La evaluacin de los mecanismos implementados ha de realizarse con programas de pruebas de aptitud que, para los laboratorios forenses deben ser para la mayor parte de los anlisis y tipos de muestra ya que es la forma ms independiente de evaluar la fiabilidad de los mtodos y los procedimientos generales del laboratorio. Aunque la aplicacin de los procedimientos ms apropiados sustentar las bases de la correcta interpretacin, en toxicologa post mortem la fiabilidad de la interpretacin de los resultados analticos de las muestras no se puede asegurar slo a travs de la mera exactitud del proceso analtico ya que hay que considerar la influencia que tienen los cambios y procesos ante y post mortem, e interpretar unos resultados que deben explicar la causa de la muerte, la contribucin a la muerte, o el dao causado. Tanto las directrices emitidas por las legislaciones gubernamentales y las recomendaciones por parte de asociaciones profesionales o sociedades cientficas, as como un sistema de calidad implantado, pueden ayudar en la seleccin y recogida de muestras, almacenamiento, transporte, procesamiento y anlisis, sin embargo queda la interpretacin de los resultados postmortem que sigue siendo la tarea ms compleja en toxicologa forense. El enfoque del anlisis toxicolgico depende de los estudios solicitados en relacin al tipo de caso. Sin embargo es frecuente que los anlisis postmortem deban resolver en el momento la tarea fundamental de la deteccin del analito antes incluso de poder validar un nuevo mtodo de anlisis. Ante casos complejos y dependiendo de los resultados de un anlisis general, o bien debido a cuestiones planteadas o a la aparicin de nuevas sustancias para determinar, pueden requerirse mtodos que previamente no han sido probados. A menudo se necesita desarrollar enfoques personalizados, incluyendo a veces la validacin de mtodos costosos que se aplicarn pocas veces, o incluso una sola vez. Diversos factores pueden afectar en diferentes proporciones a las concentraciones del analito objeto de interpretacin, dificultando adems su comparacin con las tablas de datos clnicos. Al respecto cabe citar la estabilidad qumica de los compuestos, la influencia de la farmacocintica y farmacodinamia en relacin con las concentraciones de los txicos modificadas tanto en la fase agnica como debido a patologas previas existentes. Y tambin los cambios postmortem que afectan a la prctica totalidad de compuestos, debido a las alteraciones que se producen en la sangre, procesos de redistribucin y difusin, o las degradaciones y formaciones de compuestos en el intervalo postmortem. Para maximizar la fiabilidad de los resultados postmortem se recomienda que el intervalo entre la muerte y la recogida de muestras en la autopsia se reduzca al mnimo y que las muestras sean adecuadas con respecto a la historia clnica, los aspectos jurdicos y disponibilidad. La seleccin de las muestras es la actividad preanaltica ms importante por lo que se recomienda que todo el personal implicado conozca la informacin detallada y proporcione la documental sobre el origen y calidad de las muestras. Partiendo de la base de que las muestras tienen que ser cuidadosamente tratadas por ser nicas, la utilidad de la informacin que proporciona cada muestra para la interpretacin de los resultados depende fundamentalmente del estado del cadver, su disponibilidad y del anlisis solicitado. Se requieren volmenes o cantidades suficientes de muestra que se colocaran en recipientes separados y limpios capaces de mantener la calidad probatoria. La identidad y la integridad de las muestras tienen que estar garantizada por el mantenimiento de la cadena de custodia. En cuanto a la toma de muestras, las recomendaciones alemanas LDGR relacionan las muestras que deben tomarse en todas las autopsias, tanto en los casos en que la causa de muerte es desconocida como en los casos especiales. Referente a la cantidad y uso de las muestras postmortem, adems de las normas (Orden JUS/1291/2010, de 13 de mayo), existen las directrices de Forensic Toxicology Laboratory Guidelines (SOFT/AAFS), Laboratory Guidelines for Toxicological Analysis (TIAFT) y numerosos trabajos que recomiendan el tipo, volumen o cantidad, su utilidad para la interpretacin de los resultados, las consideraciones a tener en cuenta acerca de los envases, etiquetado y disposicin segn el tipo de anlisis a realizar. Cuando nos referimos a la calidad en la interpretacin toxicolgica postmortem lo hacemos a todos los aspectos de los procesos analticos a partir de la toma y recepcin de la muestra, pasando por el anlisis y la presentacin de los resultados. Esto incluye, aunque no limita, el control de calidad de cada anlisis y los ensayos de aptitud de los laboratorios. En la norma UNE-EN ISO/IEC 17025:2005 queda reflejada que la interpretacin de los resultados quedar al criterio del facultativo responsable que tendr que tener acreditada su competencia. Aunque la interpretacin en si misma no es acreditable. Queda patente la inexistencia de criterios en la interpretacin toxicolgica postmortem ya que slo disponemos de protocolos y criterios cualitativos y cuantitativos en los trminos analticos. Incrementar los estudios encaminados a establecer correlaciones de concentraciones de txicos en distintos tipos de muestras postmortem o estudios estadsticos de las concentraciones de txicos encontrados en las poblaciones con causas de muerte similares, seran muy tiles para empezar a establecerlos. Palabras clave: Calidad, Interpretacin, Postmortem. Mesa redonda de Toxicologa Ambiental Modera: M. Jos Gonzlez, Universidad de Alcal. P.8.- PROBLEMTICA DE LOS METALES PESADOS EN EL MEDIO AMBIENTE Bermejo Barrera, P Departamento de Qumica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Facultad de Qumica. Universidad de Santiago de Compostela, Espaa. El objetivo de esta charla es clarificar los posibles problemas debidos a la presencia de los llamados pesados en el medio ambiente. Para ello, en primer lugar se aclarar que entendemos por el trmino metales pesados ya que en realidad es un trmino muy poco especfico y nada clarificador. Posteriormente se hablar sobre los diferentes tipos de metales, sus propiedades y sus posibles implicaciones en la salud humana. De entre los diferentes tipos de metales, centraremos la discusin en los considerados fundamentalmente como elementos txicos, an siendo conscientes de que la toxicidad depende claramente de los niveles presentes. Adems, si hoy deseamos hablar acerca de los peligros de los metales pesados, o de la importancia de los elementos traza como elementos esenciales, no podemos considerar solamente la concentracin total de tales metales. Aunque es importante el conocimiento exacto del contenido total de un metal, es ms importante considerar la forma qumica, es decir las distintas especies particulares de un elemento en una matriz particular. Solamente con el conocimiento de tales especies se podrn sacar conclusiones acerca de la movilidad,
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa resorcin, biodisponibilidad, acumulacin y toxicidad de un determinado elemento. La presencia de los metales en el ambiente origina dificultades especiales, ya que los metales no pueden degradarse ni biolgica ni qumicamente en la naturaleza. Los compuestos que contienen metales pueden alterarse, como es el caso de los diferentes complejos organometlicos, sin embargo, los metales permanecen. En algunos casos, tales reacciones producen formas ms txicas, como por ejemplo el mercurio que se transforma en metilmercurio, una forma mucho ms txica para los seres vivos. Por otra parte, la estabilidad de los metales tambin permite que sean transportados a grandes distancias. Por lo tanto, uno de los problemas ms graves de la persistencia de los metales en el medio es la amplificacin biolgica a travs de la cadena trfica. Como consecuencia de ello es posible que los niveles de metales en el hombre sean mucho ms elevados que en el aire o en el agua pudiendo llegar a representar un peligro para la salud humana. El estudio de la presencia de metales, tales como arsnico, cadmio, cromo, mercurio y plomo en productos de la pesca para consumo humano ha representado un importante rea de desarrollo no solo para la comunidad cientfica, sino tambin para las autoridades gubernamentales, las cuales han establecido niveles mximos permitidos para determinadas especies metlicas en todos aquellos productos destinado a consumo humano. No podemos dejar de citar a los nuevos problemas que se estn planteando en los ltimos aos como consecuencia del uso de la Nanotecnologa en distintos mbitos. Ello supone la liberacin al ambiente de grandes cantidades de nanopartculas metlicas que debido a sus propiedades fsicas y qumicas suponen un importante problema de contaminacin ambiental, que a da de hoy est todava sin estudiar en profundidad. Palabras clave: Metales pesados, Medio ambiente, Especiacin, Nanopartculas. P.9.- TOXICIDAD DE COMPUESTOS ORGNICOS: ALTERNATIVAS SOSTENIBLES. Snchez Montero, JM Departamento de Qumica Orgnica y Farmacutica. Grupo de Biotransformaciones. Universidad Complutense. Plaza de Ramn y Cajal s/n, 28040 Madrid. De forma general los compuestos orgnicos se pueden clasificar en dos grupos principales de compuestos: 1. Los tradicionales Major Air Pollutants (MAP) o principales agentes contaminantes que comprenden dixido de azufre, dixido de nitrgeno, monxido de carbono, partculas y los contaminates secundarios de ozono. 2. Hazardous Air pollutants o Agentes contaminantes peligrosos (HAP) entre los que estn comprendidos agentes qumicos, fsicos y biolgicos de diferentes tipos. Los HAP estn generalmente presentes en la atmsfera en mucha menor concentracin que los MAP aunque son ms difciles de controlar debido a que en muchas ocasiones no son identificados Entre los HAP los ms importantes son los COVs y los HAP. 2a) Compuestos orgnicos voltiles (COVs) emitidos principalmente a travs de la combustin parcial de carburantes y a travs de la evaporacin de disolventes orgnicos. De ellos destacan el benceno y el 1,3-butadieno por ser potencialmente cancergenos. Ambos son emitidos principalmente a travs de la combustin de petrleo y sus derivados. 2b) Hidrocarburos poliaromticos (PAH): son compuestos emitidos en cantidades pequeas a la atmsfera pero son potencialmente cancergenos. Los efectos de los compuestos orgnicos voltiles para la salud pueden variar mucho segn el compuesto y comprenden desde un alto grado de toxicidad hasta ausencia de efectos conocidos. Esos efectos dependern de la naturaleza de cada compuesto y del grado y del perodo de exposicin al mismo. La exposicin a estos contaminantes puede realizarse por inhalacin, ingestin o contacto con la piel. La mayor parte de los estudios se refieren a contaminacin en espacios interiores debido a la mayor abundancia de estos contaminantes y son menores los estudios referidos a exteriores. En general, la exposicin a largo plazo a los compuestos orgnicos voltiles puede causar lesiones del hgado, riones y el sistema nervioso central y cncer. La exposicin a corto plazo puede causar irritacin de los ojos y las vas respiratorias, dolor de cabeza, mareo, trastornos visuales, fatiga, prdida de coordinacin, reacciones alrgicas de la piel, nusea y trastornos de la memoria. Muchos de los disolventes ms habituales presentan diversos riesgos tanto medioambientales como para la salud, puesto que la mayora son bastante voltiles. As, por ejemplo, los hidrocarburos saturados, amn de su volatilidad y alto grado de inflamabilidad, suponen un grave riesgo si son inhalados, afectando al Sistema Nervioso Central (originando desinhibicin y/o depresin), a los pulmones, de manera que una exposicin prolongada a los mismos puede originar cardiomiopatas, atrofia cerebral, o inclusive demencia. Por lo que respecta a los hidrocarburos aromticos (benceno, tolueno, xilenos, benzonitrilo, o aromticos clorados), su volatilidad tambin les hace peligrosos, en especial en el caso del benceno, compuesto cabeza de serie. Cuando se liberan, diferentes microorganismos pueden degradarlos mediante procesos de oxidaciones a mayor o menor escala, pero si estos compuestos llegan a entornos anaerbicos (como suelos, por ejemplo), su degradacin se ralentiza de manera considerable. El benceno es un conocido cancergeno humano y una fuente importante de l, es la pintura, aunque se puede encontrar en resinas, aceites, plsticos, detergentes, explosivos, productos farmacuticos, etc. Los alcoholes (metanol, etanol, n-propanol, o iso-propanol) son un tipo de disolventes relativamente verdes, aunque su volatilidad e inflamabilidad puede originar, si existe una exposicin prolongada, problemas de irritacin ocular, dolores de cabeza, fatiga o prdida de concentracin. Los teres (fundamentalmente el ter dietlico o el tetrahidrofurano, THF) son muy frecuentemente usados para disolver productos orgnicos, pues posteriormente pueden eliminarse con facilidad por una simple destilacin, aunque su extremada volatilidad origina riesgos de explosin, acentuada por la posibilidad de formar perxidos inestables. Por ltimo, los disolventes polares aprticos, tipo acetona, 2butanona, acetonitrilo, N,N-dimetilformamida (DMF), dimetilsulfxido (DMSO), o hexametilfosforamida (HMPA), tan habituales en cualquier laboratorio orgnico, tampoco estn exentos de peligros. Las cetonas presentan una casustica semejante a los teres, mientras que el acetonitrilo puede inhibir la cadena respiratoria. La DMF puede originar daos renales o hepticos, e inclusive puede conducir a problemas de impotencia; el DMSO origina dermatitis y malfuncionamiento heptico, y finalmente, la HMPA, aunque es menos voltil, tambin puede incidir sobre los pulmones, riones y CNS. Los disolventes orgnicos estn hoy da presentes en numerossimos productos tanto industriales como de consumo diario, como pinturas, tintes, cosmticos, limpiadores tanto domsticos como industriales, y por supuesto en los combustibles. Asimismo, juegan un papel fundamental en los procesos qumicos, tanto para disolver reactivos, como para facilitar procesos de aislamiento y purificacin, o inclusive para lavar el material de laboratorio una vez utilizado. De todo lo dicho queda patente la necesidad de minimizar la
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa exposicin humana a disolventes, por lo que el estudio de diferentes sistemas de reemplazo de los mismos con medios de reaccin alternativos constituye un campo apasionante de trabajo. No obstante, para que se pueda producir un reemplazo eficiente, el disolvente alternativo tiene que cumplir una serie de condiciones: Debe disolver los materiales de partida y los reactivos. Debe ser inerte, y no interferir en la reaccin deseada. Debe, a ser posible, tener un efecto positivo en la velocidad de reaccin. Una vez cumplidos estos requisitos, asimismo debe superar una serie de cuestiones. Muchas de esas preguntas son de difcil respuesta, sobre todo a la hora de decidir si un disolvente alternativo puede ser inocuo para la salud, si no existen suficientes datos bibliogrficos al respecto. En la actualidad, no obstante, existen TRES ALTERNATIVAS SOSTENIBLES, de menor a mayor novedad, que enumeramos a continuacin. 1) Uso de Disolventes Convencionales ms Sostenibles. 2) Diseo de Nuevos Disolventes 3) Diseo de Procesos sin Disolventes P.10.- EFECTOS DE CONTAMINANTES ACUTICOS EN P E C E S : A L T E R A C I O N E S M E TA B L I C A S Y NEUROENDOCRINAS DERIVADAS DE LA EXPOSICIN A HIDROCARBUROS AROMTICOS POLICICLCOS Mguez, JM; Gesto, M; Alvarez, RM; Soengas, JL Departamento de Biologa Funcional y Ciencias de la Salud. Facultad de Biologa. Universidad de Vigo. El ambiente acutico es una matriz compleja en la cual la integridad estructural y funcional del organismo cambia constantemente por efecto de las variables biticas y abiticas. Al margen de los fenmenos naturales, los vertidos procedentes de las actividades agrcolas, escorrentas de tierras y depuraciones deficitarias de aguas urbanas, estn entre las principales fuentes de contaminacin de los sistemas acuticos. Adems, la presencia de vertidos incontrolados derivados de la actividad industrial (escapes, transporte martimo, etc), son origen de grandes cantidades de contaminantes en el medio acatico. En los ltimos aos numerosos estudios han puesto de manifiesto que la presencia de contaminantes qumicos tiene efectos adversos sobre el estado fisiolgico de los animales acuticos, tanto invertebrados como vertebrados, por lo que diversas especies han sido propuestas como modelos tiles para evaluar contaminacin ambiental. Los peces responden ante sustancias qumicas nocivas a unos niveles ms bajos que los organismos terrestres, debido principalmente al ntimo contacto que estos animales tienen con su medio acutico a travs de la piel, el intestino y sobre todo de las branquias. Todo ello hace que sean extremadamente sensibles y vulnerables a los agentes contaminantes. Diversos estudios han mostrado que la exposicin de peces a pesticidas, metales pesados, bifenilos policlorados (PCBs) y derivados del petrleo, produce mltiples alteraciones fisiolgicas, incluyendo efectos neurotxicos y disrupcin del sistema endocrino, con consecuencias sobre la reproduccin y el crecimiento. Entre los parmetros utilizados como marcadores de esta accin txica se han estudiado enzimas y productos de biotransformacin, indicadores de estrs oxidativo, protenas de estrs, parmetros genotxicos, reproductivos, endocrinos, metablicos y otros. La mayora de los estudios toxicolgicos en peces se han dirigido a evaluar los efectos sobre los ejes endocrinos que regulan la reproduccin o la respuesta al estrs, evaluando normalmente parmetros relacionados con la sntesis, funcin y metabolismo de distintas hormonas. En el caso de la respuesta de estrs, en los peces esta se integra en los ejes endocrinos hipotlamo-hipfisistejido interrenal (con produccin de glucocorticoides) e hipotlamo-hipfisis-tejido cromafn (con secrecin de catecolaminas). Las alteraciones de la produccin de esteroides gonadales e interrenales conllevan cambios en parmetros bioqumicos y metablicos que tambin son tiles a la hora de evaluar las acciones de los contaminantes. Existe menos informacin de las alteraciones que producen los contaminantes acuticos a nivel del sistema nervioso, aunque ello est suscitando creciente inters. Los hidrocarburos aromticos policclicos (PAHs) como contaminantes del ambiente acutico.- Los PAHs son compuestos orgnicos formados por dos o ms anillos de benzeno condensados, que tienen gran relevancia ecotoxicolgica por su toxicidad y presencia creciente en los sistemas acuticos. Las vas de entrada al medio acutico son diversas, incluyendo biosntesis en organismos y filtraciones desde yacimientos marinos, vertidos de combustibles desde embarcaciones, vertidos urbanos, descargas fluviales y deposiciones atmosfricas. Se conocen cientos de derivados de PAHs, desde los ms sencillos como el naftaleno (NAF, 2 anillos bencnicos) hasta compuestos de mayor peso molecular como el benzo(a) pireno (BaP) o derivados heterocclicos complejos con sustituciones diversas. Los PAHs tienen gran facilidad para incorporarse a las matrices lipdicas de los organismos y alto potencial de bioconcentracin. En los peces, suelen acumularse en cerebro y gnadas, especialmente los PAHs ms sencillos, mientras que los de mayor peso molecular tiene menor capacidad acumulativa pero mayor potencial txico y carcinognico. Diversos estudios han revelado que los PAHs se unen a un receptor intracelular aril-hidrocarburo (AhR) que se halla predominantemente en hgado pero tambin en otros tejidos. La activacin del receptor provoca su internalizacin en el ncleo, donde el complejo ligando-receptor regula la expresin de distintos genes diana. Entre estos estn los que codifican enzimas de detoxificacion (UDPGT, GST, algunos citocromos p450, etc). En algunos casos, estas enzimas, al actuar sobre los PAHs, los convierten en metabolitos ms txicos que el compuesto original, proceso conocido como bioactivacin. Se cree tambin que los PAHs pueden ejercer acciones independientes del receptor AhR. En los ltimos aos, nuestro grupo ha utilizado la trucha arco iris como modelo de pez telesteo para esclarecer los efectos endocrinos y metablicos de dos PAHs abundantes en el medio acutico: el NAF, presente en el petrleo crudo, y el BaP, de origen pirognico. Tambin hemos investigado el efecto de un agonista de receptor AhR, la naftoflavona. Particularmente se han estudiado la interaccin de estos compuestos con la actividad reproductiva y con la respuesta de estrs, as como sus potenciales efectos neurotxicos. Los resultados obtenidos en la trucha muestran que el NAF reduce los niveles plasmticos de estradiol y de cortisol, e induce una serie de alteraciones en el metabolismo energtico en distintos rganos, incluidos el hgado y el cerebro. A nivel reproductivo, el efecto inhibidor del NAF sobre la regulacin gonadal tiene mayor incidencia durante la fase de vitelognesis temprana, indicando que podra comprometer la maduracin ovrica. Este compuesto tambin afect a la capacidad de respuesta de estrs de las truchas, hecho constatado tanto en situaciones de estrs agudo como prolongado. Con respecto al BaP, los mayores efectos se observaron sobre el eje interrenal, en este caso con un fuerte incremento de la secrecin de cortisol y de los niveles de glucosa y lactato en plasma. Estos ltimos derivaran de una mayor capacidad glucogenoltica y glucoltica heptica en animales expuestos al BaP. Efectos similares se obtuvieron con la -naftoflavona. Es importante destacar que todos los PAHs produjeron aumentos de la produccin de melatonina en el rgano pineal, lo que podra indicar una accin sobre los mecanismos generadores de ritmicidad en el organismo. Dado que la melatonina tiene alta capacidad protectora celular, la
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa activacin de su produccin podra interpretarse como un mecanismo protector frente a la toxicidad de estos compuestos. Por ltimo, se han obtenido evidencias de los efectos de los PAHs sobre el metabolismo de neurotransmisores aminrgicos (serotonina, catecolaminas) en diferentes reas cerebrales. Todo ello indica que las alteraciones hormonales inducidas por los PAHs estaran mediadas por cambios en los centros neurales que controlan los ejes endocrinos gonadal e interrenal Conclusiones y perspectivas.-Dentro de los contaminantes del medio acutico, los PAHs son compuestos habituales derivados de la deposicin natural o de la accin antropognica. En peces telesteos los PAHs ejercen efectos negativos sobre los sistemas neuroendocrinos, pudiendo afectar a la reproduccin y, especialmente, condicionar la respuesta adaptativa del animal frente a cambios de su medio ambiente. La evaluacin de los efectos fisiolgicos que inducen en los peces estos y otros contaminantes acuticos arroja importante informacin sobre su potencial txico y sus mecanismos de toxicidad. Mesa redonda de Mtodos alternativos y Toxicologa experimental La prohibicin del ensayo de ingredientes cosmticos en animales en 2013 Moderan: Argelia Castao, IS Carlos III y Guillermo Repetto, Universidad Pablo de Olavide. P.11.- EVALUACIN DE LA SEGURIDAD DE LOS PRODUCTOS COSMTICOS del Caizo, C Consultora Ciencia Cosmtica La evaluacin de la seguridad de los productos cosmticos se debe realizar antes de la colocacin del producto en el mercado. El producto tiene que ser seguro en las condiciones normales o razonablemente previsibles de uso. Por qu los productos cosmticos necesitan una evaluacin toxicolgica y de seguridad? Por su propia especificidad La evaluacin de la seguridad tiene implicaciones empresariales importantes y debe gestionarse con pragmatismo y responsabilidad. Hay que realizar la evaluacin de los ingredientes, su perfil toxicolgico. Se tienen que evaluar en funcin del riesgo. Hay que realizar posteriormente la evaluacin de los productos terminados. Control de la seguridad bsica y confirmacin de la seguridad y aceptabilidad de los mismos. Tests clnicos en humanos voluntarios. Por qu y cundo. Seguimiento de la seguridad en el mercado. P.12.- EL REACH TAMBIN AFECTA A LOS PRODUCTOS COSMTICOS Vilanova, E; Estevez, J Unidad de Toxicologa y Seguridad Qumica, Instituto de Bioingeniera, Universidad Miguel Hernandez de Elche REACH (Registro, Evaluacin, Autorizacin y Restriccin de sustancias qumicas) es el Reglamento Europeo de sustancias qumicas (Reglamento 1907/2006). Es un ambicioso proyecto que bajo normas y guas basadas en el conocimiento cientfico intenta garantizar la seguridad para el ciudadano y para el medio ambiente de TODAS las sustancias existentes en el mercado absorbiendo todas las directivas derivadas de la D67/548 de sustancias peligrosas y las de sustancias nuevas. Entr en vigor el 1 de junio de 2007 con un calendario para el registro de todas las sustancias producidas o importadas en el mercado europeo. Una consecuencia es la creacin de una nueva Agencia Europea de Sustancias y Mezclas Qumicas (ECHA) que tambin ha asumido los procesos de clasificacin y etiquetado y que est siendo la actividad de ms dedicacin de base cientfica de su comit de evaluacin de riesgos (RAC) y est aplicando el nuevo sistema armonizado (Reglamento 1272/2008 de CLP) basado en el GHS auspiciado por Naciones Unidas. Tambin deriva de este el reglamento de ensayos validados (Reglamento 440/2008) que antes era el Anexo V de la Directiva 67/548. Ahora est cargando la mayor responsabilidad en la industria en el control de los riesgos para la salud humana y el medio ambiente de las sustancias qumicas que genera nuevas obligaciones de la industria y est afectando a todo el proceso de la cadena comercial aguas abajo de la importacin, produccin, intermedia de los usuarios, la produccin de artculos y distribucin y est teniendo un impacto en todo el mundo global en el mercado internacional de productos qumicos. Supondr realizar la evaluacin detallada de toxicidad y de riesgos toxicolgicos de ms de 30.000 sustancias de las 100.106 que el registro de "Sustancias existentes", cerr en 1981. Sustancias usadas como fitosanitarios, biocidas, medicamentos y aditivos alimentarios tienen regulaciones especficas. Los productos cosmticos per se no estn afectados de registro en el REACH pero s los ingredientes cosmticos. Ahora bien estos, el REACH los deja fuera de procesos a evaluaciones de riesgos, autorizaciones y restricciones al estar bajo la norma especfica de los productos cosmticos (Directiva 76/768) y la nueva Directiva de cosmticos (2009/1223) refiere al REACH en relacin a riesgos ambientales y a los mtodos de ensayo y de mtodos alternativos validados. Abren nuevos retos cientficos y jurdicos para el desarrollo de mtodos alternativos in vitro e in silico para pruebas y sistemas informticos de modelo para la prediccin de toxicidad, as como estrategias legales para evitar innecesarias pruebas de experimentacin animal lo que es especialmente importante en cosmticos por las fuertes restricciones para el desarrollo de productos cosmticos. Palabras claves: REACH, Cosmticos, Evaluacin de riesgos, In vitro, Alternativas, Clasificacin. P.13.- DISPONIBILIDAD DE ALTERNATIVAS EN LA EVALUACIN DE COSMTICOS Repetto, G Universidad Pablo de Olavide, de Sevilla, GTEMA/AETOX y REMA El fabricante, importador o comercializador es responsable de garantizar la seguridad de los productos cosmticos para el consumidor, segn la Directiva 76/768/EEC, relativa a la aproximacin de las legislaciones de los Estados miembros en materia de productos cosmticos. La seguridad del producto final se basa en la evaluacin de la seguridad de sus ingredientes, lo que evita la realizacin de ensayos con los productos acabados. De acuerdo con la citada normativa, desde 1998 se estableci que la seguridad de los cosmticos deba garantizarse sin ensayos con animales, aunque con distintas fechas lmite que fueron aplazando su aplicacin. Con la 7 enmienda de la citada directiva, 2003/15/EC, la restriccin del empleo de animales en el mbito de la evaluacin de cosmticos se ha producido en dos sentidos. En primer lugar, la prohibicin de ensayos animales en productos cosmticos acabados entr en vigor el 11 de septiembre de 2004 y para ingredientes o combinaciones de ingredientes el 11 de marzo de 2009. En segundo lugar, la prohibicin de la comercializacin de cosmticos o ingredientes evaluados en animales con objeto de cumplir el reglamento entr en vigor el 11 de marzo de 2009. Se exceptuaron los estudios de toxicidad por dosis repetida, de toxicidad para la reproduccin y de toxicocintica, hasta que se acepten por la UE-OCDE procedimientos alternativos, o como mximo el 11 de marzo de 2013, en forma paralela a la entrada en vigor del nuevo Reglamento (CE) No 1223/2009 sobre los productos cosmticos.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Preocupada ante el impacto de estas medidas, la Comisin Europea estableci cinco grupos de expertos para que estimaran si ser posible disponer de alternativas vlidas para tal fecha (Adler y col. 2011). Hasta el momento se han aceptado mediante validacin los siguientes procedimientos in vitro: 15 ensayos de toxicidad (corrosividad drmica, irritacin drmica, Irritacin severa / corrosividad ocular y fototoxicidad), 1 de toxicocintica (absorcin drmica), 5 de pirogenicidad y 3 para vacunas, adems de 10 ensayos de mutagenicidad que se incluyeron en la legislacin antes de que se implantaran los procesos de validacin. Aunque se han producido importantes avances en el desarrollo e implementacin de mtodos alternativos, la evaluacin de la seguridad de productos cosmticos precisa todava de la utilizacin de ensayos con animales. Por ejemplo, la evaluacin de la sensibilizacin drmica de ingredientes cosmticos se apoya prcticamente en exclusiva en el ensayo del ndulo linftico local (LLNA), llevado a cabo en ratn, y que constituye buen ejemplo de una alternativa de reduccin y refinamiento respecto al ensayo en cobayo. No slo se utiliza un menor nmero de animales de una especie inferior y menos sensible, sino que el procedimiento es mucho menos agresivo. Por el contrario, se ha considerado que las tcnicas de absorcin drmica deben optimizarse, aunque suelen realizarse pocos estudios de toxicocintica. Tampoco suelen realizarse ensayos de carcinogenicidad, gracias a la realizacin previa de ensayos de mutagenicidad in vitro, con los que se descartan sustancias problemticas, ya que usualmente la determinacin del NOAEL suele apoyarse en la realizacin de estudios de toxicidad crnica por dosis repetidas a 28/90 das, para los cuales no existen alternativas validadas. Tampoco se han aceptado procedimientos alternativos para la evaluacin de la toxicidad para la reproduccin y el desarrollo embrionario. Sin embargo, se dispone de algunos ensayos validados que se han mostrado particularmente tiles en la deteccin de alteraciones del desarrollo, como son el test de las clulas madre embrionarias (SCT), el ensayo en micromasas y el ensayo del embrin completo de rata. Por todo ello, y a expensas de la decisin que tome la Comisin Europea, es muy probable que, basndose en el criterio cientfico de falta de disponibilidad de procedimientos alternativos, en 2013 no entre en vigor la prohibicin absoluta de ensayo con animales para la evaluacin de ingredientes cosmticos, pero que se siga progresando en la implementacin paulatina de procedimientos alternativos que reduzcan la necesidad de ensayos in vivo y que mejoren las estrategias actuales de evaluacin del riesgo. Palabras clave: Cosmticos, Seguridad, Alternativas, Animales, Toxicologa regulatoria. Mesa redonda de Toxicologa Clnica Cuestiones actuales de toxicologa clnica. Modera: Ana M. Bermejo, Universidad de Santiago de Compostela P. 1 4 . - E N F E R M E D A D E S E M E R G E N T E S RELACIONADAS CON LA EXPOSICIN A XENOBITICOS: SNDROME DE SENSIBILIDAD QUMICA MLTIPLE Y COMORBILIDADES Valls Llobet, C Centro de Anlisis y Programas Sanitarios de Catalua. caps@pangea.org Las consecuencias sobre la salud debidas a la exposicin a xenobiticos no estn totalmente establecidas, pero empiezan a aparecer patologas recurrentes que se han iniciado de forma abrupta o insidiosa en relacin a la exposicin ocupacional, ambiental, o accidental1. Aunque es difcil todava establecer el impacto global sobre la salud de la exposicin a pesticidas, o disolventes, est bien establecida ya su relacin con diversos tipos de cncer, malformaciones congnitas, disrupcin endocrina y neurotoxicidad2. El estudio de ms de 193 personas afectadas por exposicin laboral a pesticidas y disolventes y su seguimiento durante quince aos ha constatado que en su evolucin posterior presentaban Sensibilidad Qumica Mltiple, Fatiga crnica y Fibromialgia. Recientes evidencias muestran que las tres patologas tienen elementos comunes por la afectacin del sistema lmbico y ganglios basales cerebrales y la afectacin del sistema de oxidacin-reduccin en las mitocondrias de la mayora de clulas del cuerpo. Aunque la evitacin de las exposiciones potencialmente txicas constituyen el eje de la prevencin, las nuevas evidencias fisiopatolgicas abren nuevos caminos para el tratamiento individualizado de las personas que presentan estas nuevas enfermedades emergentes. 1 Prss-Ustn, A et al. "Knowns and unknowns on burden of disease due to chemicals: a systematic reviem." Enviromental Health, 2011. 10: 9: 1-15. 2 Valls-Llobet, Carme. "Mujeres, Salud y Poder". 2009. Editorial Ctedra. P.15.- EXPOSICIN A DISRUPTORES ENDOCRINOS Y OBESIDAD Garca-Mayor, RV Servicio de Endocrinologa, Diabetes, Nutricin y Metabolismo. Complejo Hospitalario Universitario de Vigo. Vigo. Existe un creciente inters en el posible peligro para la salud que provocan los disruptores qumicos sobretodo en el sistema endocrino. Los disruptores pueden ser sustancias habituales de nuestro medio ambiente, que se encuentran en los alimentos y en otros productos de consumo; actan sobre el sistema endocrino ya que tienen la capacidad de interferir en la biosntesis, en el metabolismo y en la accin de las hormonas, alterando el control de la homeostasis normal y la reproduccin. Resultados de estudios experimentales en modelos animales, la observacin clnica en humanos y estudios epidemiolgicos convergen en el aumento de la preocupacin por los efectos de estas sustancias en la salud pblica. El grupo de sustancias identificadas como disruptores qumicos endocrinos es heterogneo, estn presentes en nuestro medio ambiente y representan una gran variedad de molculas incluyendo sustancias sintetizadas para uso industrial: solventes y lubricantes industriales, sus bioderivados (bifenilos, bifenilos polibrominados, falatos, DDT, fungicidas (vinclozolin), y agentes farmaceticos (dietil-etilbestrol). Tambin agentes qumicos naturales, que se pueden encontrar en la alimentacin humana y animal como los fitoestrgenos. Inicialmente se pensaba que estas sustancias ejercan su efecto a travs de su interaccin con receptores nucleares pero hoy se sabe que pueden actuar sobre receptores nucleares, sobre receptores de membrana, receptores de neurotransmisores, receptores hurfanos, vas enzimticas, y otros mecanismos que afectan el sistema endocrino y reproductor. El efecto de los disruptores endocrinos est condicionado por la edad en la que el individuo se ve expuesto, el periodo de latencia de la exposicin, la presencia de mezclas de disruptores en la atmsfera, y una dinmica no tradicional dosis-respuesta, en el sentido de dosis bajas pueden tener mayor efecto disruptor que las dosis altas. La obesidad se define como un aumento del contenido de grasa corporal superior al 25% en varones y 30% en mujeres. En las ltimas dcadas, se ha experimentado un incremento en la incidencia y prevalencia de la obesidad en prcticamente todos
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa los pases del mundo. En los Estados Unidos de Amrica el 30% de los adultos cumplen criterios diagnsticos de obesidad. En la poblacin infantil tambin se observa un incremento en la incidencia y prevalencia de sobrepeso y obesidad, as en un estudio realizado por nuestro grupo en la provincia de Pontevedra, en un periodo de 20 aos observamos que la prevalencia de sobrepeso, definido por un peso superior al percentil 85 para edad y sexo, en escolares de 6 a 16 aos fue de 14,9%, 21,2% y 28,8% en los estudios de campo realizados en los aos 1985, 1995 y 2005 respectivamente. En ese mismo periodo la prevalencia de nios obesos, peso superior al percentil 95, fue de 2,2%, 6,2% y 11% para cada uno de los anlisis respectivamente. El aumento de la incidencia de la obesidad en la poblacin, coincide con el aumento del uso y distribucin de determinados productos industriales, sugirindose que stos pudiesen jugar un papel importante en la epidemia de la obesidad. La obesidad tiene efectos negativos sobre la salud, aumentando el riesgo de padecer enfermedades metablicas tales como la diabetes, hiperuricemia, hipertensin arterial y dislipidemia, todos ellos a su vez conocidos componentes del llamado sndrome metablico y que condicionan la aceleracin del proceso arterioesclertico en sus manifestaciones cardiovascular y cerebrovascular. La etiologa de la obesidad se ha atribuido parcialmente a cambios en los hbitos alimenticios de la poblacin, con un aumento de la dieta occidentalizada caracterizada por un alto valor calrico, y a la disminucin de la actividad fsica. Sin embargo, los factores tradicionalmente considerados como factores etiolgicos, la predisposicin gentica y los cambios del estilo de vida, no explican del todo la epidemia de la obesidad. Se ha acuado el trmino obesogens para molculas que de forma inapropiada pueden regular el metabolismo de las grasas y la adipognesis, promoviendo el desarrollo de obesidad. La obesidad y otras anomalas metablicas tambin se han relacionado con acontecimientos ocurridos en la poca del desarrollo fetal, as el bajo peso al nacer se ha asociado con el desarrollo del sndrome metablico en la edad adulta. El metabolismo de la grasa blanca, est sometido al control del sistema nervioso simptico y es modulado por sustancias hormonales incluyendo a los esteroides sexuales. El impacto de los estrgenos ambientales sobre el tejido adiposo puede ser directo, modulando la lipognesis, lipolisis y adipognisis e indirecto, afectando al consumo de alimentos, actuando sobre la secrecin de leptina, el sistema nervioso central y la homeostasis lipdica del hgado. Productos estrognicos sintticos como el etinil-estilbestrol son ejemplo de la relacin existente entre la exposicin perinatal y el desarrollo de sobrepeso y obesidad. En algunas especies animales hay una relacin entre la concentracin de estrgenos a la cual los animales gestantes estn expuestos y el peso del producto en la edad adulta. Ratones expuestos en la etapa neonatal a dietiletilbestrol, experimentan aumento del peso y distribucin de la grasa abdominal en la edad adulta. Adems del efecto sobre el peso y la distribucin de la masa grasa, los ratones presentan elevacin de la adipocina leptina, la adiponectina y, aumento de marcadores de inflamacin como la interleucina 6. Estudios in vitro, muestran que el bisfenol A en cultivos de preadipocitos estimula la acumulacin de lpidos, y aceleran la diferenciacin a adipocitos. Existe evidencia experimental de que la superfamilia de receptores nucleares, especialmente el receptor activador de la proliferacin de los peroxisomas, son dianas moleculares de disruptores endocrinos como trifenilin y tributilin, ampliamente usados en la agricultura y la industria. Es posible que la interaccin con los receptores activadores de la proliferacin de los peroxisomas pueda tambin interactuar con los estrgenos induciendo adipognesis. Podemos concluir que en la actualidad, existe evidencia experimental que sugiere que los disruptores endocrinos pudiesen jugar un papel importante en el desarrollo de la obesidad en humanos y as contribuyan a explicar el aumento inesperado de la obesidad en prcticamente todas las poblaciones en el mundo. P.16.- MUERTE CELULAR PROGRAMADA: DE LA BIOLOGA MOLECULAR AL PROCESO CLNICO Balaa Fouce, R; Fernndez Prada, CH; Calvo lvarez, E rea de Toxicologa Dpto. Ciencias Biomdicas ULE. La apoptosis es una forma de muerte celular programada (PCD del ingls programmed cell death) propia de los organismos pluricelulares. Se trata de uno de los principales tipos de PCD y comprende una serie de procesos bioqumicos y moleculares que inducen cambios morfolgicos especficos en las clulas anteriores a su muerte. Estos cambios morfolgicos incluyen la vacuolizacin, cambios en la membrana celular como la prdida de la asimetra y del acoplamiento, colapso celular, fragmentacin nuclear, condensacin de la cromatina, y fragmentacin del ADN genmico. Durante la apoptosis, las clulas desempean un papel activo y controlado de su propia muerte (por lo que se ha hablado de suicidio celular), mientras que en la necrosis la muerte celular es un proceso descontrolado que conduce a la lisis de las clulas y a la induccin de una respuesta inflamatoria. La apoptosis se produce durante el desarrollo normal de los organismos pluricelulares y contina durante toda su vida adulta. La combinacin de la apoptosis y la proliferacin celular es la encargada de dar forma a tejidos y rganos en el desarrollo embrionario. A diferencia de la necrosis, que es una forma traumtica de muerte celular resultante de una lesin celular aguda, la apoptosis confiere ventajas al organismo durante su ciclo vital. Se calcula que entre 50-70 x 109 clulas mueren cada da en un humano adulto medio debido a la apoptosis. Esto equivale a la proliferacin y posterior destruccin de una masa celular igual al peso del cuerpo de un individuo en un ao. La apoptosis es tambin una parte importante de la regulacin del sistema inmunolgico. Los linfocitos T son clulas del sistema inmunolgico responsables de la destruccin de clulas infectadas o daadas en el cuerpo. Los linfocitos T maduran en el timo, pero antes de que puedan entrar en el torrente sanguneo, son puestas a prueba para asegurarse de que son eficaces contra antgenos extraos y para evitar que reaccionen frente a clulas sanas. Cualquier linfocito T inefectivo o autoreactivo se elimina a travs de la induccin de la apoptosis. La apoptosis es un fenmeno complejo y regulado en el que las clulas cambian su morfologa empezando por una disminucin de su volumen, como consecuencia de la destruccin de las lminas y filamentos de actina del citoesqueleto. La ruptura de la cromatina en el ncleo conduce a menudo a la condensacin nuclear (cariorresis) que en muchos casos da lugar a que los ncleos apoptticos adquieran forma de "herradura". Por ltimo, la clula se fragmenta en pequeos cuerpos apoptticos que facilitan su eliminacin por los macrfagos sin inducir un proceso inflamatorio. Estas clulas fagocticas son las responsables de la limpieza de las clulas apoptticas de los tejidos de una forma limpia y ordenada, evitando muchos de los problemas relacionados con la muerte celular necrtica. Con el fin de promover su fagocitosis, las clulas apoptticas generan cambios en la membrana plasmtica que desencadenan la respuesta de los macrfagos. Uno de esos cambios es la translocacin de fosfatidilserina desde la cara interior de la membrana plasmtica a la exterior. La apoptosis puede desencadenarse por estmulos externos (ruta extrnseca) relacionados con la unin de ligandos
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa inductores de muerte a receptores de membrana, o por estmulos intrnsecos producidos como consecuencia de una situacin de estrs y en los que las mitocondrias juegan un papel clave. En el mecanismo molecular que controla la apoptosis actan varios agentes, de los cuales uno de los ms importantes es el complejo de cisteinil-proteasas dependientes de aspartato (caspasas). Se han descrito en clulas humanas hasta 11 caspasas diferentes que se sintetizan en forma de cascada y provocan una degradacin proteica bien definida hasta la formacin de cuerpos apoptticos. La activacin de las caspasas, que existen en forma inactiva o de pro-caspasas, se produce por diferentes mecanismos en los que participan varios complejos moleculares. Un exceso o una inhibicin de la apoptosis es de gran relevancia en la patogenia de un nmero creciente de enfermedades. Podemos destacar el cncer, malformaciones, trastornos metablicos, neuropatas, lesiones miocrdicas y trastornos del sistema inmunitario. El cncer es una enfermedad que a menudo se caracteriza por una inhibicin del proceso apopttico. Las clulas cancerosas suelen tener cierto tipo de mutaciones que les permiten eludir las seales celulares de regulacin de su crecimiento y proliferacin. En circunstancias normales, las clulas daadas se someten naturalmente a la apoptosis, a diferencia de las clulas cancerosas, cuyas mutaciones pueden haber ocurrido en los lugares que controlan este proceso. En estos casos no hay control de la proliferacin celular y en consecuencia, la enfermedad puede progresar a un tumor. Entender cmo se regula la apoptosis en procesos tumorales es de gran inters en el desarrollo de tratamientos contra esta enfermedad. La inhibicin de la apoptosis desempea un papel importante en la progresin de muchas enfermedades autoinmunes. Por ejemplo, en la artritis reumatoide una excesiva proliferacin de clulas sinoviales puede ser debida en parte a la resistencia de estas clulas a los estmulos apoptticos. En otros casos, la falta de regulacin de la apoptosis de los linfocitos T puede originar clulas auto-reactivas que al entrar en la circulacin sangunea contribuyen a la aparicin de enfermedades autoinmunes. Hay otras enfermedades relacionadas con una exacerbacin del proceso apopttico. Por ejemplo, las enfermedades neurodegenerativas como el Parkinson o el Alzheimer, la esclerosis lateral amiotrfica, retinitis pigmentosa, degeneracin cerebelosa son procesos morbosos donde un exceso de apoptosis est relacionado con la prdida progresiva de neuronas. La apoptosis tambin es importante para el desarrollo normal de la placenta. En el trofoblasto las clulas de la placenta invaden el entorno uterino con el fin de remodelar los vasos sanguneos maternos y ayudar a establecer y mantener la gestacin. Para lograr este objetivo es necesario un control estricto sobre la proliferacin celular y la apoptosis. En algunos casos este proceso puede verse comprometido y un exceso de apoptosis de las clulas de trofoblasto puede estar implicado en ciertas complicaciones de la gestacin como la preeclampsia. Se abordar este tema desde las bases moleculares que inician, regulan y desencadenan el proceso apopttico, hasta las implicaciones clnicas actuales y su tratamiento. Mesa redonda de Toxicologa Veterinaria La Veterinaria y la Toxicologa: Los ltimos episodios de interaccin Modera: Antonio Juan Garca Fernndez P.17.- RIESGO DE INTOXICACIONES ACCIDENTALES Y SECUNDARIAS EN LA APLICACIN DE RODENTICIDAS Mateo, R Instituto de Investigacin en Recursos Cinegticos, IREC (CSICUCLM-JCCM), Ronda de Toledo s/n, 13071 Ciudad Real. La lucha contra roedores que causan plagas con grave impacto sobre la produccin agrcola y son portadores de zoonosis experiment un importante avance con la aparicin de los rodenticidas anticoagulantes antagonistas de la vitamina K. Debido a su elevada toxicidad y su efecto letal ligeramente diferido con respecto de la ingestin del cebo envenenado, las cumarinas e indandionas anticoagulantes han tenido un mayor xito que otros plaguicidas frente a los roedores. No obstante, la eficacia de dichos compuestos estaba condicionada por una exposicin repetida a los cebos envenenados por parte de los animales. Con la aparicin de las cumarinas de segunda generacin, de todava menor DL50 y mayor persistencia en el organismo, este inconveniente era solucionado ya que la exposicin a un nico cebo resultaba suficiente para matar al roedor. Son precisamente todas estas caractersticas las que hacen a los rodenticidas anticoagulantes compuestos susceptibles de producir intoxicaciones accidentales en especies no diana e incluso intoxicaciones secundarias en depredadores. La forma de aplicacin de los cebos envenenados es un aspecto muy importante para evitar intoxicaciones en especies no diana. Al tratarse el cebo de un alimento potencial para especies granvoras, la ingestin del rodenticida se puede dar de forma repetida hasta producir la muerte del animal, independientemente de si se trata de compuestos de primera o segunda generacin. Por lo tanto, los tratamientos a gran escala deberan llevarse a cabo asegurando que el cebo solo es accesible para los roedores. El otro punto importante en la toxicidad de los rodenticidas es su capacidad acumulativa en el hgado de los animales que lo ingieren, que resulta ser mucho mayor para las cumarinas de segunda generacin que para los otros anticoagulantes. Estas cumarinas de segunda generacin son hoy en da detectables en el hgado de un alto porcentaje de depredadores, asemejndose la problemtica a la iniciada dcadas atrs con los plaguicidas organoclorados. Los niveles de cumarinas acumuladas en el hgado de dichos depredadores pueden alcanzar concentraciones letales y conducir a la aparicin de hemorragias, pero todava se sabe muy poco de los efectos subletales que pueden tener estos compuestos a bajos niveles de exposicin. El grado de persistencia en el organismo y la posibilidad de producir intoxicaciones en especies no diana (tanto accidentales como secundarias) debe ser tenido en cuenta para la regulacin de los formulados y aplicaciones de rodenticidas y otros plaguicidas. Palabras clave: Rodenticida, Fauna silvestre, Bioaccumulacin, Envenenamiento, Reduccin de riesgo. P.18.- DICLOFENAC'S ROLE IN DRIVING RAPID VULTURE DECLINE ACROSS THE INDIAN SUBCONTINENT Taggart, MA University of the Highlands and Islands, Environmental Research Institute, Castle Street, Thurso, Caithness, Scotland, KW14 7JD, UK. Diclofenac, an NSAID or non-steroidal anti-inflammatory drug, is now recognised as the major driving force behind rapid vulture declines observed across the Indian sub-continent over the last 20 years.1-3 Old world vulture populations (specifically Gyps genus) have declined at virtually unprecedented rates during this period. For example, Gyps bengalensis (whiterumped vulture), once considered possibly the most abundant large bird of prey in the world (in 1985),4 declined by >99.9% across the Indian sub-continent between 1992 and 2007 at a mean annual decline rate of 43.9% during 2000-2007.5 As a result, all three endemic Indian Gyps species are now listed as Critically Endangered by the IUCN.6 In 2004, diclofenac was identified as the toxicant likely to be
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa driving these declines,1 and hence in 2006, the Governments of India, Pakistan and Nepal acted to ban its veterinary use. Up until this point, around 1:10 ungulate carcasses available to vultures in India contained detectable levels of diclofenac,7,8 whilst only 1:130 to 1:760 need contain a lethal dose in order to cause the decline rates observed.9 Unfortunately, one to two years later, in 2007-2008, approximately 1:20 carcasses still contained the drug. Likewise, ketoprofen (another NSAID), is now known to cause the same toxic effects in vultures10,11 and is also in use within the region. A range of other NSAIDs may also pose a risk,12 and other species (beyond the three endemic Indian Gyps) may well be susceptible.13,14 A vulture safe NSAID, meloxicam, has now been identified,15,16 but despite Government action to prevent veterinary diclofenac use across the Indian sub-continent, human formulations remain widely available and these continue to be used on livestock. This case has again highlighted a lack of knowledge and risk predictability regarding the potential effects that pharmaceuticals (as recognised emerging contaminants) may have on higher trophic level wildlife. Apart from diclofenac and ethinylestradiol (a synthetic estrogen in human pharmaceuticals), there still remains very limited environmentally relevant ecotoxicological information regarding a vast array of biologically active veterinary/human pharmaceuticals. A number of recent field studies have suggested that some other pharmaceuticals (antibiotics, other NSAIDs, estrogen mimics)1719 may also be causing deleterious effects in wild birds, however, the significance of such data, especially at the population level, still remains to be fully elucidated. (1). Oaks et al., 2004. Nature 427, 630633. (2). Shultz et al., 2004. P. Roy. Soc. Lond. B Bio. 271, S458S460. (3). Cuthbert et al., 2009. Ind. J. Vet. Med. 29, 80-85. (4). Houston. In: Newton et al., 1985. Conservation Studies on Raptors, 465-466. (5). Prakash et al., 2007. J. Bombay Nat. Hist. Soc. 104, 129135. (6). IUCN Red List of Threatened Species, 2010. (7). Taggart et al., 2007. Environ. Int. 33, 759765. (8). Taggart et al., 2009. Environ. Sci. Technol. 43, 4561-4566. (9). Green et al., 2004. J. Appl. Ecol. 41, 793-800. (10). Naidoo et al., 2010. Biol. Lett. 6, 339-341. (11). Naidoo et al., 2010. Arch. Toxicol. 84, 761-766. (12). Cuthbert et al., 2007. Biol. Lett. 3, 90-93. (13). Das et al., 2011. Bird Conserv. Int. 21, 72-75. (14). Naidoo et al., 2009. Regul. Toxicol. Pharm. 53, 205-208. (15). Swarup et al., 2007. Animal Conserv. 10, 192-198. (16). Swan et al., 2006. PLoS Biol. 4, 395-402. (17). Markman et al., 2008. PLoS ONE 3, e1674. (18). Blanco et al., 2009. Environ Res. 109, 405. (19). Blanco and Lemus, 2010. PLoS ONE 5, e14163. Key words: NSAID, Vultures, India, Veterinary pharmaceuticals, Drug residues. Simposio de Toxicologa Laboral Biomonitorizacin en Toxicologa Laboral Modera: Fernando Gil, Universidad de Granada P. 1 9 . - D E S A R R O L L O Y A P L I C A C I N D E BIOMARCADORES EN TOXICOLOGA OCUPACIONAL Gil Hernndez, F Departamento de Medicina Legal, Toxicologa y Psiquiatra. Universidad de Granada. La evaluacin de la exposicin a agentes qumicos en el medio laboral puede abordarse desde una doble perspectiva: la evaluacin ambiental y la biolgica. La primera, parcela del mximo inters en Higiene Industrial, persigue el establecimiento de niveles de referencia en el ambiente laboral con la finalidad de adoptar unos criterios de seguridad; stos se basan en lmites tolerables de exposicin que contemplan mayoritariamente la exposicin por va respiratoria, y en ocasiones, por va drmica, tratando de adecuarse a la media de la poblacin trabajadora, lo que indudablemente no se ajusta a la realidad ni sera un concepto fcil de admitir en Toxicologa. Por el contrario, la evaluacin biolgica, en ntima relacin con la vigilancia de la salud de los trabajadores, persigue el control individualizado de la exposicin en cada trabajador. De este modo, el empleo de biomarcadores en la evaluacin del riesgo txico a nivel ocupacional ha aumentado de manera notable en las ltimas dcadas y muy especialmente en los ltimos aos. La relacin existente entre los niveles de compuestos qumicos en el organismo y la respuesta txica que stos pueden originar resulta extraordinariamente compleja y depende de numerosos factores incluyendo aspectos toxicocinticos, genticos, etc La biomonitorizacin permite la evaluacin de la interaccin potencial y el impacto de xenobiticos sobre organismos vivos. El concepto de biomarcador fue inicialmente definido como la concentracin de txico o sus metabolitos en determinadas muestras biolgicas. No obstante, este concepto se ha ampliado de forma notable incluyendo aquellos cambios resultantes de la interaccin entre dichos compuestos y sus dianas celulares o moleculares as como aquellos polimorfismos de enzimas genticamente determinados que estn implicados en las fases I y II del metabolismo; stos seran los responsables de la diferente susceptibilidad de los individuos a los agentes qumicos. Quizs el problema fundamental surge de la necesidad de hallar un biomarcador ideal donde el concepto de especificidad tan slo se cumple en algunos de ellos. Se abordar igualmente el estudio de las muestras que suelen emplearse en Toxicologa Industrial y cuales, en funcin de los estudios realizados, podran suponer alternativas (saliva o el pelo) a las clsicas (sangre y orina). Asimismo se expondrn aquellos biomarcadores clsicos de exposicin, efecto y susceptibilidad y su utilidad en Toxicologa Ocupacional. Tendrn especial consideracin los nuevos biomarcadores de nefrotoxicidad, la protena de las clulas de Clara como marcador de toxicidad pulmonar, los neuroanticuerpos como biomarcadores de dao neuroptico, los biomarcadores de toxicidad reproductiva, sobre el ADN, de expresin gnica, de dao oxidativo, etc Por todo lo expuesto, la seleccin de adecuados biomarcadores es de suma importancia ya que permitir precisar la evaluacin del riesgo en individuos o subgrupos de poblacin ocupacionalmente expuestos. Adems, la incursin de las nuevas tecnologas micas (genmica, protemica y metabonmica) promete el descubrimiento y desarrollo de nuevos biomarcadores de integridad celular y tisular. Sin embargo, los biomarcadores deberan ser fcilmente cuantificables a bajas concentraciones en tejidos accesibles (sangre, orina o muestras biolgicas alternativas). Adems, los biomarcadores deberan ser indicadores especficos y sensibles de toxicidad sobre tejidos u rganos diana y marcadores de alteraciones subclnicas y, por tanto, tiles en estrategias preventivas. En el futuro ser preciso desarrollar o validar mtodos analticos de evaluacin de los nuevos biomarcadores. Palabras clave: Biomonitorizacin, Exposicin, Efectos txicos, Susceptibilidad individual, Evaluacin del riesgo. P.20.- EXPOSOME: UNA PODEROSA HERRAMIENTA PARA EVALUAR LA EXPOSICIN LABORAL A TXICOS Camacho, T. Laboratorio Lema & Bandn, Vigo. Desde el descubrimiento de los rayos X en 1895 los conocimientos sobre sus efectos han ido avanzando, no siempre sin episodios desgraciados. Estas experiencias negativas han ido creando en el subconsciente colectivo una idea deformada sobre
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa la radiacin y la radioactividad, que se perciben como intrnsecamente peligrosas, con independencia del tipo de radiacin, de la cantidad recibida o del motivo por el que se reciba. Adems, a nivel popular, suele desconocerse qu radiacin y radiactividad forman parte de la Naturaleza, siendo vistas en general como un nefasto invento del Hombre. La toxicologa ocupacional incluye tres mbitos de trabajo perfectamente definidos; el biolgico, el qumico y el radiolgico. Esta ponencia har especial hincapi en la radiacin ionizante desde el punto de vista laboral y su repercusin en el trabajador, analizando un nuevo concepto en medicina laboral, exposome, cuya finalidad es ayudar en el asesoramiento en materia de proteccin, en la evaluacin del riesgo, en la respuesta y gestin de los trabajadores tras un incidente en el trabajo y, finalmente, en la descripcin de los nuevos ensayos analticos para detectar la contaminacin interna/externa con material radiolgico. Palabras clave: Exposome, Toxicologa radiolgica, Radioistopos. Taller de Docencia en Toxicologa Modera: M. Jos Ruiz, Universidad de Valencia P.21.- ENSEANZA DE POSTGRADO EN TOXICOLOGA AMBIENTAL Gonzlez-Muoz, MJ rea de Toxicologa, Universidad de Alcal. El tercer ciclo comprende los cursos de doctorado, la formacin de especialistas y la formacin del personal docente e investigacin. La creciente preocupacin poltica, econmica y social sobre el respeto al medio ambiente hace necesario abordar el estudio multidisciplinar de los problemas ambientales y el anlisis de forma cuantitativa de dichos problemas, sus causas, las bases cientficas necesarias para entenderlos y el papel que desempean los cientficos e ingenieros en su resolucin. La toxicologa constituye una disciplina fundamental en este contexto. No obstante, son escasas las actividades de formacin en el rea de la Toxicologa Ambiental. Dichas actividades formativas se imparten en el formato de Masteres tanto oficiales como de entidades privadas. El objetivo general es ofrecer conocimientos especializados de los procesos contaminantes tanto en medio ambiente como en los seres vivos que lo habitan para, de esta forma, poder dar respuestas a las demandas que la sociedad plantea. Se concluye remarcando la escasa oferta de cursos de especializacin en esta rama de la Toxicologa y la necesidad de organizar e impartir ms cursos, dada la demanda creciente de la formacin especializada en temas medioambientales. P.22.- FORMACIN DE POSTGRADO EN SEGURIDAD ALIMENTARIA Camen, AM rea de Toxicologa. Dpto. Nutricin y Bromatologa, Toxicologa y Medicina Legal. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. Estamos asistiendo a un incremento importante y rpido en la oferta de Ttulos de Master Oficiales y de Mster Propios de Universidad, de carcter profesionalizante, en Seguridad Alimentaria, en la Universidad Espaola, con el objeto de dar respuesta a esta necesidad de profesionales que demanda la sociedad. Es en el Postgrado, donde se forman verdaderamente a los futuros profesionales especialistas en Seguridad Alimentaria, que puedan incorporarse en los Departamentos de Calidad y Seguridad de las empresas agroalimentarias, en la Administracin a diferentes niveles, y en Asesoras y Consultoras tanto a nivel privado como en empresas o cooperativas de los diferentes sectores productivos. La finalidad fundamental es formar profesionales: 1) Que sean capaces de realizar una evaluacin racional de los problemas que se plantean en el mbito de la Seguridad Alimentaria 2) Competentes en tareas de prevencin, deteccin, evaluacin, gestin, comunicacin y toma de decisiones relacionadas con la Seguridad Alimentaria, en definitiva en el Anlisis de riesgos. En la presente ponencia, se presentar los contenidos idneos que debe cubrir una adecuada formacin en Seguridad Alimentaria, segn la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA). Segn EFSA, las reas especficas de formacin en la evaluacin de Riesgos en Seguridad Alimentaria son: 1. Riesgos microbiolgicos; 2. Riesgos qumicos (aditivos alimentos/piensos, contaminantes, pesticidas); 3. Plagas; 4. Evaluaciones en el campo de la Nutricin, y 5. Evaluacin de Riesgos de Organismos genticamente modificados (OGM) y otras biotecnologas. Asimismo, se expondr una revisin de las posibilidades de Mster ofertados actualmente en nuestro pas. P.23.- LA DOCENCIA DE LA TOXICOLOGA EN EL MBITO CRIMINOLOGICO Repetto, G; Martnez Matilla, M Universidad Pablo de Olavide, de Sevilla. La criminologa es una ciencia de carcter multidisciplinar y trasversal con una alta demanda social y mltiples aplicaciones profesionales en el campo de lo privado y lo pblico. Se centra en los diversos aspectos que rodean al crimen, desde el perfil psicolgico del criminal a los aspectos sociales que lo rodean y condicionan, su prevencin y reinsercin, a los aspectos legales y jurdicos implicados en la persecucin y castigo del crimen y a su investigacin. Aborda temas como el delito, el delincuente, la poltica criminal, el control social y los procesos de criminalizacin, entre otros. Ya en el ao 1952, en la conferencia de Organizaciones Internacionales no gubernamentales interesadas en la prevencin del delito y en el tratamiento de los delincuentes, celebrada en Ginebra bajo los auspicios de las Naciones Unidas, se recomend que las universidades organizaran la enseanza de la Criminologa y de las materias criminolgicas, en funcin de las tradiciones, de las posibilidades y de las competencias locales, y que esa docencia fuera obligatoria para las personas dedicadas a la magistratura profesional, a las funciones judiciales y a los ejercicios clnicos. En un informe de 1961 de la Sociedad Internacional de Criminologa se dice que la enseanza de la Criminologa es esencialmente de naturaleza multidisciplinar, por lo que hay que organizarla en el seno de Institutos de Criminologa y no en facultades. El libro blanco del grado en Criminologa estim que en el curso 2004-2005 haba ms de 4000 personas cursando estudios propios de este tipo en las 19 universidades espaolas. Gracias a la demanda para que se oficializaran los estudios en criminologa, se promulga el Real Decreto 858/2003 de 4 de julio, que establece el ttulo universitario oficial de Licenciado en Criminologa. Se trata de una licenciatura de segundo ciclo a la que se puede acceder tras cursar algunos ttulos propios. A partir de ese momento se empieza a regularizar la situacin con la creacin de del ttulo de Grado en Criminologa y postgrados oficiales. Las salidas profesionales de la criminologa estn bastante establecidas, aunque el perfil vara segn el pas. Los criminlogos/as trabajan en una amplia variedad de agencias
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa pblicas judiciales, policiales, penitenciarias, de control de drogas, o de fronteras. Pero, adems, sobre todo en los pases anglosajones, tambin lo hacen en el sector privado en bancos y compaas de seguros, empresas privadas de seguridad, cadenas comerciales, o asociaciones sin nimo de lucro. Algunas de sus funciones son apoyar a las vctimas, investigar delitos, actuar de peritos judiciales, analizar datos para la polica, actuar como experto forense, colaborar en programas de reinsercin, investigar de fraudes, hacer de investigador privado, o investigar robos en comercios. En relacin con el ttulo de Grado en Criminologa, se imparte en 12 universidades espaolas, y est previsto se apruebe en otras. Aunque los programas son similares, puede destacarse que algunos grados inciden ms que otros en diferentes reas. Por ejemplo, el Plan de Estudios del Grado en Criminologa de la Universidad Pablo de Olavide, que consta de 240 Crditos ECTS, incide especialmente en las Ciencias Forenses e incluye en el tercer curso la asignatura cuatrimestral obligatoria "Toxicologa", de 6 crditos ECTS. Entre sus contenidos figuran los principios bsicos de Toxicologa, principales txicos y mecanismos de accin, antdotos, mtodos de deteccin de txicos en muestras biolgicas, dopaje, etc. Lgicamente debe contemplar contenidos de toxicologa forense, como conjunto de conocimientos aplicables a la resolucin de los problemas toxicolgicos que plantea el Derecho. Debe tener una concepcin moderna de la misma contemplando su divisin en toxicologa postmortem, drogas de abuso, toxicologa conductual y toxicologa ambiental. En relacin a los estudios de postgrado, actualmente se imparten 7 Msters oficiales en Criminologa en las Universidades espaolas, con diversos enfoques. Por ejemplo, el Mster Universitario en Criminologa y Ciencias Forenses, impartido por la Universidad Pablo de Olavide de Sevilla, tiene muy presentes los aspectos de ciencias forenses, en los que oferta hasta 18 ECTS, con contenidos de toxicologa tanto en un mdulo obligatorio de laboratorio criminalstico, de 3 crditos ECTS, como otro de igual nmero de crditos, en el itinerario en ciencias forenses, especfico de anlisis qumico toxicolgico. En cualquier caso, no debe olvidarse el informe de la Academia Nacional de las Ciencias Norteamericana (NAS) Reforzando la Ciencia Forense en los Estados Unidos: un paso adelante, que indica que de las diversas facetas de la insuficiencia de recursos de los laboratorios forenses, la ms preocupante es la falta de conocimientos. Palabras clave: Docencia, Toxicologa, Criminologa, Ciencias forenses. P.24.- LA TOXICOLOGA EN LOS ESTUDIOS DE POSGRADO PARA EGRESADOS VETERINARIOS Garca-Fernndez, AJ. rea de Toxicologa. Facultad de Veterinaria. Universidad de Murcia. ajgf@um.es Los egresados veterinarios tienen diversas opciones para continuar su formacin a travs de msteres oficiales de Universidad. Algunas de esas opciones estn dentro del mbito docente de las Facultades de Veterinaria, mientras que otras se ofertan desde otros centros, tales como Facultades de Farmacia, Medicina, Qumica, Escuelas de Agrnomos, etc. En esta presentacin solo se abordar la oferta de formacin en posgrado que se ofrece en las Facultades de Veterinaria y que va dirigida exclusivamente, o en mayor medida, a los egresados veterinarios. Podemos decir que no hay uniformidad en las ofertas de las distintas universidades espaolas, si bien es cierto que la mayora se decanta por ofertar msteres de investigacin o de iniciacin a la investigacin muy amplios y generales que abarcan, prcticamente, la mayora de las materias propias de la ciencia veterinaria. En algunas facultades ofrecen msteres en sanidad animal y seguridad alimentaria, y en otras incluyen tambin especializacin en produccin y mejora gentica. A pesar de ello, la participacin de los docentes de Toxicologa y la inclusin de materias propias de Toxicologa es escasa o nula en algunos msteres. Por el contrario hay Facultades donde la participacin de la Toxicologa es concreta, como por ejemplo Madrid, Len, Crdoba o Murcia. As pues, la aportacin de la Toxicologa a los msteres de Veterinaria es desigual entre universidades, desde la no participacin en ningn mster especfico para veterinarios hasta un mximo de participacin en docencia de 12 crditos. A la vista de lo expuesto, parece lgico y deseable que, desde este foro, se reflexione y debata sobre la necesidad de participar ms activamente en la formacin de egresados veterinarios. En la formacin y especializacin de veterinarios es fundamental ahondar en materias tales como los residuos de frmacos veterinarios y piensos medicamentosos en los alimentos de origen animal, la evaluacin de riesgos alimentarios, los aspectos clnicos y forenses de los venenos, la inocuidad de frmacos, la disminucin de las producciones animales asociadas a ingestin de sustancias qumicas, etc. Para ello, se debe incentivar al profesorado de Toxicologa para que proponga en sus respectivas Facultades cursos en algunas de las temticas citadas. Debemos entender, en todo caso, que la propia dinmica investigadora de cada grupo en cada Facultad condiciona tambin la oferta, as por ejemplo, en la Universidad de Murcia se ofrece un mster especfico de Gestin de la Fauna silvestre que incluye dos materias de Toxicologa, una obligatoria y otra optativa. P.25.- LA DOCENCIA DE LA TOXICOLOGA EN CIENCIAS BIOMDICAS Y DE LA SALUD EN ESTUDIOS DE POSTGRADO Ruiz, MJ Laboratorio de Toxicologa, Facultad de Farmacia, Universidad de Valencia, Av. Vicent Andrs Estells s/n, 46100, Burjasssot, Valencia, Espaa. M.Jose.Ruiz@uv.es La progresiva armonizacin de los estudios universitarios exigida por el proceso de construccin del Espacio Europeo de Educacin Superior, iniciado en 1999 con la Declaracin de Bolonia ha dotado de una dimensin y de una agilidad sin precedentes al proceso de cambio emprendido por las universidades europeas. El RD 1393/2007 fija las Directrices condiciones y procedimientos de verificacin y acreditacin para la obtencin de los ttulos de Master Universitario y Doctorado. Con esta Directriz, se inicia un proceso de transformacin de los estudios de Postgrado que incluye los ttulos de Master Oficial Universitario, Estudios de Doctorado, Mster Erasmus Mundus, Msteres, Diplomas y Certificados Propios de la Universidad y Cursos de Especializacin Universitaria. Los estudios de postgrado pretenden ser una respuesta formativa a la demanda de profesionales. En el rea de la Biomedicina y Salud, estos estudios ofrecen una slida formacin multidisciplinar que cuenta con la colaboracin de expertos de diferentes mbitos profesionales (mdicos, farmacuticos, bilogos, tcnicos, etc.). En esta rea de formacin, la Toxicologa Laboral forma parte de las materias de estudios de postgrado, incluidos en Masteres en Salud Laboral, Ciencias Biomdicas y de Salud, Prevencin de Riesgos Laborales, etc. con una carga docente que vara de 2 a 10 crditos. Por otra parte, hay que destacar que, en ninguno de los estudios de postgrado que se imparten en las Universidades Espaolas, (incluyendo tanto los adaptados como los existentes a la entrada del Plan de Bolonia) se incluyen mdulos ni actividades formativas de Toxicologa Clnica. Palabras clave: Toxicologa laboral, Estudios postgrado.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa COMUNICACIONES ORALES SEGURIDAD ALIMENTARIA: COMUNICACIONES ORALES C.1.- PLOMO Y CADMIO EN VARIEDADES DE T CONSUMIDAS EN LA ISLA DE TENERIFE Prez, B; Rubio, C; Luis, G; Gutirrez AJ; Caballero, JM; Hardisson, A rea de Toxicologa. Universidad de La Laguna. Introduccin: El t es la segunda bebida ms consumida en el mundo. La planta del t (Camellia sinensis), de origen asitico, fue introducida en Europa en el siglo XVII y desde entonces ha sido consumida como tnico y estimulante. En la actualidad, las principales variedades consumidas de t son: t negro (fermentado) y t verde (sin fermentar), que se diferencian en su recoleccin y procesado. El plomo (Pb) y el cadmio (Cd) son dos metales pesados clasificados como txicos. El plomo se caracteriza por ocasionar efectos txicos a nivel gastrointestinal, renal y sobre el sistema nervioso, as como por interferir con sistemas enzimticos implicados en la sntesis del grupo hemo. El cadmio, en exposiciones crnicas presenta manifestaciones multisistmicas entre las que destacan la nefropata cdmica y la disrupcin endocrina. Objetivos: determinar el contenido de Pb y Cd presente en distintas variedades de t (negro y verde) de consumo en la isla de Tenerife y estimar la contribucin a la ingesta provisional tolerable (PTWI) fijada para el Pb y Cd que supone el consumo de estas diferentes infusiones de t. Material y mtodo: Se analizaron un total de 30 muestras de distintas variedades de t comercializadas en la Isla de Tenerife. Tras incineracin de la muestra en un horno mufla a 450C durante 50 h, el contenido de Pb y Cd se determin por Espectrofotometra de Absorcin Atmica con cmara de grafito (EAA). Resultados: Los niveles medios de Pb obtenidos fueron de 0,0380,005 mg/Kg para t verde y 0,0410,019 mg/Kg para t negro. En cuanto a los niveles medios de Cd se obtuvieron 0,0030,001 mg/Kg para t verde y 0,0020,001 mg/Kg para t negro. Palabras clave: Plomo, Cadmio, T. C.2.-RESIDUOS DE ANTIMICROBIANOS EN DORADAS Y TIEMPOS DE RETIRADA COMO MEDIDA DE SEGURIDAD ALIMENTARIA Ares, I; Martnez, MA; Castellano, V; Martnez, M; Ramos, E; Romero, A; Martnez-Larraaga, MR; Anadn, A Departamento de Toxicologa y Farmacologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, 28040 Madrid. La industria de la acuicultura intensiva est creciendo de forma importante en los ltimos aos, se basa en la cra de especies de peces de consumo alimentadas con dietas artificiales en todo el ciclo de vida en sistemas-granja con recirculacin de agua. Las enfermedades que pueden presentarse en las diferentes especies de peces implican el uso de medicamentos. Entre los agentes teraputicos, los frmacos antimicrobianos se utilizan mucho por la frecuente incidencia de enfermedades bacterianas, en ausencia de vacunas comerciales. El tratamiento con agentes antimicrobianos en muchas ocasiones se realiza por extrapolaciones de datos farmacocinticos y farmacodinmicos de otras especies de animales, por lo que el uso de frmacos antimicrobianos en acuicultura intensiva puede representar un grave riesgo para la salud pblica y medio ambiente,
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principalmente por la aparicin de resistencias. Organizaciones Internacionales como Codex, FAO, OMS y UE han implantado guas de seguridad alimentaria que incluyen la IDA y los LMRs para aquellos antimicrobianos autorizados en acuicultura. El presente trabajo tiene como objetivo (i) estudiar la deplecin de residuos de dos frmacos antimicrobianos oxitetraciclina (OTC) tras dosis oral de 30 mg/Kg, 5 das, y flumequina (FLU) tras dosis oral de 12 mg/Kg, 5 das, en doradas (Sparus aurata, L.1758), utilizando tcnicas analticas por HPLC validadas, y (ii) determinar el Tiempo de Retirada (WT) siguiendo las directrices de la EMA, para asegurar el cumplimiento de los LMR legislados. Los resultados obtenidos concluyen que cuando se utilice OTC y/o FLU en doradas, con el rgimen de dosificacin descrito, se debe respetar un WT de 5 das para OTC y de 2 das para FLU, para una temperatura del agua de 18C, como medida de seguridad para el consumidor. Financiado por los Proyectos Consolider-Ingenio 2010 Ref. CSD/2007/00063 y Ref. n S2009/AGR-1469, MEC, y Ref. GR58/08 UCM-BSCH, Madrid. Palabras clave: Oxitetraciclina, Flumequina, Residuos, Tiempo de retirada, Doradas. C.3.-COMPARACIN DE MTODOS DE PREPARACIN DE MUESTRA PARA EL ANLISIS DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS EN POLEN Berrada, H; Blesa, J; Molt JC; Font, G. Laboratorio de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universitat de Valncia. Avda. Vicent Andrs Estelles s/n, 46100 Burjassot, Valencia houda.berrada@uv.es Se describe la comparacin de diferentes versiones de mtodos QuEChERS (rpido, fcil, barato, eficaz, robusto y seguro), para la determinacin de residuos de 20 plaguicidas de diferentes familias en polen, por cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas en tandem (GC-MS/MS). Las tres versiones ensayadas se basan en un mtodo original sin tampn, y dos versiones estandarizadas para anlisis de residuos de plaguicidas, el Mtodo Oficial AOAC 2007.01 que emplea acetato, y el del Comit Europeo de Normalizacin (CEN) Mtodo estndar EN 15.662, que utiliza tampn citrato. Por razones econmicas, se estudi la sustitucin del acetonitrilo por acetato de etilo en la versin con tampn de acetato, al observar que genera extractos menos limpios y menores recuperaciones, se descart su empleo. La exactitud de los mtodos de extraccin se estudia a niveles de adicin entre 50 y 1000 ng/g de polen, en general las recuperaciones son superiores a 72% con RSD <14% utilizando las 3 versiones. Tambin se comportan de forma semejante en cuanto a los efectos de matriz en la cuantificacin y el ruido qumico que aparece como fondo en los cromatogramas. Para la determinacin se utiliza el triple cuadrupolo Agilent 7000 A GC/MS/MS con un inyector multimodo. Se optimiza la energa de colisin (CE), que permite fragmentar los iones obtenidos en la fuente de ionizacin, as como seleccionar los fragmentos caractersticos de cada plaguicida y las diferentes relaciones de intensidad entre ellos. Este es el modo de adquisicin ms utilizado en los triple cuadrupolos (MRM, Mltiple Reaction Monitoring), como establece la Directiva europea (SANCO) para la confirmacin de los compuestos mediante la espectrometra de masas. La linealidad y los lmites de cuantificacin que proporcionan las tres variantes, permiten alcanzar los Lmites Mximos de Residuos legislados para los plaguicidas seleccionados. Palabras clave: Plaguicidas, Polen, GC-MS/MS, QuEChERS.
XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.4.-DETERMINACIN DE MICOTOXINAS EMERGENTES DE Fusarium EN CEREALES POR CROMATOGRAFA LQUIDA-ESPECTROMETRA DE MASAS EN TANDEM CON TRIPLE CUADRUPOLO Ferrer, E; Font, G; Maes, J; Serrano, AB Laboratori de Bromatologia i Toxicologia. Facultat de Farmcia. Universitat de Valncia. Av Vicent Andrs Estells s/n 46100 Burjassot (Spain) Las micotoxinas son metabolitos secundarios producidos por hongos filamentosos, principalmente de los gneros Aspergillus spp., Penicillium spp. y Fusarium spp. Son contaminantes de alimentos, principalmente de cereales como trigo, cebada, maz y arroz. Las denominadas micotoxinas emergentes de Fusarium spp. [eniatinas (A, A1, B y B1), beauvericina y fusaproliferina] son objeto de estudio en la actualidad debido a sus efectos txicos, entre los que se incluyen inhibicin enzimtica, citotoxicidad y teratogenicidad (Jestoi, 2008). El objeto del presente trabajo es la puesta a punto de un mtodo rpido, sensible y reproducible para la determinacin de eniatinas A, A1, B y B1 (ENA, ENA1, ENB, y EN B1, respectivamente), beauvericina (BEA) y fusaproliferina (FUS) en cereales utilizando cromatografa lquida-espectrometra de masas (LCMS/MS) con triple cuadrupolo (QqQ). Se estudian diferentes procesos de extraccin de las muestras: ultrasonidos, microondas (ambas con purificacin posterior con C18) y Ultra-Turrax. Se optimizan el tiempo y la temperatura de extraccin, as como diferentes disolventes como acetona, hexano, metanol, acetonitrilo y mezclas de stos, obteniendo los mejores resultados para la extraccin por Ultra-Turrax con acetonitrilo durante tres minutos. La determinacin cromatogrfica se realiza en fase reversa con columna C18 y fase mvil metanol (20mM formiato de amonio)/ acetonitrilo. El mtodo propuesto por LC-ESI-MS/MS con triple cuadrupolo (QqQ) se valida de acuerdo a los criterios de la Comisin Europea 2002/657/CE. Se estudia el efecto de la matriz, obtenindose interferencia entre 7-35%, por lo que la linealidad se determina con rectas de calibrado preparadas a partir de blancos de muestra. Los parmetros analticos obtenidos: linealidad (r2 >0,998), calculada en un rango de 0.05-500 g Kg- 1; lmites de cuantificacin (LOQs) que oscilan entre 0,05 g Kg- 1 (ENA, ENB, ENB1 y BEA) y 0,1 g Kg- 1 (ENA1 y FUS) y recuperaciones (obtenidas con blancos de muestra adicionados de patrn a concentraciones correspondientes a LOQs y 100 LOQs) que oscilan entre 87-120%, con desviaciones estndar (RSD) < 12%, ponen de manifiesto la bondad del mtodo analtico propuesto. [1] Jestoi. Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 2008, 48, 21-49. Este trabajo forma parte de un proyecto de investigacin financiado por el Ministerio de Ciencia e Innovacin (AGL2010/17024/ALI). Palabras clave: Micotoxinas, Cereales, Espectrometra de masas en tndem. C.5.-BOTULISMO INTESTINAL EN LACTANTES DE ARGENTINA 1992-2010 Garca, S; Pauca, A; Yanicelli, M; de Pietri, D; Martin M; Antolini L Programa Nacional de Prevencin y Control de las Intoxicaciones, Ministerio de Salud de la Nacin. Av. 9 de julio 1925, CABA, Argentina. precotox@msal.gov.ar El botulismo intestinal (antes llamado botulismo del lactante) es actualmente la forma ms frecuente de la intoxicacin por Clostridium botulinum. Con severidad variable, desde hipotona leve, hasta parlisis flccida con requerimiento de asistencia respiratoria mecnica, ha sido asociado al sndrome de muerte sbita. Casi todos los casos reportados en Amrica del Sur proceden de Argentina. En nuestros suelos se han identificado serotipos A, B, E, F y G. Sin embargo, en mas del 99% de las muestras biolgicas se hall el serotipo A. Pueden encontrarse en el polvo ambiental, en la ropa, en la miel y en algunas hierbas medicinales. Si bien el botulismo alimentario era una enfermedad incorporada al Rgimen Legal de las Enfermedades de Notificacin Obligatoria establecido por Ley Nacional 15465 (ao 1960), el botulismo del lactante recin fue considerado evento de notificacin obligatoria en 1999 coincidentemente con la reglamentacin del etiquetado de miel que indicaba no administrar a menores de un ao. Se analizan 331 casos registrados entre los aos 1992 y 2010, 96 procedentes de anlisis de laboratorios entre 1992 y 1997, y 227 notificados al Sistema Nacional de Vigilancia de la Salud entre los aos 1999 y 2010. La media de edad fue de 3,5 meses (rango 15 das a 13 meses). No se observ un patrn estacional. La incidencia calculada en Argentina es de 4 por cada 100.000 nacidos vivos, ms del doble de la reportada por Estados Unidos (1,9 por cada 100.000 nacidos vivos). Para la provincia de Mendoza, la incidencia es de 38 por cada 100.000 nacidos vivos. El anlisis de los datos de las notificaciones no muestra una reduccin en el nmero de casos notificados que permita inferir que haya habido algn impacto de la medida que recomend restringir la administracin de miel a los lactantes. TOXICOLOGA FORENSE Y TCNICAS ANALTICAS EN TOXICOLOGA: COMUNICACIONES ORALES C.6.-LA GARANTA DE CALIDAD EN LOS LABORATORIOS FORENSES Contreras MT; Izquierdo R Instituto Nacional de Toxicologia y Ciencias Forenses Departamento de Barcelona La calidad de los resultados es un objetivo fundamental en los Laboratorios Forenses, porque estos son utilizados para dictar Sentencias Judiciales. El laboratorio necesita operar bajo un Sistema de Calidad que incluya una extensa documentacin de sus actividades. El manual de calidad, los procedimientos de gestin de la calidad, los procedimientos tcnicos, los procedimientos de calibracin, etc., son documentos internos que sustentan el sistema de calidad implantado en el laboratorio. La garanta de calidad, comprende todas aquellas actividades de un laboratorio para conseguir y demostrar la calidad en ste. Estas actividades comprenden la evaluacin, el control de calidad y las correcciones internas. Mediante las actividades de evaluacin de la calidad se supervisan las actividades de control de calidad, con el objetivo de asegurar que dichas actividades se realizan de forma adecuada y eficaz. Estos controles deben realizarse, siempre que sea posible, basados en criterios estadsticos, por lo que ser fundamental un cierto conocimiento de la estadstica para aplicarlos. La evaluacin de la calidad de los ensayos garantiza el mantenimiento de las condiciones de validacin. Otro punto importante es el del personal; Es necesario que est formado y cualificado para el trabajo que va a desempear. La necesidad de mejorar la calidad de las medidas, hace que se establezca en el laboratorio forense un Sistema de Calidad que Asegure la Calidad de los resultados. La mejora continua comprende las siguientes acciones: Planificar, Hacer, Verificar y Actuar. Conclusin: La Calidad nunca es un accidente, es siempre el resultado de una gran intencin, de un gran esfuerzo de una direccin comprometida y de una ejecucin hbil. Palabras clave: Sistema de calidad, Controles internos e interlaboratorios, Norma ISO 17025, Garanta de calidad.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.7.-EL PAPEL ACTUAL DE LA CROMATOGRAFA DE LQUIDOS ACOPLADA A LA ESPECTROMETRA DE MASAS EN TOXICOLOGA FORENSE de Castro Ros, A1,2; Concheiro Guisn, M1; Quintela Jorge, O3; Lendoiro Belo, E1; Cruz Landeira, A1; Lpez-Rivadulla, M1 1 Servicio de Toxicologa Forense, Instituto de Ciencias Forenses, Universidad de Santiago de Compostela. 2 Departamento de I+D. Cienytech S.L., Santiago de Compostela. 3 Departamento de Madrid, Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. La cromatografa de lquidos acoplada a la espectrometra de masas simple o en tandem (LC-MS, LC-MSMS) se ha convertido en los ltimos aos en una herramienta fundamental en los laboratorios de toxicologa forense. La LC-MS supone una superacin de la clsica cromatografa de gases acoplada a la espectrometra de masas (GC-MS) en el anlisis directo, sin necesidad de derivatizacin previa, de compuestos no voltiles, polares o termolbiles. Sin embargo, la LC-MS tambin presenta importantes limitaciones que merecen un punto de reflexin, como la pobre ionizacin de algunos analitos y el efecto de ciertos componentes de la matriz en dicha ionizacin o efecto matriz, as como la falta de reproducibilidad de las bibliotecas de compuestos desarrolladas hasta el momento. Este trabajo analiza los pros y los contras de los mtodos de cuantificacin desarrollados con esta tcnica, as como de los mtodos de cribado LC-MS basados en bsquedas espectrales en bibliotecas (general unknown) o en la monitorizacin de compuestos diana (target screening). Otros aspectos analizados son: El estudio de la validacin de los mtodos basados en LCMS, destacando especialmente el ensayo del efecto matriz, Los criterios establecidos para la correcta identificacin de los compuestos (relacin de iones), Posibles soluciones a los principales problemas planteados por esta tcnica. El presente trabajo analiza adems los diferentes tipos de interfases (ESI, APCI, MALDI) y de detectores (cuadrupolo, trampa de iones, tiempo de vuelo) ms comnmente empleados, indicando sus principales aplicaciones y limitaciones. Palabras clave: LC-MS(MS), Drogas, Validacin, Efecto matriz, Criterios identificacin. C.8.-ASPECTOS FORENSES DE LA INVESTIGACIN DE UNA INTOXICACIN ACCIDENTAL POR BROMURO DE METILO Carratala, F1; Burillo, L1; Bueno, H2; Garrido-Lestache E1 1 Institutuo de Medicina Legal de Valencia. 2 Instituto Nacional de Toxicologia. Departamento de Barcelona. Se describe la intervencin de las diversas Secciones del Instituto de Medicina Legal en la investigacin de una intoxicacin aguda por bromuro de metilo sobre dos hermanos, uno con resultado de muerte. La intoxicacin se produce por la exposicin al gas emanado de un tratamiento insecticida efectuado en su domicilio, concretamente en la habitacin contigua al dormitorio. La investigacin requiri identificacin del txico durante la inspeccin judicial de la escena y la realizacin de anlisis ambientales y sobre ambos afectados para confirmar la presencia del bromuro de metilo como agente causal. Caso I Varon de 27 aos. El paciente estuvo expuesto durante el periodo de descanso nocturno, manifestando crisis convulsivas generalizadas que motivaron su ingreso, para evolucionar desfavorablemente con distress respiratorio, neumonia y shock sptico, falleciendo cinco dias despus del ingreso. En los anlisis postmortem se obtuvieron niveles de in bromuro: sangre cardiaca 38 mg/L. El Paciente II, varn de 26 aos estuvo expuesto durante tres periodos nocturnos, aunque con diferente distribucin temporal, manifestando los primeros sntomas 48 horas despus del
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paciente I. La evolucin de este caso fue ms favorable pese a presentar inicialmente un cuadro sintomtico similar al fallecido, instaurndose tratamiento con hemodilisis ante la sospecha y posterior confirmacin del origen txico, con niveles de ion bromuro en sangre de 124 mg/L. El control evolutivo hasta la emisin del informe mdico forense de sanidad permite establecer unas secuelas neurolgicas graves que le incapacitan laboralmente. Llama la atencin la pervivencia de uno de los afectados pese al hallazgo de concentraciones bromuro muy superiores a las descritas como letales en la bibliografa. La intervencin y coordinacin de las diversas Secciones del Instituto de Medicina Legal permite el acceso a aspectos relevantes de la intoxicacin de inters forense lo que mejora el conocimiento y la interpretacin de las circunstancias del caso. Palabras clave: Intoxicacin accidental, Bromuro de metilo, Niveles txicos, Pervivencia, Secuelas neurolgicas. C.9.-SUMISIN QUMICA CON ESCOPOLAMINA? IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DEL LAVADO EXTERNO EN EL ANLISIS DE PELO Lendoiro Belo, E1; de Castro Ros, A1,2; Concheiro Guisn, M1; Quintela Jorge, O3; Lpez-Rivadulla, M1; Cruz Landeira, A1 1 Servicio de Toxicologa Forense, Instituto de Ciencias Forenses, Universidad de Santiago de Compostela. 2Departamento de I+D. Cienytech S.L., Santiago de Compostela. 3Departamento de Madrid, Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. En el presente trabajo se describe un posible caso de sumisin qumica como ejemplo para poner de manifiesto la importancia del estudio del lavado externo en el anlisis toxicolgico de la muestra de pelo. La supuesta vctima aleg haber sido intoxicada en repetidas ocasiones, probablemente con escopolamina, la ltima vez un mes antes de la solicitud del anlisis. Para el anlisis toxicolgico se recolect una muestra de cabello, que se dividi en 3 segmentos de 4-5 cm, a fin de estudiar cronolgicamente la posible exposicin al txico. Cada muestra (40-52 mg/segmento) se lav 2 veces con diclorometano (DCM), que fue posteriormente recolectado para su anlisis. A continuacin se cort el pelo, se aadi benzoilecgonina-d3 (BEd3), y se incub con tampn fosfato 0.01M pH 8.4 durante 12 h. El lquido resultante se extrajo con DCM: 2-propanol:n-heptano (50:17:33) y se analiz mediante LC-MSMS. La separacin cromatogrfica se realiz en una columna Atlantis C18 (2.1 x 50 mm, 3 m) (Waters Corp, Milford, MA, USA), empleando como fase mvil formiato amnico 10 mM con 0,1% cido frmico y acetonitrilo. El espectrmetro de masas de triple cuadrupolo oper en modo electrospray positivo, seleccionando las transiciones 304,3>138,2, 304,3>156,2 y 304,3>103,0 para la deteccin de escopolamina, y 293,2>171,2 para BE-d3. Solo se encontraron trazas de escopolamina (<LOQ) en el segmento de pelo ms prximo a la raz, sustancia que tambin fue detectada en el ltimo lavado del mismo segmento, y en una concentracin ms de cuarenta veces superior a la determinada en la matriz del pelo. Por tanto, la presencia en el lquido de lavado de niveles de escopolamina muy superiores a los determinados en la matriz interna del pelo nos permiti descartar la supuesta intoxicacin de la vctima, y concluir que la presencia de escopolamina en la muestra se debi a la contaminacin externa del pelo. Palabras clave: Sumisin qumica, Escopolamina, Anlisis de pelo, LC-MSMS. C . 1 0 . - D E T E R M I N A C I N D E K E TA M I N A , NORKETAMINA Y DEHIDRONORKETAMINA EN MUESTRAS DE PELO MEDIANTE CROMATOGRAFA DE GASES - ESPECTROMETRA DE MASAS Matey, JM.; Snchez S Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses (INTCF),
XIX Congreso Espaol de Toxicologa Departamento de Madrid, Servicio de Drogas. La ketamina es una sustancia sintetizada a principios de los aos 60, tiene propiedades anestsicas de corta duracin, lo que origin que fuera utilizada como anestsico de uso hospitalario. Hoy en da, este uso est limitado a casos muy especficos de anestesia en circunstancias muy concretas. Debido probablemente a sus efectos secundarios tales como: delirios y trastornos del sueo entre otros; y a los trastornos psquicos que produce, principalmente disociativos y alucingenos. Probablemente debido a estos ltimos, se ha desviado su empleo a un uso ilcito y recreativo. Dada la frecuencia e incidencia de esta sustancia, utilizada actualmente como droga de abuso, se ha generado la necesidad de su fiscalizacin y se ha incluido en la legislacin recientemente (Orden SAS/2712/2010, actualizndose el Anexo I de la lista IV del Real Decreto 2829/1977). El objetivo de este trabajo consiste en valorar la casustica de ketamina y sus metabolitos en muestras de pelo, detectada a este respecto en el Departamento de Madrid del INTCF, as como la presencia de otras drogas de abuso. Adems, en los casos en que la muestra de pelo iba acompaada de orina, se presentan tambin sus resultados, lo que enriquece de manera notable la interpretacin del caso. El mtodo analtico utilizado conlleva una preparacin previa de la muestra, diferentes derivatizaciones (las cuales fueron optimizadas para tal propsito), y como tcnica analtica cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas con un analizador de cuadrupolo (GC-MS). El nmero de casos en que se determinaron los analitos analizados fue mayor de lo esperado. Se detectaron 26 casos en las muestras remitidas en un plazo aproximado a un ao. En todos los casos salvo en uno, se detectaron otras sustancias, entre otras MDMA, anfetamina y cocana. De estos, ocho casos presentaban otras muestras complementarias (como orina) para valorar un consumo reciente. Palabras clave: Ketamina, Norketamina, Dehidronorketamina, Anlisis de pelo y GCMS. C . 11 . - D E T E R M I N A C I N C U A L I TAT I VA Y CUANTITATIVA DE COCANA EN PELO MEDIANTE GCMSMS TRIPLE CUADRUPOLO BRUKER 300 Mora, A1; Snchez, M1; Bueno, C2; Prez, MA2; Gely, C1; Barbal, M1; Perales, E1; Arroyo, A1 1 2 Instituto de Medicina Legal de Catalunya. Laboratorio de Desarrollo de Aplicaciones. Bruker, Madrid, Espaa. La determinacin cualitativa y cuantitativa en toxicologa forense de cocana en pelo por cromatografa viene publicada en el consenso del 2003 de la Society of Hair Testing. En este consenso se establecen los analitos a incluir en el anlisis y los lmites de cuantificacin recomendados (LOQ) para la cocana y sus metabolitos (Benzoilecgonina, cocaetileno y ecgonina metil ester). El LOQ recomendado para la cocana ha de ser 0,5 ng/mg y 0,05 ng/mg para sus metabolitos. La tcnica mediante la cual se realicen los anlisis no viene reflejada en dicho consenso y podr ser cualquier tcnica que llegue a estos LOQ recomendados a nivel cuantitativo y se pueda demostrar a nivel cualitativo. A nivel cualitativo usaremos las normas publicadas en un documento tcnico de la World Anti-Doping Agency. En este documento la cualificacin de los compuestos mediante espectrometria de masas en tndem se realiza mediante unas normas de asignacin de puntos. La cualificacin positiva de un compuesto requiere un mnimo de 4 puntos. Un in precursor tiene un valor de 1 punto y un in hijo 1,5 puntos. En este trabajo se propone la tcnica de cromatografia de gases acoplada a espectrometria de masas por triple cuadrupolo 300 de Bruker (GC-MSMS-TQ). Hemos establecido un mtodo para la cualificacin y cuantificacin que cumple ampliamente ambas recomendaciones. Los analitos estudiados son Cocana, ecgonina metil ster, benzoilecgonina y cocaetileno. Los puntos establecidos para su cualificacin son respectivamente 8, 5, 6,5 y 6,5. Los LOQ y lmites de deteccin establecidos cumplen las recomendaciones. Las recuperaciones estn a niveles de otros estudios en extraccin en fase slida. En conclusin proponemos el uso de mtodo para cocana mediante GC-MSMS-TQ ya que cumple las normas y recomendaciones establecidas por dos importantes asociaciones que rigen la toxicologa. A nivel de equipos es una tcnica ms econmica. Palabras Clave: Cocana, Pelo, Cromatografia, Espectrometria de masas, Triple cuadrupolo. C.12.-DETERMINACIN DE NICOTINA, COTININA Y T R A N S - H I D R O X I C O T I N I N A E N S A L I VA P O R CROMATOGRAFA DE GASES/ESPECTROMETRIA DE MASAS EN TNDEM da Fonseca, BM1; Moreno, IED1; Magalhes, AR1; Geraldes, V1; Queiroz, JA1; Calheiros, J1,2; Barroso, M3; Gallardo, E1 1 CICS-UBI - Centro de Investigao em Cincias da Sade Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique 6201556, Covilh, Portugal. 2 Instituto Nacional de Sade Dr. Ricardo Jorge (INSA), I.P. Av. Padre Cruz, 1649-016 Lisboa, Portugal. 3 Instituto Nacional de Medicina Legal Delegao do Sul; Rua Manuel Bento de Sousa, 3, 1150-219 Lisboa, Portugal. Se presenta un mtodo sencillo, fiable, rpido y sensible para la determinacin simultnea de nicotina y metabolitos (cotinina y trans-hidroxicotinina) en saliva empleando la extraccin en fase slida (SPE) y la cromatografa de gases con detector de espectrometra de masas en tandem (GC/MS-MS). Utilizando 0,2 mL de saliva los compuestos fueron extrados con cartuchos de extraccin de modo mixto (Oasis MCX). Como patrones internos se utilizaron los respectivos deuterados. La separacin cromatogrfica se realiz en 12 minutos en una columna analtica HP-5MS (30m x 0,25 mm, 0,25 m). La ionizacin se realiza mediante el modo de impacto electrnico, y las transiciones seleccionadas fueron 132,2 > 105,1 y 132,2 > 117,1 para la nicotina; 174,6 > 104,1 y 174,6 > 118 para la cotinina; y 284,4 >175,1 y 284,4 >218,1 para la trans-3-hidroxicotinina. Para cada uno de los patrones internos fue monitorizada nicamente una transicin. La metodologa propuesta fue validada para los siguientes parmetros: selectividad, modelo de calibracin, estabilidad, precisin (repetibilidad y precisin intermedia) y exactitud (bias), lmite inferior de cuantificacin (LLOQ), reproducibilidad y robustez siguiendo criterios de la FDA. Se obtuvo linealidad en un intervalo de concentraciones de 0,5-1000 ng/mL. Las recuperaciones de los compuestos fueron siempre superiores a 90%. Despus de llevar a cabo los estudios de validacin para garantizar la fiabilidad de los resultados cuantitativos, la metodologa fue aplicada a muestras de saliva procedentes de 30 nios con edades inferiores a 10 aos as como en otros fumadores pasivos. Hasta la fecha el presente trabajo es el mtodo ms sensible para la deteccin de marcadores de consumo de tabaco utilizando nicamente 0,2 mL de saliva. Palabras clave: Exposicin pasiva a tabaco, GC/MS-MS, Saliva.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa TOXICOLOGA AMBIENTAL: COMUNICACIONES ORALES C.13.-PARMETROS DE ESTRS OXIDATIVO COMO BIOMARCADORES DE CONTAMINACIN POR PLOMO EN RIN DE CONEJO Calaco, E; Ramos, A; Gil-Hernndez, M; Prez-Lpez, M; Mguez, MP rea de Toxicologa. Facultad de Veterinaria. Universidad de Extremadura. Avda. de la Universidad s/n. 10003-Cceres. El estudio propone evaluar los efectos causados por la exposicin a un metal pesado, el plomo, en rin de conejo a travs del anlisis de parmetros de estrs oxidativo, y poder establecer aquellos que puedan servir como biomarcadores de contaminacin por este metal. Se parti de 30 conejos neozelandeses blancos adultos de ambos sexos, divididos en 3 grupos de 10 individuos. Un grupo control, y otros dos grupos que recibieron una nica dosis va oral de acetato de plomo (50 y 100 mg/Kg). A los 30 das de la administracin se sacrificaron y se les extrajo el rin, en cuyo homogeneizado se determin malondialdehdo (MDA) (Recknagel y col., 1982), glutatin reducido (GSH) (Hissin y Hilf, 1976), y las actividades enzimticas de la catalasa (Clairborne, 1985) y glutatin STransferasa (GST) (Habig y col., 1974). La exposicin a plomo produjo un incremento de MDA con ambas dosis ensayadas, tanto en el conjunto de la poblacin como en funcin del sexo. Con respecto al GSH se observ una deplecin del antioxidante con ambas dosis, siendo adems dosis-dependiente tanto en la poblacin como en el estudio por sexos. En cuanto a las actividades enzimticas, el plomo produjo en la poblacin un descenso de la actividad catalasa, slo con la dosis mayor ensayada. En funcin del sexo las hembras mostraron una disminucin de actividad con ambas dosis, a diferencia de los machos donde result ser inclusive dosis-dependiente. Finalmente, con respecto a la actividad GST, se observ una reduccin de la misma con ambas dosis tanto en el conjunto de la poblacin como en los machos, sin embargo, en las hembras tan slo la mayor dosis ensayada result ser suficiente para producir un descenso significativo de su actividad. Los autores agradecen al Ministerio de Educacin y Ciencia el haber subvencionado este estudio (CTM2007-60041). Palabras clave: Biomarcador, Estrs oxidativo, Plomo, Ecotoxicologa, Conejo. C.14.-PORFIRINAS COMO BIOMARCADORES DE CONTAMINACIN AMBIENTAL: NIVELES HEPTICOS EN CONEJO EXPUESTOS A DIFERENTES DOSIS DE PLOMO Gil-Hernndez, M; Hernndez-Moreno, D; de la Casa Resino, I; Mguez, M.P; Soler, F; Prez-Lpez, M Unidad de Toxicologa. Facultad de Veterinaria UEX. Avda. de la Facultad s/n 10171 Cceres. Espaa. La amplia distribucin de contaminantes ambientales en ecosistemas terrestres hace indispensable el desarrollo de una serie de biomarcadores que indiquen los efectos de dichos xenobiticos sobre la fauna terrestre. En este sentido, el conejo, especie ampliamente distribuida en los ecosistemas mediterrneos, juega un papel fundamental. Las porfirinas, metabolitos intermediarios en la sntesis del grupo hemo, son producidas en tejidos eritropoyticos, tales como el hgado o el rin y excretadas mediante orina o heces. Estos metabolitos pueden verse alterados por la presencia de ciertos contaminantes ambientales, como PCBs, dioxinas o metales pesados, que producirn cambios en su perfil de acumulacin o excrecin. En el presente estudio se han determinado, en conejo blanco neozelands, los niveles de porfirinas hepticas (8, 7, 6 y 5-carboxiporfirina) mediante HPLC, con el objetivo de establecer diferencias en estos parmetros entre animales expuestos a diferentes dosis de acetato de plomo (D1=1/100 DL50: 50 mg/Kg y D2=1/50 DL50:100 mg/Kg). Los resultados muestran diferencias significativas, para las dos dosis ensayadas en las cuatro porfirinas aisladas mayoritariamente, estudiadas con respecto a los animales control. La 6-carboxiporfirina fue la porfirina aislada en mayor cantidad de las muestras hepticas con el mtodo de extraccin utilizado. En el caso de la 8, 7 y 6-carboxiporfirina, se observa una clara induccin de sus niveles en los animales expuestos a la dosis ms alta, con respecto a los controles, mientras que la 5carboxiporfirina presenta una marcada inhibicin, al menos en el grupo expuesto a la dosis ms baja de plomo. El estudio revela que esa induccin e inhibicin es mayor en machos que en hembras, presentando estas ltimas un menor efecto a la misma dosis de contaminante. Los autores expresan su agradecimiento al Ministerio de Educacin y Ciencia, que ha subvencionado la realizacin del presente estudio (CTM2007-60041). Palabras clave: Porfirinas, Hgado, Conejos, Plomo. C.15.-CARACTERIZACIN DE LA PRODUCCIN DE MICROCISTINAS POR Microcystis aeruginosa PCC7806 vs Microcystis aeruginosa PCC7820 MEDIANTE CL-MS Ros, V1; Prieto, AI1; Moreno, I1; Fras JE2; Soria ME3; Camen AM1 1 rea de Toxicologa, Universidad de Sevilla. 2Instituto de Bioqumica Vegetal y Fotosntesis. CSIC, Sevilla. 3Servicio de Espectrometra de Masas, Universidad de Sevilla. En las reservas de agua dulce pueden aparecer floraciones de cianobacterias representando un importante peligro medioambiental, debido a las toxinas que sintetizan. Las ms frecuentemente detectadas son las microcistinas (MC). Se han identificado entorno a 80 tipos de MC todas ellas con un aminocido en comn, el cido 3-amino-9-metoxi-2, 6, 8 trimetil-10 fenildeca-4, 6-dienoico (Adda), diferencindose principalmente en dos L-aminocidos variables. Sin embargo, no todas las especies pueden sintetizar MC, pudiendo incluso variar la capacidad productora entre cepas de una misma especie. El objetivo de este trabajo ha sido la caracterizacin de las MC producidas por la cepa de Microcystis aeruginosa PCC7806 frente a las producidas por la cepa PCC7820. Adems se ha llevado a cabo un estudio de la produccin de MC intracelulares de ambas cepas a lo largo de su crecimiento para encontrar la fase donde est ms favorecida esta produccin. Ambas cepas se cultivaron en medio BG11 durante 21 das bajo las mismas condiciones. El recuento celular, la clorofila y la densidad ptica se midieron a partir de 5 mL de cultivo recogidos cada 72 horas. De la misma forma se tomaron 100 mL de cultivo filtrndose para separar el material celular del medio. Una vez paralizado el cultivo, el material celular obtenido se liofiliz. Analizados los extractos por CL-MS, se identificaron MC-LR y (D-Asp, Dha, dMeAdda) LR como toxinas mayoritarias en ambas cepas. Cada una de ellas mostr una dinmica diferente en el mismo periodo de tiempo y en las mismas condiciones de cultivo. As la produccin mxima de Microcystis aeruginosa PCC7820 fue de 0,097 pg de MC/clula alcanzado a los 7 das frente a los 0,010 pg de MC/clula tras 15 das de cultivo de la cepa PCC7806. Agradecimientos: CICYT (AGL2006--06523/ALI), Junta de Andaluca (CTS-358) y al Instituto de Bioqumica Vegetal y Fotosntesis (CSIC, Sevilla). Palabras Clave: Microcystis aeruginosa, PCC7820, PCC7806, LC-MS, Ensayo de inhibicin de la fosfatasa.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.16.-ARSNICO EN HGADO Y RIN DE ARAO Y ALCA DE LA CATSTROFE DEL PRESTIGE Rodrguez, P1; Alonso, J1; Garca, MA1; Bravo, A2; Cascallana, Jl2; Melgar, MJ1 reas de Toxicologa1 y Anatoma Patolgica2 de la Facultad de Veterinaria Universidad de Santiago de Compostela (Campus de Lugo). E-mail: mj.melgar@usc.es El petrleo derramado en el hundimiento del Prestige contena, por su baja calidad, un elevado nivel de metales pesados. La catstrofe trajo como consecuencia la muerte de alrededor de 300.000 aves marinas, encontrndose fuel en el aparato digestivo, en algunas de ellas. En este estudio se pretende conocer las concentraciones de arsnico, como metaloide txico que es, en muestras de algunos cadveres de dichas aves petroleadas. Para ello se recogieron 29 alcas (Alca torda) y 55 araos (Uria aalge) entre diciembre de 2002 y febrero de 2003 en el Centro de Recuperacin de Aves de Oleiros. En estas aves marinas se realiz la necropsia y, las muestras de hgado y rin fueron sometidas a un proceso de digestin en medio cido, en una estacin de microondas; determinando finalmente, los niveles de arsnico por espectrometra de masas con fuente de plasma de acoplamiento inductivo (ICP-MS). Los resultados, expresados en peso seco, muestran rangos de arsnico en hgado de alca y arao comprendidos entre 1,87-45,96 ppm y 1,19-94,17 ppm, y sus promedios fueron 16,18 ppm y 23,40 ppm, respectivamente. Para el rin, tambin en alca y arao, se establecen rangos entre 0,70-35,10 ppm y 0,52-83,69 ppm, y con promedios de 7,81 y 10,13 ppm, respectivamente. El anlisis de varianza muestra una diferencia estadsticamente significativa (p < 0,01) entre las dos especies, siendo los niveles de arsnico ms elevados en arao que en alca, tanto en hgado como en rin. En conclusin, los niveles de arsnico detectados en ambas especies de aves son muy elevados comparando con otros estudios y con los patrones, esto puede deberse a la bioacumulacin del metaloide presente en el petrleo derramado e ingerido por las aves. Agradecimientos: A la Xunta de Galicia que subvencion los Proyectos PGIDIT03RF026101PR e INCITE08PXB261087PR Palabras clave: Arsnico, Alca, Arao, Prestige. C.17.-LA EXPOSICIN A BIFENILOS POLICLORADOS DE TIPO DIOXIN-LIKE MODULA NEGATIVAMENTE EL SISTEMA IGF EN SUJETOS ADULTOS SANOS Domnguez-Boada, L1; Luzardo, OP1; Henrquez-Hernndez, LA1; Valern, PF2; Lara, PC3; Almeida-Gonzlez, M1; Losada, A4; Zumbado, M1; Serra-Majem, L5; lvarez-Len, EE6 1 Unidad de Toxicologa, Dpto. de Ciencias Clnicas, Universidad de Las Palmas de Gran Canaria. 2Laboratorio de Fisiologa, Dpto. de Bioqumica, Biologa Molecular, Fisiologa, Gentica e Inmunologa, Universidad de Las Palmas de Gran Canaria. 3 Unidad de Radiologa, Dpto. de Ciencias Clnicas, Universidad de Las Palmas de Gran Canaria. 4Unidad de Anlisis Clnico, Hospital General Universitario de Gran Canaria Dr. Negrn, Servicio Canario de Salud. 5Unidad de Medicina Preventiva y Salud Pblica, Dpto. de Ciencias Clnicas, Universidad de Las Palmas de Gran Canaria. 6Unidad de Medicina Preventiva, Complejo Hospitalario Universitario Materno-Infantil, Servicio Canario de Salud. El factor de crecimiento dependiente de insulina tipo I (IGF-I) y los bifenilos policlorados de tipo Dioxin-like (DL-PCBs) estn relacionados con la patognesis de distintas enfermedades, como cncer, diabetes y desrdenes del crecimiento. La potencial relacin que pueda existir entre los niveles sricos de IGF-I y DLPCBs ha sido investigada en 456 adultos sanos procedentes de una muestra representativa de la poblacin adulta de la Comunidad Autnoma de Canarias. Se procedi a la determinacin de doce congneres de tipo DL-PCBs (77, 81, 105, 114, 118, 123, 126, 156, 157, 167, 169 y 189) mediante cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas (rango de edad 18-73 aos). Se calcularon tambin los Equivalentes Txicos de dioxinas (TEQs). Observamos una correlacin negativa entre los niveles sricos de DL-PCB 156 y 167, as como del sumatorio de DL-PCBs y TEQs, y los niveles sricos de IGF-I en el total de la poblacin. En anlisis multivariante ajustado por gnero, ndice de masa corporal (IMC), edad y niveles de IGFBP-3, observamos que los niveles de IGF-I eran significativamente menores en el subgrupo de mujeres jvenes (18-45 aos de edad) con bajo IMC (<27 Kg/m2) que presentaban niveles detectables de DL-PCB 156, en comparacin con sujetos dentro del mismo subgrupo y que presentaba niveles no detectables del contaminante (p < 0,0001). Observamos esa misma asociacin negativa entre los sumatorios de DL-PCBs y TEQs en el mismo subgrupo de individuos (p = 0,017 y p = 0,019, respectivamente). Estos hallazgos sugieren que los DL-PCBs podran modular negativamente el sistema IGF-I, de una manera que est altamente condicionada por el sexo, la edad y el IMC. Estas circunstancias podran contribuir al desarrollo de enfermedades relacionadas con IGF-I. Palabras clave: IGF, Compuestos dioxin-like, Poblacin adulta sana. C.18.-NIVELES DE BIFENILOS POLICLORADOS EN LA POBLACIN DE LAS ISLAS CANARIAS Henrquez-Hernndez, LA1; Luzardo, OP1; Almeida-Gonzlez, M1; lvarez-Len, EE2; Serra-Majem, L3; Zumbado, M1; Domnguez-Boada, L1 1 Unidad de Toxicologa, Dpto. de Ciencias Clnicas, Universidad de Las Palmas de Gran Canaria.2Unidad de Medicina Preventiva, Complejo Hospitalario Universitario MaternoInfantil, Servicio Canario de Salud. 3Unidad de Medicina Preventiva y Salud Pblica, Dpto. de Ciencias Clnicas, Universidad de Las Palmas de Gran Canaria. Los bifenilos policlorados (PCBs) son contaminantes txicos persistentes presentes en el medioambiente y detectados en suero y otros tejidos de origen humano. El objeto del estudio fue determinar los niveles sricos de PCBs en una muestra representativa de la Comunidad Autnoma de Canarias, para dilucidar las principales causas de contaminacin y evaluar los riesgos potenciales de estas sustancias sobre la salud, haciendo uso de los Equivalentes Txicos de dioxinas (TEQs). Se procedi a la determinacin de dieciocho congneres de PCBs (28, 52, 77, 81, 101, 105, 114, 118, 123, 126, 138, 153, 156, 157, 167, 169, 180 y 189) mediante cromatografa de gases acoplada a espectrometra de masas en 607 individuos sanos de nuestra poblacin (rango de edad 6-75 aos). Detectamos residuos de algn PCB en el 76% de las muestras analizadas, siendo los congneres 153 y 180 los de mayores niveles de residuos (mediana, 21,8 y 6,7 ng/g lpido, respectivamente). Los niveles de PCBs no dioxin-like aumentaban en relacin directa con la edad, el ndice de masa corporal, el hbitat y el hbito tabquico. La mediana del Marker-PCBs fue de 46,4 ng/g lpido. Los niveles sricos del PCBs de tipo dioxin-like fueron de 48,5 ng/g lpido en el percentil 95, y estaban asociados positivamente a la edad; tal y como ocurra con los TEQs, que alcanzaron valores de 58,6 pg/g lpido en el subgrupo de individuos mayores de 65 aos. Los niveles de contaminacin por PCBs en nuestra poblacin son, no obstante, menores a los descritos en otras poblaciones espaolas y otros pases desarrollados. Sin embargo, dado que estos compuestos parecen ejercer acciones nocivas sobre la salud an a baja dosis, estos resultados podran ser considerados por las
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa autoridades sanitarias con el fin de establecer medidas para disminuir la exposicin de la poblacin estudiada a los PCBs. Palabras clave: PCBs, Muestra poblacional representativa, Suero. C.19.-NIVELES DE METALES PESADOS EN MUESTRAS DE PELO DE ADOLESCENTES DE LA REGIN DE MURCIA Bar, R1; Jerez, S1; Conesa, J1; Pereguez, JE2; Gascn, JJ2; Motas, M1 1 rea de Toxicologa, 2rea de Medicina Preventiva y Salud Pblica, Dpto. de Ciencias Sociosanitarias, Universidad de Murcia, Campus de Espinardo 30100, Murcia. El pelo es una muestra de gran utilidad para la determinacin de niveles de metales pesados en poblaciones humanas. Los metales se almacenan en el pelo mediante su incorporacin a las protenas pilosas a travs de la sangre durante los procesos de crecimiento, reflejando niveles de exposicin a medio y largo plazo. Por otro lado la medicin de metales pesados en sangre muestra la absorcin de dichos elementos, reflejando niveles de exposicin a corto plazo. En el presente trabajo se lleva a cabo la determinacin de niveles de metales pesados (Cd y Pb) en muestras de pelo y sangre de 20 adolescentes de la Regin de Murcia con edades comprendidas entre 7 y 14 aos, se establece la correlacin entre las concentraciones obtenidas en ambos medios, as como el estudio de posibles relaciones causa-efecto de dichos niveles con respecto a una amplia variedad de hbitos de vida y alimentarios (consumo de alcohol y tabaco, presencia de amalgamas dentales, composicin de la dieta, etc.) que son estudiados mediante la realizacin de encuestas personalizadas. Las muestras de pelo (0,4 gramos) se toman de la zona occipital de la cabeza y se almacenan individualmente en bolsas de plstico a temperatura ambiente para su posterior anlisis. Las muestras de sangre (2-5 mL) se almacenan en tubos heparinizados en refrigeracin. Tras la realizacin de los procesos de lavado, secado y digestin cida asistida por microondas (HNO3:H2O2:H2O), los metales son determinados mediante espectrometra de masas con plasma acoplado inductivamente (ICP-MS). Los resultados obtenidos son analizados mediante el uso del paquete estadstico SPSS 15.0. Los resultados muestran una relacin entre la exposicin a estos elementos y su acumulacin en la matriz del pelo, a su vez las correlaciones entre ambos elementos en sangre y pelo, validan el uso de esta matriz para la monitorizacin de dichos contaminantes. Palabras clave: Metales pesados, Pelo, Hbitos de vida, Sangre, Adolescentes. MTODOS ALTERNATIVOS Y TOXICOLOGA EXPERIMENTAL: COMUNICACIONES ORALES C.20.-CILINDROSPERMOPSINA PURA COMO AGENTE CAUSANTE DE EFECTOS TXICOS EN LA LNEA CELULAR INTESTINAL HUMANA CACO-2 Gutirrez-Praena, D; Pichardo, S; Jos, A; Camen, AM rea de Toxicologa, Facultad de Farmacia, Universidad de Sevilla. C/ Profesor Garca Gonzlez 2, 41012, Sevilla, Espaa. La cilindrospermopsina (CYN) es una toxina producida por diversas especies de cianobacterias, que en determinadas condiciones, pueden crecer de forma masiva. Esto supone un grave problema desde el punto de vista ecolgico y de la alimentacin humana, ya que diversas especies de animales de consumo humano pueden bioacumular CYN. Adems, esta toxina tambin puede llegar a los humanos a travs del agua de bebida.
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La CYN es un alcaloide txico que inhibe la sntesis de protenas, reduce los niveles de glutatin reducido (GSH) y causa genotoxicidad. Estos efectos se han demostrado en lneas celulares de rganos diana, como hgado y rin, pero an son escasos sobre otros tejidos como el gastrointestinal, a pesar de la posible exposicin por esta va. En este estudio se investig la citotoxicidad basal y el estrs oxidativo de la CYN sobre la lnea celular intestinal humana Caco-2. En el estudio de citotoxicidad basal, las clulas se expusieron a concentraciones de entre 0 y 40 g/mL de CYN pura durante 24 h y 48 h, empleando como biomarcadores: contenido proteico (PT), ensayo de captacin de rojo neutro (RN), y la reduccin de una sal de tetrazolio (MTS). En todos ellos se observ una reduccin progresiva dependiente de la concentracin, siendo ms evidente a las 48 h. Por otro lado, en el estudio de estrs oxidativo, se determinaron los niveles de especies reactivas de oxgeno (ERO), la actividad de la enzima glutamilcisteina sintetasa (GCS) y los niveles de GSH, empleando para ello la CE50 (PT) y subdivisiones (2,5, 1,25 y 0,625 g/mL), durante 24h. Los resultados muestran un aumento de las ERO a 1,25 g/mL, y tanto la actividad GCS como los niveles de GSH se vieron incrementados significativamente a 2,5 g/mL. Estos resultados muestran la implicacin del estrs oxidativo como mecanismo de accin txica de la CYN. Los autores agradecen a la Junta de Andaluca (P09-AGR04672I) y al MICINN (AGL2009-10026) la financiacin de este trabajo, y al Servicio de Biologa del CITIUS el soporte tcnico. Palabras clave: Cilindrospermopsina, Caco-2, Citotoxicidad basal, Estrs oxidativo. C.21.-ANLISIS DE CAMBIOS EN POTENCIAL DE MEMBRANA ITOCONDRIAL EN CLULAS HEPG2 POR CITOMETRA DE FLUJO HYPERCYT Juan-Garca, A1,3; Davisson, VJ1,2; Ruiz, MJ3; Font, G3; Robinson, JP1,4 1 Purdue University Cytometry Laboratories (PUCL), Bindley Bioscience Center, -Discovery Park. 2 Department of Medicinal Chemistry and Molecular Pharmacology, Purdue University. 3 Dpto. de Medicina Preventiva I Salut Publica, Ciencies de l'Alimentaci, Toxicologia I Medicina Legal, Lab. de Toxicologia, Universitat de Valencia, Espaa. 4 Department of Basic Medical Sciences and Department of Biomedical Engineering, Purdue University, West Lafayette, IN 47907, USA. El hallazgo gradual de nuevos compuestos y el aumento en la complejidad de ensayos hacen que el cribado de alto rendimiento (HTS) sea no solamente atractivo, sino necesario. La citometra de flujo es capaz de realizar de forma simultnea el anlisis cuantitativo en una gran variedad de marcadores pticos de expresin bioqumica o de respuesta fisiolgica. HyperCyt, desarrollado recientemente para el anlisis de HTS, permite, junto con la citometra de flujo, el anlisis de placas multipocillos y la obtencin de datos de forma instantnea. Los ensayos de cribado a escala industrial requieren ser rpidos, eficaces, con bajo consumo de reactivos, pequeo volumen de muestra, robustos, sensibilidad adecuada, reproducibilidad y precisin; con el fin de discriminar entre compuestos que abarcan un rango amplio de actividad. En consecuencia, un control de calidad en HTS es un eslabn importante para la obtencin de datos. En este trabajo se presenta la caracterizacin de compuestos y la comparacin de los valores de toxicidad obtenidos con el HyperCyt acoplado al citmetro de flujo, (CyAnR), para el anlisis de 11 compuestos en clulas HepG2, y un anlisis de control de calidad de los resultados obtenidos por tres biomarcadores fluorescentes. El efecto de los compuestos analizados en clulas HepG2 se
XIX Congreso Espaol de Toxicologa realiz directamente midiendo los cambios de potencial de membrana mitocondrial (PMM) (TMRM) o indirectamente mediante la observacin de cambios en la viabilidad (ToPro3) y contenido de ADN (Hoechst). Los datos obtenidos se representan con curvas respuesta mediante: 1) proporcin de poblacin celular respondedora a los compuestos. 2) cambios en la media de fluorescencia de la poblacin celular tratada. 3) cambios de PMM y viabilidad con distancia KS entre la poblacin control y la tratada. A.J.G. agradece al Ministerio de Ciencia e Innovacin por la Beca de Movilidad Postdoctoral para la Investigacin en EEUU (EX2008-0452). Palabras clave: HyperCyt, Citometra, Cribado, HepG2, Mitocondria. C.22.-EVALUACIN DE LOS EFECTOS TXICOS DE NANOPARTCULAS DE PLATA MEDIANTE ANLISIS TRANSCRIPTMICO EN PEZ CEBRA Olasagasti, M; Pardo, MA; Escuredo, K; Rainieri, S Fundacin AZTI-Tecnalia. Parque Tecnolgico de Bizkaia, Astondo bidea, edif.609. 48160 Derio El uso de las nanotecnologas y los nanomateriales es cada vez ms comn en muchos sectores, includo el sector alimentario. Sin embargo, todava no se conocen a fondo todos los efectos que pueden tener los compuestos de dimensin nano sobre un organismo. Estudios realizados con varios tipos de nanopartculas, tanto in vitro como in vivo, han puesto de manifiesto su potencial txico, pero sin aclarar su mecanismo de accin. En este trabajo se han testado los efectos de nanopartculas de plata con el objetivo de averiguar su posible mecanismo de accin en un modelo animal, el pez cebra. Concretamente, se ha evaluado si el efecto de las nanopartculas de plata es debido a la dimensin nano de las partculas o a la liberacin de iones metlicos. Estos objetivos se han alcanzado mediante la comparacin de los perfiles transcriptmicos de larvas de pez cebra expuestas, por un lado a nanopartculas de plata y por otro a una solucin de plata inica, utilizando microarrays de Affymetrix. Los resultados obtenidos revelaron que el mecanismo de toxicidad de la nanoplata difiere del de la plata inica, si bien tienen respuestas comunes. Mediante PCR cuantitativa a tiempo real (RT-qPCR) se han podido determinar algunos genes que se expresan de forma diferencial como consecuencia de la exposicin a nanoplata y plata inica y otros que se expresan de forma especifica en caso de exposicin a plata inica. Por lo tanto, nosotros proponemos que el efecto txico de la nanoplata es consecuencia de su dimensin as como de la liberacin de iones. Palabras clave: Nanoplata, Pez cebra, Microarray, Toxicidad. C.23.-ACUMULACIN DE DELTAMETRIN EN SNC Y EFECTOS CITOTXICOS EN CLULAS DE NEUROBLASTOMA HUMANO SH-SY5Y Romero, A; Ramos, E; Martnez, M.A; Castellano, V; Ares, I; Martnez, M.; Martnez-Larraaga, M.R; Anadn, A Departamento de Toxicologa y Farmacologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, 28040 Madrid. El insecticida deltametrin, piretroide Tipo II, es un compuesto neurotxico cuyo principal mecanismo de accin es el bloqueo de los canales de sodio voltaje-dependientes. En mamferos, la ingestin origina el sndrome txico agudo CS (salivacin y coreoatetosis). Los objetivos del presente estudio son: i) Comparar la distribucin y eliminacin del deltametrin y su metabolito 4-OH deltametrin en el SNC de rata. ii) Evaluar el efecto citotxico in vitro del deltametrin y su metabolito 4-OH deltametrin en clulas de neuroblastoma humano SH-SY5Y. En el primer objetivo, ratas Wistar macho recibieron oralmente una dosis nica de deltametrin (26 mg/Kg). Tras dosificacin y posterior sacrificio se recogen muestras de cerebro y de sangre para el posterior anlisis de los niveles de deltametrin y su principal metabolito 4-OH deltametrin por HPLC-UV. En el segundo objetivo, se trataron clulas SH-SY5Y con deltametrin y su metabolito 4-OH deltametrin (concentraciones desde 1 mM hasta 0,01 M) y tras 24 h de exposicin se evaluaron con MTT. En base a los resultados obtenidos, se concluye que el deltametrin atraviesa la barrera hematoencefalica y se distribuye ampliamente en el SNC, de donde se elimina ms lentamente que del plasma. Los resultados in vitro revelan la elevada toxicidad del metabolito 4-OH-deltametrin respecto al compuesto inalterado deltametrin, siendo la reduccin de la viabilidad del 60% y 30% respectivamente a concentracin de 10 M. Los resultados del presente estudio deberan ser incorporados en la evaluacin del riesgo de este insecticida. Trabajo financiado por los Proyectos Consolider-Ingenio 2010 Ref. CSD/2007/00063 (FUN-C-FOOD) y Ref. n S2009/AGR1469, MEC, y Ref. GR58/08 UCM-BSCH, Madrid. Palabras clave: Deltametrin, SNC, Citotoxicidad, Clulas SHSY5Y. C.24.-ENSAYOS BIOLGICOS PARA LA EVALUACIN DE LA CALIDAD DEL SUELO Riva, MC; Rib, J; Mndez, A Centre de Recerca i Innovaci en Toxicologia (CRIT) de la UPC. Centro de Innovacin Tecnolgica Miembro de TECNIO (Generalitat de Catalunya). Campus Terrassa, Zona IPCT Edificio TR23, Ctra.Nac.150, Km15; 08227 Terrassa. Los ensayos por la evaluacin de la Calidad Ambiental de suelos potencialmente contaminados se basan en la exposicin a organismos residentes en suelos y sedimentos. Normalmente, el punto final de los ensayos que estn actualmente normalizados se basa en la inhibicin de la supervivencia de los organismos de ensayo o la inhibicin de su reproduccin, con un tiempo de ensayo entre 7 y 20 das. Recientemente se han desarrollado ensayos basados en el comportamiento de los organismos de ensayo frente a muestras de suelo contaminado. Concretamente se han publicado Normas ISO que describen la medida del grado de alejamiento de un organismo de un suelo contaminado como parmetro indicativo de su calidad ambiental. La determinacin del grado de alejamiento permite obtener resultados despus de 48 horas de exposicin. El objetivo de este trabajo consiste en el estudio del ensayo de alejamiento utilizando como organismo de ensayo colmbolos de la especie Folsomia Candida, para obtener resultados que permitan la evaluacin rpida de la calidad de un suelo potencialmente contaminado. Se ha llevado a cabo la realizacin de los experimentos repetitivos necesarios, para validar la idoneidad de los organismos obtenidos, mediante el estudio de la repetibilidad, reproducibilidad del ensayo y la correlacin y verificacin de resultados para contaminantes escogidos y suelos contaminados. Finalmente, se han comparado resultados de toxicidad obtenidos con organismos cultivados en el laboratorio en distintas condiciones fisiolgicas. Palabras clave: Bioensayos, Alejamiento, Colmbolos, Contaminacin, Suelos.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa MECANISMOS DE ACCIN TXICA, GENOTOXIDAD Y CARCINOGNESIS: COMUNICACIONES ORALES C.25.-INTERACCIN GEN-AMBIENTE: EFECTOS DEL POLIMORFISMO GENTICO DE PARAOXONASA-1 Y LA EXPOSICIN A PLAGUICIDAS SOBRE ENZIMAS ANTIOXIDANTES ERITROCITARIAS Hernndez, AF 1 ; Lacasaa, M 2; Lpez-Guarnido, O 1; Rodrguez, M2; Gil, F1; Parrn, T3; Alarcn, R3; Requena, M3; Pla, A1 1 Departmento de Medicina Legal y Toxicologa, Universidad de Granada; 2Escuela Andaluza de Salud Pblica, Granada; 3 Delegacin Provincial de Salud de Almera. Uno de los posibles mecanismos de toxicidad responsables de los efectos adversos de los plaguicidas es el estrs oxidativo. En este estudio se ha evaluado si la exposicin ocupacional a estos agentes qumicos en un entorno de agricultura intensiva produce alteraciones en diversas enzimas antioxidantes. Se recogieron muestras de sangre de trabajadores de invernadero de la provincia de Almera en dos perodos diferentes (alta y baja aplicacin de plaguicidas) en las que se determinaron biomarcadores de exposicin (colinesterasa srica y eritrocitaria), susceptibilidad (paraoxonasa-1, PON1) y efecto (diversas enzimas antioxidantes eritrocitarias: superxido dismutasa, catalasa, glutatin peroxidasa, glutation reductasa, glucosa-6- fosfato deshidrogenada y cido rico srico). Mediante ecuaciones de estimacin generalizadas se valor la interaccin entre los biomarcadores de exposicin y susceptibilidad sobre los indicadores de estrs oxidativo. Los resultados indican que la exposicin a corto plazo a plaguicidas (reflejada por el descenso de la colinesterasa srica) se asocia, por un lado, a una disminucin de glutatin reductasa, glucosa-6-fosfato deshidrogenada y cido rico y, por otro, a un aumento de catalasa y glutatin peroxidasa. Por el contrario, la exposicin continuada a plaguicidas (medida por el descenso de la colinesterasa eritrocitaria) se asoci a una menor actividad catalasa. El genotipo PON1-192 mostr un efecto modulador sobre la catalasa y cido rico. La interaccin del genotipo PON1 102QR con el descenso de la colinesterasa srica (exposicin a corto plazo) mostr un efecto significativo sobre la glutatin peroxidasa, glutatin reductasa y cido rico. En conclusin, la exposicin a plaguicidas genera estrs oxidativo por afectacin de enzimas antioxidantes eritrocitarias y, adems, este efecto vara segn el polimorfismo genticos de PON1. Palabras clave: Plaguicidas, Estrs oxidativo, Paraoxonasa, Colinesterasas, Enzimas antioxidantes. C.26.-EFECTOS NEFROTXICOS DEL DEFERASIROX, UN QUELANTE DE HIERRO Snchez-Gonzlez, PD1,2; Lpez-Hernndez, FJ1,3; VicenteVicente L1; Lpez-Novoa, JM1; Morales, AI1 1 Unidad de Toxicologa, Departamento de Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Salamanca. 2Bio-inRen S.L. Salamanca. (3). IECSCYL. Unidad de Investigacin. Hospital Universitario de Salamanca. e-mail: amorales@usal.es La sobrecarga de hierro es una complicacin importante en anemias crnicas que requieren mltiples transfusiones durante largos perodos de tiempo. La sobrecarga de hierro puede provocar dao heptico, cardaco y del sistema endocrino, provocando la disfuncin de estos rganos y comprometiendo la vida del paciente. La utilizacin de diferentes sustancias que fijen el Fe y ayuden a su eliminacin, es la mejor forma de evitar su toxicidad. En este sentido, desferaxirox se presenta como el quelante de ms reciente desarrollo y con gran eficacia clnica. Sin embargo, en los ensayos clnicos se han observado incrementos de la creatinina srica cuyas causas no han sido
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aclaradas. Por ello, el objetivo de nuestro estudio fue evaluar en profundidad la posible disfuncin renal y la lesin morfolgica que pudieran derivarse de su tratamiento. El trabajo se llevo a cabo con ratas Wistar divididas en dos grupos experimentales, uno tratado con desferasirox durante 7 das (75 mg/Kg/da; i.p.) y otro control. Se evaluaron los parmetros habituales de funcin renal, se estudi la funcin glomerular y los marcadores de dao tubular. As mismo, se hizo un estudio histolgico. Los resultados mostraron cmo el deferasirox aument significativamente la excrecin urinaria de protenas, albmina y glucosa. Estas alteraciones en la funcin renal se correspondieron con un dao tubular evidenciado por el incremento urinario de las enzimas marcadoras: NAG, KIM-1, NGAL y Clusterina. En los estudios histolgicos se observ necrosis/apoptosis tubular y una lesin caracterizada por pequeas reas con prdida del borde en cepillo y vacuolizacin citoslica. Sin embargo, este grupo de animales tratados con deferasirox mantuvo la funcin glomerular normal, sin alteraciones observables en los parmetros hemodinmicos de perfusin renal, tasa de filtracin glomerular, flujo plasmtico renal y resistencia vascular renal. Nuestro estudio sugiere que el desferasirox induce nefrotoxicidad a nivel tubular sin comprometer la funcionalidad glomerular. Palabras clave: Deferasirox, Nefrotoxicidad, Terapia quelante de hierro. C.27.-CITOTOXICIDAD DE LA NANOARCILLA CLOISITE 30B EN LA LNEA CELULAR INTESTINAL HUMANA CACO-2 Gutirrez-Praena, D1; Pichardo, S1; Jord, M2; Bermdez, JM2, Aucejo, S2; Jos, A1 1 rea de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla; 2 rea de Materiales y Sistemas de Envasado. Lnea de Desarrollo de Nuevos Materiales. ITENE. Valencia Las nanoarcillas son filosilicatos naturales, que se emplean en la fabricacin de materiales compuestos polimricos para mejorar propiedades, tales como la resistencia trmica y mecnica. Gracias a las ventajosas propiedades que aportan, las nanoarcillas se emplean en un amplio rango de aplicaciones industriales, entre ellas en el desarrollo de materiales de envase para alimentos. Debido a la intensa investigacin que se esta realizando en la obtencin de productos que contienen nanoarcillas, se hace necesario estudiar la toxicidad de las mismas con vistas a garantizar su seguridad para el consumidor. El objetivo del presente estudio fue evaluar la citotoxicidad del Closite 30B en la lnea celular humana Caco-2, tras la exposicin a una rango de concentraciones (3,91-500 g/mL) durante 24 y 48 horas. Los indicadores ensayados fueron la captacin del colorante rojo neutro (RN) como biomarcador de dao lisosomal y viabilidad celular; el contenido proteico total (PT) como biomarcador de la proliferacin y prdida de adherencia de las clulas; y la metabolizacin de la sal de tetrazolio MTS, como biomarcador de la actividad de las deshidrogenasas mitocondriales y consecuente dao mitocondrial. Los resultados obtenidos mostraron efectos citotxicos por accin de la nanoarcilla incluso a las concentraciones ms bajas ensayadas. Se aprecia una disminucin tanto en el contenido proteico como en el ensayo de reduccin de MTS a partir de la primera concentracin ensayada, siendo significativa en ambos biomarcadores desde 7,81g/mL. Resultados similares se observaron para la captacin de RN, aunque dicho marcador se mostr menos sensible ya que la bajada fue significativa a partir de la concentracin de 15,63 g/mL. Por tanto, teniendo en cuenta los posibles efectos txicos a nivel intestinal sera necesario controlar la migracin de esta nanoarcilla del envase a los alimentos. Agradecimientos: Ministerio de Ciencia e Innovacin. Proyecto AGL2010-21210. Servicio de Biologa del CITIUS. Palabras clave: Citotoxicidad, Microarcilla, Cloisite 30B, Caco-2.
XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.28.-UTILIDAD DE LA ALBMINA COMO MARCADOR DE P R E D I S P O S I C I N D E N E F R O TO X I CIDAD INDUCIDA POR EL TRATAMIENTO CON CISPLATINO. Vicente-Vicente, L1; Lpez-Hernndez, FJ1,2; Prieto, M1; LpezNovoa, JM1; Morales, AI1. 1 Unidad de Toxicologa. Departamento de Fisiologa y Farmacologa. Universidad de Salamanca; 2 IESCYL. Unidad de Investigacin. Hospital Universitario de Salamanca. En el tratamiento oncolgico frecuentemente, el paciente se ve sometido a una politerapia que incrementa los efectos txicos de los frmacos. Este es el caso del antineoplsico, cisplatino, con gentamicina, un antibitico aminoglucsido efectivo contra G ().Siendo ambos nefrotxicos pudieran desencadenar una i nsuficiencia renal aguda (IRA). Los marcadores utilizados habitualmente no son capaces de predecir esta predisposicin a padecer IRA. El propsito de este trabajo fue estudiar (i) si la administracin de cisplatino a dosis subtxicas sensibiliza a los animales padecer dao renal; y (ii) si la albuminuria pudiera ser til para predecir dicho dao renal. Ratas Wistar macho fueron divididas en cuatro grupos: Control (C), cisplatino (P), gentamicina (G) y cisplatino + gentamicina (PG). Se administr una dosis subtxica de cisplatino el da 0 en los grupos P y PG. La gentamicina tambin a dosis subtxica fue administrada durante 6 das comenzando el da 2, en los grupos G y PG. La funcin renal se monitoriz mediante la determinacin del aclaramiento de creatinina (Clcr), marcadores plasmticos (creatinina y urea) y urinarios (proteinuria, glucosuria y actividad de la enzima N-acetil-beta-D-glucosaminidasa). En el da 2 (antes de administrar gentamicina) se realiz un anlisis protemico urinario y se confirmo mediante Western blot. La administracin de un nico frmaco (grupos P y G) no produjo ninguna alteracin en los parmetros renales. Por otro lado, la administracin de gentamicina en el grupo PG produjo un incremento significativo de los marcadores plasmticos y urinarios as como, una disminucin del Clcr. La albmina aument en los animales tratados con cisplatino con respecto a los controles, antes de administrar gentamicina. Estos resultados sugieren que el cisplatino a dosis subtxicas es capaz de predisponer a las ratas a sufrir una IRA. La albumina pudiera ser un marcador til para detectar y prevenir la IRA en pacientes sometidos a estos tratamientos Palabras clave: Albuminuria, Predisposicin, Dao renal agudo, Uranio, Marcadores. C.29.-LAS CIANOBACTERIAS PRODUCTORAS Y NO PRODUCTORAS DE MICROCISTINAS ALTERAN LA TRANSCRIPCIN GNICA DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES EN TILAPIA Puerto, M; Jos, A; Pichardo, S; Camen, AM Area de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. Profesor Garca Gonzlez 2, 41012 Sevilla, Espaa. Las cianobacterias son bacterias Gram-negativas, con una distribucin ubicua, capaces de producir compuestos qumicamente muy diversos. En la actualidad su crecimiento excesivo se ha convertido en un importante problema de calidad de las aguas debido a la liberacin de sus toxinas. Los organismos acuticos pueden experimentar una exposicin involuntaria tanto de forma aguda como crnica, ya que pueden estar inmersos en aguas contaminadas con cianotoxinas. Los conocimientos sobre los efectos ocasionados por el contacto de estas cianotoxinas en tilapias, peces de consumo humano, son hasta la fecha insuficientes. El presente trabajo pretende estudiar los efectos txicos de las clulas de cianobacterias en tilapias (Oreochromis niloticus). Para ello, las tilapias fueron expuestas de forma oral a clulas de cianobacterias productoras de Microcistinas (MCs) y no productoras de MCs durante 21 das. Posteriormente, se extrajo el rin y se analizaron las actividades enzimticas implicadas en el estrs oxidativo: glutatin peroxidada (GPx) y glutatin-S-transferasa (GST), la evaluacin de la alteracin de sus niveles de ARNm, as como la abundancia proteica de GST. Tambin se estudiaron los niveles de peroxidacin lipdica (LPO). Cuando los peces fueron expuestos a las clulas de cianobacterias productoras de MCs, los niveles de LPO aumentaron, mientras que la actividad enzimtica, la expresin gnica y la abundancia de protenas experimentaron alteraciones tras la exposicin a ambas clulas de cianobacterias. Estos resultados demostraron por primera vez, que la exposicin subcrnica a clulas de cianobacterias produce estrs oxidativo, as como cambios en enzimas antioxidantes, tanto a nivel bioqumico como molecular. Los autores agradecen al CICYT (AGL2006-06523) la financiacin de este trabajo, y al Servicio de Biologa del CITIUS y al Centro Superior de Investigacin Cientfica (CSIC) por su soporte tcnico. Palabras clave: Estrs oxidativo, Glutatin peroxidada, Glutatin-S-transferasa, Expresin gnica, Tilapia. TOXICOLOGA FARMACUTICA Y DROGAS DE ABUSO: COMUNICACIONES ORALES C.30.-PATRN INTERNO EN LA DETERMINACIN CUANTITATIVA DE ETANOL. RECOMENDACIN, SUGERENCIA INSTRUCCIN O NORMA Mora, A; Snchez, M; Gely, C; Barbal, M; Perales, E; Arroyo, A Instituto de Medicina Legal de Catalunya La determinacin cuantitativa de etanol viene publicada por el Consejo General del Poder Judicial (Bol Inf. 3 poca. Ao XII Nm. 108, Pg. 141) Noviembre 1992. Han pasado ya muchos aos desde esta instruccin y su revisin solo ha sido reflejada mediante recomendaciones o sugerencias internas propias de cada laboratorio. La cantidad de innovaciones a nivel de tecnologa y conocimientos llevan a la necesidad de revisar de una manera rpida dicho anlisis. Sera un primer paso para unificar criterios de anlisis toxicolgicos proponer una nueva instruccin ms verstil y que permita a los diferentes laboratorios que trabajan en esta prueba con tecnologa diversa poder dar una respuesta unificada en los valores cuantitativos legislados. Los ejercicios interlaboratorio organizados por el Instituto Nacional Toxicologa y Ciencias Forenses (INTCF) nos llevan a la revisin de una parte de este anlisis: el patrn interno. La instruccin refleja que el patrn interno ha de ser n-propanol a 0,8 g/L. En la ltima sesin formativa realizada por el INTCF Barcelona en 2010 se sugiere que el n-propanol puede ser endgeno en casos puntuales de cetoacidosis. En el posterior ejercicio interlaboratorio recibido una de las muestras contiene una cantidad de n-propanol perfectamente asociable a un caso real. Con estos datos nuestro grupo de trabajo ha realizado un cambio del patrn interno (n-propanol) pasando a usar el tertbutil alcohol. Los resultados obtenidos han sido muy satisfactorios y se han hallado dos casos de cetoacidosis con valores de n-propanol endgeno que verifican la importancia de este cambio. Datos: Caso A: Cetona: 0,16g/L n-propanol: 0,08g/L Caso B: Cetona: 0,11g/L n-propanol: 0,13g/L Proponemos el uso de este patrn interno de forma generalizada en los laboratorios de toxicologa y el cambio de la instruccin para que sea ms verstil y adaptable a todas las tcnicas que hay en los distintos laboratorios.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Palabras clave: Etanol, n-propanol, Tertbutil alcohol, Patrn interno, Anlisis. C.31.-PRESENCIA DE LEVAMISOL EN MUERTES RELACIONADAS CON COCANA Almarza Lorente, E; Martnez Gonzlez, MA; Lora-Tamayo D'Ocon, C Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Departamento de Madrid. C/ Jos Echegaray, 4; 28232-Las Rozas de Madrid, Madrid El levamisol es el ismero levo de tetramisol, se clasifica en el grupo teraputico de los imidazotiazoles, en Espaa se utiliza como antihelmntico en preparados de uso veterinario. En otros pases se ha utilizado de forma limitada como inmunomodulador o inmunoestimulante en tratamientos como cncer de colon, infecciones de la piel o artritis reumatoide. En Espaa se ha empezado a detectar como adulterante en los alijos de cocana a partir del ao 2006. No se conoce con exactitud la razn del uso de levamisol como adulterante de la cocana, se sabe que posee efectos nicotnicos, mimetizando la accin de la acetilcolina y reforzando as su efecto euforizante. El levamisol potencia los efectos txicos de la cocana sobre el corazn, adems de producir otras graves patologas como la agranulocitosis. En nuestro laboratorio, en el ao 2008 ya se detect que un 20 % de las muestras de alijos de cocana contenan levamisol. En el ao 2010 su uso aument significativamente, ya que un 63% de las muestras de alijos de cocana analizadas lo contenan. El levamisol no es un sustituto de ningn otro adulterante y parece ser que es aadido ya en el proceso de elaboracin de la cocana en los pases de origen. En el presente trabajo, se realiza un estudio de 243 los casos de sujetos fallecidos autopsiados analizados en nuestro centro durante el ao 2010 y cuyas muertes estuvieron relacionadas con el consumo de cocana. En un 23% de estos casos se detect la presencia de levamisol en alguna de las muestras analizadas. Parece pues evidente, que el levamisol aparece unido a cocana como hallazgo toxicolgico en casos de fallecimientos relacionados con el consumo de esta droga de abuso y cabra pensar que en alguno de estos casos el levamisol haya contribuido a la causa de la muerte. Palabras claves: Levamisol, Cocana, Toxicologa forense, Postmortem. C.32.-APLICABILIDAD DE UN INMUNOENSAYO PARA DETECCIN DE COCANA Y OPICEOS EN SANGRE POSTMORTEM Arroyo, A; Snchez, M; Barbal, M; Mora, A Instituto de Medicina Legal de Catalunya. En medicina forense son frecuentes las muertes relacionadas con el consumo de drogas de abuso. El sistema AxSYM (Abbott) se utiliza para el anlisis de drogas en orina y de algunos medicamentos en sangre cuando se requiere una respuesta rpida cualitativa o semicuantitativa. En el caso de drogas de abuso, el sistema AxSYM detecta de forma cualitativa la presencia de drogas en orina segn unos cutt offs establecidos. Su utilizacin en la sangre no ha sido validado. Objetivos: evaluar la eficacia del analizador AxSYM para la deteccin de cocana y opiceos en sangre postmortem. Material y Mtodos: 228 muestras de sangre procedentes de autopsias, donde se sospechaba que la muerte estaba relacionada con drogas, o cuando se conocan antecedentes previos de consumo de drogas. Las autopsias se realizaron en el Servicio de Patologa del Instituto de Medicina Legal de Catalua. Las muestras se procesaron en el analizador AxSYM que utiliza la tcnica de inmunoensayo (FPEIA) previa
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centrifugacin de la muestra y precipitacin con acetonitrilo. Los resultados se compararon con los obtenidos mediante anlisis por CG-EM (Varian 4000). Se calcularon los parmetros establecidos para pruebas diagnsticas, la sensibilidad, la especificidad, y los valores predictivos positivos y negativos. Para la cocana fueron 74%, 97%, 97% y 78% respectivamente. Para los opiceos fueron 68%, 99%, 95% y 90% respectivamente. Se confirmaron el 100% de los resultados negativos. Los resultados de sensibilidad son moderados en ambas drogas. La especificidad y la concordancia entre los resultados del analizador ensayado y la espectrometria son superiores a otras tcnicas de inmunoensayo en sangre. En la prctica forense el sistema AxSym ser til en los casos que se precise un resultado cualitativo rpido, en relacin con la presencia de cocana y opiceos, aunque se requiere posterior confirmacin por mtodos exactos y precisos como la CG-EM Palabras clave: Medicina forense, Toxicologa, Drogas de abuso, Immunoensayo, Cocana, Opiceos. C.33.-PRESENCIA DE FTALATOS EN LENTES DE CONTACTO Y EN SOLUCIONES DE LIMPIEZA Prez-Fes, C; Barciela-Alonso, MC; Bermejo Barrera, P Departamento de Qumica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela 15782. Espaa. En el presente trabajo se ha realizado un estudio para la identificacin y cuantificacin de esteres de ftalatos en diferentes soluciones de limpieza de lentes de contacto. Los esteres de ftalato estudiados fueron el dimetil ftalato (DMP), dietil ftalato (DEP), butil bencil ftalato (BBP) y dibutil ftalato (DBP). La identificacin y cuantificacin de estos compuestos se ha realizado utilizando la cromatografa lquida de alta resolucin acoplada a la espectrometra de masas en tndem (HPLCMS/MS), siendo sta una tcnica altamente sensible para la cuantificacin de estos compuestos. Por otro lado, se ha realizado un estudio de migracin de estos compuestos desde las lentes de contacto. El objetivo de este estudio fue estudiar la posible migracin de estos ftalatos desde las lentes de contacto al ojo humano como resultado de la utilizacin de las mismas. El estudio de migracin fue realizado introduciendo la lente de contacto en lgrima artificial, incubndola a 37C y agitando a 130 rpm durante 24 horas. Pasado este tiempo se determin la concentracin de estos ftalatos en la lgrima artificial. El mtodo utilizado para la determinacin de estos compuestos es preciso (con desviaciones estndar relativas comprendidas desde 2,2 a 11,9%) y sensible, con lmites de deteccin de 0,03, 0,19, 0,31 y 2,62 g/L para el DMP, DEP, BBP y DBP respectivamente. Los resultados obtenidos confirman la presencia de algunos de estos ftalatos en algunas soluciones de limpieza comercializadas en dosis individuales. Este resultado puede ser debido al tipo de plstico utilizado para fabricar cada envase, siendo ms flexible el utilizado en los envases monodosis. Adems, durante el estudio de migracin de ftalatos, el DBP y BBP fueron liberados desde la lente de contacto durante el periodo de incubacin, siendo el DBP el que se libera en mayor proporcin. Palabras clave: Ftalatos, Lentes de contacto, Soluciones limpieza, LC-MS/MS. C.34.-VALIDACIN EN ANLISIS TOXICOLGICO FORENSE Bueno, J; Contreras, MT; Izquierdo, R Instituto Nacional de Toxicologia y Ciencias Forenses Departamento de Barcelona.. Hoy en da, se debera trabajar nicamente con mtodos validados, todos los laboratorios forenses deberamos estar ya cumpliendo la norma ISO17025, y uno de los aspectos
XIX Congreso Espaol de Toxicologa principales de esta norma es que los mtodos deben estar validados: Es realmente difcil validar nuestros mtodos? La respuesta a esta pregunta es sencilla: NO. En un laboratorio forense, son muchos los analitos objeto de anlisis, y son muchas las tcnicas que empleamos y mtodos o PNTS que disponemos. Normalmente se trata de mtodos que venimos utilizando durante mucho tiempo, pero que empezamos a usarlos antes la validacin de los mismos aunque, por supuesto en la mayora de los casos estos procedimientos que usamos son correctos y funcionan: es decir cuando son aplicados correctamente obtenemos resultados vlidos. La validacin, consiste simplemente en obtener evidencias que demuestren que nuestro mtodo funciona, para ello debemos fijar unos cuantos parmetros: Rango Implica delimitar el campo de aplicacin Linealidad Una buena linealidad implica que la respuesta de nuestro equipo sea proporcional a la concentracin de analito, y los patrones utilizados en la calibracin correctamente preparados Lmites de deteccin y cuantificacin Normalmente los obtenemos a partir de la curva de calibrado y que debern cumplir nuestras necesidades analticas. Precisin Implica conocer la repetibilidad y reproducibilidad de nuestro mtodo Exactitud Debemos documentar la exactitud de nuestro mtodo, preferentemente con ejercicios Interlaboratorios, muestras certificadas o mtodo adiciones Incertidumbre Toda medida lleva asociada una incertidumbre, podemos calcularla mediante mtodo de contribuciones o caja negra Los valores que deben cumplir estos parmetros no estn predefinidos sino que dependern de las necesidades de la aplicacin y del uso previsto. Palabras clave: Validacin, Mtodos, Parmetros, ISO-17025. C.35.-DETERMINACIN DE OPICEOS, COCANA, ANFETAMINAS, METADONA Y METABOLITOS EN PLACENTA HUMANA MEDIANTE CROMATOGRAFA DE LQUIDOS-ESPECTROMETRA DE MASAS Concheiro Guisn, M1; Daz Doce, A1; de Castro Ros, A1,2; Lendoiro Belo, E1; Cruz Landeira, A1; Lpez-Rivadulla, M1 1 Servicio de Toxicologa Forense, Instituto de Ciencias Forenses, Universidad de Santiago de Compostela. 2 Departamento de I+D. Cienytech S.L., Santiago de Compostela. La placenta humana es un complejo rgano que permite el intercambio de sustancias entre la madre y el feto, presenta propiedades secretoras de hormonas y es capaz de metabolizar ciertas sustancias (ej. drogas). El estudio de las sustancias presentes en la misma permite conocer su funcionamiento, as como sus propiedades para la deteccin de consumo de drogas durante el embarazo. Presentamos un mtodo analtico que permite la determinacin simultnea de 18 drogas y metabolitos (morfina, codena, 6-acetilmorfina, morfina-3-glucurnido, morfina-6-glucurnido, ecgonina metil ster, benzoilecgonina, m-hidroxi-benzoilecgonina, cocana, cocaetileno, anfetamina, metanfetamina, MDA, MDMA, metadona y EDDP) mediante cromatografa de lquidos acoplado a espectrometra de masas en tandem. Un g de placenta fue homogeneizado en 5 mL de agua, y tras centrifugar 20 min a 4000 rpm, se aadieron 50 L de cido frmico a 3 mL del sobrenadante. Esta mezcla fue sometida a una extraccin en fase slida con cartuchos de intercambio catinico MCX. La separacin cromatogrfica tuvo lugar en una columna de fase reversa Atlantis T3 3 m, 2,1 x 100 mm, en modo gradiente y con un tiempo total por muestra de 18 min. La fase mvil fue una mezcla de agua con 0,1% de cido frmico y acetonitrilo. La cuantificacin fue realizada en modo MRM, seleccionando dos transiciones por compuesto. Los parmetros de validacin estudiados fueron: linealidad (1-500 ng/g o 5-100 ng/g, segn compuesto), lmite de deteccin (0,5-2,5 ng/g), lmite de cuantificacin (1-5 ng/g), imprecisin e inexactitud intra e inter-da (n=20, <15%), eficacia del proceso y de la extraccin (>50%) y efecto matriz (n=10, <20%). El mtodo demostr ser sensible y especfico, y ser empleado en el estudio de la placenta como matriz alternativa en la deteccin de la exposicin intratero a drogas de abuso. Palabras clave: Placenta, Opiceos, Cocana, Anfetaminas, Metadona. TOXICOLOGA CLNICA: COMUNICACIONES ORALES C.36.-OCCUPATIONNAL THORIUM EXPOSURE Deschamps, F; Razafindranaly, J Department of occupational health, Faculty of Medicine, Reims (51100) France. Thoriated electrodes are used in TIG (Tungsten Inert Gas) welding. Thorium intake may happen during grinding and welding operations using thoriated electrodes. The use of thoriated tungsten electrodes may be originally of a potential hazard. The annual committed effective dose from inhalation of Thorium 232, Thorium 230, Thorium 228, et Ra 228, is usually below 1mSv, for a full-time TIG welder. Electrode consumption during welding was primarily the result of tip sharpening. Indead less than 3% of weight loss was attributable to the welding process. Considerable intake can happen during both alternating-current welding and also electrode grinding, if suction systems are not used. Neither excess of morbidity nor mortality was found among the TIG or non-TIG welding group. In the worst case, the annual limit of intake of thorium derived from the most recent ICRP publications was exceeded by a factor of 10. A 60 years old retired welder has referred to an occupational diseases department to investigate his past exposure to thorium. During the medical examination, he indicated being afraid of his past occupational thorium exposure. He has decided to wear a personal dosimeter at work for the last years of work. He was engaged as a welder for the last 34 years. He used successively 3 processes. He welded pipes, and mechanical devices for food industry. He worked either outdoor or in a work shop, and also sometimes in narrow non-ventilated spaces. The consumption of thorium was evaluated to a half kilogram during his entire career. Data obtained were significantly above upper limits. Level of Thorium 238 was almost 30 times upper limit, Thorium 238 four times upper limit, and Thorium 203 sixtheen times upper limit. So elevated Thorium assessments cannot occur during an occupational exposition including a huge exposure. Concerning working conditions as described by the patient, such a high occupational Thorium exposure is uncommon. Selfpoisoning can produce such measurements. A Goal of the patient was probably to underline welding is a dangerous job, with insuffisant occupational hygiene protection. Key words: Thorium, Occupational exposure, Voluntary poisoning.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.37.-FACTORES ASOCIADOS A LA MORTALIDAD EN LOS PACIENTES INGRESADOS EN LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS POR INTOXICACIN AGUDA GRAVE DESDE UN SERVICIO DE URGENCIAS Echarte Pazos, JL1; Torres Del Pliego, E2; Rey Prez, A3; Aguirre Tejedo, A1; Del Bao Lpez, F1; Clemente Rodrguez, C1; Palls Villaronga, O1; Martnez Izquierdo, MT1; Mnguez Mas, S1; Lpez Casanova, MJ1; Campodarve Botet, I1; Marzo Roche, D1; Blanco Lpez, L1; Skaf Peters, E1; Nolla Salas J3; Pedragosa Vall, A1; Puente Palacios, I4; Len Bertrn, N5; Labordeta De La Cal, V5; Molas, E2; Esteve Palau, E2; Vilapalana Marz, L2; Superva Caparrs, A1 1 Servicio de Urgencias. Hospital del Mar de Barcelona. Parc de Salut Mar. 2Servicio de Medicina Interna-Infecciosas. Parc de Salut Mar. 3Unidad de Cuidados Intensivos. Hospital del Mar. Parc de Salut Mar. 4Servicio de Urgencias. Hospital de la Esperanza. Parc de Salut Mar. 5Centro Peracamps de Urgencias. Parc de Salut Mar. Introduccin: El conocimiento de los factores asociados a mortalidad de las intoxicaciones agudas graves (IAG) que ingresan en la Unidad de Cuidados Intensivos (UCI) puede permitir la deteccin de los mismos. Objetivo: Conocer los factores relacionados con la mortalidad en pacientes ingresados por IAG en la UCI. Material y mtodos: Estudio retrospectivo y descriptivo de los pacientes ingresados por IAG en la UCI. Se revisaron las historias clnicas de las personas ingresadas por IAG en la UCI desde Enero de 2009 a Diciembre del 2010. Se recogieron datos demogrficos, existencia de paro cardiorespiratorio (PCR), necesidad de ventilacin mecnica (VM), necesidad de drogas vasoactivas (DVA), Escala APACHE y mortalidad. El tratamiento estadstico de los datos se realiz con el paquete SPSS mediante la "t" de Student o la "chi" cuadrado, considerando valores significativos si p<0,05 Resultados: Se recogieron 73 pacientes ingresados por IAG (71% hombres y 29% mujeres). La edad media fue de 40+13,5 aos. El 50,7% fueron por drogas de abuso, 49,3% etlicas y el 17,8% medicamentosas. El etanol en sangre medio fue de 87,6 + 125,4 mg/dl. La mortalidad global de la serie fue de un 16,4% (12 casos). En el anlisis de las diferentes variables se encontraron diferencias significativas respecto a mortalidad en: a) Sexo: hombres 23,5%, mujeres 0% (p=0,014); b) No consumo herona 12,7%, consumo herona 44,4% (p=0,037); c) No presentar sntomas cardiovasculares 5,9%, presentar sntomas cardiovasculares 42,9% (p<0,0001); d) No presentar sntomas respiratorios 6,4%, presentar sntomas respiratorios 36% (p=0,002); e) Glasgow>9 5,7%, Glasgow<8 27,8% (p=0,024); f) No requerir DVA 6,3%, requerir DVA 37,5% (p=0,002); No PCR 7,8%, s PCR 87,5% (p<0,0001). Los pacientes que no fallecieron tenan un APACHE < 16. Conclusiones: Los factores asociados a la mortalidad de las IAG el sexo, el consumo de herona, los sntomas cardiovasculares y respiratorios, el Glasgow<8, necesitar DVA y presentar PCR. Palabras clave: Mortalidad, Intoxicaciones, Drogas de abuso, Herona, Unidad de cuidados intensivos. C.38.-DETERMINACIN DE PIPERACINAS EN MUESTRAS DE ORINA POR MICROEXTRACCIN EN ADSORBENTE EMPAQUETADO (MEPS) Moreno, IED1; da Fonseca, BM1; Magalhes, AR1; Geraldes, V1; Queiroz, JA1; Costa, S2; Barroso, M2; Gallardo, E1 1 CICS-UBI - Centro de Investigao em Cincias da Sade Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique 6201556, Covilh, Portugal. 2 Instituto Nacional de Medicina Legal Delegao do Sul; Rua
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Manuel Bento de Sousa, 3, 1150-219 Lisboa, Portugal. La piperacina se comenz a usar como antihelmntico en el ao 1953 y desde entonces se han usado un amplio grupo como antihelmnticos, en especial para la ascariasis e infecciones por oxiuros. Hoy en da, algunas de ellas son consideradas drogas legales en algunos de los pases miembros de la UE, de hecho en 2009 la mCPP segua siendo la nueva droga sinttica ms disponible en el mercado1. El objetivo de este trabajo es la deteccin y cuantificacin de 4 piperacinas [1- benzilpiperacina (BZP), 1-(3-trifluorometilfenil) piperacina (TFMPP), 1-(3-clorofenil) piperacina (mCPP) e 1-(4metoxifenil) piperacina (MeOPP)] a partir de 200 L de orina, utilizando la microextraccin en adsorbente empaquetado (MEPS). La MEPS es la miniaturizacin de la SPE convencional con las ventajas de que reducir el volumen de muestra y de reactivos necesario para la extraccin. Adems las etapas de extraccin e inyeccin se pueden efectuar en lnea. Para efectuar la extraccin se emple un adsorbente de modo mixto (C8 e intercambio inico). Factores que influyen en le proceso de extraccin como dilucin de la muestra, nmero de aspiraciones a travs del dispositivo de MEPS, porcentaje de cido en la activacin del absorbente, porcentaje de metanol en el lavado y porcentaje de base en la elucin fueron previamente optimizados utilizando diseo experimental (DOE). Se estudi la linealidad del mtodo en el rango de concentraciones de 0,5 a 5 g/mL as como otros parmetros de validacin: precisin exactitud, limites de deteccin y cuantificacin y estabilidad. No se observaron efectos de carryover en todo el proceso de extraccin. Las recuperaciones oscilaron entre 80%- 90% para MeOPP, mCPP y TFMPP, y 40% para la BZP. La literatura cientfica es todava escasa en relacin a esta tcnica de extraccin, debido a su reciente aplicacin, por lo que este es el primer estudio que describe la aplicacin de esta tcnica en determinacin de piperacinas en muestras biolgicas. 1 Observatorio Europeo de las Drogas y las Toxicomanas. Informe Anual 2010 del Observatorio Europeo de las Drogas y las Toxicomanas. http://www.emcdda.europa.eu/attachements.cfm/att_120104_E S_EMCDDA_AR2010_ES.pdf Palabras clave: Microextraccin en adsorbente empaquetado, Piperacinas, Orina. C.39.-EFECTOS DEL ALCOHOL ETLICO EN LA FUNCIN COGNITIVA Y SISTEMA VISUAL BAJO ESTMULOS AUDITIVOS Y VISUALES Guisndez, N1,3; Carballo, J2; Uroz, V3,4. 1 Bendix Consulting. 2Escuela de ptica y Optometra. Universidad Complutense de Madrid. 3Facultad de Medicina. Departamento de Toxicologa y Legislacin Sanitaria. Escuela de Medicina Legal. Universidad Complutense de Madrid. 4 Centro de Estudios Jurdicos, Ministerio de Justicia. Introduccin: El consumo de alcohol etlico puede tener implicaciones graves cuando se realizan tareas complejas como la conduccin de vehculos a motor. Los lmites de alcohol en aire espirado para la conduccin se establecen en Espaa en 0,15 mg/L (conductores noveles y profesionales), y 0,25 mg/L (resto de la poblacin). Objetivo: Dado que puede existir susceptibilidad individual que haga que los efectos del etanol a niveles bajos sean muy variables, el propsito de esta investigacin fue examinar en sujetos sanos su influencia sobre diversos parmetros de funcin cognitiva y visual. Material y Mtodos: Se estudiaron en 20 voluntarios, antes y despus de la ingesta de alcohol etlico, los parmetros de agudeza visual (AV) a 5 metros y a 33 cm (acomodacin), reaccin pupilar a la luz y los resultados del Test de rendimiento de funcin cognitiva bajo
XIX Congreso Espaol de Toxicologa estmulos auditivos y visuales (TRCAV). El TRCAV es un programa informtico multimedia que determina el tiempo de respuesta ante preguntas auditivas, que se superponen con otras 23 que se formulan a travs de un estmulo visual. El alcohol etlico se determin con el dispositivo de Drger Alcotest 6510. Resultados: Bajo los efectos del alcohol (media de 0,20 mg/L), la AV disminuy en menos de un 10%, predominantemente en el examen monocular, las pupilas estaban midriticas y su respuesta a la luz fue ms lenta. Segn el TRCAV se detect en el grupo de niveles inferiores de alcohol etlico un ligero aumento en la atencin prestada a los estmulos auditivos frente a los visuales, mientras que en el rango de niveles superiores, existe una tendencia al deterioro de los resultados. Conclusiones: A niveles bajos de etanol en sujetos sanos, la funcin cognitiva ante estmulos auditivos y visuales puede estar potencialmente afectada, y existe disminucin de la AV en relacin con la alteracin acomodativa producida. Palabras clave: Alcohol etlico, Sistema visual, Sistema auditivo, Conduccin vehculos a motor, Funcin cognitiva. C.40.-ESPECTROMETRA DE MASAS EN TNDEM PARA LA DETERMINACIN DIRECTA Y SIMULTNEA DE OPICEOS Y COCANA EN CABELLO HUMANO Mguez Framil, M1; Moreda Pieiro, A1; Bermejo Barrera, P1; Cocho, JA2; Bermejo, AM3; Tabernero, MJ3 1 Departamento de Qumica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Facultad de Qumica. Universidad de Santiago de Compostela, Espaa. 2Laboratorio de Metabolopatas. Hospital Clnico Universitario de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, Espaa 3Departamento de Anatoma Patolgica y Ciencias Forenses. Facultad de Medicina. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, Espaa. Se ha desarrollado un mtodo basado en Espectrometra de Masas en Tndem con ionizacin por electrospray (ESI-MS/MS) para la determinacin simulatnea, rpida y altamente sensible de morfina, 6 metilacetilmorfina (6-MAM), codena, cocana y benzoilecgonina (BZE) en pelo de personas consumidoras de drogas. Las muestras de pelo, previamente pulverizadas, se sometieron a dos pre-tratamientos distintos para aislar las drogas de inters. El primer mtodo consisti en un procedimiento de dispersin de matriz en fase slida (MSPD) empleando almina como dispersante y cido clorhdrico diluido (0,6 M) como eluyente, seguido de una etapa en lnea de limpieza y preconcentracin por extraccin en fase slida (SPE). El segundo de los mtodos consisti en una hidrlisis enzimtica con Pronasa E asistido por energa de ultrasonidos (USEH), seguido de una etapa SPE de limpieza / preconcentracin. La deteccin ESI-MS/MS oper en modo positivo con adquisicin MRM tras las seleccin de transiciones in precursor in producto especificas para cada analito. La mayor sensibilidad se obtuvo empleando una disolucin portadora de acetonitrilo / agua / cido frmico (80/19,875/0,125). Los lmites de deteccin del mtodo fueron 39,2, 4,4, 6,8, 7,0 y 7,4 ng g-1 para morfina, 6-MAM, codena, cocana y BZE, respectivamente. Los coeficientes de variacin para la precisin intra e interda fueron inferiores al 9 y al 12%, respectivamente; mientras que la recuperacin analtica vari de 96 5 106 4%. El mtodo desarrollado (MSPD-ESI-MS/MS) se aplic a distintas muestras de cabello de politoxicmanos, y los resultados fueron comparados estadsticamente con los obtenidos despus de anlisis convencionales por cromatografa de gases espectrometra de masas (GC-MS). Igualmente, el procedimiento USEH-ESI-MS/MS se compar estadsticamente con mtodos de referencia por USEH-GC-MS. Palabras clave: Drogas de abuso, Pelo, Dispersin de matriz, Hidrlisis enzimtica, ESI-MS/MS. C.41.-A PROPSITO DE UN CASO: INTOXICACIN MORTAL POR SOBREDOSIS DE COLCHICINA Quintela, O1,2; Snchez de Len, MS1; Uroz, V2,3; Anadn, MJ2; Andreu, M1 1 Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses (INTyCF). Departamento de Madrid. 2Departamento de Toxicologa y Legislacin Sanitaria. Facultad de Medicina. Universidad Complutense de Madrid. 3Centro de Estudios Jurdicos, Ministerio de Justicia. La colchicina es un principio activo conocido desde la antigedad para el tratamiento del dolor articular. Se presenta en envases de 40 comprimidos (1 mg) y de 60 (0,5 de colchicina + 5 mg de diciclomina hidrocloruro). Es considerada como frmaco de eleccin para el tratamiento de gota aguda y afecciones inflamatorias venosas, gota crnica y reumatismo gotoso. Se presenta un caso de intoxicacin de un varn de 52 aos con antecedentes de artritis gotosa. La ingesta de 40 comprimidos de colchicina en una tarde, por supuesta mal interpretacin de rdenes mdicas, produjo una intoxicacin con desenlace fatal a los cuatro das de la ingesta. Se calcula dosis ingerida de 0,6 mg/Kg. Tras carbn activado y pantoprazol, fueron precisas medidas de soporte por presentar hipotensin grave, acidosis metablica, neutropenia, trombopenia y coagulopata. El cuadro clnico evolucion a fallo multiorgnico (afectacin heptica, respiratoria, hematolgica y renal, y rabdomiolisis). Tras la realizacin de la autopsia judicial, el Servicio de Histopatologa del INTyCF inform de focos de edema y hemorragia y exudado leucocitario alveolar en pulmn; focos de miocarditis intersticial y necrosis subepicrdica de ventrculo izquierdo; necrosis central hemorrgica (hgado de shock), atrofia de pulpa blanca en bazo y rin de shock. Todo ello compatible con un cuadro de fracaso multiorgnico. En el anlisis qumico-toxicolgico del Servicio de Qumica del INTyCF, se determin la colchicina en sangre mediante cromatografa de lquidos acoplada a espectrometra de masas (LC-MS/MS), resultando un valor de 0,0054 g/mL. La confirmacin analtica con tcnicas de gran especificidad como el LC-MS/MS de casos de posible intoxicacin por colchicina se hace imprescindible. Sera recomendable que frmacos de un estrecho margen teraputico como la colchicina fueran dispensados en envases con un nmero menor de comprimidos, y se alertara de forma expresa a los pacientes de los riesgos mortales en caso de sobredosis. Palabras clave: Colchicina, Sobredosis, Fallo multiorgnico, LC-MS/MS, Gota. TOXICOLOGA VETERINARIA: COMUNICACIONES ORALES C . 4 2 . - E VA L U A C I N D E L A E X P O S I C I N A RODENTICIDAS ANTICOAGULANTES EN BHO REAL (Bubo bubo) DEL SURESTE ESPAOL Gmez-Ramrez, P1; Martnez-Lpez, E1.; Mara-Mojica, P1,2; Garca-Fernndez, AJ1,*. 1 rea de Toxicologa, Facultad de Veterinaria, Universidad de Murcia. *ajgf@um.es 2 Centro de Recuperacin de Fauna Silvestre de Santa Faz, Alicante, Generalitat Valenciana. El uso en zonas rurales de los rodenticidas anticoagulantes para el control de plagas de roedores puede suponer un riesgo de intoxicacin secundaria para los animales que los consumen. En el Sureste de Espaa, el Bho real es una especie relativamente abundante que en ocasiones habita ambientes humanizados asociados a zonas de cultivo donde este tipo de biocidas pueden
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa aplicarse. Por tanto, y con el fin de determinar el grado de exposicin a estos compuestos, 18 muestras de hgado obtenidas de Bhos ingresados en el Centro de Recuperacin de Fauna Silvestre (CRFS) de Santa Faz (Alicante) entre 2003 y 2008 se sometieron a extraccin con acetonitrilo para analizar los residuos de los 5 rodenticidas ms frecuentemente utilizados (warfarina, clorofacinona, bromadiolona, difenacoum y brodifacoum) con LC-MSMS. El 83% de las muestras presentaron residuos de rodenticidas, siendo el difenacoum y el brodifacoum, seguidos de la bromadiolona los ms frecuentemente detectados (82%, 64% y 17% respectivamente). Estos tres compuestos son los ms comercializados en nuestro pas, por lo que la frecuencia de deteccin podra ser un reflejo de su frecuencia de uso. Aunque concentraciones tan bajas como 10 ng/g de brodifacoum se han asociado a hemorragias subcutneas en Bhos, el umbral de toxicidad para rapaces nocturnas se ha establecido en 100 ng/g, niveles superados en tres de nuestros individuos. Sin embargo la intoxicacin por rodenticidas no parece ser la causa de muerte de ninguno de los 18 Bhos estudiados, los cuales ingresaron en el CRFS principalmente por electrocucin y traumatismos. No obstante cabe recordar que el impacto de los rodenticidas anticoagulantes no se limita a la muerte por hemorragias agudas y que como consecuencia de las hemorragias subletales los animales pueden ser ms susceptibles de sufrir accidentes traumticos. Agradecimientos: A la Generalitat Valenciana por facilitar las muestras. Al MICIIN y a la CARM (Fundacin Sneca) por los proyectos CGL2004-5959/BOS, CGL2008-4318/BOS y 08758/PI/08. Palabras clave: Rodenticidas anticoagulantes, Bho real, Monitorizacin, Riesgo. C.43.-INTOXICACIN POR Thapsia villosa L. EN OVEJAS Villarroya, A; Sastre-Baixauli, L; Blanquer, A; Rodilla, V Universidad Cardenal Herrera CEU, Depto. Fisiologa, Farmacologa y Toxicologa, Avda. Seminario s/n, 46113Moncada (Valencia). En animales herbvoros la fotosensibilizacin producida por la ingesta de plantas se produce con relativa frecuencia, aunque el nmero de especies implicadas no es excesivamente alto. Una de las especies capaz de producir este tipo de intoxicacin es una planta de la familia de las Umbelferas que se encuentra bien distribuida por la pennsula ibrica: Thapsia villosa L. El ganado ovino que ingiere la planta presenta un cuadro caracterstico de eritema con inflamacin y edema de la cabeza, siendo orejas y prpados las zonas ms afectadas. Aqu describimos una intoxicacin por Thapsia villosa en ovejas de raza Cartera en el municipio de Allepuz (Teruel) con aparicin de eritemas, edema subcutneo en la cabeza y en menor grado en las extremidades as como temblores generalizados. Adicionalmente, los animales afectados por la intoxicacin muestran polidipsia y un comportamiento anmalo que relacionamos con un proceso de fotofobia intenso: son reacios a abandonar el aprisco o establo para salir a campo abierto y si se les obliga, son capaces de abandonar el rebao en busca de sombra. En zonas desarboladas como es la zona en que se produjo esta intoxicacin es caracterstico que los animales afectados introduzcan la cabeza dentro de un arbusto, quedndose inmviles en esa posicin. El tratamiento en estas intoxicaciones consiste en recluir los animales en lugares oscuros, con lo que en 48 h comienza a remitir el edema, se forman exudados serosos y posteriormente costras, sobre todo en los pabellones auriculares. Segn los ganaderos consultados, las ovejas rechazan el consumo de la planta por lo que las intoxicaciones suelen afectar a animales trasladados de otras zonas en las que no crece la planta o tras manejos en los que el rebao permanece mucho tiempo en el aprisco (ej. tratamientos farmacolgicos, esquileo) y al salir al pasto parecen no discriminar la planta. C.44.-ESTUDIO RETROSPECTIVO DE LOS CASOS DE ENVENENAMIENTO EN FAUNA EN EXTREMADURA EN LOS LTIMOS SEIS AOS. Ibez, Y; Hernndez, D; Prez-Lpez, M; Soler, F rea de Toxicologa. Facultad de Veterinaria. Universidad de Extremadura. Avda. de la Universidad s/n. 10003-Cceres. En este trabajo se presentan los resultados de los ltimos 6 aos (del 2005 al 2010) de los anlisis realizados en nuestro laboratorio a raz del convenio de colaboracin firmado con la Junta de Extremadura para llevar a cabo el estudio analtico de posibles cebos envenenados y de animales sospechosos de haber muerto por envenenamiento en el entorno natural. Fueron remitidos 473 casos, que englobaban a 452 ejemplares de ms de 40 especies animales diferentes, y 106 supuestos cebos envenenados. De cada animal se remiti, siempre que fue posible, el hgado, contenido digestivo y SNC. La mayora de los supuestos cebos consistieron en restos crnicos (carne fresca con o sin huesos y embutidos). De manera rutinaria, se efectu anlisis de plaguicidas mediante tcnicas cromatogrficas (CCF, HPLC-DAD y CG con detectores NPD y MS) que variaron temporalmente, as como de estricnina (mtodo colorimtrico). Sobre SNC se determin la actividad de la enzima acetilcolinesterasa y su reactivacin (dilucin y 2-PAM) como forma de evidenciar el efecto txico de los plaguicidas anticolinestersicos. Como resultado final, se detectaron como positivos 288 ejemplares (64% del total) de 238 casos, y 87 cebos (82% del total de cebos remitidos). De las 25 especies animales afectadas, las ms frecuentes fueron: buitre leonado (Gyps fulvus) (22% de los casos positivos), perro domstico (Canis familiaris) (13%), buitre negro (Aegypius monachus) (9%) y milano real (Milvus milvus) (5,5%). Los cebos envenados resultaron ser el 25% del total de casos positivos. Los plaguicidas anticolinestersicos carbofurano y aldicarb, pertenecientes al grupo de los carbamatos, fueron las sustancias halladas en el 50% de los casos positivos; en menor porcentaje, fueron hallados otros carbamatos (metiocarb, carbaril, tiodicarb, fenoxicarb, metomilo), diversos organofosforados (clorfenvinfos, malatin, fenamifos, metamidofos, dimetoato, clorpirifos, diazinon, fention, monocrotofos, metil-paration, forofos, fenitrotion), estricnina, cipermetrina, endosulfan, imidacloprid, y fenobarbital. Palabras clave: Fauna silvestre, Cebo, Plaguicidas, Envenenamiento. C.45.-RESDUOS DE ANTIBITICOS Y RESISTENCIAS BACTERIANAS EN EXCRETAS DE VACUNO Carballo, M; Espern, F; Gonzlez, M; Vzquez, B; De la Torre, A CISA-INIA, Valdeolmos, 28130 Madrid, Espaa. Como consecuencia del uso masivo de antibiticos en clnica veterinaria se ha producido, durante las ltimas dcadas, una liberacin constante de este tipo de compuestos al medio ambiente. Su entrada se realiza a travs de la reutilizacin agraria de las excetas ganaderas, ya que entre un 70% a un 90% de la mayora de los principios activos administrados va oral son excretados sin metabolizar. La evidencia cientfica de la presencia de residuos de antimicrobianos y de resistencias, tanto en excretas animales como en suelos y aguas ubicados en reas de actividad ganadera, ha disparado la alerta sobre las consecuencias que esta situacin puede originar en la salud pblica, animal y
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa medioambiental. El objetivo de este trabajo es el estudio de residuos de antibiticos (tres tetraciclinas y un fenicol) y resistencias microbianas en excretas animales procedentes de cinco granjas de vacuno (3 de leche y 2 de engorde) de la zona centro. La cuantificacin analtica consisti en: secado y triturado de las muestras, extraccin con metanol en condiciones cidas y deteccin analtica y cuantificacin mediante HPLC-MS. El estudio microbiolgico se realiz mediante la siembra en 3 medios McConkey: dos con antibitico (tetraciclina y cloranfenicol) y uno sin antibitico. Se realiz el recuento de UFC y se calcul el porcentaje de cepas resistentes en cada medio. Adicionalmente, se procedi a la caracterizacin de las muestras (pH, carbn orgnico, nitrgeno total y materia orgnica). Los resultados analticos muestran la presencia de oxitetraciclina y clortetraciclina en todas las muestras. Asimismo, se detecta un elevado porcentaje de resistencias bacterianas a las tetraciclinas (hasta 60,8% de cepas resistentes) y al cloranfenicol (51,0%). Se discute la relevancia sanitario-ambiental de los resultados obtenidos. Este trabajo ha sido financiado por el convenio CC08C20 (MARM-INIA). Palabras clave: Antibiticos, Resistencias, Excretas animales, Medioambiente. C.46.-INFLUENCIA DEL SEXO EN LA EXPRESIN DE DISTINTOS BIOMARCADORES HEPTICOS EN CORZO (Capreolus capreolus) De la Casa-Resino, I*; Hernndez-Moreno, D; Lpez-Beceiro, A; Fidalgo, LE; Mguez, MP; Prez-Lpez, M rea de Toxicologa. Facultad de Veterinaria de Cceres. Avda de la Universidad s/n.10003 Cceres. E-mail: delacasa@unex.es Todos los seres vivos del planeta se encuentran sometidos a constantes agresiones que proceden del medio en el que desarrollan su existencia, y que tienen su origen tanto en acciones derivadas de la actividad humana, como en la propia naturaleza. Cuando un contaminante qumico interacciona con la fauna de un ecosistema, causa una serie de daos en diferentes unidades estructurales del mismo. En este sentido los animales salvajes resultan de utilidad para su empleo como bioindicadores de la contaminacin ambiental, ya que presentan una serie de caractersticas especficas como son, entre otras, su mayor tamao corporal y la facilidad de obtencin de muestras, ya que suelen ser animales procedentes de actividades cinegticas. Mediante el presente estudio se pretenden cuantificar los niveles basales en hgado de corzo (Capreolus capreolus) de las enzimas de biotransformacin de fase I, CYP1A en funcin de la actividad etoxiresorrufina o-deetilasa (EROD), y fase II, glutatin Stransferasa (GST) y uridin-difosfo-glucuronosiltransferasa, as como los niveles de peroxidacin lipdica en funcin del malondialdehdo (MDA), con el objetivo de establecer las diferencias fisiolgicas existentes entre gneros. Los resultados obtenidos no mostraron diferencias estadsticamente significativas, entre machos y hembras, en los niveles de actividad EROD, GST y UDPGT. En cambio, se encontr una diferencia estadsticamente significativa entre los niveles de MDA hepticos de machos y hembras, siendo dicha diferencia significativa a nivel p<0,05. El estudio de correlaciones mostr, como dato ms destacable, una correlacin altamente significativa (p<0,01) entre las enzimas de fase I (EROD) y fase II (UDPGT) en las hembras. Los resultados obtenidos permiten evidenciar las diferencias existentes, en su caso, entre los niveles de las enzimas estudiadas en machos y hembras, aspecto este que debe ser considerado en futuros estudios de biomonitorizacin. *Irene de la Casa-Resino es becaria de la Consejera de Economa Comercio e Innovacin (Junta de Extremadura) PRE09001. Palabras clave: Biomonitorizacin, EROD, GST, UDPGT, MDA. C.47.-INTOXICACIN POR TANINOS EN RUMIANTES AFRICANOS LOCALIZADOS EN UN SAFARI PARK Soler, F1; Rodrguez, P2; Sierra, C2; Flores, L2; Gargallo, A2; Farias, F3; Prez-Lpez, M1 1 Unidad de Toxicologa. Dpto. de Sanidad Animal. Facultad de Veterinaria. Universidad de Extremadura. Avda. de la Universidad s/n. Cceres (solertox@unex.es) 2Wildvets, Veterinarios para la Fauna Salvaje, C/ Abades 18, 2B. Sevilla. (www.wildvets.com) Centro de Inmunologa y Enfermedades Infecciosas (CEI-Granada). Instituto de Patologa, Unidad de Infectopatologa e Inmunopatologa. IAMA, Espaa. Entre noviembre de 2010 y enero de 2011 en el Badoca Safari Park (Portugal) se produjo la muerte tras cuadros clnicos de carcter agudo/subagudo de cuatro ejemplares adultos de distintas especies de rumiantes africanos: azul (Connochaetes taurinus), antlope eland comn (Taurotragus oryx), bfalo del Congo (Syncerus caffer nanus) y Arru (Ammotragus lervia). Los sntomas clnicos ms aparentes consistieron en la aparicin gradual de apata, separacin del grupo, anorexia, cese de la rumia, postracin y muerte entre 24-48 horas. El cuadro clnico se completaba entre 3-10 das. Las medidas teraputicas de soporte llevado a cabo no dieron resultado positivo. En el anlisis sanguneo realizado en el antlope eland lo ms destacable fue un importante aumento en la urea y creatinina (unas 10-7 veces lo normal en rumiantes domsticos, respectivamente) indicando un claro dao renal. Tambin se detect aumento en la ASAT, GGT y calcio, y disminucin de potasio y cloro. Los hallazgos ms relevantes de la necropsia fueron congestin de mucosa de abomaso, ligera hepatomegalia, edema gelatinoso perirrenal, hidropericardio, ascitis, hidrotrax, petequias y equimosis diseminadas. Las lesiones histopatolgicas ms significativas se observaron en rin con la aparicin en todos los animales de una grave tubulonefrosis txica con degeneracin y necrosis del epitelio tubular renal, hemorragias intertubulares, presencia de material eosinoflico intratubular procedente de la necrosis completa de las clulas tubulares, ectasia ductal difusa y necrosis glomerular segmentaria y focal. Otros hallazgos: moderado edema en mucosa y submucosa intestinal; congestin y edema intersticial heptico. El cuadro clnico, los hallazgos sanguneos y, sobre todo, las lesiones histopatolgicas en rin son totalmente compatibles con un proceso de intoxicacin por taninos. La poca de aparicin de estos casos coincidi con una alta produccin de bellotas por parte de los alcornoques presentes en el parque, debido a unas condiciones climticas favorables, siendo consumidas ad libitum por los animales. Los taninos son los componentes txicos presentes en las bellotas de Quercus spp., como el alcornoque. Palabras clave: Intoxicacin, Taninos, Rumiantes africanos, Zoo. C.48.-DNA DAMAGE ON Crocodylus moreletti FROM AN URBAN LAKE AT SOUTHERN GULF OF MEXICO Gamboa-Rodrguez, T1; Gamboa-Aldeco, R1; Saldivar-Osorio, L2; Gmez-Cruz, R1; Luna, M1; Padrn-Lpez, M1; Aguirre, I1 1 Div. Acad. Ciencias Biolgicas. Universidad Jurez Autnoma de Tabasco, Mxico. 2Laboratorio de Espectroscopia de Absorcin Atmica, Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Email: gambtere@gmail.com Some crocodile populations are decreasing their number due to anthropogenic pressure to their natural habitats at southern Gulf of Mxico. Laguna de las Ilusiones, is an urban lake and there is a continuous input of pollutants into their aquatic ecosystems, like solid wastes, municipal wastes waters, pluvial waters
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa carrying combustion particles and oil deposited by auto motors. This situation exposes crocodiles to a variety of pollutants, some of them with risk to health and reproduction capabilities. In the present study we determined genotoxic effect on DNA from a wild population of Crocodylus moreletii from an urban lake. Simultaneously Lead was measured in blood cells and dermal scale samples from organisms from the same lake, in order to establish correlation. Analytical method was the Mexican-199SSA1-2000 Standard method. Blood and dermal plates were digested in nitric acid. Samples, their respective blanks and standards were analyzed by triplicate with an A.A. spectrometer (Perkin Elmer 2380) with graphite furnace. DNA strands brakes were evaluated with the Single cell electrophoresis assay (Comet Assay) on peripheral blood cells of wild individuals taken from the lake and compared to a control group from a breeding farm. DNA migration from the nucleus measured in m ranged from 19.5 up to 49.88 and from 0 up to 35 in the wild and control groups respectively. DNA migration, reported as the Tail/head ratio, was 1.6 0.10 (mean S.E.) for wild group, and 0.4 0.16 for control group. Difference was statistically significant (p<0.05). Lead concentration in wild animals blood samples ranged from 6.55 up to 15.34 g/dl with a mean of 12.011.6 g/dl, and it was slightly higher than captive organisms (8.15 1.7g/dl), however this was not statistically significant (p<0.05). Lead concentration in dermal plates was higher than in blood samples, and ranged from 4.2 up to 55.29 ppm with a mean value of 22.62 3.2 ppm for wild animals. DNA damage evaluated on wild organisms was medium to high, meanwhile it was medium to low at control group. Crocodylus DNA damage founded in wild organisms is probably due to pollutants, like lead derived from urban activities, posing them at risk to mutagenic or reproductive effects. Key words: Genotoxicity, Comet assay, Crocodylus, Lead. COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER SEGURIDAD ALIMENTARIA: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.49.-PRESENCIA DE TRICOTECENOS TIPO A EN CEREALES Y DERIVADOS PROCEDENTES DE LA AGRICULTURA ECOLGICA Berrada H1; Juan C1; Ritieni A2; Font G1 1 Laboratory of Food Chemistry and Toxicology, Faculty of Pharmacy, University of Valencia, Av. Vicent Andrs Estells s/n, 46100 Burjassot, Valncia, Spain. 2Department of Food Science. Faculty of Agriculture, University of Naples "Federico II", Via Universit 100, 80055, Portici, Napoli, Italy. La contaminacin por micotoxinas en la agricultura ecolgica y tradicional ha estado en continua controversia debido a la mayor probabilidad de contaminacin por hongos micotoxignicos en la ecolgica ya que no se usan antifngicos qumicos. La contaminacin de especies del gnero Fusarium en los cereales como el trigo, cebada, avena, arroz, maz y en productos derivados, implica la presencia de tricotecenos [1]; los cuales producen efectos txicos en humanos y animales, como mortalidad, irritacin, alteraciones inmunolgicas, etc [2]. Los tricotecenos se clasifican en 4 grupos, A, B, C, y D, segn el grupo funcional. El grupo A es el ms grande e incluye las toxinas: T-2, HT-2, diacetoxiscirpenol (DAS) y neosolaniol (NEO). Son la T-2 y HT-2 las que presentan mayor toxicidad, como se recoge en el proyecto CT/EFSA/CONTAM/2010/03 del instituto alemn FOBIG. Por otra parte la JECFA ha establecido provisionalmente una ingesta diaria tolerable (IDT) de la suma de ambas en 0,06 g/Kg peso corporal/da [3]. En este estudio
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hemos evaluado la presencia de T-2, HT-2, DAS y NEO, en 93 muestras de cereales y productos derivados (trigo, avena, cebada y centeno) de agricultura ecolgica comercializados en la regin de Campania en Italia, para as conocer la exposicin de los consumidores de estos productos. La determinacin se realiz por cromatografa lquida acoplada a espectrometra de masas en tndem, utilizando el mtodo de extraccin desarrollado por Santini et al., 2009 [4]. El 8% de las muestras analizadas contenan tricotecenos, siendo positivas enT-2 y HT-2, con valores comprendidos entre 7,13-17,8 g/Kg y entre 6.7- 60,1 g/Kg respectivamente. A pesar que la incidencia no fue muy elevada, los valores hallados superaron las IDT para un adulto de 60 Kg que consume diariamente 150 g de cereales contaminados con la suma del contenido ms alto de HT-2 y T-2, alcanzando una ingesta diaria de 0,195 g/Kg peso corporal/da. C. Juan gradece a la Conselleria de Educaci de la Generalitat Valenciana la Beca Postdoctoral del Programa VALi+d per a investigadors en fase postdoctoral (APOSTD) 2010 que est disfrutando y que ha permitido el desarrollo de este trabajo. [1] Scott, P. M. (1990) Cereal Foods World, 35, 661-666. [2] Malloy, C. D.; Marr, (1997). J. S. J. Public Health Manage Pract., 3, 61-69. [3] Food and Agriculture Organization of the United Nations, FAO Food and Nutrition Paper 74, 2001. [4] Santini, A., Ferracane, R., Aragn, A., & Ritieni, A. (2009). J. Sc. Food Agric., 89, 1145-115. Palabras clave: Tricotecenos, Agricultura ecolgica, Trigo, Avena, Cebada, Centeno, Espectrometra de masas. C.50.-DETERMINACIN FLUORIMTRICA DIRECTA DE FLUORURO EN AGUA CON ALUMINIO(III)PICOLINOILHIDRAZONA DEL SALICILALDEHIDO Mnuel-Vez, MP1; Albendin, G2; Arufe, MI2 1 Dpto. Qumica Analtica. 2rea de Toxicologa . Facultad de Ciencias del Mar y Ambientales. Universidad de Cdiz. Campus Ro San Pedro. 11510. Puerto Real (Cdiz). El in fluoruro es un importante parmetro de calidad del agua debido a su efecto beneficioso o txico a bajas o altas concentraciones, respectivamente. Tambin es conocido que el fluoruro afecta a varios tipos de plantas y, por consiguiente, los seres humanos y animales pueden sufrir intoxicaciones producidas por alimentos contaminados por fluoruro. Es usual realizar el anlisis de fluoruro mediante electrodo selectivo o colorimetra, si bien mediante determinaciones fluorimtricas, muy escasas en la bibliografa, se consiguen lmites de deteccin mucho ms bajos que con dichas tcnicas. En el presente estudio, se ha desarrollado un mtodo fluorimtrico directo para determinar concentraciones de fluoruro inferiores al nanogramo por mililitro. El mtodo se ha basado en la disminucin (quenching) de la fluorescencia del complejo formado entre el ligando picolinoilhidrazona del salicilaldehido y el in Al3+ en medio actico-acetato, por el in fluoruro. El referido complejo fluorescente ha sido profusamente estudiado, aplicado y publicado, por investigadores de nuestras reas y grupo de investigacin, para la determinacin de aluminio en diferentes tipos de aguas, disoluciones salinas y extractos de suelos, mediante mtodos directos, discontinuos o en flujo. Para la optimizacin de la emisin fluorescente del complejo se han estudiado sus caractersticas espectrales, en ausencia y presencia de iones fluoruro, as como su estabilidad a distintos pH, temperatura y los efectos de diferentes sales e iones extraos. Para conseguir ptimos calibrados se han evaluado las concentraciones del ligando e in Al3+, base para permitir determinar nanogramos por mililitro de fluoruro con adecuada precisin y exactitud; para la validacin de los parmetros analticos se han realizado diferentes estudios de recuperacin. El
XIX Congreso Espaol de Toxicologa mtodo propuesto ha sido aplicado para la determinacin de fluoruro en aguas minerales, aguas de pantanos, y aguas de suministro municipal. Palabras clave: Fluoruro, Fluorimetra, Quenching, Agua. C.51.-ESPECIACIN DE ARSNICO EN MUESTRAS DE ORINA TRAS LA INGESTA DE UN ALGA TIPO WAKAME Garca-Sartal, C; Barciela-Alonso, MC; Bermejo Barrera, P Departamento de Qumica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Facultad de Qumica, Avenida das Ciencias s/n, 15782, Universidad de Santiago de Compostela. Una de las vas de entrada del arsnico en el organismo humano, es a travs del consumo de alimentos de origen marino, entre ellos, las algas. La mayora de los mamferos metabolizan el arsnico inorgnico ingerido a DMA, especie de menor toxicidad, sin embargo existen otras especies como la AsB que se excretan directamente sin metabolizar. El alga Wakame presenta un elevado contenido en arsnico orgnico, arsenoazcares. El objetivo de este trabajo es identificar los posibles metabolitos excretados en la orina tras la ingesta de un alga rica en arsenoazcares. Para ello, se ha determinado la concentracin de arsnico total en diferentes muestras de orina pertenecientes a cuatro voluntarios, tras haber ingerido 150 g de alga tipo Wakame. Los voluntarios evitaron ingerir alimentos procedentes del mar durante los cuatro das anteriores y posteriores a la ingesta del alimento. El arsnico ha sido cuantificado en dichas muestras haciendo uso de la espectrometra de masas con fuente de plasma de acoplamiento inductivo (ICP-MS). Para ello, las muestras se han diluido 1:10 con HNO3 del 2% (v/v). Los resultados obtenidos sugirieron que la permanencia del arsnico en el cuerpo humano es de unas 3040 h para los cuatro individuos objeto de estudio. Adems, se ha procedido a realizar un estudio de especiacin de arsnico en las muestras de orina, emplendose, para ello, la cromatografa de intercambio aninico (AE) como tcnica de separacin y un tampn de hidrgeno carbonato amnico 20mM a pH 9,0 como fase mvil. El acoplamiento de la columna cromatogrfica con el ICP-MS nos ha permitido cuantificar, haciendo uso de estndares comerciales, hasta cuatro especies del elemento en las muestras (AsB, DMA, MMA y As (III)). Haciendo uso de Orbitrap-MS con fuente electrospray se han podido identificar y elucidar posibles estructuras para tres especies de arsnico que han eludo de la columna para las cuales no existen estndares especficos. Palabras clave: Arsnico, Orina, Wakame, ICP-MS, OrbitrapMS. C.52.-MYCOTOXIN ANALYSIS IN HUMAN URINE. PRELIMINARY STUDY. Ferrer, E; Rubert, J; Soler, C; Maes, J; Font, G Departament de Medicina Preventiva i Salut Pblica. Facultat de Farmcia. Universitat de Valncia. Av Vicent Andrs Estells s/n 46100 Burjassot (Spain). Mycotoxins might arrive to humans by different ways, but the most frequent one is by food intake. For this reason, the last decade the efforts of researchers and national authorities have been focused in order to assess occurrence of mycotoxin in foodstuff. However, variations in food processing, food intake, contamination levels, intestinal absorption, toxin distribution and excretion lead are individual variations that should be estimated in the analysis considering mycotoxins as a possible biomarkers. This study was based on the simultaneous extraction of AFB1, AFB2, AFG1, AFG2, OTA, ZON, DON, FB1, FB2, T-2 and HT-2 toxin in human urine by MYCO 6in1 immunoaffinity column (IAC) followed by LC-MS/MS detection, using triple quadrupole-linear ion trap mass spectrometer. QTrap mass spectrometer allowed the unambiguous identification of 11 mycotoxins in one run and its simultaneous determination at low concentration. Moreover, this instrument provided an extra tool for positive samples confirmation of the selected mycotoxins; an Information Dependent Acquisition (IDA) experiment, with selected reaction monitoring (SRM) as the survey scan and an enhanced product ion (EPI) scan. The optimization method showed good linearity (r>0.99), sensibility, repeatability and reproducibility criteria according to that established by the Commission Regulation 2002/657/CE. The developed method was validated: the limits of quantification (LOQs) were ranged from 1.2 to 35 g Kg- 1 for aflatoxin B2 and DON. Spiked extracts at LOQ and 100 times LOQ level, yielded average recoveries in the range of 88-116% with relative standard deviations (RSDs) less than 14%. On the other hand, the matrix effects were evaluated, and the corrections were not necessary, since the calculated matrix effects results showed that matrix effects were not significant or negligible. In this pilot study with 27 volunteers, OTA, DON and AFG2 were detected and confirmed. This survey of mycotoxins demonstrated the necessity to correlate the occurrence of mycotoxins in different foodstuffs and the human adsorption. This work was supported by the Spanish Ministry of Science and Innovation (AGL2010/17024/ALI). C.53.-DETERMINACIN DE MERCURIO Y ARSNICO EN PESCADO FRESCO, CONGELADO Y EN CONSERVA CONSUMIDO EN ANDALUCA Gil, F; Olmedo, P; Molina, I; Hernndez, AF; Pla, A. Dpto. Medicina legal y Toxicologa. Universidad de Granada. Los metales pesados constituyen probablemente los contaminantes ms significativos en el medio acutico y por ello el pescado es una de las principales fuentes de exposicin a ellos para el ser humano. El presente estudio determina las concentraciones de un metal pesado (Hg) y un metaloide (As) en muestras de pescado fresco, congelado y en conserva de consumo en Andaluca. Los niveles de Hg y As en pescado se determinaron mediante espectrofotometra de absorcin atmica utilizando un sistema automatizado de generacin de hidruros previo secado y digestin cida asistida por microondas. Se realiz un muestreo de las especies de pescado ms consumidas en Andaluca segn el Ministerio de Medio Ambiente y Medio Rural y Marino, seleccionando 25 especies de pescado fresco, 6 de pescado congelado (en ambos casos con 11 unidades por especie) y 12 especies de pescado en conserva (con 12 unidades por especie), sumando un total de 485 muestras. Tras el muestreo, se aprecia que el pescado que se consume en la Comunidad Autnoma Andaluza es de muy variada procedencia dependiendo de la especie, de modo que tan slo un 30% del pescado comercializado como fresco, procede de las costas andaluzas. En lo que respecta al Hg, los niveles medios en la mayora de las especies, expresados en g/g de pescado hmedo, se encuentran en el rango comprendido entre el lmite de deteccin y 0,2 g/g, excepto en 5 tipos de pescado donde se superaron estos niveles medios: pez espada (0,60 g/g), cazn (0,46 g/g), pinta roja (0,74 g/g), atn fresco (0,50 g/g) y atn en conserva (0,36 g/g). En lo que respecta al As, la gamba fresca (0,67 g/g), los berberechos en conserva (0,64 g/g) y las sardinas frescas (0,54 g/g) destacan sobre el resto que presentaron niveles generalmente bajos (usualmente inferiores a 0,25 g/g). Palabras clave: Biomonitorizacin, Exposicin, Evaluacin del riesgo, Toxicologa ambiental.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.54.-CARACTERIZACIN DE VINOS BLANCOS DE DOS DENOMINACIONES DE ORIGEN ESPAOLAS EN FUNCIN DEL CONTENIDO MINERAL Hernndez-Moreno, D1; Garca-Rodrguez, G2; Soler, F1; PrezLpez, M1 1 Unidad de Toxicologa. Facultad de Veterinaria (UEX). Avda de la Universidad s/n. 10003. Cceres. E-mail: davidhm@unex.es. 2 Centro de Salud (SES). Avenida Virgen de la Soledad 7. 10193 Talavan (Cceres). El vino es una de las bebidas ms consumidas del planeta, constituyendo un importante agente comercial, sometido por tanto a estrictas medidas de control y autentificacin. En su composicin entran una gran cantidad de compuestos, entre los que se encuentran los elementos minerales, los cuales, en la bsqueda de herramientas para asegurar la autenticidad del vino basadas en pruebas no subjetivas, pueden ayudar a definir la sea de identidad de una Denominacin de Origen. Este hecho se basa en que la composicin mineral del vino est influenciada por factores ambientales, tales como el clima, el suelo, la variedad cultivada y la forma de almacenado de la uva, por ejemplo, todo lo cual crea unas especiales condiciones que se deberan ver reflejadas en el producto final certificado. En el presente estudio se ha analizado el contenido en 19 elementos minerales en vinos blancos de dos denominaciones de origen espaolas, Ras Baixas y Ribera del Guadiana, para posteriormente emplearlo en un anlisis estadstico multivariante para discriminar los caldos en funcin de su origen geogrfico. Al realizar el estudio de componentes principales (tcnica de visualizacin usada para lograr una reduccin de la dimensionalidad), se observ que las cuatro primeras componentes acumularon ms del 62% de la varianza original, resultando estadsticamente significativas para el estudio. Los elementos Li, Ba, Ni, Al, Cu, Mn, Zn y K mostraron su relevancia dentro de la primera de estas componentes, mientras que Pb, Cd y Zn lo hicieron en la segunda. Se aplic as mismo un estudio linear discriminante para maximizar la varianza entre categoras de cara a la exploracin de la estructura de los datos. En este caso, las variables que influyeron ms (p<0,001) en el proceso de clasificacin de los caldos fueron las correspondientes a los elementos Ba, Cd, Co, Li, Mg, Mn y Zn. Palabras clave: Vino, Mineral, Caracterizacin. C.55.-MICROEXTRACCIN EN GOTA INMERSA: UN MTODO ANALTICO SEMIAUTOMATIZADO PARA CUANTIFICAR CROMO (VI) EN AGUAS Pena, FJ; Senra, S; Cabaleiro, N; De La Calle, I; Gil, S; Costas, M; Lavilla, I; Bendicho, C. Departamento de Qumica Analtica y Alimentaria, rea de Qumica Analtica, Facultad de Qumica, Universidad de Vigo, As Lagoas-Marcosende s/n, 36310 Vigo. E-mai l: bendicho@uvigo.es El cromo existe en varios estados de oxidacin desde II hasta +VI, pero en estudios medioambientales, los estados de oxidacin Cr(III) y Cr(VI) son los ms importantes. Estas especies difieren en carga y en propiedades fisicoqumicas, y como consecuencia, en su reactividad qumica, biolgica y bioqumica. El Cr(III) es un nutriente esencial en personas y animales y juega un papel importante en el funcionamiento del metabolismo de los lpidos, la glucosa y las protenas, mientras que el Cr(VI) es nocivo para los sistemas biolgicos debido a sus efectos mutagnicos y genotxicos. Por tanto, es necesario investigar la movilidad y biodisponibilidad de una sustancia potencialmente peligrosa en relacin a sus posibles efectos medioambientales. As, los compuestos de Cr(VI), excepto los cromatos de algunos metales como Pb, Be, Sr, Ca, Ag y Zn, son altamente solubles, mviles y biodisponibles en comparacin con el bajo nmero de
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compuestos solubles de Cr(III). Por lo tanto, es ms importante obtener informacin sobre la especiacin de cromo, en concreto de la especie Cr(VI), que acerca del contenido de cromo total en muestras medioambientales. La especiacin de cromo normalmente se refiere a la cuantificacin de los dos principales estados de oxidacin, III y VI. En este trabajo se ha acoplado la microextraccin en gota inmersa con el anlisis mediante inyeccin sequencial para la deteccin de Cr(VI) a nivel ultratraza utilizando para ello la espectrometra de absorcin atmica electrotrmica. La novedad del mtodo consiste en la formacin de los quelatos Cr(VI)-APDC y su posterior extraccin en una microgota de disolvente orgnico inmiscible con el agua. El lmite de deteccin obtenido fue de 0.02 g/L de Cr(VI). Las ventajas del mtodo son: excelente lmite de deteccin, consumo mnimo de disolventes, automatismo y reduccin de residuos txicos. El trabajo se ha realizado con cargo al proyecto del Ministerio de Ciencia e Innovacin CTQ2009-06956/BQU y del contratoprograma para grupos de Referencia de la Universidad de Vigo (09VIA08). 1.Arun K. Shanker, Carlos Cervantes, Herminia Loza-Tavera, S. Avudainayagam, Environment International, 31(2005) 739753. 2.Francisco Pena, Isela Lavilla, Carlos Bendicho, Spectrochimica Acta Part B, 63(2008)498. Palabras clave: Cromo (VI), Microextraccin en gota, Miniaturizacin, Espectrometra de absorcin atmica electrotrmica. C.56.-METDO ANALTICO MINIATURIZADO BASADO EN LA REACCIN DE GRIESS PARA LA DETECCIN DE NITRITO Cabaleiro, N; Costas, M.; De La Calle, I; Senra, S; Pena, FJ; Gil, S; Lavilla, I; Bendicho, C Departamento de Qumica Analtica y Alimentaria, rea de Qumica Analtica, Facultad de Qumica, Universidad de Vigo, As Lagoas-Marcosende s/n, 36310 Vigo. E-mail: bendicho@uvigo.es El nitrito es una especie de nitrgeno ubicua en sistemas medioambientales, alimentarios, industriales y fisiolgicos. Aunque se encuentra de forma natural en sistemas acuticos, la actividad industrial y urbana ha dado lugar a elevadas concentraciones de este anin, que se genera como resultado de la oxidacin de amonaco o de la reduccin de nitratos. Como consecuencia, su acumulacin potencial en acuferos y suelos representa un riesgo para la salud humana, ya que el paso de nitrito a la circulacin sangunea da como resultado la conversin irreversible de hemoglobina a metahemoglobina, comprometiendo con ello el consumo y transporte de oxgeno. El nitrito a su vez es precursor de distintas N-nitrosaminas, conocidos agentes cancergenos. Debido a esto, son diferentes las agencias internacionales que han establecido lmites legales para nitritos en aguas de consumo [1]. As, el control de este anin se hace necesario como resultado de su toxicidad en aguas naturales y de consumo, y adems, puede ser utilizado como un indicador de la contaminacin orgnica del agua. Entre las distintas metodologas propuestas para su monitorizacin, el mtodo colorimtrico basado en el ensayo de Griess constituye, debido a su sencillez, el mtodo de referencia actual para la determinacin de nitrito en aguas [2]. Recientemente, han sido propuestos otros procedimientos de microextraccin en fase lquida, que mejoran el ensayo en trminos de selectividad, sensibilidad y reducen notablemente el consumo de reactivos necesarios para la determinacin [3]. El trabajo se ha realizado con cargo al proyecto del Ministerio de Ciencia e Innovacin CTQ2009-06956/BQU y del contratoprograma para grupos de Referencia de la Universidad de Vigo
