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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTN DE AREQUIPA FACULTAD DE INGENIERA DE PROCESOS ESCUELA DE INGENIERA QUMICA

Extraccin, Caracterizacin fisicoqumica del aceite esencial del fruto del molle y su aplicacin como crema repelente de mosquitos
Tesis Presentada por los bachilleres:

Ramos Pealoza Heymi Tatiana Reinoso Talavera Oswaldo Alfredo

Para optar el ttulo profesional de. INGENIEROS QUMICOS

AREQUIPA PER 2013

PRESENTACIN

Sr. Decano de la Facultad de Ingeniera de Procesos. Sr. Director de la Escuela Profesional de Ingeniera Qumica. Srs. Miembros del Jurado. Cumpliendo con el Reglamento de Grados y Ttulos de la Facultad de Ingeniera de Procesos de la Escuela Profesional de Ingeniera Qumica - UNSA ponemos en vuestra consideracin y en particular a de los miembros del jurado el trabajo de investigacin titulado: Extraccin, Caracterizacin fisicoqumica del aceite esencial del fruto del molle y su aplicacin como crema repente de mosquitos el que de contar con su venia, esperamos nos permita obtener el ttulo profesional de Ingenieros Qumicos y pueda ser usado para el desarrollo acadmico de nuestra universidad en el rea de recursos naturales, cumpliendo con los objetivos propuestos. Atentamente,

. Ramos Pealoza Heymi Tatiana.

Reinoso Talavera Oswaldo Alfredo.

A Dios por ser mi gua. A mi familia por ser mi fuerza y apoyo en cada paso que doy, a ustedes les dedico el esfuerzo y dedicacin puestos en todos mis proyectos. A todos mis amigos con los que compart experiencias y conocimientos a lo largo de ste camino. A la Universidad Nacional de San Agustn por brindarme las enseanzas adquiridas a lo largo de estos aos.

Heymi Tatiana Ramos Pealoza

A Dios por ser mi protector y gua en toda mi vida. A mi Madre Lourdes que me dio la vida y que sin su apoyo no podra haber terminado mi carrera. A mis hermanos Suhelem y Luis que los amo mucho y me apoyaron incondicionalmente siempre. A mi padre Alfredo por sus consejos. A todos mis amigos que conoc en el camino de la Universidad y que llegaron algunos a ser como mis hermanos. A mi alma mater la Universidad Nacional de San Agustn a la que me debo.

Oswaldo Alfredo Reinoso Talavera

INTRODUCCION

La produccin mundial de los aceites esenciales es de miles de toneladas anuales, es decir estamos ante un mercado de indudable importancia econmica y tamao considerable, incluso en zonas pobres y deprimidas se intenta introducir el cultivo de plantas aromticas y la obtencin de aceites esenciales como forma de aumentar las perspectivas de la poblacin y la riqueza del pas. Pases como el Per donde sus bondades climatolgicas y caractersticas agrcolas permiten el desarrollo de recursos botnicos aromticos es necesario continuar con los estudios de obtencin y aplicacin de los aceites esenciales.

Una de las aplicaciones que tiene el aceite esencial de molle es de repelente de insectos, por lo cual buscamos maximizar la extraccin de aceite de los frutos para poder aplicarlo en la elaboracin de una crema repelente de mosquitos ya que en lugares de esparcimiento al aire libre el ser humano se encuentra afectado por la presencia de stos que son una molestia para el normal desarrollo de sus actividades debido a la incomodidad que generan sus picaduras y en algunos casos, para ciertas personas, pueden ocasionar problemas ms severos como reacciones alrgicas, edemas y hasta urticarias.

En el mercado existen, en su mayora, repelentes de tipo sintticos que tienen como principio activo el DEET (Dietiltoluamida) y muy pocos repelentes naturales. La creciente toma de conciencia acerca del deterioro ambiental y los problemas para la salud que stos ocasionan, han contribuido a originar un vuelco hacia lo natural. Es por ello que se busca obtener una crema repelente en base al aceite esencial del molle que tenga un porcentaje de proteccin similar o mejor a los del mercado.

RESUMEN

En la primera etapa que fue la obtencin de aceite esencial de los frutos del rbol de molle, maximizando el rendimiento de extraccin, se haca necesario conocer y controlar el rol de las variables involucradas en la extraccin, de esta manera la realizacin del presente trabajo permiti determinar que a una humedad de 15%, a un tamao de partcula de 3 mm y a un tiempo de extraccin de 90 minutos se obtiene los mayores rendimientos de extraccin (6.92 %). El modelo matemtico que se encontr para la extraccin fue lineal y se denota a continuacin:

Donde: Tp: Tamao de partcula (mm) te: tiempo de extraccin (min) De este modelo se desprende que las variables significativas son el tamao de partcula y tiempo de extraccin y no toma en cuenta a la humedad para los niveles planteados.

En la segunda etapa de la investigacin se determin de las propiedades fisicoqumicas fundamentales donde se obtuvieron los siguientes resultados:

PROPIEDAD
ASPECTO COLOR OLOR SABOR DENSIDAD RELATIVA 20/20C INDICE DE REFRACCIN 20C SOLUBILIDAD EN ETANOL ml aceite/ml alc RESIDUO DE EVAPORACION DESVIACIN POLARIMETRICA 20C (Solucin de 0.1 % en etanol absoluto) INDICE DE ACIDEZ (porcentaje como cido oleico) INDICE DE PEROXIDO (meq de O2 / Kg de muestra) INDICE DE ESTER

RANGO

Liquido lmpido y brillante De incoloro a amarillo plido Muy acentuado al olor de molle Astringente y picante 0,8404 1,4780 Hasta 80 % 8.02 +0.3 1,49 No se identific 19.13

Fuente: Elaboracin Propia.

En esta etapa tambin se realiz una cromatografa gaseosa con deteccin de masas donde el aceite esencial analizado arrojo los siguientes componentes:

ANALISIS

RESULTADO Alfa pineno (3.69%) Beta mirceno (32.16%) Alfa felandreno (45.34) Benceno, 1-metil-3-(1-metiletil) (1.81%) Beta felandreno (11.54%) Cariofileno (2.59%) Naftaleno, 1,2,3,5,6,8a-hxahidro-4,7 (1.84%) Ciclohexanometanol, 4-etenil-alfa (1.02 %)

DETERMINACION CUANTITATIVA DE METABOLITOS SECUANDARIOS (%) Cromatografa gaseosa con deteccin de masas, mtodo de cuantificacin, por normalizacin interna (rea)

Fuente: Elaboracin Propia

Donde el componente activo de la crema repelente viene a ser el Alfa pineno y est en una proporcin del 3.69 %.

En la tercera etapa de la investigacin se determin la crema con mejor extensibilidad y viscosidad para poder usarla en la cuarta parte de la investigacin, de esta manera la realizacin del presente trabajo permiti determinar que con 80 % de fase acuosa, 70 C de temperatura de mezcla y 15 min de agitacin se obtiene la mejor extensibilidad y viscosidad de la crema. Esta etapa dio lugar a dos modelos matemticos lineales:

Donde: : Porcentaje de la fase acuosa : Temperatura de mezcla : Tiempo de agitacin

Este trabajo permiti conocer que las variables significativas en la elaboracin de la crema son porcentaje de la fase acuosa y la temperatura de mezcla para la extensibilidad y el porcentaje de la fase acuosa y el tiempo de agitacin para la viscosidad todo esto para los niveles planteados.

En la cuarta etapa de la investigacin se compar el porcentaje de proteccin de la crema repelente con tres repelentes del mercado, dando los siguientes resultados:
PORCENTAJE DE REPELENTE GENERO DE LA PERSONA PROTECCION

4 hr

R1 R1 R2 R2 R3 R3 F1 F1 F2 F2 F3 F3

M F M F M F M F M F M F

93.75 97.44 95.12 100 94.0 97.73 91.11 90.32 95.0 97.06 97.22 97.56

Fuente: Elaboracin Propia Donde: R1: Repelente en spray, tiene como principio activo DEET (Dietiltoluamida al 14.994%) R2: Repelente en crema, tiene como principio activo DEET (Dietiltoluamida pero no especifica concentracin) R3: Repelente en crema, tiene como principio activo Butilacetilaminopropianato de etilo al 15% F1: Formulacin en crema con 6 % de aceite esencial de molle F2: Formulacin en crema con 8 % de aceite esencial de molle F3: Formulacin en crema con 10 % de aceite esencial de molle

La investigacin permiti conocer que la formulacin N3 con 10 % de aceite esencial tiene un porcentaje de proteccin muy similar al Relente comercial N2 y est por encima de los repelentes uno y tres, lo que hace competitivo nuestro producto en el mercado.

INDICE DEL CONTENIDO

CAPITULO I ........................................................................................................................ 1 CONSIDERACIONES GENERALES ....................................................................................... 1


1.1. 1.2. 1.3. Definicin del problema ................................................................................................ 1 Ttulo del estudio........................................................................................................... 2 Objetivos ....................................................................................................................... 2 Objetivo general .................................................................................................... 2 Objetivos especficos ............................................................................................. 2

1.3.1. 1.3.2. 1.4. 1.5.

Hiptesis ........................................................................................................................ 3 Justificacin de la investigacin .................................................................................... 3 Justificacin tecnolgica........................................................................................ 3 Justificacin ecolgica. .......................................................................................... 3 Justificacin socio-econmica. .............................................................................. 4

1.5.1. 1.5.2. 1.5.3. 1.6. 1.7.

Tipo de investigacin..................................................................................................... 4 Alcance. ......................................................................................................................... 4

CAPITULO II ....................................................................................................................... 5 MARCO CONCEPTUAL....................................................................................................... 5


2.1. RBOL DEL MOLLE (Schinnus Molle Linneo) ................................................................. 5 Generalidades ....................................................................................................... 5 Origen e historia .................................................................................................... 6 Descripcin y caractersticas de la planta. ............................................................ 8 Clasificacin sistemtica...................................................................................... 11 Aspecto agronmico ........................................................................................... 12 Composicin del fruto del Schinus molle l. ......................................................... 16 Usos de la semilla o fruto de Shinus molle l. ....................................................... 17 Principio terico de la destilacin ....................................................................... 19 Sistema inmiscible ............................................................................................... 23 Teora de la destilacin intermitente por vapor ................................................. 23 Tipos de destilacin intermitente por vapor ...................................................... 25 Accin del vapor sobre la materia vegetal .......................................................... 31 Influencia sobre el tipo de materia prima ....................................................... 31 Resistencia al paso del vapor .......................................................................... 32 Influencia de difusin osmtica ...................................................................... 33 2.1.1. 2.1.2. 2.1.3. 2.1.4. 2.1.5. 2.1.6. 2.1.7. 2.2. 2.2.1. 2.2.2. 2.2.3. 2.2.4. 2.2.5. 2.2.5.1. 2.2.5.2. 2.2.5.3.

EXTRACCIN POR ARRASTRE CON VAPOR .................................................................. 19

2.2.5.4. 2.3. 2.3.1. 2.3.2. 2.3.3. 2.3.4. 2.3.5. 2.3.5.1. 2.3.6. 2.3.7. 2.3.8. 2.3.9. 2.3.9.1. 2.3.9.2. 2.4. 2.4.1. 2.4.2. 2.4.3. 2.4.4. 2.5. 2.5.1. 2.5.2. 2.5.3. 2.6.

Flujo ptimo de vapor ..................................................................................... 33 Generalidades ..................................................................................................... 34 Gnesis de las esencias vegetales ....................................................................... 35 Quimismo biogentico de las esencias vegetales. .............................................. 37 Distribucin de las esencias en las plantas ......................................................... 40 Factores que afectan el contenido del aceite. .................................................... 40 Influencias externas sobre la composicin de las esencias............................. 40 Clasificacin de los aceites esenciales................................................................. 40 Composicin de los aceites esenciales. ............................................................... 44 Usos de los aceites esenciales ............................................................................. 45 Estabilizacin de los aceites esenciales ............................................................... 46 Uso de Desecantes .......................................................................................... 46 Uso de Antioxidantes ...................................................................................... 47 Antecedentes ...................................................................................................... 48 Propiedades del aceite esencial del Schinus molle l. .......................................... 48 Componentes del aceite esencial del Schinus molle l. ........................................ 52 Usos y posibilidades del aceite esencial de Schinus molle.................................. 55 Tipos de repelentes disponibles .......................................................................... 57 Aplicacin de Repelentes de Mosquitos ............................................................. 58 El DEET (Dietiltoluamida).................................................................................... 59

ACEITES ESENCIALES.................................................................................................... 34

ACEITE ESENCIAL DE SCHINUS MOLLE L. ..................................................................... 48

REPELENTES ................................................................................................................. 57

CREMAS ....................................................................................................................... 61

2.6.1. Generalidades. ............................................................................................................ 61 2.6.2. Clasificacin ................................................................................................................. 62 2.6.3. Excipiente .................................................................................................................... 62 2.6.3.1. Tipos de excipientes ............................................................................................ 62 2.6.4. Principios activos ......................................................................................................... 63 2.6.5. Aditivos ........................................................................................................................ 63 2.6.6. Componentes y elaboracin de cremas ...................................................................... 63 2.6.7. Controles Fsicos de Cremas ........................................................................................ 66

CAPITULO III .................................................................................................................... 68 DESARROLLO EXPERIMENTAL......................................................................................... 68


3.1. 3.2. GENERALIDADES.......................................................................................................... 68 PLANIFICACION DE LA EXPERIMENTACIN ................................................................. 68 Objetivo ............................................................................................................... 69

3.2.1. PLANIFICACION DE LA PRIMERA ETAPA ...................................................................... 69 3.2.2.

