DOSIFICACIN DEL COMPLEMENTO.

IMPORTANCIA EN PATOLOGA AUTOINMUNE

Por: Sofa Jaramillo Q.

OBJETIVOS
GENERALES: ESPECFICOS:

Identificar la relacin de las concentraciones plasmticas de los componentes del sistema del complemento con patologas de etiologa autoinmune.

Conocer los procesos de evaluacin srica del complemento. Vincular su papel en la gnesis de diversas patologas.

CONOCIMIENTOS PREVIOS

Sistema del Complemento: concepto, constituyentes, funciones, importancia. Concepto y variedades de inmunocomplejos. Concepto de Patologa Autoinmune.

COMPONENTES

Pp. Va Clsica y del MAC

Pp. Va Alternativa (Factores)

Pp. Reguladoras

Receptores del Complemento

UTILIDAD MDICA
Orientacin diagnstica en procesos mediados por inmunocomplejos Valoracin de la actividad de enfermedades por inmunocomplejos
Inmunocomplejos=Consumo del complemento

Interpretacin en el contexto de la situacin clnica del pcte. NDICE CATABLICO: 2%

Dficit en los componentes iniciales de la Va Clsica (C1, C4, C2) en asociacin con Enfermedades Autoinmunes

CONSIDERACIONES SOBRE LOS RESULTADOS

ndice Catablico: 2% Algunas de las protenas que conforman el sistema del complemento fungen como Reactantes de Fase Aguda. Funcin diversa en los diferentes compartimentos corporales. del nivel del complemento avala la sospecha de su participacin en dao tisular, mas no lo prueba. Nivel normal del complemento no excluye su participacin en injuria tisular. de los componentes de una va hacen presumir que sta se encuentra activada y media la agresin (no se requiere conocer los niveles de todos los componentes).

MEDICIN DE LOS FACTORES DEL COMPLEMENTO A. Inmunoqumico (Bsqueda como Ag) RID Nefelometra Caractersticas: Altamente especficos Vas Va Clsica Va Alternativa Valoracin Funcional Procedimientos: TEST CH50 (Actividad Hemoltica Total) Actividad Funcional Aislada Productos de Degradacin

ELISA
(10-20ng/ml)

Ac. Monoclonales

Fciles de realizar (suero o plasma)

Menor costo y tiempo No determinan funcionalidad

No detectan niveles bajos (desde 10g/ml)

NIVELES DE COMPLEMENTO MEDIANTE ENSAYOS ANTIGNICOS: VA CLSICA Y ALTERNATIVA

Materiales:
Muestra de suero o plasma a <(-20C) Suero proteico estndar (estabiliza) Equipos de RID

Procesamiento:
RID:
Tca. Mancini (exceso de Ac., ms exacto) Tca. Fahey (no exceso de Ac.)

VALORACIN FUNCIONAL: VA CLSICA (CH50) Y ACTIVIDAD AISLADA

Materiales:
Eritrocitos de oveja (sensibles, Ag. Forssman para Ac. De conejo) Sol. De Alserver Buffer (barbital) Ac. Anti Forssman Extraccin asptica, solucin de Alserver. Conservacin hasta 6 semanas a 4C. Centrifugacin a 4C, se descarta sobrenadante y capa leucocitaria. G. rojos en buffer, se lavan y sensibilizan con Ac. Disoluciones de suero del pcte. Unir muestra de EA Incubar a 37C durante 1h. Agitando c/15. Colocar en hielo + Barbital. Centrifugar 5 a 800rpm, sobrenadante medir en espectrofotmetro a 540nm. Elaborar curva.

Procesamiento:

VALORACIN FUNCIONAL: VA ALTERNATIVA (AH50)

Materiales:
Suero humano (dilucin 1:5) Eritrocitos de conejo (EDTA+iones de Mg+2)

Ttulo (CH50/AH50)= dilucin final de suero humano que lisa el 50% de los eritrocitos de oveja/conejo.

INTERPRETACIN

CH50:

Determinar ausencia de cualquiera de las partes del complemento, excepto C9. AH50 ineficiente: o ausencia de la properdina.