XIX Congreso Espaol de Toxicologa (09VIA08) 1. World Health Organization, Nitrate and Nitrite in Drinking Water. 2007 2. AOAC, Method 36.1.21 (16th ed.), Official Methods of Analysis, Washington, DC (1995). 3. S. Senra-Ferreiro, F. Pena-Pereira, I. Lavilla, C. Bendicho, Anal. Chim. Acta 668 (2010) 195-200. Palabras clave: Nitrito, Anin txico, Aguas, Monitorizacin. C.57.-PLOMO Y CADMIO EN PECES LITORALES DE LA COSTA NORTE DE GRAN CANARIA Afonso, A1; Lozano, G1; Gutirrez A J2; Rubio, C2; Hardisson, A2 1 rea de Zoologa, Facultad de Biologa de la Universidad de La Laguna, Campus de Anchieta, 38206. La Laguna. Tenerife. Espaa. 2rea de Toxicologa, Facultad de Medicina de la Universidad de la Laguna, Campus de Ofra s/n, 30871. La Laguna. Tenerife. Espaa. En este trabajo se han determinado las concentraciones de metales txicos (Pb y Cd) en el msculo de cuatro especies de peces litorales: el sargo blanco Diplodus sargus cadenati, la salema Sarpa salpa, la vieja Sparisoma cretense, y la lisa o lebrancho Chelon labrosus, objeto de la pesca artesanal y de consumo corriente entre la poblacin insular de Gran Canaria. Adems, se ha evaluado la seguridad del consumo de estas cuatro especies, determinando el aporte de Pb y Cd a la ingesta semanal provisional tolerable (PTWI) de las mismas. Para el anlisis de metales de las muestras se utiliz un espectrofotmetro de absorcin atmica Perkin Elmer 4100 ZL, con un horno de grafito Perkin Elmer y un muestreador automtico AS 70. El estudio estadstico de los datos obtenidos se realiz mediante el paquete SPSS versin 19.0. En cuanto al contenido de plomo, se encontraron diferencias significativas entre la vieja (Sparisoma cretense) y el resto de las especies estudiadas, siendo adems sta primera la que menores concentraciones present (24,319 g/Kg 11,60). Para el cadmio, encontramos diferencias significativas entre las concentraciones de este metal en el sargo (Diplodus sargus cadenati) y el resto de las especies, siendo adems esta primera especie la que mayor contenido present (2,060 1,77 g/Kg). Respecto al aporte a la ingesta semanal provisional tolerable (PTWI) de plomo y cadmio, encontramos que la especie que ms aporta a la PTWI del plomo es la lisa (Chelon labrosus) (1,51%). Para el cadmio, la especie de mayor aporte a la PTWI de este metal fue el sargo (Diplodus sargus) (0,15%). Estos aportes resultan evidentemente bajos y no representan ningn riesgo por el consumo de estas especies por parte de la poblacin canaria. Palabras clave: Plomo, Cadmio, Espectrofotometra de absorcin atmica, Peces, Alimentacin, Gran Canaria. C.58.-INGESTAS DE HIDROCARBUROS AROMTICOS POLICCLICOS DE UNA POBLACIN UNIVERSITARIA Mateos, C; Aguilar, MV; Gonzlez-Muoz, MJ; Martnez Para, MC; Meseguer, I Departamento de Nutricin, Bromatologa y Toxicologa. Universidad de Alcal de Henares. Introduccin: La presencia de hidrocarburos aromticos policclicos en los alimentos es frecuente, especialmente en aquellos que son sometidos a temperaturas elevadas, por ejemplo la fritura o el asado a la brasa, o a determinados mtodos de conservacin como el ahumado. Los Hidrocarburos Aromticos Policclicos (HAPs) y sus derivados estn asociados al aumento en la incidencia de diversos tipos de cncer en el hombre. De hecho, de aproximadamente un centenar de estos compuestos, alrededor de veinte se ha demostrado que poseen actividad carcinognica, mutagnica o inmunosupresora. Debido a las mltiples fuentes de estos compuestos y al aumento del gusto por los alimentos demasiados hechos, puede ocurrir que determinados segmentos de la poblacin estn sometidos a dosis superiores a las recomendadas. Objetivos: Estimar la ingesta semanal de estos compuestos pirorgnicos, los hidrocarburos aromticos policclicos totales y cancergenos, en una poblacin universitaria, que por sus hbitos alimentarios puede representar una poblacin de riesgo a estos txicos. Metodologa: La poblacin estudiada ha estado constituida por 350 alumnos (20-24 aos) matriculados en diversos tipos de licenciaturas de la Universidad de Alcal de Henares (Madrid). De ellos un 21,84% han sido varones y un 78,16% mujeres. La evaluacin de la ingesta de los alimentos se ha realizado mediante un cuestionario de frecuencia de consumo, previamente validado. La cuantificacin de contaminantes se ha realizado mediante el programa on line Ribefood. Resultados: La ingesta semanal de hidrocarburos aromticos policclicos totales a travs de la dieta es de 0,990,40 g mientras que los HAP cancergenos es de 0,110,05 g/semana, no existiendo en ningn caso diferencias estadsticamente significativas en funcin del gnero ni del hbito de fumar. La proporcin de HAPs cancergenos/HAPs totales es muy inferior al detectado en pases como Italia u Holanda donde los derivados HAPs cancergenos representaban la mitad de los HAPs totales. Palabras clave: Hidrocarburos aromticos policclicos, Dieta, Universitarios. C.59.-EXPOSICIN A CONTAMINANTES AMBIENTALES DE UNA POBLACIN UNIVERSITARIA A TRAVS DE LA DIETA Mateos, C; Meseguer, I; Gonzlez-Muoz, MJ; Martnez Para, MC; Aguilar MV Departamento de Nutricin, Bromatologa y Toxicologa. Universidad de Alcal de Henares. Introduccin: La presencia de contaminantes ambientales en los alimentos no es un hecho aislado, por ello, a travs de la dieta, todos estamos expuestos. Son stos unos compuestos que, a pesar de que no suelen afectar a los caracteres organolpticos de los alimentos, pueden tener consecuencias en la salud pblica, incluso a pequeas concentraciones. A pesar de los muchos esfuerzos que se realizan para controlar sus niveles, es imposible conseguir niveles cero debido a la eclosin de procesos industriales y tecnolgicos experimentada en las ltimas dcadas. Objetivos: Estimar la ingesta de contaminantes medioambientales (metales pesados, dioxinas, compuestos policlorados, plaguicidas) de una poblacin universitaria, evaluando su exposicin cuantitativa a estos compuestos as como identificar subgrupos poblacionales de riesgo, as como evaluar la eficacia del sistema de control de proteccin de salud pblica existente en la Comunidad de Madrid a travs del control de los LMR en alimentos. Metodologa: El estudio se ha realizado con estudiantes universitarios de 20-24 aos (n= 350; de los cuales 21,84% han sido varones y un 78,16% mujeres, 33,78% fumadores y 66,21% no fumadores) de la Comunidad de Madrid. En la realizacin de este trabajo se ha seguido el protocolo establecido en la Declaracin de Helsinki. Para evaluar la ingesta usual de alimentos y, por ende de contaminantes, se ha empleado un cuestionario de frecuencia de consumo previamente validado. La cuantificacin de contaminantes se ha realizado mediante el programa on line Ribefood. Resultados: El contenido estimado de contaminantes ambientales muestra diferencias significativas en funcin del gnero para el mercurio, plomo, derivados polihalogenados y hexanoclorobenceno, siendo este contenido superior en las
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa mujeres. Respecto al hbito de fumar, no entraa diferencias estadsticas en la ingesta de este tipo de contaminantes. Un 63,51% de los individuos estudiados supera la ingesta mxima tolerable de dioxinas y furanos debido al elevado consumo de carne, pescado y productos lcteos. Palabras clave: Metales pesados, Derivados halogenados, Plaguicidas. C.60.-EVALUACIN DEL CONTENIDO DE CADMIO EN CONSERVAS DE ATN Y BONITO: REPERCUSIONES TOXICOLGICAS Melgar, MJ; Alonso, J; Roca, I; Garca, MA rea de Toxicologa de la Facultad de Veterinaria Universidad de Santiago de Compostela. (Campus de Lugo) E-mail: mj.melgar@usc.es La contaminacin por metales pesados es de gran importancia en el medio acutico. Los atunes (Thunnus species) y bonitos (Sarda species) son muy sensibles a esta contaminacin porque son especies relativamente longevas y adems, al estar en la parte ms alta de la cadena alimentaria marina tienden a la bioacumulacin trfica. El objetivo de este trabajo fue la determinacin del contenido de cadmio en muestras de atn y bonito en conserva y en fresco, el anlisis estadstico de los factores que influyen en su contenido (envase, preparacin y marca), y la estimacin del riesgo toxicolgico que se derive de su consumo, teniendo en cuenta la importancia nutricional que suponen para la dieta, tanto el atn como el bonito. 110 muestras, procedentes de centros comerciales, fueron sometidas a un proceso de digestin, en medio cido, en una estacin de microondas. Las concentraciones de cadmio en las muestras digeridas, se determinaron por espectrometra de masas con fuente de plasma de acoplamiento inductivo (ICP-MS). Como resultados, destacar que el contenido de cadmio decreci segn el orden: fresco > enlatado > vidrio, considerando las presentaciones estudiadas, y siendo el valor de la menos contaminada 0,0071 g Cd/g. Considerando el tipo de preparacin, los niveles de cadmio fueron: aceite > escabeche ~ natural. En cuanto a las marcas comerciales no se observaron diferencias estadsticamente significativas. Finalmente, ninguna muestra excedi el lmite legal, establecido para el cadmio en 0,1 g/g. Teniendo en cuenta la participacin de atn y bonito, fresco y en conserva, en la dieta de los espaoles, puede considerarse que el aporte de cadmio, por consumo de estas especies, no supone ningn riesgo de tipo toxicolgico; sin embargo ha de tenerse en cuenta el aporte de este metal por otros alimentos y otras vas. Agradecimientos: A la Xunta de Galicia que subvencion el Proyecto INCITE08PXB261087PR. Palabras clave: Cadmio, Atn, Bonito, ICP-MS. C.61.-SEGURIDAD ALIMENTARIA: RESIDUOS DE NICARBACIN, DICLAZURIL Y ROBENIDINA EN HUEVOS Eguaras, M; Girons, G; Prez de Ciriza, JA; Izu, M; Prez, E; Siz, I Instituto de Salud Pblica de Navarra C/ Leyre 15 31003 Pamplona. Navarra. La coccidiasis es una enfermedad endmica en la produccin avcola causada por un grupo de protozoos pertenecientes al gnero Eimeria (coccidios). Las medidas higinicas no son suficientes para prevenirla, por ello y para controlar o impedir el desarrollo de los coccidios, se aaden anticoccidianos a los piensos. El nicarbacin, diclazuril y robenidina son anticoccidianos de sntesis qumica que idealmente no deberan dejar residuos. Sin embargo, las contaminaciones cruzadas de los piensos pueden provocar su aparicin en los alimentos de origen animal. Hasta febrero del 2010 no existan lmites para estos residuos. Actualmente, la normativa vigente para el contenido de estos residuos en huevo est contenida en el Reglamento n124/2009 de la Comisin. El Laboratorio del Instituto de Salud Pblica de Navarra ha desarrollado un mtodo de anlisis basado en una extraccin con acetonitrilo, concentracin por evaporacin en corriente de nitrgeno y posterior determinacin por HPLC-MS/MS. La tcnica est validada y actualmente acreditada por ENAC, habindose obtenido los valores del lmite de decisin y lmite de determinacin segn establece la Decisin de la Comisin 2002/657. Se ha llevado a cabo una revisin de las muestras de huevo analizadas durante el periodo 2006-2010 en la zona norte de Espaa siendo un total de 462. En un 24% se ha detectado presencia de anticcocidianos. El compuesto ms frecuentemente encontrado es el Nicarbacin, oscilando las concentraciones entre 0,1 y 40 g/Kg. Sin embargo, estas concentraciones se encuentran por debajo de lo marcado actualmente por la legislacin. Aunque los residuos obtenidos no suponen riesgo para la salud (datos toxicolgicos de la WHO), deberan tomarse medidas para evitar esta contaminacin producida probablemente en las plantas de produccin de los piensos, aunque no pueden descartarse otras causas como el error en las formulaciones o el uso incorrecto de los anticoccidianos. Palabras clave: Nicarbacin, Diclazuril, Robenididna, HPLCMS/MS, Huevo. C . 6 2 . - E VA L U A C I N D E L A S E G U R I D A D D E L ANTIBITICO AVILAMICINA EN POLLOS DE CONSUMO HUMANO Torres, AI; Martnez, MA; Ares, I; Martnez-Larraaga, MR; Anadn, A Departamento de Toxicologa y Farmacologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, 28040 Madrid. La avilamicina, antibitico oligosacrido del grupo de las ortomicinas, fue autorizado en la UE como aditivo alimentario promotor del crecimiento hasta el 1 de enero del 2006, fecha que fue prohibido. Actualmente, est autorizado como agente teraputico frente a infecciones entricas en pollos, pavos, cerdos y conejos por su amplio espectro de actividad frente a bacterias Gram (+). En el aspecto de seguridad alimentaria, se han realizado estudios de toxicidad para fijar el NOAEL e IDA. Se ha establecido la IDA toxicolgica 115 g/Kg (6900 g/persona) aplicando un factor de seguridad 100 a un NOAEL de 11,5 mg/Kg p.c. en estudios de reproduccin de 3 generacin en ratas, NOAEL basado en un aumento de peso del hgado en recin nacidos. Tambin se ha establecido la IDA microbiolgica 2,8 g/Kg (168 g/persona), 40 veces < IDA toxicolgica. Debido a que los residuos de avilamicina no muestran actividad antimicrobiana, la IDA toxicolgica es ms relevante para el anlisis del riesgo. La UE fija los LMR en pollos para la avilamicina siendo el residuo marcador el cido dicloroisoeverninico. En el presente estudio tras el rgimen de dosificacin oral recomendado, 100 mg avilamicina/Kg p.c. durante 21 das, en pollos de engorde se establece el Tiempo de Retirada (WT) previo al sacrificio que asegure el cumplimiento de los LMR legislados. El cido dicloroisoeverninico fue analizado en muestras de musculo, piel+grasa, hgado y rin a diferentes WT (6 animales/WT) tras la ltima dosificacin por una tcnica validada de HPLC-MS/MS. El WT observado fue de 0 das. Los resultados obtenidos demuestran a efectos de seguridad alimentaria un riesgo muy bajo de residuos y un alto
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa nivel de seguridad de uso de la avilamicina en la especie animal de consumo pollos. Financiado por los Proyectos Consolider-Ingenio 2010 Ref. CSD/2007/00063 y Ref. n S2009/AGR-1469, MEC, y Ref. GR58/08 UCM-BSCH, Madrid. Palabras clave: Avilamicina, Biodisponibilidad, Residuos, Pollos. C.63.-SO2 EN DIFERENTES DENOMINACIONES DE ORIGEN DE LAS ISLAS CANARIAS Ben-Charki, N1,2; Revert, C1; Rubio, C1; Gutirrez, AJ1; Hardisson, A1 1 rea de Toxicologa de la ULL. 2Instituto Canario de Calidad Agroalimentaria. Santa Cruz de Tenerife. El SO2 presente en el vino tiene carcter antioxidante, antimicrobiano e inhibidor del pardeamiento. El SO2 se genera en el vino de forma natural tras la fermentacin pero, su cantidad es tan pequea que, es necesaria la adicin de aditivos de SO2 o derivados para alcanzar la funcionalidad de conservador. En exceso puede alterar las caractersticas gustativas. Los vinos blancos, sobre todo los dulces, para evitar el pardeamiento, poseen niveles de SO2 ms altos que los vinos tintos. Los niveles de SO2 Totales estn regulados por el Reglamento (CE) n 606/2009, con unos niveles mximos permitidos de 200 mg/L en vino blanco y 150 mg/L en vino tinto. Segn la Directiva Comunitaria 2003/89/CE, los vinos se ven obligados a llevar una etiqueta que seale la presencia de SO2 cuando ste aditivo se encuentre en concentraciones superiores a 10 mg/L. Debido a su potencial toxicidad especialmente para individuos asmticos, se ha establecido una IDA (Ingesta Diaria Admisible) de 0,7 mg de SO2 por kilo de peso corporal y da. Material y Mtodo: Un total de 188 muestras de vino (105 de vino tinto y 83 de vino blanco) de diferentes D.O. de las Islas Canarias fueron sometidas a estudio mediante el mtodo yodomtrico oficial de la O.I.V., en el Instituto Canario de Calidad Agroalimentaria (ICCA). Las D.O. consideradas fueron las siguientes: La Palma (Isla de La Palma), La Gomera (Isla de La Gomera), Tacoronte- Acentejo, Valle de Gimar y Abona (Isla de Tenerife). Resultados: Los contenidos medios de SO2 Totales obtenidos fueron de 99,7138,457 mg/L en vino blanco y de 64,9132,706 mg/L en vino tinto por lo que se cumplen los niveles mximos permitidos. Por D.O. los niveles medios detectados fueron: La Palma 82,2131,66 mg/L y 45,0029,76 mg/L; La Gomera 88,5026,21 mg/L y 82,3019,49 mg/L; Tacoronte-Acentejo 126,9133,53 mg/L y 63,3917,34 mg/L; Valle de Gmar 113,6128,54 mg/L y 94,1156,83 mg/L; y Abona 98,7448,84 mg/L y 69,3540,12 mg/L, para vinos blancos y tintos respectivamente. Palabras clave: Sulfitos, Sulfuroso, Vinos Canarios, Toxicidad, Conservante. C.64.-ADSORCIN DE MICOTOXINAS MEDIANTE BIOPOLMEROS Ruiz, M1; Rodilla, V2; Pozas, R1; Abad, J1; Sastre, AM3 1 Departament d'Enginyeria Qumica, Universitat Politcnica de Catalunya E.P.S.E.V.G., Avda. Victor Balaguer s/n. 08800 Vilanova i la Geltr, Barcelona. 2Departamento de Fisiologa, Farmacologa y Toxicologa, Universidad Cardenal Herrera CEU. Avda. Seminario s/n. 46113 Moncada, Valencia. 3Departament d'Enginyeria Qumica, Universitat Politcnica de Catalunya E.T.S.E.I.B., Diagonal 647, 08028 Barcelona. En la actualidad se conocen ms de 300 micotoxinas diferentes, siendo las ms destacadas las aflatoxinas, el deoxinivadenol, las fumonisinas, las ocratoxinas, la toxina T-2 y la zearalenona. Existen diferentes mtodos fsicos, qumicos y biolgicos para la reduccin de las micotoxinas en los alimentos destinados a los animales. Los ms utilizados actualmente son los mtodos fsicos, especialmente la adsorcin con arcillas, las cuales al no ser digeribles presentan inconvenientes durante el proceso de digestin. El objetivo de este trabajo es poder dar una alternativa al uso de las arcillas como adsorbentes de micotoxinas. El adsorbente propuesto en nuestro estudio es el alginato de calcio, biopolmero fabricado a partir del alginato de sodio. El alginato de calcio presenta ventajas frente a las arcillas, pues al ser un biopolmero es biocompatible con el organismo no creando problemas digestivos. Las micotoxinas objeto de nuestro estudio han sido la zearalenona y el dioxinivalenol. La experimentacin realizada se ha centrado en la obtencin de la capacidad de adsorcin del alginato de calcio para dichas micotoxinas. A partir de soluciones de micotoxinas de concentracin conocida (25 g/mL) se han realizado estudios en sistema bacth, aadiendo a cada una de las soluciones una cantidad de adsorbente determinada (0,05-1,5 g). Las concentraciones residuales de micotoxina de las diferentes muestras fueron analizadas mediante HPLC acoplado a un detector UV. Los resultados obtenidos nos muestran unos valores de adsorcin superiores a los indicados en la bibliografa mediante la utilizacin de montmorillonita, uno de los adsorbentes ms utilizados actualmente para la eliminacin de micotoxinas en la alimentacin para animales. Palabras clave: Micotoxinas, Adsorcin, Alginato de calcio. C.65.-Pb Y Cd EN SEDIMENTOS BAJO INSTALACIONES ACICOLAS EN LA COSTA DE LA ISLA DE TENERIFE Hernndez-Snchez, C1; Rubio, C1; Riera, R2; Gutirrez, AJ1; Hardisson, A1 1 rea de Toxicologa de la Universidad de La Laguna. 2Centro de Investigaciones Medioambientales del Atlntico SL. Introduccin: La calidad de los sedimentos ha sido reconocida como un importante indicador de la contaminacin antropognica. El COMPENDIO DE CALIDAD MEDIOAMBIENTAL PARA LA PROTECCIN DE LA VIDA ACUTICA MARINA (2000) establece, para una isla volcnica como Nueva Zelanda (comparable a Tenerife), un lmite inferior a partir del cual comienza el riesgo ambiental de 1,2 mg/Kg para el Cd y de 47 mg/Kg para el Pb. Material y mtodo: Se establecieron 4 puntos de muestreo de sedimentos. Dos puntos de muestreo se fijaron bajo dos jaulas de acuicultura (puntos de Impacto 1 y 2), un punto de muestreo se localiz cercano a stas (punto de Influencia) y el punto Control se situ alejado de las jaulas. 22 muestras de profundidades entre 2,5 y 5 cm fueron extradas. Para el procesado de las muestras se recurri a la digestin con agua regia. Los metales Pb y Cd fueron determinados por Espectrofotometra de Absorcin Atmica de Llama. Resultados y discusin: Las concentraciones en mg/Kg obtenidas para Cd fueron las siguientes: 0,66 0,22 (pto de Impacto 1) y 0,85 0,05 (pto de Impacto 2), 0,64 0,09 (pto de Influencia) y 0,82 0,14 (pto Control). Las concentraciones encontradas para Pb en mg/Kg fueron: 12,34 1,79 (pto de Impacto 1) 13,90 1,35 (pto de Impacto 2); 11,84 3,87 (pto de Influencia) y 12,21 0,59 (pto Control). Las concentraciones obtenidas de Cb y Pb en los sedimentos estn por debajo del lmite inferior establecido por el COMPENDIO DE CALIDAD MEDIOAMBIENTAL PARA LA PROTECCIN DE LA VIDA ACUTICA MARINA. No se observ un gradiente de contaminacin entre los puntos analizados (Impacto-Influencia-Control), siendo indicativo de que la actividad acucola instalada en la costa de Tenerife Norte no es una fuente de Pb y Cd para los sedimentos situados bajo las jaulas de acuicultura.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Palabras claves: Plomo, Cadmio, Acuicultura, Sedimentos, EAA. C.66.-ESTUDIO DE RESIDUOS DE AMINOGLUCSIDOS EN PRODUCTOS DE ORIGEN ANIMAL MEDIANTE HPLC-MS/MS Izu, M; Eguaras, M; Girons, G; Oscz, M; Prez de Ciriza, JA; Prez, E; Siz, I Instituto de Salud Pblica de Navarra C/ Leyre 15 31003 Pamplona. Navarra. Los agentes inhibidores o antimicrobianos utilizados de forma fraudulenta, indiscriminada y abusiva, sin atender a los principios de la buena prctica veterinaria pueden suponer un riesgo para la salud de los consumidores. Los problemas de toxicidad aguda son poco probables pero pueden provocar reacciones de hipersensibilidad y su uso continuado perece tener relacin directa con la aparicin de resistencias bacterianas. Dentro del grupo de aminoglucsidos, se han estudiado la Dihidroestreptomicina, Estreptomicina, Espectinomicina, Gentamicina y Neomicina. Los mtodos de anlisis microbiolgicos de criba, permiten conocer de forma genrica la presencia de inhibidores del crecimiento bacteriano, pero no proporcionan informacin estructural siendo necesaria una confirmacin qumica. Las propiedades fsico-qumicas de los aminoglucsidos hacen necesario utilizar mtodos sensibles y especficos como la cromatografa lquida con deteccin de masas/masas para su determinacin. Las Agencias reguladoras de la Unin Europea han establecido los Lmites Mximos de Residuos (LMRs) segn el tipo de producto, oscilando entre 50 y 1000 g/Kg para los diferentes compuestos. Como criterio de seleccin de muestras fue que hubieran resultado positivas en el test de criba durante el periodo 20062010 en la zona norte de Espaa. En el Laboratorio de Salud Pblica de Navarra se ha desarrollado un mtodo de anlisis basado en una extraccin con acetonitrilo y posterior purificacin slida con cartuchos Oasis MCX para la Neomicina y Gentamicina y con cartuchos ACCELL PLUS para la Espectinomicina, Estreptomicina y Dihidroestreptomicina. Se analizaron un total de 118 muestras confirmndose presencia de aminoglucsidos en un 15% de ellas. La Dihidroestreptomicina fue el compuesto mayoritariamente encontrado. Los porcentajes confirmados fueron bajos considerando su positividad en el test de criba. Los 5 compuestos analizados son los de mayor empleo, pero se puede estar utilizando principios activos del grupo de los aminoglucsidos pero distintos de los productos citados. Tampoco puede descartarse falta de especificidad hacia los aminoglucsidos en los mtodos de criba. Palabras clave: Inhibidores, Aminoglucsidos, HPLC, Espectrometra masas, Dihidroestreptomicina. C.67.-CONTAMINANTES CLORADOS (PLAGUICIDAS Y PCBs) EN CANALES DE OVINO Soler, F; Hernndez-Arnguez, M; Hernndez, D; Mguez, MP; Prez-Lpez, M Unidad de Toxicologa. Dpto. de Sanidad Animal. Facultad de Veterinaria. Universidad de Extremadura. Avda. de la Universidad s/n. Cceres (solertox@unex.es). La presencia de residuos de plaguicidas y contaminantes ambientales en los alimentos supone la principal va de entrada de los mismos al ser humano. Por ello, el desarrollo y puesta en marcha de planes de muestreo y control de los mismos est establecido oficialmente como medida de seguridad alimentaria, si bien a veces el nmero de anlisis realizados no es el suficiente. De distintos mataderos de Extremadura se muestrearon un total de 311 canales de cordero procedente de distintos cebaderos, tomando muestras de tejido graso perirrenal. Tras adicin de patrones internos la grasa se someti a una purificacin con cido sulfrico, siendo el extracto final analizado mediante GC-MS con detector en modo ionizacin qumica negativa para distintos plaguicidas clorados (HCHs, heptacloro, heptaclor epxido, aldrn, endosulfan sulfato y DDT y derivados) y 15 PCBs. Los lmites de cuantificacin se situaron entre 1-10 ng/g, netamente inferiores a los lmites mximos de residuos marcados por la legislacin vigente (Reglamento 149/2008). Ninguna muestra contuvo PCBs por encima del lmite de cuantificacin. De los residuos de plaguicidas, los porcentajes de presentacin en las muestras (valores superiores al lmite de cuantificacin) fueron los siguientes: DDE (100%), beta-HCH (93%), HCB (35%), lindano (22%), alfa-HCH (19%), endosulfn sulfato (8%), heptacloro epxido (6%), DDT (5%) y TDE (2%). Del total de muestras nicamente 5 superaron el LMR para el beta-HCH y 3 para el lindano, estando todas las dems por debajo del LMR. Se puede concluir, por tanto, que el consumo de carne de cordero no representa ningn riesgo para la salud, si bien se deberan investigar los factores (geogrficos, de alimentacin, etc) que contribuyen a que aparezcan de manera muy frecuente residuos del beta-HCH, llegando a superar incluso el LMR propuesto. Palabras clave: Residuos, Clorados, Grasa, Ovino, Seguridad alimentaria. C.68.-ALTERACIONES HEPTICAS Y RENALES INDUCIDAS POR CILINDROSPERMOPSINA EN TILAPIAS: INFLUENCIA DE LA VA DE EXPOSICIN 1 Gutirrez-Praena, D1; Jos, A ; Pichardo, S1; Moyano, MR2; Blanco, A3; Camen, AM1 1 rea de Toxicologa, Facultad de Farmacia, Universidad de Sevilla. C/ Profesor Garca Gonzlez 2, 41012, Sevilla. 2 Departamento de Farmacologa, Toxicologa y Medicina Legal y Forense.Universidad de Crdoba. Campus de Rabanales Carretera Madrid-Cdiz s/n. 14071, Crdoba. 3Departamento de Anatoma y Anatoma y Patologa comparativa. Universidad de Crdoba. Campus de Rabanales Carretera Madrid-Cdiz s/n. 14071, Crdoba. La presencia de la cianotoxina cilindrospermopsina (CYN), producida por diversos gneros de cianobacterias (p.ej. Cylindrospermopsis, Aphanizomenon), es cada vez ms ubicua en distintos reservorios de agua, por lo que est considerada como un peligro emergente a nivel mundial. Diferentes organismos acuticos, pueden estar expuestos a CYN, por lo que resulta de inters abordar los estudios acerca de su toxicidad en peces, prcticamente inexistentes. En la presente investigacin, se expusieron cuatro lotes de Tilapias (Oreochromis niloticus) a una dosis nica de 200 g CYN/Kg p.c., utilizando dos vas de administracin: va oral, mediante sonda nasogstrica (utilizando 0,5 mL de una disolucin de NaCL al 0,9% (w/v) como vehculo) y por va intraperitoneal (i.p.). Dos lotes ms, correspondientes a los respectivos lotes control, recibieron el vehculo (0,5 mL de NaCl al 0,9% w/v) por cada va considerada. Sacrificados los peces a las 24 h de exposicin, se extrajeron muestras de hgado y rin, y se procedi al estudio de las alteraciones histopatolgicas, mediante microscopa ptica y electrnica. Los peces tratados con CYN por va oral presentaron un ligero proceso degenerativo en hgado, observndose acumulacin de glucgeno y vesculas de grasa. Estas lesiones (degeneracin glucognica, esteatosis) son ms manifiestas en el parnquima heptico de los peces tratados con CYN por va i.p., presentando los hepatocitos una morfologa a modo de clulas en cebolla, y en la zona pancretica aparecen clulas degeneradas con escasos grnulos, vacuolizaciones, y ciertos signos de necrosis.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa En rin de peces intoxicados con CYN se observ una glomerulopata con procesos de atrofia, hiperemia de los capilares, tumefaccin de los tbulos proximales y distales con dilatacin de sus luces, siendo estos procesos ms acusados cuando la va de exposicin es intraperitoneal. Los autores agradecen a la Junta de Andaluca (P09-AGR04672I) y al MICINN (AGL2009-10026) la financiacin para la realizacin de este estudio. Palabras clave: Cilindrospermopsina, Tilapias, Histopatologa, Va oral, Va intraperitoneal. C.69.-AFECTACIN DE MARCADORES DE ESTRS O X I D AT I V O E N T I L A P I A S E X P U E S TA S A CILINDROSPERMOPSINA: INFLUENCIA DEL TIEMPO Y VA DE EXPOSICIN Gutirrez-Praena, D; Pichardo, S; Jos, A; Camen, AM rea de Toxicologa, Facultad de Farmacia, Universidad de Sevilla. C/ Profesor Garca Gonzlez 2, 41012, Sevilla, Espaa. La fauna y flora acuticas pueden estar expuestas a la cianotoxina cilindrospermopsina (CYN), la cual es producida por diferentes especies de cianobacterias, que se suelen encontrar en una gran variedad de reservorios de agua en todo el mundo. Debido a esto la podemos considerar tambin como un importante contaminante de las aguas de consumo humano. Se ha demostrado que la CYN es un potente inhibidor de la sntesis de protenas y de glutatin reducido y, adems, estn surgiendo estudios en los que se observa que puede producir genotoxicidad. El papel del estrs oxidativo como mecanismo de toxicidad de la CYN en peces, est bajo estudio. En el presente trabajo, ocho grupos de tilapias (Oreochromis niloticus) se dispusieron de forma aleatoria. Cuatro grupos (n=8) recibieron 200 g/Kg de CYN pura por pez: dos grupos mediante sonda gstrica y otros dos grupos mediante inyeccin intraperitoneal (i.p). La dosis elegida fue la ms baja que produca efecto en estudios realizados previamente. Los peces se sacrificaron en dos periodos de tiempo: 24 horas y 5 das tras la exposicin a CYN. Otros cuatro grupos se emplearon como controles, de los distintos tratamientos aplicados. Los peces fueron sacrificados, se extrajeron los hgados y se investigaron los siguientes biomarcadores de estrs oxidativo: peroxidacin lipdica (LPO), actividad NADPH oxidasa, oxidacin de protenas y oxidacin de ADN. Los resultados mostraron diferentes respuestas en funcin de la va y del tiempo transcurrido hasta el sacrificio. Los autores agradecen a la Junta de Andaluca (P09-AGR04672I) y al MICINN (AGL2009-10026) la financiacin de este trabajo. Palabras clave: Cilindrospermopsina, Tilapia, Estrs oxidativo, Va exposicin, Tiempo sacrificio. C.70.-ALTERACIONES NEUROQUMICAS EN SNC POR LA MICOTOXINA FUMONISINA B1 Ramos, E; Martnez, MA; Castellano, V; Martnez, M; Romero, A; Ares, I; Martnez-Larraaga, MR; Anadn, A Departamento de Toxicologa y Farmacologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, 28040 Madrid. Las principales fumonisinas en maz contaminado son las fumonisinas B1, B2 y B3, siendo B1 (FB1) la principal implicada en salud pblica. FB1 est asociada con cncer de esfago en poblaciones rurales en Asia y Sudfrica. En sanidad animal, FBl causa leucoencefalomalacia en quidos, enfermedad que se inicia con ataxia, paresia, apata e hipersensibilidad. En base a estos efectos, el presente trabajo examina si FB1 afecta el contenido de neurotransmisores monoaminas en el SNC. Ratas Wistar macho de 200 g p.c. reciben i.p. dosis de 0,25 mg FB1/Kg p.c. (FB1 disuelta en 0,4 mL solucin salina), 5 das. Tras tratamiento, animales control y tratados se sacrifican por decapitacin, el cerebro se asla y se diseccionan los tejidos corteza frontal, hipotlamo, hipocampo, cuerpo estriado y mesencfalo para analizar el contenido de noradrenalina (NA) y metabolito 3metoxi-4-hidroxifeniletilenglicol (MHPG), dopamina (DA) y metabolitos cido 3,4-dihidroxifenilacetico (DOPAC) y cido homovanlico (HVA), y serotonina (5-HT) y metabolito cido 5hidroxi-indol actico (5-HIAA) por HPLC con deteccin electroqumica. Los resultados demuestran FB1 produce alteraciones estadsticamente significativas en los niveles de todas las monoaminas estudiadas: incremento en los niveles de NA excepto en mesencfalo; incremento de DA en hipocampo, mesencfalo e hipotlamo y descenso en corteza frontal; incremento en 5-HT en hipocampo y mesencfalo y descenso en corteza frontal. Los niveles de MHPG, 5-HIAA, DOPAC y HVA tambin fueron alterados as como la tasas de recambio. Hasta el momento los estudios de toxicidad realizados en ratas describen efectos nefrotxicos, hepatotxicos y carcingenos. En base a los resultados obtenidos, se concluye que tambin FB1 posee efectos neurotxicos en ratas que podran estar asociados con la leucoencefalomalacia descrita por FB1 en quidos. Posteriores investigaciones son necesarias para definir la neurotoxicidad de FB1. Financiado por los Proyectos Consolider-Ingenio 2010 Ref. CSD/2007/00063 y Ref. n S2009/AGR-1469, MEC, y Ref. GR58/08 UCM-BSCH, Madrid. Palabras clave: Fumonisina B1, Neurotransmisores monoaminas, SNC. TOXICOLOGA FORENSE Y TCNICAS ANALTICAS E N TO X I C O L O G A : C O M U N I C A C I O N E S E N FORMATO POSTER C.71.-LA CROMATOGRAFA DE GASES APLICADA A LA DETERMINACIN DE DROGAS DE SUSTITUCIN EN SANGRE Margalho, C1,3; Franco, J1,3; Corte Real, F1,2,3 ; Vieira, DN1,2,3 1 Instituto Nacional de Medicina Legal, I.P. Delegao do Centro. 2Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra. 3 Centro de Estudos Forenses CENCIFOR. Los medicamentos de sustitucin se utilizan en el tratamiento mdico de los adictos a opiceos, en especial la herona. El tratamiento de sustitucin se basa en el uso de un frmaco con accin similar a la droga de consumo habitual siendo la metadona y la buprenorfina los ms utilizados. Sin embargo, estas sustancias pueden ser consumidas simultneamente con otras drogas ilcitas, lo que aumenta la posibilidad de ocurrencia de muerte por sobredosis. Esta situacin es ms frecuente con el abuso de la metadona. Los autores presentan dos metodologas analticas para la determinacin de la metadona, la buprenorfina y sus metabolitos principales (EDDP y norbuprenorfina, respectivamente) mediante extraccin en fase slida (Oasis MCX) y anlisis por cromatografa de gases con detector de espectrometra de masas. Ambos mtodos fueron validados con arreglo al procedimiento de validacin en vigor en el Departamento de Toxicologa Forense de la Delegacin del Centro (STF-C). Los parmetros estudiados fueron la selectividad, linealidad, lmites de deteccin y cuantificacin, recuperacin y precisin. De acuerdo con los criterios adoptados en el STF-C, los resultados para todos los parmetros estudiados fueron aceptables, lo que demuestra la sensibilidad de las metodologas. Los mtodos desarrollados fueron adecuados para la determinacin de las sustancias estudiadas, ya que se obtuvieron
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa resultados satisfactorios en la participacin en el programa de control de calidad externo: STM - Replacement drugs in serum and urine. Las metodologas se estn utilizando en el laboratorio para anlisis de rutina. Los autores presentan algunos casos reales analizados. Palabras clave: Metadona, Buprenorfina, Sangre, SPE, GC/MS. C.72.-ESTUDIO DEL CONSUMO DE ALCOHOL ETLICO EN UN CASO DE RETIRADA DE CUSTODIA A UNA ABUELA DE SU NIETA Segura, L1; Jurado, C2; Garca, B3; Calvo, A3; Lpez de Medrano-Villar, MJ3; Garrido-Lestache, E3 1 Medico Forense. Toxiclogo. Instituto Anatmico Forense de Madrid. 2 Instituto Nacional de Toxicologa. Departamento de Sevilla. 3 Instituto de Medicina Legal Valencia. Si bien no es infrecuente la solicitud de pericial mdico forense en relacin al consumo o no de drogas y/o alcohol etlico para la determinacin de la custodia de los hijos, si es inusual dichos estudios cuando la custodia la tienen los abuelos. En este caso, se describe como fueron necesarias al menos dos periciales mdico forenses, para determinar que la persona explorada se encontraba en condiciones de recuperar la custodia de su nieta; custodia que se le haba retirado por parte de la Consellera de Bienestar social basada en una denuncia familiar. De una forma conjunta a las primeras exploraciones se solicitaron anlisis de alcohol y drogas en muestra biolgica de orina, estudio de hemograma, bioqumica, coagulacin y funcin heptica, la transferrina deficiente en carbohidratos en muestra sangunea y determinacin de etil-glucurnido, en mechn de cabellos. Los resultados analticos, menos el anlisis del cabello, dieron todos negativos. Las exploraciones medico forenses revelaban la mas absoluta normalidad y adems, la explorada negaba rotundamente el consumo de alcohol etlico. En la ltima exploracin mdica se descubri, que de forma ocasional la explorada consuma alrededor de 15cc de agua del Carmen como remedio para su ansiedad, sin poder establecerse que exista un consumo excesivo de alcohol pese a los resultados analticos del etil-glucurnido que arrojaron una cifra de 60 pg/mg y que por la fecha del anlisis, octubre del 2008, la Society of Hair Testing relacionaba dicha cifra con un consumo excesivo de alcohol. Todo ello corrobor la importancia que tiene la utilizacin de los resultados analticos como complemento del informe mdico forense y de la cautela que debe establecerse a la hora de la interpretacin de los anlisis de cabello, siendo el establecimiento de unas concentraciones de corte adecuadas una de las cuestiones ms importantes, pero tambin ms discutidas . Palabras clave: Alcohol etlico, Agua del carmen, Etilglucurnido, Concentraciones de corte, Pericial medico forense. C.73.-HIDRLISIS ENZIMTICA ASISTIDA POR ULTRASONIDOS PARA LA ESPECIACIN DE ARSNICO EN ALIMENTOS DE ORIGEN MARINO POR HPLC-ICPMS Moreda Pieiro, A1; Moreda Pieiro, J2, Herbello Hermelo, P1, Bermejo Barrera, P1, Muniategui Lorenzo, S2, Lpez Maha, P2,3, Prada Rodrguez, D2,3 1 Departamento de Qumica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Facultad de Qumica. Universidad de Santiago de Compostela, Espaa.2Departmento de Qumica Analtica. Facultad de Ciencias. Universidad de A Corua. A Corua, Espaa. 3Instituto Universitario de Medioambiente. Universidad de A Corua. Lins, Oleiros (A Corua), Espaa. En este trabajo se ha desarrollado un procedimiento de extraccin de especies de arsnico (arsenito, As(III); arsenato, As(V); cido
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dimetilarsnico, DMA; y arsenonetana, AsB) en muestras de productos marinos (pescado y moluscos) basado en una hidrlisis enzimtica asistida por energa de ultrasonidos. Como enzima proteoltica se emple la pepsina bajo las condiciones optimizadas de pH 3,0, 40C de temperatura, y 7,5 mL de una disolucin de pepsina 1,0% (m/v). El empleo de energa de ultrasonidos (35 kHz) permiti acortar el tiempo de hidrlisis enzimtica entre 4,0 y 30 minutos, seleccionando as un tiempo de extraccin de 5 min. El extracto enzimtico fue posteriormente sometido a una etapa de clean-up empleando extraccin en fase slida con ENVI-CarbTM como soporte. La separacin cromatogrfica se llev a cabo con una columna de cambio aninico (Dionex AS7) que permite la separacin en 15 minutos y en una misma secuencia de seis especies de arsnico distintas (As(III); As(V); DMA; AsB, adems de cido monometilarsnico, MMA y arsenocolina, AsC). La precisin del procedimiento (n=11) fue del 7% para AsB y DMA, del 11% para As(III) y del 9% para MMA. La exactitud del mtodo se verific analizando dos materiales de referencia (DORM2 y BCR 627) que ofrecen valores certificados para AsB y DMA, encontrando buena concordancia con los valores obtenidos. El mtodo desarrollado se aplic finalmente a la especiacin de arsnico en muestras de pescado blanco (merluza, bacalao, lenguado) y azul (sardina y caballa) y tambin a muestras de moluscos (mejillones, berberechos, almejas, vieiras y ostras). Palabras clave: Materia orgnica disuelta, Agua de mar, Nanotubos de carbono, Analizador de carbono orgnico total, HPLC. C.74.-INCIDENCIA DE COCANA ADULTERADA CON LEVAMISOL: ESTUDIO EN MUESTRAS DECOMISADAS EN LA PROVINCIA DE CADIZ Navas, I1; Arufe, MI2 1 Seccin de Inspeccin Farmacutica y Control de Drogas. Subdelegacin del Gobierno en Cdiz. Dependencia de Sanidad Sanidad Exterior. 2rea de Toxicologa. Facultad de Medicina. Universidad de Cdiz. Plaza Fragela s/n. 11003 Cdiz. El levamisol es un frmaco de actividad antiparasitaria y propiedades inmunomoduladoras utilizado hoy en da principalmente en veterinaria. Como consecuencia de su uso prolongado se han descrito efectos secundarios graves como reacciones alrgicas, problemas del sistema nervioso, efectos de tipo hematolgico (principalmente neutropenia) y necrosis cutnea. Recientemente en diversos pases se ha informado sobre la aparicin de casos de agranulocitosis asociada al consumo de cocana adulterada con levamisol, frmaco que parece potenciar los efectos euforizantes de la droga debido a su accin sobre el sistema dopaminrgico, lo que podra explicar su uso en el proceso de adulteracin de la cocana. El uso del levamisol como adulterante de la cocana en Estados Unidos y Europa se ha documentado desde el ao 2004. La determinacin del contenido de cocana y adulterantes en muestras de trfico ilcito es importante no slo desde el punto de vista clnico y toxicolgico, sino tambin con fines forenses, en relacin con la identificacin de la procedencia geogrfica, la comparacin de muestras y la va de sntesis de la droga. El objetivo de este trabajo es estudiar la incidencia del levamisol en las muestras de cocana procedentes de trfico ilcito en la provincia de Cdiz durante el primer semestre del ao 2011. Los anlisis realizados por GC/MS indican que el levamisol ha pasado a ser uno de los adulterantes ms frecuentes junto a la fenacetina, seguidos por cafena, anestsicos locales como lidocana, tetracana, procana y benzocana, entre otros compuestos. Los resultados sugieren que el consumo de cocana adulterada con levamisol podra estar extendido en nuestro medio, al menos durante el periodo de estudio.
XIX Congreso Espaol de Toxicologa Palabras clave: Drogas de abuso, Cocana, Adulterantes, Levamisol. C.75.-ANLISIS DE METADONA Y EDDP EN PELO POR EXTRACCIN EN FASE SLIDA DE MODO MIXTO Barroso, M1,2; Gallardo, E3; Dias, M1,2; Vieira, DN2,4; Queiroz, JA3; Lpez-Rivadulla, M5 1 Instituto Nacional de Medicina Legal Delegao do Sul, Rua Manuel Bento de Sousa, 3, 1150-219 Lisboa, Portugal. 2Cencifor Centro de Cincias Forenses, Largo da S Nova, 3000-213 Coimbra, Portugal. 3CICS-UBI - Centro de Investigao em Cincias da Sade, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique, 6201556 Covilh, Portugal. 4Instituto Nacional de Medicina Legal, Largo da S Nova, 3000-213 Coimbra, Portugal. 5Servicio de Toxicologa Forense, Instituto de ciencias Forenses Lus Concheiro, San Francisco s/n, 15782 Santiago de Compostela, Espaa. El pelo, una de las muestras alternativas ms utilizadas en el campo de la toxicologa, tiene como principales ventajas la posibilidad de realizar una investigacin retrospectiva del consumo crnico de drogas y frmacos, adems la ventana de deteccin de las sustancias tras su consumo puede ir de meses a aos, dependiendo de la longitud del mismo. En el presente trabajo, los autores proponen un mtodo para la rpida determinacin de metadona y su principal metabolito EDDP en muestras de pelo, empleando extraccin en fase slida con cartuchos de modo mixto cromatografa de gasesespectrometra de masas (GC-MS) [1]. Como patrones internos se emplearon los respectivos anlogos deuterados, y la extraccin de drogas del interior del pelo (un paso limitante de cualquier tcnica y normalmente un proceso lento que puede tardar hasta 15 h) fue conseguida en 45 minutos a 50C, ya que la matriz queratnica fue destruida con 1 M de hidrxido de sodio. Los extractos obtenidos fueron posteriormente purificados por extraccin en fase slida y analizados por GC-MS. Empleando nicamente 10 mg de muestra, los lmites de cuantificacin fueron de 0,1 ng/mg para los dos compuestos. El mtodo ha sido completamente validado de acuerdo con criterios internacionales de validacin, incluyendo linealidad (LLOQ 30 ng/mg), precisin y exactitud (CV y MRE < 15%, respectivamente). El rendimiento de la tcnica fue superior a 90% para ambos compuestos, y esta elevada eficiencia contribuy para los bajos lmites de cuantificacin obtenidos. De este modo, el mtodo desarrollado puede ser perfectamente utilizado en la determinacin de metadona y EDDP en muestras de pelo en situaciones clnicas y forenses. De hecho, ya se est utilizando en la rutina del laboratorio en casos post-mrtem y de custodia de menores. [1] Barroso M, , Vieira DN, Lpez-Rivadulla M, Queiroz JA. Mixed-mode solid-phase extraction for sample cleanup in hair analysis for methadone and its main metabolite. Biomed. Chromatogr. 2010; 24: 1240-1246. Palabras clave: Metadona, Pelo, SPE Modo mixto, Cromatografa de gases. C.76.-DETERMINACIN SIMULTNEA DE ANTIDEPRESIVOS EN PLASMA POR CROMATOGRAFA DE GASES ESPECTROMETRA DE MASAS Pietracci, E1,2; Tabernero, MJ2; lvarez, I2; Cabarcos, P2; Bermejo, AM2 1 Departamento de Toxicologa, Facultad de Farmacia, Universidad de Urbino, Italia. 2 Instituto de Medicina Legal, Servicio de Toxicologa Forense, Facultad de Medicina. La depresin es un trastorno recurrente o crnico del humor que afecta las actividades sociales y econmicas de 121 millones de habitantes. Segn la OMS en el 2020 la depresin ser la segunda patologa en el mundo despus de las enfermedades cardiacas, adems aflije no solo quien es enfermo (hasta a aumentar la probabilidad de un comportamiento suicida) sino tambin sus familiares, amigos, colegas. Antes de los '80 la depresin era tratada con TCA, MAO y Litio. Pero en los ltimos aos se desarrollaron nuevas generaciones de antidepresivos que incluyen los ms prescritos en la actualidad. Estas cuentan con SSRI (Selective Serotonin Reuptake Inhibitors: paroxetina, sertralina, fluoxetina, norfluoxetina), SNRI (Serotonin and Noradrenalin Reuptake Inihibitors: venlafixina) y NSSA (Noradrenergic and Specific Serotonergic Antidepressants: mitazapina). Adems hay diferentes clases de frmacos activos en trastornos bipolares, como la olanzapina que por estrutura quimica es asociada a las benzodiazepinas. En este trabajo se ha desarrollato un mtodo analitico por cromatografia de gases-espectrometria de masas (GC-MS) para la determinacin en plasma de los antidepresivos mas usados hoy en da. La preparacin de las muestras requiere una extraccin previa lquido-lquido (LLE) con t-butilmetileter. Algunas de las substancias (fluoxetina, norfluoxetina, sertralina, paroxetina) son derivatizadas con 1-(heptafluorobutyryl) imidazole (HFBI). La separacin GC se desarrolla en 23,76 minutos. La identificacin y la cuantificacin se realizan en modo SIM (selected ion monitoring) con EI (electron impact). Se preparan curvas de calibracin del rango 0,01 g/mL-3 g/mL que corresponden a concentraciones teraputicas y txicas. El lmite de cuantificacin (LOQ) vara desde 0,01 g/mL a 0,1 g/mL y el lmite de deteccin desde 0,0025 g/mL a 0,005. Este mtodo nos permite detectar y cuantificar los antidepresivos ms recientes en rangos teraputicos y txicos, es por ello til para anlisis toxicolgicos clnicos y forenses. Palabras claves: Antidepresivos, GC-MS, LEE, Plasma, Olanzapina. C.77.-MUERTE POR REACCIN ADVERSA A DROGAS EN GALICIA: EVOLUCIN EN UN PERODO DE 10 AOS Bouzas-Cruz N2; Tabernero MJ4; Lpez de Abajo, B; Bouzas C3; Cruz Landeira, A1; Bermejo AM4 1 Servicio de Toxicologa. Instituto de Ciencias Forenses Luis Concheiro. Universidad de Santiago de Compostela. 2 Mdico MIR, Servicio Cardiologa, CHUS Santiago de Compostela. 3 Mdico de Atencin Primaria. 4Instituto de Medicina Legal, Servicio de Toxicologa Forense, Facultad de Medicina. Objetivo: Estimar la evolucin del impacto de las muertes por Reaccin Aguda a Sustancias Psicoactivas en Galicia en un perodo de 10 aos, as como el perfil del fallecido y las sustancias que se asocian con mayor riesgo de muerte, en funcin de los resultados de los anlisis toxicolgicos efectuados. Pacientes y mtodos: La poblacin objeto de estudio han sido aquellos fallecidos con edades comprendidas entre los 10 y los 64 aos, cuya causa de muerte ha sido la reaccin adversa aguda a sustancias psicoactivas en la Comunidad Autnoma de Galicia y enviados al Instituto de Ciencias Forenses de la USC para la confirmacin analtica, en los aos 1999 y 2009. La informacin se ha recogido a travs de un cuestionario que incluye datos sobre variables socio-demogrficas, informacin clnica e informacin analtica. El procesamiento y anlisis de los datos se ha llevado a cabo mediante el paquete estadstico SPSS.18.0. Resultados: El nmero de casos (44/41), el sexo (90% varones) y la edad media (36,4 aos/37 aos) han sido similares en ambos perodos, 1999 y 2008 respectivamente. Las sustancias y/o metabolitos detectadas con mayor frecuencia han sido: opiceos (68% / 56%), cocana (41% positivos en ambos aos), benzodiacepinas (45% / 54%), cannabis (41% / 29%) y metadona (13% / 29%). Existe un claro patrn de policonsumo, ya que solo
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa en el 20% de los casos se detect una sola droga. La asociacin ms frecuente ha sido de opiceos y cocana, y de ambos con las benzodiacepinas. Conclusiones: El nmero de fallecimientos por reaccin adversa aguda a drogas en Galicia parece haberse estabilizado en los ltimos 10 aos, as como el perfil del fallecido, un varn de 3637 aos y policonsumidor. Las principales drogas implicadas siguen siendo los opiceos (tendencia decreciente) y la cocana (estable), seguidas de metadona y benzodiacepinas, que presentan una tendencia creciente. Palabras clave: Reaccin adversa, Drogas, Intoxicacin mortal. C.78.-ESTUDIO DE LAS INTOXICACIONES DE INTERS MDICOLEGAL EN GALICIA DURANTE EL PERODO 2009-2010 Fernndez, P; Tabernero, MJ; lvarez, I; Cabarcos, P; Puga, M; Bermejo AM Instituto de Ciencias Forenses. Servicio de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina Universidad de Santiago de Compostela. Se presenta una revisin de 2.566 intoxicaciones, analizadas en el Servicio de Toxicologa Forense del Instituto de Ciencias Forenses, por requerimiento de diferentes juzgados de Galicia. Del total de casos estudiados, 1.221 se han dado en el ao 2009 y 1.345 en 2010. Se observa un claro predominio del sexo masculino, con 1.046 hombres y 175 mujeres en el ao 2009, frente a 1.140 hombres y 205 mujeres en el ao 2010. Las muestras biolgicas enviadas para su anlisis se reparten en cada uno de los dos aos estudiados como sigue: 761 orinas, 668 pelos, 414 sangres, 267 humores vtreos, 7 bilis, 7 contenidos gstricos y 2 vsceras en el ao 2009; y 764 orinas, 772 pelos, 501 sangres, 381 humores vtreos, 15 bilis, 13 contenidos gstricos y 2 vsceras en el ao 2010. La droga implicada en un mayor nmero de intoxicaciones fue la cocana, seguida del cannabis, herona, alcohol, metadona y benzodiacepinas. En cuanto a los juzgados que han remitido dichas muestras en los dos aos estudiados, destacan los de Santiago (374 casos), Vigo (337 casos), Lugo (287 casos), Pontevedra (194 casos), y Orense (17 casos) en el ao 2009; y los juzgados de Vigo (412 casos), Santiago (320 casos), Lugo (285 casos), Pontevedra (208 casos), A Corua (65 casos) y Orense (30 casos) en el ao 2010. La distribucin de las intoxicaciones a lo largo de los meses del ao fue bastante regular en los dos aos estudiados, aunque se debe resaltar un menor nmero de casos en agosto de 2009 y enero de 2010 y una mayor incidencia de intoxicaciones en septiembre de 2009 y marzo, septiembre y octubre de 2010. Palabras clave: Intoxicaciones, Casos judiciales, Drogas de abuso, Frmacos. C.79.-ESTUDIO DE ALCOHOLEMIA Y RELACIN CON LA REFORMA DEL CDIGO PENAL EN MATERIA DE TRFICO Calvo, A; Lpez de Medrano-Villar, MJ; Garca, B; Arlandis, A; Castellar, A; Merino, Y; Ferrer, S; Garrido-Lestache, E. Instituto de Medicina Legal. Seccin de Toxicologa. Avda. del Saler, n 14. 46013. Valencia. La Ley Orgnica 15/2007, de 30 de Noviembre, por la que se modifica la Ley Orgnica 10/95, refleja la reforma del Cdigo Penal en materia de seguridad vial, teniendo como objetivo fundamental el reducir el nmero de muertos en carretera. Dicha reforma, entre otros aspectos, incluye penas de prisin de 6-12 meses por la conduccin bajo el influjo de bebidas alcohlicas, cuando la tasa sea superior a los 1,20 gramos por litro o una tasa de alcohol espirado superior a 0,60 miligramos por litro. La Direccin General de Trfico ya ha confirmado en numerosas ocasiones que Espaa tiene un problema con el alcohol. De hecho, de todos los delitos cometidos contra la seguridad vial, como pueden ser la velocidad excesiva o la conduccin temeraria, el conducir bajo la influencia del alcohol o drogas es el ms cometido. Segn datos de la Fiscala de Seguridad Vial, en 2009 se han realizado 56.138 procedimientos penales por este motivo y se han llevado a cabo cerca de 135.000 condenas desde la entrada en vigor de la reforma del Cdigo Penal en 2007. Si nos referimos a las medidas privativas de libertad, segn datos a 1 de junio de 2010, las crceles contaban con 284 presos por conducir bajo los efectos de drogas y alcohol, el 28,3% de todos los presos por delitos contra la seguridad vial. El objetivo de este estudio es evaluar la repercusin que la modificacin del Cdigo Penal ha tenido sobre los valores de la tasa de alcoholemia, valorando la incidencia que dichas medidas han tenido en los expedientes de trfico de la Comunidad Valenciana en los ltimos aos. La determinacin de la tasa de alcoholemia se realiz mediante cromatografa de gases con inyector de espacio de cabeza. Palabras clave: Alcoholemia, Seguridad vial, Cdigo penal, Cromatografa de gases con inyector de espacio de cabeza. C.80.-ANLISIS DE MULTICOMPONENTES EN LA INVESTIGACIN DE MEZCLAS DE SUSTANCIAS DE INTERS EN TOXICOLOGA FORENSE Gonzlez Padrn, A Instituto Nacional de Toxicologa. Sevilla. La cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) con detector de matriz de diodos ultravioleta (DAD) es ampliamente usada en anlisis de principios activos. No obstante, debido a la gran cantidad dichas sustancias de inters toxicolgico, cuando se emplea en rutinas de investigacin toxicolgica general, puede ocurrir una coelucin de varias sustancias y, por lo tanto, que un pico sea el resultado de una suma de seales cromatogrficas. Obviamente, sera factible separarlas para su anlisis, pero ello implica cambiar el mtodo cromatogrfico para un caso concreto e inyectar varias veces los extractos con la consiguiente prdida de tiempo. En este trabajo, se describe la aplicacin del anlisis de multicomponentes (MCA), tcnica espectrofotomtrica mediante la que se pueden desarrollar mtodos aplicables a nuestra rutina de trabajo con el sistema HPLC-DAD empleando un mtodo con gradiente de flujo tomando como modelo el solapamiento de los picos de imipramina y maproptilina. Se efecta la determinacin de la composicin de una mezcla de dichos antidepresivos en cantidades desconocidas. Mediante el uso de MCA se reconstruyeron los cromatogramas y espectros correspondientes a cada analito sin cambiar de mtodo y, por tanto, sin tener que inyectar los extractos varias veces. En sntesis, el MCA se manifiesta como una herramienta til en las rutinas toxicolgicas para su aplicacin en aquellos casos, durante el screening toxicolgico por HPLC-DAD, en los que se den seales cromatogrficas solapadas y as poder completar su deteccin, identificacin y cuantificacin en un solo cromatograma. Palabras clave: HPLC-DAD, Screening, Solapamiento, MCA. C.81.-DETERMINACIN DE ESTUPEFACIENTES EN SANGRE Y ORINA MEDIANTE LA TCNICA DE LA IMPREGNACIN EN PAPEL Y ANLISIS POR TNDEM MASAS Antelo Domnguez, A1; Otero Fernndez, M1; Moreda Pieiro, A1; Bermejo Barrera, P1; Cocho, JA2; Bermejo, AM3; Tabernero, MJ3 1 Departamento de Qumica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Facultad de Qumica. Universidad de Santiago de Compostela, Espaa. 2Laboratorio de Metabolopatas. Hospital Clnico
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Universitario de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, Espaa. 3Departamento de Anatoma Patolgica y Ciencias Forenses. Facultad de Medicina. Universidad de Santiago de Compostela. Santiago de Compostela, Espaa. Tradicionalmente, los anlisis mediante cromatografa de lquidos o gases y espectrometra de masas han sido los ms comunes en los laboratorios clnicos y toxicolgicos para la determinacin de compuestos en muestras biolgicas. Los analitos de inters se encuentran presentes en concentraciones muy bajas en matrices complejas como fluidos biolgicos o tejidos por lo que generalmente se requieren procesos de pretratamiento de muestra laboriosos y posteriormente programas largos de separacin cromatogrfica. La incorporacin de la tcnica de espectrometra de masas en tndem a los anlisis toxicolgicos ha supuesto una serie de ventajas como la posibilidad de suprimir la etapa de separacin cromatogrfica y la capacidad de analizar tanto cualitativa como cuantitativamente muestras complejas sin apenas limpieza o pretratamiento de la muestra. A pesar de que la tcnica de impregnacin en papel no es una tcnica reciente, a lo largo de la ltima dcada ha sido desarrollada principalmente para la deteccin de desordenes metablicos en neonatos haciendo uso de la espectroscopa de masas en tndem. El material empleado para la fabricacin del papel as como los protocolos de toma de muestra y anlisis han sido optimizados y estandarizados de forma que actualmente se ha simplificado mucho el trabajo analtico en hospitales y laboratorios toxicolgicos. En este trabajo se han unido las ventajas de la tcnica de impregnacin de papel como tratamiento previo de muestras a la espectroscopa de masas en tndem para determinar cuantitativamente 5 drogas (cocana, benzoilecgonina, codena, morfina y 6-MAM) en sangre y orina. Una vez escogido el disolvente extractante ptimo para las muestras impregnadas en el papel, se realiz un diseo experimental para la optimizacin de las variables principales que influyen en el proceso de extraccin. Se fijaron las variables de compromiso con las que maximizar las concentraciones extradas de las drogas de estudio y se procedi a la validacin del mtodo evaluando la precisin, exactitud y los lmites de deteccin y cuantificacin. Palabras clave: Drogas de abuso, Sangre, Orina, Impregnacin en papel, ESI-MS/MS. C.82.-DETERMINACIN DE BENZODIAZEPINAS Y PSICOFRMACOS EN MATRICES BIOLGICAS POR CROMATOGRAFA LQUIDA DE ULTRA EFICACIAESPECTROMETRA DE MASAS (UPLC-MS-MS) Pons, B; Prez, B; Vila, I; Diego, Y; Lorente, LM Laboratorio Forense. Instituto Vasco de Medicina Legal. C/ Barroeta Aldamar, 10. 48001 Bilbao En nuestro laboratorio se ha desarrollado un mtodo analtico que permite determinar 21 benzodiacepinas y dos anlogos (zopiclona y zolpidem), as como algunos antidepresivos (citalopram, amitriptilina, venlafaxina, trazodona, etc.) a bajas concentraciones en diversas muestras biolgicas. Las muestras seleccionadas para el estudio previamente haban sido analizadas por inmunoensayo homogneo CEDIA (Cloned Enzyme Donor Immuno Assay) de ThermoFisher de carcter semicuantitativo, presentando datos positivos o bastante por debajo de los cut-off en benzodiacepinas o antidepresivos triciclcos. El mtodo instrumental utilizado es cromatografa lquida de ultra eficacia con detector de espectrometra de masas de triple cuadrupolo (UPLC/MS/MS). Previamente, las muestras tienen un sencillo tratamiento con b-glucoronidasa para romper el posible glucurnido, dilucin con tampn de pH=6 y centrifugacin. Para la extraccin de los analitos se utilizan cartuchos de extraccin en fase slida (SPE) Oasis HLB (hydrophilic-lipophilic balance), con metanol como eluyente. El modo de trabajo en el UPLC/MS/MS es el MRM (mltiple reaction monitoring) y el sistema de ionizacin es electro spray positivo. Para que no haya ninguna duda de seal debida a otros componentes de la matriz, se han seleccionado dos transiciones especficas para cada analito. La cuantificacin se realiza por calibracin con tres estndares internos deuterados. La separacin cromatogrfica se realiza con una columna Acquity UPLCTM BEH C18 utilizando disolucin tampn de formiato amnico y acetonitrilo como fases mviles. La duracin del proceso cromatogrfico es menor de 5 minutos. Por este mtodo se han analizado muestras de orina, plasma, sangre entera, bilis e hgado. Las muestras de hgado y contenidos gstricos necesitan una etapa adicional de precipitacin con acetonitrilo. Para la inyeccin en el UPLC/MS/MS es necesario filtrar los extractos con filtros de 0,2 mm. En todos los casos se han obtenido muy buenas recuperaciones y especificidades. El mtodo se ha comprobado con disoluciones certificadas de orina y disoluciones adicionadas en nuestro propio laboratorio. Tambin est siendo testado con las determinaciones que se realizan en paralelo por el Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Palabras clave: Benzodiacepinas, Psicofrmacos, Extraccin en fase slida, Cromatografa lquida de ultraeficacia, Espectrometra de masas. C.83.-DETERMINACIN DE DIEZ ANTIDIABTICOS ORALES EN SANGRE MEDIANTE CROMATOGRAFA DE LQUIDOS ACOPLADA A ESPECTROMETRA DE MASAS Quintela, O1,2; Meja, C1; Uroz, V2,3; Anadn, MJ2; Ortega, A1 1 Servicio de Qumica. Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses (INTyCF). Departamento de Madrid. 2 Departamento de Toxicologa y Legislacin Sanitaria. Facultad de Medicina. Universidad Complutense de Madrid. 3Centro de Estudios Jurdicos, Ministerio de Justicia. La existencia de los trastornos del metabolismo de la glucosa, como la diabetes mellitus, plantea problemas en la prctica forense. Por otra parte, suele ser un problema para los mdicos forenses la muerte sbita en los pacientes que la padecen con posteriores hallazgos negativos en la autopsia. En el caso de una muerte sbita relacionada con una hipoglucemia de origen desconocido, la deteccin de antidiabticos orales (ADOs) permite la diferenciacin de hipoglucemia debido a la administracin de estas sustancias o debido a otras razones, como por ejemplo la inducida por la insulina de un insulinoma. Podra existir una etiologa homicida en casos de intoxicacin por ADOs, tal y como sucedi con la insulina que supuestamente se emple en los asesinatos acaecidos en la residencia de Olot (Gerona). Adems, existen dificultades analticas para determinar analticamente a nivel hospitalario frmacos como los ADOs. Por todas estas razones, se ha desarrollado en nuestro Servicio de Qumica del INTyCF un mtodo para la deteccin de estos principios activos mediante cromatografa de lquidosespectrometra de masas en tndem (LC-MS/MS), con ionizacin negativa por electrospray. En esta comunicacin se detalla ampliamente el sistema analtico forense. Se ha optimizado el mtodo para la determinacin de diez ADOs en una misma inyeccin cromatogrfica. Las sustancias seleccionadas para su deteccin especfica fueron: metformina, repaglidina, glipizida, gliclazida, glisentida, glibornurida, nateglinida, glimepirida, glibenclamida y gliquidona. Tras un simple proceso de precipitacin de protenas, los ADOs fueron separados mediante una columna cromatogrfica ciano, siendo esta
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa eleccin la ms adecuada debido a la diferente polaridad entre los diferentes ADOs. Se presenta, por tanto, un mtodo altamente especfico para auxiliar a los mdicos forenses en la determinacin de la causa de muerte en relacin con intoxicaciones por ADOs, as como en las acaecidas en el seno de un cuadro clnico de hipoglucemia de origen desconocido. Palabras clave: Muerte sbita, Antidiabticos orales, LCMS/MS, Diabetes mellitus, Anlisis toxicolgico. C.84.-DETERMINACIN SIMULTNEA DE SIETE BENZODIACEPINAS EN PLASMA POR CROMATOGRAFA DE GASES ESPECTROMETRA DE MASAS Baz, JA2; Tabernero, M.J1; Bermejo, AM1; lvarez, I1; Cabarcos, P1 Instituto de Medicina Legal. Servicio de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina 2Departamento de Qumica Analtica. Facultad de Qumica. Universidad de Santiago de Compostela. Las benzodiacepinas tienen una gran importancia dentro de la prctica clnica debido a sus mltiples acciones farmacolgicas. Los frecuentes problemas relacionados con el amplio uso de las benzodiacepinas, as como las mltiples intoxicaciones que causan, llev a la necesidad del desarrollo de un mtodo analtico preciso, sensible y rpido para la determinacin simultnea de 7 de benzodiacepinas de uso comn (nordiazepam, diazepam, oxacepam, temazepam, bromazepam, midazolam y lorazepam) en plasma. Se ha desarrollado un mtodo por GC-MS para la determinacin de estos compuestos, previo procedimiento de extraccin por SPE con Bond Elut - Certify (130 mg, 3 mL). Los extractos obtenidos son derivatizados con N-methyl-N-(tertbutyldimethylsilyl) trifluroacetamide (MTBSTFA) para dar lugar a derivados tert-butyldemethylsilyl. Para la cuantificacin fueron utilizados patrones internos deuterados. Las curvas de calibracin fueron lineales en el rango de 0,02 - 1,5 g / mL. La precisin intra- e inter-da y la precisin fueron satisfactorios (CV inferior al 15%). Las recuperaciones fueron adecuadas para cada uno de los siete analitos. El mtodo desarrollado se ha aplicado con xito para la investigacin toxicolgica en casos de intoxicacin tanto accidental como voluntaria/suicida. Palabras clave: Benzodiacepinas, Plasma, GC-MS, SPE, MTBSTFA. C.85.-DETERMINACIN TOXICOLGICA EN LA INTOXICACIN POR CIANURO: A PROPSITO DE UN CASO Snchez, M; Mora, A; Gely, C; Font, G; Crespo, S; Pujol, A; Perales, E; Barbal, M; Arroyo, A Instituto de Medicina Legal de Catalunya. Antecedentes: Varn de edad superior a 30 aos que trabaja en el muelle de inflamables del Puerto de de Barcelona con posibilidad de acceso a reactivos y compuestos txicos. Por la maana un compaero de trabajo lo encuentra sin vida en decbito supino en el suelo. En la inspeccin del cadver no se encuentran lesiones ni signos de violencia y junto al cuerpo se encuentran restos de un polvo de color blanco. Se realiza la autopsia judicial con reportaje fotogrfico y se observan signos externos que sugieren una posible intoxicacin por cianuro debido al color rosado de la nariz y lbulo de las orejas, lesin custica en labio inferior, sangre y vsceras rosadas y olor a cianhdrico en el contenido del estmago. Se manda a laboratorio muestras de sangre, orina y contenido gstrico para estudios complementarios de txicos con los antecedentes mencionados. Tcnicas: Cromatografa de gases en espacio de cabeza acoplada a detector por ionizacin de llama. Confirmatorio por HS-GCMS. Mtodo: acidificacin de la muestra con clorhdrico 1M para obtener el cido cianhdrico en las muestras recibidas. Recta de
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calibrado con rangos 0,0284g/L- 0,284g/L. r2 = 0,999. Y= 0,2240X+ 0,0098 Concentraciones txicas 0,2 mg/L. Concentraciones letales 1 mg/L recogidas en las tablas de concentraciones de xenobiticos en fluidos biolgicos humanos M. Repetto 2007. Resultados de cianuro obtenidos: Orina: 0,02 g/L Sangre: 0,004 g/L Contenido gstrico: 2,11 g/L Muestra slida: Con una pureza superior al 95% expresada en cianuro. Los valores obtenidos en orina y sangre confirman las sospechas del levantamiento por los indicios hallados. Confirman tambin los datos microscpicos documentados fotogrficamente en la posterior autopsia de una manera objetiva y fundamentada. Se puede emitir un informe final forense detallado y concordante. Se aporta otra concentracin letal a la bibliografa ya existente y se correlacionan valores en distintas matrices. Palabras clave: Cianuro postmortem, Toxicologa forense, Anlisis, Intoxicacin, Medicina legal. C.86.-DETERMINACIN DE SEIS ANALGSICOS EN PLASMA USANDO EXTRACCIN EN FASE SLIDA Y CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA RESOLUCIN Taboada, V1; Fernndez, P1; Lorenzo, RA2; Tabernero, MJ1; Carro, MA2 1 Instituto de Medicina Legal. Servicio de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina. 2Departamento de Qumica Analtica. Facultad de Qumica. Universidad de Santiago de Compostela. Se ha desarrollado un mtodo para la determinacin simultnea de paracetamol, metamizol, tramadol, cido saliclico, diclofenaco e ibuprofeno en plasma, usando cromatografa lquida de alta resolucin acoplada a un detector de red de diodos (HPLC-DAD) y extraccin en fase slida (SPE). A 0,5 mL de plasma conteniendo los seis analgsicos se le aaden 0,5 mL de agua, y se procede a su extraccin usando cartuchos Oasis HLB, previamente acondicionados con acetato de etilo, metanol y tampn fosfato pH 4. Se realiza el lavado con agua e hidrxido amnico 0,05M, se seca el cartucho y finalmente se eluyen los analitos con acetato de etilo. El extracto obtenido se lleva a sequedad bajo una corriente de nitrgeno a 40C, se reconstituye con 100 L de fase mvil y se inyectan 30 L en el cromatgrafo. La columna cromatogrfica utilizada es una XBridgeTM Shield RP18 (4,6250mm, 5m) y la fase mvil, compuesta por acetonitrilo y tampn fosfato pH 7,5, es eluda en modo gradiente, obteniendo una buena separacin de los compuestos en un tiempo de 22 minutos. La respuesta del detector fue lineal en el rango de 0,5 a 20 g/mL, los lmites de deteccin oscilaron entre 0,3 y 12,5 ng/mL para el paracetamol y el tramadol respectivamente, y los coeficientes de variacin siempre fueron menores del 15%. Las recuperaciones obtenidas varan desde 93% para el tramadol hasta 102% para el metamizol. Finalmente el mtodo fue aplicado a 20 muestras de plasma procedentes de sujetos intoxicados con uno o varios analgsicos. Palabras clave: Analgsicos, Plasma, HPLC-DAD, SPE. TOXICOLOGA AMBIENTAL: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.87.-NIVELES DE METALES PESADOS EN PLACENTA HUMANA Gil F1; Amaya E2; Olmedo P1; Fernndez-Rodrguez M2; Olea N2 1 Dpto. Medicina legal y Toxicologa. Universidad de Granada. 2 Laboratorio Investigaciones Mdicas, Hospital Universitario San Cecilio, CIBERESP.