3.2.3. 3.2.5. 3.3. 3.3.1. 3.3.2. 3.4. 3.4.1. 3.4.2. 3.4.2.1. 3.4.2.2. 3.4.2.3. 3.4.3. 3.4.4. 3.5. 3.5.1. 3.5.2. 3.5.3. 3.5.4. 3.5.5. 3.5.7. 3.5.8.

Determinacin de las variables ........................................................................... 69 Procedimiento experimental............................................................................... 73 Objetivo ............................................................................................................... 76 Procedimiento Experimental............................................................................... 76 Objetivo ............................................................................................................... 77 Determinacin de variables ................................................................................ 77 Proporcin de las fase acuosa ......................................................................... 78 Temperatura de mezcla .................................................................................. 79 Tiempo de agitacin ........................................................................................ 79 Determinacin del mtodo o diseo experimental ............................................ 79 Procedimiento experimental............................................................................... 81 Objetivo ............................................................................................................... 84 Fundamento ........................................................................................................ 84 Determinacin de variables ................................................................................ 84 Determinacin del nmero de experimentos ..................................................... 85 Procedimiento experimental............................................................................... 86 Recursos Materiales. ........................................................................................... 86 Recursos Humanos. ............................................................................................. 88

PLANIFICACION DE LA SEGUNDA ETAPA ..................................................................... 76

PLANIFICACION DE LA TERCERA ETAPA ...................................................................... 77

PLANIFICACION DE LA CUARTA ETAPA........................................................................ 84

3.5.6. RECURSOS PARA LA INVESTIGACIN. ......................................................................... 86

CAPITULO IV.................................................................................................................... 89 TRATAMIENTO E INTERPRETACION DE RESULTADOS .................................................... 89


4.1. 4.2. Generalidades. ............................................................................................................ 89 Resultados de la primera etapa: Extraccin del aceite esencial de molle .................. 89 Molienda del fruto del molle: ............................................................................. 89 Resultados obtenidos en la prctica ................................................................... 92 Desarrollo del diseo factorial ........................................................................ 94 Discusin de la primera etapa. ............................................................................ 98

4.2.1. 4.2.2. 4.2.2.1. 4.2.3. 4.3. 4.4.

Resultados de la segunda etapa: Caracterizacin del aceite esencial de molle ....... 100 Resultados de la tercera etapa: Formulacin de la crema repelente. ..................... 107 Desarrollo del diseo factorial .......................................................................... 107 Desarrollo del diseo factorial para la extensibilidad ....................................... 107 Desarrollo del diseo factorial para la viscosidad ............................................. 110 Discusin de la tercera etapa. ........................................................................... 114

4.3.1. Discusin de la segunda etapa. ................................................................................. 100 4.4.1. 4.4.2. 4.4.3. 4.4.4.

4.5. Resultados de la cuarta etapa: Pruebas de proteccin y comparacin con otros repelentes del mercado ........................................................................................................ 116 4.5.1. 4.5.2. Pruebas con Repelentes del mercado. .............................................................. 116 Pruebas con la crema formulada ...................................................................... 116

4.5.3. Comparacin de los porcentajes de proteccin de las formulaciones y repelentes del mercado. ................................................................................................... 117 4.5.4. Discusin cuarta etapa. ..................................................................................... 118

CAPITULO V................................................................................................................... 120 COSTOS DE LA INVESTIGACIN .................................................................................... 120


5.1. Fuente de financiamiento ......................................................................................... 120 Costos Directos .................................................................................................. 120 Costos Indirectos ............................................................................................... 121 5.1.1. 5.1.2. 5.2. 5.3.

INVERSIN. ................................................................................................................ 121 FINANCIAMIENTO. .................................................................................................... 121

CONCLUSIONES............................................................................................................. 122 RECOMENDACIONES .................................................................................................... 125 BIBLIOGRAFA ............................................................................................................... 126 ANEXOS ......................................................................................................................... 129 ANEXO N1 .................................................................................................................... 130 Ensayos de Laboratorio para la Caracterizacin del aceite esencial del fruto del molle ...................................................................................................................................... 130 ANEXO N2 .................................................................................................................... 134 Ensayo de laboratorio para la determinacin de humedad de la semilla de molle.... 134 ANEXO N3 .................................................................................................................... 137 Informes de Ensayos..................................................................................................... 137 ANEXO N4 .................................................................................................................... 140 Normas Tcnicas Usadas .............................................................................................. 140

INDICE DE FIGURAS

Figura 1. Mapa de ubicacin del Schinus Molle L ....................................................................... 14 Figura 2. Vista en corte de la semilla de molle............................................................................ 17 Figura 3. Destilador para extraccin con corriente de vapor...................................................... 26 Figura 4. Destilador para extraccin por arrastre de vapor. ....................................................... 27 Figura 5. Usos de los aceites esenciales. ..................................................................................... 46 Figura 6. Aplicaciones industriales del Aceite de Schinus molle l. .............................................. 56 Figura 7. Diagrama de flujo de la extraccin de aceite esencial de molle. ................................. 73 Figura 8. Equipo de Extraccin por Arrastre de Vapor usado en laboratorio. ............................ 74 Figura 9. Molinos para granos ..................................................................................................... 89 Figura 10. Semilla de molle entera.............................................................................................. 91 Figura 11. Semillas de molle molidas a tres diferentes aberturas del molino. ........................... 91 Figura 12. Volumen de aceite esencial vs tiempo ....................................................................... 92 Figura 13. Rendimiento vs Numero de extraccin ...................................................................... 93 Figura 14. Porcentaje de proteccin para diferentes repelentes ............................................. 118

INDICE DE TABLAS Tabla 1. Usos medicinales tradicionales de las diferentes partes de la planta ............................. 7 Tabla 2. Descripcin morfolgica del molle. ............................................................................... 11 Tabla 3. Clasificacin sistemtica del molle ................................................................................ 11 Tabla 4. Anlisis Bromatolgico del Schinus Molle L. ................................................................. 17 Tabla 5. Clasificacin por flores, plantas y agrios........................................................................ 41 Tabla 6. Clasificacin por granos, semillas, especies, maderas, cortezas, raices y hojas ........... 42 Tabla 7. Esencias voltiles ........................................................................................................... 43 Tabla 8. Esencias medias ............................................................................................................. 43 Tabla 9. Esencias fijas .................................................................................................................. 44 Tabla 10. Rendimientos de extraccin por arrastre con vapor. .................................................. 48 Tabla 11. Propiedades fisicoqumicas encontradas. ................................................................... 48 Tabla 12. Propiedades fisicoqumicas encontradas del aceite esencial de molle....................... 49 Tabla 13. Metabolitos primarios y secundarios encontrados. .................................................... 49 Tabla 14. Propiedades fisicoqumicas encontradas por Fritzche. ............................................... 50 Tabla 15. Propiedades fisicoqumicas encontradas por Schimel. ............................................... 51 Tabla 16. Propiedades fisicoqumicas encontradas por Davidson y Montes. ............................. 51 Tabla 17. Metabolitos Primarios y secundarios encontrados por Davidson y Montes .............. 52 Tabla 18. Diferencias Entre un Repelente Natural y un Repelente Sinttico ............................. 58 Tabla 19. Emulsificantes usados en la industria.......................................................................... 65 Tabla 20. Abertura del molino y dimensiones de la semilla ....................................................... 70 Tabla 21. Factores y niveles del diseo experimental ................................................................ 71 Tabla 22. Diseo factorial de la experimentacin ....................................................................... 72 Tabla 23. Propiedades fisicoqumicas aceite esencial de molle a determinar ............................ 76 Tabla 24. Mtodos INDECOPI Empleados ................................................................................... 76 Tabla 25. Componentes de la crema y su funcin ...................................................................... 77 Tabla 26. Formulaciones de la Crema Repelente ........................................................................ 78 Tabla 27. Variables y Niveles de la 3ra Etapa .............................................................................. 80 Tabla 28. Diseo factorial de la experimentacin ....................................................................... 81 Tabla 29. Formato para la recoleccin de datos de la tercera etapa.......................................... 83 Tabla 30. Variables y Niveles-4ta Etapa ...................................................................................... 84 Tabla 31. Porcentajes de Proteccin ........................................................................................... 85 Tabla 32. Porcentaje de proteccin para repelentes del mercado ............................................. 86 Tabla 33. Medidas de la semilla entera de Molle ....................................................................... 90 Tabla 34. Medidas de la semilla de Molle molida a una abertura de molino de 1mm. .............. 90 Tabla 35. Medidas de la semilla de Molle molida a una abertura de molino de 2mm. .............. 90 Tabla 36. Medidas de la semilla de Molle molida a una abertura de molino de 3mm............... 91 Tabla 37. Volumen de aceite esencial extrado en diferentes tiempos. ..................................... 92 Tabla 38. Rendimientos de aceite esencial extrado ................................................................... 93 Tabla 39. Datos experimentales para resolucin del sistema factorial lineal ............................. 94 Tabla 40. Transformacin de variables ....................................................................................... 94 Tabla 41. Anlisis del diseo factorial lineal ............................................................................... 96 Tabla 42. Propiedades Fisicoqumicas encontradas del Aceite Esencial de Molle. .................. 100 Tabla 43. Comparacin de propiedades fisicoqumicas del aceite obtenido y de bibliografa . 101 Tabla 44. Metabolitos secundarios encontrados en el aceite esencial extrado ...................... 103 Tabla 45. Comparacin de componentes del aceite esencial obtenido y de bibliografa ........ 106 Tabla 46. Toma de datos de la tercera etapa. .......................................................................... 107 Tabla 47. Transformacin de variables ..................................................................................... 107 Tabla 48. Anlisis del diseo factorial lineal para la extensibilidad .......................................... 108 Tabla 49. Anlisis del diseo factorial lineal para la viscosidad ................................................ 110

Tabla 50. Recoleccin de datos de la tercera etapa ................................................................. 113 Tabla 51. Porcentajes de Proteccin de los repelentes del mercado ....................................... 116 Tabla 52. Porcentajes de Proteccin de las cremas formuladas ............................................... 116 Tabla 53. Comparacin de repelentes formulados con repelentes del mercado ..................... 117 Tabla 54. Resumen Costos Directos. ......................................................................................... 120 Tabla 55. Costos Indirectos. ...................................................................................................... 121 Tabla 56. Determinacin de la solubilidad en etanol................................................................ 131

CAPITULO I

CONSIDERACIONES GENERALES 1.1. Definicin del problema

Se sabe de las propiedades del molle como repelente, pero se viene usando mayormente de manera directa o casera, es por ello que se busca procesarlo para la obtencin de un repelente natural, sin embargo para la obtencin del aceite esencial del fruto del molle, maximizando el rendimiento de extraccin, se hace necesario conocer y controlar el rol de las variables involucradas y la interrelacin de las mismas, como son: Tamao de partcula, humedad y tiempo, de igual modo no se tiene definido la concentracin de aceite esencial que se debe aadir a una presentacin en crema para que tenga un porcentaje de proteccin similar a los del mercado.

1.2. Ttulo del estudio Extraccin, Caracterizacin fisicoqumica del aceite esencial del fruto del molle y su aplicacin como crema repelente de mosquitos 1.3. Objetivos

1.3.1. Objetivo general

Obtener el aceite esencial del fruto del molle por el mtodo de arrastre con vapor, determinando los niveles de las variables que maximizan la extraccin, realizando su caracterizacin fisicoqumica y evaluando su aplicacin en la formulacin de una crema repelente de mosquitos que tenga un porcentaje de proteccin similar o superior a los del mercado.

1.3.2. Objetivos especficos

Obtener el aceite esencial del fruto del molle por el mtodo de arrastre con vapor, evaluando los niveles planteados para las variables: porcentaje de humedad, tiempo de extraccin y tamao de partcula en el rendimiento de la extraccin.

Desarrollar el diseo factorial con replica en el punto central para hallar el modelo matemtico que representa al rendimiento de la extraccin.

Realizar la caracterizacin fisicoqumica del aceite esencial de molle obtenido. Elaborar una crema repelente evaluando los niveles planteados para las variables: fase acuosa, temperatura de mezcla y tiempo de agitacin en la viscosidad y extensibilidad de la crema.

Desarrollar el diseo factorial con replica en el punto central para hallar el modelo matemtico que represente a la viscosidad y luego a la extensibilidad de la crema.

Comparar el porcentaje de proteccin de las cremas elaboradas frente a otros repelentes del mercado.

1.4. Hiptesis

De las variables: humedad, tamao de partcula y tiempo de extraccin se desprende que el tamao de partcula es la variable ms significativa dentro del proceso de extraccin de aceite esencial del molle, siendo las partculas de mayor tamao y menor humedad con las que se obtiene un mejor rendimiento. En la composicin qumica del aceite esencial de molle, se encuentran componentes que causan repelencia sobre los mosquitos como son el limoneno y el pineno, a una concentracin no mayor al 10% de aceite esencial en la crema se obtendr un porcentaje de proteccin igual al de los repelentes del mercado.

1.5. Justificacin de la investigacin

1.5.1. Justificacin tecnolgica

La presente investigacin nos permitir desarrollar la tecnologa adecuada para la extraccin del aceite esencial de los frutos del molle al conocerse los niveles de las variables ms significativos para posteriormente escalarlo a una planta industrial. Asimismo nos brindar una nueva alternativa en el desarrollo de cremas repelentes con alto porcentaje de proteccin en base a materias primas naturales.

1.5.2. Justificacin ecolgica. La picadura de los mosquitos an sin transmitir enfermedades puede causar problemas ya sea por el efecto txico que tiene la sustancia que introduce el mosquito en la picadura para que la sangre no se coagule o por desencadenar reacciones alrgicas en algunas personas como edemas o urticarias.