PRUEBA DE FIJACIN DEL COMPLEMENTO

Capacidad del complemento de interaccionar con los complejos Ag-Ac.

Materiales:
Suero del paciente Antgeno (soluble o particulado) EA (eritrocitos de oveja sensibilizados)

Procesamiento:
Incubacin de suero con 3-5 unidades CH50
Positiva: Fijacin (complemento es consumido)

Agregar EA Incubacin a 37C por 1h. O toda la noche en fro (ttulos mayores)
Positiva: No lisis Negativa: Lisis

CONDICIONES TCNICAS
pH Temperatura Tiempo Ionicidad

Concentracin de iones Ca+2 y Mg+2

Fragilidad osmtica de los eritrocitos utilizados

VALORES REFERENCIALES
VA PROTENA g/ml VA CLSICA

C1q C1r C1s C4 C2 Factor B Factor D Properdn

MBL C4 C2 C3 C5 C6 C7 C8 C9

80 50 50 600 20 250 5 25
1 600 20 1300 80 75 55 55 59

VA ALTERNATIVA

VA DE LAS LECTINAS

VA COMN

VALORES REFERENCIALES
Nivel total del complemento en sangre: 41 a 90 unidades hemolticas (CH50). Nivel de C1: 16 a 33 mg/dL. Niveles de C3:
hombres: 88 a 252 mg/dL. mujeres: 88 a 206 mg/dL.

Niveles de C4:
hombres: 12 a 72 mg/dL. mujeres: 13 a 75 mg/dL.

ACTIVACIN (CONSUMO) PATOLGICO DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

Ac. Anormal

Complejo Inmune

Material Extrao

Neoantgeno del Sistema del Complemento (MAC)

DISMINUCIN DEL COMPLEMENTO

PRIMARIA O CONGNITA LES Angioedema hereditario Fiebre mediterrnea familiar Vasculitis por urticaria GMN Inmunodeficiencia combinada grave Hipogammaglobulinemia ligada al sexo Infecciones recurrentes SECUNDARIA O ADQUIRIDA

Enfermedades asociadas a Artritis Enfermedades asociadas a vasculitis Enfermedades asociadas a nefritis

DISMINUCIN DEL COMPLEMENTO: PUNTUALIZACIONES

C1q: Aclaramiento inadecuado de clulas apoptsicas C4 o CR1/CR2: Fallo en la seleccin negativa de LB C3 y C4: LES (monitorizacin)

PATOLOGAS CON VINCULACIN DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

Primaria o Congnita LES Angioedema hereditario Fiebre mediterrnea familiar Vasculitis por urticaria GMN Inmunodeficiencia combinada grave Hipogammaglobulinemia ligada al sexo Infecciones recurrentes Secundaria o Adquirida

Enfermedades asociadas a artritis Enfermedades asociadas a vasculitis Enfermedades asociadas a nefritis

AVERIGUAR:

Qu es el LES? Qu otros exmenes de laboratorio ayudan en su diagnstico?

BIBLIOGRAFA
Balcells, A.; Soriano, M. La Clnica y el Laboratorio. 9na. Edicin. Editorial Marn. Barcelona Espaa. 1973. Henry, B.; et all. Laboratorio en el Diagnstico Clnico. Editorial Marbn Libros. Madrid Espaa. 2010. Kindt, T.; Goldsby, R.; Osborne, B. Inmunologa de Kuby. VI Edicin. Editorial Mc Graw-Hill. Mxico D.F.-Mxico. 2007. Prieto, J. Yuste, J. La Clnica y El Laboratorio Balcells. 21era. Edicin. Editorial Elsevier Masson. Barcelona Espaa. 2010. Regueiro J., Lpez C., Gonzlez S., Martnez E. Inmunologa. IV Edicin Revisada. Ed. Mdica Panamericana. Madrid - Espaa. 2012. Rojas, W., Anaya J., Aristizbal B., Cano L., Gmez L., Lopera D. Inmunologa de Rojas. XV Edicin. Corporacin para las Investigaciones Biolgicas. Medelln Colombia. 2010.