XIX Congreso Espaol de Toxicologa Los metales pesados son uno de los contaminantes ms extendidos y cuyas propiedades toxicas son bien conocidas. Estos metales pueden bioacumularse en la placenta humana y transferirse al feto, con repercusiones negativas sobre los neonatos, dada la gran susceptibilidad de los mismos a sustancias txicas. Por ello, la biomonitorizacin de los niveles de estos metales en la placenta es de gran inters para valorar una posible exposicin fetal. El objetivo del estudio fue determinar los niveles de cinco metales pesados (Pb, Cd, Cr, Mn y Hg) y un metaloide (As) en placenta humana mediante espectrofotometra de absorcin atmica utilizando la generacin de hidruros (Hg y As) y el horno de grafito (Pb, Cd, Cr y Mn), previo secado y digestin cida asistida por microondas. La poblacin a estudio procede de la cohorte de madres-hijos INMA-Granada del Proyecto de Investigacin Infancia y Medioambiente, incluida en el estudio en el momento que las mujeres acudan al Hospital Universitario San Cecilio de Granada (HUSC), a dar a luz. De todas las participantes (n=668) se dispone de muestra de placenta, depositadas en el biobanco del HUSC a -86C. Para este estudio se eligieron al azar 137 muestras de placenta. Las concentraciones medias obtenidas, para los valores detectables, expresadas en g/g de placenta hmeda, fueron: Pb 0,088 g/g, Cd 0,004 g/g, Mn 0,071 g/g, Cr 0,146 g/g y Hg 0,00001 g/g. El As no fue detectable en ninguna de las muestras analizadas. Los niveles cuantificados corresponden a los descritos en poblaciones no expuestas, y son comparativamente ms bajos que los encontrados en estudios llevados a cabo en zonas de gran exposicin a metales pesados. Resulta especialmente significativo que el 65,0% de las muestras de placenta presentaron niveles no detectables de Pb y que los niveles de Hg se encuentran muy prximos al lmite de deteccin. Palabras clave: Biomonitorizacin, Exposicin, Evaluacin del riesgo, Metales pesados. C.88.-OPTIMIZACIN DEL CULTIVO Y ESTUDIO DEL CRECIMIENTO DE LAS CIANOBACTERIAS: Cylindrospermopsis raciborskii y Aphanizomenon ovalisporum Ros, V; Prieto, AI; Moreno, I; Camen, AM rea de Toxicologa. Departamento de Nutricin y Bromatologa, Toxicologa y Medicina Legal. Universidad de Sevilla. Las cianobacterias txicas estn presentes en una gran diversidad de hbitats acuticos formando floraciones que contaminan las aguas y originan un grave riesgo para la salud humana y animal. Estas floraciones suelen presentarse como resultado de la eutrofizacin de los ecosistemas acuticos, aunque tambin se ven influenciados por factores como luz, temperatura, nitrgeno, etc. Concretamente los gneros Cylindrospermopsis y Aphanizomenon han sido detectados en floraciones txicas a nivel mundial. En el presente estudio nos propusimos conocer las mejores condiciones de cultivo de Aphanizomenon ovalisporum y la capacidad de crecimiento de esta especie productora de Cilindrospermopsina (CYN) con respecto a una cepa no productora de Cylindrospermopsis raciborskii. Para llevar a cabo la optimizacin de las mejores condiciones del medio de cultivo de A. ovalisporum se ensayaron tres variables del medio: medio Z8, medio Z8 enriquecido con CO2 1% y medio Z8 enriquecido con CO2 1% y NaHCO3 10 mM a 30C, con iluminacin (28 moles fotones m-2 s1) y burbujeo con aire estril continuos. Una vez comprobadas las mejores condiciones del medio de cultivo para un mayor crecimiento celular y una mayor produccin de CYN (medio Z8), se utiliz ste para la realizacin del estudio dinmico de crecimiento de ambas cepas valorando distintos parmetros: clorofila, densidad ptica y recuento celular. Ambos cultivos se mantuvieron durante 43 das en las condiciones ensayadas anteriormente. Se recogieron muestras de ambos cultivos los das 1, 8, 15, 22, 29, 36 y 43, momento en el que finaliz el estudio. En general, las medidas de clorofila y densidad ptica mostraron una evolucin similar al crecimiento celular en el tiempo y ste fue mayor en el cultivo de A. ovalisporum que en el de C. raciborksii hasta el da 36, momento en el que A. ovalisporum experiment decrecimiento celular. Los autores quisieran agradecer al CICYT (AGL2009-10026) y a la Junta de Andaluca (P09-AGR-4672I) por la financiacin del presente estudio. Palabras claves: Aphanizomenon, Cylindrospermopsis , Crecimiento, Clorofila, Densidad ptica. C.89.-CONCENTRACIN DE METALES PESADOS EN DIGNIDOS PARSITOS DE Sarpa salpa EN LAS COSTAS DE DAKAR (SENEGAL)* Torres, J1,2; Ndiaye PI3; Eira, C4,5 ; B, CT3; Miquel, J1,2 1 Departament de Microbiologia i Parasitologia Sanitries, Facultat de Farmcia, Universitat de Barcelona, Av. Joan XXIII, sn, 08028 Barcelona, Spain. 2Institut de Recerca de la Biodiversitat, Universitat de Barcelona, Av. Diagonal, 645, 08028 Barcelona, Spain. 3Dpartement de Biologie animale, Facult des Sciences et Techniques, Universit Cheikh Anta Diop de Dakar, Senegal. 4CESAM & Departamento de Biologia, Universidade de Aveiro, Campus de Santiago 3810-193 Aveiro, Portugal. 5Sociedade Portuguesa de Vida Selvagem, Estaao de Campo de Quiaios, Apartado 16 EC Quiaios 3081-101 Figueira da Foz, Portugal. En la actualidad la utilidad de ciertos modelos parasitarios como bioindicadores de polucin ambiental por metales pesados est ampliamente demostrada. Sin embargo, existen pocos precedentes que utilicen un modelo pez / dignido intestinal en medio marino. En este sentido, la salpa (Sarpa salpa) es un pez abundante y de consumo habitual en las cercanas de Dakar (Senegal) que aparece frecuentemente infestado por dignidos intestinales. En base a ello, se cuantificaron los niveles de tres metales pesados (Pb, Cd y Hg) en los tejidos de 25 salpas procedentes de la costa de Dakar, as como en dos de sus dignidos parsitos (Elstia stossichianum y Wardula capitellata). Inmediatamente tras su pesca se recogieron distintos tejidos y se guardaron congelados hasta su anlisis. Para ello, se us alrededor de 150 mg (peso hmedo) de cada muestra y se realiz una digestin cida de las mismas con HNO3 y H2O2 precediendo la cuantificacin de los metales por medio de ICP-MS. Los resultados, validados con el uso de blancos y estndares (DORM2 y DOLT-3), se indican en ppb (ng elemento / g de tejido hmedo). Las concentraciones obtenidas para el plomo fueron: 421 en rin, 559 en hgado y 56 en msculo. Para el cadmio fueron: 635, 907 y 7 respectivamente. Para el mercurio fueron: 39, 38 y 12 respectivamente. No se detect mercurio en ninguno de los dos dignidos analizados. Sin embargo, E. stossichianum present unas elevadas concentraciones de plomo y cadmio (732 y 947). Por su parte, los respectivos valores en W. capitellata fueron 3348 y 459. El mayor valor de bioconcentracin de plomo lo present Wardula respecto a la musculatura, siendo de 60. El valor ms elevado de bioconcentracin de cadmio se evidenci en Elstia respecto al msculo, siendo de 135. *Estudio subvencionado por los proyectos PCI-AECID: A/023428/09 y A/030039/10. Palabras Clave: Sarpa, Elstia, Wardula, Metales pesados, Senegal. C.90.-CONCENTRACIN DE ELEMENTOS TXICOS EN Sarpa salpa Y Balistes capriscus PROCEDENTES DE MAHDIA Y SFAX (TNEZ) Torres, J1,2; Kacem H3; Eira, C4,5 ; Neifar, L3; Miquel, J1,2
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Departament de Microbiologia i Parasitologia Sanitries, Facultat de Farmcia, Universitat de Barcelona, Av. Joan XXIII, sn, 08028 Barcelona, Spain. 2Institut de Recerca de la Biodiversitat, Universitat de Barcelona, Av. Diagonal, 645, 08028 Barcelona, Spain. 3Laboratoire de Biodiversit et Ecosystmes Aquatiques, Dpartement des Sciences de la Vie, Facult des Sciences de Sfax, 3000 Sfax, Tunisia. 4CESAM & Departamento de Biologia, Universidade de Aveiro, Campus de Santiago 3810-193 Aveiro, Portugal. 5Sociedade Portuguesa de Vida Selvagem, Estaao de Campo de Quiaios, Apartado 16 EC Quiaios 3081-101 Figueira da Foz, Portugal. La salpa (Sarpa salpa) y el pez ballesta (Balistes capriscus) son dos peces marinos de consumo habitual en Tnez. Su pesca en ocasiones se produce en zonas ms o menos cercanas a grandes industrias qumicas (gouvernorat de Sfax). En base a ello, se realiz un estudio con el fin de cuantificar los niveles de ciertos elementos txicos (Pb, As, Cd y Hg) en tejidos (hgado, rin y musculatura) de diversos ejemplares de ambas especies procedentes de la costa de dos gouvernorats con distinto grado de industrializacin como son Mahdia y Sfax. Se analizaron 27 salpas y 21 peces ballesta de Mahdia (con menos industrias) y 24 S. salpa y 24 B. capriscus de Sfax (zona altamente industrializada). Inmediatamente tras su pesca se recogieron los tejidos y se guardaron congelados hasta su anlisis. Para dicho anlisis se us alrededor de 150 mg (peso hmedo) de cada muestra, las cuales fueron digeridas con HNO3 y H2O2 antes de proceder a su cuantificacin por medio de ICP-MS. Los resultados fueron validados con el uso de blancos y estndares (DORM-2 y DOLT-3) y se indican en general en ppb (ng elemento / g de tejido hmedo). Los resultados muestran que los niveles de Pb y Cd fueron significativamente superiores en Sfax. La concentracin de As fue mayor en S. salpa de Mahdia. Los niveles de Hg fueron en general superiores en B. capriscus en comparacin con los valores obtenidos en S. salpa. A nivel ms concreto, la mayor concentracin media de Pb se observ en el hgado de salpas de Sfax (751 ppb), la de As en el rin del pez ballesta de Mahdia (62 ppm), la de Cd en hgado de salpas de Sfax (5326 ppb) y la de Hg en rin de B. capriscus de Sfax (2073 ppb). *Estudio subvencionado por los proyectos PCI-AECID: A/015863/08 y A/023585/09. Palabras Clave: Sarpa, Balistes, Elementos txicos, ICP-MS, Tnez. C.91.-DISTRIBUCIN Y VARIACIN TEMPORAL DE PLOMO (Pb) EN SUELOS URBANOS Pea-Fernndez, A1; Gonzlez-Muoz, MJ1; Lobo-Bedmar, MC2 1 Departamento de Nutricin, Bromatologa y Toxicologa, Universidad de Alcal, Campus Universitario, 28871-Alcal de Henares, Madrid. 2Instituto Madrileo de Investigacin y Desarrollo Rural Agrario y Alimentario (IMIDRA), Madrid. Los estudios de monitorizacin de la contaminacin de suelos, y en concreto, suelos urbanos o antroposuelos, presentan una gran importancia para evaluar el riesgo que tienen las diferentes actividades humanas sobre la salud. Esta trascendencia ha quedado plasmada en multitud de trabajos de monitorizacin de metales y metaloides en suelos de diferentes ciudades a lo largo del globo. Sin embargo, poco se sabe sobre como se distribuyen estos elementos en esta matriz y qu factores afectan a su presencia. El objetivo ha sido monitorizar la distribucin del Pb en suelos de parques pblicos de Alcal de Henares (Madrid), as como determinar su variacin temporal. Para ello, se ha dividido el rea de estudio en cuatro zonas, y se han realizado varios
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muestreos repartidos en el tiempo. Tambin se ha cuantificado el riesgo txico para el ser humano, derivado de la ingestin de este contaminante a travs de su presencia en los suelos, utilizando los criterios propuestos por la US EPA. Se ha determinado un incremento significativo de casi el 70% de Pb en slo un ao (julio 2000 a julio 2001), que se podra atribuir principalmente al uso de carburantes con este metal, cuyo uso ha sido prohibido posteriormente (enero 2002). Sin embargo, este aumento no presenta riesgo para la poblacin. En general, se ha observado una elevada variabilidad en la distribucin de este contaminante entre zonas. Este estudio ha puesto de manifiesto que la presencia de metales en los suelos, y, en concreto, el Pb, estara afectada por multitud de factores, tanto naturales como antropognicos, muchos de los cuales son actualmente desconocidos. Este hecho hace que sea muy compleja la identificacin de una o unas fuentes de emisin, que podran explicar las fluctuaciones aqu encontradas, especialmente en ambientes urbanos, ya que se encuentran peridicamente distorsionados por el hombre. Palabras clave: Metales, Distribucin, Suelos, Evaluacin de riesgos. C . 9 2 . - B I O M O N I TO R I Z A C I N D E M E TA L E S Y METALOIDES EN EL CABELLO: ESTUDIO DE DISTRIBUCIN POR ZONAS DE RESIDENCIA Pea-Fernndez, A1; Gonzlez-Muoz, MJ1; Lobo-Bedmar, MC2 1 Departamento de Nutricin, Bromatologa y Toxicologa, Universidad de Alcal, Campus Universitario, 28871-Alcal de Henares, Madrid. 2Instituto Madrileo de Investigacin y Desarrollo Rural Agrario y Alimentario (IMIDRA), Madrid. El uso del cabello humano se acepta como un monitor vlido para evaluar la exposicin a metales y metaloides, principalmente para aquellas de carcter ambiental y ocupacional. Sin embargo, poco se sabe sobre como afecta la zona de residencia de una misma ciudad al contenido de estas sustancias en el cabello de su poblacin, y por tanto, a su exposicin. Por ello, se ha credo interesante estudiar su posible influencia en la poblacin adolescente de Alcal de Henares (Madrid). Se ha monitorizado el contenido de As, Al, Be, Cd, Cr, Cu y Zn en el cabello de 96 chicas/os de 13-16 aos, mediante espectrometra de emisin atmica de plasma acoplado inductivamente (ICP-OES). Para el muestreo se ha dividido la ciudad en cuatro distritos, atendiendo principalmente a criterios demogrficos. No se han detectado niveles de As y Be en el cabello, lo que podra indicar que la poblacin adolescente alcalana no ha estado expuesta a estos contaminantes. Por otro lado, slo el Cr y el Cu han mostrado una dependencia con la zona de residencia. Las diferencias en el contenido mineral en el cabello entre zonas se atribuyen a numerosos factores, desde ambientales, geogrficos o socioeconmicos, hasta alimentarios, muchos de los cuales son desconocidos. Las escasas diferencias aqu encontradas indicaran que la poblacin adolescente de Alcal sufre la misma exposicin a estos contaminantes con independencia de la zona en la que viven, posiblemente debido a su proximidad. Sin embargo, la dependencia zonal encontrada para el Cr y el Cu, se podra atribuir a factores de tipo nutricional, ya que la va alimentara se ha descrito como una de las fuentes de exposicin ms importante para estos metales. Asimismo, otro posible factor que podra incidir de manera especial en este colectivo sera el socioeconmico, ya que este afecta directamente a los hbitos nutricionales de la familia. Palabras clave: Metales, Distribucin, Cabellos, Poblacin infantil.
XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.93.-EMPLEO DE NANOTUBOS DE CARBONO COMO SOPORTES DE EXTRACCIN EN FASE SLIDA PARA LA DETERMINACIN Y CARACTERIZACIN DE MATERIA ORGNICA DISUELTA EN AGUA DE MAR Snchez Gonzlez, J; Garca Otero, N; Moreda Pieiro, A; Bermejo Barrera, P. Departamento de Qumica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Facultad de Qumica. Universidad de Santiago de Compostela, Espaa. Se ha desarrollado un mtodo basado en la preconcentracin de materia orgnica disuelta (DOM) en agua de mar empleando nanotubos de carbono de pared mltiple (MWCNTs) como soportes de extraccin en fase slida (SPE). La extraccin en fase slida se llev a cabo tanto en modo bao como en modo columna, siendo las recuperaciones analticas mayores cuando se emplea el modo bao. La cuantificacin se realiza por diferencia entre la DOM en el agua de mar antes y despus de la preconcentracin por SPE empleando un analizador de carbono orgnico total (TOC) que opera en condiciones supercrticas (375C, 3200 psi) en medio cido fosfrico 6.0 M y con persulfato sdico 2,0% (m/v) como oxidante (deteccin de CO2 generado por espectrometra de infrarrojos no dispersiva, NDIR). La retencin de la DOM en el soporte MWCNTs se consigue tras acidulacin de la muestra de agua de mar (250 mL) a pH 1.0 y agitacin a 180 rpm (agitacin orbital-vaivn) a 25C con 60 mg de MWCNTs durante 4 h. La precisin total del procedimiento (n= 5) es del 4%, obteniendo una recuperacin analtica media del 55 3%. Este resultado indica que la capacidad de retencin de los MWCNTs es dependiente de la los tamaos moleculares de DOM en el agua de mar, siendo necesaria una caracterizacin de los tamaos moleculares retenidos. La caracterizacin de la DOM retenida se realiza por cromatografa lquida de alta resolucin en modo exclusin de tamaos (columna Superdex Peptide 10/300 GL con un rango de resolucin de tamaos moleculares entre 100 y 7000 Da). Para ello, la DOM retenida se eluye con 25 mL de una disolucin de metanol alcalinizada con sosa 2,0 M a pH 12 tras agitacin orbital-vaivn a 180 rpm y 25C durante 1 h. El extracto metanlico se neutraliza con una disolucin de cido clorhdrico 2,0 M y, la mezcla se evapora a sequedad, redisolviendo el residuo con 5 mL de fase mvil hidrgeno-fosfato disdico / nitrato amnico (25 mM / 25 mM, pH 6,5). Tras la separacin cromatogrfica se obtiene que el rango de tamaos moleculares de DOM retenida oscila entre los 100 y los 2000 Da. Este resultado confirma que la DOM preconcentrada empleando MWCNTs es de bajo peso molecular. Palabras clave: Materia orgnica disuelta, Agua de mar, Nanotubos de carbono, Analizador de carbono orgnico total, HPLC. C.94.-DETECCIN Y CUANTIFICACIN DE CILINDROSPERMOPSINA EN MUESTRAS DE AGUA MEDIANTE LC-MS/MS Guzmn-Guilln, R1; Prieto, AI1; Gonzlez, AG2, Soria, ME3; Camen, AM1 1 rea de Toxicologa. Departamento de Nutricin y Bromatologa, Toxicologa y Medicina Legal. Universidad de Sevilla. 2 Departamento de Qumica Analtica. Universidad de Sevilla. 3Centro de Investigacin, Tecnologa e Innovacin. Universidad de Sevilla (CITIUS). La aparicin, cada vez ms frecuente, de floraciones txicas de cianobacterias se est convirtiendo en un importante problema de calidad del agua en muchos pases del mundo, lo que genera un riesgo para la salud humana y animal. Es importante poder disponer de mtodos adecuados de deteccin y cuantificacin de estas toxinas para poder alertar a la poblacin y evitar as su exposicin a las mismas. La Cilindrospermopsina (CYN) es una toxina emergente producida por distintos gneros de cianobacterias por lo que, en el presente trabajo, nos propusimos poner a punto un mtodo analtico para su determinacin en muestras de agua. El mtodo consiste en filtrar la matriz de agua (200 mL), y posterior purificacin y concentracin utilizando filtros (glass fiber) y cartuchos de carbn grafitizado (SPE). El residuo se resuspende en 250 L de agua y la muestra se inyecta en un cromatgrafo LC-MS/MS (Perkin-Elmer Series 200) para su determinacin. Para la deteccin de CYN, se emplearon las transiciones 416,2/274,2, 416,2/336,1 y 416,2/194,0, sirviendo esta ltima para cuantificar la toxina. Se comprob la linealidad del mtodo (0,999) en el rango de concentraciones ensayadas (5500 g/L). Los lmites de deteccin (LOD) y cuantificacin (LOQ) calculados se sitan dentro del rango de concentraciones usuales encontradas de CYN en aguas naturales, de 3-10 g/L. El mtodo mostr una buena repetitividad, reproducibilidad y las recuperaciones superaron el 85% en las distintas concentraciones ensayadas. Adems la robustez calculada mediante un mtodo factorial 23 en el que se estimaron las siguientes variables: lote de cartucho SPE, velocidad de flujo y volumen de resuspensin del extracto obtenido, fue adecuada. Por todo esto, el presente mtodo validado permite la deteccin y cuantificacin de CYN presente en muestras reales de agua. Los autores quisieran agradecer al CICYT (AGL2009-10026) y a la Junta de Andaluca (P09-AGR-4672I) por la financiacin del presente estudio. Palabras clave: Cilindrospermopsina, LC-MS/MS, Aguas. C.95.-PLOMO Y CADMIO EN EL CANGREJO NEGRO (Grapsus adscencionis) EN CANARIAS Cabezas, D; Gutirrez, AJ; Rubio, C; Hardisson, A rea de Toxicologa, Facultad de Medicina de la Universidad de la Laguna, Campus de Ofra s/n, 30871. La Laguna. Espaa. En este trabajo se realiza la cuantificacin de las concentraciones de metales txicos (Pb y Cd) en cangrejos negros (Grapsus adscencionis) recogidos de su hbitat natural, reflejando las diferencias encontradas en la distribucin de los metales entre el exoesqueleto y el contenido interno de los cangrejos. Tambin exponemos conclusiones acerca de la contaminacin ambiental de las zonas de muestreo. Los muestreos fueron llevados a cabo realizando transeptos de 150 metros a lo largo de la costa en direccin norte-sur y de 5 metros de ancho. La tcnica de captura fue la del mechn nocturno o alumbramiento nocturno, se tomaron de esta manera 56 ejemplares de 4 zonas de muestreo (Punta del Hidalgo, Las Teresitas, Bocacangrejo y Refinera) de la costa de Tenerife. Para el anlisis de metales de las muestras se utiliz un espectrofotmetro de absorcin atmica Perkin Elmer 4100 ZL con un horno de grafito Perkin Elmer y un muestreador automtico AS 70. El estudio estadstico de los datos obtenidos se realiz mediante el paquete estadstico SPSS versin 19.0. El cangrejo negro Grapsus adscencionis mostr amplias variaciones en las concentraciones de plomo y cadmio, tanto entre las zonas como entre los tipos de tejidos. Las zonas con mayor concentracin de metales txicos fueron, Dos Hermanas para el cadmio (2,59 1,29 g/Kg) y la Refineria para el plomo (3,00 0,07 g/Kg). Adems, en todos los casos, la mayor concentracin de los metales analizados correspondi al exoesqueleto de esta especie frente a las menores concentraciones encontradas en el contenido interno. Palabras clave: Plomo, Cadmio, Espectrofotometra de absorcin atmica, Grapsus adscencionis, Tenerife.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.96.-PERFIL TOXICOLGICO DE LOS PRODUCTOS DE TRANSFORMACIN DE LA Jatropha curcas L. Barahona, E; Anadn, A; Daz, P; Castellano, V; MartnezLarraaga, MR Departamento de Toxicologa y Farmacologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, 28040Madrid. Jatropha curcas L, planta Euphobiaceae originaria de Amrica Central, resistente a la sequa y capaz de crecer en terrenos marginales ha adquirido gran importancia por el contenido en aceite de su semilla (35-40%) que puede transformarse en biodiesel. Su cultivo no compite con la produccin de alimentos por contener sustancias altamente txicas como steres de forbol (2-4 mg/g en las diferentes variedades) y lectinas. De sus productos de transformacin destacamos: (1) El aceite que se obtiene es txico, no se utiliza para consumo. La extraccin de los steres de forbol con metanol es el mejor mtodo para rebajar su contenido (55%). (2) La torta resultante del prensado de la semilla tiene alto contenido proteico. Podra utilizarse como fertilizante orgnico (3-4,5% de N) o en alimentacin animal si se detoxifica. La presencia de toxinas biodegradables, tipo esteres de forbol, hace que la torta pueda usarse como biopesticida. Recientemente se han degradado los steres de forbol de la torta mediante fermentacin en estado slido (1,5 mL de inculo/5 g de torta a 30C y 65% de humedad) con Pseudomonas aeruginosa (cepa PseA), Esto tiene gran importancia ambiental, social y econmica, pero se necesitan ensayos en animales para confirmar su seguridad, antes de su uso en piensos. (3) En la obtencin del biodiesel por transesterificacin se aisla glicerina como subproducto. La toxicidad de las impurezas que acompaan a la glicerina (metanol 0,5% y sodio 1,2% ambos aadidos como catalizadores) se considera despreciable. (4) Los contaminantes que originan la combustin del biodiesel como xidos de nitrogeno, monxido de carbono, partculas PM 2,5 y nanopartculas, pueden afectar al aparato respiratorio, irritar piel y mucosas, aumentar la predisposicin a infecciones virales y frenar el crecimiento. El mecanismo parece estar relacionado con la produccin y liberacin de citokinas proinflamatorias y quemokinas de las clulas del epitelio bronquial. Palabras clave: Jatropha curcas L, Esteres de forbol, Toxicidad, Biodiesel. C.97.-ESTUDIOS PRELIMINARES DE COMPUESTOS ORGNICOS PERSISTENTES EN DELFINES LISTADOS (Stenella coeruleoalba) VARADOS EN EL SURESTE PENINSULAR. Pealver, J1,3; Navas, I1; Marn, MD2; Mara-Dolores, E3; Martnez-Lpez, E1; Garca-Fernndez, AJ1,* 1 rea de Toxicologa. Universidad de Murcia. Campus de Espinardo, Murcia. *ajgf@um.es 2Laboratorio Regional de Salud Pblica. Consejera de Sanidad y Consumo Regin de Murcia. Ronda de Levante 11, 30008, Murcia. 3Consejera de Agricultura y Agua Regin de Murcia. Plaza Juan XXIII. 30008, Murcia. Los Contaminantes Orgnicos Persistentes (COPs) son compuestos txicos, persistentes con un marcado carcter lipoflico, capacidad de bioacumulacin y biomagnificacin. Los cetceos se encuentran en la cspide de la cadena trfica marina, siendo escasos los estudios sobre la contaminacin por estos compuestos en el Mediterrneo. La obtencin de datos es una valiosa herramienta para comprender las causas del deterioro poblacional de esta especie y para conocer el estado de los hbitats en los que se desenvuelven sus poblaciones. Se ha evaluado la exposicin y posibles efectos txicos relacionados con la exposicin. Se analizaron insecticidas organoclorados (ismeros del hexaclorociclohexano, derivados ciclodinicos y
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DDT y derivados) as como una batera de congneres de PCBs que abarca a 10 congneres coplanares (PCBs tipo dioxina) y 6 congneres no coplanares (monitores ambientales) en tejido adiposo de 12 delfines listados varados en la Regin de Murcia durante el ao 2009. Todas las muestras analizadas presentaban residuos de insecticidas organoclorados y de PCBs. Los insecticidas organoclorados ms frecuentemente detectados fueron: lindano, p,p-DDT, endrn aldehido y p,p-DDE y por el contrario los que menos endosulfn I, dieldrn y endrn. Los derivados difenilalifticos, con las mayores concentraciones, revelan una exposicin continua, si bien no parecen ser suficientes para constituir un riesgo inmediato para la poblacin. Respecto a PCBs, los congneres no coplanares 138, 153, 180 y 183 se detectaron en todas las muestras analizadas; los congneres 52 y 101 se detectaron en 8 ejemplares, mientras que el congnere 28 no se detect. Por el contrario, de los 10 coplanares analizados, no se hall ningn No Orto (77, 81, 126, 169). De los coplanares Orto, cuatro no se hallaron (114, 156, 157 y 189), mientras que s se encontr el 118 (en 7 ejemplares), cuyo TEF en alto, y el 167 (en 5 delfines). Agradecimientos: A David Corbaln y al personal del CR de Fauna Silvestre El Valle. Financiado por la Fundacin Seneca (CARM) (08758/PI/08). Palabras clave: COPs, Organoclorados, PCBs, Delfn listado, Mediterrneo. C.98.-ESTUDIO ECOTOXICOLOGICO DE LA OXITETRACICLINA EN LA LOMBRIZ DE TIERRA (Eisenia fetida) Pro, J1; Martnez-Larraaga, MR2; Anadn, A2 1 Laboratorio de Ecotoxicologa. Departamento de Medio Ambiente. INIA. Madrid. 2Departamento de Toxicologa y Farmacologa. Facultad de Veterinaria. UCM. Madrid. Los medicamentos veterinarios se emplean en produccin animal para proteger la salud de los animales, evitar prdidas econmicas, y garantizar un suministro de alimentos inocuos. La oxitetraciclina es un antibitico de amplio espectro empleado en medicina humana y veterinaria producido a partir del actinomiceto Streptomyces rimosus que se utiliza para el control de bacterias, hongos y organismos similares a micoplasmas. La presencia de residuos de oxitetraciclina en estircoles y purines, derivados de animales tratados, y aplicados como fertilizantes en suelos agrcolas conlleva el riesgo de entrada de oxitetraciclina en el ecosistema terrestre pudiendo actuar sobre organismos nodiana, como invertebrados terrestres, que juegan un papel importante en la degradacin y transformacin de la materia orgnica. Una interferencia en estos procesos podra alterar el ciclo de nutrientes, afectando la fertilidad del suelo. Dada la escasa informacin disponible de los efectos subletales de la oxitetraciclina en lombriz de tierra, se ha desarrollado un estudio examinando el efecto de oxitetraciclina en forma de clorhidrato sobre Eisenia fetida (Oligochaeta, Lumbricidae) empleando una modificacin del ensayo de toxicidad aguda para lombriz de tierra segn normas de la OCDE aumentando el tiempo de exposicin a 21 das y utilizando un suelo agrario mezclado con arena (proporcin 1:1) simulando el peor caso posible (es decir, mayor porcentaje de arena y menor porcentaje de carbono orgnico, que permita una menor adsorcin de la sustancia a ensayo). Como parmetro final de toxicidad adems de la mortalidad se introduce la variacin en el peso final como parmetro subletal. Las concentraciones nominales de oxitetraciclina empleadas en este ensayo estn comprendidas entre 0,1 y 1000 mg/Kg suelo (peso seco). Los datos obtenidos de este estudio pueden reducir el factor de incertidumbre asociado en la evaluacin del riesgo as como tambin mejorar la comprensin de los efectos potenciales de la oxitetraciclina en
XIX Congreso Espaol de Toxicologa invertebrados terrestres. Palabras clave: Oxitetraciclina, Invertebrados terrestres, Eisenia fetida. C.99.-VALORACIN DE EFECTOS DE PROPYL PARABEN Y SULFONATO DE PERFLUOROOCTANO EN Lemna minor Pro, J; Fernndez, C; del Ro, C; Carbonell, G Laboratorio de Ecotoxicologa. Departamento de Medio Ambiente. INIA. Madrid. La aplicacin de residuos slidos urbanos, lodos y efluentes de depuradora como fertilizantes y/o enmiendas orgnicas en suelos agrarios puede llevar asociada la introduccin en el medio ambiente de contaminantes. El propyl paraben (para-hidroxi-benzoato de propilo) es el aditivo conservante ms utilizado de la familia de los parabenes empleado en productos de cuidado personal, alimentos y compuestos farmacuticos. Los sulfonatos de perfluorooctano (PFOS) son sustancias que se comercializan en forma de sales, derivados y polmeros, utilizados para proporcionar resistencia a la grasa, al aceite y al agua en diversos materiales. Debido a su extrema persistencia se ha acordado su limitacin a nivel comunitario, con algunas excepciones debido a lo reducido de esos usos y a la carencia de productos alternativos. El medio acutico se considera el receptor final de las aguas residuales (depuradas o sin depurar) y de las aguas procedentes de la escorrenta, percolacin o lixiviacin de los suelos. Los ensayos estandarizados de la OCDE contemplan el uso de Lemna minor para la valoracin de los efectos de contaminantes sobre el crecimiento de plantas acuticas. El objetivo de este estudio es la valoracin de los efectos de propyl paraben y PFOS mediante dos ensayos estticos de inhibicin del crecimiento en Lemna minor con concentraciones nominales comprendidas entre 0,01 y 100 mg/L. Los parmetros finales de toxicidad, inhibicin del crecimiento (ErCx) e inhibicin del rendimiento (EyCx) a los 7 das de exposicin, estn basados en tres variables de medida: nmero de frondas, peso fresco y peso seco. Los datos de toxicidad obtenidos en este ensayo pueden reducir la incertidumbre asociada a la evaluacin del riesgo ambiental y mejorar la comprensin de los efectos potenciales de propyl paraben y sulfonato de perfluoroctano en plantas acuticas. Este trabajo ha sido financiado por los proyectos: RTA201000004-C02-00 y CTM2010-19779-C02 Palabras clave: Contaminantes emergentes, PFOS, Parabenes, Lemna minor. C.100.-ESTUDIO ECOTOXICOLGICO PILOTO EN LAS MINAS ABANDONADAS DE URANIO DE SALAMANCA Pescador, M1,2; Vicente-Vicente, L2; Snchez-Gonzlez, PD2; Prieto, M2; Morales, AI2 1 Facultad de Ciencias Agrarias y Ambientales, Universidad de Salamanca, Avda. Filiberto Villalobos 119-129, 37007, Salamanca (moises@usal.es). 2rea Toxicologa, Departamento Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Salamanca. Las actividades de extraccin de minerales son responsables de graves impactos sobre el medio ambiente los cuales, la mayora de las veces, persisten durante varias dcadas, incluso despus de que la explotacin minera haya cesado. Los datos obtenidos de los animales silvestres que estn expuestos a los contaminantes en su hbitat natural, son muy importantes para la salud humana y las evaluaciones ambientales de riesgo. Estos datos proporcionan informacin sobre la contaminacin del medio ambiente con sustancias qumicas o mezclas qumicas, efectos en la cadena trfica y el potencial riesgo de exposicin para la vida silvestre y en los seres humanos. El propsito de este trabajo ha sido evaluar el potencial riesgo de exposicin ambiental con metales pesados en las cercanas de una mina de Uranio. El estudio se elabor mediante la captura de 21 ejemplares de ratones de campo (Apodemus sylvaticus) en la mina de Uranio en Saelices el Chico (Salamanca), siendo la zona control un rea similar en Casillas de Flores (Salamanca). A los individuos capturados se les extrajo tejido renal, heptico y seo (fmur, escpula y hemimandbula inferior). Tambin se recogieron muestras de suelo en los puntos de captura. Mediante espectrometra de masas (ICP-MS) se analiz el contenido en: Aluminio, Arsnico, Cadmio, Cobalto, Cobre, Estroncio, Hierro, Plomo, Selenio y Uranio. El suelo de la mina reflej un mayor contenido de Uranio, Arsnico, Cobre, Estroncio, Plomo y Hierro respecto a la zona control. Por el contrario, en los tejidos no se detectaron diferencias en la mayora de los metales, excepto en el tejido seo, en el cual se detect mayor abundancia de Plomo y Estroncio. En el tejido renal se registraron elevados niveles de Uranio, aunque el nmero de muestras no fue suficientemente alto como para poder permitir extraer conclusiones fiables. El Cadmio tambin apareci en los tejidos analizados, sin embargo, sorprendentemente no supero el umbral de deteccin en el suelo. Los resultados obtenidos sugieren un aumento de concentracin en algunos metales pero con gran incertidumbre, debida al bajo nmero de muestras, sera recomendable la ampliacin de este tipo de estudios para descartar o confirmar de forma consistente la posible influencia ecotoxicolgica de los metales pesados en reas ricas en Uranio. Palabras clave: Apodemus, Captura, Metales, Uranio. C.101.-ESTUDIO DE LA EXPOSICIN PRENATAL A METALES TXICOS DETERMINADOS EN LQUIDO AMNITICO Y SANGRE MATERNA Ros, V1; Calleja, A 2; Luque, M3; Ostos, R3; Grilo, A4; Camen, AM1; Moreno, I 1 1 rea de Toxicologa, Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla, Spain. 2Centro de Investigacin, Tecnologa e Innovacin de la Universidad de Sevilla CITIUS. Universidad de Sevilla, Spain. 3Servicio de Ginecologa, Hospital de Valme de Sevilla. 4Servicio de Medicina Interna, Hospital de Valme de Sevilla. Los contaminantes medioambientales son un constante peligro para la salud humana. Estos agentes son ubicuos encontrndose tanto en los alimentos, como en el agua o en el aire. En los ltimos aos se ha observado un incremento en el nmero de nios nacidos con bajo peso y/o malformaciones congnitas en ciudades con un alto nivel de contaminacin medioambiental. Estos efectos sobre el feto pueden ser debido a una exposicin materna a ciertos contaminantes entre los que destacamos: Cd, Pb, y Hg. La exposicin materna a estos metales se estudia en muestras de sangre, y en lquido amnitico la exposicin fetal. El objetivo de este trabajo ha sido el empleo de un mtodo simple para la determinacin de Pb, Hg, Cd, Mn y Ni en sangre materna y lquido amnitico por Espectrometra de emisin de plasma acoplado a espectrometra de masas (ICP-MS). Las muestras fueron previamente digeridas por microondas, enfrindose durante 24 horas para minimizar las prdidas de elementos voltiles. Los tiempos de integracin ptimos para cada elemento en el lquido amnitico fueron: Ni (4,5 s, 300 pg/mL), Mn (3 s, 30 pg/mL), Cd(15 s, 10 pg/mL), Hg (30 s, 100 pg/mL) y Pb (12 s, 500 pg/mL), y para las muestras de sangre: Ni (4,5s, 500 pg/mL), Mn (6 s, 200 pg/mL), Cd (6 s, 40 pg/mL), Hg (30 s, 50 pg/mL) and Pb (6 s, 100 pg/mL). El factor de dilucin empleado para evitar los efectos de matriz en lquido amnitico fue de 1:5 para todos los elementos, y en la sangre se emple 1:25 para Mn, Cd, Hg y Pb y 1:10 para el Ni. El rendimiento del mtodo se comprob en material certificado (Clinchek(R) Serum Control Level II y Whole Blood Control Level II). El mtodo se aplic a muestras de
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa sangre y lquido amnitico procedentes de embarazadas, y fueron recogidas durante el parto. Los niveles encontrados estn por debajo de los niveles que se consideran peligrosos para la salud. Agradecimientos: Ayuda del Plan Propio de la Universidad de Sevilla. Palabras clave: Fluido amnitico, Metales txicos, ICP-MS, Contaminacin medioambiental. C.102.-ADSORCIN DE BORO EN ALGINATO DE CALCIO: INFLUENCIA DE SALES DE SODIO, CALCIO Y MAGNESIO Ruiz, M1; Tobalina, C1; Demey, H1; Sastre, AM2 1 Departament d'Enginyeria Qumica, Universitat Politcnica de Catalunya E.P.S.E.V.G., Avda. Victor Balaguer s/n. 08800 Vilanova i la Geltr, Barcelona.2Departament d'Enginyeria Qumica, Universitat Politcnica de Catalunya E.T.S.E.I.B., Diagonal 647, 08028 Barcelona. Uno de los contaminantes que ha adquirido especial importancia en la ltima dcada es el boro. No fue sino hasta el ao 2009 en el que fue realizado por la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) un estudio exhaustivo de la toxicidad del boro, estableciendo el lmite de nivel de boro presente en el agua potable en 2,4 mg/L. En las plantas, el boro es un elemento necesario para su crecimiento, pero a dosis elevada es txico para su evolucin. En los humanos, un consumo prolongado puede provocar diferentes disfunciones en el organismo. En la actualidad no existe un mtodo universal para la eliminacin del boro de las aguas contaminadas. Experimentaciones llevadas a cabo por nuestro grupo de trabajo a partir de soluciones sintticas de boro nos han revelado que el alginato de calcio es un buen adsorbente para la eliminacin del boro. No obstante los fluidos reales contaminados con boro son ricos en sales, por este motivo, debido a la gran importancia que conlleva la posible reutilizacin del agua contaminada nos hemos planteado el estudio de la influencia de diferentes sales en la adsorcin de boro utilizando como adsorbente el alginato de calcio para poder valorar su posible aplicacin. Las sales seleccionadas para nuestro estudio han sido: NaCl, NaHCO3, Na2SO4, Na2CO3 y Na2HPO4, CaCl2 y Ca(NO3)2, MgCl2 y MgSO4. Los resultados obtenidos nos muestran que la capacidad de adsorcin del boro se ve altamente influenciada por la presencia de sales de sodio, calcio y magnesio, sufriendo una reduccin que oscila entre el 5 y 30%. Paralelamente se estableci la relacin entre la presencia de sales y el hinchamiento producido en las perlas, siendo las sales de sodio las que producen un mayor cambio de volumen del adsorbente. Palabras clave: Boro, Adsorcin, Sales. C.103.-ALCA COMN (Alca torda) COMO BIOINDICADOR DE CONTAMINACIN POR MERCURIO EN EL SUROESTE DEL MEDITERRNEO Espn, S1; Martnez-Lpez, E1; Mara-Mojica, P1,2; GarcaFernndez, AJ1 1 rea de Toxicologa. Universidad de Murcia. Campus de Espinardo, 30100 Murcia. ajgf@um.es 2 Centro de Recuperacin de Fauna Silvestre Santa Faz Alicante. Consellera de Medio Ambiente, Agua, Urbanismo y Vivienda, Generalitat Valenciana. Se ha analizado la concentracin de mercurio mediante un analizador directo de mercurio (DMA-80, Milestone) en diferentes tejidos de 50 individuos de alca comn (Alca torda) ahogados en artes de pesca en el mar mediterrneo. El patrn de distribucin fue similar que el observado en otros estudios (hgado>barbas>rin>msculo>encfalo>ejes), con niveles de mercurio de 2,85 0,89, 2,66 1,6, 2,22 0,87, 1,54 0,54, 1,48 0,54 y 1,30 0,76 mg/Kg (peso seco), respectivamente. Se encontraron correlaciones positivas en los niveles de mercurio
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entre tejidos internos (r>0,80, p<0,000), probablemente reflejo de una exposicin crnica y un equilibrio entre su absorcin, metabolismo y eliminacin. Las correlaciones entre los niveles de mercurio en rganos internos y plumas tambin fueron significativas (0,33>r>0,48; p<0,05), lo que sugiere que la pluma puede ser una excelente herramienta no destructiva para monitorizar mercurio en alcas. Los niveles de mercurio encontrados en msculo son, aproximadamente, diez veces mayores que las concentraciones observadas por otros autores en potenciales presas del alca (0,14-0,16 mg/Kg peso seco). Los niveles detectados son mayores que los citados en otras especies de lcidos de latitudes ms altas, lo cual puede tener su razn de ser en diferencias en la dieta durante la invernada en el mediterrneo. En cualquier caso, los niveles son menores que los descritos como causantes de efecto txico. Se observaron diferencias significativas asociadas a la edad, con niveles de mercurio mayores en aves adultas para rin, encfalo y plumas (p<0,008). No se observaron diferencias debidas al sexo ni al estado nutricional. Consideramos que, de acuerdo con los resultados, el alca comn puede ser una buena especie biomonitora de mercurio en el rea mediterrnea, especialmente los individuos adultos. Agradecimientos: A la Generalitat Valenciana por la obtencin de las muestras. Al MICIIN y la Fundacin Seneca por los proyectos MASCA'2004 (CGL2004-5959/BOS), MASCA'2008 (CGL2008-4318/BOS) y 08758/PI/08. Palabras clave: Mercurio, Alca torda , Bioindicador, Mediterrneo, Plumas. MTODOS ALTERNATIVOS Y TOXICOLOGA EXPERIMENTAL: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.104.-CAMBIOS HISTOPATOLGICOS EN HGADO Y RIN DOSIS-DEPENDIENTES INDUCIDOS EN T I L A P I A S E X P U E S TA S A C L U L A S D E Aphanizomenon ovalisporum PRODUCTORES DE CILINDROSPERMOPSINA Guzmn-Guilln, R1; Prieto, AI1; Moyano, MR2; Blanco3, A; Camen, AM1 1 rea de Toxicologa. Departamento de Nutricin y Bromatologa, Toxicologa y Medicina Legal. Universidad de Sevilla. 2Departamento de Farmacologa, Toxicologa y Medicina Legal. Universidad de Crdoba. 3Departamento de Anatoma y Anatoma y Patologa comparativa. Universidad de Crdoba. Las floraciones txicas de cianobacterias suelen presentarse como resultado del aumento de la eutrofizacin, habitualmente de naturaleza antropognica, de los ecosistemas acuticos. Esto es cada vez ms frecuente en algunas regiones donde el crecimiento de la actividad agrcola e industrializacin no han estado seguidos por un desarrollo adecuado de los tratamientos de aguas residuales. Todo esto lleva a una acumulacin de estas toxinas en distintas especies acuticas con los consiguientes efectos txicos. La cilindrospermopsina (CYN) es una cianotoxina hidrosoluble producida por Aphanizomenon ovalisporum, al que pueden estar expuestos diferentes organismos acuticos, como los peces. En el presente trabajo nos interes estudiar las diferentes lesiones histopatolgicas producidas en hgado y rin de tilapias expuestas a clulas de A. ovalisporum con diferentes dosis de CYN (10 y 100 g/L). Para ello se formaron tres grupos (8 peces) de tilapias: un grupo control, uno de peces expuestos a 10 g CYN/L y otro de peces expuestos a 100 g CYN/L, durante un periodo de 14 das. Los rganos se extrajeron para su posterior anlisis por microscopa
XIX Congreso Espaol de Toxicologa ptica y electrnica. En los dos rganos estudiados se observaron daos histolgicos a ambas dosis de exposicin. En hgado, se observ al microscopio ptico necrosis dispersa de los hepatocitos, acumulacin de glucgeno y ncleos picnticos, dando imagen de pancreatitis necrtica y al microscopio electrnico acumulacin de glucgeno amorfo y sustancias grasas. En rin, en general, se observ glomerulopata acompaada de atrofia e hiperemia de los capilares y engrosamiento de la membrana basal glomerular. Adems, los efectos txicos se mostraron dosis dependientes en ambos rganos, siendo la dosis de 100 g/L la que gener mayores lesiones. Los autores quisieran agradecer al CICYT (AGL2009-10026) y a la Junta de Andaluca (P09-AGR-4672I) por la financiacin del presente estudio. Palabras clave: Cilindrospermopsina, Tilapias, Histopatologa, Aphanizomenon ovalisporum. C.105.-LA INDUCCIN DE VITELOGENINA EN ZEBRAFISH (Danio rerio) COMO BIOMARCADOR DE LA CONTAMINACIN ACUTICA EN LA EXPOSICIN AL BISFENOL-A Molina, AM1; Lora, AJ1; Blanco, A2; Fernndez, AI1; Costela, C3; Moyano, MR1 1 Dpto. Farmacologa, Toxicologa, y Medicina legal y Forense. Universidad de Crdoba. 2Dpto. Anatoma y Anatoma Patolgica Comparadas. Universidad de Crdoba. 3Servicio de Experimentacin y Produccin Animal. Universidad de Cdiz. La importancia del Bisfenol-A (BPA) como contaminante medioambiental y el riesgo que supone debido a su baja tasa de biodegradabilidad y su bioacumulacin en la cadena trfica ha motivado que recientemente la Eurocmara haya incluido al BPA como sustancia a evaluar su toxicidad. La Comisin Europea tendr hasta 2013 para decidir si se aaden al inventario trece nuevas sustancias, entre las que se incluye el BPA. De ah la importancia de una evaluacin de la peligrosidad de esta sustancia como contaminante. La vitelogenina, es una hormona de naturaleza proteica, precursora del desarrollo folicular como respuesta a los estrgenos circulantes en el plasma, es secretada en el hgado. La vitelogenina es frecuentemente utilizada como un biomarcador sensible a la accin de compuestos estrognicos artificiales en el medio acutico. Para realizar la investigacin hemos utilizado 60 zebrafish machos y hembras distribuidos al azar en acuarios: Grupo control (n=20), y 4 grupos tratados (n=40) expuestos a 1, 10, 100 y 1000 g/L respectivamente, durante los 14 das. Inmediatamente despus del sacrificio, con una dilucin de MS-222, se tomaron las muestras y se congelaron para el posterior anlisis toxicolgico del BPA (mediante LC/MS-MS) y para realizar el anlisis de la vitelogenina (Inmunoensayo enzimtico). Se observ un incremento de BPA en los animales a medida que aumenta la concentracin al que estaban expuestos, mostrndose diferencias significativas en todos los grupos de estudio con respecto al ltimo lote de exposicin. De la misma forma, al determinar los niveles de vitelogenina, se observ como a medida que aumenta la concentracin del BPA al que estaban expuestos los animales, la concentracin de la hormona fue incrementando, observndose una correlacin positiva entre ambos. Los zebrafish macho, tambin aumentaron la produccin de la hormona al ser expuestos al BPA. Este trabajo ha sido financiado por la Consejera de Innovacin, Ciencia y Empresa. Junta de Andaluca (Proyectos de Excelencia) P09-AGR-5143. Palabras clave: Bisfenol-A, Branquias, Zebrafish, Biomarcador, Contaminacin acutica. C.106.-ESTRS OXIDATIVO PRODUCIDO POR CILINDROSPERMOPSINA PURA EN LA LNEA CELULAR HEPTICA DE PEZ PLHC-1 Gutirrez-Praena, D; Pichardo, S; Jos, A; Camen, AM rea de Toxicologa, Facultad de Farmacia, Universidad de Sevilla. C/ Profesor Garca Gonzlez 2, 41012, Sevilla, Espaa. Las cianobacterias pueden crecer en un amplio rango de hbitats dando lugar a la produccin de cianotoxinas. Entre ellas se encuentra la cilindrospermopsina (CYN), un potente alcaloide txico cuya presencia se ha detectado en masas de agua de diferentes pases. Por ello, tanto la fauna y flora de estos hbitats, como el hombre al consumir agua y alimentos contaminados, pueden verse afectados. In vivo e in vitro se ha demostrado que la CYN inhibe la sntesis de protenas. Adems, produce efectos genotxicos y reduce la sntesis de GSH, aunque no se conoce si el estrs oxidativo est implicado en dichos cambios. Por ello, la potencial alteracin de biomarcadores de estrs oxidativo por esta toxina es de inters. De esta forma, en el presente trabajo se han determinado los niveles de especies reactivas de oxgeno (ERO), la actividad de la enzima -glutamilcisteina sintetasa (GCS) y los niveles de glutatin reducido (GSH) de la lnea celular heptica de pez PLHC-1. Las clulas se expusieron a los valores de concentracin efectiva media CE50, CE50/2 y CE50/4, calculadas a partir de los resultados obtenidos en los ensayos de citotoxicidad basal realizados previamente sobre la misma lnea celular (0-8 g/mL de CYN pura). Las ERO sufrieron un aumento significativo dependiente de la concentracin, mientras que la GCS aument su actividad para la concentracin de CE50/4 (2 g/mL), vindose reducida posteriormente de forma significativa a las concentraciones ms elevadas ensayadas. Por ltimo, el GSH disminuy significativamente a la concentracin ms alta ensayada. Los resultados obtenidos indican que el estrs oxidativo est relacionado con la patogenicidad de la CYN in vitro. Los autores agradecen a la Junta de Andaluca (P09-AGR04672I) y al MICINN (AGL2009-10026) la financiacin de este trabajo, y al Servicio de Biologa del CITIUS el soporte tcnico. Palabras clave: Cilindrospermopsina, PLHC-1, Citotoxicidad basal, Estrs oxidativo. C.107.-EVALUACIN TOXICOLGICA DE MEZCLAS COMPLEJAS MEDIANTE MTODOS ALTERNATIVOS A LA EXPERIMENTACIN ANIMAL Pillco, A1; Hazen, MJ2, de la Pea, E1 1 Departamento de Mutagnesis, Instituto de Ciencias Agrarias (ICA), Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC), Serrano 115, 28006 Madrid. 2Departamento de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad Autnoma de Madrid, Darwin 2, 28049 Madrid. La evaluacin toxicolgica de mezclas complejas (MC) ha ido adquiriendo gran inters desde que se ha demostrado que los efectos toxicolgicos de las sustancias simples varan cuando se encuentran en forma de mezclas. Evaluar el efecto txico de MC es importante porque podran ser peligrosas para el ser humano y el medio ambiente. Los lodos que provienen de las estaciones de depuracin de aguas residuales son MC que en los ltimos aos estn siendo utilizados como enmiendas agrcolas y tambin estn siendo valorizados mediante procesos qumicos como la pirlisis, para obtener productos con alta capacidad energtica. El objetivo de este trabajo es evaluar la toxicidad de extractos de lodos que se aplican en agricultura y de lquidos de pirlisis que se obtienen a partir de lodos, mediante mtodos alternativos a la experimentacin animal. Los ensayos de bioluminiscencia en Vibrio fischeri y de germinacin en semillas de Lepidium sativum. fueron empleados para evaluar la ecotoxicidad. Los
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa resultados para ambos ensayos revelan un alto nivel de toxicidad producido por ambas muestras. Para evaluar la genotoxicidad, primero se empleo el ensayo de Salmonella typhimurium. El protocolo fue seguido utilizando las cepas TA98, TA100, TA102 y TA104. Los resultados mostraron la presencia de actividad mutagnica producida por los lquidos de pirlisis. Las cepas ms sensibles demostraron ser la TA98 y la TA100. Segundo, se emple el ensayo de mutacin y recombinacin somtica en Drosophila melanogaster. El protocolo fue seguido empleando los cruces estndar y alta bioactivacin. Los resultados muestran que los lquidos de pirlisis tienen la capacidad de producir daos genotxicos. Los cuatro mtodos alternativos han demostrados ser rpidos, econmicos y sensibles para evaluar MC. En conclusin los mtodos alternativos han demostrado la existencia de riesgo ecotxico y genotxico producido por MC empleadas en agricultura y en la valorizacin energtica. Proyecto: OTT2007X1317, *MAEC-AECID. Palabras clave: Ecotoxicidad, Mutagenicidad, Genotoxicidad, Mezclas, Mtodos alternativos. C.108.-MONITORIZACIN FISIOLGICA DE RATONES C57BL6/J DURANTE MUESTREO SANGUNEO REPETIDO Camino, I; Casado, P; Blasco, C; Castaeda, P; Ortega, F; Martnez, MS; Garca, A; Ferrer, S; Jimnez, E Diseases of the Developing World Drug Discovery Center. GlaxoSmithKline R&D. Tres Cantos, Madrid, Espaa. El centro de Enfermedades para Pases en Desarrollo (Diseases for Developing World, DDW) en Tres Cantos est dedicado al desarrollo de nuevos frmacos, principalmente, frente a malaria y tuberculosis. La estrategia para la progresin de compuestos a travs de la fase preclnica est basada en disponer de un paquete integrado de resultados obtenidos del ratn, Eficacia + Exposicin + Tolerabilidad, que nos permita seleccionar los mejores candidatos para alcanzar la fase de desarrollo. Estos estudios preclnicos son complejos y costosos. Por ello, y teniendo en cuenta el firme compromiso de GSK con el principio de las 3R's, hemos puesto a punto un ensayo de cribado en el que, a partir de los mismos sujetos, se obtienen resultados simultneos de tolerabilidad y exposicin sistmica. El estudio consiste en el anlisis de los posibles efectos adversos tras la administracin de altas dosis de nuevos compuestos junto con sus niveles sanguneos, obtenidos mediante muestreo aleatorio. Esta aproximacin nos permite integrar dos estudios in vivo en uno con la consiguiente reduccin en el nmero de animales y optimizar el diseo de los estudios de eficacia. El objetivo del estudio fue asegurar que el muestreo repetido de muestras de sangre era bien tolerado por los ratones de la cepa C57BL/6J. Ganancia de peso, observaciones in vivo, anlisis hematolgico y bioqumico de la sangre fueron los parmetros elegidos para medir las posibles alteraciones fisiolgicas que pueden sufrir los animales tras repetidas colecciones de sangre a lo largo de 24h. Los resultados confirman que hasta tres extracciones de sangre de 25uL pueden ser realizadas en los ratones C57BL6/J durante 24h sin interferir en los estudios de tolerabilidad. Palabras clave: C57BL6/J, Muestreo sanguneo, 3R's. C.109.-EVALUACIN IN VITRO DEL EFECTO ENDOCRINO DE COMPUESTOS ORGANOCLORADOS DETECTADOS EN RAPACES Aldeguer, MP; Salas, A; Navas, I; Martnez-Lpez, E; GarcaFernndez, AJ* rea de Toxicologa, Facultad de Veterinaria, Universidad de Murcia. *ajgf@um.es A pesar de que la mayora de los insecticidas organoclorados han sido prohibidos, se han utilizado ampliamente durante aos, y debido a su elevada persistencia, se siguen detectando hoy en da. Algo parecido ocurre con organoclorados de origen industrial como los PCBs. La capacidad de algunos de estos compuestos de interactuar con el sistema endocrino de animales y ser humano ha sido ampliamente estudiada. En estudios previos realizados sobre poblaciones de aves rapaces del sur y sureste peninsular se ha demostrado la exposicin a varios compuestos organoclorados, considerndose relevante estimar el riesgo que dicha exposicin puede determinar en trminos de salud de las poblaciones. Algunas de las muestras analizadas eran de especies con una delicada situacin como el guila imperial o el guila perdicera. El presente estudio pretende evaluar, mediante la aplicacin del E-Screen, la capacidad estrognica de algunos de los organoclorados ms frecuentemente detectados en estas muestras. Esta tcnica utiliza la lnea celular MCF7 (lnea de tumor mamario humano) con la que se evala la capacidad de inducir proliferacin celular de las sustancias, al actuar como un estrgeno. El grado de proliferacin se compara con el del estrgeno endgeno ms potente, el 17 -estradiol, determinndose el Efecto Proliferativo Relativo (RPE). Los compuestos con mayor RPE fueron, en orden decreciente, el aldrn, PCB 153, DDT tcnico y DDE (desde 101,59% hasta 81,84%). Excepto el endosulfn tcnico, cuyo RPE es de 74,04%, el resto de compuestos han resultado ser agonistas parciales con baja RPE (dieldrn, lindano y lindano tcnico). Las concentraciones ms altas detectadas en las rapaces son las de DDE, uno de los compuestos con mayor poder estrognico de los analizados. Por el contrario, los que dieron menor capacidad estrognica han sido los que se han prohibido ltimamente, lindano en el ao 2000 y endosulfn en 2007. Agradecimientos: Al MICIIN y a la CARM (Fundacin Sneca) por los proyectos CGL2004-5959/BOS, CGL2008-4318/BOS y 08758/PI/08. Palabras clave: Estrogenicidad, E-Screen, Rapaces, Insecticidas organoclorados, PCBs. C.110.-EFECTOS HISTOPATOLGICOS EN EL HGADO TRAS LA EXPOSICIN AL BISFENOL-A EN ZEBRAFISH (Danio rerio) Lora, AJ1; Molina, AM1; Blanco, A2; Montero, E1; Ayala, N3; Moyano, MR1 1 Dpto. Farmacologa, Toxicologa, y Medicina legal y Forense. Universidad de Crdoba 2Dpto. Anatoma y Anatoma Patolgica Comparadas. Universidad de Crdoba. 3Servicio Centralizado de Animales de Experimentacin. Universidad de Crdoba. El Bisfenol-A es un producto qumico ampliamente utilizado en la fabricacin de plsticos de policarbonato y resina epoxi. La exposicin a los humanos a travs de los alimentos puede producirse por migracin desde los envases y recipientes que estn en contacto con los alimentos. En Europa la Ingesta Diaria Admisible (IDA) para el BPA es 0,05 mg/kg p.v./da. Ha sido establecido por la Autoridad Europea en Seguridad Alimentaria (EFSA) en 2006 y confirmada en 2010, basndose en los Niveles de Efectos Adversos No Observados (NOAEL) de 5 mg/Kg/da derivados de la toxicidad heptica en dos generaciones de estudios de toxicidad en ratones. En este estudio nos planteamos utilizar como biomarcador en zebrafish (Danio rerio) las alteraciones histopatolgicas provocadas por BPA en el hepatopncreas. El Zebrafish ha sido utilizado como un nuevo modelo animal en toxicologa (OCDE 204). Los cambios histolgicos tras las exposiciones al BPA son evidentes y nos permiten evaluar el riesgo de la presencia de BPA en el ambiente y/o los alimentos. Para realizar la investigacin hemos utilizado 30 zebrafish macho
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa distribuidos al azar en los tres acuarios del estudio: Grupo control (n=10), y grupos tratados (n=20). Los grupos tratados fueron expuestos a 10 y 1000 g/L respectivamente, durante los 14 das. Los animales se sacrificaron con una dilucin de MS-222. Inmediatamente despus del sacrificio se tomaron las muestras y fijaron para el procesado histolgico. Hemos observado lesiones estructurales y ultraestructurales en los grupos de peces tratados con BPA, que consistieron en un proceso en el que fueron evidentes los signos de degeneracin heptica con un elevado incremento de glucgeno, y transformacin de glucgeno en sustancia lipdica, mayor en los peces expuestos a 1000 g/L. En ambos grupos tratados el pncreas mostr una imagen degenerativa y procesos necrticos, siendo estos ms evidentes en el grupo expuesto a 1000 g/L. Este trabajo ha sido financiado por la Consejera de Innovacin, Ciencia y Empresa. Junta de Andaluca (Proyectos de Excelencia) P09-AGR-5143. Palabras clave: Bisfenol-A, Hgado, Zebrafish, Histopatologa, Biomarcadores. C.111.-EVALUACIN PRECLNICA DEL INTERFERN ALFA 5: ESTUDIO DE LA TOXICIDAD A DOSIS REPETIDAS POR VIA SUBCUTNEA Arbillaga L1; Gil AG1; Gonzlez, I2; Cornet, ME2; Lpez de Cerain, A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Centro de Investigacin en Farmacobiologa Aplicada (CIFA), Universidad de Navarra, Pamplona. 2Digna Biotech, Madrid. El sistema interfern (IFN) es la primera lnea de defensa contra infecciones vricas en mamferos. El interfern alfa 5 (IFN-5) es una protena con potente actividad antiviral que ha demostrado inducir una mayor sealizacin y expresin de genes antivirales que el IFN-2, actual tratamiento para las hepatitis crnicas virales. Estos datos sugieren que puede ser muy til en el tratamiento de pacientes con infeccin crnica por el virus de la hepatitis C y justifican los estudios preclnicos para evaluar su seguridad y eficacia en modelos animales. El presente estudio tiene por objeto la evaluacin de la toxicidad del IFN -5 despus de su administracin diaria, durante 31 das, por va subcutnea en macacos, incluyendo la evaluacin de la tolerancia subcutnea. Para su realizacin, macacos Macaca fascicularis de ambos sexos son distribuidos en cuatro grupos (n=5/sexo/grupo): Grupo tratado dosis baja (1x105 UI/Kg); Grupo tratado dosis intermedia (1x107 UI/Kg); Grupo tratado dosis alta (1x108 UI/Kg) y Grupo control. Adems, con la finalidad de evaluar la reversibilidad de los efectos txicos que pudieran producirse, el estudio contempla la inclusin de un grupo satlite (n=4/sexo). Se realizan estudios de sintomatologa general, evaluacin del ritmo de ganancia ponderal, de tolerancia drmica, anlisis bioqumicos, hematolgicos y de coagulacin, urianlisis, estudios oftalmolgicos y estudio anatomopatolgico macro y microscpico. La administracin diaria de IFN -5 durante 31 das a las dosis ensayadas, no produce letalidad, alteraciones en la sintomatologa general ni alteraciones significativas en el ritmo de ganancia ponderal. No se encuentran lesiones oculares, ni diferencias con significacin clnica en ninguno de los parmetros analticos evaluados. No se detectan alteraciones en el peso de los rganos extrados, ni alteraciones macro o microscpicas que pudieran relacionarse con el tratamiento. Finalmente, se concluye que el tratamiento subcutneo con la dosis en el rango teraputico en humanos (1x105 UI/Kg de peso corporal) es bien tolerado en el lugar de administracin. Palabras clave: Interfern, Hepatitis, Toxicidad, Dosis repetidas, Macaco. C.112.-TOXICOCINTICA A DOSIS REPETIDAS DEL INTERFERON ALFA 5 TRAS SU ADMINISTRACIN POR VA SUBCUTNEA EN MACACOS Gil, AG1; Arbillaga L1; Gonzlez, I2; Cmara FJ2; Ruiz, J2; Lpez de Cerain A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Centro de Investigacin en Farmacobiologa Aplicada (CIFA), Universidad de Navarra, Pamplona. 2Digna Biotech, Madrid. El interfern alfa 5 (IFN-5) es una protena con una potente actividad antiviral y ha demostrado que puede ser muy til en el tratamiento de infecciones crnicas por el virus de la hepatitis C. Como otras protenas teraputicas de uso humano, el IFN-5 ha mostrado ser inmunognico en animales de experimentacin. Por ello, con el fin de apoyar e interpretar los hallazgos toxicolgicos del estudio preclnico a dosis repetidas en macacos Macaca fascicularis, el objetivo de este estudio fue conocer los niveles de IFN-5 que se alcanzan en el suero tras la pauta de administracin diseada para ese estudio. Para ello, los animales, machos y hembras, distribuidos en 4 grupos (n=5/sexo/grupo), 3 grupos de tratamiento y un grupo control, fueron administrados diariamente con IFN-5 durante 31 das a las dosis de 1 x 108 UI/Kg de peso corporal, 1 x 107 UI/Kg de pc, 1 x 105 UI/kg de pc y vehculo (suero fisiolgico), respectivamente. La actividad de IFN-5 fue cuantificada en el suero obtenido antes de la primera administracin y a los das 14, 21 y 30 de estudio mediante un ensayo antiviral frente al efecto citoptico del virus de la encefalomiocarditis (EMCV) en clulas HeLa. Adems, a los mismos tiempos de estudio, se evalu la presencia de anticuerpos neutralizantes anti-IFN-5. Los resultados obtenidos mostraron que la administracin diaria de IFN -5 durante 31 das, es capaz de desarrollar una respuesta inmune en los macacos que reduce sensiblemente e incluso llega a neutralizar la actividad antiviral de la molcula in vivo. Este hecho provoca una clara disminucin en la capacidad farmacodinmica del animal y pone un lmite a la duracin de los estudios de toxicidad a dosis repetidas, a las dosis de IFN -5 ensayadas. Palabras clave: Interfern, Hepatitis, Toxicocintica, Anticuerpos neutralizantes, Macaco. C.113.-EVALUACIN PRECLNICA DE LA TOLERANCIA LOCAL DE DIFERENTES FORMULACIONES DRMICAS DE UN PPTIDO SINTTICO (P144) Gil, AG1; Azqueta, A1; Dotor, J3; Borrs-Cuesta, F2; Cornet, ME3; Lpez de Cerain, A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Centro de Investigacin en Farmacobiologa Aplicada (CIFA), Universidad de Navarra, Pamplona. 2rea de Terapia Gnica y Hepatologa, Centro de Investigacin Mdica Aplicada (CIMA), Universidad de Navarra, Pamplona. 3Digna Biotech, Madrid. El P144 es un pptido de 14 aminocidos derivado de la secuencia del receptor de tipo III del TGF-b (Betaglicano). Este pptido ha mostrado una excelente eficacia en modelos preclnicos relacionados con procesos fibrognicos, como son los modelos animales de fibrosis heptica, fibrosis cardaca y esclerodermia; por lo que es un candidato idneo para el desarrollo de terapias dirigidas al tratamiento de enfermedades asociadas a estos procesos fibrognicos. Los requerimientos regulatorios para el desarrollo toxicolgico preclnico del pptido hacen necesaria la realizacin de ensayos de toxicidad general tras administracin drmica a dosis repetidas -90 das-. Con la finalidad de realizar una evaluacin inicial de la tolerancia local de dos formulaciones de P144 candidatas -crema y lipogel- y de sus respectivos vehculos, se dise un estudio en conejos New Zealand. Para ello, 12 animales distribuidos en 4 grupos de ensayo (n=3/grupo), recibieron
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa durante 5 das, dos aplicaciones drmicas diarias de los productos de ensayo o de sus respectivos vehculos. Por ltimo, con la finalidad de comparar los resultados de los 4 productos frente a una crema comercial de referencia se incluy un quinto grupo que recibi -Cetavlon- con la misma pauta. La administracin se realiz en una superficie de 60 cm2 con la proporcin de 0,5 mL/20 cm2/aplicacin. En todos los casos se realiz una evaluacin macro y microscpica de las reas de piel tratada y de reas de piel control (sin tratamiento). Se evalu la presencia de eritema, edema, descamacin formacin de costras e hiperplasia y, se tomaron muestras de piel para estudio microscpico convencional. De los resultados obtenidos, puede concluirse, que la toxicidad local observada depende nicamente de los vehculos de las formulaciones crema o lipogel y que el pptido P144 no aporta toxicidad. Adems, las lesiones producidas son claramente diferenciadas, ya que la aplicacin de la formulacin crema y del Cetavlon- provocan necrosis epidrmica, mientras que la aplicacin del lipogel produce hiperplasia drmica de intensidad leve. Palabras clave: Pptido, Toxicidad, Tolerancia local, Formulaciones drmicas. C.114.-PARMETROS DETERMINANTES EN LA ADMINISTRACIN DRMICA REPETIDA DE UNA FORMULACIN CREMA DEL PPTIDO SINTTICO (P144) Gil, AG1; Azqueta, A1; Dotor, J3; Borrs-Cuesta, F2; Cornet, ME3; Lpez de Cerain, A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Centro de Investigacin en Farmacobiologa Aplicada (CIFA), Universidad de Navarra, Pamplona. 2rea de Terapia Gnica y Hepatologa, Centro de Investigacin Mdica Aplicada (CIMA), Universidad de Navarra, Pamplona. 3Digna Biotech, Madrid. El pptido sinttico P144 es un pptido derivado de la secuencia del receptor de tipo III del TGF-b (Betaglicano) dirigido al tratamiento de enfermedades asociadas a procesos fibrognicos. Un estudio preliminar realizado con una formulacin en crema del P144 evidenci la presencia de importantes lesiones drmicas que imposibilitaban su uso en el desarrollo preclnico del pptido; por ello, con el objeto de mejorar la tolerancia drmica de la formulacin, se hizo necesario un estudio que valorase la influencia de distintos parmetros y procedimientos de administracin: volumen de producto de ensayo, tamao del rea de aplicacin, nmero de aplicaciones y lavado tras un tiempo de exposicin. Se evalu la toxicidad local producida tras administracin drmica repetida del vehculo de la crema P144 en conejos New Zealand. 15 animales fueron distribuidos en 5 grupos (n=3/grupo) y administrados diariamente, durante 5 das, siguiendo distintas pautas de administracin: Grupo 1 (una aplicacin/da de 1,5 mL en un rea de 60 cm2); Grupo 2 (dos aplicaciones/da de 1,5 mL en 90 cm2); Grupo 3 (dos aplicacin/da de 0,75 mL en 60 cm2) y Grupo 4 (dos aplicacin/da de 1,5 mL en 60 cm2 con lavado de la zona tras 2 horas de exposicin). Adems, se incluy un grupo 5 que sirvi como control de lavado. En todos ellos, se evaluaron macro y microscpicamente las reas de piel tratada y de piel control (sin tratamiento). Asimismo, se evalu la presencia de eritema, edema, descamacin formacin de costras e hiperplasia y, se tomaron muestras de piel para estudio microscpico convencional. Los mejores resultados de tolerancia drmica se obtienen en el Grupo 1 tratado con 1,5 mL del producto de ensayo en 60 cm2 a razn de una aplicacin diaria. El aumento de la superficie de tratamiento, el fraccionamiento en varias aplicaciones/da del
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volumen a administrar o el lavado de la zona de aplicacin no suponen una disminucin en la toxicidad drmica observada. Palabras clave: Pptido, Toxicidad drmica, Evaluacin preclnica. C.115.-INTERACCIN ENTRE POLIMORFISMO GENTICO DE PARAOXONASA-1 Y EXPOSICIN A PLAGUICIDAS SOBRE BIOMARCADORES DE HEPATOTOXICIDAD Hernndez, AF1; Lacasaa, M2; Gil, F1; Rodrguez, M2; Parrn, T3; Alarcn, R3; Requena, M3; Pla, A1 1 Departmento de Medicina Legal y Toxicologa, Universidad de Granada; 2Escuela Andaluza de Salud Pblica, Granada; 3 Delegacin Provincial de Salud de Almera. Los plaguicidas que experimentan activacin metablica en el hgado pueden producir hepatotoxicidad manifestada precozmente a nivel bioqumico. Este estudio evalu si la exposicin continuada a plaguicidas produce alteraciones bioqumicas de la funcin heptica as como la posible interaccin entre la exposicin a plaguicidas y los polimorfismos genticos de enzimas metabolizadoras de plaguicidas sobre los biomarcadores de efecto hepatotxico. Se realiz un seguimiento de una poblacin de trabajadores de agricultura intensiva de invernadero en Almera con evaluacin en dos perodos diferentes (alta y baja exposicin a plaguicidas), recogiendo caractersticas sociodemogrficas y ocupacionales y muestras de sangre para determinar biomarcadores de exposicin (colinesterasa srica y eritrocitaria), susceptibilidad (paraoxonasa-1, PON1) y efecto (transaminasas hepticas ALT, AST, enzimas de colestasis GGT, fosfatasa alcalina y lpidos sricos -triglicridos, colesterol total, LDL y HDL-). Mediante ecuaciones de estimacin generalizadas se valor la interaccin entre los biomarcadores de exposicin y susceptibilidad sobre los indicadores biolgicos de hepatotoxicidad. La disminucin de colinesterasa srica (indicador de exposicin aguda a plaguicidas) se asoci a un descenso de los parmetros de funcionalismo heptico y de los lpidos sricos (salvo el HDLcolesterol). Por el contrario, el descenso de la colinesterasa eritrocitaria (indicador de exposicin continuada a plaguicidas) se asoci a niveles elevados de AST y fosfatasa alcalina y a un aumento de lpidos sricos (excepto el HDL-colesterol). Por su parte, el polimorfismo gentico PON1 mostr un efecto modulador sobre la ALT. Adems, se observ una interaccin estadstica significativa entre el alelo PON1-192Q y la colinesterasa eritrocitaria sobre los niveles de triglicridos y HDL-colesterol. Los resultados de este estudio indican que la exposicin continuada a plaguicidas puede originar un diferente perfil de hepatotoxicidad en funcin del tipo de exposicin, aguda o continuada. En este ltimo caso, la exposicin origina un perfil lipdico proaterognico, especialmente en los portadores del alelo PON1-192Q. Palabras clave: Plaguicidas, Hepatotoxicidad, Paraoxonasa, Colinesterasas, Lpidos. C.116.-EVALUACIN IN VITRO DE LA ACTIVIDAD CITOTXICA DE ESPONJAS DE LA COSTA DE GALICIA Ferreira, M; Lago, J; Chapela, MJ; Fajardo, P; Atanassova, M; Vieites, JM; Cabado, AG ANFACO-CECOPESCA, rea de Microbiologa y Toxinas. Crta. Colegio Universitario, 16. Campus Universitario LagoasMarcosende, Vigo. 36310 Pontevedra. Las esponjas marinas constituyen una importante fuente de compuestos bioactivos con propiedades antibacterianas, antifngicas, citotxicas o antiinflamatorias. En este trabajo se determin la actividad citotxica in vitro de cinco especies de