Los repelentes en su gran mayora tienen como principio activo el DEET, el cual segn el Centro Nacional de Informacin de Pesticidas de EEUU (NPIC) es absorbido por la piel de las personas; adems se determin que para los peces de agua dulce e insectos es txico a niveles altos. Dadas estas circunstancias y a la importancia de sustituir productos sintetizados por naturales se brindar una nueva alternativa para la formulacin de repelentes con principios activo respetuosos con el medio ambiente. 1.5.3. Justificacin socio-econmica. El rbol de molle es un recurso abundante y de fcil adquisicin que no est siendo aprovechado. Se le puede dar valor agregado creando una industria alternativa para sta materia prima y puede constituir una nueva fuente de ingreso para el agricultor que actualmente no obtiene beneficios por tener ste recurso en sus tierras. El mercado de productos naturales est en rpido crecimiento y por ello la introduccin de ste repelente tiene altas posibilidades de una buena aceptacin entre los consumidores. 1.6. Tipo de investigacin. Cientfico tecnolgico. 1.7. Alcance.

La investigacin se llevar a efecto a nivel de laboratorio; difundindose sus conclusiones a efecto de que los interesados puedan continuar con los estudios de escalamiento y produccin.

CAPITULO II

MARCO CONCEPTUAL 2.1.RBOL DEL MOLLE (Schinnus Molle Linneo)

2.1.1. Generalidades

El Schinus molle L. tambin conocido como mulli, cullash o simplemente molle. Etimolgicamente la voz mulli es de origen Quechua y de ella viene la voz molle, la palabra molle tiene origen en la lengua quich, y que viene de las races mo que significa cierta clase de mosquitos, le hojas, por lo que se llama hoja con mosquitos. MOSTACERO (1), Schinus molle l., molle pimentero falso, rbol de hermoso porte, oriundo de Amrica del Sur. En Amrica Central donde fue introducido por los espaoles le llaman Piru. Pertenece a la familia de las Anacardiceas, Genero Schinus con 30 especies de Amrica del sur, con una especie que se extiende hasta Mxico; en el Per se conocen cinco cuyos nombres son los siguientes: 1. Schinus molle L. rbol de la vida 2. Schinus Microphyllus checche 3. Schinus Pearcei molle 4. Schinus Polygamus apantancar 5. Schinus Andinus
5

El nombre Pepper tree no es una denominacin valida pues segn Pepper tree (El rbol de pimienta) es el nombre comn para tres especies de rbol en familias separadas: Drimys lanceolata en la familia Winteraceae, de Australia y Tasmania; Macropiper excelsum en la familia Piperaceae, de Nueva Zelanda, creciendo a 6 m (20 ft); y Schinus molle en la familia Anacardiceas, un rbol siempre verde de los Andes Peruanos que se ha introducido ampliamente en muchos regiones tropicales secas. Su pequea fruta, en racimos terminales, parecen granos de pimienta. 2.1.2. Origen e historia

Segn GARCILAZO DE LA VEGA (2) los antiguos peruanos cultivaron el rbol de mulli o molle por el aspecto particular de las arboledas de esta planta. Por los frutos con los que hacan una bebida fermentada llamada chicha de molle, la que se preparaba frotando los frutos maduros entre las manos, en agua caliente hasta que el agua tuviera sabor dulzaino, procurando no disolver el amargo de estos frutos. El lquido era filtrado y dejado fermentar durante tres o cuatro das. Esta chicha se beba sola o mezclada con chicha de maz; se tomaba ordinariamente y tambin por sus propiedades medicamentosas para males de riones y vejiga. Evaporando el lquido usado para preparar la chicha obtenan un jarabe espeso, la miel de molle de la que gustaron, llevando ms lejos la fermentacin preparaban vinagre. Las hojas ms tiernas se empleaban para limpiarse los dientes y apretar las encas. El cocimiento de las hojas se empleaba en el tratamiento de muchas enfermedades de la piel y de las lceras rebeldes. De las ramas preparaban mondadientes. El ltex recin extrado se empleaba para extirpar la nube de los ojos; el ltex desecado que constituye la llamada resina de molle, se empleaba como emplasto resolutivo y favorecedor de la cicatrizacin de las heridas; esta resina disuelta en agua se tomaba como purgante. Segn BERNAB COBO (3), la resina se empleaba en los embalsamientos, pero no hay pruebas al respecto; tambin la resina se usaba a manera de supositorios para combatir los gusanos intestinales. La corteza del tronco se empleaba en cocimiento para deshinchar las piernas.
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El cocimiento de la raz con las cortezas del tronco, ramas y hojas, se usaba para teir tejidos de amarillo plido. ALDAVE (4), los antiguos peruanos preparaban con los frutos una bebida fermentada, la chicha de molle, a la que le atribuan propiedades medicamentosas. La tintura de los frutos se usa contra el reumatismo a modo de frotaciones. La oleorresina contenida en la corteza, se usa para obturar muelas cariadas asimismo es purgante, a este producto se le llama tambin Almaciga americana y tiene usos industriales. CERRATE (5), el cocimiento de las hojas y ramas de molle, se lavan en las maanas los pezones de las vacas lecheras cuando se agrietan por la baja temperatura durante los meses de heladas en la sierra. Con el cocimiento tibio se hacen grgaras para quitar el dolor de la garganta. La resina facilita la cicatrizacin de las heridas. GIBAJA (6), Los antiguos peruanos fueron grandes tejedores y tintoreros que utilizaron pigmentos de plantas entre ellas destaca el Schinus molle molle. LOCK (7), en el Per antiguo tenemos los Textiles paracas, que a juzgar por los efectos conseguidos en sus telas, cerca de 190 tonos (verde y amarillo) fueron obtenidos de la rama de molle.
Tabla 1. Usos medicinales tradicionales de las diferentes partes de la planta

Uso Teraputico Afecciones respiratorias Antirreumtico Antiparsito Hepatitis Cicatrizante Desinflamante oftalmolgico Depurativo Hemosttico

Parte Empleada Yemas y ramas jvenes Hojas y Frutos Tallo y semillas Hojas Corteza y Hojas Corteza Planta Fruto

Preparacin Cocimiento Cocimiento Cocimiento Infusin- Macerado Resina-Molidos Ltex Cocimiento Cocimiento

Administracin y dosis Uso externo: Gargarismo Bebida Jarabe Bebida Uso externo: Emplastos Uso externo: Colirio Bebida Uso externo: Lavados
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Fuente: Pallardel.

2.1.3. Descripcin y caractersticas de la planta.

LOZANO (8), el Schinus molle L. es una especie vegetal muy difundida siendo su desarrollo ptimo en los climas de los valles interandinos (Lpez 2003). Perteneciente a la familia Anacardiaceae, se conoce en los pases andinos como molle, mulli o falsa pimienta, posiblemente nativa desde Ecuador hasta Argentina. El uso popular medicinal ubica a las hojas del molle desde un repelente de mosquitos hasta un analgsico en dolores reumticos (Gonzales et al. 2009, Ulloa 2009), en cuanto a su ecologa y hbitat, algunos autores lo consideran originaria del Per y en Bolivia se encuentra en forma silvestre en alturas desde 1000 a 2900 msnm., prospera a orilla de caminos, en zonas perturbadas con vegetacin secundaria, en pedregales y cerca de las viviendas, se desarrolla bien en valle amplio, suelo frtil, profundo, con humedad subterrnea y bien drenado (Vargas et al. 2000). En los valles interandinos y ecorregiones sricos de Centro y Sur Amrica, localizados entre 1000 a 2900 m, en las que se distribuye S. molle, existe un elevado nmero de usos pero los principales se agruparon en 12 categoras de uso, ordenados en forma alfabtica como se cita a continuacin:

1. Aromatizante [toda la planta]. Todo el rbol despide un intenso olor perfumado debido a la presencia de abundantes aceites esenciales y voltiles.

2. Base para chicle [exudado]. Su exudado es una resina blanquecina que es usada en Amrica del Sur como goma de mascar, se dice que fortalece las encas y sana las lceras de la boca.

3. Construccin [tallo y ramas]. Se usan los tallos y ramas para postes, horcones de viviendas y cabos de herramientas agrcolas, adems importante en el horneado de panes en las comunidades rurales (ramas dispuestas como escoba en la punta de un palo para limpiar las cenizas del horno).

4. Colorantes y artesana [hoja, tallo, corteza, raz]. Hirviendo sus hojas, ramas, corteza y raz se obtiene un lquido amarillo plido, que tie la lana o el algodn, previamente impregnado en una solucin concentrada dando un color amarillo de carcter permanente.

5. Combustible [madera de tallos y ramas]. Tallo y ramas secas se emplean tambin para lea.

6. Comestible [fruto]. Los frutos del molle se usan como aromatizantes y para dar sabor al vinagre; seco y molidos se usan como pimienta blanca o para adulterar a la verdadera pimienta (Piper nigrum) y se prepara una bebida refrescante. Tambin se consume en la industria de los embutidos, salchichas y carnes ahumadas, contiene aceites esenciales, flavonoides y cidos masticadiennicos.

7. Cosmtico [hoja]. De las hojas se extrae un aceite aromatizante que se usa en enjuagues bucales y como dentfrico. Las semillas contienen aceites de los cuales se obtiene un fijador que se emplea en la elaboracin de perfumes, lociones, talcos y desodorantes.

8. Forrajero [fruto]. Importante alimento para pjaros y las flores visitadas por abejas melferas.

9. Insecticida o Txica [fruto, hoja]. El aceite esencial de las hojas y frutos ha mostrado ser un efectivo repelente de insectos, particularmente contra la mosca casera. El fruto puede contener 5 % de aceite esencial y las hojas 2 %. Las hojas se emplean para evitar el ataque de plagas en la papa cosechada, protegindolas con una cubierta de hojas de molle.

10. Medicina [fruto, hoja, ramas]. El cocimiento de las ramas se emplea para hacer grgaras y cura problemas respiratorios y en forma de mate para tomar y curar dolencias del hgado. El agua de las hojas y fruto cocidos se toma para curar el reumatismo. La resina aplicada directamente sobre la piel sirve
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para cicatrizar heridas, aliviar dolores de los pies y tratar a enfermos con parlisis parcial o embolia. Estudios cientficos muestran sustancias esenciales de las hojas con efectos analgsicos y contrarrestantes de la presin alta (en ciertas regiones de Uruguay se emplea como anticonceptivo). Tambin es considerada inhibidor de hongos y bacterias, por ello algunas personas usan en lavaje para posparto.

11. Ornamentacin [toda la planta]. ltimamente es utilizado como planta ornamental en programas de reforestacin en Sur Amrica principalmente y en otras regiones. Adems como rbol ornamental ha sido introducido a varios pases y naturalizado en Mxico y California.

12. Restauracin [fruto, hoja, ramas]. Conservacin de suelo y control de la erosin, por ser una especie que prospera en pedregales y suelos relativamente pobres en nutrientes. Las hojas, ramas y frutos se caen abundantemente y al caer constituyen una buena materia orgnica que aumenta la fertilidad del suelo, es en este sentido que acelera la velocidad en la recuperacin de terrenos degradados.

CERRATE (5), Arbusto o arbolito siempre verde, tallo hasta 7 metros de alto ramoso, ramas esparcidas, colgantes puberulentas, las ramas y el tronco exudan una resina blanquecina si sufren una herida. Hojas alternas pecioladas, pecolos de 3-5.5cm de largo, limbo imparipennado, fololos 25 a 27 falcados 35-65 x 3-8 mm, ssiles, los bsales alternos y mayores, cerca pice opuesto y menores. Las inflorescencias son panculas muy abiertas 8-15 o ms centmetros de largo. Flores pequeas muy numerosas, blancas pentmeras. Frutos drupas esfricas 4-5 mm de dimetro, brillantes rosado-oscuras. Semillas negras opacas. Plantas xerfilas; viven en las quebradas clidas y abrigadas de los valles interandinos y vertientes occidentales. En el esto lucen lozanos, brillantes, de follaje verde claro; a pesar de que la mayora de los arbustos circundantes se hallan agostados.
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Tabla 2. Descripcin morfolgica del molle.

PARTE ARBOL TALLO RAMAS Schinus molle 5 8 metros de altura Laxas y pendulares

DESCRIPCION

INFLORESCENCIAS Alternas compuestas pinnadas, generalmente con 7 y 13 pares de foliolos, linear-lanceolados, subenteros o serrados hacia el pice, agudos o subobtusos. FLORES Pequeas, numerosas blanco amarillentas dispuestas en panculas largas axilares y terminales, cliz con 5 segmentos, corola de 5 ptalos oblongos, imbricados. ENVOLTURAS FLORALES FRUTO SEMILLA Drupa globosa, de color Rosado. Solitaria, cotiledones plano convexos, carnosos, embrin curvo, endospermo escaso o nulo de 4-5 mm de dimetro
Fuente: MOSTACERO

Diez estambres, ovario libre, sesil y 1-flocular.

2.1.4. Clasificacin sistemtica Segn ENGLER (9), la clasificacin sistemtica, del molle, mulli, cullash o pimentero falso.

Tabla 3. Clasificacin sistemtica del molle

ESPECIE GENERO FAMILIA ORDEN SUBCLASE CLASE SUB DIVISION DIVISION

MOLLE SCHINUS ANACARDIACEAS SAPINDALES ARQUICLAMIDEAS DICOTILEDONEAS ANGIOSPERMAS FANEROGAMAS


Fuente: ENGLER

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2.1.5. Aspecto agronmico

Distribucin geogrfica: HERRERA (10), El rea geogrfica donde se encuentra distribuido el Schinus molle es bastante extensa, se encuentra en Per, Bolivia, Argentina y Mxico, (Fue llevado a Europa como una planta decorativa). El rbol de molle segn WERBERBAUER (11), demanda un clima seco, clido o subclido, pertenece al oeste y al territorio interandino y rehuye el oriente, lo mismo que las inmediaciones del mar. El lmite de su extensin vertical oscila alrededor de los 3,300 msnm en el sur, 3,000 msnm en centro y a 2,000 msnm en el norte. Suele vivir cerca de los ros y puede apartarse considerablemente de ellos slo en niveles superiores. Esta distribuido a lo largo de los ros, entre los 2,800 m. Se le encuentra en muchas quebradas templadas, en las verticales occidentales de los andes y en algunos valles de la costa. As lo encontramos desde el departamento de Piura, en los valles de los ros Quiroz y Piura en Huancabamba. En el departamento de Lambayeque se le encuentra en los alrededores de Chiclayo y Lambayeque, y en las mrgenes del ri Saa. En el departamento de la Libertad, a lo largo de los ros Jetepequeque, Chicama, Moche, y alrededores de Santiago de Chuco. En el departamento de Ancash en las ribera de los ros Pativilca, Huarmey, en los valles de Nepea y del ro Santa, desde Recuay hasta Caraz, en Pallasca y Orcos. En el departamento de Lima tenemos las riberas de los ros Pativilca, Chancay, Chilln y Lurn; a lo largo del ro Rimac y alrededores del Ferrocarril Central, Matucana, Chosica, Ricardo Palma y Surco. En los alrededores de Barranca, Supe, Canta y Yauyos. En el departamento de Ica, a lo largo de los ros Pisco y Blanco, en los alrededores de San Jos de Molinos, Palpa, Nazca y en la baha de San Nicols. Se encuentra en el departamento de Arequipa en los valles de los ros Chili y Yura, Tambo y Yanca, en las cercanas de Lomas, en Caylloma, Chala, cerca de Antiquipa.
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En el departamentos de Moquegua, se encuentra en los valles de Casma, Torata y lugares aledaos al ro Tambo y Moquegua. En Tacna, en los alrededores de Tarata, Cumbay y Candarve. En la sierra se halla distribuido a lo largo de los valles del Mantaro y del Apurimac (Cuzco). As se encuentra en los departamentos de Cajamarca a lo largo del ro Huncabamba y en los alrededores de San Gregorio. En Huanuco, en Ambo y zonas aledaas. En Junn, en el valle de Tarma y alrededores. En Ayacucho, en los valles de los ros Pacapausa y Yanca, en Huanta, Ayacucho y Alrededores. En el Cuzco, a lo largo de las riberas de los ros Apurimac y Urubamba, en Cuzco y zonas aledaas, en la provincia de Quispicanchis: Urcos y Calca. Esta especie rehuye la selva, pero se le encuentra en la ceja de montaa, en los valles y riberas de los ros: Utcubamba, en el departamento de Amazonas; Huallaga, en el departamento de San Martn y Chumbamba en los departamentos de Cuzco y Ucayali.

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Figura 1. Mapa de ubicacin del Schinus Molle L

Fuente: Morales (2008).

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2.1.5.1. Clima y suelo.

La planta de molle cuyo hbitat es en lugares de clima seco clido o subclido como los de la sierra entre los 2000 y 3000 msnm. En nuestro medio est distribuido a lo largo de los ros entre los 2,800 msnm. Vegetacin riberea de la costa, de los valles occidentales y de los valles interandinos hasta 1,500 msnm. Piso medio: 1,500 a 2,500 msnm.

2.1.5.2. Tcnica de cultivo y cosecha

El INRENA (Instituto de Reforestacin Nacional) (12), de acuerdo a los artculos 17 y 19 del Decreto Ley N 25902, LEY ORGANICA DEL MINISTERIO DE AGRICULTURA, es el encargado de desarrollar y promover el uso racional y la conservacin de los recursos naturales, segn el Programa de accin nacional de lucha contra la desertificacin, se incluy al molle como uno recurso natural domesticable no maderable de potencial melfero, en su campaa de reforestacin nacional en los departamentos de LAMBAYEQUE, AMAZONAS, JAEN, CUZCO, HUANUCO y MOQUEGUA; desde 1995 a la fecha.

Se considera al molle como una especie de planta de importancia econmica, es decir es un recurso forestal de la sierra. 1.- Tcnica de cultivo: Segn WEBB (13). Precipitacin fluvial Rgimen de lluvias Estacin Seca Temperatura Promedio : 300 - 620 mm : verano : 4 a 8 meses : 12 - 18 C

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El Schinus molle es muy resistente a la sequa, se le encuentra en alturas medias de zonas semiridas y montaosas. El molle, especialmente cuando joven (rbol menor de 15 aos), es sensible a las heladas. El periodo de produccin de los frutos de molle est comprendido entre los meses de Marzo a Agosto. Caractersticas del suelo: Segn WEBB (13). a) Textura b) Reaccin (pH) c) Drenaje : : : Arenoso Alcalino o neutro Bueno

Otras Caractersticas: Tolera la salinidad moderada, prefiere suelos arenosos y en algunos lugares se le utiliza para consolidar dunas.

2.1.6. Composicin del fruto del Schinus molle l.

Segn CORNEJO (14), el fruto es una drupa de 4 mm de dimetro promedio, el epicarpio es de color rojo brillante, mesocarpio semicarnoso dulce, endocarpio pergaminaceo ptreo y una glndula de resina. La pulpa es poco desarrollada, su olor terebintceo es muy pronunciado, de sabor dulce aromtico y ligeramente picante.

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Tabla 4. Anlisis Bromatolgico del Schinus Molle L.

ENSAYO HUMEDAD GRASAS PROTEINA CENIZAS FIBRAS AZUCARES REDUCTORES NIFEX TOTAL
Fuente: Cornejo.

% 19.62 15.47 7.12 6.20 14.70 12.80 24.09 100.00

Figura 2. Vista en corte de la semilla de molle.

Fuente: Cornejo.

2.1.7. Usos de la semilla o fruto de Shinus molle l.

MADRID (15), dio a conocer un breve estudio botnico del fruto del Schinus molle linneo, as como su bromatologa, distribucin geogrfica e historia, anlisis de sus constituyentes por la marcha de Floriani, elaboracin de chicha y sus anlisis fisicoqumicos.
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La riqueza alcohlica de la chicha de molle oscila entre 3 y 6, lo cual la coloca en la categora de las bebidas alcohlicas, atribuyndosele propiedades curativas de algunas dolencias del hgado y los riones. Agrega que se trata de un alimento pobre en protenas. MARTINEZ (16), El fruto puede emplearse en la alimentacin como agente saborizantes (condimento), y tambin del fruto se puede extraer el aceite esencial que puede servir como fijador de perfumes y por su olor agradable, puede utilizarse en la fabricacin de colonias. TORRES J (17), Contribuyo tambin en el estudio de los frutos drupceos del molle que son la parte ms importante de la planta de los cuales se pueden obtener subproductos ms valiosos: Elaboracin de Chicha, los frutos maduros y secos se someten a dilucin por percolacin con agua para extraer el azcar que se encuentra en el mesocarpio que es semicarnoso y dulce, la dilucin es fermentada a temperatura ambiente, luego se filtra y pasteuriza. Para la elaboracin de vinagre, los frutos maduros, secos y limpios se percolan; se filtran para someterlos a fermentacin alcohlica a temperatura ambiente. El mosto descubado se pasteuriza para someterlo a fermentacin actica, controlando diariamente su acidez hasta lograr un vinagre adecuado, luego se filtra y se pasteuriza. Se obtuvo un producto de baja acidez: 2-3, 6% semejante a los vinagres de sidra y cerveza, y determinar el rendimiento del aceite esencial del fruto. Para obtener alcohol etlico, los frutos maduros frescos y secos se percolan. Y de acuerdo a los anlisis, las diversas muestras se destilan por separado, previa fermentacin alcohlica con los mostos corregidos; los destilados son rectificados para los anlisis organolpticos y fisicoqumicos. Para la extraccin de aceite esencial, los frutos percolados fueron secados a temperatura ambiente para ser molidos y sometidos a destilacin por arrastre con vapor de agua.

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2.2. EXTRACCIN POR ARRASTRE CON VAPOR

2.2.1. Principio terico de la destilacin

GARCIA (18), elementalmente, se puede definir la destilacin fraccionada como la separacin de dos o ms sustancias basada en las diferencias existentes entre sus tensiones de vapor. Dichas sustancias pueden ser o no, miscibles, total o parcialmente, comportndose sus tensiones parciales de vapor en uno y otro caso de forma diferente.

La mezcla de varios gases perfectos sigue la ley de Dalton; segn ella, la presin total de la mezcla es la suma de las presiones que cada masa de gas tendra al ocupar, a la misma temperatura, el volumen total ahora ocupado por la mezcla gaseosa. Otra forma de exponer esta misma ley, equivalente a la anterior, es que si se juntan varias masas de gases perfectos, todas mantenidas a igual temperatura y presin, de manera que la presin total resultante de la mezcla continu igual a la presin primitiva de cada uno de ellos, entonces la masa de gases tendra que ocupar un nuevo volumen, suma exacta de los volmenes ocupados primitivamente por cada gas. Esta ley totalmente aplicable a mezclas de gases perfectos, presenta algunas excepciones cuando se trata de vapores (gases en condiciones prximas a las que determinan su licuacin o condensacin), dependiendo de su mutua afinidad.

Si consideramos un sistema heterogneo formado por dos lquidos no miscibles, tales como el agua y un aceite esencial, los vapores emitidos por cada uno de ellos no se influyen al no presentar afinidades mutuas sus molculas gaseosas y, por tanto, sus tensiones de vapor se adicionan totalmente; al ir calentando dicho sistema heterogneo llegar un momento en el cual la tensin de vapor se iguale a la presin ejercida sobre la superficie libre de ambos lquidos y entonces el sistema entra en ebullicin. La tensin parcial de cada vapor es en este momento inferior a la presin externa, de forma que los lquidos se encuentran hirviendo a temperatura inferior a su punto de ebullicin, bajo la presin actual.
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Cuando por el contrario, se trata de un sistema formado por dos o ms lquidos totalmente miscibles de diferentes puntos de ebullicin, cada tensin parcial a una cierta temperatura es igual a la producida por el lquido puro, aislado manteniendo en iguales condiciones. Cuando uno de ellos se encuentra en proporcin muy preferente (soluciones diluidas), la variacin de su tensin de vapor sigue la ley de Raoult (es proporcional al nmero de molculas disueltas), pero esto no ocurre en otras proporciones debido a la solubilidad de cada vapor en lquidos distintos del suyo propio, desapareciendo por ello toda proporcionalidad.

Comparemos ahora la marcha de la ebullicin en ambos tipos de sistemas. Cuando la suma de las tensiones parciales de vapor de un sistema heterogneo se iguala a la presin ejercida sobre su superficie libre, ya hemos visto que el sistema entra en ebullicin; por no influirse mutuamente, cada tensin parcial depender solamente de la temperatura a que el sistema se encuentra, y no a las proporciones presentes de ambos componentes, de forma que la ebullicin continuara inalterablemente mientras se encuentren presentes los dos lquidos. Por el contrario, en un sistema homogneo (que tambin entra en ebullicin cuando la suma de las tensiones parciales es igual a la presin externa, la tensin de vapor de cada componente en un momento dado depende de la composicin que aquel momento tenga el lquido subyacente y, como los vapores son ms ricos en componentes voltil que dicho lquido, pues lgicamente el componente ms voltil dar por gramo ms vapores que los ms fijos, el lquido procedente de la condensacin de los vapores emitidos en la ebullicin estar enriquecido en voltil. Cuando entre las tensiones de vapor hay una gran diferencia, la cantidad de los otros componentes que acompaan al voltil ser muy pequea, separndose entonces dicho componente de los dems, pero este no es el caso general. Como consecuencia de lo expuesto, todo lquido no miscible con el agua puede ser arrastrado por aquella hirviendo a temperatura ms bajo que su punto de ebullicin, y de todo sistema homogneo es posible aislar sus componentes por destilacin seca, siempre que haya suficiente diferencia entre sus tensiones de vapor (al menos har falta una diferencia de 3-5 entre sus puntos de ebullicin para poder separarlos mediante destilacin).cuando la diferencia es
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pequea, se hace necesario volver a destilar, partiendo del lquido ms rico en voltil obtenido en la primera destilacin, y repetir el proceso hasta conseguir el resultado buscado. Esta repeticin de las destilaciones se realiza automticamente en las rectificaciones; se designa con este nombre un sistema en el cual, y en las llamadas columnas rectificadoras, los vapores obtenidos en la caldera sufren una primera condensacin en el primer plato dando por enfriamiento un lquido que vuelve a hervir gracias al calor que le trasmite nuevos vapores llegados de la caldera; los vapores desprendidos en esta segunda ebullicin vuelven a condensarse ms arriba en la columna, en el segundo plato, para hervir calentados por los procedentes del plato inferior, y as sucesivamente repitindose el proceso gran nmero de veces. Como los vapores de calefaccin se condensan dando un lquido ms pobre en voltil, que desciende por la columna, resultan en ellas dos corrientes de materia: una ascendente, de vapores, que conforme se acerca a la cabeza de la columna es ms rica en voltil, y otra, de lquido ascendente (reflujo), que conforme va acercndose a la caldera es ms rica en el componente ms fijo. Al tratar los sistemas heterogneos hemos supuesto que uno de los componentes es el agua y el otro es un aceite esencial, pero estas consideraciones son aplicables a todos los dems casos en que se emplee una sustancia donde la esencia sea insoluble; generalizando, estos arrastres reciben el nombre de codestilaciones, y son de gran inters. La codestilacin acuosa se utiliza para aislar los aceites esenciales, pero ya veremos como la codestilacin con glicoles, ftalatos, etc. Se emplea tambin para separar esencias liquidas de las esencias absolutas de concretos, y en otros casos. Suponiendo que los vapores siguen las leyes de los gases perfectos, vamos a deducir una ecuacin aproximada que nos dar la idea del comportamiento general de las codestilaciones. La cantidad de cada componente que, durante una codestilacin, se encuentra al estado de vapor, ser:

Donde: G = Peso del componente al estado de vapor.