XIX Congreso Espaol de Toxicologa esponjas procedentes de zonas intermareales de la costa de Galicia (Ophlitaspongia seriata, Halichondria panicea, Pachymatisma johnstonia, Suberites massa y Haliclona sp.), empleando la lnea celular humana Neuroblastoma BE(2)-M17. Los cultivos celulares se incubaron durante 6 18 h con concentraciones de 5 10 mg/mL de extractos acuosos de cada una de las especies y tras el perodo de incubacin se cuantificaron varios parmetros indicadores de dao celular: alteraciones morfolgicas, despredimiento del sustrato, potencial de membrana mitocondrial, alteracin de la proliferacin celular e integridad de membrana plasmtica. La incubacin con extractos de O. seriata, H. panicea, P. johnstonia y Haliclona sp. provoc alteraciones en la morfologa celular acompaadas de elevados porcentajes de desprendimiento celular, con valores mximos del 47%, 63%, 61% y 77% respectivamente, as como un descenso del potencial de membrana mitocondrial. P. johnstonia, O. seriata y S. massa causaron asimismo un descenso de la proliferacin celular, que alcanz respectivamente valores del 49%, 38% y 64%. La incubacin con los distintos extractos durante 18 h increment la entrada de yoduro de propidio en las clulas con respecto a la incubacin durante 6 h. En conjunto, los efectos txicos observados son compatibles con el desencadenamiento de fenmenos de apoptosis en las clulas de neuroblastoma, aunque el aumento de la entrada de yoduro de propidio podra indicar la induccin de necrosis secundaria al prolongarse el tiempo de incubacin. Las propiedades citotxicas de los extractos sugieren la presencia de compuestos con potenciales aplicaciones farmacolgicas o biotecnolgicas en las especies de esponja estudiadas. Este trabajo ha sido financiado por el proyecto 08MMA011CT, (Xunta de Galicia). Palabras clave: Esponja marina, Compuesto bioactivo, Neuroblastoma, Citotoxicidad, Apoptosis. C.117.-EVALUACIN DE LA CITOTOXICIDAD IN VITRO DE CONTAMINANTES ORGANOESTNNICOS Y PERFLUOROALQUILADOS Ferreira, M; Blanco, L; Lago, J; Chapela, MJ; Fajardo, P; Atanassova, M; Vieites, JM; Cabado, AG ANFACO-CECOPESCA, rea de Microbiologa y Toxinas. Crta. Colegio Universitario, 16. Campus Universitario LagoasMarcosende, Vigo. 36310 Pontevedra. Los compuestos organoestnnicos y perfluoroalquilados son sustancias txicas presentes en los alimentos marinos a pesar de las restricciones mundiales sobre su utilizacin, establecidas en 2008 y 2009 respectivamente. Es por tanto necesario realizar una evaluacin del riesgo. En este trabajo se evalu la actividad citotxica de tres compuestos organoestnnicos: monobutilestao (MBT), dibutilestao (DBT) y tributilestao (TBT) y de dos perfluoroalquilados: cido perfluorooctanoico (PFOA) y perfluoro-1-octanosulfonato potsico (PFOS), sobre cultivos de la lnea celular humana Neuroblastoma BE(2)-M17, incubados durante 1, 3, 16 24 h. Entre los compuestos organoestnnicos, concentraciones 1 M y 10 M de TBT causaron el desprendimiento de las clulas del sustrato, aumentando el porcentaje de desprendimiento con el tiempo de incubacin. El TBT (10 M) tambin inhibi casi completamente la proliferacin celular. El MBT (0,1, 1 y 10 M) redujo la proliferacin celular aunque sin provocar efectos significativos sobre el desprendimiento celular. La incubacin con TBT y MBT caus adems alteraciones morfolgicas en las clulas, que adquirieron un aspecto redondeado. El DBT no afect a la proliferacin ni al desprendimiento celular a las concentraciones y los tiempos de incubacin probados. En los cultivos tratados con PFOA y PFOS (0,1, 1, 10, 100 y 200 M) no se observ desprendimiento celular ni alteraciones en el potencial de membrana mitocondrial. Sin embargo, se observaron incrementos significativos de la permeabilidad de la membrana plasmtica al yoduro de propidio en los cultivos tratados con 100 y 200 M, que fueron mayores en los cultivos incubados con PFOA. Los resultados sugieren que existen diferencias en el grado de citotoxicidad de ambos grupos (organoestnnicos y perfluoroalquilados), as como entre los distintos compuestos de cada grupo. Ensayos adicionales permitirn establecer con mayor precisin el mecanismo de accin de estos compuestos. Este trabajo ha sido financiado por el proyecto TAL 2 IN827F, (Xunta de Galicia). Palabras clave: Organoestnnico, Perfluoroalquilado, Citotoxicidad, Neuroblastoma. C.118.-EXPOSICIN ORAL A ALUMINIO Y NIVELES DE A M I L O I D E E N C E R E B R O D E R ATO N E S TRANSGNICOS Ribes, D1,2; Salazar, JG2,3; Cabr, M1; Vicens, P1,2; Gmez, M1; Domingo, JL1; Colomina, MT1,2 1 Laboratorio de Toxicologa y Salud Medioambiental. 2 Centre de Recerca en Avaluaci i Mesura de la Conducta, Universitat Rovira i Virgili. 3Escuela de Farmacia, Universidad de Los Andes (Venezuela). Diversos estudios epidemiolgicos y clnicos sugieren un posible vnculo entre la exposicin a aluminio (Al) y la enfermedad de Alzheimer (EA). Los datos experimentales sealan un efecto directo del Al en el procesamiento de la protena precursora amiloide y de -amiloide (A). El objetivo del presente estudio ha sido determinar los efectos de la exposicin oral a Al sobre los niveles de los fragmentos 1-40 y 1-42 de A. A los 6 meses de edad, ratones wild y transgnicos (Tg2576) recibieron una dieta suplementada con lactato de Al (0 y 11 mg/g de dieta) durante periodos de 6 y 9 meses. Los niveles de A se midieron en la corteza cerebral y en hipocampo mediante enzimoinmunoanlisis. La exposicin a Al durante 6 meses no increment los niveles de A en cerebro de los ratones tratados. Sin embargo, una exposicin ms prologada (9 meses) increment los niveles de 1-42 en ratones Tg 2576 expuestos a Al. Estos resultados indican que la exposicin crnica oral a 11 mg/g de lactato de Al, durante un perodo de 9 meses, afecta la cognicin, as como aumenta los signos bioqumicos en un modelo animal de la EA (ratones Tg2576). Palabras clave: Aluminio, -amiloide, Enfermedad de Alzheimer, Ratones Tg2576. C . 11 9 . - E VA L U A C I N D E L O S E F E C TO S D E L NONILFENOL EN LARVAS DEL CUARTO ESTADIO DE Chironomus riparius (DIPTERA) Martnez-Paz, P; Morales, M; Martnez-Guitarte, JL; Morcillo, G Grupo de Biologa y Toxicologa Ambiental. Facultad de Ciencias, UNED. Madrid. El nonilfenol (NP) es un producto empleado en la produccin de surfactantes industriales. Presenta actividad disruptora endocrina en mamferos mimetizando la accin del estradiol mientras que en organismos acuticos se han descrito efectos tanto crnicos como agudos aunque su forma de actuacin a nivel celular es, en su mayor parte, desconocida. Para estudiar el modo de accin y analizar los efectos tempranos de este compuesto se han expuesto larvas del cuarto estadio de Chironomus riparius, un organismo acutico ampliamente utilizado en el campo de la toxicologa acutica, a diversas concentraciones de NP durante 24 horas (1, 10 y 100 g/L). Los parmetros analizados, principalmente por medio de Real Time PCR, incluyen la respuesta hormonal, por
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa medio del anlisis de los niveles de transcripcin del receptor de la ecdisona (EcR) y el receptor relacionado con estrgenos (ERR), la respuesta de estrs celular, examinando los niveles de transcrito de Hsp70, y los mecanismos de detoxificacin, a travs del estudio de los niveles de transcripcin del citocromo P450 (CytP450) y la actividad de la Glutatin-S-Transferasa (GST). Los resultados obtenidos muestran que se producen cambios en los niveles de expresin de los genes EcR, ERR, Hsp70 y CytP450, adems de la inhibicin de la actividad enzimtica de la GST, reforzando el papel del nonilfenol como disruptor endocrino en organismos acuticos y apuntando a que las respuestas de estrs celular y de detoxificacin tienen un papel en la resistencia a este compuesto. Financiado por CICYT, CTM2009-07189. Palabras clave: Nonilfenol, Chironomus, ARNm, GST. C.120.-EFECTOS DE LA PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN LA EXPOSICIN DE ORGANISMOS DEL SUELO A METALES PESADOS Nez, MA; Rib, J; Riva, MC Centre de Recerca i Innovaci en Toxicologia (CRIT) de la UPC. Centro de Innovacin Tecnolgica Miembro de TECNIO (Generalitat de Catalunya). Campus Terrassa, Zona IPCT Edificio TR23, Ctra.Nac.150, Km15; 08227 Terrassa. En las ltimas dcadas se ha estudiado ampliamente como afecta la presencia de contaminantes metlicos en el suelo a los organismos presentes en l. Se sabe que el pool de microorganismos presente de forma natural en el suelo es el responsable de eliminar sustancias contaminantes y por lo tanto de atenuar sus efectos nocivos sobre el resto de organismos del suelo. La presencia de microorganismos es pues esencial para la biorremediacin de suelos contaminados. Hay estudios que demuestran este hecho pero muy pocos se centran en cmo la accin de los microorganismos puede afectar a la supervivencia de las lombrices y la acumulacin de metales pesados. El objetivo de este estudio ha sido evaluar los posibles efectos de los microorganismos en presencia de metales pesados sobre organismos terrestres. Se han llevado a cabo experimentos y ensayos de toxicidad aguda (7 y 14 das) y crnica (2 meses) con la lombriz de tierra, cultivada en el laboratorio, mediante la exposicin a varias concentraciones de sales metlicas en dos tipos de suelos. Simultneamente y a partir del ensayo de lixiviacin se han extrado los microorganismos del suelo realizando el recuento en placa, y dems parmetros fisicoqumicos del suelo, relacionndolos con la bioacumulacin de los metales y con la supervivencia de los gusanos Eisenia foetida. Palabras clave: Toxicidad, Aguda, Crnica, Eisenia foetida, Suelos. C.121.-APLICACIN DEL E-SCREEN PARA EVALUAR LA ACTIVIDAD ESTROGNICA DE FRMACOS Y HORMONAS PRESENTES EN AGUAS RESIDUALES Salas, A; Aldeguer, MP; Navas, I; Martnez-Lpez, E; GarcaFernndez, AJ* rea de Toxicologa, Facultad de Veterinaria, Universidad de Murcia. *ajgf@um.es Residuos de frmacos, tales como antibiticos, antiinflamatorios, antiepilpticos, tranquilizantes, antidepresivos y medios de contraste de rayos X son habituales en las aguas residuales. Igualmente, residuos de hormonas son tambin encontradas, siendo frecuentemente detectados estrgenos naturales y el anticonceptivo etinilestradiol (EE2). En general, las bajas concentraciones que se detectan en estas aguas no parecen a priori representar un problema de toxicidad aguda. Sin embargo, ha ido aumentando el inters por los posibles efectos a medio y largo plazo, entre ellos, su posible capacidad de provocar interferencias en la funcin endocrina. El ensayo de E-Screen (Soto et al., 1995) mide la estrogenicidad de los compuestos mediante la cuantificacin indirecta de proliferacin de las clulas MCF-7, que expresan receptores estrognicos. El objetivo de este trabajo es evaluar el efecto proliferativo de la lnea celular MCF-7 tras su exposicin a diez frmacos, un medio de contraste y seis hormonas. Los compuestos a evaluar fueron seleccionados por haber sido descrita su presencia en aguas residuales y efluentes de depuradora. Tras la siembra de 2000 clulas por pocillo y transcurridas 24 horas de adhesin, las clulas fueron expuestas a las distintas concentraciones de las sustancias (10 M a 0,01 pM, segn el compuesto). Adems se incluyeron controles negativos y positivos (17--estradiol 1nM). Tras cinco das de exposicin se evalu la proliferacin celular mediante la tcnica colorimtrica de la Sulforhodamina B. Los frmacos evaluados presentaron una actividad estrognica baja. El efecto proliferativo relativo (PRE) fue de entre 25% y 20% para roxitromicina, fluoxetina, iopromida y naproxeno. Para trimetoprim, sulfametoxazol, carbamacepina, diclofenaco e ibuprofeno fue de entre 10% y 16%; y menor del 10% en los casos del citalopram y eritromicina. Las hormonas mostraron una actividad estrognica cercana a la del control positivo presentando el siguiente orden descendente: 17--estradiol (137,14%), estrona (121,4%), dietilestilbestrol (120,67%), hexestrol (101,62%), testosterona (82,71%) y trembolona (73,01%). Financiado por el proyecto CONSOLIDER del MICIIN (NOVEDAR-CSD00C-07-22204) Palabras clave: Estrogenicidad, E-Screen, MCF-7, Frmacos, Hormonas. C.122.-USO DE PATGENOS FLUORESCENTES COMO M T O D O A L T E R N AT I V O D E VA L O R A C I N TOXICOLGICA DE FRMACOS Calvo-lvarez, E1; lvarez-Velilla, R1; Prada, CF1; Guerrero, N2; Prez-Pertejo, Y1; Balaa-Fouce, R1; Reguera, RM1 1 Dpto. Ciencias Biomdicas, Ftad. Veterinaria Universidad de Len. 2Centro de Biologa Molecular Severo Ochoa, Madrid. La deteccin fluorescente de protenas reporteras in vivo ha surgido como una herramienta poderosa para estudiar procesos patolgicos y la eficiencia de frmacos. Entre los muchos instrumentos de imagen que se han desarrollado, los reporteros emisores de fluorescencia (protena verde fluorescente: GFP, mCherry y otros) estn a la vanguardia de las tecnologas utilizadas en los ltimos aos para estudiar las infecciones experimentales murinas con distintos patgenos modificados. Estos patgenos modificados genticamente permiten observar la diseminacin en el hospedador, cuantificar la carga infecciosa y valorar la respuesta inmune del hospedador a tiempo real y sin necesidad de sacrificar el animal para hacer estas valoraciones lo que supone un mtodo de reemplazamiento acorde con las recomendaciones ticas comunitarias. Se ha diseado un vector integrativo en el genoma de Leishmania major (un patgeno responsable de enfermedades cutneas) que expresa la protena mCherry emisora de fluorescencia roja de forma estable. Se ha determinado la linealidad de la respuesta de los cultivos y su sensibilidad comprobndose que podan ser detectadas apenas 50.000 clulas. Varios compuestos inhibidores de topoisomerasas con potencial anticancergeno contrastado (captotecina, topotecan, irinotecan y SN38) han sido evaluados mediante esta tcnica, obtenindose curvas dosis/respuesta equivalentes a las de otros mtodos estndar (recuento en Coulter y azul Alamar). Finalmente, se han infectado ratones Balb/c con patgenos transformados en la almohadilla plantar trasera izquierda y se ha permitido el desarrollo de la infeccin hasta las 8
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa semanas post-infeccin. La lesin plantar fue monitoreada tanto por su aumento de tamao como por la emisin de fluorescencia usando un sistema de imagen a tiempo real IVIS-Lumina Calliper. Los resultados demuestran que hubo una correlacin estrecha entre el desarrollo de la lesin, la fluorescencia emitida y la carga infectiva, demostrando que hemos desarrollado una herramienta excelente de valoracin de la patogenicidad in vivo respetando los principios ticos de reduccin y reemplazamiento. MICINN AGL2010-16078; JCyL Gr238; ISCIII; PI09/0448; RICET. Palabras clave: 3Rs, Patgenos fluorescentes, Imagen in vivo a tiempo real. C.123.-ACTIVIDAD ACETILCOLINESTERASA EN EL EMBRIN DE PEZ CEBRA COMO MARCADOR DE RETRASO EN EL DESARROLLO Teixid, E; Piqu, E; Gmez-Cataln, J; Llobet, JM Unidad de Toxicologa, Departamento de Salud Pblica, Facultad de Farmacia. Universidad de Barcelona. El pez cebra (Danio rerio), expresa la enzima acetilcolinesterasa muy tempranamente en el desarrollo y adems, con la edad dicha expresin aumenta. Aparte de su conocida funcin cataltica le ha sido atribuido un papel muy importante en el desarrollo muscular y neuronal. Por lo tanto, la determinacin de la actividad acetilcolinesterasa en el embrin de pez cebra podra representar un parmetro til para la evaluacin tanto de la neurotoxicidad como del retraso en el desarrollo embrionario. Los embriones de pez cebra fueron expuestos a una seleccin de conocidos teratgenos (cido valproico, cido retinoico, cafena, salicilato de sodio, glucosa, hidroxiurea y cido metoxiactico). Se determin la actividad acetilcolinesterasa y otros parmetros cuantitativos como el ngulo entre la cabeza-tronco y la longitud de la cola. Los parmetros cualitativos fueron evaluados a travs de un sistema de puntuacin morfolgica. En general, los diferentes patrones observados en las curvas concentracinrespuesta nos permitieron diferenciar entre los compuestos que producen retraso en el desarrollo a concentraciones no teratgenicas y los compuestos que bruscamente producen malformaciones embrionarias. Tambin se observ una buena correlacin entre la actividad acetilcolinesterasa y el ngulo cabeza-tronco. En conclusin, el anlisis de la actividad acetilcolinesterasa podra ser un adecuado marcador para la cuantificacin del retraso en el desarrollo embrionario del pez cebra. Palabras clave: Pez cebra, Retraso en el desarrollo, Teratgeno, Acetilcolinesterasa. TOXICOLOGA CLNICA, FARMACUTICA Y DROGAS DE ABUSO: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.124.-TOXICIDAD DE LA SULPIRIDA EN LA FARMACIA COMUNITARIA Font, G1; Romn, B1; Mndez, P2; Ruiz MJ1 1 Laboratori de Bromatologia i Toxicologia, Facultat de Farmcia, Universitat de Valncia, Av. Vicent Andrs Estelles s/n, 46100 Burjassot, Valencia, Spain; *M.Jose.Ruiz@uv.es 2 Agencia Valenciana de Salud. rea de Farmacia y Prod. Sanitarios. GFyPS/Fundacin Investigacin FIHGU. Los medicamentos que pertenecen al grupo teraputico N (sistema nervioso central) son ampliamente utilizados y requieren un protocolo de dispensacin especfico por los importantes efectos adversos que pueden manifestar y las interacciones a las que estn sujetos. Llama la atencin el consumo de sulpirida, por el uso masivo que se hace de esta, siendo un medicamento con importantes efectos adversos, ya que pertenece al grupo de antipsicticos. Se realiz un estudio observacional descriptivo en la poblacin de usuarios de una oficina de farmacia, en Ganda (Valencia), revisando las fichas de los pacientes a los que se les haba dispensado sulpirida en los ltimos tres aos, analizando la medicacin concomitante que pudiera aumentar el riesgo de aparicin de efectos adversos. El consumo de sulpirida supone el 30% del grupo N05A (Antipsicticos), siendo con diferencia el frmaco ms consumido de este grupo. El total de pacientes que la consumen es de 55, de estos el 41 son pensionistas (75%), slo 2 pacientes pensionistas no presentaban ningn riesgo aadido, mientras que en el grupo de menores de 65 aos, el 35% estaba correcto. Los efectos adversos ms graves pueden aparecer a nivel del SNC, con un 51% de pacientes; y a nivel cardiovascular, con un 64%. Destaca el dato de que el 39% de pacientes estn en riesgo por aparicin de efectos adversos en el SNC y a nivel cardiovascular. A la vista de estos datos se ve necesario hacer un protocolo de dispensacin especfico para la sulpirida, teniendo en cuenta que la mayora de pacientes que la toman son geritricos y toman medicacin que puede causar graves interacciones. Tambin sera necesario realizar educacin sanitaria para prevenir la aparicin de ataques de vrtigo en la poblacin anciana. Palabras clave: Toxicidad, Sulpirida, Farmacia comunitaria. C.125.-ANLISIS DE LAS INTOXICACIONES AGUDAS POR PRODUCTOS QUMICOS ATENDIDAS EN UN SERVICIO DE URGENCIAS.UNIDAD DE TOXICOVIGILANCIA Echarte Pazos, JL1; Aguirre Tejedo, A1; Del Bao Lpez, F1; Clemente Rodrguez, C1; Palls Villaronga, O1; Martnez Izquierdo, MT1; Mnguez Mas, S1; Lpez Casanova, MJ1; Campodarve Botet, I1; Marzo Roche, D1; Blanco Lpez, L1; Skaf Peters, E1; Pedragosa Vall, A1; Puente Palacios, I2; Len Bertrn, N3; Labordeta De La Cal, V3; Torres Del Pliego, E4; Molas, E4; Esteve Palau, E4; Vilapalana Marz, L4; Rey Prez, A5; Superva Caparrs, A1 1 Servicio de Urgencias. Hospital del Mar de Barcelona. Parc de Salut Mar; 2Servicio de Urgencias. Hospital de la Esperanza. Parc de Salut Mar; 3Centro Peracamps de Urgencias. Parc de Salut Mar; 4Servicio de Medicina Interna-Infecciosas. Parc de Salut Mar; 5Unidad de Cuidados Intensivos. Hospital del Mar. Parc de Salut Mar. Introduccin: Los Servicios de Urgencias hospitalarios (SUH) pueden y deben desarrollar una labor fundamental en cuanto a Toxicovigilancia. Objetivo: Evaluar las caractersticas epidemiolgicas y toxicolgicas de las exposiciones a productos qumicos que requieren consulta a un SUH. Material y Mtodos: Anlisis transversal, descriptivo y retrospectivo, de los pacientes intoxicados por productos qumicos que ingresaron en el SU del ao 2007 al 2010. Resultados: Se recogieron 149 casos (49% hombres). La edad media fue de 40,7+15,3 aos. El 56,4% fueron intoxicaciones domsticas, 28,9% laborales, 7,4% suicida. El tipo de txico fue en un 53,7% eran gases de los cuales un 50% fueron txicos y 50% irritantes, 19,5% casticos, 10,1% disolventes, 10,1% detergentes, 2% plaguicidas y 4,6% otros. En cuanto al principal agente txico a destacar 30 casos de monxido de carbono (CO), 11 casos de leja, 4 de amoniaco, 3 de salfumn, 1 cido sulfrico, 1 de sosa castica, y 6 de cloro. La va de entrada ms frecuente fue la respiratoria en un 60,4%, 38,9% digestiva y cutneo ocular en un 4%. En un 32,9% fueron asintomticos. Se realiz tratamiento sintomtico en 122 casos. Las medidas terapeticas especficas ms utilizadas fueron antdotos en un 26,8% (38 casos
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa oxgeno a alta concentracin, 23 casos hidroxicobalamina, 1 caso etanol y 1 caso atropina), descontaminacin cutneo ocular en un 2% y en ningn caso se realiz descontaminacin digestiva. Hubo slo un fallecimiento en un caso por intoxicacin suicida por salfumn (2%). Conclusiones: - En nuestra serie de las intoxicaciones se debe a la inhalacin de gases destacando el CO. - A destacar el uso de hidroxicobalamina cmo antdoto en un 15,4% de los casos. - La mortalidad observada en este estudio no es despreciable ya que representa el 2% del total, y casi el 10% en relacin a las intoxicaciones con ideacin suicida. C.126.-EXCRECIN DEL PIP EN EL FRACASO RENAL AGUDO INDUCIDO POR LA GENTAMICINA Quiros, Y1,2; Lpez-Hernndez, FJ1,3; Lpez-Novoa, JM1; Morales, AI1; Prieto, M1 1 Unidad de Toxicologa, Departamento de Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Salamanca. 2Bio-inRen S.L. Salamanca. 3IECSCYL. Unidad de Investigacin. Hospital Universitario de Salamanca. e-mail: amorales@usal.es La gentamicina (G) es un antibitico aminoglucsido utilizado en la prctica clnica en el tratamiento de las infecciones por gramnegativos. Sin embargo, su uso est limitado por su nefrotoxicidad, que puede conducir al fracaso renal agudo (FRA). Un aspecto clave para el manejo clnico del FRA es un diagnstico temprano, para lo que actualmente se est desarrollando una nueva generacin de marcadores urinarios precoces. En este estudio, se utiliz un modelo de dao renal agudo en ratas inducido por gentamicina para identificar nuevos marcadores urinarios sensibles con los que predecir la nefrotoxicidad de la gentamicina. Para ello, se administr G durante 6 das o suero salino (como control). El dao renal se determin mediante parmetros bioqumicos, estudios histolgicos y deteccin de marcadores tisulares y urinarios conocidos. Para el estudio de predisposicin al FRA, se administr una dosis subtxica de un segundo nefrotxico (nitrato de uranilo) a las ratas tratadas previamente con gentamicina. La excrecin urinaria del telepptido carboxiterminal del procolgeno I (PIP) se determin mediante ELISA. Nuestros resultados indican que un rgimen subtxico de gentamicina no modifica ninguno de los parmetros de funcin renal, pero predispone a las ratas al FRA. Sin embargo, cuando las ratas tratadas con dosis subtxicas de gentamicina, se les administra el nitrato de uranilo, desarrollan una grave disfuncin renal que no se observa en los animales no predispuestos. Curiosamente, la excrecin urinaria de PIP aumenta significativamente en las ratas sometidas tanto a dosis subtxica como txica de gentamicina. Nuestros resultados sugieren que un aumento en la excrecin urinaria de PIP podra ser utilizada potencialmente para identificar a los animales con mayor riesgo de padecer un FRA causado por previo tratamiento con gentamicina. Palabras clave: Predisposicin, Fracaso renal agudo, Gentamicina. C.127.-MONITORIZACIN DE Cd, Pb, Co Y Mo EN PELO COMO BIOMARCADORES DE HIPERTENSIN ARTERIAL Gonzlez-Muoz, MJ1; Snchez-Muniz, FJ2; Rdenas, S3; Bastida, S2 1 Departamento de Nutricin, Bromatologa y Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Alcal. 2Departamento de Nutricin y Bromatologa I (Nutricin). Facultad de Farmacia. Universidad Complutense. 3Seccin Departamental de Qumica
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Analtica. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense. La implicacin de los elementos minerales en la etiologa de las enfermedades cardiovasculares (ECV) ha sido ampliamente demostrada, especialmente su relacin con la presin arterial, donde ejercen un impacto multifactorial. As, las propiedades txicas de varios iones metlicos, como Cd, Pb y Co, pueden causar hipertensin. El empleo del pelo como biomonitor de los niveles y variaciones de macro-minerales y elementos traza con distintos propsitos: estimacin de niveles de exposicin ambiental, evaluacin del estado nutricional y diagnstico de enfermedades, se considera una alternativa idnea para establecer protocolos de prevencin. Los objetivos de este estudio, llevado a cabo en una muestra de 26 postmenopusicas, son determinar: (a) diferencias en los niveles de metales txicos en pelo de mujeres normo e hipertensas y (b) la posible relacin entre el contenido de estos metales en pelo y la presin arterial sangunea. Las mujeres hipertensas poseen niveles significativamente (p<0,05) ms elevados de Cd, Co y Mo, con tendencia a presentar un mayor contenido de Pb que las normotensas. Adems, la concentracin de Co se correlaciona significativamente con la presin arterial sistlica (r=-0,650; p<0,004) y diastlica (r=0,768; p<0,001). El Cd incrementa la presin sangunea al aumentar la actividad plasmtica de renina y modificar el metabolismo de las catecolaminas. El Pb induce hipertensin como resultado de su toxicidad sobre el tbulo renal, elevando los niveles de catecolaminas. Asimismo, el Co daa al rin, produciendo un incremento de la expresin de la eritropoyetina. El Mo es un cofactor involucrado en la activacin de la enzima xantina oxidasa, generando oxirradicales asociados con el aumento del tono arteriolar en individuos hipertensos. En conclusin, las diferencias entre el contenido de metales txicos en el cabello de mujeres normo e hipertensas, sugiere la utilidad y validez de su determinacin para diagnstico de trastornos en la presin sangunea. Palabras clave: Presin sangunea, Metales txicos, Pelo, Postmenopausia. C.128.-DETECCIN DE CONSUMO DE ALCOHOL EN EMBARAZO POR DETERMINACIN DE STERES ETLICOS DE CIDOS GRASOS Cabarcos, P; Tabernero, MJ; lvarez, I; Bermejo, AM Instituto de Medicina Legal. Servicio de Toxicologa Forense. Universidad de Santiago de Compostela. C/ San Francisco s/n 15782 Santiago de Compostela. El consumo de alcohol en el embarazo puede producir daos fetales irreversibles, siendo su identificacin difcil debido a la falta de datos clnicos objetivos. Los marcadores biolgicos del consumo crnico del alcohol permiten la identificacin de estos casos. En este trabajo se ha realizado la determinacin de tres steres etlicos de cidos grasos (etil miristato, etil palimitato y etil estearato) en 78 muestras de meconio. La deteccin de estos marcadores en el meconio representa una exposicin fetal a alcohol. Son, por lo tanto, marcadores biolgicos sensibles y especficos para la exposicin prenatal a alcohol (PAE) durante el embarazo. Se ha desarrollado y validado una nueva metodologa para la cuantificacin de FAEE usando GC-MS trabajando con impacto electrnico. Se ha usado la extraccin asistida por microondas (MAE) como tcnica de extraccin. Se han sintetizado los correspondiente steres etlicos D5 usndolos como patrones internos. Los LOD y LOQ para cada analito fueron 100 y 500 ng/g respectivamente. El mtodo mostr una buena reproducibilidad en el rango de concentraciones estudiado (5003000 ng/g). Los resultados obtenidos para los ensayos inter e
XIX Congreso Espaol de Toxicologa intra-da, as como para la recuperacin se han ajustado a los criterios internacionales. Treinta y dos muestras de meconio (53%) fueron positivas mostrando valores superiores a 1000 ng/g, el cut off usado para diferenciar entre consumo ocasional o no consumo de consumo crnico usando la suma de los tres FAEE. Los resultados han sido contrastados con las historias mdicas cuando ello ha sido posible. En conclusin, a pesar de que el mtodo desarrollado ha mostrado ser capaz de cuantificar los FAEE, sera aconsejable realizar el anlisis de otros marcadores simultneamente para poder colaborar en la interpretacin de los datos. Palabras clave: steres etlicos de cidos grasos, Extraccin asistida por microondas, Meconio, GC-MS, Exposicin prenatal a alcohol. C.129.-PERFIL DE LAS INTOXICACIONES EN EL SERVICIO DE URGENCIA DEL HOSPITAL SO TEOTNIO DE VISEU. Cardoso, N1; Guedes, A2; Marques, R2; Gallardo, E1, 3 1 Faculdade de Cincias da Sade, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique 6201-556, Covilh, Portugal. 2 Servio de Urgncia Geral, Hospital de So Teotnio, E.P.E., Av. Rei D. Duarte, 3504-509 Viseu, Portugal. 3CICS-UBI - Centro de Investigao em Cincias da Sade, Universidade da Beira Interior, Av. Infante D. Henrique 6201-556, Covilh, Portugal. Con la finalidad de conocer el perfil y el manejo del paciente intoxicado en las Urgencias del Hospital de So Teotnio de Viseu (Portugal) se realiz un estudio retrospectivo durante el ao 2010 de los pacientes adultos atendidos por una intoxicacin aguda. La informacin se recogi en una ficha con 27 items en donde figuran datos epidemiolgicos, etiolgicos clnicos, analticos y teraputicos. Se aplic un protocolo de recepcin, acogida y clasificacin asistencial donde se evaluaron parmetros que permiten analizar aspectos fsicos y psiquitricos del individuo, riesgo de vida y grado de conciencia. Se atendieron 332 casos de intoxicacin aguda. No se encontraron diferencias significativas al comparar los meses, registrndose una media de 27,7 intoxicados por mes. Del nmero total de casos observados, 10,84% son tentativas autolticas. El riesgo de mortalidad moderada fue de 33,43% (111 casos) y el de mortalidad alta fue de 31,33% (104 casos). La clasificacin de mortalidad moderada o alta se realiz siguiendo los criterios del Centro de Informaes Antivenenos do Instituto Nacional de Emergncia Mdica. En 14,17% de los intoxicados se observ alteracin del estado de conciencia y en 0,5% angustia acentuada (alteraciones fsicas o emocionales marcadas). Las vas areas estaban comprometidas en 4 intoxicados y en 1 de los casos se observ shock circulatorio. Finalmente en 7 casos la informacin dada por el paciente no coincidi con las observaciones y la sintomatologa de la intoxicacin. Otros parmetros como edad, sexo, evolucin clnica, franja horaria de mxima frecuentacin, tipo de txico, va de entrada, antecedentes toxicolgicos, mortalidad, tiempo de permanencia en el hospital y tratamiento fueron tambin analizados. Queremos destacar que este es el primer estudio de estas caractersticas efectuado en Portugal, una vez que hasta la fecha no existen datos acerca del perfil de los intoxicados. Palabras clave: Intoxicaciones agudas, Mortalidad, Servicio de urgencias. C.130.-ENVENENAMIENTO POR ANIMALES VENENOSOS PONZOOSOS EN ARGENTINA DURANTE EL PERODO 2006-2010 Garca, S1; Casas, N2; de Roodt, A3,4, Costa de Oliveira, V3,4; Fandio, E2; Echenique, H2 Programa Nacional de Prevencin y Control de las Intoxicaciones-Ministerio de Salud de la Nacin, precotox@msal.gov.ar; 2Direccin de Epidemiologa-Ministerio de Salud de la Nacin. Av. 9 de Julio 1925, CABA, Argentina; 3 Laboratorio de Toxinopatologa, Centro de Patologa Experimental y Aplicada, Facultad de Medicina, UBA, J.E. Uriburu 950 5 CABA, Argentina. 4Instituto Nacional de Produccin de Biolgicos-ANLIS Carlos G. Malbrn, Av. Vlez Sarsfield 563, CABA. Argentina. Los envenenamientos por animales venenosos-ponzoosos de Argentina son patologas agudas potencialmente graves, que pueden comprometer la vida de los pacientes o dejar secuelas crnicas. Resultan de inters sanitario los accidentes con serpientes de los gneros Bothrops (98% de los accidentes por serpientes), Crotalus y Micrurus, araas de los gneros Latrodectus, Loxosceles y Phoneutria, y alacranes del gnero Tityus. En todos estos casos, constituyen una emergencia mdica para la que se cuenta con antidotismo efectivo, y en Argentina, desde hace dcadas, existe suficiente produccin de antivenenos y adecuada distribucin en los establecimientos sanitarios. Con la finalidad de orientar las acciones de prevencin y las intervenciones de control oportunas, estn alcanzadas por la Ley Nacional 15465 (ao 1960) que establece el Rgimen Legal de las Enfermedades de Notificacin Obligatoria. Entre los aos 20062010 se comunicaron al Sistema Nacional de Vigilancia de la Salud (SNVS) un total de 46896 accidentes (9379/ao), de los cuales 36105 (77%) fueron por alacranes, 6716 (14,3%) por araas y 4075 (8,7%) por serpientes. El grupo etreo ms afectado fue el de 15 a 24 aos. Se registr mayor notificacin en las provincias del Noroeste (3286) y Noreste (3219) para serpientes y araas, y en la regin Centro para escorpiones (13917 casos). La ocurrencia de envenenamiento por ofidios y escorpiones fue mayor en los meses de verano, en cambio los accidentes por araas no presentaron una estacionalidad marcada. Se registraron 44 fallecimientos (menos de 1 defuncin cada 1000 accidentados), de los cuales 17 correspondieron a envenenamiento por ofidios, otros 17 a envenenamientos por escorpiones y 10 a envenenamientos por araas, con la siguiente distribucin por edades: mayores de 65 aos para serpientes (58,62%), menores de 9 aos y entre 45 y 64 aos para araas (30% cada grupo) y menores de 9 aos para escorpiones (88,23%). P a l a b r a s c l a v e s : A n i m a l p o n z o o s o , Vi g i l a n c i a , Envenenamiento, Mortalidad, Epidemiologa.
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C.131.-PLOMO Y CADMIO EN EL LQUIDO AMNITICO DE GESTANTES Prez, JA1; Gutirrez, AJ1; Troyano, J3; Rubio, C1; Hardisson, A1 1 rea de Toxicologa, Facultad de Medicina de la Universidad de la Laguna, Campus de Ofra s/n, 30871. La Laguna. Espaa. 2 rea de Ginecologa, Facultad de Medicina de la Universidad de La Laguna, Campus de Ofra s/n, 38071. La Laguna. Espaa. El propsito de este trabajo fue determinar los niveles de plomo y cadmio en 254 muestras de lquido amnitico de mujeres embarazadas tomadas en dos hospitales de referencia (Hospital Universitario de Canarias y Hospital Universitario Nuestra Seora de Candelaria) de la provincia de Santa Cruz de Tenerife (Espaa) respecto a las variables hbito tabquico y zona de procedencia. Las amniocentesis se realizaron mediante puncin transabdominal en todos los casos entre la 15 y la 16+6 semana de gestacin. Las pacientes leyeron y firmaron el Documento de Consentimiento Informado (DCI). Para la determinacin de las concentraciones de Pb y Cd se utiliz un Espectrofotmetro de Absocin Atmica Perkin Elmer 4100
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa ZL equipado con cmara de grafto y corrector Zeeman. Una vez obtenidas las concentraciones de Pb y Cd en las muestras analizadas, se realiz un estudio estadstico de las mismas mediante el programa SPSS 19.0. Las mayores concentraciones de cadmio se encontraron en el lquido amnitico de las gestantes del HUNSC (11,634,64 g/dL). Las gestantes que tenan como hospital de referencia el HUC, presentaron en su lquido amnitico los niveles de plomo mayores (5,511,12 g/dL) No existen diferencias significativas entre el contenido de plomo del lquido amnitico de las fumadoras y las no fumadoras. Sin embargo s existen diferencias significativas entre el contenido de cadmio del lquido amnitico de las gestantes. Las gestantes fumadoras presentaron en los dos casos mayores contenidos de estos metales en sus lquidos amniticos (1,53 0,95 g/dL de Cd y 11,34 5,63 g/dL de Pb). Excluyendo la poblacin gestante fumadora, los resultados nos demuestran que existen diferencias significativas entre el contenido de cadmio del lquido amnitico de las gestantes procendentes de la zona norte de Tenerife y La Palma (HUC) y el de las gestantes procedentes de la zona sur de Tenerife, La Gomera y el Hierro (HUNSC). Palabras clave: Plomo, Cadmio, Lquido amnitico, Gestantes, Espectrofotometra de absorcin atmica. C.132.-ESTUDIO DE LAS INTOXICACIONES POR ALCOHOL METLICO EN LA COMUNIDAD VALENCIANA Lpez de Medrano-Villar, MJ; Calvo, A; Garca, B; Arlandis, A; Castellar, A; Merino, Y; Ferrer, S; Garrido-Lestache, E Instituto de Medicina Legal Valencia. Seccin de Toxicologa. Avda. del Saler, n 14. 46013. Valencia. El alcohol metlico o alcohol de madera, tambin conocido como el compuesto qumico metanol, es el alcohol ms sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un lquido ligero (de baja densidad), incoloro, inflamable y txico. Su frmula qumica es CH3OH. El metanol se encuentra en una gran variedad de productos de consumo. Es un disolvente industrial y se emplea como materia prima en la fabricacin de formaldehdo. Tambin se utiliza como componente de anticongelantes, espesantes y disolventes de pinturas y barnices. El metanol, que es altamente txico, puede ser tambin aadido al etanol para hacer que ste no sea apto para el consumo humano. Segn las directivas europeas, los peligros que presenta hacen referencia a ser un producto fcilmente inflamable y txico por inhalacin, por ingestin y en contacto con la piel, produciendo efectos irreversibles muy graves, incluso la muerte. Uno de los criterios para el diagnostico de la intoxicacin por alcohol metlico es conocer los niveles de metanol en sangre. Cifras superiores a 0,20 g/L son indicativos de intoxicacin severa y requieren tratamiento con etanol, as como valores superiores a 0,50 g/L que precisan hemodilisis. Identificada la concentracin de este txico su tratamiento es ms eficaz y por tanto el pronstico ms favorable. Las intoxicaciones por alcohol metlico en la Comunidad Valenciana son estudiadas mediante la revisin retrospectiva de los casos en que se solicita la determinacin de alcohol metlico en fluidos biolgicos durante los ltimos diez aos. La poblacin de estudio incluye muestras procedentes de los hospitales de la Agencia Valenciana de Salud y muestras de cadveres del Instituto de Medicina Legal de Valencia, siendo la tcnica analtica utilizada la cromatografa de gases con inyector de espacio de cabeza. Palabras clave: Alcohol metlico, Intoxicacin, Toxicidad, Cromatografa de gases con inyector de espacio de cabeza.
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C.133.-EXPRESIN DE SINTOMATOLOGA PSICTICA ASOCIADA A CONSUMO DE COCANA Lpez-Guarnido, O1; Hernndez-Bellido, L2,3; Castao, H; Rodrigo, L1; Ruiz-Veguilla, M3 1 Departamento de Medicina Legal y Toxicologa de la Universidad de Granada. 2Departamento de Psicologa Experimental y Fisiologa del Comportamiento de la Universidad de Granada. 3Unidad de Psiquiatra del Neurodesarrollo. Complejo Hospitalario Jan. Objetivo: realizar una evaluacin psico-toxicolgica para comprobar cmo afecta el consumo de cocana a la posibilidad de manifestacin de sintomatologa psictica, entre usuarios de la sustancia que no han solicitado ayuda por problemas de adiccin. Metodologa: La muestra est constituda por un total de 263 individuos repartidos entre consumidores y no consumidores. Para evaluar la presencia de sintomatologa psictica se utiliz el test: Community Assessment Psychic Experience (C.A.P.E.). Este instrumento evala por una parte la expresin de sntomas tanto positivos (paranoia, delirios, alucinaciones,.) como negativos (falta de habilidades sociales y emocionales,). Resultados: Los resultados no muestran diferencias entre consumidores de cocana y no consumidores en relacin a la expresin de sintomatologa psictica. Dentro del grupo de consumidores de cocana s se hallaron diferencias a la hora de manifestar sntomas psicticos positivos. Los que inician el consumo de cocana con 17 aos o antes tienen 2,7 veces ms riesgo de expresar dos o ms sntomas psicticos positivos que los que iniciaron el consumo con 18 aos o ms (p=0,03). Adems los individuos que han consumido cocana entre 101 y 1000 veces tienen 2,6 veces ms riesgo de desarrollar dos o ms sntomas psicticos positivos (p=0,025) que los que no. Palabras clave: Cocana, Psicosis, Sntomas positivos, Sntomas negativos. C.134.-EXPRESIN DE SINTOMATOLOGA PSICTICA SUBCLNICA ASOCIADA A USO FRECUENTE DE CNNABIS Lpez-Guarnido, O1; Hernndez-Bellido, L2,3; Rubio-Gmez, JL 2,3 ; Gmez-Miln, E2; Ruiz-Veguilla, M3 1 Departamento de Medicina Legal y Toxicologa de la Universidad de Granada. 2Departamento de Psicologa Experimental y Fisiologa del Comportamiento de la Universidad de Granada. 3Unidad de Psiquiatra del Neurodesarrollo. Complejo Hospitalario Jan. Objetivo: Establecer si el uso de cnnabis incrementa la posibilidad de manifestar sintomatologa psictica, entre poblacin que nunca ha demandado asistencia psiquitrica. Metodologa: Un total de 258 participantes fueron incluidos en el estudio utilizando el mtodo de bola de nieve.Se dividi a la muestra en usuarios diarios de cnnabis (N = 148) y no diarios (N = 110). Posteriormente, se distribuy a los participantes en cuatro grupos, segn la frecuencia de consumo: (I) Consumidores espordicos y no consumidores [N = 66]; (II) Consumidores semanales [N = 44]; (III) Consumidores diarios [N = 84] y; (IV) Consumidores con ms de cinco administraciones diarias [N = 64]. La expresin de sintomatologa psictica fue evaluada mediante el cuestionario Community Assessment of Psychic Experiences (CAPE), que permite examinar la manifestacin tanto de sntomas subclnicos positivos, como negativos. Se explor la probabilidad de mostrar dos y tres sntomas psicticos a menudo o casi siempre. Resultados: Los usuarios diarios de cnnabis mostraban mayor probabilidad de manifestar sintomatologa psictica positiva (O.R = 2,3, 95% CI: 1,2 4,3) y negativa (O.R = 2,9, 95% CI: 1,3 6,5), comparados con lo no usuarios diarios. No obstante, al tener en cuenta el uso de otras sustancias psicoactivas, la
XIX Congreso Espaol de Toxicologa significatividad para expresin de sntomas positivos se perda. La regresin logstica entre los cuatro grupos, segn frecuencia de uso, mostr una mayor probabilidad de manifestar sntomas psicticos positivos (O.R = 2,9, 95% CI: 1,1 7,4) y negativos (O.R = 4,8, 95% CI: 1,6 14,3), nicamente entre aquellos consumidores de ms de cinco administraciones diarias. Conclusiones: El consumo de cnnabis con una frecuencia de cinco o ms administraciones diarias podra incrementar considerablemente la expresin de sintomatologa psictica subclnica. Aunque la manifestacin de sntomas psicticos positivos parece depender tambin en gran medida del uso de otras sustancias psicoactivas. Palabras clave: Cnnabis, Psicosis, Sntomas positivos, Sntomas negativos. C.135.-EDEMA DE GLOTIS POR HIPERSENSIBILIDAD AL CLORO Prez Lpez, MR; Bustillo Nez, C; Casalderrey Rivas, M; Taboada Barja, C; Carro Roibal, A Servicio Anestesia Reanimacin. Complexo Hospitalario de Pontevedra (CHOP) El cloro (Cl-) en sus diversas presentaciones es el mtodo qumico ms usado como desinfectante por su fcil manejo, control y eficacia. La exposicin inhalatoria a concentraciones de cloro 45 mg/m3 provoca irritacin de la mucosa nasal, ocular y larngea; concentraciones 150mg/m3 incluso en exposiciones de corta duracin, pueden provocar inflamacin de la mucosa bronquial, colapso y muerte. Caso clnico Paciente de 49 aos que ingresa en reanimacin procedente de urgencias por angioedema de va respiratoria alta, relacionado con desinfeccin del agua de la piscina con pastillas de cloro 6 horas antes. Al ingreso presentaba un cuadro de dificultad respiratoria con estridor y moderado edema de glotis. La sO2 era de 88%. Se procede a tratamiento con O2 al 100%; dexametasona iv; adrenalina en aerosol e intravenosa evolucionando favorablemente. Se realiza interconsulta a alergologa, que demostr reaccin de hipersensibilidad al Cl-. Conclusiones: 1.Los desinfectantes utilizados en las piscinas deberan ser agentes activos a bajas concentraciones, fciles de identificar, medir y seguros en su uso. 2.El exceso de cloro en las piscinas y su inhalacin puede causar enfermedades pulmonares graves, riesgo que aumenta cuando la exposicin es frecuente y prolongada. 3.El pronstico y evolucin del paciente depende de la cantidad de txico inhalado y del tratamiento precoz. 4.El servicio de informacin toxicolgica proporciona un servicio telefnico 24 horas para consulta. Schuler HK (2007). Soaps, detergents, and bleaches. En: Shannon MW, Borron SW, Burns MJ (eds). Haddad and Winchester's clinical management of poisoning and drug overdose. 4th ed. Philadelphia. Saunders Elsevier; chap 102. Rippe JM (2008). Management of advanced heart failure. En: Irwin RS, Rippe JM (eds). Irwin and Rippe's intensive care medicine. 6th ed. Baltimore. Lippincott Williams & Wilkins; chap 33. C.136.-INTOXICACIONES ACCIDENTALES LABORALES G R AV E S Y M O R T A L E S P R O D U C I D A S P O R TRICLOROETILENO Quintas Fernndez, C1;Fernndez Colom J2; Diaz de Freijo, S3; ; Sanz-Galln, P4 1 Servicio de Medicina Preventiva y Salud Pblica. Hospital LucusAugusti (Lugo). Unidad de Toxicologa. Laboratorio Echevarne (Barcelona). 3Coordinacin de Salud. Grupo Cimpor (Vigo). 4 Escuela Profesional. Medicina del Trabajo. Universidad de Barcelona (Barcelona). El tricloroetileno es un disolvente clorado utilizado en el mbito industrial que se emplea, entre otras funciones, como desengrasante de piezas metlicas y quitamanchas. En 2011 el INSHT ha reducido los valores lmites biolgicos a dicha sustancia. Aportamos tres casos de intoxicacin accidental por tricloroetileno: 1er Caso. Varn de 42 aos. Trabajaba en un taller mecnico. Fue a limpiar un compresor que estaba en un subterrneo con una botella de cinco litros de tricloroetileno al 99% y media hora despus fue hallado muerto. En la autopsia se le detecta tricloroetileno en sangre (16 mg/L). De los resultados anatomopatolgicos destaca un edema cerebral, pulmonar y congestin visceral generalizada. 2 Caso. Mujer de 23 aos de edad. Trabajaba desde haca dos aos como dependienta en una zapatera. Durante diez das estuvo ocho horas diarias retirando etiquetas de zapatos con tricloroetileno al 99%, en una habitacin pequea (30 m3), cerrada, sin ventilar y sin ningn equipo de proteccin individual. Cuando llevaba una semana sacando las etiquetas inici un cuadro clnico en forma de cefaleas intensas, somnolencia, inestabilidad y fatiga. La paciente continu trabajando hasta el dcimo da que termin la tarea que le haban encomendado. Una semana despus le detectaron lesiones talmicas y cerebelosas irreversibles. 3er Caso. Mujer de 21 aos de edad. Trabaj dos aos en una empresa de joyera. Estuvo recogiendo durante hora el tricloroetileno en caliente que se haba volcado de una cubeta. Al finalizar inici un cuadro de cefaleas intensas, desorientacin temporo-espacial, disartria y marcha atxica por lo que fue remitida a un hospital donde permaneci dos das. Al tercer da fue visitada por su Mutua donde le detectaron unas concentraciones de cido tricloroactico en orina de 240 mg/g creatinina (Valor Lmite Biolgico entonces: 100 mg/g creatinina). A las dos semanas se realiz un nuevo control en el que persista las cefaleas occipitales, bradipsiquia, vrtigos y marcha atxica. Remitida a un Servicio de Neurologa donde se le diagnstico Sndrome Vestibular Central. A los seis meses se constat que el Sndrome Vestibular persista considerndolo ya como irreversible. Palabras claves: Tricloroetileno, Valores lmite biolgicos; Secuelas neurolgicas C.137.-EPIDEMIOLOGA DE LAS INTOXICACIONES SUICIDAS POR TXICOS EN UN HOSPITAL COMARCAL GALLEGO Cruz Landeira, A1; Castro Lpez, RM2, de Castro Ros, A1; Lendoiro Belo, E1 1 Servicio de Toxicologa. Instituto de Ciencias Forenses Luis Concheiro. Universidad de Santiago de Compostela. 2Servicio de Urgencias Hospital Virxa da Xunqueira (Cee, A Corua). Objetivo: Las tentativas de suicidio por txicos figuran entre las intoxicaciones agudas ms frecuentes en los servicios de urgencias. Con este trabajo se pretende conocer las caractersticas epidemiolgicas y clnicas de las intoxicaciones con finalidad suicida en el mbito de un hospital comarcal gallego. Pacientes y mtodos: Se ha realizado un estudio descriptivo retrospectivo de las intoxicaciones con intencionalidad suicida atendidas en el Servicio de Urgencias del Hospital Virxe da Xunqueira (Cee, A Corua) en un perodo de cinco aos (2005 a 2009), en el que se registraron diferentes variables relativas a caractersticas epidemiolgicas y clnicas. Se hizo una revisin
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa detallada de la documentacin clnica relacionada con cada episodio recogiendo informacin relacionada con datos epidemiolgicos y clnicos. El anlisis estadstico se realiz mediante los programas Excel 2007 y SPSS 17.0. Resultados: Se valoraron 132 episodios, lo que supone una incidencia de 60 casos/100.000 habitantes y ao. De estos el 67% correspondieron a mujeres y la edad media fue de 36,61 aos. El 70% tena antecedentes de patologa psiquitrica, siendo la ms frecuente los cuadros depresivos, y el 59% utiliz sus frmacos habituales. Los txicos ms usados fueron las benzodiazepinas (57%), los antidepresivos (29%) y los analgsicos (16,8%). El 90% requiri pruebas diagnsticas/medidas teraputicas. Se indic descontaminacin digestiva al 73,5% (carbn activado 69%, lavado gstrico 67%) de los pacientes. El 51% de lavados gstricos se realizaron pasadas 2 horas tras la ingesta. El 23% tena antecedentes de intento de suicidio. Slo 4 casos necesitaron ingreso en UCI y no se registr ningn xitus. Conclusiones: El prototipo de paciente no difiere de lo descrito en publicaciones anteriores. Destaca el incremento en el uso de los antidepresivos. La elevada prctica de descontaminacin digestiva podra indicar una baja adherencia a las ltimas recomendaciones. Palabras clave: Tentativa de suicidio, Txico, Intoxicacin aguda, Urgencia. C.138.-COMPARACIN ENTRE LAS TENTATIVAS DE SUICIDIO POR TXICOS Y LAS TENTATIVAS POR OTROS MECANISMOS Cruz Landeira, Al; Vzquez Lima, JL2; lvarez Rodrguez, C3; Concheiro Guisn, M1; Lpez-Rivadulla, M1 1 Servicio de Toxicologa. Instituto de Ciencias Forenses Luis Concheiro. Universidad de Santiago de Compostela. 2Servicio de Urxencias Hospital do Salns (Vilagarca de Arousa, Pontevedra).3Servicio de Urgencias Hospital de Vern (Ourense). Objetivo: Investigar las caractersticas diferenciales de las tentativas de suicidio por txicos (TST), frente a las tentativas de suicidio en que se emplea otro mecanismo (SOM). Pacientes y mtodos: Se ha realizado un estudio descriptivo retrospectivo de las tentativas de suicidio atendidas en el Servicio de urgencias del Hospital do Salns (Vilagarca, Pontevedra), entre enero del 2005 y diciembre del 2009. De la bsqueda efectuada 285 episodios reunieron los criterios de inclusin. Se hizo una revisin detallada de la documentacin clnica relacionada con cada episodio recogiendo informacin relacionada con datos epidemiolgicos y clnicos. El anlisis estadstico se realiz mediante los programas Excel 2007 y SPSS 17.0. Resultados: El 73% de todos los episodios fueron TST, pero el uso de txicos fue especialmente frecuente en mujeres (el 65% de los TST eran mujeres, y el 57% de los SOM eran varones, p=0,001). El mecanismo predominante en los SOM fue el corte de muecas. No se encontraron diferencias significativas en el patrn temporal (da de semana, mes, tumo asistencial, etc), ni en la edad media o existencia de antecedentes de tentativas previas. Los antecedentes psiquitricos fueron ms frecuentes en las TST, especialmente el sndrome ansioso-depresivo (73% de los pacientes con esta patologa realizaron TST, p=0,001). No se encontraron diferencias en el destino del paciente, pero s en el tiempo medio de permanencia en el servicio de urgencias, que fue mayor en las TST (6,6 horas frente a 4 horas, p<0,001). No se ha registrado ningn xitus en esta serie. Conclusiones: Aproximadamente 3 de cada 4 episodios de tentativa de suicidio son TST. Son ms frecuentes en mujeres, con antecedentes de sndrome ansioso-depresivo. No hay diferencias en cuanto al pronstico. Palabras clave: Tentativa de suicidio, Mecanismo suicida,
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Txico, Urgencias. C.139.-CARACTERIZACIN DE LA INGESTIN POR SOBREDOSIS DE PARACETAMOL. REPORTE DE UN CENTRO DE INFORMACIN TOXICOLGICA Ros, JC1,2; Bravo, V1; Bettini, M1; Romn, M1; Cerda, P1; Mieres, JJ1; Prez, M1; Scholz, K1; Paris, E1 1 Centro de Informacin Toxicolgica y de Medicamentos, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Catlica de Chile (CITUC). 2 Departamento de Laboratorios Clnicos, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Catlica de Chile. Introduccin: El paracetamol es un analgsico antipirtico de amplio uso a nivel mundial. Sin embargo, su ingestin es tambin una de las causas de sobredosis medicamentosa ms comn. En Estados Unidos es la primera causa de fallo heptico agudo en adultos. En Chile no se cuenta con informacin relacionada con las intoxicaciones por paracetamol. El objetivo de esta investigacin es caracterizar el perfil epidemiolgico de la sobredosis por paracetamol. Mtodo: Se realiz un estudio transversal, retrospectivo donde se consideraron todas las consultas telefnicas realizadas al Centro de informacin toxicolgica de la Universidad Catlica de Chile (CITUC). Se analizaron las variables de sexo, edad y cantidad ingerida de casos accidentales y suicidas durante el ao 2009. Resultados: Se recibieron 959 consultas por ingestin aguda de paracetamol. Los pacientes de sexo femenino representaron un 63,1% de las llamadas. Con respecto a la circunstancia de exposicin, 49,6% de los casos se produjo con ideacin suicida, de los cuales 74,8% fueron mujeres. La ingestin accidental se dio principalmente en nios. Un 29,3% de la muestra ingiri el medicamento en dosis txica, es decir, potencialmente generadora de dao heptico. Al analizar sexo femenino como factor de riesgo de ingesta de paracetamol con fines suicidas, las mujeres presentaron 2,7 veces mayor riesgo que los hombres (OR=2,72, IC 95%: 2,07-3,58, p<0,001). Al analizar la adolescencia como factor de riesgo de intento de suicidio con dosis potencialmente generadoras de dao heptico, se observ que ser adolescente aument 3,3 veces el riesgo (OR: 3.62, IC 95%: 2,4 - 4, 7,08, p< 0,001). Conclusin: Las mujeres presentaron mayor riesgo suicida que los hombres y los adolescentes resultaron ser el grupo ms vulnerable de ingerir dosis potencialmente generadoras de dao heptico. Palabras claves: Paracetamol, Intoxicaciones, Centros toxicolgicos, Epidemiologia, Suicidios. C.140.-ANLISIS DE LAS INTOXICACIONES L A B O R A L E S A T R AV S D E U N C E N T R O TOXICOLGICO Ros, JC1,2; Cerda, P1; Bettini, M1; Bravo, V1; Mieres, JJ1; Prez, M1; Gallardo, A1; Silva, L1; Paris, E1 1 Centro de Informacin Toxicolgica y de Medicamentos, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Catlica de Chile (CITUC). 2 Departamento de Laboratorios Clnicos, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Catlica de Chile. Introduccin: En el medio laboral es frecuente la manipulacin y el contacto con sustancias txicas. Existe escasa informacin sobre la toxicidad de sustancias qumicas utilizadas en los lugares de trabajo y los trabajadores con frecuencia no conocen los riesgos. El objetivo fue caracterizar las intoxicaciones laborales registradas en Chile por el CITUC durante el perodo comprendido entre los aos 2006 a 2009. Mtodo: Se realiz un estudio longitudinal-retrospectivo. Se analizaron las variables sexo, edad, va de exposicin, procedencia de la llamada y sustancia txica. Resultados: Durante el perodo se registraron 2.405 llamados por intoxicaciones laborales. De estos llamados,
XIX Congreso Espaol de Toxicologa 97,2% corresponde a intoxicaciones laborales individuales y el 2,7% a brotes de intoxicacin laboral. Se report que 69,5% de los trabajadores expuestos son de sexo masculino. Con respecto a la edad, 11,8 % tiene menos de 20 aos de edad y 52% tiene entre 21 y 39 aos de edad. En relacin al interlocutor, ms del 76% de los llamados los realiza personal de salud. La exposicin inhalatoria representa un 54%, 17% es cutnea, 14% es ingestin y un 10% es por va ocular. El 31,56% corresponde a intoxicaciones por plaguicidas, 12,5% por humos/gases/vapores, 9,3% por cidos/lcalis. Conclusiones: Se observ que las intoxicaciones laborales se produjeron principalmente en trabajadores hombres y que esta se presenta entre 21 y 39 aos. La va inhalatoria es protagonista de las intoxicaciones laborales por lo que se hace necesario que las autoridades insistan y adviertan la necesidad de proteccin de esta va a travs de equipos adecuados. Los centros toxicolgicos se pueden transformar en una herramienta importante de conocimiento en este tipo de exposiciones y colaborar en su prevencin. Palabras claves: Intoxicaciones, Exposiciones laborales, Centros toxicolgicos, Epidemiologa, Sustancias txicas. C.141.-DETERMINACIN DE MARCADORES DE CONSUMO CRNICO DE ALCOHOL EN EL EMBARAZO Tabernero, MJ1; Cabarcos, P1; Baa, A2; Bermejo, AM1; Chiarotti, M3; Fraga, JM2 1 Instituto de Medicina Legal. Servicio de Toxicologa Forense. Facultad de Medicina. Universidad de Santiago de Compostela. 2 Unidade de Neonatoloxa, Departamento de Pediatra, Complexo Hospitalario Universitario de Santiago. 3 Istituto di Medicina Legale, Facolt di Medicina e Chirurgia, Universit Cattolica del Sacro Cuore, Roma (Italia). El diagnstico objetivo de alcoholismo es cada vez ms importante dado el gran nmero de problemas asociados a su consumo, y esto afecta de manera especial a las mujeres embarazadas. El consumo de alcohol en el embarazo causa graves problemas en el desarrollo fetal, siendo su confirmacin difcil debido a la negativa de las mujeres embarazadas a reconocer su consumo. Por ello, muestras como el meconio, capaces de atrapar de forma irreversible las sustancias consumidas durante el embarazo, son de gran importancia para determinar si ha habido un consumo en el perodo de gestacin y poder relacionarlo con los posibles sntomas del neonato, lo que permitira adoptar medidas precoces en el tratamiento de estos casos. Se han desarrollo, pues, procedimientos analticos sensibles y especficos (GC/MS, LC/MS/MS) para la determinacin de marcadores biolgicos del consumo de alcohol, en concreto el Etilglucurnido y los steres etlicos de los cidos grasos (FAEEs). Se ha puesto a punto un mtodo de extraccin de Etilglucurnido en meconio, con extraccin en fase slida (con columnas Bond Elut Certify) previo tratamiento de la muestra con Acetonitrilo, utilizando patrn interno deuterado (Etilglucurnido d5) para su cuantificacin, y anlisis de la misma con LC/MS/MS, con una recta de calibrado lineal dentro del rango de 50-200 ng/g, siendo el LOD de 20 ng/g y el LOQ de 50 ng/g. En el caso de los FAEEs el rango de calibracin ha sido de 500-3000 ng/g, con un LOD de 100 ng/g y un LOQ de 500 ng/g. Los FAEEs analizados han sido el Etil Miristato, Etil Palmitato y Etil Estearato (con sus correspondientes patrones internos deuterados), realizndose su determinacin analtica con GC/MS. Se han analizado 110 muestras de meconio, 66 de ellas para el Etilglucurnido (21 positivas y 45 negativas) y 82 muestras para FAEEs (31 positivas y 51 negativas). Palabras clave: Etilglucurnido, FAEEs, Meconio, GC/MS, LC/MS/MS. C.142.-TOXICIDAD DE LOS MEDICAMENTOS MS USADOS QUE ACTAN EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Ruiz, MJ1; Juan-Garca, A1; Mndez, P2; Romn, B1 1 Laboratori de Bromatologia i Toxicologia, Facultat de Farmcia, Universitat de Valncia, Av. Vicent Andrs Estelles s/n, 46100 Burjassot, Valencia, Spain; *M.Jose.Ruiz@uv.es. 2 Agencia Valenciana de Salud. rea de Farmacia y Prod. Sanitarios. GFyPS/Fundacin Investigacin FIHGU. Los frmacos incluidos en el grupo teraputico N (que actan en el sistema nervioso central), son de los ms consumidos en la actualidad, segn datos publicados por el Sistema Nacional de Salud. Estos datos de consumo, unido al hecho de que la notificacin de reacciones adversas, en la Comunidad Valenciana, est en segundo lugar los trastornos del sistema nervioso, slo por debajo de las alteraciones en el lugar de administracin, hacen del grupo teraputico N, un conjunto de frmacos a los que se les debe prestar especial atencin. Se realiz un estudio observacional descriptivo en la poblacin de usuarios de una oficina de farmacia, en Ganda (Valencia), revisando las fichas de los pacientes, entre el 01/01/2009 al 31/12/2010, que tienen pautados medicamentos incluidos en los subgrupos teraputicos N03, N04, N05 y N06 objeto del estudio y se analiza la medicacin concomitante y circunstancias que puedan aumentar el riesgo de aparicin Reacciones Adversas a los Medicamentos (RAMs). De los subgrupos teraputicos a estudio se seleccionan 16 principios activos; 6 por ser objeto de las ltimas notas de farmacovigilancia, y el resto por ser los ms consumidos y por tanto, por disponer de suficientes datos. El nmero de pacientes activos en la farmacia que tiene pautado, al menos uno de ellos, es de 118. La media de medicamentos del grupo teraputico N que toma cada paciente es de 2,5. De los 118 pacientes estn en riesgo de sufrir efectos txicos 71 (60%). De estos se pueden considerar muy graves 9 casos (8%), y graves 28 (24%). A la vista de estos datos sera recomendable emplear protocolos concretos de dispensacin para cada uno de los grupos terapeticos, con el fin de evitar duplicidades, interacciones y dosis o pautas incorrectas. Palabras clave: Toxicidad, Medicamentos, Sistema nervioso central. C.143.-ALBUMINURIA: POSIBLE MARCADOR DE PREDISPOSICIN AL DAO RENAL POR EXPOSICIN CRNICA A URANIO Vicente-Vicente, L1; Lpez-Hernndez, FJ1,2; Prieto, M1; LpezNovoa, JM1; Morales, AI1 1 Unidad de Toxicologa. Departamento de Fisiologa y Farmacologa. Universidad de Salamanca. 2IESCYL. Unidad de Investigacin. Hospital Universitario de Salamanca. La exposicin aguda a uranio parece relacionarse claramente con dao renal, mientras que la lesin por exposicin crnica es incierta y difcilmente cuantificable. Tambin se desconoce si la acumulacin crnica pudiera predisponer a sufrir una insuficiencia renal aguda (IRA) cuando el individuo se ve expuesto a otro nefrotxico. El propsito de este trabajo fue (i) estudiar si la exposicin crnica a uranio sensibiliza a los animales para desarrollar dao renal cuando se les administra otro nefrotxico (gentamicina) y (ii) identificar biomarcadores capaces de detectar esta predisposicin a la IRA. Se utilizaron ratas Sprague-Dawley que se dividieron en dos grupos (i) expuestas a nitrato de uranilo (NU) en agua de bebida durante 21 semanas y (ii) ratas control. Despus de este tiempo ambos grupos fueron sometidos a un rgimen subtxico de gentamicina durante 7 das. La funcin renal se monitoriz mediante la medida de marcadores plasmticos (creatinina y
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa urea) y urinarios (proteinuria y actividad de las enzimas N-acetilbeta-D-glucosaminidasa y lactato deshidrogenasa). En la semana 21, antes de la administracin de gentamicina, se realiz un estudio de protemica urinaria que fue re-confirmado mediante Western blot. La administracin crnica de uranio durante 21 semanas no produjo ningn cambio en los marcadores de dao renal estudiados, en ambos grupos. Sin embargo, la administracin de gentamicina en el grupo NU produjo un incremento significativo en la creatinina y en la urea plasmtica que no fue apreciado en el grupo control. El estudio de protemica urinaria detect albmina como potencial biomarcador. Estos resultados sugieren que la exposicin crnica a uranio es capaz de predisponer a las ratas a sufrir una IRA. La albmina pudiera ser un marcador til para detectar y prevenir la IRA en grupos de poblacin expuestos a uranio y que requieren tratamientos con frmacos nefrotxicos. Palabras clave: Albuminuria, Predisposicin, Dao renal agudo, Uranio, Marcadores. C.144.-BENZODIAZEPINES POISONING IN MOROCCAN CHILDREN Aghlallou, Y1; Achour, S2; Bouftini, S1; Mokhtari, R3; Soulaymani, A3; Soulaymani, R4 1 Faculty of Sciences Dhar El Mehraz, FEZ, Morocco. 2 Department of Pharmaceutical Toxicology, Hospital University. Faculty of Medicine and Pharmacy, Fez. Faculty of Science and Technology, Kenitra, Morocco. 3Faculty of Technical Sciences, Kenitra, Morocco. 4Poison and Pharmacovigilance center Morocco. Faculty of Medicine and Pharmacy, Rabat, Morocco. Objective: Describe the epidemiological and clinical characteristics of benzodiazepines poisoning in Moroccan children. Method: Retrospective study of all cases related to benzodiazepines poisoning in Moroccan children received in the Poison control center of Morocco from January 1992 to December 2008. The age, sex, route of administration, symptoms and evolution were analyzed. To assess the severity of poisoning, we used an international gradation poisoning score severity "PSS": Grade 0: No signs or signs not in connection with the poisoning Grade 1: Signs spontaneously regressed Grade 2: Signs pronounced Grade 3: Severe poisoning with life-threatening Grade 4: Deaths Results: 43 cases were collected. The mean age of patients was 4.26 3.49 years. The sex-ratio was 1.05 in favor of a male. The age group most affected was the baby walker (69%). The circumstance was accidental (86%). Oral route was involved in all cases. The symptomatology was dominated by vomiting in 33.33%, nausea in 21.21% and abdominal pain in 15.15% of cases. According to "PSS", 11 cases were classified in grade 2 and 14 cases were classified in grade 0 and 1. No deaths have been recorded. Conclusion: It could be concluded that the benzodiazepines poisoning in children is frequent and severe. Parents and health professionals should be aware of the potential danger of such poisoning in order to prevent or limit the consequences. C.145.-DRUG POISONING IN MOROCCAN CHILDREN Aghlallou, Y1; Achour, S2; Bouftini, S1; Mokhtari, R3; Soulaymani, A3; Soulaymani, R4 1 Faculty of Sciences Dhar El Mehraz, Fez, Morocco; 2 Department of Pharmaceutical Toxicology, Hospital University. Faculty of Medicine and Pharmacy, Fez. Faculty of Science and
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Technology, Kenitra, Morocco; 3Faculty of Technical Sciences, Kenitra, Morocco. 4Poison and Pharmacovigilance center Morocco. Faculty of Medicine and Pharmacy, Rabat, Morocco. Objective: Describe the epidemiological and clinical characteristics of drug poisoning in Moroccan children Methods: Retrospective study of all cases related to drug poisoning in children received in the Poison control center of Morocco from January 1992 to December 2008. . The age, sex, route of administration, symptoms and the outcome were analyzed. Results: 6367 cases have been collected. The mean age of patients was 4.80 3.92 years. The sex-ratio was 1.14 in favor of a male. The age group most affected was the baby walker (56%). The circumstance was accidental (90.3%). The drugs most frequently were those of the nervous system with 28.38%. Oral route was the most involved (96.3% of cases). The symptomatology was dominated by neurological signs (drowsiness and hypoesthesia) in 20.83%, followed by Hepato-digestive disorders (diarrhea and vomiting) in 12.5% of cases. The action to be taken was based on treatment spillway, induced vomiting and symptomatic treatment. The antidote was administered in 3 cases. The outcome was favorable in 70%. Eleven deaths were recorded. The drugs implicated in deaths were: Surgam, Digoxin, aspirin, acetaminophen, Gardenal and Amarel. Conclusion: It could be concluded that drugs poisoning are common in children is frequent and severe. Significant efforts must be intensified by industrial firms in the packaging of drugs for primary prevention. Parent education is essential to prevent and mitigate the consequences. TOXICOLOGA VETERINARIA: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.146.-ACTIVIDAD COLINESTERASA EN ERITROCITOS DE AVES SILVESTRES EXPUESTOS IN VITRO A PLOMO, CADMIO Y MEZCLAS BINARIAS Hernndez-Garca, A1; Romero, D1; Gravato, C2; MartnezLpez, E1; Guilhermino, L2; Garca-Fernndez, AJ1,* 1 rea de Toxicologa, Facultad de Veterinaria, Universidad de Murcia. *ajgf@um.es. 2 Laboratrio de Ecotoxicologia. CIMARLA/CIIMAR & ICBAS, Universidade do Porto, Portugal. La inhibicin de la colinesterasa por metales es un tema que an genera controversia cientfica. El objetivo de este trabajo era evaluar los efectos del plomo y el cadmio sobre la actividad de esta enzima en eritrocitos de nade real (Anas platyrhynchos), bho real (Bubo bubo) y busardo ratonero (Buteo buteo). La proporcin de la mezcla cadmio/plomo utilizada fue la encontrada en estudios de campo realizados en sangre de rapaces forestales y la descrita en diferentes muestras medioambientales. Tras determinar la viabilidad celular de los eritrocitos sometidos a estudio mediante ioduro de propicio, se seleccionaron diferentes concentraciones para evaluar la actividad de esta enzima en los hemolisados. La actividad colinesterasa se midi siguiendo el mtodo de Ellman. Se observaron diferencias entre especies. Los eritrocitos de nade mostraron un descenso de la actividad enzimtica, mientras que los de bho real presentaron un incremento de actividad significativo. Los eritrocitos de busardo, sin embargo, no mostraron cambios con respecto a los controles cuando se exponan a plomo, pero se incrementaba considerablemente la actividad enzimtica cuando se exponan a cadmio y a las EC25 y EC50 de la mezcla. Poco se conoce sobre los efectos de estos metales sobre la actividad colinesterasa en eritrocitos, aunque se haba descrito previamente un descenso en roedores expuestos in vivo a plomo. Por otro lado, en trabajadores expuestos a plomo no se observaron variaciones enzimticas
XIX Congreso Espaol de Toxicologa significativas. En el caso del cadmio, han sido descritos descensos de actividad enzimtica en eritrocitos de humanos y roedores expuestos in vitro. En humanos, se ha hipotetizado que la activacin de la actividad colinesterasa est relacionada con alteraciones de la membrana eritrocitaria. En conclusin, el incremento de la actividad colinesterasa en eritrocitos de rapaces expuestos a cadmio y/o plomo, especialmente en bho real, podra ser un signo de dao estructural de la membrana. Agradecimientos: Financiado por el MICIIN (CGL20045959/BOS, CGL-2008-4318/BOS, NOVEDAR-CSD00C-0722204) y la Fundacin Seneca (CARM) (08758/PI/08). Palabras clave: Plomo, Cadmio, Aves silvestres, In vitro, Colinesterasa. C.147.-BIOMONITORIZACIN DE LOS NIVELES DE MERCURIO EN SANGRE DE GAVIOTA PICOFINA (Larus genei) DEL MEDITERRNEO SUBOCCIDENTAL Ramos, C1; Martnez-Lpez, E1; Gmez-Ramrez, P1; Jimnez, P1; Mara-Mojica, P1,2; Garca-Fernndez, AJ1* 1 rea de Toxicologa. Universidad de Murcia. Campus de Espinardo, 30100 Murcia. *ajgf@um.es 2 Centro de Recuperacin de Fauna Silvestre Santa Faz Alicante. Consellera de Medio Ambiente, Agua, Urbanismo y Vivienda, Generalitat Valenciana. Desde el punto de vista de la contaminacin en ecosistemas acuticos los metales pesados ms importantes son el mercurio y el cadmio. La toxicidad del mercurio incluye desde disrupcin endocrina a afecciones del sistema neurolgico y alteraciones en el desarrollo embrionario. Los niveles de mercurio en sangre pueden ser usados para identificar la exposicin a travs de la dieta en un perodo de tiempo corto y son correlacionados con los niveles encontrados en tejidos internos. La Gaviota picofina (Larus genei) mantiene una poblacin estable en el sur de Alicante, siendo las Salinas de Santa Pola el rea donde se registran las ms importantes concentraciones de la especie. Sin embargo, segn el Catlogo Valenciano de Especies de Fauna Amenazadas, est catalogada como Vulnerable. Durante tres campaas de anillamiento (2006, 2008 y 2010) se obtuvieron 136 muestras de sangre de polluelo que fueron analizadas mediante un analizador directo de mercurio Milestone DMA-80. Los valores medios de concentracin de mercurio en sangre fueron de 63,84 g/L, siendo los niveles en el 2008 significativamente menores que en los otros dos aos de estudio. Nuestros niveles fueron similares a los encontrados en pollos de gaviota cana (Larus canus) de varias zonas del Ro Elba (59 25 g/L y 83 56 g/L) y a los encontrados en sangre de adultos de distintas especies de aves de una rea considerada como no contaminada. Aunque para una correcta interpretacin de los resultados hay que tener en cuenta parmetros como la edad, el estatus migratorio y el nivel trfico, concentraciones de mercurio por encima de 3000 g/L en sangre de Colimbo grande (Gavia immer) fueron considerados con riesgo moderado de producir efectos reproductivos. Agradecimientos: A la Consellera de Medio Ambiente, Agua, Urbanismo y Vivienda, Generalitat Valenciana por el apoyo en el muestreo. Al MICIIN y la Fundacin Sneca por los proyectos MASCA'2004 (CGL2004-5959/BOS), MASCA'2008 (CGL2008-4318/BOS) y 08758/PI/08. Palabras clave: Gaviota picofina, Larus genei, Mercurio, Sangre, Mediterrneo. C.148.-DRSTICO DESCENSO DE LAS CONCENTRACIONES DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN SANGRE DE AGUILLILA CALZADA (Aquila pennata) Martnez-Lpez, E1; Vallverd, N; Mara-Mojica, P1,2; Martnez, JE3; Calvo, JF3; Garca-Fernndez, AJ1,* rea de Toxicologa. Universidad de Murcia. Campus de Espinardo, Murcia. *ajgf@um.es. 2Centro de Recuperacin de Fauna Silvestre Santa Faz Alicante. Consellera de Medio Ambiente, Agua, Urbanismo y Vivienda, Generalitat Valenciana. 3 rea de Ecologa e Hidrologa. Universidad de Murcia. A pesar del dficit hdrico de la Regin de Murcia como consecuencia de la escasez de agua, su actividad agrcola es elevada, situndose entre las ms importantes de Espaa en este sector. La Regin de Murcia es uno de los territorios con mayor nmero de ventas de productos fitosanitarios (10,14% del total espaol). La observacin de los efectos adversos de estos compuestos sobre la fauna silvestre ha auspiciado la revisin de leyes y la implantacin de nuevas regulaciones para prevenir estos efectos en la poblacin humana. Estudios previos, demuestran la utilidad de la sangre de pollos de aguililla calzada para monitorizar el uso de estos plaguicidas en regiones agrcolas y alertar a las autoridades de posibles riegos sobre la salud ambiental y la salud humana. El anlisis de cualquier fenmeno ambiental requiere establecer el nivel de resolucin espaciotemporal adecuado para su estudio. Durante los perodos de cra de 1999 a 2008 se obtuvieron un total de 113 muestras de sangre de pollos de aguililla calzada, se determinaron 14 insecticidas organoclorados de los grupos difenilalifticos, ciclodinicos e ismeros de los hexaclorociclohexanos. En los primeros aos de estudio (1999-2003), todos los compuestos fueron detectados en alguna de las muestras, siendo los ciclodinicos los que con mayor frecuencia (98,4%) y en mayores concentraciones aparecan (135,39 135,29 g/L). Sin embargo, a partir del ao 2004 la frecuencia de deteccin de los plaguicidas evaluados desciende drsticamente (< 20%) siendo los ismeros del HCH, debido fundamentalmente al lindano, los que presentan las mayores concentraciones (valor mximo de 51,79 g/L). Este descenso parece lgico debido a que los niveles en sangre nos dan una informacin reciente de le exposicin a compuestos y la mayora de estos insecticidas fueron prohibidos para uso agrcola en 1994 en Espaa (Orden de 4 de Febrero de 1994). Agradecimientos: A la Consejera de Agricultura y Agua, al MICIIN y a la Fundacin Sneca (CGL2004-5959/BOS, CGL2008-4318/BOS y 08758/PI/08). Palabras clave: Insecticidas organoclorados, Sangre, Aguililla calzada, Aquila pennata.
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C.149.-UTILIDAD DE PARSITOS DE PALOMA PARA BIOMONITORIZAR CONTAMINACIN POR METALES PESADOS Goyena, E2; Jerez, S1; Ortiz, J2; Motas, M1 1 rea de Toxicologa, Dpto. Ciencias Sociosanitarias. 2rea de Parasitologa, Dpto. de Sanidad Animal, Universidad de Murcia, Campus de Espinardo 30100, Murcia. En las ltimas dcadas ha crecido la preocupacin por la deteccin y el control de la contaminacin medioambiental. El empleo de organismos vivos o biomonitores es habitual para conocer la contaminacin debida a las fracciones biodisponibles de los metales pesados, es decir, las que son susceptibles de ser absorbidas y acumuladas por el hombre y los animales. En el presente trabajo se ha evaluado la capacidad del cestodo Railletina tetragona de bioconcentrar metales pesados con respecto a la que presenta su hospedador, y biomonitor, la paloma domstica (Columba livia). Para ello se ha medido la concentracin de Pb y Cd en cinco tejidos (hgado, rin, msculo, hueso y plumas) de 25 palomas infectadas, y en las tenias que las parasitaban. Previamente a la realizacin de la necropsia, todo el material se lav cuidadosamente con cido Ntrico 3%, calidad suprapur y agua desionizada Milli-Q. Tras la realizacin de los procesos de secado y digestin cida asistida
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa por microondas (HNO3:H2O2:H2O), los metales son determinados mediante espectrometra de masas con plasma acoplado inductivamente (ICP-MS). Los resultados obtenidos son analizados mediante el uso del paquete estadstico SPSS 15.0. El rgano del ave que mostr la mayor concentracin de Cd fue el rin (11,387 g/g), mientras que en el cestodo aparecieron concentraciones muy inferiores (0,042 g/g). En el caso del Pb, las diferencias tambin fueron evidentes, observndose una concentracin en el parsito (211,734 g/g) bastante superior a la del tejido con mayor concentracin (hueso) (46,534 g/g). Palabras clave: Railletina, biomonitor, Metales pesados, Paloma. C.150.-Paspalum paspaloides (MICHX.) SCRIBNER PARASITADO POR Claviceps paspali: MICOTOXICOSIS TREMORGNICA Moyano, MR1; Molina, AM1; Lora, AJ1; Mndez, JL2, Fernndez, R3; Rueda, A1 1 Dpto. Farmacologa, Toxicologa, y Medicina legal y Forense. Universidad de Crdoba. 2College of Veterinary Medicine. University of Minnesota (EEUU). 3Servicio Centralizado de Animales de Experimentacin. Universidad de Crdoba. El Claviceps paspali es un hongo que frecuentemente parasita el pasto del gnero Paspalum. Una vez que el esclerotio ha sido ingerido por los animales que pastan se desarrolla en ellos un sndrome neurotxico (tremorgnico) caracterizado fundamentalmente por temblores, designndose a estas micotoxinas como tremorgnicas. El mecanismo de accin, aunque no est claro, parece ser que est relacionado con la inhibicin del neurotransmisor GABA, unindose al receptor o cerca de ste en el canal del cloro. Este sndrome ha sido descrito frecuentemente en Sudfrica y Amrica, slo se han dado algunos casos en Europa, y es la primera vez que se describe en Espaa. Durante el mes de Noviembre en las marismas del P.N. Doana (Huelva), se desarroll un sndrome tremorgnico en bovinos y caballos que pastaban en esta zona. Se afectaron 23 novillas, y tres vacas adultas de un total de 130 animales, siendo las manifestaciones clnicas ms intensas en los animales ms jvenes. Adems, se afectaron dos potros aunque con signos clnicos ms leves. Estos signos consistieron en temblores, movimientos anormales de la cabeza, alteracin motora del globo ocular, e incoordinacin motora que fue ms evidente en el tercio posterior, y agravada bajo condiciones de estrs. La temperatura rectal fue de 1-1,5C, y despus de una hora y media los animales se recuperaron espontneamente. El estudio histopatolgico, revel las lesiones ms graves en el cerebro, con microhemorragias difusas por todo el parnquima cerebral, degeneracin neuronal, satelitosis, neurofagia, gliosis, necrosis y degeneracin moderada del neuropilo de las zonas cerebrales perifricas. El Departamento de Botnica de la Universidad de Crdoba, identific el pasto como Paspalum paspaloides (Michx.) Scribner, y el hongo fue identificado mediante la morfologa del esclerotio como Claviceps paspali. Palabras clave : Micotoxicosis tremorgnica, Paspalum paspaloides (Michx.) Scribner, Claviceps paspali, Vacas, Potros. C.151.-A PROPSITO DE UNA INTOXICACIN POR UVAS EN UN PERRO Linares-Roig, C; Rodilla, V Universidad Cardenal Herrera CEU, Dpto. Fisiologa, Farmacologa y Toxicologa, Avda. Seminario s/n, 46113Moncada (Valencia). Describimos la sintomatologa y el tratamiento en una perra mestiza de 10 aos de edad tras una ingesta masiva de uvas. La perra fue encontrada por su propietario rodeada de tres vmitos cuyo contenido eran uvas, y que el propietario relaciona con un
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paseo por el campo realizado unas 24 horas antes. La perra se mostraba aptica y desorientada, con un alto grado de deshidratacin, las mucosas congestionadas, anorexia, debilitamiento generalizado, taquipnea y taquicardia. Se realiz una ecografa en la que se detect un rgano lleno de lquido. Inicialmente se le administraron suero salino fisiolgico, amoxicilina-cido clavulnico y furosemida. La analtica sangunea pone de manifiesto niveles muy elevados de urea (182,1 mg/dL), creatinina (4,24 mg/dL) y fosfatasa alcalina (190 U/L) acompaada de leucocitosis y una infeccin por Erhlichia. Se instaur tratamiento con doxiciclina, benazeprilo, y dieta Hill's K/D. Transcurridas 72 h una exploracin radiolgica revela la dilatacin de la vejiga urinaria y dilatacin intestinal producida por gases. Puesto que el animal permaneca con anuria manifiesta se realiz sondaje para vaciar la vejiga urinaria y se le administr un enema que produj una expulsin masiva de uvas parcialmente digeridas. Posteriormente una ecografa demuestra un tamao intestinal prcticamente normal. Tras esta intervencin el animal comienz a recuperarse rpidamente produciendo orina casi con normalidad pero se mantuvo el tratamiento durante un total de cinco das. La amoxicilina se administr durante otros cinco das, la dieta Hill's K/D y benazeprilo durante un mes y la doxiciclina durante 40 das. Quince das despus de la ingesta, la urea y la creatinina continuaban elevadas (66,5 y 2,47 mg/dL respectivamente), pero todos los valores fueron normales transcurridos tres meses de la intoxicacin producindose una total recuperacin. C . 1 5 2 . - E VA L U A C I N D E L A D E M A N D A Y DISTRIBUCIN DEL SERVICIO DE ATENCIN TOXICOLGICA VETERINARIA DE LUGO Garca, MA1; Nvoa, MC1; Prez-Lpez, M2; Melgar, MJ1 1 reas de Toxicologa de las Facultades de Veterinaria de Lugo (USC) y 2Cceres (UEX). E-mail: mangeles.garcia@usc.es El Servicio de Atencin Toxicolgica Veterinaria (SATVe) trata de resolver problemas de toxicologa clnica veterinaria a travs de consultas mediante tcnicas telemticas (telfono, fax, Email,) y analticas. El objetivo de este trabajo es analizar la casustica toxicolgica en el perodo 2001-2007 en relacin con diversos tems: origen geogrfico, tipo de solicitud, usuarios y especies afectadas. Como resultados, es de destacar que en el perodo de estudio hubo un aumento de consultas del 225%, siendo mayor el incremento en los 3 primeros aos, seguido de una tendencia a la estabilizacin en torno a 100 casos anuales. Respecto al origen geogrfico, en la Comunidad Autnoma de Galicia, Lugo fue la provincia desde donde ms casos fueron remitidos (39,42%), seguida por Pontevedra (25,92%), A Corua (21,96%) y Ourense (13%). Segn el tipo de solicitud, se observa que el nmero de consultas telemticas (54,77%) es ligeramente superior al de solicitudes de anlisis (45,24%). Como usuarios del SATVe, se sitan en primer lugar los profesionales clnicos veterinarios (71,61%), seguidos de los particulares (12,81%) y las administraciones pblicas (12,31%), finalmente un grupo heterogneo denominado Otros (3,87%) que incluye cooperativas, asociaciones de defensa animal, zoolgicos, etc. Considerando slo el grupo de la Administracin, la principal demandante fue la Consellera de Medio Ambiente e Desenvolvemento Sostible (Xunta de Galicia) con un 61,25%. Por especie animal o cebo, los cnidos fue el grupo que ms consultas origin (48,74%), seguido por bvidos (12,31%), y flidos con el 8,39%. Algunos investigadores atribuyen esa diferencia al distinto comportamiento y/o domesticacin de ambas especies (cnidos y bvidos). Las aves constituyeron el
XIX Congreso Espaol de Toxicologa 26,47% de las consultas de fauna salvaje, porcentaje bastante superior al observado en 5 pases de la UE (57%) del total de casos de fauna salvaje. Palabras clave: Consultas, Geografa, Solicitud, Especies. C.153.-INTOXICACIN POR Claviceps purpurea EN CABALLOS, A PROPSITO DE UN CASO CLNICO Gil-Hernndez, M; Iglesias-Martn, A.; Soler, F; Prez-Lpez, M Unidad de Toxicologa. Facultad de Veterinaria UEX. Avda. de la Facultad s/n. 10071 Cceres. Espaa. Una micotoxina se define como un metabolito txico secundario producido por un moho. El Cornezuelo de centeno es un hongo parsito que reemplaza o invade el ovario en desarrollo de las gramneas, con mayor frecuencia al centeno, aunque puede afectar a otros cereales como trigo o avena, resultando una estructura conocida como esclerotio. Este hongo est asociado a procesos de ergotismo gangrenoso en diferentes especies animales. La concentracin total y las proporciones de alcaloides del cornezuelo (ergotamina, ergotoxina y ergometrina), varan entre las especies y segn las condiciones ambientales. Los granos contaminados se descubren pocas veces al inspeccionar los cereales, y los datos sobre toxicidad en animales son escasos. Segn algunos estudios realizados en vacuno, bastan ingestiones en proporcin de 0,02% del peso corporal de los animales para producir ergotismo gangrenoso tras 11 das. El ergotismo gangrenoso se describe en todos los animales domsticos, afectando los extremos, como nariz, orejas, cola y extremidades. En el presente trabajo se presenta un caso clnico aparecido en el norte de Cceres, durante la primavera de 2010. Una yegua de aproximadamente 7 aos de edad comenz a mostrar lesiones ulcerativas, con prdida progresiva de pelo y sustancia en zonas perifricas de su cuerpo, tales como hocico, orejas y extremidades posteriores, que fueron empeorando paulatinamente. Segn la anamnesis, el animal comenz a mostrar estos sntomas tras varios das de pastoreo en un cultivo de centeno. El animal fue tratado tras esa primera exposicin con penicilina durante siete das y metilprednisolona en inyeccin nica. En una segunda exposicin al cultivo, el animal mostr sntomas respiratorios, volviendo a tratarse de igual modo. Tras la retirada del cereal contaminado (confirmado mediante cromatografa, detectndose la presencia de los alcaloides del hongo), el animal mejor, pero varios meses despus, todava presentaba signos cutneos visibles. Palabras clave: Micotoxinas, Ergotismo, Caballos, Gangrena. C.154.-EXPOSICIN A METALES EN POLLOS DE AZOR (Accipiter gentilis) Y SU RELACIN CON PARMETROS BIOQUMICOS SANGUNEOS Ramn, L1; Martnez-Lpez, E1; Jimnez, P1; Gmez-Ramrez, P1; Mara-Mojica, P1,2; Martnez, JE3; Calvo, JF3; GarcaFernndez, AJ1,* 1 rea de Toxicologa. Universidad de Murcia. Campus de Espinardo, Murcia. ajgf@um.es. 2Centro de Recuperacin de Fauna Silvestre Santa Faz Alicante. Consellera de Medio Ambiente, Agua, Urbanismo y Vivienda, Generalitat Valenciana. 3 rea de Ecologa e Hidrologa. Universidad de Murcia. La exposicin a contaminantes ambientales figura entre los posibles factores que han llevado al descenso poblacional de un nmero importante de especies, lo cual se ha relacionado con la capacidad de algunos de estos compuestos de interferir con las funciones fisiolgicas de los organismos vivos. En la Regin de Murcia, el Azor ha sufrido un detrimento poblacional en las dos ltimas dcadas. En este estudio se han analizado cadmio, plomo, cobre y zinc en 85 muestras de sangre de pollos de azor obtenidas entre los aos 2007 y 2010. Adems se han determinado los niveles de albmina, PA, aspartato amino transferasa, calcio, colesterol, CK, -GT, Glucosa, LDH, Fsforo, Protenas totales y cido rico en suero. Las concentraciones medias de Zn y Cu fueron 381,93 123,08 y 37,91 111,06 g/dL, y las de Pb y Cd fueron 1,63 1,93 y 0,23 0,39 g/dL, respectivamente. Los niveles de Cu y Zn y Pb estn dentro del rango de aves sanas o no expuestas. Aunque an no se han establecido niveles de referencia para aves no expuestas a cadmio estos resultados son similares a los encontrados en rapaces de zonas no contaminadas y no se puede asociar a alteraciones del sistema inmune. La correlacin ms fuerte fue la encontrada entre los dos metales esenciales (rho= 0,424 p<0,01), lo que sugiere la existencia de un patrn comn regulador de metabolismo que puede depender de factores fisiolgicos como la condicin general del individuo. La informacin sobre parmetros bioqumicos en rapaces de vida libre es escasa y, an menor la relacionada con exposicin a metales. No hemos encontrado ninguna correlacin en este sentido en nuestro estudio. Es posible que las concentraciones de metales no sean lo suficientemente altas o el tiempo de exposicin insuficiente como para alterar los parmetros bioqumicos. Agradecimientos: A la Consejera de Agricultura y Agua, al MICIIN y a la Fundacin Sneca (CGL2004-5959/BOS, CGL2008-4318/BOS y 08758/PI/08). Palabras clave: Azor, Accipiter gentilis, Metales pesados, Parmetros bioqumicos, Sangre. C.155.-PARMETROS DE ESTRS OXIDATIVO EN OVEJAS GESTANTES VACUNADAS FRENTE A ENTEROTOXEMIA. PAPEL DE LA MELATONINA Ramos, A1; Rodrguez-Arribas, M1; Calaco, E1; Regodn, S2; Mguez, MP1 1 Unidad de Toxicologa y 2Unidad de Anatoma. Facultad de Veterinaria de Cceres. Avda. de la Universidad s/n. 10003 Cceres. E-mail: asuncionramos@unex.es Se ha demostrado que la administracin de una vacuna comercial, frente a la enterotoxemia (Cl. Perfringens tipo D), produce un aumento significativo en el ttulo de anticuerpos en ovejas gestantes. En este sentido, el objetivo del estudio se encamin a la evolucin de la capacidad antioxidante total (TAC) y de la peroxidacin lipdica as como, al papel antioxidante de la melatonina mediante su administracin en forma de implantes. Para ello, se seleccionaron 40 ovejas gestantes, las cuales fueron divididas en cuatro grupos: 1: control, 2: control melatonina, 3: vacunadas y 4: vacunadas + melatonina. El grupo control recibi nicamente el vehculo mientras que los grupos 2, 3 y 4 recibieron la vacuna y el implante de melatonina respectivamente los das 0 y 21 del experimento. El ndice de peroxidacin lipdica (MDA) fue determinado en las muestras de plasma de las ovejas siguiendo el mtodo descrito por Reknagel y cols. (1982) mientras que, el TAC fue determinado en las muestras de suero mediante un kit comercial. Dichas determinaciones se llevaron a cabo los das 0, 7, 14, 21, 42, 60, 90 y 120 del experimento. Los resultados obtenidos en general muestran una ligera tendencia a la disminucin del MDA antes del parto seguida de un incremento en el postparto, coincidiendo con una tendencia opuesta cuando se analiz la evolucin de la capacidad antioxidante total. La administracin de la vacuna no mostr variaciones significativas. Los animales que fueron tratados con melatonina mostraron un patrn de comportamiento similar y en general presentaron unos niveles de capacidad antioxidante total algo superiores con respecto a los no tratados. Agradecimientos: A Ramos es becaria de la Junta de Extremadura (expediente PRE07029). Palabras clave: Estrs oxidativo, Ovejas, Gestacin, Vacuna, Melatonina.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa C.156.-RIESGO DE BOTULISMO AVIAR ASOCIADO AL ABASTECIMIENTO DE HUMEDALES CON AGUAS RESIDUALES Anza, I; Daz, S; Snchez, S; Mateo, R; Vidal, MD Instituto de Investigacin en Recursos Cinegticos (CSICUCLM-JCCM). Ronda de Toledo s/n 13071, Ciudad Real, Espaa. En Castilla-La Mancha se registran frecuentemente brotes de botulismo aviar, la mayora en humedales abastecidos con aguas residuales tratadas. Con objeto de valorar si esta prctica puede favorecer la presencia de Clostridium botulinum tipo C en el medio, entre abril de 2010 y marzo de 2011, se tomaron muestras de agua, sedimentos, invertebrados acuticos, dpteros y heces de aves silvestres en siete visitas a tres humedales Manchegos: el complejo lagunar de Alczar de San Juan y la laguna de Navaseca, ambos abastecidos con aguas residuales tratadas, y el Parque Nacional de Las Tablas de Daimiel, tomado como zona control. Durante este periodo se desencadenaron dos brotes de botulismo, uno en la laguna de Navaseca (julio-agosto de 2010) y otro en la laguna de Pozuelo de Calatrava (octubre de 2010) durante los cuales se tomaron muestras de agua, sedimentos y dpteros. Las muestras obtenidas se analizaron mediante PCR en tiempo real para detectar el gen que codifica la neurotoxina BoNTC de C.botulinum. En las Tablas de Daimiel no se detect ninguna muestra positiva (n=551). En Alczar de San Juan se detectaron dos muestras positivas, una de heces (0,4%) y una de sedimento (2,4%). En Navaseca resultaron positivas una muestra de agua (2,4%), una de sedimento (2,4%), dos pooles de invertebrados acuticos (12,5%), un pool de dpteros (3,7%) y ocho muestras de heces (3,7%). Durante los dos brotes se detect una muestra de sedimento positiva (25%) en Pozuelo y 2 de agua en Navaseca (33%). Estos resultados indican que, dado que la prevalencia global fue mayor en Navaseca y Alczar, el abastecimiento de humedales con aguas residuales tratadas podra propiciar la presencia de C. botulinum tipo C en ellos. Adems, se observa que las aves portadoras podran constituir un reservorio de C.botulinum en los humedales donde aparecen brotes. Palabras clave: Botulismo aviar, Aguas residuales, Humedales manchegos. MECANISMOS DE ACCIN TXICA, GENOTOXIDAD, CARCINOGNESIS Y NANOTOXICOLOGA: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.157.-EVALUACIN NEUROTOXICOLGICA DE COMPUESTOS ORGANOFLUORADOS A NIVEL HIPOTALMICO Torriani, B1; Pereiro, N1; Franco, V1; Moyano, MR2; Hardisson, A3; Lafuente, A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Universidad de Vigo, Facultad de Ciencias, Campus de Ourense, Las Lagunas, s/n, 32004Ourense. 2Departamento de Farmacologa, Toxicologa y Medicina Legal y Ciencias Forenses, Facultad de Veterinaria, Universidad de Crdoba, Crdoba. 3Area de Toxicologa, Facultad de Medicina, Campus de Ofra, Universidad de La Laguna, 38071 La Laguna, Tenerife. La exposicin alimentaria a compuestos organofluorados ha sido cuantificada recientemente en Espaa. Sin embargo, hay muy poca informacin de su toxicidad. Partiendo de los pocos datos existentes acerca de la toxicidad neuroendocrina de estos xenobiticos, el objetivo de este trabajo ha sido evaluar las alteraciones que induce su exposicin, en la concentracin y metabolismo de diversos aminocidos que intervienen en la regulacin de la actividad del eje hipotalmico-hipofisario80
testicular (HHT), para lo cual se ha tomado el sulfonato de perfluorooctano (PFOS) como molcula modelo. Para la consecucin de este objetivo, se ha administrado mediante sonda intragstrica a ratas macho adultas Sprague-Dawley, PFOS (disuelto en Tween 20 al 2,5% ) a las dosis de 0,5; 1,0; 3,0 y 6,0 mg/Kg/da durante 28 das, administrndose el vehculo a los animales del grupo control. Al finalizar el tratamiento, se han sacrificado los animales y extrado el hipotlamo anterior, se ha homogeneizado y centrifugado a 11.000 rpm y a 4C 15 min. El sobrenadante obtenido se ha hervido durante 7 min y posteriormente se ha centrifugado a 17.000 rpm y a 4C 30 min. En el sobrenadante resultante se ha cuantificado la concentracin de aspartato, glutamato, glutamina, GABA y taurina mediante cromatografa lquida de alta resolucin con deteccin UV (HPLC-UV). Los animales expuestos a PFOS mostraron un aumento de la concentracin de glutamina en hipotlamo anterior, mientras que slo las dosis de 3,0 y 6,0 mg/kg/da indujeron un ascenso en la concentracin de GABA en esta regin hipotalmica. Se observ tambin desgranulacin parcial a nivel neuronal, siendo prcticamente total en los animales tratados con las dosis ms elevadas de PFOS, y presentando satelitosis en las clulas de los oligodendrocitos. La patologa inducida por los compuestos organofluorados en el eje HHT podra estar mediada por las alteraciones observadas en el hipotlamo anterior. Este trabajo ha sido subvencionado por el Ministerio de Ciencia e Innovacin (Ref. AGL2009-09061). Palabras clave: Neurotoxicidad, Compuestos organofluorados, Aminocidos, Hipotlamo. C.158.-ALTERACIONES AMINOACIDRGICAS EN CEREBELO INDUCIDAS POR LA EXPOSICIN A COMPUESTOS ORGANOFLUORADOS Torriani, B1; Pereiro, N1; Moyano, MR2; Lafuente, A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Universidad de Vigo, Facultad de Ciencias, Campus de Ourense, Las Lagunas, s/n, 32004Ourense. 2Departamento de Farmacologa, Toxicologa y Medicina Legal y Ciencias Forenses, Facultad de Veterinaria, Universidad de Crdoba, Crdoba. El sulfonato de perfluorooctano (PFOS), es el producto final de la degradacin de muchos compuestos organofluorados. Al igual que ellos, es un compuesto persistente, se acumula en los organismos vivos y se encuentra ampliamente distribuido en el medioambiente. Por otro lado, se ha relacionado este compuesto con alteraciones en el comportamiento, lo que podra estar relacionado posiblemente con alteraciones -todava no evaluadas- en el sistema nervioso central (SNC). Ante estos hechos, el objetivo de este trabajo ha sido evaluar las posibles alteraciones que induce la exposicin a PFOS en la concentracin de aspartato, glutamina, glutamato, GABA y taurina en cerebelo de rata macho adulta (Sprague-Dawley). Para ello, se administr mediante sonda intragstrica PFOS (disuelto en Tween 20 al 2,5% ) a las dosis de 0,5; 1,0; 3,0 y 6,0 mg/Kg/da durante 28 das, administrndose el vehculo a los animales del grupo control. Al finalizar el tratamiento, se sacrificaron los animales y se extrajo el cerebelo, el cual fue procesado para obtener la extraccin de los aminocidos objeto de estudio. La determinacin y cuantificacin de los mismos se realiz mediante cromatografa lquida de alta resolucin con deteccin UV (HPLC-UV). Los animales tratados con las dosis de 0,5; 1,0 y 3,0 mg/Kg/da de PFOS mostraron un descenso de la concentracin de aspartato y GABA en cerebelo, mientras que la dosis de 6,0 mg/Kg/da indujo un aumento de la concentracin de glutamina en esta regin cerebral. El estudio de anatoma patolgica revel alteraciones celulares de diversa ndole segn la dosis de PFOS administrada. Es importante indicar que en los animales tratados con PFOS no se observaron alteraciones en la postura, motilidad,
XIX Congreso Espaol de Toxicologa agresividad, etc, por lo que las alteraciones encontradas a nivel cerebelar no conllevaron disfunciones a este nivel. Palabras clave: Neurotoxicidad, Compuestos organofluorados, Aminocidos, Cerebelo. C.159.-EVALUACIN TOXICOLGICA DE POSIBLES ADITIVOS ALIMENTARIOS OBTENIDOS A PARTIR DE RESIDUOS DE LA INDUSTRIA VITIVINCOLA Pereiro, N1; Fernndez-Prez, B1; Franco, V1; Daz Reinoso, B2; Moure, A2; Domnguez, H2; Paraj, JC2; Lafuente, A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Universidad de Vigo, Facultad de Ciencias, Campus de Ourense, 32004-Ourense. 2Departamento de Ingeniera Qumica, Universidad de Vigo, Facultad de Ciencias, Campus de Ourense, 32004-Ourense. Los residuos de la industria agroalimentaria conllevan mltiples problemas a nivel ecotoxicolgico. En este sentido, las corrientes residuales de las industrias vitivincolas tienen un impacto ambiental negativo debido a su acidez, y al contenido de slidos y materia orgnica. Adems, contienen concentraciones significativas de flavonoides y cidos fenlicos, con actividad antioxidante, por lo que podran tener aplicaciones en alimentacin y cosmtica. Por ello, se ha desarrollado un proceso de recuperacin, concentracin y purificacin de dichos compuestos fenlicos, que actualmente est en trmite de patente (Moure et al., 2008). Ante la posibilidad de utilizar extractos obtenidos de estos residuos vitivincolas como aditivos alimentarios, se evalu su toxicidad. Para ello se utilizaron vinazas de vino blanco, suministradas por la Cooperativa Vitivincola do Ribeiro (Ourense), se almacenaron a 4C, centrifugaron a 4500 rpm y se procesaron siguiendo el nuevo proceso en trmite de patente. Se evalu la toxicidad del extracto obtenido, administrndose a ratas adultas (macho y hembras) de la cepa Sprague-Dawley durante 3 meses, 5 das/semana, a dosis de 0,5; 1,0 y 2,0 g/Kg/da. Al final del tratamiento, se obtuvieron muestras de orina y sangre de cada uno de los animales, se hizo el hemograma y las pruebas bioqumicas clsicas en este tipo de estudios. Se observ un aumento de eritrocitos, hemoglobina y hematocrito tanto en rata hembra como en macho. La administracin del extracto estudiado indujo en rata hembra un descenso de la concentracin srica de alanina aminotransferasa, aspartato aminotransferasa y colesterol total. En rata macho tratada con el extracto se observ un descenso de la concentracin srica de glucosa y del contenido de microalbmina en orina. Los resultados obtenidos sugieren que el extracto obtenido de esta corriente residual de una industria vitivincola no presenta toxicidad, y adems su ingesta podra tener efectos beneficiosos para la salud. Palabras clave: Evaluacin toxicolgica, Aditivos alimentarios, Residuos industriales. C . 1 6 0 . - E VA L U A C I N D E L A T O X I C I D A D NEUROENDOCRINA DE COMPUESTOS ORGANOFLUORADOS A NIVEL HIPOFISARIO Pereiro, N1; Bernndez, G1; Moyano MR2; Lafuente, A1 1 Laboratorio de Toxicologa, Universidad de Vigo, Facultad de Ciencias, Campus de Ourense, Las Lagunas, s/n, 32004Ourense. 2Departamento de Farmacologa, Toxicologa y Medicina Legal y Ciencias Forenses, Facultad de Veterinaria, Universidad de Crdoba, Crdoba. Los compuestos organofluorados se utilizan ampliamente como surfactantes, lubricantes, polmeros, en espumas contra incendios, en la industria fotogrfica, como componentes de recubrimientos de papel y adhesivos, en cosmticos, insecticidas y embalajes de alimentos, en la produccin de semiconductores, en el enchapado metlico, en los fluidos hidralicos en la industria de la aviacin, etc. Adems, al ser substancias tensioactivas, se utilizan tambin como repelentes del agua y de grasas en embalajes de alimentos, textiles, tapiceras, alfombras, etc. Entre estos compuestos, el ms conocido es el sulfonato de perfluorooctano (PFOS), al ser tambin el producto final de degradacin de muchos de ellos. Por otro lado, estos compuestos parecen ser disruptores endocrinos, por lo que el objetivo del presente trabajo es estudiar las alteraciones que inducen en la concentracin de aminocidos que regulan la actividad del eje hipotalmico-hipofisario testicular (HHT) en adenohipfisis. Para ello se ha administrado mediante sonda intragstrica a ratas macho adultas Sprague-Dawley, PFOS (disuelto en Tween 20 al 2,5% ) a las dosis de 0,5; 1,0; 3,0 y 6,0 mg/Kg/da durante 28 das. Tras el tratamiento, se han sacrificado los animales y extrado la adenohipfisis, en la cual se ha cuantificado la concentracin de aspartato, glutamato, glutamina, GABA y taurina mediante cromatografa lquida de alta resolucin con deteccin UV (HPLC-UV). Los animales tratados con las dosis de 1,0 y 3,0 mg/Kg/da de PFOS muestran un aumento de la concentracin de todos los aminocidos analizados, mientras que el contenido de glutamina tambin se ve incrementado con la dosis de 6,0 mg/Kg/da, a la vez que tambin aumenta la concentracin de GABA con la dosis de 0,5 mg/Kg/da. El estudio microscpico revela que las clulas gonadotropas estn afectadas. Estas alteraciones son mayores al aumentar la dosis de PFOS, e incluso disminuye el nmero de gonadotropas. Este trabajo ha sido subvencionado por la Xunta de Galicia: Programa de Promocin General de Investigacin (Ref. INCITE09383314PR). Palabras clave: Toxicidad neuroendocrina, Compuestos organofluorados, Hipfisis. C.161.-EVALUATION OF CYTOTOXIC AND GENOTOXIC EFFECTS OF ZOLENDRONIC ACID Achel, GD1*; Olivares, A2**; Armero, D3; Alcaraz-Saura, M2; Olmos, E2; Alcaraz, M2 1 Applied Radiation Biology Centre, Radiological and Medical Sciences Research Institute, Ghana Atomic Energy Commission, Legon-Accra, Ghana. Departments of 2Radiology and Physical Medicine and 3Nursing, Faculty of Medicine/Dentistry, University of Murcia, 30100- Campus Espinardo (Murcia), Spain. Introduction: Zoledronic acid (ZA) is a bisphosphonate used in the treatment of the cancer associated with hypercalcaemia, in complications for bone metastasis and in postmenopausal osteoporosis. Recently, it has been implicated in the induction of maxillary osteonecrosis after extractions and dental implants. Objectives: To evaluate the cytotoxic capacity of ZA in comparison with the damaging effects induced by exposure to ionizing radiation. Material and method: We used the cytokinesis-block micronucleus test (MN) with cytochalasin-B on irradiated human lymphocytes to evaluate the genotoxic capacities of two concentrations of ZA (Zometa: 5% and 100%). The cytotoxic effects were determined by the MTT assay with normal prostate cell lines (PNT2). The results were compared with the cytotoxic effects induced by the exposure to different dose of X-rays. Statistical analysis consisted of pair wise contrast analysis of variance to compare the percentages of cell survival in the cultures with different concentrations of the compounds and contrasting their means with the method of minimum significant differences. The analysis was carried out with a logarithmical transformation of the data to accommodate the adjustments made for the ANOVA. Results: The concentrations of ZA showed a significant increase in the frequency of MN compared with the control samples
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa (p<0.001); it did not show significant differences with those exposed to the doses of X-rays administered (2 Gy). The results of the MTT assay showed significant increment in cytotoxicity due to the presence of ZA and this was found to be proportional to that caused by the dose of ionizing radiation (p<0.001) administered to the cells within the study period (24h and 48h). Conclusion: Zoledronic acid shows significant genotoxic and cytotoxic capacities similar to that induced by exposure to Xrays. This report was supported by a grant from the National Spanish R + D Programme CENIT of the Spanish Ministry of Science and Technology denominated SENIFOOD and with support from an IAEA sponsored fellowship (GHA10021)* and another of the Foundation Sneca of the Autonomous Community of the Region of Murcia.** Key words: Micronucleus, Bisphosphonate, Mutagenic effects, Cytotoxicy. C.162.-EVALUATION OF THE CYTOTOXICITY AND GENOTOXICITY OF TRICLOSAN AT CONCENTRATIONS RECOMMENDED BY ODONTOLOGISTS Achel, GD1*; Martnez-Beneyto, Y2; Armero, D3; Olivares, A4**; Alcaraz, M4 1 Applied Radiation Biology Centre, Radiological and Medical Sciences Research Institute, Ghana Atomic Energy Commission, Legon-Accra, Ghana. Departments of 2Stomatology, 3Nursing , 4Radiology and Physical Medicine and, Faculty of Medicine/Dentistry, University of Murcia, 30100- Campus Espinardo (Murcia), Spain. Introduction: Triclosan (2,4,4-trichloro-2-hydroxydiphenyl ether) is a synthetic substance with broad spectrum antimicrobial activity frequently used in soaps, deodorants, antiseptic, cosmetics and in dental products. However, different authors have described a potential mutagenic effect of triclosan. Objectives: To evaluate the genotoxic and cytotoxic capacities of the Triclosan comparing it with the damage induced by the exposure to X-rays. Material and method: We used the cytokinesis-block micronucleus test (MN) with cytochalasin-B on irradiated human lymphocytes to evaluate the genotoxic capacities of four concentrations of Triclosan (1%, 0.1%, 0.01% and 0.001%). The cytotoxic effect was determined by the MTT assay on normal prostate cell lines (PNT2). The results were compared with the cytotoxic effect induced by the exposure to different doses of Xrays. Statistical analysis consisted of pair wise contrast analysis of variance to compare the percentages of cell survival in the cultures with different concentrations of the compounds and contrasting their means with the method of minimum significant differences. The analysis was carried out with a logarithmical transformation of the data to accommodate the adjustments made for the ANOVA. Results: The different concentrations of triclosan showed a slight increment in the frequency of MN compared with the controls samples but the differences were not found to be statistically significant while the ionizing radiation produced an increment in the frequency of appearance of MN (p <0.001), which expresses a chromosomal damage induced by the X-rays. The results with the MTT assay showed significant increment of the cytotoxicity of the Triclosan that is proportional to the concentrations and to the period of study (24h and 48h). Conclusion: Triclosan does not exhibit genotoxic capacity at the concentrations analyzed, although it demonstrates cytotoxic ability in a dose dependent fashion. This report was supported by a grant from the National Spanish R + D Programme CENIT of the Spanish Ministry of Science and Technology denominated SENIFOOD and with support from an
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IAEA sponsored fellowship (GHA10021)* and another of the Foundation Sneca of the Autonomous Community of the Region of Murcia.** Key words: Micronucleus, Dentistry, Mutagenic effects, Cytotoxicity. C.163.-ENDOCRINE-DISRUPTING POTENTIAL OF BISPHENOL-S AND OTHER BISPHENOL-A CONGENERS VIA NUCLEAR RECEPTORS Molina-Molina, JM1,2; Balaguer, P3; Senz, JM1,2; Real, M1,2; Fernndez, MF1,2; Olea, N1,2 1 Laboratory of Medical Investigations, San Cecilio University Hospital, University of Granada, Spain. 2CIBER of Epidemiology and Public Health (CIBERESP), Granada, Spain. 3 Cancer Research Institute, Montpellier, France. Bisphenols are a group of chemicals structurally similar to bisphenol-A (BPA), currently used as the primary raw material in the production of polycarbonate and epoxy resins. Some bisphenols are intended to replace BPA in several industrial applications. This is the case of bisphenol-S (BPS) which has an excellent stability at high temperature and resistance to sunlight. Because of the experience with the endocrine disrupting properties of BPA, studies on the endocrine properties of BPS have focused on its interaction with human estrogen receptor alpha (hERa), but information about interaction with other nuclear receptors is not available yet. The aim of this study was to investigate interactions of BPS, BPF, BPA and its halogenated derivatives, tetrachlorobisphenol A (TCBPA) and tetrabromobisphenol A (TBBPA), with human estrogen receptors (hERa and hERb), androgen receptor (hAR), and pregnane X receptor (hPXR), using a panel of in vitro bioassays based in competitive binding to nuclear receptors, reporter gene expression and cell proliferation assessment. BPS, BPF, and BPA displayed a strong activation for both ERs; TCBPA was a weak agonists of the hERa. Unlike BPF and BPA, BPS was more active in hERb than in hERa assay. BPF and BPA were full hAR antagonists (BPA>BPF), whereas BPA and BPS were weak agonists. Only BPA, TCBPA and TBBPA, were hPXR agonists (TCBPA>TBBPA>BPA). These findings provide strong evidence that BPA congeners might disrupt the function of multiple nuclear receptors and thus they have the potential to affect the endocrine and the reproductive systems in humans. Endocrine disruption is an intrinsic hazard that should be avoided, so the substitution of BPA should be made with caution. Key words: Endocrine-disrupting chemicals (EDCs), BisphenolA (BPA) congeners, Bisphenol-S (BPS), Nuclear receptors, In vitro tests. C.164.-INFLUENCIA DE FACTORES RELATIVOS AL GNERO SOBRE LA CARGA ESTROGENICA TOTAL EFECTIVA Molina-Molina, JM1,2; Arrebola, JP1,2; Fernndez, MF1,2; Martin-Olmedo, P2,3; Olea, N1,2 1 Laboratorio de Investigaciones Mdicas, Hospital Universitario San Cecilio, Universidad de Granada, Granada. 2 CIBER de Epidemiologa y Salud Pblica (CIBERESP), Granada. 3 Escuela Andaluza de Salud Pblica, Granada. La cuantificacin de la actividad estrognica proporcionada por el bioensayo E-Screen es un mtodo de referencia en muchos laboratorios para evaluar la Carga Estrognica Total Efectiva (TEXB), aplicable a extractos de muestras biolgicas de muy diferente origen (tejido adiposo, placenta, sangre). Habitualmente, los protocolos de extraccin y preparacin de las muestras para el bioensayo incluyen mtodos basados en HPLC preparativa que separan los contaminantes ambientales
XIX Congreso Espaol de Toxicologa (xenoestrgenos) de las hormonas sexuales endgenas. Esto ha motivado que no se disponga de informacin sobre el efecto estrognico conjunto de las hormonas endgenas y los xenoestrgenos previa a su separacin. El objetivo del presente estudio fue investigar TEXB de xenoestrgenos polares/no polares y hormonas endgenas en muestras de tejido adiposo antes y despus de la separacin efectiva mediante fraccionamiento por HPLC. Se encontraron diferencias importantes en la distribucin y en los factores predictores de TEXB pre-fraccionamiento, distintas segn el sexo. Por ejemplo, en mujeres, se evidenci una correlacin positiva y estadsticamente significativa entre el tiempo acumulado de uso de terapia hormonal y TEXB (Spearman coefficient=0,61; p=0,036). En hombres, las concentraciones en tejido adiposo de hexachlorobenceno, -hexaclorociclohexano y p,p diclorodifenildicloroetileno se correlacionaron negativamente con TEXB, con coeficientes de Spearman de 0,389 (p=0,090), 0,42 (p=0,077), and -0,65 (p=0,002), respectivamente. TEXB de los extractos pre-fraccionamiento representa la estrogenicidad cruda del tejido adiposo, mientras que el fraccionamiento por HPLC minimiza el efecto de factores confusores como la edad, el ndice de masa corporal y el tiempo acumulado de terapia hormonal. Los resultados sugieren la existencia de interacciones asociadas al gnero que pueden influir sobre la estimacin de TEXB. Palabras clave: Xenoestrgenos, E-Screen, Tejido adiposo, Gnero, Compuestos orgnicos persistentes. C.165.-ESTRS OXIDATIVO Y ALTERACIONES H I S T O PAT O L G I C A S E N H G A D O T R A S L A EXPOSICIN ORAL DE TILAPIAS A CILINDROSPERMOPSINA Puerto, M1; Jos, A1; Pichardo, S1; Moyano, MR2; Blanco, A3; Camen, AM1 1 Area de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. Profesor Garca Gonzlez 2, 41012 Sevilla, Espaa. 2 Departamento de Farmacia, Toxicologa y Legal y Medicina Forense. Universidad de Crdoba. Campus de Rabanales Carretera Madrid-Cdiz s/n. Crdoba, 14071, Espaa. 3 Departamento de Anatoma y Patologa y Anatoma Comparada. Universidad de Crdoba. Campus de Rabanales Carretera Madrid-Cdiz s/n. Crdoba, 14071, Espaa. Las cianobacterias constituyen uno de los principales grupos de organismos procariotas. Una de sus caractersticas ms importantes es que poseen metabolitos secundarios muy activos, denominados cianotoxinas. Entre ellas destacaremos la cilindrospermopsina (CYN), cuya toxicidad en peces est an poco estudiada. La CYN posee una estructura cclica derivada de la guanidina, que presenta una alta solubilidad en el agua por su carcter hidroflico. Existe un gran nmero de organismos acuticos que pueden entrar en contacto con esta cianotoxina, por ello consideramos imprescindible conocer los efectos de la CYN en tilapia (Oreochromis niloticus), ya que es una especie de agua dulce donde crecen las cianobacterias productoras de dicha toxina y es ampliamente consumida en Europa y frica. Entre sus efectos txicos, se conoce que es un potente inhibidor de la sntesis de protenas y de glutatin (GSH). Con el fin de estudiar el estrs oxidativo y las alteraciones histopatolgicas, se utilizaron tilapias que fueron intoxicadas con 200 y 400 g CYN/Kg por sonda gstrica. Pasadas 24 horas, se analiz en hgado los siguientes biomarcadores: el contenido de GSH, implicado en el mecanismo de defensa no enzimtico frente al estrs oxidativo, y la enzima glutatin peroxidasa (GPx), implicada en el sistema defensivo antioxidante, a nivel de expresin gnica y de actividad. As mismo, se realiz un estudio histopatolgico de este rgano utilizando microscopa ptica y electrnica. Se comprob que la CYN produce una disminucin del contenido de GSH, as como alteraciones de la actividad y expresin gnica de la GPx. Los resultados histopatolgicos mostraron efectos dependientes de la dosis. En el presente trabajo se pone de manifiesto por primera vez la afectacin histopatolgica del hgado de tilapias en contacto con la CYN, as como cambios en parmetros de estrs oxidativo a nivel bioqumico y molecular. Los autores agradecen a la Junta de Andaluca (P09-AGR04672I) y al MICINN (AGL2009-10026) la financiacin de este trabajo, y al Servicio de Biologa del CITIUS el soporte tcnico Palabras clave: Cilindrospermopsina, Glutatin, Glutatin peroxidasa, Sonda gstrica, Tilapia. C.166.-EFECTO CITOTXICO DE UN ADHESIVO DENTAL EN LAS CONDICIONES HABITUALES DE MANIPULACIN CLNICA Alcaraz, M1; Garca-Cruz, E2; Chiva, F2; Armero, D3; AlcarazSaura, M1; Achel, GD4* Departamentos de 1 Radiologa y Medicina Fsica, 2 Estomatologa y 3Enfermera, Facultad de Medicina y Odontologa, Universidad de Murcia, 30100- Campus Espinardo (Murcia), Espaa. 4Applied Radiation Biology Centre, Radiological and Medical Sciences Research Institute, Ghana Atomic Energy Commission, Legon-Accra, Ghana. Introduccin: La toxicidad del composite dental se ha atribuido a monmeros residuales de una polimerizacin incompleta que podran producirse, aunque se siguieran las recomendaciones del fabricante. Objetivos: Evaluar el efecto genotxico y citotxico de Prime&Bond NT tras la polimeracin realizada en las condiciones habituales de uso clnico (en presencia y/o ausencia de oxgeno). Material y mtodos: El adhesivo se polimeriz con luz ultravioleta (Optilux 501) y se mantuvo en suero salino durante diferentes perodos (1-24 horas, 1-12 semanas). La capacidad genotxica se ha evaluado mediante el test de microncleos (MN) de linfocitos humanos con bloqueo citocintico. El efecto citotxico se ha determinado mediante el test del MTT en lneas celulares de prstata normal (PNT2). Los resultados se han comparado con efecto citotxico inducido por rayos X utilizando y con el efecto, del cido rosmarnico como radioprotector conocido. Se ha realizado un anlisis de varianza complementado con contraste de medias para comparar los porcentajes de supervivencia celular, complementando con contraste de igualdad de pares con el mtodo de la mnima diferencia significativa. Los anlisis se han realizado transformando logartmicamente los datos para ajustarse a las condiciones del ANOVA. Resultados: Las muestras estudiadas no mostraron un incremento significativo de MN respecto al de las muestras controles, lo cual puede expresar la ausencia de efecto mutagnico de las muestras analizadas. Los resultados de citotoxicidad obtenidos con el test del MTT muestran ausencia significativa de efecto citotxico en las muestras polimerizadas en ausencia de oxigeno. Sin embargo, muestran un descenso significativo de la supervivencia celular en todos los perodos estudiados y en todas las muestras polimerizadas en presencia de oxgeno (p<0,001); efecto txico mayor al inducido por las dosis de radiacin ionizante administradas (p<0,001). Conclusin: El adhesivo dentinario polimerizado en presencia de oxigeno, situacin habitual en la manipulacin clnica, presenta un efecto citotxico significativo. Este trabajo se ha realizado con una ayuda del Programa CENIT del Ministerio de Ciencia e Innovacin (acrnimo:Senifood) y con una Beca Predoctoral de la AIEA (GHA10021)*
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa Palabras clave: Microncleos, Odontologa, Citotoxicidad, Efectos mutagnicos. C.167.-TOXICIDAD DE UN ANESTSICO: SEVOFLUORANE Martin-Gl, R1; Alcaraz, M2; Armero, D3; Alcaraz-Saura, M2; Achel, GD4*; Quesada, S2 Servicio de 1Anestesia y Reanimacin, Ciudad Sanitaria Virgen de la Arrixaca, 30071-El Palmar, Murcia. Departamentos de 2 Radiologa y Medicina Fsica y 3Enfermera, Facultad de Medicina y Odontologa, Universidad de Murcia, 30100Campus Espinardo (Murcia), Espaa. 4Applied Radiation Biology Centre, Radiological and Medical Sciences Research Institute, Ghana Atomic Energy Commission, Legon-Accra, Ghana. Introduccin: El sevofluorano es un anestsico que permite la induccin anestsica rpida con respiracin espontnea y la estabilidad hemodinmica; aunque son escasos los estudios que describen su posible capacidad citotxica Objetivos: Determinar la capacidad citotxica del sevofluorano comparndola con el efecto lesivo de la radiacin ionizante. Material y mtodos: Hemos utilizado el test de microncleos (MN) de linfocitos humanos con bloqueo citocintico administrando 20-40 L de sevofluorano para determinar la capacidad genotxica del sevofluoranr. El efecto citotxico se ha determinado mediante una curva dosis-respuesta tras la administracin de diferentes volmenes de Sevofluorane (5-150 L) utilizando el test del MTT en lneas celulares de prstata normal (PNT2). Los resultados se han comparado el efecto citotxico de los rayos X utilizando, adems, la administracin del cido rosmarnico como radioprotector conocido. Se ha realizado un anlisis de varianza complementado con contraste de medias para comparar los porcentajes de supervivencia celular, complementando con contrastes de igualdad de pares con el mtodo de la mnima diferencia significativa. Los anlisis se han realizado transformando logartmicamente los datos para ajustarse a las condiciones del ANOVA. Resultados: El sevofluorano produce un incremento significativo en la frecuencia de aparicin de MN (p<0,001), lo que expresa el dao cromosmico inducido por el mismo. Este incremento no presenta diferencias significativas con las dosis de radiacin administradas, por lo que su capacidad genotxica es similar a la producida por la radiacin ionizante. El test del MTT muestra una supervivencia celular del 30% a las 24 h cuando se administraban volmenes superiores a 20 L; siendo slo 1,5% a las 48 h cuando se administran 150 L de sevofluorano; mostrando una capacidad citotxica significativa (p<0,001), mayor a la inducida por las dosis de radiacin administradas (p<0,001) (2-10 Gy). Conclusin: El sevofluorano presenta efecto genotxico y citotxico significativo similar o mayor al inducido por la radiacin ionizante administrada. Este trabajo se ha realizado con una ayuda del Programa CENIT del Ministerio de Ciencia e Innovacin (acrnimo:Senifood) y con una Beca Predoctoral de la AIEA (GHA10021)* Palabras clave: Microncleos, Anestesia, Citotoxicidad, Efectos mutagnicos. C.168.-LA FLUVASTINA INHIBE LA PROLIFERACIN EN LAS CLULAS MDA-MB-231 Y 3LL INDEPENDIENTEMENTE DE LA APOPTOSIS Nez-Lozano, R1,2; Lpez-Hernndez, FJ1,3; Lpez-Novoa, JM1; Morales, AI1; Pescador, M1 1 Unidad de Toxicologa, Departamento de Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Salamanca. 2Bio-inRen S.L. Salamanca. 3IECSCYL. Unidad de Investigacin. Hospital Universitario de Salamanca. e-mail: amorales@usal.es
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Las estatinas son una familia de frmacos utilizados en el tratamiento de la hipercolesterolemia: inhiben la enzima HMGCoA reductasa, que cataliza la sntesis de mevalonato, paso limitante en la ruta de colesterol. Pero tambin producen una serie de efectos independientes de la disminucin del LDL denominados pleiotrpicos relacionados con acciones tanto teraputicas como txicas. Aunque el mecanismo de estos efectos no est totalmente dilucidado, se conoce la implicacin de la falta de la prenilacin proteica. Las estatinas inhiben la sntesis de muchos productos derivados del mevalonato entre los que se encuentran el geranilgeranil pirofosfato (GGPP) y el farnesil pirofosfato (FPP), sustratos necesarios para la prenilacin de las GTPasas de la superfamilia Ras que, a su vez, regulan muchas funciones celulares como la proliferacin, migracin, diferenciacin, etc. Estas GTPasas pueden ser preniladas por el grupo farnesilo y/o por el geranilo en funcin de la protena. Cada una de estas dos formas de prenilacin puede desencadenar diferentes efectos biolgicos, ya sean txicos o teraputicos. Por ello, se desarrollaron inhibidores especficos de cada tipo de prenilacin, por ejemplo en la terapia anticancerosa. Estudiamos los efectos de la fluvastatina en la proliferacin, en el tipo de muerte y el papel de la geranilacin y farnesilacin en las lneas celulares de cncer MDA-MB-231 y 3LL. La fluvastatina inhibi la proliferacin de forma independiente de la apoptosis en ambas lneas celulares. Para caracterizar esta disminucin de la proliferacin tambin realizamos estudios de ciclo celular y de viabilidad. El cotratamiento con mevalonato restituy por completo la proliferacin. El precursor del GGPP, geranilgeraniol, revirti total o parcialmente la inhibicin de la proliferacin. El precursor del FPP, farnesol, no modific la accin de la fluvastatina. Esto indic que el efecto de sta sobre la proliferacin podra estar relacionado con determinadas protenas de la superfamilia Ras que principalmente se geranilan. Palabras clave: Fluvastatina, Prenilacin, GTPasa, Geranilgeraniol, Farnesol. C.169.-CAMBIOS MORFO-HISTOQUMICOS EN INTESTINO Y BRANQUIA DE RODABALLO INDUCIDOS POR LA EXPOSICIN A UN POLIBROMADO Barja-Fernndez, S; Mguez, JM; Conde-Sieira, M; LpezPatio, MA; lvarez-Otero, R Dpto de Biologa Funcional y CC de la Salud. Universidad de Vigo. Los bifenilos polibromados (PBBs) se hallan entre los ms efectivos ignfugos y por ellos son incorporados en plsticos, madera, textiles, circuitos electrnicos etc., para reducir su inflamabilidad. Sin embargo, la contaminacin agrcola ocurrida en Michigan en 1973, as como su reciente deteccin en peces, aves y mamferos marinos, indican potenciales propiedades txicas. En este trabajo evaluamos los cambios morfolgicos e histoqumicos en el intestino y las branquias de ejemplares juveniles de rodaballo (Scophthalmus maximus) inducidos por la exposicin a un PBBs, el BDE-47 (2,4, 4-tetrabromodifenil ter), con el fin de determinar sus potenciales efectos en organismos acuticos. Para ello establecimos 4 grupos de tratamiento: 1) grupo control, sin exposicin a PBB, 2) grupo control con exposicin al solvente (DMSO 0,1), 3) grupo expuesto a BDE-47 0,03 g/L y 4) grupo expuesto a BDE-47 0,3 g/L. Los tratamientos se aplicaron en el agua durante 15 das. Tras la fase experimental, branquias e intestino fueron fijados en Bouin y paraformaldehido 4%, incluidas en parafina, seccionadas a 3-10 m de grosor y teidas con hematoxilinaeosina y las tcnicas histoqumicas del cido perydico de Schiff (PAS), Azul alcian (AA) pH 2,5 y PAS-AA. El anlisis
XIX Congreso Espaol de Toxicologa cuantitativo se realiz por campo (40X) y los resultados se analizaron estadsticamente (ANOVA). Los resultados obtenidos revelan que los grupos tratados con BDE-47 presentan vacuolizacin del epitelio intestinal e hiperplasia de las clulas caliciformes. A nivel branquial se observa acortamiento de las laminillas branquiales secundarias, fusin de las mismas, dilatacin capilar e hiperplasia de las clulas mucosas. No se han observado diferencias significativas en los parmetros analizados entre los animales control y los expuestos al solvente ni entre las dos dosis del PBBs. Estos resultados indican que el polibromado BDE-47 provoca diversas alteraciones en epitelios expuestos a l lo que posiblemente constituye una respuesta adaptativa ante agentes irritantes. Palabras clave: Histopatologa, Polibromados, Peces, Toxicidad. C.170.-EFECTOS FISIOLGICOS DE LA EXPOSICIN DE JUVENILES DE RODABALLO (Scophthalmus maximus) A PBBs. DATOS PRELIMINARES lvarez-Otero, R; Conde-Sieira, M; Lpez-Patio, MA; Gesto; M, Soengas, JL; Mguez, JM Dpto de Biologa Funcional y CC de la Salud. Universidad de Vigo. Los bifenilos polibromados (PBBs) son compuestos orgnicos, slidos, solubles en grasas y diversos solventes orgnicos, cuyas propiedades ignfugas hacen que sean adicionados a una gran variedad de tiles cotidianos. Su presencia en el ambiente parece deberse a las descargas industriales y la deposicin de residuos, pudiendo ingresar en la cadena alimenticia y ser bioconcentrados por los organismos. El presente trabajo muestra los efectos fisiolgicos de la exposicin de juveniles de rodaballo (Scophthalmus maximus) a un PBBs, el BDE-47 (24,4tetrabromodifenil ter), con objeto de determinar su incidencia en organismos acuticos. Los ejemplares de rodaballo obtenidos de un mismo desove (30 g, 4 meses de edad) recibieron los siguientes tratamientos: sin exposicin al BDE-47 y expuestos a BDE-47 0,3 g/L durante 15 das y 30 das. La ingesta y el crecimiento (peso corporal y longitud) de los animales fueron evaluados en los das 1, 7 y 15. Una vez sacrificados los animales, se cuantific el ndice hepatosomtico (HSI), parmetros plasmticos (niveles de glucosa y lactato) y el contenido hipotalmico de neurotransmisores monoaminrgicos (serotonina, catecolaminas). Los resultados revelaron una disminucin progresiva en la cantidad de alimento ingerido por los animales tratados con BDE47, que se tradujo en ralentizacin de la ganancia de peso y estancamiento del crecimiento. Adems, se observ un descenso en el contenido hipotalmico de dopamina (15 y 30 das) y de serotonina (30 das) en el grupo tratado con BDE-47, conjuntamente con un incremento de la relacin metabolitos cidos/aminas. Estos resultados sugieren que la exposicin al polibromado tiene un efecto estresante en el rodaballo, el cual podra conllevar secundariamente alteraciones metablicas y de la ingesta. Los datos tambin indican que el crecimiento de los animales podra verse condicionado durante exposiciones prolongadas a estos agentes. Palabras clave: Polibromados, BDE-47, Rodaballo, Estrs, Catecolaminas. C . 1 7 1 . - E X P O S I C I N A O L E N A D E PA L M A TERMOXIDADA: EFECTO SOBRE EL ESTRS OXIDATIVO EN INTESTINO DELGADO Olivero-David, R1; Gonzlez-Muoz, MJ1; Bened, J2; Bastida, S3; Snchez-Muniz, FJ3 1 Dpto. Nutricin, Bromatologa y Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Alcal; 2 Dpto. de Farmacologa. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid; 3 Dpto. de Nutricin. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid. El origen y presencia de polmeros de triglicridos en intestino delgado han sido poco estudiados. El presente estudio combina un experimento de absorcin in vivo a corto plazo, con una determinacin por cromatografa de alto rendimiento por exclusin de peso molecular (HPSEC), para determinar el efecto de la exposicin a olenas de palma con diferentes grados de termo-oxidacin, en ratas Wistar machos tras su administracin va esofgica. Se pretende establecer la relacin entre el nivel de compuestos polimerizados de las olenas administradas con la posible presencia de compuestos de triglicridos polimerizados en el intestino y la cantidad de sustancias reactivas al cido tiobarbitrico (TBARS) y glutation peroxidado, indicadoras de estrs oxidativo en el tracto intestinal. Despus de la exposicin durante 4 horas a las olenas con diferente grado de alteracin, los niveles de TBARS (p<0,05) e ndice redox (glutation oxidado/glutation total) en el intestino delgado aumentaron en relacin con la cantidad de compuestos de alteracin administrados. Se constata, por primera vez en bibliografa, la presencia de compuestos polimricos de triglicridos en el intestino, los cuales deben formarse a partir de compuestos resultantes de la digestin de los aceites alterados y contribuir al estrs oxidativo en el intestino. Palabras clave: Glutation, Intestino, Olena de palma, ndice redox, TBARS. C.172.-ESTRS OXIDATIVO COMO MECANISMO DE TOXICIDAD DE CILINDROSPERMOPSINA EN TILAPIAS EXPUESTAS A CLULAS DE Aphanizomenon ovalisporum Guzmn-Guilln, R; Prieto, AI; Ros, V; Camen, AM rea de Toxicologa. Departamento de Nutricin y Bromatologa, Toxicologa y Medicina Legal. Universidad de Sevilla. La Cilindrospermopsina (CYN) es un alcaloide tricclico producido por distintos gneros de cianobacterias en medio acutico. Entre su mecanismo de accin, es conocido su capacidad para inhibir la sntesis de protenas. Debido a su carcter hidrosoluble, esta toxina puede ser fcilmente transmitida a travs de la cadena alimentaria por aguas de bebida, aguas de riego contaminadas, consumo de pescado contaminado etc. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el estrs oxidativo como posible mecanismo de accin txica de CYN en tilapias (Oreochromis niloticus) expuestas a liofilizados de clulas de Aphanizomenon ovalisporum. Se estudiaron los posibles efectos txicos de la CYN a dos concentraciones (10 y 100 g CYN/L) y durante dos perodos de exposicin (7 y 14 das). Para ello se formaron seis grupos (8 peces) de tilapias: 2 controles, 2 expuestos durante 7 das y 2 expuestos 14 das. Una vez transcurridos los periodos de exposicin, los peces fueron sacrificados y se extrajeron los rganos objeto de estudio (hgado y rin). Se estudiaron distintos biomarcadores de estrs oxidativo: oxidacin lipdica (LPO), oxidacin de protenas, oxidacin de ADN, y las actividades enzimticas Glutation Peroxidasa (GPx), Catalasa (CAT), NADPH oxidasa y el balance GSH/GSSG. En general, se observaron mayores cambios de estos parmetros en tilapias tratadas con una dosis de 100 g CYN/L, tras 14 das de exposicin. De los resultados obtenidos concluimos que existe una implicacin del estrs oxidativo en el mecanismo de accin de CYN en tilapias. Los autores quisieran agradecer al CICYT (AGL2009-10026) y a la Junta de Andaluca (P09-AGR-4672I) por la financiacin del presente estudio. Palabras clave: Estrs oxidativo, Cilindrospermopsina, LPO,
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa GSH, Oxidacin ADN. C.173.-TOXICIDAD COMPARADA DE CAMPTOTECINAS EN CLULAS DE ALTA TASA PROLIFERATIVA MEDIADA POR TOPOISOMERASAS Prada, CF; lvarez-Velilla, R; Calvo-lvarez, E; Prez-Pertejo, Y; Balaa-Fouce, R; Reguera, RM Dpto. CC Biomdicas, Facultad de Veterinaria, Universidad de Len. La ADN topoisomerasa IB (TopIB) ha sido identificada como diana teraputica de patgenos de elevada tasa proliferativa ya que est implicada en los procesos de reparacin de problemas topolgicos del ADN que aparecen durante la divisin celular. Las TopIB son la diana de las camptotecinas, drogas antitumorales de gran importancia clnica. Estos compuestos cumplen su funcin mediante la estabilizacin covalente del complejo ADN-enzima (complejo de cleavage) lo que impide que la TopIB pueda reestructurar el ADN a una forma ms relajada. Esto genera un choque con la horquilla de replicacin, y por lo tanto, imposibilita la divisin y causa la muerte de la clula. Para determinar la toxicidad comparada de estos compuestos se han desarrollado diferentes metodologas experimentales que comprenden las diferentes etapas del proceso de actuacin de la TopIB de los patgenos en oposicin con la enzima humana. Han sido evaluadas cuatro drogas: Camptotecina (CPT), su metabolito activo SN38, Topotecan (TPT) derivado hidrosoluble de la CPT y el Irinotecn (IRI) profrmaco del TPT. Los ensayos de inhibicin de la relajacin mostraron una mayor afinidad de los compuestos por la protena del patgeno, alcanzando niveles submicromolares en todos los casos con excepcin del IRI, que no present capacidad de inhibicin. Posteriormente, para ver la estabilizacin del complejo covalente, se realizaron ensayos de equilibrio de religacin/cleavage con un sustrato marcado radiactivamente en su extremo 5'. Todas las camptotecinas, con excepcin del IRI, provocaron una estabilizacin del complejo de cleavage proporcional a la concentracin de droga ensayada, presentando un lugar de estabilizacin adicional al existente en la enzima humana. A la vista de estos resultados podemos afirmar que las camptotecinas son poderosos aliados en la lucha frente a patgenos. MICINN AGL2010-16078; JCyL Gr238; ISCIII; PI09/0448; RICET. Palabras clave: Camptotecina, Toposiomerasa, Antitumorales. C.174.-EXPOSICION POR VA INHALATORIA A TRES TIPOS DE NANOPARTCULAS DE ORO DURANTE 21 DIAS IN VIVO Porredon, C1; de Lapuente, J1; Gonzlez, J2; Camps, L1; Ramos, D1; Serret, J1; Brull, N1; Gonzlez-Linares, J1; Caas, X2; Borrs, M1 1 Unitat de Toxicologia Experimental i Ecotoxicologia (UTOX). Parc Cientfic de Barcelona; 08028-Barcelona. 2Plataforma de Recerca Aplicada en Animal de Laboratori (PRAAL). Parc Cientfic de Barcelona; 08028-Barcelona. El objetivo de este estudio consista en determinar si exista una toxicidad debida a una exposicin crnica a nanopartculas de oro, las cuales haban sido previamente estudiadas in vivo tras una administracin aguda con resultados negativos. Se compararon los efectos de tres tipos de nanopartculas de oro: nanopartculas de oro de 12 nm de dimetro (Au12), nanopartculas de oro de 12 nm con recubrimiento de cido hialurnico (HAAu) y nanopartculas de oro de 100 nm de dimetro (Au100). Se utiliz la rata como modelo experimental, se realizaron 5 exposiciones semanales en una cmara inhalatoria durante 21 das. El estudio constaba de un grupo control y 9 grupos tratamiento: 3 productos