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m = Peso de una molcula real. A =Nmero de molculas reales que se encuentran al estado vapor. N =Nmero de Avogadro. n =Nmero de molculas gramo presentes al estado de vapor. M =Peso molecular. p =Presin parcial de vapor. V =Volumen total ocupado por la mezcla de vapores. R =Constante de los gases perfectos T =Temperatura absoluta del sistema. Sealando con subndice W los valores del vapor de agua y con E los valores de los aceites esenciales, tendremos:

Expresin no totalmente exacta, pero que la idea de las proporciones del problema. Efectivamente, aunque el peso molecular del agua es inferior al peso molecular medio de los aceites esenciales, su tensin de vapor es muy superior a la de aquellos (las esencias tienen tensiones de 0,005 a 0,5 mm de mercurio, a 20C) razn por la cual los vapores originados contienen mucho ms vapor de agua que de aceite esencial, siendo tambin ms rico en agua el producto condensado.

Por estar compuestos los aceites esenciales de varios cuerpos qumicos se comprende fcilmente, teniendo en cuenta la relacin precedente, que la composicin del aceite arrastrado no sea constante, ya que cada componente tiene distinto M y distinta p, siendo necesario por ello recoger la totalidad de los productos arrastrados. Tambin se justifica por la anterior expresin que, si la codestilacin acuosa se realiza a menor presin que la atmosfrica, la proporcin de agua en el condensado sera mayor, siendo adems el aceite arrastrado ms rico en componentes voltiles; cuando se quieren aislar componentes muy fijos es necesario operar a presin superior a la atmosfrica, y por esto se aplica vapor sobrecalentado.

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2.2.2. Sistema inmiscible

Cuando se mezclan dos componentes totalmente inmiscibles entre s, cada uno de ellos se comporta como si no estuviera en presencia del otro, de tal modo que las presiones de vapor de ambos componentes, a una temperatura determinada, son iguales a las tensiones de vapor de las sustancias puras a la temperatura en cuestin. De aqu se deduce que la temperatura de ebullicin de una mezcla inmiscible es ms baja que la de cualquiera de los componentes, siendo independiente de la composicin de la mezcla, ya que esta hierve cuando la suma de las presiones de vapor de los componentes puros es igual a la presin que soportan. La composicin de los vapores producidos en la ebullicin de estas mezclas es constante e independiente de la composicin del lquido, recibiendo el nombre de hetereoazeotropo, el punto definido por esta composicin. 2.2.3. Teora de la destilacin intermitente por vapor

La destilacin es el mtodo utilizado con ms profusin para preparar esencias naturales, y casi el ms antiguo produciendo simultneamente aceites esenciales y las llamadas aguas aromticas de mucho inters en ciertos casos particulares constituidas por las aguas de condensacin saturadas de aceites esenciales. Se puede definir la destilacin fraccionada como la separacin de dos o ms sustancias, basadas en las diferencias existentes entre sus tensiones de vapor. Dichas sustancias pueden ser, o no, miscibles total o parcialmente, comportndose sus tensiones parciales de vapor en uno y otro caso en forma diferente. La mezcla de varios gases perfectos sigue la Ley de Dalton; segn ella, la presin total de la mezclas es la suma de las presiones que cada masa de gas tendra al ocupar, a la misma temperatura, el volumen total ahora ocupado por la mezcla gaseosa. Otra forma de exponer otra ley, equivalente a la anterior, es que si se juntan varias masas de gases perfectos todas mantenidas a igual

temperatura y presin, de manera que la presin total resultante de la mezcla


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contine igual a la presin primitiva de cada uno de ellos, entonces la masa de gases tendra que ocupar un nuevo volumen. Suma exacta de los volmenes ocupados primitivamente por cada gas. Si consideramos un sistema heterogneo formado por dos lquidos no miscibles, tales como el agua y un aceite esencial, los vapores emitidos por cada uno de ellos no se influyen al no presentar afinidades mutuas sus molculas gaseosas y por tanto, sus tensiones de vapor se adicionan totalmente; al ir calentando dicho sistema heterogneo llegara un momento en el cual la tensin de vapor se iguale a la presin ejercida sobre la superficie libre de ambos lquidos y entonces el sistema entrar en ebullicin. La tensin parcial de cada vapor es en este momento inferior a la presin externa, de forma que los lquidos se encuentran hirviendo a temperatura inferior a su punto de ebullicin, bajo la presin actual. Comparemos ahora la marcha de ebullicin en ambos tipos de sistemas. Cuando la suma de las tensiones parciales de vapor en un sistema heterogneo se iguale a la presin ejercida sobre la superficie libre, ya hemos visto que el sistema entra en ebullicin; por no influirse mutuamente, cada tensin parcial depender solamente de la temperatura a que el sistema se encuentra, y no de las proporciones presentes de ambos componentes, de forma que la ebullicin continuar inalteradamente mientras se encuentren presentes los dos lquidos. Como consecuencia de lo expuesto, todo lquido no miscible con el agua puede ser arrastrado por aquella hirviendo a temperatura ms baja que su punto de ebullicin, y de todo sistema homogneo es posible aislar sus componentes por destilacin seca, siempre que haya suficiente diferencia entre sus tensiones de vapor (al menos har falta una diferencia de 3-5 entre sus puntos de ebullicin para poder separarlos mediante una destilacin). Cuando la diferencia es pequea, se hace necesario volver a destilar, partiendo del lquido ms rico en voltil obtenido en la primera destilacin, y repetir el proceso hasta conseguir el resultado buscado. Al tratar de los sistemas heterogneos hemos supuesto que uno de los componentes es el agua y el otro un aceite esencial, pero estas consideraciones son aplicables a todos los dems casos en que se emplee una sustancia donde la esencia sea insoluble; generalizando estos arrastres reciben el nombre de
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codestilaciones y son de gran inters. La codestilacin acuosa se utiliza para aislar los aceites esenciales. Es el mtodo ms comn de separar los aceites esenciales del material vegetal o de la planta, puede realizarse a presiones superiores o inferiores a la atmosfrica, se prefiere este mtodo en virtud a que las esencias son insolubles o muy poco solubles en agua. Si los lquidos son completamente insolubles, la presin de vapor de cualquiera de los componentes no pueden ser modificados por la presencia del otro, por lo tanto todo lquido no miscible con el agua puede ser arrastrado por aquella hirviendo a temperaturas ms bajas que su punto de ebullicin.

2.2.4. Tipos de destilacin intermitente por vapor

La destilacin con vapor de agua es el mtodo ms comn de separar los aceites esenciales del material de la planta. La expresin destilacin con vapor, el aceite esencial mediante la accin trmica, fisicoqumica e incluso qumica del vapor de agua abandona fcilmente la materia vegetal y en segundo lugar, porque aquel, una vez aislado, destila a temperatura muy inferior a su punto de ebullicin. Si en vez de este arrastre se realizara una destilacin seca slo estara originando su aislamiento por el calor y descomposicin de material vegetal. Tal como se aplica actualmente en la industria de aceites esenciales abarca tres tipos de Hidrodestilacin o codestilacin.

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Figura 3. Destilador para extraccin con corriente de vapor.

Fuente: Garca.

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Figura 4. Destilador para extraccin por arrastre de vapor.

Fuente: Garca.

2.2.4.1. Destilacin con agua

En este procedimiento el material vegetal est en contacto directo con el agua hirviendo en el hidrodestilador; el calor se aplica por los mtodos usuales (generador de vapor, alambique, destilador, etc). En este mtodo es mxima la accin qumica del agua sobre el material (hidrlisis, oxidaciones)
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y por ello se utiliza cuando la esencia a obtener procede de glucsidos inodoros. El material deber de estar dividido y cubierto totalmente de agua, siendo lo mejor hacer que ocupe unos 10 - 15 cm. De altura y agregar luego agua hasta que sobrepase al material en unos 5 cm. Se debe cargar en forma apropiada, para que la difusin del vapor sea mxima; suele trabajarse a la presin atmosfrica, debindose tener mucho cuidado para que el material no se queme ni el agua se agote. La velocidad de destilacin es baja, debindose poner el agua ya caliente para evitar retrasos de tiempo y aumentos de la hidrlisis. La calidad del producto obtenido depende del cuidado seguido en la operacin, especialmente si se usa fuego directo. El agua condensada debe redestilarse en algunos casos, mientras que en otros interesa devolverlas automticamente hidrlisis. a la caldera, arrastrando consigo los productos de la

VENTAJAS:

Esta destilacin es necesaria si el material tiende a apelmazarse; y si son expuestos al vapor, forman una masa gelatinosa del cual no se puede recuperar el aceite.

La destilacin en algunos materiales de madera tales como la canela, la inmersin en agua hirviente facilitara la difusin del aceite fuera de los tejidos de la planta.

DESVENTAJAS:

No es posible mantener un calentamiento uniforme, de tal manera que el rgimen de destilacin varia. La destilacin es lenta, los aceites estn expuestos al agua en ebullicin por mucho tiempo y esto puede causar cambios no deseables en el aceite.

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2.2.4.2. Destilacin con agua - vapor

No se alcanza por este sistema grandes temperaturas; corresponde a la destilacin con vapor de baja presin y produce muy pocas

descomposiciones. Se basa en colocar el material a destilar sobre un falso fondo que lo asla del agua, haciendo hervir esta con fuego directo, vapor en camisa o serpentn. De esta forma el agua desprende vapores siempre saturados y, en cambio, la hidrlisis es mnima por no encontrarse el

material en contacto con los vapores ms tiempo que el justamente necesario. Sus instalaciones no son muy complicadas, pero tampoco son tan simples como en la destilacin con agua, pueden montarse en el campo los tipos ms sencillos como son los calentados a fuego directo, y representa un tipo interesante para destilar hojas y hierbas.

El material ha de tener tamao uniforme, pero no habr de molerse demasiado, dando buen resultado la granulacin. Trabaja cerca de los 100C, cuando lo hace bajo 1 atm de presin y el rendimiento en aceite esencial es bueno a no ser que ocurra apelmazamientos; se puede usar de nuevo en muchos casos, el agua del alambique, tambin es posible que refluyan al fondo las disoluciones del productos solubles en agua que, en contacto con las paredes calientes, se vayan quemando. Para cargarse normalmente el material a baja temperatura se producen condensaciones sobre l con mucha originando una cierta

frecuencia, y esta humedad aglomera al material

dificultad; se lucha contra ello intercalando palos secos al hacer la carga. La velocidad de trabajo no es muy grande, requiriendo mucho tiempo para el arrastre las esencias ricas en componentes de alto punto de ebullicin.

VENTAJAS:

El mtodo es extremadamente usado porque se puede recuperar el aroma del agua condensada en una primera destilacin, al utilizar esta nuevamente para producir vapor.
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Es el ms conveniente para aquellos que exploran las posibilidades de produccin de aceites esenciales, evaluando varias cosechas posibles para el corto tiempo que dura el proceso.

DESVENTAJAS:

Por cargarse normalmente el material a baja temperatura se producen condensaciones sobre el con mucha frecuencia, y esta humedad aglomera al material originando una dificultad.

La velocidad de trabajo es lenta lo que requiere mucho tiempo para el arrastre para esencias ricas en componentes de alto punto de ebullicin.

2.2.4.3. Destilacin con vapor directo

Este tipo de destilacin es semejante al anterior salvo que no haya agua en el fondo del hidrodestilador. Se hace pasar en ella vapor seco a travs del material vegetal colocado en columnas o cestones; el vapor tiende a recalentarse en virtud de la resistencia opuesta a su paso por el material, y esto debe evitarse ya que el mayor inconveniente del mtodo se basa en que cuando estn secas las membranas celulares no son apenas permisibles y el aceite no puede salir al exterior. Si el hidrodestilador no est revestido con material aislante, se forma mucho condensado; sin embargo hay suficiente vapor para facilitar que el aceite esencial salga de los tejidos. La difusin osmtica es muy escasa en este tipo de tratamiento interesando en ciertas ocasiones hmedo en pequea cantidad. La instalacin para este mtodo es muy costosa, pero presentan mucha mayor capacidad de produccin. El material se puede cargar de cualquier forma, pues slo presentan inconvenientes en este sistema los polvos, por su tendencia al apelmazamiento; va muy bien para semillas, maderas y races, cuyos componentes de alto punto de ebullicin se arrastran as fcilmente. La difusin osmtica es muy escasa en este tipo de tratamientos, interesando en ciertas ocasiones inyectar primero vapor hmedo en pequea cantidad;
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inyectar primero vapor

una de sus mayores ventajas es que puede trabajarse bajo las condiciones deseadas de presin y temperatura. El rendimiento suele ser bueno, especialmente si el material ha sufrido previamente una trituracin apropiada y la calidad obtenida es francamente buena.

VENTAJAS:

Es un mtodo corto, esto minimiza la descomposicin de constituyentes sensibles tales como los steres. Es apropiado para la destilacin a gran escala, por su proceso rpido de igual manera que variado y cargado de material

DESVENTAJAS:

Si no se regula la calidad del vapor, la humedad con el material pueden evaporarse y el aceite no liberarse de los tejidos.

2.2.5. Accin del vapor sobre la materia vegetal

2.2.5.1. Influencia sobre el tipo de materia prima

Los componentes olorosos se hallan situados en glndulas odorferas existentes dentro o fuera de las clulas vegetales; ambas posibilidades se diferencian histolgicamente, pero en el mecanismo de extraccin es muy similar en ambos casos.