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por 3 tiempos de exposicin cada uno. La toxicidad sistmica y evolucin clnica de los animales se determin mediante el control de signos clnicos, la evolucin de pesos, hematologa, bioqumica clnica e histopatologa de intestino, rin, hgado, cerebro y pulmn. Se estudi el efecto sobre la coagulacin. Tambin se estudi la genotoxicidad mediante la tcnica del Comet assay, y el estrs oxidativo mediante el estudio de la peroxidacin lipdica por determinacin de los niveles de malondialdehido (MDA) en plasma, pulmn e hgado. Todos los grupos incrementaron de peso durante las exposiciones sin existir ninguna diferencia significativa entre ellos. Aunque se obtuvieron resultados dentro de la normalidad, al analizar los resultados se obtuvieron diferencias significativas para algunos parmetros: en los resultados del comet assay de sangre, la dosis alta de Au12, y la dosis alta y media de Au100 presentaron un incremento de los valores; en los resultados de MDA en plasma, los grupos de dosis alta de los tres tipos de nanopartculas de oro y la dosis media de HAAu tambin presentaron un incremento significativo. Palabras clave: Nanotoxicologa, In vivo. C.175.-BIODISTRIBUCIN IN VIVO DE NANOPARTCULAS DE ORO TRAS UNA EXPOSICIN POR VA INHALATORIA Porredon, C1; de Lapuente, J1; Gonzlez, J2; Camps, L1; Ramos, D1; Serret, J1; Brull, N1; Gonzlez-Linares, J1; Caas, X2; Borrs, M1 1 Unitat de Toxicologia Experimental i Ecotoxicologia (UTOX). Parc Cientfic de Barcelona; 08028-Barcelona. 2Plataforma de Recerca Aplicada en Animal de Laboratori (PRAAL). Parc Cientfic de Barcelona; 08028-Barcelona. El objetivo de este estudio consista en determinar la distribucin de las nanopartculas in vivo en funcin de sus caractersticas de recubrimiento y tamao tras una exposicin por va inhalatoria. Se compar el comportamiento de tres tipos de nanopartculas de oro: nanopartculas de oro de 12 nm de dimetro (Au12), nanopartculas de oro de 12 nm con recubrimiento de cido hialurnico (HAAu) y nanopartculas de oro de 100 nm de dimetro (Au100). Se utiliz la rata como modelo experimental, se realizaron 5 exposiciones semanales en una cmara inhalatoria (Aeroneb Lab Nebulizer System) durante 21 das. Se control el estado de los animales y se extrajeron muestras de sangre para determinar la cintica de las nanopartculas en el torrente sanguneo por espectrometra de masas con fuente de plasma de acoplamiento inductivo (ICP-MS). En cuanto a la biodistribucin de las nanopartculas en el organismo se tomaron muestras del bulbo olfatorio, pulmn, carina, hgado, bazo y rin para su posterior observacin por microscopia electrnica de transmisin (TEM) y muestras de testculo, ovario, bulbo olfatorio, pulmn, hgado, ndulo linftico, bazo, rin y pncreas para cuantificar los niveles de oro por ICP-MS. El anlisis microscpico por TEM se realiz sobre tres clulas con presencia de nanopartculas y sobre la distribucin intracelular de stas. La distribucin en pulmones muestra que en la mayora de los casos las NPs se localizan en vesculas de macrfagos de forma individual o en agregacin. Por otro lado, se ha observado que la exposicin a las nanopartculas no afecta al comportamiento de los animales, as como al incremento de peso esperado. Palabras clave: Nanotoxicologa, In vivo, Biodistribucin, TEM; ICP-MS. C.176.-DUODENAL AND COLONIC BIOAVAILABILITY OF ENNIATINS APPLYING AN IN VITRO METHOD IN CACO-2 CELLS
XIX Congreso Espaol de Toxicologa Font, G; Meca, G; Maes, J; Ruiz, MJ Laboratory of Food Chemistry and Toxicology, Faculty of Pharmacy, University of Valencia, Av. Vicent Andres Estelles s/n, 46100 Burjassot, Valencia, Spain. Enniatins (ENs) are antibacterial compounds produced by secondary metabolism of some Fusarium strains as F. subglutinans and F. proliferatum. These bioactive compounds are enzyme inhibitors and have antifungal, antibacterial and immonumodulatory activities. The bioavailability of the minor Fusarium mycotoxins ENs utilizing an in vitro method which allows the simulation of the small and large intestine tracts was used. Caco-2 cells are considered a validated international model used to study the intestinal absorption of the compounds contained in food. This method, based on the application of the Caco-2 cells grown alone or in symbiosis with strains characteristics of the gastrointestinal tract has permitted to simulate the duodenal and colonic intestinal compartments. Nine strains were used for this purpose: Lactobacillus animalis, Lb. casei, Lb. casei rhamnosus, Lb. plantarum, Lb. rhuminis, Lb. casei casei, Bifidobacterium breve, Bif. adolescentes, Bif. Bifidum. The experiments were realize utilizing the transwell plates, that are plates constituted by three parts, and in particular by a filter of 0.22 M, on the cells were grown until the complete differentiation (21 days), an apical compartment that simulate the intestinal lumen, where generally are introduced the compounds for the cell absorption, and a basolateral compartment that has the function to recollect the compounds absorbed by cells and to simulate the blood stream. The mean percentages of duodenal and colonic bioavailabilities, focussed in four ENs (A, A1, B and B1) added in the in vitro model at 1.5 and 3.0 M concentrations, were of 68.00 and 48.26%, respectively. Total bioavailability, calculated as the sum of duodenal and colonic bioavailabilities, has evidenced a mean value of 86.16%. The work presented herein can be considered as the first where the influences of different intestinal compartments on the bioavailability of ENs have been studied. This work was supported by the Science and Innovation Spanish Ministry (AGL 2010-17024/ Ali). Key words: Enniatins, Bioavailability, Transepithelial transport, Caco-2 cells, LC-MS. C.177.-ESTUDIO DE LA CITOTOXICIDAD DE LA MICROARCILLA NANOFIL116 EN LA LNEA CELULAR INTESTINAL HUMANA CACO-2 Gutirrez-Praena, D1; Pichardo, S1; Jord, M2; Bermdez, JM2, Aucejo, S2; Jos, A1 1 rea de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. 2rea de Materiales y Sistemas de Envasado. ITENE. Paterna. Valencia. La conservacin de alimentos perecederos est sufriendo una revolucin gracias al desarrollo de nuevos e innovadores materiales de envase. En este sentido el uso y aplicacin de micro y nanomateriales en el envasado de alimentos ha permitido alargar los tiempos de vida til de productos perecederos, siendo las arcillas uno de los materiales de mayor potencial en este campo. En concreto, el nanofil 116 es una montmorillonita sdica natural cuyo uso como aditivo en plsticos est siendo estudiada para mejorar sus propiedades fsicas, mecnicas y trmicas. Sin embargo, existen pocos datos acerca de su toxicidad. Por ello, se estudi la citotoxicidad de distintas concentraciones de esta microarcilla (0,98 62,5 g/mL) tras 24 y 48h de exposicin en la lnea celular intestinal humana Caco-2, dado que la exposicin a estos compuestos tiene lugar por va oral. Los indicadores ensayados fueron la captacin del colorante rojo neutro (RN) como biomarcador de viabilidad celular, el contenido proteico total (PT) como biomarcador de la proliferacin y prdida de adherencia, y la metabolizacin de la sal de tetrazolio MTS, como biomarcador de la actividad de las deshidrogenasas mitocondriales. Los resultados muestran que a la mayor dosis ensayada no se alcanza la concentracin efectiva media en ninguno de los marcadores considerados, siendo el contenido proteico el indicador ms sensible, seguido de la reduccin de MTS y la inhibicin de la captacin de RN. Agradecimientos: Ministerio de Ciencia e Innovacin. Proyecto AGL2010-21210. Servicio de Biologa del CITIUS. Palabras clave: Nanofil 116, Arcilla, Citotoxicidad, Caco-2, Nanomaterial, Montmorillonita. C.178.-MECANISMO IMPLICADO EN LOS EFECTOS TXICOS RENALES DE LA TERAPIA QUELANTE CON DEFERASIROX Snchez-Gonzlez, PD1,2; Lpez-Hernndez, FJ1,3; Prieto M1, Lpez-Novoa, Jm1; Morales, AI1 1 Unidad de Toxicologa, Departamento de Fisiologa y Farmacologa, Universidad de Salamanca. 2Bio-inRen S.L. Salamanca. 3IECSCYL. Unidad de Investigacin. Hospital Universitario de Salamanca. e-mail: amorales@usal.es La toxicidad por hierro es un trastorno que afecta a numerosos pacientes dependientes de transfusiones, debido a que la hemoglobina en los glbulos rojos es una protena rica en hierro y que el organismo es incapaz de eliminarlo. La terapia para evitar la sobrecarga de hierro consiste en la quelacin del este metal. El desferasirox es un quelante eficaz, pero que ha mostrado ligeras alteraciones renales en ensayos clnicos, mientras que en estudios experimentales realizados en nuestro laboratorio, se ha observado una evidente lesin tubular in vivo. El objetivo de nuestro estudio fue estudiar el posible mecanismo implicado en este dao renal. Se utiliz una lnea de clulas epiteliales tubulares de ratn (MCT). Los estudios revelaron que: (1) existe un efecto antiproliferativo/citotxico del deferasirox, principalmente a las 24 horas post-tratamiento; (2) el contenido celular de los marcadores caractersticos de necrosis tubular (NAG, NGAL y KIM-1) en los cultivos MCT, aumenta despus de 24 horas de tratamiento con deferasirox, con ligeros cambios en su excrecin al medio de cultivo; y (3) los cultivos de MCT muestran una evidencia significativa de muerte celular por apoptosis, mediada por un incremento en la expresin y activacin de caspasa-3 y una marcada fragmentacin del ADN. En conclusin, la terapia quelante con deferasirox provoca directamente una serie de eventos proapoptticos y antiproliferativos en las clulas epiteliales que podran estar implicados en el dao tubular observado in vivo. Palabras clave: Deferasirox, Toxicidad renal, Cultivos celulares, Quelacin con hierro. C.179.-EFECTOS DE LA EXPOSICIN AL XIDO DE TRIBUTILESTAO (TBTO) EN LARVAS DE Chironomus riparius (DIPTERA) Morales, M; Martnez-Paz, P; Martnez-Guitarte, JL; Morcillo, G Grupo de Biologa y Toxicologa Ambiental. Facultad de Ciencias. UNED. Madrid. El xido de tributilestao (TBTO) est catalogado como un disruptor endocrino. Se trata de un biocida de amplio uso cuyas aplicaciones en pinturas de barcos, estabilizadores de plsticos y protectores de maderas conllevan un vertido directo e indirecto a los ecosistemas acuticos. El TBTO presenta una vida en el agua que oscila entre unos das y varias semanas, pero persiste en sedimentos durante aos. Estudios previos han demostrado sus efectos nocivos en invertebrados. En el caso de Chironomus parece alterar los niveles de ecdisteroides y el desarrollo de los discos imagnales
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa genitales, especialmente en machos. Estos datos sugieren un efecto disruptor endocrino de la hormona ecdisona y esto hace que sea un compuesto muy adecuado para analizar marcadores gnicos relacionados con la ruta de sealizacin de esta hormona. En este trabajo, nos planteamos identificar el potencial efecto del TBTO en genes implicados en el sistema endocrino de insectos y en la ruta de detoxificacin de xenbioticos. El organismo utilizado en este estudio es Chironomus riparius, considerado como modelo en ensayos de toxicidad en ecosistemas acuticos y como indicador biolgico de calidad de aguas. Se analizaron los efectos en los niveles de expresin de genes relacionados con la ruta de la ecdisona, como el receptor de la ecdisona (EcR), el receptor relacionado con estrgenos (ERR), as como el citocromo P450. El anlisis de los niveles de transcripcin se realiz por Real Time PCR. Adems, se evalu la actividad de la enzima Glutatin-S transferasa (GST) que representa junto con el citocromo P450 uno de los mayores grupos de enzimas detoxificantes implicadas en la eliminacin de compuestos xenobiticos. Los resultados muestran cambios en los niveles de expresin en los genes de la ruta hormonal, as como del citocromo P450. Estos datos sugieren que los genes ERR y citocromo P450 pueden ser potenciales marcadores biolgicos de exposicin al disruptor endocrino, TBTO. Financiado por CICYT, CTM2009-07189. Palabras clave: xido de tributilestao, Chironomus, Disruptor endocrino. C.180.-ALTERACIONES HISTOPATOLGICAS EN TESTCULO DE TENCAS (Tinca tinca) EXPUESTAS AL AGENTE DISRUPTOR ENDOCRINO 17-ETINILESTRADIOL Oropesa, AL1; Hernndez, D1; Soler, F1; Prez, M1; Fallola, C2; Pula, Hj2; Gmez, LJ3 1 Unidad de Toxicologa, Facultad de Veterinaria, Universidad de Extremadura, Cceres, Espaa. 2Centro de Acuicultura. Direccin General de Medio Natural. Junta de Extremadura. Antigua N-V, km. 391,7. 06195 - Villafranco del Guadiana, Badajoz, Espaa. 3Unidad de Anatoma Patolgica, Facultad de Veterinaria, Universidad de Extremadura, Cceres, Espaa. El 17-etinil-estradiol es un estrgeno de origen sinttico que constituye uno de los principales ingredientes de la pldora anticonceptiva, siendo tambin utilizado en las terapias de reemplazamiento estrognico. Este compuesto es vehiculado a travs de los efluentes de las Estaciones Depuradoras de Aguas Residuales (ETAP) a aguas superficiales y sedimentos, originando una disminucin de la eficacia reproductiva en ciertos organismos acuticos. Con la finalidad de evaluar las alteraciones en la funcin reproductiva de tencas (Tinca tinca) expuestas a este agente disruptor endocrino, se realiz un test crnico ensayndose 3 dosis de 17-etinil-estradiol (50 g/Kg, 100 g/Kg y 500 g/Kg). El estudio anatomopatolgico del testculo revel en los peces expuestos a 17-etinil-estradiol una disminucin en el nmero de tbulos seminferos, mostrando adems una prdida de su morfologa habitual. Los tbulos seminferos presentaban formas tortuosas as como una degeneracin de las clulas de Sertoli y de Leidig. Tambin se observ una degeneracin del tejido conjuntivo intertubular. Consideramos que tales lesiones, que se agravaban con el incremento en la dosis de exposicin, pueden afectar adversamente la capacidad reproductiva de esta especie. Palabras clave: Disruptor endocrino, 17-etinil-estradiol, Tenca (Tinca tinca), Testculo. C.181.-DIFERENCIACIN Y CUANTIFICACIN DE ACIDO GAMMA-HIDROXIBUTIRICO Y GAMMA88
BUTIROLACTONA MEDIANTE CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS Y ESPECTROFOTOMETRIA DE INFRAROJOS EN MUESTRAS PROCEDENTES DE ALIJOS Gutirrez, D; Tena, T; Valcarce, F Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Departamento de Madrid. Servicio de Drogas. El uso de GHB y su precursor GBL como drogas de abuso ha experimentado en los ltimos aos un gran aumento, incluyendo su uso vinculado a agresiones sexuales. A nivel legislativo, en Espaa, de conformidad con lo dispuesto en el Convenio de 1971 sobre sustancias psicotrpicas de las Naciones Unidas, tanto el GHB como el GBL fueron introducidos en el ao 2002 por Orden SCO/469/2002 en la Lista IV del Anexo I del Real Decreto 2829/1977 por el que se regula la fabricacin, distribucin, prescripcin y dispensacin de sustancias y preparados psicotrpicos. El GBL se retir de dicha lista mediante Orden SCO/2004/2006 debido a su uso generalizado en la industria. El anlisis de estos compuestos tiene alguna complicacin en CG/MS, ya que el GHB se convierte en GBL por el calor, lo que hace que no puedan diferenciarse mediante esta tcnica, si no se realiza una derivatizacin previa. El anlisis por HPLC, tambin es complicado debido al pequeo tamao de la molcula, su naturaleza polar y la ausencia de grupos cromforos que den lugar a un espectro ultravioleta caracterstico. Hasta el ao 2006, la diferenciacin entre GHB y GBL no era importante desde el punto de vista judicial, al estar ambas sustancias sometidas a fiscalizacin. Es a partir de la exclusin del GBL de las listas, cuando dicha diferenciacin se hace imprescindible en el laboratorio forense. Presentamos un mtodo optimizado en HPLC/DAD que permite la separacin de los citados compuestos y poder as diferenciarlos de modo presuntivo en base a su tiempo de retencin. La confirmacin se realiza por FTIR validando con ello los resultados previamente obtenidos por HPLC. Con este mtodo se ha procedido a la cuantificacin mediante HPLC-DAD del contenido en GHB y/o GBL en muestras recibidas en el Servicio de Drogas del Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses. Palabras clave: cido gammahidroxibutrico (GHB), Gammabutirolactona (GBL), Cromatografa de lquidos de alta resolucin con detector de diodo array (HPLC/DAD), (Espectrofotometra de infrarrojos con transformada de fourier (FTIR), Psicotropo. C.182.-INTERACCION DE CLORAMINA-T CON EL METABOLISMO OXIDATIVO Martnez, MA; Castellano, V; Martnez, M; Ares, I; Ramos, E; Romero, A; Martnez-Larraaga, MR; Anadn, A Departamento de Toxicologa y Farmacologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid, 28040 Madrid. La Cloramina-T (N-cloro-4-tolueno sulfonamida), sustancia bactericida de uso ambiental, ampliamente se utiliza en la industria alimentaria y como conservante en el procesado de alimentos. Tambin tiene propiedades fungicidas. En medicina veterinaria se utiliza como antisptico de uso tpico. La Cloramina-T es un agente oxidante por formar HClO. Estudios de toxicidad aguda describen en ratas una DL50 oral de 1000 mg/Kg y DL50 por inhalacin >0,275 mg/litro/4 h. Estudios de toxicidad oral subcronica-90 das sealan un NOAEL de 15 mg/Kg p.c., aunque se discute su mutagenicidad. Estudios cinticos realizados en ratas en nuestro laboratorio tras dosis nica oral de 100 mg/Kg p.c. demuestran que Cloramina-T se absorbe y se
XIX Congreso Espaol de Toxicologa elimina rapidamente con una biodisponibilidad oral de un 50%, Cmax=35 g/mL en un Tmax=0,44 h y una semivida de eliminacin 1,41 h. Con el fin de aportar nuevos datos de toxicidad de Cloramina-T que puedan ayudar a la evaluacion de su seguridad de uso, el presente trabajo estudia posibles efectos de la Cloramina-T sobre isoenzimas P450 (CYP) en microsomas hepticos procedentes de ratas Wistar macho tratadas con Cloramina-T (5 y 10 mg/Kg p.c., oral, 4 das) (Cloramina-T disuelta en 0,4 mL solucin salina). Animales control y tratados se sacrifican 24 h tras la ltima dosis, individualmente se les aisla el hgado, se homogeniza y se prepara el pellet microsomal y almacena en alicuotas a -80C para las determinaciones enzimaticas. Cloramina-T, aument las actividades de las enzimas anilina hidroxilasa y aminopirina N-demetilasa, as como tambin la N-demetilacin de eritromicina (CYP3A1), Odeetilacin de la etoxiresorufina (CYP1A1) y O-demetilacin de la metoxiresorufina (CYP1A2) de forma dosis-dependiente. Los resultados sugieren que la induccin de enzimas P450 constituye un dato de valor para la evaluacin del riesgo de este biocida. Financiado por los Proyectos Consolider-Ingenio 2010 Ref. CSD/2007/00063 y Ref. n S2009/AGR-1469, MEC, y Ref. GR58/08 UCM-BSCH, Madrid. Palabras clave: Cloramina-T, Enzimas P450, Hgado de rata. C.183.-CYTOTOXICITY, LIPID PEROXIDATION AND OXIDATIVE STRESS INDUCED BY EXPOSURE OF BEAUVERICIN AND ENNIATINS IN CACO-2 CELLS Prosperini, A; Lombardi, G; Font, G; Ruiz, MJ Laboratory of Toxicology, Faculty of Pharmacy, University of Valencia, Av. Vincent Andres Estelles s/n 46100 Burjassot, Valencia, Spain. Mycotoxins are secondary fungal metabolites that can produce toxic effects on animal and human health as common contaminants of food and feed. Their toxicity on different mammalian cell lines has been showed but the mechanisms have not been fully clarified. The induction of oxidative stress, as a possible mechanism, has been assumed. Oxidative stress that occurs in the cells, as a consequence of an inequity between the prooxidant/antioxidant systems, causes injure to biomolecules such as nucleic acids, proteins, structural carbohydrates, and lipids by increased intracellular generation of reactive oxygen species (ROS) that play an important role in the pathogenesis of a variety of diseases and important biological processes. In this study the cytotoxicity effects, the generation of ROS species and the lipid peroxidation were investigated in the epithelial colorectal adenocarcinoma (Caco-2) cell line as function of increasing time after exposure to different concentration of Fusarium mycotoxins, beauvericin (BEA) and enniatins (ENs) A, A1, B and B1. The MTT was used to determine cell viability. After 24, 48, 72h of exposure the IC50 values obtained ranged from 1.25 M (EN A1 after 72h exposure) to 14.8 M (EN A1 after 24h exposure). The determination of malonedialdhyde (MDA)thiobarbituric acid (TBA) adduct was signed to determine lipid peroxidation. The MDA production resulted in a significant (p 0.05) increase after all mycotoxins exposure in a concentration and time-dependent manner. The intracellular ROS generation was determined by the sensitive fluorogenic probe 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2-DCFDA) that is converted intracellularly to highly fluorescent dichlorofluorescein (DCF) with the presence of intracellular ROS. The relative intensity of fluorescence from Caco-2 cells incubated with BEA and ENs demonstrated a significant (p 0.05) increase in ROS levels versus control cells (not exposed to mycotoxins). The mycotoxins that were more cytotoxic resulted also to produce a more significant oxidative stress in Caco-2 cells. This work was supported by the Science and Innovation Spanish Ministry (AGL 2010-17024/ Ali) Key words: Beauvericin, Enniatins, Lipid peroxidation, Oxidative stress. C.184.-POTENTIAL CYTOTOXIC EFFECTS OF INDIVIDUAL AND COMBINED EMERGING Fusarium MYCOTOXINS IN CHO-K1 CELLS. Hui, L; Fernndez-Franzn, M; Font, G; Ruiz, MJ Laboratorio de Toxicologa. Facultat de Farmcia, Universitat de Valncia, Av. Vicent Andres Estelles, s/n, 46117, Burjassot, Valencia, Spain. M.Jose.Ruiz@uv.es Enniatins (ENs) A, A1, B and B1 are prevalently produced by Fusarium species. Known as emerging mycotoxins, ENs can cause outbreaks in humans and animals. The chemical diversity of mycotoxins not only poses difficulties for analytical techniques, but also provides limited data available on their toxicities. ENs elicit a wide range of differing biological properties and toxicological effects, and their co-occurrence may increase these hazards. As the potential toxins reach the cells in vitro in the same as they would in vivo, viability of cytotoxicity is studied with CHO-K1, which is considered to be one of the sensitive cell lines for preliminary screening mycotoxin contaminated feed and food extracts. In this study, individual ENs' cytotoxic potential effects were evaluated in CHO-K1 after 24, 48, and 72 h of exposure by a short time tests, the MTT assay. The results show that IC50 values of EN A, A1, B and B1 were larger than 7.5 M, 11.59 M, 13.1 M and 7.4 M, respectively for 24h; 3.1 M, 1.9 M, 2.2 M and 2.4 M for 48h; similar values than those obtained for 48 h were observed after 72h of exposure. EN A1 showed the strongest cytotoxic potential in CHO-K1 cells. On the other hand, simultaneous exposure to ENs for 24 h was determined. Cytotoxicity interactions were evaluated by the isobologram method. In acute binary tests, each EN showed a complex interaction with each other (supperadditivity, additivity or subadditivity) at the six different combination ratios tested. In conclusion, ENs are capable to affect CHO-K1 cell proliferation and viability through inhibition of grown cells; the toxic potential depends on the concentration, time of exposure and combination of ENs. These results provide quantitative evidence regarding potentially important interactions between ENs. The combination index-isobologram equation method can serve as a useful tool in food risk assessment. This work was supported by the Science and Innovation Spanish Ministry (AGL 2010-17024/ Ali) Key words: Enniatins, Cytotoxicity, Isobolograms, Interactions, CHO-K1 cells. DOCENCIA EN TOXICOLOGA: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.185.-INTRODUCCIN DE NUEVAS ACTIVIDADES COMO COMPLEMENTO Y AYUDA EN EL APRENDIZAJE DE LA ASIGNATURA TOXICOLOGA Prieto, AI; Pichardo, S; Jos, A; Moreno, I; Puerto, M; Camen, AM rea de Toxicologa. Departamento de Nutricin y Bromatologa, Toxicologa y Medicina Legal. Universidad de Sevilla. Supone un gran reto poder adaptar asignaturas con un gran nmero de alumnos matriculados a los nuevos grados segn los principios del Espacio Europeo de Educacin Superior (EEES). Por ello los profesores del rea de Toxicologa de la Universidad de Sevilla nos planteamos proponer la realizacin actividades
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa voluntarias como complemento y ayuda en la enseanza de la asignatura Toxicologa, impartida durante el curso acadmico 2009-2010. Los objetivos propuestos fueron: fomentar la participacin de los estudiantes y el trabajo en grupo, aumentar la capacidad de sntesis y de autocorreccin de los conocimientos adquiridos, as como la toma de decisiones y el espritu crtico. Se propuso la realizacin voluntaria de tres actividades que fueron llevadas a cabo de forma simultnea: una primera actividad consistente en la elaboracin en grupo de carteles didcticos basados en el contenido de la asignatura de forma esquematizada y en los que se relacionaban los diferentes temas, una segunda actividad individual basada en la resolucin de problemas (aprendizaje basado en problemas, ABP) y una tercera actividad realizada en horario de clase consistente en la realizacin de forma continuada de exmenes tipo test para fomentar el repaso y una mayor comprensin, pudiendo corregir conceptos errneos recin adquiridos por los alumnos. Al final del curso se expusieron los carteles didcticos en horario de clase, se corrigieron y evaluaron los ABP y los exmenes tipo test realizados formaron parte del examen final de la asignatura. La experiencia ha sido muy positiva, destacando la alta participacin e inters del alumnado y su mayor implicacin en la asignatura, adems se ha constatado una mejora del rendimiento acadmico aumentando el nmero de notables (35,7% frente a 6%) y disminuyendo el nmero de suspensos (20,8% frente a 24,6%) del presente curso acadmico 2009-2010 con respecto al curso anterior (2008-2009). Se agradece la ayuda econmica concedida por el I Plan Propio de Docencia de la Universidad de Sevilla en la convocatoria de proyectos de Innovacin y Mejora Docente 2009-2010. Palabras clave: Aprendizaje, Toxicologa, Carteles didcticos, ABP, EEES. C.186.-APLICACIN DE METODOLOGAS ACTIVAS DE ENSEANZA EN LA ASIGNATURA SEGURIDAD ALIMENTARIA, PERTENECIENTE AL GRADO EN FARMACIA Jos, A; Pichardo, S; Prieto AI; Puerto, M; Gutirrez-Praena, D; Guzmn-Guilln, R; Mairena, I; Moreno, I; Camen, AM rea de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. La asignatura Seguridad Alimentaria: Riesgos Txicos y Prevencin es una materia optativa de 2 del Grado en Farmacia, con una carga lectiva de 6 crditos ECTS (3 tericos, 1,5 prcticos y 1,5 de seminarios) y con 97 alumnos matriculados en el curso 2010/11. En los seminarios se proporcion a los alumnos informes de la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA) y de la Agencia Espaola de Seguridad Alimentaria y Nutricin (AESAN) sobre distintos peligros presentes en los alimentos (dioxinas, melamina, bisfenol A, semicarbazida, etc.). Tras el anlisis de esta informacin, los alumnos, por parejas, plasmaron las ideas principales en psters que tuvieron que exponer a los compaeros, siempre contando con la supervisin del profesor. Finalmente, se ofreci a los alumnos la posibilidad de presentar los psters realizados en las I Jornadas de Seguridad Alimentaria: Anlisis de Riesgos, celebradas en Sevilla el 5 de noviembre de 2010 y organizadas por la Seccin de Toxicologa Alimentaria de la Asociacin Espaola de Toxicologa (AETOX). Con esta experiencia, los alumnos aprendieron y practicaron distintas competencias transversales (anlisis de la informacin, capacidad de sntesis, exposicin en pblico, etc.) adems de vivir por primera vez, la experiencia de participar en una Jornada Cientfica. Al finalizar la actividad, se realiz una encuesta annima a los alumnos y los resultados derivados de la misma reflejan un alto grado de satisfaccin con la actividad. Agradecimientos: Vicerrectorado de Docencia. Convocatoria de Proyectos de Innovacin y Mejora Docente 2010-11. Palabras clave: Seguridad alimentaria, Toxicologa, Innovacin docente, Jornada cientfica. C.187.-ESTUDIO DEL RENDIMIENTO Y TASAS DE ABANDONO EN LA ASIGNATURA DE TOXICOLOGA Pichardo, S; Prieto, A.I; Moreno, I; Jos, A; Puerto, M; Camen, AM rea de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla. Toxicologa es una asignatura troncal que se imparte en el 2 cuatrimestre del 3er curso de la Licenciatura de Farmacia con una carga lectiva de 8 crditos, siendo 6 de ellos tericos. Debido a la estructura del actual plan de estudios, existe un elevado nmero de alumnos que abandonan la asignatura de Toxicologa. Adems, cambios recientes en los planes de estudio han dado lugar a una masificacin de los grupos de teora, ya que el presente curso 2010-2011 es el ltimo de la licenciatura de Farmacia, tras iniciarse el grado, en el que se puede cursar la asignatura de forma presencial. Por estos motivos, las profesoras de Toxicologa planteamos el presente proyecto de investigacin docente con el fin de indagar en los motivos reales que llevan al abandono de la asignatura. Para ello, se realizaron tres encuestas a los alumnos: una al principio de curso, otra despus de la realizacin del primer parcial y una ltima despus del examen final. Tras el estudio de las encuestas realizadas, podemos destacar entre los motivos argumentados por los alumnos para abandonar la asignatura los siguientes: la percepcin de dificultad del contenido terico de la asignatura (slo el 20% aprecian una dificultad media frente al 80% que consideran una dificultad alta o muy alta), la coincidencia de las clases tericas con otras asignaturas (80% frente a otros motivos de ausencia), un bajo seguimiento de la asignatura a lo largo del curso (menos del 30% de los alumnos han realizado un estudio continuado de la asignatura) y la importancia de haber aprobado el primer parcial realizado cuando se ha impartido la mitad de la asignatura (70%). Los resultados obtenidos resultan de gran utilidad para poder incidir en las debilidades, intentando hacer ms comprensibles los contenidos tericos, incitar a los alumnos a realizar el primer parcial y motivarlos a un estudio continuo de la misma, para as intentar mejorar el seguimiento y rendimiento de nuestra asignatura en los siguientes cursos acadmicos. Agradecimientos: Vicerrectorado de docencia. Convocatoria Proyectos de Investigacin Docente 2009-2010. Palabras clave: Docencia, investigacin docente, abandono, rendimiento. C.188.-INNOVACIN DOCENTE EN LA ASIGNATURA DE TOXICOLOGA: REALIZACIN DE TRPTICOS INFORMATIVOS DEL ABUSO DE DROGAS Pichardo, S; Prieto, AI; Jos, A; Moreno, I; Puerto, M; GutirrezPraena, D; Guzmn-Guilln, R; Ros, V; Mairena, I; Camen, AM rea de Toxicologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla Durante el curso 2010-2011 se ha realizado en la asignatura de Toxicologa un proyecto de innovacin docente diseado para implicar al alumnado en el aprendizaje de la asignatura mediante el estudio de temas de gran actualidad y que despiertan una gran preocupacin social, como son los efectos txicos derivados del consumo de las drogas de abuso. Para ello los alumnos estudiaron y trabajaron dichos temas, y posteriormente elaboraron carteles y trpticos informativos para el resto de compaeros de la Facultad de Farmacia y de la Universidad de Sevilla. As, se consigui que los alumnos asimilaran estos conocimientos, y tambin que
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa fueran capaces de transmitirlos, realizando de esta forma una de las funciones ms importantes y valoradas como sanitarios: la informacin a la poblacin como mtodo de prevencin, sobretodo a la poblacin estudiantil, con mayor riesgo de exposicin a estas sustancias. Este proyecto ha permitido motivar e implicar de forma ms directa al alumno en el proceso de aprendizaje de la asignatura, adems de fomentar el trabajo en grupo y la capacidad de sntesis. As mismo, ha permitido formar a los alumnos en competencias imprescindibles para su futuro profesional, como la de ser capaces de proporcionar informacin sanitaria a la poblacin. Agradecimientos: Vicerrectorado de docencia. Convocatoria Proyectos de Innovacin Docente 2010-2011. Palabras clave: Docencia, Innovacin docente, Trpticos, Drogas de abuso, Prevencin. C.189.-PRCTICA DE LABORATORIO: ESTUDIO DE LA I N H I B I C I N Y R E A C T I VA C I N D E L A ACETILCOLINESTERASA Piqu, E; Teixid, E; Llobet, JM; Gmez-Cataln, J ORFILA: Grupo de Innovacin Docente de Toxicologa. Unidad de Toxicologa, Departamento de Salud Pblica, Facultad de Farmacia, Universidad de Barcelona. El objetivo docente de la prctica es comprobar in vitro el mecanismo de accin de los pesticidas organofosforados as como su bioactivacin y la efectividad del tratamiento con oximas en caso de intoxicacin. Los organofosforados inhiben la acetilcolinesterasa aumentando los niveles de acetilcolina en las sinapsis nerviosas. El enzima inhibido puede, si no ha pasado demasiado tiempo, reactivarse por accin de las oximas, las cuales rompen el enlace entre el enzima y el organofosforado. Se expone un homogenizado de cerebro de rata a paration y a paraoxon. Previamente se obtiene el paraoxon simulando la bioactivacin mediante oxidacin qumica con bromo segn el protocolo descrito por Arufe y colaboradores (Arufe MI et al. Biochemical Education, 2000). Se incuban en un bao termostatizado durante 30 minutos y a continuacin se determina la actividad acetilcolinesterasa siguiendo el mtodo de Ellman. El alumno comprobar por un lado que los organofosforados inhiben la acetilcolinesterasa y por otro la bioactivacin del paratin a paraoxon, ya que se observa una mayor inhibicin con la exposicin a ste ltimo. Seguidamente, se realizar el experimento de la reactivacin de la enzima inhibida por paraoxon mediante obidoxima y pralidoxima. Se incuban nuevamente en el bao durante 30 minutos y se determina su actividad. Se comprueba que, efectivamente existe reactivacin del enzima por parte de las oximas y que la capacidad de reactivar el enzima in vitro es superior para la obidoxima que para la pralidoxima. En conclusin, este experimento constituye una prctica de laboratorio para los alumnos fcil, rpida y econmica, sobre el mecanismo de toxicidad de los organofosforados y el tratamiento de la intoxicacin a travs de oximas. Palabras clave: Acetilcolinesterasa, Pesticidas organofosforados, Inhibicin, Reactivacin, Oximas. C.190.-ELABORACIN DE ATLAS DE PLANTAS DE INTERS TOXICOLGICO COMO ESTRATEGIA DEL APRENDIZAJE MEDIANTE IMGENES Moyano, MR; Molina, AM; Serrano-Rodriguez, JM; Lora, AJ; Fernndez, AI; Serrano-Caballero, JM Dpto. Farmacologa, Toxicologa, y Medicina legal y Forense. Universidad de Crdoba. La Toxicologa, disciplina troncal del Grado de Veterinaria, incluyen en su programa un apartado sobre toxicologa vegetal de gran importancia para el futuro profesional, dado que representa aproximadamente el 60% de la casustica de los casos clnicos de intoxicaciones en animales. Por ello, se realizan verdaderos esfuerzos para que el alumno profundice y complete su formacin en toxicologa vegetal, con la dificultad que entraa la recoleccin e identificacin de las principales especies vegetales txicas para el ganado, debido al gran nmero de plantas txicas, a su gran dispersin en cuanto a la poca del ao en la que se desarrolla y a su distribucin geogrfica en nuestra comunidad. La semipresencialidad implica que parte de la docencia se imparte en el aula, segn el modelo presencial convencional, mientras que otra parte se basa en un proceso de autoaprendizaje bajo la supervisin del profesor. El objetivo principal de este proyecto es la elaboracin de un atlas sobre plantas txicas para los animales que permita al alumno disponer de un material apropiado para el conocimiento de las especies vegetales de inters en veterinaria para el aprendizaje terico y prctico de la toxicologa. Para la elaboracin de este atlas se seleccionaron las principales especies vegetales txicas para los animales, se identificaron y fotografiaron en las distintas etapas del desarrollo de cada planta a lo largo del ao; se realiz una bsqueda adecuada de la informacin relativa a cada especie vegetal, tanto desde el punto de vista botnico como del de sus principios activos y sus efectos; se realiz una ficha documental de cada especie en la que se incluy la informacin iconogrfica realizada junto a la informacin documental recogida; y por ltimo se elaborar un atlas, a partir de las fichas de cada especie, en la que se recoja la informacin iconogrfica y documental. Este trabajo ha sido financiado en la X Convocatoria de Proyectos de Innovacin y Mejora de la Calidad Docente de la Universidad de Crdoba (08A3031). Palabras clave: Toxicologa, Plantas, Veterinaria, Atlas, Aprendizaje. C.191.-PREDICCIN IN SILICO DE LA GENOTOXIDAD Y CARCINOGENICIDAD. APLICACIN EN LA DOCENCIA Prieto, M; Pescador, M; Morales, AI Unidad de Toxicologa. Unidad de Fisiopatologa Renal y Cardiovascular. Universidad de Salamanca. Una de las prioridades de la industria farmacutica es la identificacin temprana de efectos genotxicos, mutagnicos y carcinognicos en molculas candidatas a nuevos frmacos, evitando el desarrollo de estudios preclnicos y clnicos y ahorrando as tiempo y recursos. Las nuevas tecnologas in silico suponen un gran avance en este sentido, pues permiten predecir la actividad toxicolgica en base a la identificacin en la molcula de alertas estructurales de toxicidad. Con la implantacin del Grado de Farmacia (Universidad de Salamanca), decidimos incluir en el programa de la asignatura de Toxicologa el seminario Prediccin de la Toxicidad de molculas in silico, con el objetivo de trabajar los conceptos antes mencionados. Para el desarrollo de la actividad se adquiri el software Derek for Windows (Lhasa Limited, Leeds, UK). El programa aplica reglas, como las derivadas de la relacin estructura-actividad, y realiza en unos segundos una prediccin razonada de la toxicidad (carcinogenicidad, genotoxicidad, mutagenicidad, hepatotoxicidad, irritacin, toxicidad ocular) potencial de una molcula en humanos, otros mamferos y/o bacterias. El resultado se apoya con citas bibliogrficas, ejemplos y otros comentarios. Se distribuyeron entre los alumnos diversas molculas para su correspondiente prediccin de genotoxicidad, mutagenicidad y carcinogenicidad. Estas molculas contenan grupos qumicos electroflicos, capaces de reaccionar con zonas nucleofilicas del ADN. Algunos de estos grupos qumicos fueron: grupos nitro,
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa grupos azoaromticos, N-metil derivados, cloroaminas, propiolactonas, carbamatos... Al finalizar, cada alumno entreg un informe de la molcula analizada, que posteriormente fue evaluado. Algunas de las competencias adquiridas por los alumnos fueron: 1) conocer los efectos de las sustancias genotxicas, 2) conocer las principales alertas estructurales capaces de producir potencial genotoxicidad, 3) saber aplicar las tcnicas in silico para la investigacin toxicolgica, 4) saber evaluar e interpretar los resultados obtenidos de estas pruebas. Palabras clave: Genotoxicidad, Mutagenicidad, Carcinogenicidad, Prediccin, In silico. RELACIONES INTERNACIONALES Y REDES CIENTFICAS: COMUNICACIONES EN FORMATO POSTER C.192.-RED IBEROAMERICANA DE TOXICOLOGIA Y SEGURIDAD QUMICA Herrero, O; Pillco, A; Fernndez, P; Hazen, MJ; Escalante, P; Cavieres, MF; Font, G; de la Pea, E CSIC.C/Serrano 115, 28006 Madrid (http://ritsq.org) (epena@ccma.csic.es) Se inicia la Red Iberoamericana de Toxicologa y Seguridad Qumica (RITSQ) a partir de 2005, bajo la iniciativa conjunta de la Dra. Barros, de la Universidade de So Paulo (Brasil) miembro de IUTOX, y del Dr. de la Pea, del Consejo Superior de Investigaciones Cientficas, Presidente de AETOX (2001-2007), como actividad del Comit Espaol de Toxicologa IUTOX (CETox) y utilizando su pgina web (http://cetox.org/); en 2006 en Santiago de Chile, en el Congreso de ALATOX celebramos la Reunin Promotora. Los objetivos de la RITSQ son: 1) Coordinar la participacin de los diferentes grupos existentes en universidades y organismos de investigacin; 2) Fortalecer la colaboracin y el intercambio acadmico entre los programas de Doctorado y Maestra de diferentes pases iberoamericanos; 3) Favorecer la realizacin de proyectos de investigacin conjuntos entre docentes e investigadores de Iberoamrica, pasantas estudiantiles y eventos acadmicos; 4) Profundizar en el estudio de mtodos de ensayo de corta y larga duracin utilizados en la evaluacin de la carcinogenicidad, la mutagenicidad y la toxicidad para la reproduccin de sustancias y mezclas; 5) Desarrollar y estandarizar mtodos analticos para la identificacin y determinacin de biomarcadores de exposicin, efecto y susceptibilidad; 6) Aplicar mtodos de evaluacin del riesgo para la salud humana y el medio ambiente; 7) Fomentar el intercambio cientfico de profesionales interesados en Toxicologa; y 8) Fomentar el uso de mtodos alternativos a la experimentacin animal. Se presentan las actividades de la RITSQ, mostrando que la pgina web (http:ritsq.org) tiene 30.257 visitas, desde marzo de 2010 a junio de 2011 son 11.527 visitas; se han registrado 612 toxiclogos; celebrado dos Reuniones de la RITSQ, en CTOXI en 2007 en Montreal, donde asistieron 20 personas y en IUTOX2010 Barcelona, donde asistieron un total de 68 personas. Desde la constitucin de la RITSQ hemos presentado 23 carteles en diferentes congresos y reuniones, celebrados en Argentina, Cuba, Brasil, Colombia, Espaa, Mxico, Portugal y Uruguay. Se destaca la labor que la RITSQ desarrolla en la difusin de eventos, reuniones y congresos de toxicologa y que deseamos ser un catalizador con Iberoamrica. Palabras clave: RITSQ, IUTOX, CETox, ALATOX OTRAS (Comunicacin recibida en el Comit Organizador del Congreso a fecha de 21/06/2011) C.193.-BILIS/SANGRE: RELACIN ENTRE SUS NIVELES DE ALCOHOL ETLICO EN MUESTRAS POSTMORTEM Pladevall, R; Vingut, A; Rey, R; de las Heras, ML; Lpez, ML; Candenas, JI; Garca, E; Hernando, C; Snchez, JA; Rodrguez, B; Valverde, JL Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses (Dep. de Barcelona) Si bien en la investigacin forense del consumo de alcohol etlico, el estudio conjunto de las muestras de sangre y humor vtreo post-mortem es comnmente aceptado y disponemos de numerosos estudios sobre la relacin existente entre los niveles del humor vtreo/sangre, pocos estudios relacionan concentraciones de alcohol etlico entre bilis y sangre. Un trabajo realizado en 1984 con 78 pares de muestras indicaba una relacin bilis/sangre de 0,92 con una SD de 0,22, aunque los autores concluan que el uso de la bilis para la estimacin de la concentracin de alcohol en sangre era ms preciso a niveles superiores a 1 g/L. Otro trabajo presentado en 1990 con 37 pares, obtena una relacin bilis/sangre de 0,99, indicando que en todos los casos se haba establecido el equilibrio y se haba dejado atrs la etapa de absorcin. En esta comunicacin presentamos un estudio con 572 pares de muestras, obteniendo, previa depuracin de los resultados y descartando los valores de concentracin de alcohol etlico en bilis inferiores a 0,5 g/L, una relacin bilis/sangre de 1,08 0,03 para un intervalo de confianza del 95%; con una SD de 0,28. Palabras clave: Alcohol etlico, Sangre, Bilis, Post-mortem.
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XIX Congreso Espaol de Toxicologa NDICE DE AUTORES A Abad, J Achel, GD Achour, S Afonso, A Aghlallou, Y Aguilar, MV Aguirre Tejedo, A Aguirre, I Alarcn, R Albendin, G Alcaraz, M Alcaraz-Saura, M Aldeguer, MP Almarza Lorente, E Almeida-Gonzlez, M Alonso, J lvarez, I lvarez, RM lvarez-Len, EE lvarez-Otero, R lvarez-Rodrguez, C lvarez-Velilla, R Amaya, E Anadn, A Anadn, MJ Andreu, M Antelo Domnguez, A Antolini, L Anza, I Arbillaga, L Ares, I Arlandis, A Armero, D Arrebola, JP Arroyo, A Arufe, MI Atanassova, M Aucejo, S Ayala, N Azqueta, A B B, CT Balaguer, P Balaa-Fouce, R Baa, A Barahona, E Barbal, M Barciela-Alonso, MC Barja-Fernndez, S Bar, R Barroso, M Bastida, S Baz, JA Ben-Charki, N Bendicho, C Bened, J Bermejo Barrera, P Bermejo, AM Bermdez, JM Bernndez, G Berrada, H Bettini, M Blanca, J. 49 81, 82, 83, 84 76 47 76 47 40, 69 43 16, 36, 66 44 81, 82, 83, 84 81, 83, 84 64, 68 38 33 33, 48 53, 54, 56, 70 20 33 84, 85 74 68, 86 56 13, 28, 35, 48, 51, 60, 88 41, 55 41 54 29 80 65 28, 35, 48, 51, 88 54, 72 81, 82, 83, 84 82 31, 37, 38, 56 44, 52 66, 67 36, 87 64 65, 66 57 82 23, 68, 86 75 60 31, 37, 38, 56 38, 45 84 34 31, 40, 53 70, 85 56 49 46 85 18, 38, 41, 45, 52, 54, 59 41, 52, 53, 54, 56, 70, 75 36, 87 81 28, 44 74 14 Blanco Lpez, L Blanco, A Blanco, L Blanquer, A Blasco, C Blesa, J Borrs, M Borrs-Cuesta, F Bouftini, S Bouzas, C Bouzas-Cruz, N Bravo, A Bravo, V Brull, N Bueno, C Bueno, H Bueno, J Burillo, L Bustillo Nez, C C Cabado, AG Cabaleiro, N Caballero, JM Cabarcos, P Cabezas, D Cabr, M Calaco, E Calheiros, J Calleja, A Calvo, A Calvo, JF Calvo-lvarez, E Camacho, T Cmara, FJ Camen, AM Camino, I Campodarve Botet, I Camps, L Candenas, JI Caas, X Carballo, J Carballo, M Carbonell, G Cardoso, N Carratala, F Carro Roibal, A Carro, MA Casado, P Casalderrey Rivas, M Casas, N Cascallana, JL Castaeda, P Castao, H Castellano, V Castellar, A Castro Lpez, RM Cerda, P Chapela, MJ Chiarotti, M Chiva, F Clemente Rodrguez, C Cocho, JA Colomina, MT
40, 69 50, 62, 64, 83 67 42 64 28 86 65, 66 76 53 53 33 74 86 31 30 38 30 73 66, 67 46 28 53, 54, 56, 70, 75 59 67 32, 79 31 61 52, 54,72 77, 79 23, 68, 86 25 65 26, 32, 34, 37, 50, 51, 57, 59, 61, 62, 63, 83, 85, 89, 90 64 40, 69 86 92 86 40 42 61 71 30 73 56 64 73 71 33 64 72 28, 35, 51, 60, 88 54, 72 73 74 66, 67 75 83 40, 69 41, 54 67
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Concheiro Guisn, M Conde-Sieira, M Conesa, J Contreras, MT Cornet, ME Corte Real, F Costa de Oliveira, V Costa, S Costas, M Costela, C Cravedi, JP Crespo, S Cruz Landeira, A D da Fonseca, BM Davisson, VJ de Castro Ros, A de la Calle, I de la Casa-Resino, I de la Pea, E de la Torre, A de Lapuente, J de las Heras, ML de Pietri, D de Roodt, A del Bao Lpez, F Del Caizo, C del Ro, C Demey, H Deschamps, F Dias, M Diaz de Freijo, S Daz Doce, A Daz Reinoso, B Daz, P Daz, S Diego, Y Domingo, JL Domnguez, H Domnguez-Boada, L Dotor, J E Echarte Pazos, JL Echenique, H Eguaras, M Eira, C Escalante, P Escuredo, K Espern, F Espn, S Esteve Palau, E Estevez, J F Fajardo, P Fallola, C Fandio, E Farias, F Fernndez Colom, J Fernndez Prada, CH Fernndez, AI Fernndez, C Fernndez, MF
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30, 39, 74 84, 85 34 29, 38 65, 66 51 71 40 46 63 12 56 30, 39, 53, 73, 74 31, 40 34 30, 39, 73 46 32, 43 63, 92 42 86 92 29 71 40, 69 21 61 62 39 53 73 39 81 60 80 55 67 81 33 65, 66 40, 69 71 48, 50 57 92 35 42 62 40, 69 21 66, 67 88 71 43 73 23 63, 91 61 82
Fernndez, P Fernndez, R Fernndez-Franzn, M Fernndez-Prez, B Fernndez-Rodrguez, M Ferreira, M Ferrer, E Ferrer, S Fidalgo, LE Flores, L Font, G Fraga, JM Franco, J Franco, V Fras, JE G Gallardo, A Gallardo, E Gamboa-Aldeco, R Gamboa-Rodrguez, T Garca Otero, N Garca, A Garca, B Garca, E Garca, MA Garca, S Garca-Cruz, E Garca-Fernndez, AJ Garca-Mayor, RV Garca-Rodrguez, G Garca-Sartal, C Gargallo, A Garrido-Lestache, E Gascn, JJ Gely, C Geraldes, V Gesto, M Gil Hernndez, F Gil, AG Gil, F Gil, S Gil-Hernndez, M Girons, G Gmez, A Gmez, LJ Gmez, M Gmez-Cataln, J Gmez-Cruz, R Gmez-Miln, E Gmez-Ramrez, P Gonzlez Padrn, A Gonzlez, AG Gonzlez, I Gonzlez, J Gonzlez, M Gonzlez-Linares, J Gonzlez-Muoz, MJ Goyena, E Gravato, C Grilo, A Guedes, A Guerrero, N Guilhermino, L Guisndez, N
54, 56, 92 78 89 81 56 66, 67 29, 45 54, 64, 72 43 43 28, 29, 34, 44, 45, 56, 69, 87, 89, 92 75 51 80, 81 32 74 31, 40, 53, 71 43 43 59 64 52, 54, 72 92 33, 48, 78 29, 71 83 27, 41, 60, 62, 64, 68, 76, 77, 79 22 46 45 43 30, 52, 54, 72 34 31, 37, 56 31, 40 20, 85 25 65, 66 16, 36, 45, 56, 66 46 32, 79 48, 50 16 88 67 69, 91 43 72 41, 77, 79 54 59 65 86 42 86 26, 47, 58, 70, 85 77 76 61 71 68 76 40
Gutirrez, AJ Gutirrez, D Gutirrez-Praena, D Guzmn-Guilln, R H Hardisson, A Hazen, MJ Henrquez-Hernndez, LA Herbello Hermelo, P Hernndez, AF Hernndez-Arnguez, M Hernndez-Bellido, L Hernndez-Garca, A Hernndez-Moreno, D Hernndez-Snchez, C Hernando, C Herrero, O Hui, L I Ibez, Y Iglesias-Martn, A Izquierdo, R Izu, M J Jerez, S Jimnez, E Jimnez, P Jord, M Jos, A Juan, C Juan-Garca, A Jurado, C K Kacem, H L Lacasaa, M Lafuente, A Lago, J Lara, PC Lavilla, I Lendoiro Belo, E Len Bertrn, N Linares-Roig, C Llobet, JM Lobo-Bedmar, MC Lombardi, G Lpez, ML Lpez Casanova, MJ Lpez de Abajo, B Lpez de Cerain, A Lpez de Medrano-Villar, MJ Lpez Maha, P Lpez-Beceiro, A Lpez-Guarnido, O Lpez-Hernndez, FJ Lpez-Novoa, JM Lpez-Patio, MA Lpez-Rivadulla, M Lora, AJ Lora-Tamayo D'Ocon, C
28, 47, 49, 59, 71 88 34, 36, 50, 51, 63, 87, 90 59, 62, 85, 90 13, 28, 47, 49, 59, 71, 80 63, 92 33 52 16, 36, 45, 66 50 72 76 32, 42, 43, 46, 50, 88 49 92 92 89 42 79 29, 38 48, 50 34, 77 64 77, 79 36, 87 34, 36, 37, 50, 51, 63, 83, 87, 89, 90 44 34, 75 52 57 36, 66 80, 81 66, 67 33 46 30, 39, 73 40, 69 78 69, 91 58 89 92 40, 69 53 65, 66 52, 54, 72 52 43 36, 72 36, 37, 70, 75, 84, 87 36, 37, 70, 75, 84, 87 84, 85 30, 39, 53, 74 63, 64, 78, 91 38
Lorente, LM Lorenzo, RA Losada, A Lozano, D Lozano, G Luis, G Luna, M Luque, M Luzardo, OP M Magalhes, AR Mairena, I Maes, J Mnuel-Vez, MP Margalho, C Mara-Dolores, E Mara-Mojica, P Marn, MD Marques, R Martin, M Martnez Gonzlez, MA Martnez Izquierdo, MT Martnez Matilla, M Martnez Para, MC Martnez, JE Martnez, M Martnez, MA Martnez, MS Martnez-Beneyeto, Y Martnez-Guitarte, JL Martnez-Larraaga, MR Martnez-Lpez, E Martnez-Paz, P Martin-Gl, R Martin-Olmedo, P Marzo Roche, D Mateo,R Mateos, C Matey, JM Meca, G Meja, C Melgar, MJ Mndez, A Mndez, JL Mndez, P Merino, Y Meseguer, I Mieres, JJ Mguez Framil, M Mguez, JM Mguez, MP Mnguez Mas, S Miquel, J Mokhtari, R Molas, E Molina, AM Molina, I Molina-Molina, JM Molt, JC Montero, E Mora, A Morales, AI Morales, M Morcillo, G
55 56 33 16 47 28 43 61 33 31, 40 90 29, 45, 87 44 51 60 41, 62, 77, 79 60 71 29 15, 38 40, 69 26 47 77, 79 28, 35, 51, 88 28, 35, 48, 51, 88 64 82 67, 87 28, 35, 48, 51, 60, 88 41, 60, 62, 64, 68, 76, 77, 79 67, 87 84 82 40, 69 24, 80 47 30 87 55 33, 48, 78 35 78 69, 75 54, 72 47 74 41 20, 84, 85 32, 43, 50, 79 40, 69 57 76 40, 69 63, 64, 78, 91 45 82 28 64 31, 37, 38, 56 36, 37, 61, 70, 75, 84, 87, 91 67, 87 67, 87
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Moreda Pieiro, A Moreda Pieiro, J Moreno, I Moreno, IED Motas, M Moure, A. Moyano, MR Muniategui Lorenzo, S N Navas, I Ndiaye, PI Neifar, L Nolla Salas, J Nvoa, MC Nez, MA Nez-Lozano, R O Olasagasti, M Olea, N Olivares, A Olivero-David, R Olmedo, P Olmos, E. Oropesa, AL Ortega, A Ortega, F Ortiz, J Oscz, M Ostos, R Otero Fernndez, M P Padrn-Lpez, M Palls Villaronga, O Paraj, JC Pardo, MA Paris, E Parrn, T Pauca, A Pedragosa Vall, A Pena, FJ Pea-Fernndez, A Pealver, J Perales, E Pereiro, N Pereguez, JE Prez de Ciriza, JA Prez Lpez, MR Prez, B Prez, E Prez, JA Prez, M Prez, MA Prez-Fes, C Prez-Lpez, M Prez-Pertejo, Y Pescador, M Pichardo, S Pietracci, E Pillco, A Piqu, E Pla, A Pladevall, R
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41, 52, 54, 59 52 32, 57, 61, 89, 90 31, 40 34, 77 81 13, 50, 62, 63, 64, 78, 80, 81, 83, 91 52 52, 60, 64, 68 57 57 40 78 68 84 35 82 81, 82 85 45 81 88 55 64 77 50 61 54 43 40, 69 81 35 74 16, 36, 66 29 40, 69 46 58 60 31, 37, 56 80, 81 34 48, 50 73 28, 55 48, 50 71 74, 88 31 38 32, 42, 43, 46, 50, 78, 79 68, 86 61, 84, 91 34, 36, 37, 50, 51, 63, 83, 87, 89, 90 53 63, 92 69, 91 16, 36, 45, 66 92
Pons, B Porredon, C Pozas, R Prada Rodrguez, D Prada, CF Prieto, AI Prieto, M Pro, J Prosperini, A Puente Palacios, I Puerto, M Puga, A Puga, M Pujol, A Pula, HJ Q Queiroz, JA Quesada, S Quintas Fernndez, C Quintela Jorge, O Quintela, O Quiros, Y R Rainieri, S Ramn, L Ramos, A Ramos, C Ramos, D Ramos, E Razafindranaly, J Real, M Regodn, S Reguera, RM Repetto, G Requena, M Revert, C Rey, R Rey Prez, A Ribes, D Rib, J Riera, R Ros, JC Ros, V Ritieni, A Riva, MC Robinson, JP Roca, I Rdenas, S Rodilla, V Rodrigo, L Rodrguez, B Rodrguez, M Rodrguez, P Rodrguez-Arribas, M Romn, B Romn, M Romero, A Romero, D Rubert, J Rubio, C Rubio-Gmez, JL Rueda, A Ruiz, J
55 86 49 52 68, 86 32, 57, 59, 62, 85, 89, 90 37, 61, 70, 75, 87, 91 60, 61 89 40, 69 37, 83, 89, 90 12 54 56 88 31,40, 53 84 73 30 41, 55 70 35 79 32, 79 77 86 28, 35, 51, 88 39 82 79 68, 86 21, 26 16, 36, 86 49 92 40, 69 67 35, 68 49 74 32, 57, 61, 85, 90 44 35, 68 34 48 70 42, 49, 78 72 92 36, 66 33, 43 79 69, 75 74 28, 35, 51, 88 76 45 28, 47, 49, 59, 71 72 78 65
Ruiz, M Ruiz, MJ Ruiz-Veguilla, M S Senz, JM Siz, I Salas, A Salazar, JG Saldivar-Osorio, L Snchez de Len, MS Snchez Gonzlez, J Snchez Montero, JM Snchez, JA Snchez, M Snchez, S Snchez-Gonzlez, PD Snchez-Muniz, FJ Sanz-Galln, P Sastre, AM Sastre-Baixauli, L Scholz, K Segura, L Senra, S Serra-Majem, L Serrano, AB Serrano-Caballero, JM Serrano-Rodrguez, JM Serret, J Sierra, C Silva, L Skaf Peters, E Soengas, JL Soler, C Soler, F Soria Snchez, ML Soria, ME Soulaymani, A Soulaymani, R Superva Caparrs, A T Tabernero, MJ Taboada Barja, C Taboada, V Taggart, MA Teixid, E Tena, T Tobalina, C Torres del Pliego, E Torres, AI Torres, J Torriani, B Troyano, J U Uroz, V. V Valcarce, F Valern, PF Valls Llobet, C Valverde, JL Vallverd, N Vzquez Lima, JL
49, 62 27, 34, 69, 75, 87, 89 72 82 48, 50 64, 68 67 43 41 59 19 92 37, 38, 56 30, 80 36, 61, 87 70, 85 73 49, 62 42 74 52 46 33 29 91 91 86 43 74 40, 69 20, 85 45 32, 42, 43, 46, 50, 79, 88 17 32, 59 76 76 40, 69 41, 53, 54, 56, 70, 75 73 56 24 69, 91 88 62 40, 69 48 57 80 71 40, 41, 55 88 33 22 92 77 74
Vzquez, B Vicens, P Vicente-Vicente, L Vidal, MD Vieira, DN Vieites, JM Vila, I Vilanova, E Vilapalana Marz, L Villarroya, A Vingut, A Y Yanicelli, M Z Zalko, D Zumbado, M
42 67 36, 37, 61, 75 80 51, 53 66, 67 55 21 40, 69 42 14, 92 29 12 33
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Colaboradores
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Revista de
Toxicologa
RGANO OFICIAL DE LA ASOCIACIN ESPAOLA DE TOXICOLOGA
en el texto. Citas como observaciones no publicadas o pendientes de publicacin deberan evitarse. Las referencias irn numeradas por orden de aparicin en el texto y citadas numricamente y entre corchetes. Por ejemplo: [1], [2-13]. Al final del texto la bibliografa ir citada de la siguiente manera: a) artculos de revistas: apellidos e iniciales de todos los autores, ao, ttulo completo, revista en su abreviatura normalizada, nmero de volumen y primera y ltima pgina y utilizando los signos de puntuacin como en el ejemplo. 7. de la Pea E, Herrera A, Barrueco C, Canga C (1988) Sistemas de activacin metablica. Rev Toxicol 6: 33-38. b) libros: apellidos e iniciales de los autores, ao de publicacin, ttulo completo del libro, editorial, lugar de publicacin y n de pginas o, si se trata de un captulo, apellidos e iniciales de los autores, ao de publicacin, ttulo del captulo, en: editores del libro, ttulo completo del libro, editorial, lugar de publicacin y primera y ltima pgina: 21. de la Pea E, Burguete I, Guadao A (1999) Evaluacin Mutagnica y Genotxica. Direccin General de Enseanza Superior e Investigacin Cientfica, Sociedad Espaola de Mutagnesis Ambiental, MURCIA98. Madrid. pp. 398. 14. de la Pea E, Guadao A, Repetto G (1999) Mtodos alternativos y complementarios en experimentacin animal. En: Prez-Garca CC, Dez-Prieto L, Garca Partida P (cols) Introduccin a la Experimentacin y Proteccin Animal. Len. Universidad de Len. 215-223. FIGURAS: Todas las figuras debern ir numeradas consecutivamente y enviadas en hoja aparte. Las figuras publicadas previamente deben ser enviadas con el permiso escrito del titular de los derechos. Las explicaciones de la figuras no deben repetirse en el texto y tienen que ser breves y claras. Notas como ver texto deben evitarse. Formato: las ilustraciones se enviarn en el formato definitivo o indicando claramente el porcentaje de reduccin que se desea. En cualquier caso hay que tener en cuenta las proporciones de la columna o pgina impresa. Las inscripciones dentro de las figuras sern claras y aproximadamente de 2 a 3 mm de altura. Para la publicacin de fotografas en color, el autor tendr que sufragar los gastos, segn presupuesto de la editorial. Las TABLAS debern presentarse en hojas aparte, una tabla por hoja, numeradas correlativamente con nmeros arbicos y con una leyenda. En resumen la ESTRUCTURA DE UN ARTCULO ser la siguiente: Titulo, firma, resumen, palabras clave, title, abstract, key words, texto, agradecimientos, bibliografia. La redaccin de la revista se reserva el derecho de introducir modificaciones en los artculos recibidos, siempre que no alteren el sentido de los mismos, para adaptarlos a las normas de publicacin. Los trabajos se enviarn a la Editora de la Revista de Toxicologa como archivo pdf o word en un correo electrnico: Dra. M del Prado Mguez Santiyn Universidad de Extremadura. Avda. de la Universidad, s/n. 10071 CCERES (ESPAA) E-mail: revtoxicol@unex.es Fax: (+34) 927 257 110
INSTRUCCIONES A LOS AUTORES

Los MANUSCRITOS se enviarn por e-mail (revtoxicol@unex.es), escritos claramente a doble espacio, con mrgenes amplios, en tamao DIN A4. Tanto la forma como el contenido debern ser cuidadosamente revisados para evitar correcciones sobre las pruebas. Se indicar sobre el margen izquierdo la localizacin de tablas y figuras. El TEXTO debe ser claro y conciso, cuidando la ortografa y la utilizacin de abreviaturas. Todas las pginas irn numeradas correlativamente, comenzando por la primera pgina o titular y siguiendo con el texto, bibliografia, tablas y pies de figuras. Los ARTICULOS originales no deberan superar las seis pginas impresas o diez en las revisiones incluyendo tablas y figuras (una pgina impresa equivale a unas tres pginas mecanografiadas). El precio de cada pgina adicional es de 60 . Las COMUNICACIONES cortas y los CASOS clnicos no deben superar las tres pginas impresas incluyendo una o dos tablas o figuras y hasta 10 citas bibliogrficas. El editor someter las copias a dos revisores externos a la revista cuyas observaciones se trasladarn al autor para la reescritura del original.
PRESENTACIN DEL MANUSCRITO

En la PRIMERA PGINA deber constar: ttulo del artculo y hasta cinco palabras clave, ambos en ingls y castellano. Nombre completo del autor/es, institucin donde se ha realizado el trabajo y direccin donde hay que enviar las pruebas. Para facilitar la comunicacin se agradecera la inclusin de un nmero de telfono, fax o e-mail. RESUMEN: Ser lo ms informativo posible, y comprender una pequea Introduccin, un sucinto Material y Mtodos, los Resultados abreviados y las Conclusiones del trabajo. Su lectura dar una idea clara del mismo, se acompaar de una versin en ingls (Abstract) y palabras clave (Key words). No debe sobrepasar las 300 palabras mecanografiadas y no debe incluir abreviaturas ni referencias. La INTRODUCCIN describir los orgenes y bases del estudio. Las revisiones y las comunicaciones cortas no necesitan introduccin. En la seccin de MATERIAL Y MTODOS se evitarn descripciones de todo aquello que pueda encontrarse en la bibliografa citada. Deben describirse de forma concisa los individuos y series estudiados, criterios de seleccin, procedimientos, duracin y nmero de repeticiones de los ensayos, equipo y materiales utilizados y cuantos datos puedan precisarse para la repeticin del estudio. Los mtodos estadsticos debern tambin describirse en esta seccin. Para sustancias qumicas o frmacos se citar el nombre genrico conforme a la IUPAC. S se utiliza una marca registrada, se har constar el nombre genrico y el nombre del fabricante. La seccin de RESULTADOS presentar sin interpretarlas, las observaciones realizadas, as como el anlisis estadstico. Los datos numricos se pueden presentar en tablas pero sin repetirlos entonces en el texto. En la DISCUSIN se considerarn los resultados presentados comparndolos con otros publicados, las razones que apoyan la validez de los mismos, su aplicacin prctica y las directrices para nuevas investigaciones. BIBLIOGRAFA: La exactitud de las referencias bibliogrficas es responsabilidad del autor. Slo deberan incluirse referencias relacionadas estrechamente con el trabajo y que el autor pueda verificar personalmente. Todas las referencias listadas deben ir citadas
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Revista de Toxicologa (Editada desde 1983)

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Revtox 28 1 2011

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ASOCIACIN ESPAOLA DE TOXICOLOGA Resumen actual de caractersticas y normativas

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D.L.: CO-723-83. S.V.: 91051 R. ISSN: 0212-7113

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XIX Congreso Espaol de Toxicologa

Anunciacin Lafuente Gimnez Presidenta del XIX Congreso Espaol de Toxicologa

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