El calor y el vapor del agua, sobre todo estando hmedo este, hinchan las paredes celulares y facilitan el paso de los aceites esenciales al exterior, por osmosis, influyendo favorablemente la cantidad de agua presente por ser soluble en ella a esta temperatura parcialmente, los aceites esenciales, y por atravesar esta disolucin mucho ms fcilmente las paredes vegetales

humedecidas, por el vapor; se comprende as que las esencias obtenidas por este mtodo tengan ms componentes solubles en el agua que otra.
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Por el contrario la humedad del vapor es perjudicial para gran nmero de aceites esenciales a causa de su accin hidrolgica sobre los steres, que generalmente constituyen la parte ms noble de la esencia.

Si el arrastre se hace con agua hirviente, la temperatura del tratamiento depender de la presin atmosfrica del momento, pero si interviene vapor depender solamente de la presin a que este trabaje.

2.2.5.2. Resistencia al paso del vapor

El aceite esencial no est distribuido por igual en el material de la planta, si no que se hallan en muchas pequeas glndulas de aceite, sacos oleferos o pelos glandulares. Para que el vapor se ponga en contacto con el aceite hay que desgarrar los tejidos y hay que romper la membrana de las glndulas o hacer que el aceite se difunda a travs de esas membranas. Este proceso complejo de difusin y de osmosis recibe el nombre de

hidrodifusin. Otro factor es la solubilidad relativa de cada componente del aceite del hidrodestilado.

La destilacin con vapor recalentado tiende a impedir la hidrodifusin, la destilacin en agua la facilita.

La apropiada preparacin del material es de gran importancia produccin de aceites.

en la

En muchos casos, es importante cargar uniformemente el hidrodestilador para evitar la formacin de canales de vapor con la resultante disminucin del rendimiento de aceites. Los aceites ms solubles requieren con frecuencia destilaciones repetidas de las aguas de destilacin con nueva cantidad de materia vegetal, con el fin de evitar el recalentamiento y obtener un aceite de buena calidad. Los aceites que tienen una densidad aproximada a la del agua requieren una batera de frascos Florentinos para suficiente separacin de los dos lquidos condensados.
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2.2.5.3. Influencia de difusin osmtica

Los componentes olorosos se hallan situados en glndulas odorficas existentes dentro o fuera de las clulas vegetales; ambas posibilidades se diferencian histolgicamente, pero el mecanismo de extraccin es muy similar en ambos casos. El calor y el vapor del agua, sobre todo estando hmedo este, hinchan las paredes celulares y facilitan el paso de los aceites esenciales al exterior, por osmosis, influyendo favorablemente la cantidad de agua presente por ser soluble en ella a esta temperatura parcialmente, los aceites esenciales, y por atravesar esta disolucin mucho ms fcilmente las paredes vegetales humedecidas por el vapor.

En la destilacin con vapor la difusin osmtica es muy escasa en este tipo de tratamiento, interesando en ciertas ocasiones inyectar primero vapor hmedo en pequea cantidad; una de las mayores ventajas es que puede trabajarse bajo las condiciones deseadas de presin y temperatura.

2.2.5.4. Flujo ptimo de vapor

El flujo ptimo de vapor es un valor difcil de conseguir, es la cantidad de vapor, capaz de vencer las prdidas (reflujos), que ocasionan las prdidas del alambique, y capaz de arrastrar el aceite contenido en la materia prima (hojas, semillas, etc).

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2.3. ACEITES ESENCIALES

2.3.1. Generalidades

Los aceites esenciales son mezclas de compuestos qumica y fsicamente diferentes, odorferas y de naturaleza oleosa. Obtenida por un proceso fsico sobre un material vegetal generalmente lquidos a temperaturas ordinarias, insolubles en agua. Solubles en alcohol en diversas proporciones en su mayor parte ms livianos que el agua incoloros o ligeramente coloreados, lmpidos y voltiles su olor y sabor corresponden a las de la parte vegetal del cual provienen. Llamados tambin aceites voltiles, etreos o esencias estn constituidos predominantemente por compuestos hidrocarbonados usualmente llamados terpenos y sesquiterpenos que actan como soporte de sus derivados oxigenados, aldehdos, alcoholes, cetonas y esteres a los cuales se debe preponderadamente el perfume de los aceites. GIUSSEPE (19), indica tambin que conforman residuos no voltiles constituidos principalmente por cumarinas, ceras de naturaleza parafnicas y cidos grasos. Desde el punto de vista qumico, es incorrecto llamarlos aceites a estas sustancias. El nombre adoptado en aquellos das en que los compuestos se clasificaban en base a un limitado estudio qumico y de acuerdo a sus propiedades fsicas; pues como se descubri ms adelante difieren en su composicin y propiedades de los aceites vegetales que se componen de glicridos y de los aceites minerales que se constituyen principalmente de hidrocarburos. Para dar mayor estabilidad contra la oxidacin y la resinificacin, que comprende en la expulsin de los terpenos y sesquiterpenos. El aceite esencial concentrado lo componen por lo tanto sustancias oxigenadas que son las que

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tienen mayor solubilidad en alcohol diludo (eleva la solubilidad en agua) y principalmente son portadores de aroma. La alteracin por accin del tiempo constituye la oxidacin ocasionado por el oxgeno del aire y es acelerado por la luz; por ello su almacenaje deben ser en recipientes hermticos que dificulten el paso de la luz total o parcialmente. KRILJENKO (20), Existen mtodos generales de desterpenacin y

sesquidesterpenacin, entre los que destaca la destilacin fraccionada al vaco, donde se suele fraccionar en cuatro partes: los que destilan primero son los terpenos, lo siguiente constituyen los compuestos oxigenados, la tercera los sesquiterpenos y la ltima los residuos no voltiles; con este mtodo es casi imposible la separacin completa de los sesquiterpenos. Existe hoy un nuevo mtodo que est basado en los principios de absorcin cromatogrfica. 2.3.2. Gnesis de las esencias vegetales

GARCIA (18), Slo aparecen sustancias odorficas en los rganos jvenes, los cuales van paulatinamente produciendo y almacenando cada vez menos cantidad de esencia, hasta llegar a la floracin, momento en el cual parece que la esencia es difundida por el tallo y hojas hasta la flor; al quedar sta fecundada, consume parte de dicha esencia y una vez acabada la semilla, el sobrante desciende de nuevo al tallo para difundirse por otros rganos. Las clulas productoras de esencia, en cuyo interior puede observarse

microscpicamente la gota de aceite no integrado por glicridos, pertenecen a las glndulas interiores o exteriores; en este ltimo caso suelen ser clulas epidrmicas (pelos secretores) que acumulan la secrecin entre la cutcula de la epidermis y el resto de las paredes celulares, mientras en las glndulas interiores suele depositarse la esencia segregada entre las paredes celulares. Los pelos secretores pueden estar formados por una sola clula sencilla, alargada, o por varias alargadas y superpuestas, colocadas unas al lado de las otras. Cuando el pelo est integrado por varias clulas, la terminal suele ser muy aguda, aunque a veces sea globular y dividida por varias membranas. Otras clulas secretoras exteriores se encuentran situadas en el parnquima o epidermis de las yemas. Las glndulas interiores son de dos tipos:
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Esquizognicas cuando al engendrarse por subdivisin queda entre las clulas un espacio destinado a recoger la secrecin y lisinognicas cuando este espacio o bolsa se forma por disolucin de algunas clulas en las secreciones formadas. Si en estos espacios se forman varias capas de clulas, constituyen canales en vez de bolsas. Tschirch (21), suponen que las esencias naturales se forman en los vegetales a expensas de las membranas celulares, sufriendo estas una especie de gelatinizacin para luego desdoblarse en sustancias mucilaginosas y esencia. En las glndulas esqugnicas se forman las esencias en las clulas que bordean la bolsa o canal, apareciendo primero en dichas bolsas y ms tarde dentro de las clulas secretoras. Las partes externas de las membranas correspondientes se hacen mucilaginosas rpidamente y luego aceitosas proceso que continua hasta que la glndula o canal secretor se encuentra totalmente rodeada por estas capas, llamadas resingenas por Tschirch (21) y que, segn el mismo autor, estn separadas por el propio canal por una fina cutcula. Esta capa resingena forma la esencia, que se aglomera luego en gotas dentro del canal secretor o bolsa. En las glndulas lisinognicas tambin hay capas resingenas que funcionan de igual forma, pero estas glndulas suelen formarse slo patolgicamente. Tambin se ha atribuido la formacin de las esencias en los vegetales a la funcin cloroflica, por producirse menores cantidades de esencia cuando la planta se encuentra resguardada de la luz y por formar parte de la clorofila del fitol, alcohol sesquiterpnico que podra ser el origen de otros cuerpos terpinoideos, puntos de partida para diferentes familias de componentes. Ya pens Mesnad (22) en este origen el ao 1894 suponiendo que las esencias son producidas en la degradacin de la clorofila, localizndose luego en la superficie interna de la epidermis. Charabot y Laloue (23) han demostrado la formacin de algunas esencias dentro de los cloroplastos, a consecuencia de la asimilacin de la clorofila especialmente los steres deben formarse bajo la accin de la luz, facilitndose el desprendimiento de agua por las mismas causas que se facilita la funcin cloroflica, deshidratacin facilitada por ciertas diastasas. La circulacin de la esencia a travs de la planta se facilita por la formacin de ciertos
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glucsidos que, una vez llegados a la flor, son hidrolizados para consumirse in situ el glcido y quedar libre el aglucn, origen del olor floral. Por ejemplo: las partes no odorferas del rosal contienen el mismo glucsido que los ptalos, pero en ellos estn ausentes (al menos en la cantidad necesaria) los enzimas hidrolizantes que liberan las esencias; tambin es posible la presencia de ambos, glucsido y enzima, en clulas distintas, por lo cual se dificulta o impide su interaccin. Langlais y Bollinger (24) han llegado a realizar la hidrlisis artificial de estos glucsidos, aumentando as el rendimiento de las flores en esencia. Por ejemplo en aquellas flores que, como el jazmn, continan dando esencia despus de arrancadas de la planta, emiten su olor por este mecanismo, facilitndose la emisin de nuevas cantidades de esencia por el desplazamiento hacia la derecha del equilibrio: Glucsido + agua glcido + esencia

2.3.3. Quimismo biogentico de las esencias vegetales.

Braverman (25) an no se conoce exactamente el mecanismo qumico segn el cual se forman las esencias en las plantas, mecanismo que habr de ser muy complejo y casi imposible de reducir a leyes generales, como se comprende al ver que, excepto algunas esencias tales como las de almendra amarga, lemongras y gaulteria, la mayor parte contiene 50 y hasta 100 cuerpos qumicos; de ellos slo son bien conocidos un corto nmero, por entrar los dems en proporciones muy reducidas. Siempre es posible, no obstante, encontrar entre los constituyentes algn parentesco qumico; por ejemplo: se pueden obtener a partir del linalol, in vitro los siguientes cuerpos: acetato (y otros esteres) de linalilo, dipenteno (o limonenos) geraniol, nerol, terpineol cineol, citral, citronelol metilheptenona, mirceno y ocimeno, siendo corriente su coexistencia con el linalol en productos naturales, lo que viene a demostrar la posibilidad de su transformacin in vivo. Una de estas familias de componentes puede coexistir con otra, como es el caso del ylang-ylang, en cuya esencia adems de la serie benclica se han reconocido varios fenoles relacionados entre s. Otra dificultad para sealar el proceso qumico formativo de las esencias naturales se
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encuentran en los cambios de composicin que pueden experimentar durante su permanencia y separacin de la planta, aislamiento, etc. Morel (26) seala que los esteres, uno de los componentes ms estables, sufren en la planta y durante el aislamiento de la esencia fenmenos tales como interesterificaciones, transposiciones de Beckmann o de Wagner-Meerwein, inversiones Walden (los ismeros pticos presentan olores diferentes, caso muy estudiado en el mentol, cuya forma levgira huele de 3,3 a 3,5 veces ms que la dextrgira, diferencindose sus olores cuando se encuentran diluidos en el aire a concentraciones inferiores a los 16g por litro), emigraciones de radicales, impedimentos estricos y alcoholisis. STRAUSZ (27) tambin son posibles dentro de la planta los fenmenos propios del envejecimiento, que, unidos a los anteriormente citados, pueden determinar las diferencias existentes entre las esencias originadas en diferentes lugares geogrficos. Los esqueletos hidrocarbonados de los productos tratados pueden reunirse, biogenticamente, en cuatro grupos: cadenas lineales ms o menos saturadas, derivados del benceno, cuerpos terpnicos o terpenoideos, esqueletos varios, de orgenes diversos explicables con suposiciones especiales. Las cadenas lineales proceden de los cidos formados en las

descomposiciones protenicas, y los derivados del benceno o del isopropilbenceno se forman a partir de los glcidos; los terpenos presuponen

procesos ms complejos que sern expuestos ms adelante. Entre ciertos componentes existen relaciones de homologa; en los concretos de extraccin con disolventes voltiles se encuentran ceras formadas por alcoholes grasos superiores, del C24- C36, esterificados con cidos grasos tambin de nmero par de tomos de carbono, junto con hidrocarburos de nmero impar. La coexistencia de estos homlogos se debera a un proceso de -oxidacin en el cul el -cetocido puede descarboxilarse para originar una cetona, o bien oxidarse para dar cido actico junto a otro -cetocido con dos carbonos menos que en el cuerpo primitivo. El primer caso ocurre en el castoreum, donde coexisten la acetofenona y el cido fenilproplico que la origin, y en el almizcle, pues al formarse la
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muscona a partir del cido metilpalmtico, aparece una -metilcetona. El

segundo caso aparece en la esencia de la raz de lirio, donde se ha reconocido una larga serie de cidos grasos (caprlico, pelargnico, cprico, undeclico, lurico, trideclico) en forma anloga a la esencia de menta japonesa (con los cidos frmico, actico, valerinico, caproico y, probablemente, el

pelargnico) y a la menta del Brasil (donde han aparecido el metanol, etanol, nbutanol, pentanol e isobutil-carbinol). En cuanto a la aparicin de grupos funcionales, se sospecha que los alcoholes se forman en los cloroplastos, as como sus esteres, procediendo generalmente los cidos de descomposiciones protecas o de oxidacin glucdicas. Los hidrocarburos deben formarse a partir de los alcoholes, tambin en el interior de los cloroplastos, los aldehdos por oxidacin de los alcoholes en las inflorescencias (las cetonas posiblemente por igual camino) y los fenoles por desdoblamientos protenicos a partir de los cidos aromticos. Siempre son posibles, adems las transformaciones por xido-reducciones, isomerizaciones, etc., de un cuerpo en otro similar, es corriente encontrarse junto a un cierto alcohol, por ejemplo: el aldehdo, cetona, cido o esteres correspondientes. Para explicar la gnesis de los terpenos, los componentes de las esencias ms abundantes y de estructura ms complicada, es necesario tener presente que: a) Estructuralmente los terpenos estn constituidos por varias cadenas en C5 ramificadas, presentando una periodicidad caracterstica. b) Estas cadenas se encuentran unidas por sus extremos en la mayor parte de los casos. c) La oxidacin, reduccin, emigracin de dobles enlaces y polimerizacin ocurren con cierta frecuencia y facilidad. d) Los terpenos van acompaados frecuentemente de derivados propilbencnicos e hidrocarburos de cadena lineal.

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2.3.4. Distribucin de las esencias en las plantas

GARCIA (18), no puede sealarse ninguna regla general, y este es uno de los motivos por los cuales no se conoce el papel biolgico de las esencias vegetales. En algunas especies se encuentra distribuidas por todo el individuo, sin apenas variar la composicin qumica, pero en otros son extraordinariamente diferentes los productos obtenidos de distintos rganos. Por este motivo, en unas plantas se tratan los individuos enteros, mientras en otras slo se tratan los rganos ricos en esencia o productores de las esencias ms interesantes. 2.3.5. Factores que afectan el contenido del aceite.

2.3.5.1. Influencias externas sobre la composicin de las esencias. GARCIA (18), Las condiciones que ms intensamente determinan la gnesis de la esencias en las plantas son: suelo, luz, humedad y enfermedades producidas por los insectos; tanto influyen todas, que se citan modificaciones de las composiciones slo por cambios de suelo. La luz modifica la forma y tamaos de los canales secretores y estimula la funcin cloroflica, alterando la proporcin de esencias y su composicin terpnica. El almacenaje durante unas horas antes del tratamiento, aun tomando precauciones puede causar serios perjuicios. Por ejemplo: el aceite esencial de la nuez moscada decrece en un 33% si se almacena la nuez durante tres horas, llegando a un 55% si se almacena seis horas a la sombra y hasta 62% durante seis horas al sol. 2.3.6. Clasificacin de los aceites esenciales

Los aceites esenciales se clasifican:

2.3.6.1. Por su origen

a) Esencias naturales: Son los que se obtienen directamente de la naturaleza, generalmente son de origen vegetal, tambin pueden ser de origen animal.
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Pueden ser productos de secrecin como tambin de algunos estados patolgicos. b) Esencias sintticas: Son productos de sntesis orgnica, pueden obtenerse por transformacin de los compuestos obtenidos de diversas esencias o por sntesis directa. Prescindiendo de la naturaleza, son muy empleadas en perfumera.

c) Esencias artificiales: Son mezclas de las dos anteriores; son de aroma anlogo al de las esencias naturales.

2.3.6.2. Por el Origen de la materia prima natural

a) De origen vegetal: La agrupacin de los aceites esenciales, con vista al empleo como materia prima se agrupan de la siguiente manera.

Tabla 5. Clasificacin por flores, plantas y agrios

Esencias de los Esencias florales Agrios Cidra Lima Limn Mandarina Naranjo amargo Naranjo dulce Toronja Clavel Jacinto Jazmn Lilas Lirio Madre selva Mimosa Narciso Retama Rosa Violeta

Esencias de Plantas Albahaca Hierba buena Lavanda Menta Organo Romero Salvia Tomillo Geranio Manzanilla Mirto Ruda

Fuente: GRIGNARD Y WATSON

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Tabla 6. Clasificacin por granos, semillas, especies, maderas, cortezas, raices y hojas

Esencias de Granos Semillas y Especias Ans Apio Cilandro Clavo Comino Haba Hinojo Molle Nuez Moscada Perejil Pimienta Pimiento Vainilla Zanahoria Uva

Esencias de Maderas, Cortezas, Races y Hojas Abedul rnica Calamo Canela Cedro Ciprs Enebro Eucalipto Hierba luisa Laurel Mua Cerezo Pino Palo Rosa Lirio Pino Sndalo Valeriana

Fuente: GRIGNARD Y WATSON

b) De origen Animal: mbar, Civeta.

2.3.6.3. Por su composicin elemental.

Segn GRUNFELD (28):

a) Esencias pobres en oxigeno: (Ricos en terpenos) entre las que tenemos las de trementina, limn, romero, eucalipto, laurel, naranja y mandarina.

b) Esencias ricas en oxigeno: Como de ans, hinojo, comino, menta, manzanilla, rosas, violeta, etc.

c) Esencias nitrogenadas: Como Berro, Mastuerzo, y capuchino.

d) Esencias sulfonadas: ajo, cebolla y mostaza.

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2.3.6.4. Por su punto de ebullicin.

Se pueden agrupar en tres grupos.

Tabla 7. Esencias voltiles

Grupo 1 Ans Bergamota Cidra Lima Linloes Mandarina Naranja a. Niaouli

Grupo 2 Badiana Ciprs Eleni Espliego Eucaliptus lobulus Gautera Hinojos Hisopo Lavandas Lavandin Limn Mejorama Naranja dulce Nuez moscada Salvia

Grupo 3 Alcavaren Almendra amarga Anglica Cilandro Enebro(bayas) Hierbabuena Laurel Lemongras Menta piperina Petigrain Pimienta Ruda

Fuente: GARCIA.

Tabla 8. Esencias medias

Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Albahaca Bay Cedro Calamo Citronela Ceiln Citronela Java Cardamomo Estragon Clavo Cayepu Galbanun Jazmn (abs.) Comino Geranio Mimosa Jengibre Lirio (abs.) Opopnax (ac. es.) Lavanda(abs) Neroli/Big (ac. es.) Palm rosa Melisa Organo Perejil Mirra Pino (agujas) Pimiento Mirto Romero Rosa Poleo Rosa de Mayo Sasafrs Salvia Esclarea Rosa de oriente Tomillo Verbena
Fuente: GARCIA.

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Tabla 9. Esencias fijas

Grupo 1 Amarilla Benju Cananga Canelas Clavel Estoraque (ac. es.) Incienso (ac.es) Jacinto(abs.) Junquillo Labdanun(ac. es.) Naranjo(abs.agua) Narciso(abs) Nardo Opoponax res. abs) Yang-ylang

Grupo 2 Abedul Almiscle(res) Ambar/gris(res) BalsamoPeru (bals) Cassie(abs) Castoreum (res) Estoraque(res) Guayaco Labdanum(res. Abs) Lirio Naranjo(flor) Pachul Vainilla Vetiver Violeta (hojas)

Grupo 3 Apio Blsamo Tol(bals) Civera (res) Civeta Costus Haba tonca Muzgo.encina(abs) Sndalo

Fuente: GARCIA.

2.3.7. Composicin de los aceites esenciales.

KIRK (29), la mayor parte de los aceites esenciales estn compuestos de terpenos, sustancias oxigenadas, sesquiterpenos y pequea cantidad de residuos no voltiles. Es posible entonces dividirlo en dos grandes grupos de compuestos orgnicos: los que solamente contienen carbono e hidrgeno y los que contienen carbono hidrgeno y oxgeno. Existen muy pocas excepciones como son: isocianatos orgnicos, disulfuros orgnicos y algunas aminas.

1. Los compuestos que contienen carbono e hidrgeno. Se han encontrado los siguientes hidrocarburos: alcanos, olefinas, hidrocarburos aromticos, terpenos (olefnicos, monocclicos y bicclicos, sesquiterpenos, alifticos, monocclicos, bicclicos y tricclicos, diterpenos y azulenos). Los de mayor importancia lo constituyen los terpenos sesquiterpenos que se encuentran en proporciones significativa en algunos aceites esenciales.

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2. Compuestos que contienen carbono, hidrgeno y oxgeno. Estos son los componentes del cual dependen las grandes diferencias de olor observadas en varios aceites esenciales. Esta comprende: alcoholes, aldehdos, cetonas y steres que pueden ser saturados, alifticos y aromticos, terpnicos y sesquiterpnicos. Otros componentes importantes son: fenoles,

esteresfenlicos, cidos esterificados, lactonas steres y cumarinas, de menor importancia son los derivados fumricos, las cumaronas y las quinonas. En algunos aceites esenciales predomina en mayor parte un compuesto qumico, as por ejemplo: el salicilato de metilo constituye 98% del aceite de abedul caoba, el anetol 90%, del aceite de ans, el linalol 85% el aceite de palo de rosa, el safrol 80% del aceite de sasafrs; en cantidades aproximadas.

2.3.8. Usos de los aceites esenciales

TORRES A (17), los usos de los aceites esenciales son muy diversos entre los ms importantes los tenemos: Por ejemplo: es muy usado en la composicin de sabor y en menor escala en perfumes. Combinado adecuadamente puede ser usado para imitar al limn, lima, naranja, toronja, cereza, etc. La concentracin del aceite es de 40 ppm pero puede ser aumentada hasta 160 ppm para gomas de mascar, otras concentraciones son 9.2 ppm para bebidas no alcohlicas. En nuestro medio es usado en las bebidas gasificadas (aceite esencial de hierba luisa) y medicinales (aceite esencial de eucalipto); en otros pases el uso directo es muy amplio, abarcando la lnea de jabones, alimentos y bebidas. Por tanto puede ser usado en las diversas Industrias de los combustibles, cosmticos, repelentes, alimentara, artesanal y pinturas.

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Figura 5. Usos de los aceites esenciales.

Fuente: Torres A.

2.3.9. Estabilizacin de los aceites esenciales

2.3.9.1. Uso de Desecantes

VITALE (30), los desecantes pueden clasificarse en: 1. Desecantes de accin qumica y 2. Desecantes de accin fsica. Los ms usados en el desecado de aceites esenciales son los de accin qumica en especial los que fijan el agua como agua de cristalizacin y son regenerables por calentamiento. Ejemplo: cloruro de calcio, sulfato de sodio, perclorato de magnesio. Cabe destacar al sulfato de sodio anhidro (usado para anlisis), semejante al sulfato de magnesio, es un desecante inerte, de actividad moderada. Adecuado para el secado de compuestos sensibles, como cidos grasos, aldehdos, cetonas, halogenuros de alquilo y de arilo y aceites esenciales por su composicin qumica.

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2.3.9.2. Uso de Antioxidantes

REEVES (31), menciona a Lundberg que manifiesta que la deterioracin de los aceites esenciales ha sido atribuida a reacciones de oxidacin, polimerizacin, hidrlisis y resinificacin. Sin embargo, hasta ahora no es evidente que la oxidacin por aire sea similar a la auto oxidacin en las reacciones primarias orientadas a su deterioracin. As mismo, se reporta que la cadena principal de las reacciones de deterioracin se debe a la oxidacin, y que por ello puede ser evitado por el uso de antioxidantes. Los antioxidantes encontrados efectivos en los aceites esenciales son: el NDGA, L-tocoferoli, etil y propil galato, BHA, Hidroquinona, Catecol y principalmente BHT-BAYER (Butil hidroxi

tolueno C15H24O) que es un compuesto no higroscpico y no txico. Adems un nmero de extractos acuosos y alcohlicos de plantas han sido patentados como antioxidantes actan sinergicamente, esto es, dos o ms en combinacin proporcionan una mayor proteccin contra la mayor oxidacin que la que podra esperarse del efecto de cada uno de ellos emplendolo slo. Se da el nombre de sinrgista a las sustancias, como el cido fosfrico, el cido ctrico, el cido ascrbico y la cefalina, que no tienen propiedad antioxignica cuando se utilizan solas, pero refuerzan la accin antioxidante de otras sustancias.

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2.4. ACEITE ESENCIAL DE SCHINUS MOLLE L.

2.4.1. Antecedentes

Existen muchos estudios sobre el aceite esencial de Schinus molle l., en el extranjero y en nuestro pas, como puede verse en la literatura, generalmente fue realizada por estudiosos bioqumicos y farmacuticos, recientemente hace dos dcadas fue visto su posible utilizacin con criterio industrial.

2.4.2. Propiedades del aceite esencial del Schinus molle l.

MARTINEZ (16), obtuvo aceite esencial del fruto de molle por el mtodo de arrastre de vapor en laboratorio, con un rendimiento promedio de 2,73%, teniendo en cuenta la altitud sobre el nivel del mar.

Tabla 10. Rendimientos de extraccin por arrastre con vapor.

Lugar Vitarte Ricardo Palma y Matucana Huanta

Rendimiento (%) 2.59 3.35 2.55

Fuente: Martnez. Tabla 11. Propiedades fisicoqumicas encontradas.

Propiedad Gravedad Especfica Poder Rotatorio a 20C ndice de Refraccin


Fuente: Martnez

Rango 0.8473 +0.49245 1.4956

Propone como componente principal al mirceno, 8% fenoles y otro cuerpos aromticos no identificados en menor cantidad, sustancias terpnicas 22% y 15 el ndice de irritabilidad. Reporta los siguientes principios activos: cido actico y saliclico, fenoles, carvacrol, alcoholes y cetonas. MONTES, A., Y BANDINELLI, C., (32) Utiliz bayas trituradas para el

mtodo por arrastre de vapor obteniendo los siguientes resultados:


48

Tabla 12. Propiedades fisicoqumicas encontradas del aceite esencial de molle.

Propiedad Aspecto Color Olor Sabor Rendimiento Peso especfico a 20C ndice Refraccin(20C) ndice de Acidez ndice de Ester ndice de Ester en fro ndice de Ester /estilar Fenoles(abs. lcali)%

Rango Liq. lmpido y brillante Amarillo Plido Aromtico Ligeramente Picante 4.8% 0.8575 1.4887 0.285 20.5 8.55 43.5 2.68

Fuente: MONTES, A., Y BANDINELLI, C. Tabla 13. Metabolitos primarios y secundarios encontrados.

Hidrocarburos -pineno d--felandreno -felandreno

Esteres Formiato de -Terpinol

Alcoholes -Terpinol

Otros comp. Un fenol 3 aldehdos 3 Cetonas

Fuente: MONTES, A., Y BANDINELLI, C.

GILDEMEISTER, E. y HOFFMANN, F. (33) Reportan un rendimiento en las bayas de 3.35 a 5.2 % de aceite esencial, entre los principales constituyentes informan que son el y -felandreno, y en menor proporcin el -Pineno y el Carvacrol, sealan tambin similar composicin para el aceite esencial de las hojas.

FRITZCHE, B., (34) reporta de dos aceites de Schinus molle obtenidos de bayas importadas. Las siguientes caractersticas encontradas:
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Tabla 14. Propiedades fisicoqumicas encontradas por Fritzche.

Propiedad Color Olor Rendimiento Gravedad especfica 15C Poder Rotatorio ndice Refraccin(20C) Nmero de cidos Nmero de Ester/acet. Solubilidad hasta:

Rango Liq. ligeramente coloreado a pimienta 5.5 a 7.2% 0.556-0.366 +4717 +2655 1.4790-1.4818 2.4 - 2.5 10.5 8.3 10 vol. De alcohol 90%
Fuente: Fritzche B.

BERNHARD, R., y WROLSTAD, R. (35) reportaron haber aislado: -pineno, -pineno, canfeno, mirceno, -felandreno, limoneno y p-cymeno.

CH3C 6H4CH (CH3)2 p-Cymeno

H2C=CHC (=CH2) CH2CH2CH=C (CH3)2 Mirceno

50

SCHIMEL, E (36) Examino cuatro muestras de aceite derivados de las bayas y reportaron lo siguiente:

Tabla 15. Propiedades fisicoqumicas encontradas por Schimel.

Propiedad Gravedad especfica Rotacin ptica ndice de acidez Nmero de Ester Nmero de Ester/ acetilacin

I 0.850 +464

II 0.860 +4230 25.2 56.2

III 0.8320 +6040 0.4 9.3 14.0

IV 0.8561 +62.42

Fuente: Schimel.

La muestra de aceite III tiene un olor reminiscente de molle, contiene gran porcentaje de felandreno y trazas de fenoles (Carvacrol). La muestra IV tambin contiene mucho felandreno y trazas de fenoles.

DAVIDSON Y MONTES (37), Obtuvieron los resultados que se observan en la siguientes tablas.
Tabla 16. Propiedades fisicoqumicas encontradas por Davidson y Montes.

Propiedad Color Aspecto Rendimiento Peso especfico 20C Desviacin Polarimtrica 20C ndice Refraccin(20C) ndice de acidez. Nmero de Ester Nmero de Ester en fro Nmero de Ester / acetilacin

Rango mbar claro Liq. Oleoso, lmpido 3.0% 0.9037 +28 1.4921 1.5 15.53 2.8 69.11

Fuente: Davidson y Montes.

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Tabla 17. Metabolitos Primarios y secundarios encontrados por Davidson y Montes

Hidrocarburos -pineno -felandreno

Fenoles Oroetil Carvacrol (1.33%)

Alcoholes Alcoholes totales terpenol(15%)

Otros comp. en 2 aldehdos 2 Cetonas

Fuente: Davidson y Montes

GUPTA (38), encontr en los frutos los siguientes compuestos: cianidina3-rutinsido y peonidina-3-galactsido en corteza y hojas: cidos linolnico, linolico, lignocrico y esterico. Adems report la presencia de los siguientes compuestos -amirina, fisetina, cido glico, glucosa y fructuosa, piperina, cido protocatquico, quercetina, quercitrina, isoquercitrina, rutina, sitosterol, taninos y preisocalameneidol.

2.4.3. Componentes del aceite esencial del Schinus molle l.

TERHUNE, S (39) reporta la separacin y elucidacin estructural de un nuevo hidrocarburo de la serie sesquiterpeno llamado -spatuleno, siendo esta la primera vez que se logra aislar este compuesto como producto natural de los aceites esenciales obtenidos por destilacin a vapor de los frutos secos del Schinus molle recolectados en los alrededores de la ciudad de Mxico. La estereoqumica del compuesto fue confirmada mediante deshidratacin del

spatulenol con cloruro de tinilo a 0 C en piridina.

ANON (40), GONZALES, A (41) CREMONINI (42) y BERNHARD, R. y WROLSTAD, R., (35) reportan haber aislado el felandreno del aceite esencial del Schinus molle.
52

-felandreno

GONZALES, A., (41) tambin reporta haber aislado del aceite esencial de los frutos de molle.

el Carvacrol

igualmente MONTES et al. (32) reportan haber aislado el o-etil fenol a partir

(CH3)2CHC6H3(CH3)OH Carvacrol OH CH2CH3 o-etil fenol

POZZO-BALBI

(43)

reportan

haber

aislado

el

cido

3-epi-

isomaticadienollico a partir de la fraccin acdica de una oleorresina obtenida, por extracciones Soxhlet, a partir de los frutos de una anacardicea (Schinus molle), el mismo que lleva un grupo aldehdico en la cadena carbonada C20.
CHO

cido3-epi-isomasticadienollico

H OH H
COOH

POZZO-BALBI (43) tambin lograron separar de la fraccin cida de la oleorresina de los frutos de Schinus molle, compuestos identificados como cido isomasticadiennico y el cido isomasticadiennico de metilo. Igualmente SEOANE E (44) aisl el cido isomasticadienonlico y el cido isomasticadienonlico de metilo.
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R2

COOR2

R H
cidos: Isomasticadiennico:R=O;R1CH3;R2=H de metilo: R=O; R1=R2=CH3 Isomasticadienonlico:R=O;R1=CHO,R2=H de metilo: R=O;R1=CHO;R2=CH3

Tambin menciona POZZO BALBI (43) que han sido obtenidos otros cidos triterpenoides a partir de la fraccin acdica de la oleorresina del Schinus molle, los mismos que tienen cadenas carbonatadas comprendidas entre 22 a 28 tomos de carbono. Estos compuestos identificados corresponden a las estructuras siguientes:
R2

R R H
COOR2
cidos Isomasticadiennico R=O;R1=CH3;R2=H Isomasticadienico de metilo R=O; R1=R2=CH3

R1

H
COOR3
cidos: 3-epi-Isomasticadienolico R=H; R1=0H; R2=CH3;R3=H 3-epi-Isomasticadienico de metilo R=H; R1=0H; R2=R3=CH3 Isomasticadienonlico de metilo R=H; R1=HO; R2=CHO; R3=CH3

PUSHPA Y RASTOGI, (45) reporta que en perido comprendido entre (1971-1977) se han aislado una gran variedad de compuestos terpenoides penta y tretacclicos, entre los cuales se encuentra el eufano obtenido a partir del Schinus molle cuya estructura es:

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H H H

Eufano

GUPTA (38), El aceite esencial contiene: -bergamont-trans-eno, bourboneno, - y -candineno, - y -calacoreno, calameneno, canfeno, car 3 - eno, carvacrol, - cariofileno, - copaeno, croweacina, - cubebeno, pcimeno, D- elemeno, elemol, - y -eudesmol, germacreno-D, butirato de geraniol, -guaieno, -humuleno, limoneno, - y -pineno, sabineno, terpineol, -terpineno. TEJADA (46), report la siguiente composicin para el aceite esencial de molle: - y -felandreno, sabineno, terpineno, candineno, canfeno, limoneno, 3ciclo Hexen 1-ol, 4-methyl 1 (1- methyl ethyl) y 1,4,6 hepta triene 2,3,6 trimethyl.

2.4.4. Usos y posibilidades del aceite esencial de Schinus molle

MARTINEZ (16), menciona la posible aplicacin esenciales en perfumera, farmacologa y

de los aceites

alimentacin, sin precisar los

procedimientos y mtodos factibles para su efecto. As mismo menciona que el aceite esencial desterpenado es ms estable y de mejor aplicacin en la industria de perfumera.

GUENTHER (47), el aceite de molle puede ser usado como saborizante de especies.

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TEJADA (46), realiz un aromatograma del aceite esencial, tambin determino que presenta una accin bactericida frente a la Shigella Hexenerins y E. Coli y adems determin una dosis letal media de 3.7 mg/l para su uso como insecticida, as mismo comprob la accin repelente del aceite.
Figura 6. Aplicaciones industriales del Aceite de Schinus molle l.

Fuente: Tejada.

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2.5. REPELENTES

Los repelentes hacen que los humanos no sean atractivos a los mosquitos, por lo cual los mosquitos evitan acercarse a las reas del cuerpo cubiertas por repelente. Los repelentes no matan a los mosquitos. Los mejores productos proveen proteccin por largo tiempo tras una sola aplicacin. Los investigadores de la Universidad de Florida, prueban y evalan la efectividad de los repelentes segn el perodo de tiempo durante cual el repelente mantiene su efectividad luego de una sola aplicacin sobre la piel. Este perodo se conoce como el Tiempo de Proteccin Completa (TPC). 2.5.1. Tipos de repelentes disponibles

Los repelentes disponibles actualmente consisten de productos qumicos sintticos, como el DEET, o productos derivados de las plantas, como la citronela. Varias frmulas de estos productos las cuales difieren en la concentracin del ingrediente activo (la substancia que actualmente repele a los mosquitos), estn disponibles al pblico. Estos productos estn disponibles en forma de aerosoles, lociones, espumas, y otras.

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Tabla 18. Diferencias Entre un Repelente Natural y un Repelente Sinttico

NATURAL Baja presencia toxicidad

SINTTICO Toxicidad muy alta

Es un poco ms complicada la obtencin de Es ms fcil la obtencin de productos los ingredientes activos para productos qumicos de sntesis naturales Depende de tiempos de cosecha, de Todos estos productos son factibles de ser cuidados de cultivo, del clima y de la fabricados en cualquier parte del mundo sin procedencia mayores requerimientos

Cuida la salud de quien lo usa y proyecta un Suelen contener alcohol como deshidrante beneficio adicional de proteccin para la piel para la piel y butano/propano como

propelente y desengrasante. Ambos efectos perjudiciales para la piel No presenta efectos adversos para el medio Afecta el medio ambiente ambiente Durabilidad media Alta durabilidad

Fuente: REPELENTE PARA INSECTOS VOLADORES (Daza, 2006)

2.5.2. Aplicacin de Repelentes de Mosquitos

Aplique segn las instrucciones en la etiqueta. Use sentido comn al aplicar. Vigile las reacciones alrgicas, algunas personas pueden ser alrgicas a los ingredientes en algunos productos. No aplique en la boca u ojos o en heridas o partes irritadas en la piel. Para aplicar en la cara, aplique el producto a las manos y luego frtelas sobre la cara. Aplique SOLAMENTE a las partes del cuerpo que estn expuestas a las picadas. Algunos productos se pueden aplicar directamente a las ropas, pero verifique que es as en la etiqueta. No aplique a piel que va a estar cubierta por la ropa. No permita que los nios se apliquen el producto solos. Aplique solamente con la frecuencia recomendada en la etiqueta. Usar demasiado producto NO es lo mejor. Si el producto se desgasta ms rpido que
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lo esperado, lea la etiqueta para averiguar con cuanta frecuencia se puede reaplicar. Acurdese que ciertas cosas pueden disminuir el efecto del repelente; por ejemplo, actividades que hacen sudar, humedad alta, temperaturas altas, lluvias, y natacin.

2.5.3. El DEET (Dietiltoluamida)

La EPA ha determinado que el uso normal de DEET no causa preocupacin sobre la salud a la poblacin general de los EU, y no est clasificado como un carcingeno humano. La Academia Americana de Pediatra recomienda que los repelentes usados por nios no deben contener ms del 10% de DEET. Repelentes que contiene DEET nunca deben ser aplicados a nios menores de dos aos. Luego de regresar sitios interiores (por ejemplo a su hogar), lave bien las partes del cuerpo que recibieron el repelente.

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Figura 7. Tiempos de Proteccin de Repelentes Probados

Fuente: Comparative efficacy of insect repellents against mosquito BITES, Fradin M, Day, J.

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2.6. CREMAS

2.6.1. Generalidades.

El estudio de las emulsiones es de gran inters en una inmensa cantidad de productos que utilizamos a diario como son las cremas para el cuidado personal, pintalabios, algunos alimentos (helados, leche, mantequilla) y productos agroqumicos como los insecticidas y pesticidas. La leche por ejemplo, no es ms que diminutas gotas o glbulos de grasa estabilizados por una pelcula de protenas y fosfolpidos y suspendido en una fase acuosa, y la mantequilla en cambio, gotas de agua dispersas en grasas. En el sector de los cosmticos, las cremas hidratantes y protectoras para los rayos UV tambin son emulsiones de partculas aceitosas dispersas en agua. En el sector farmacutico, las emulsiones pueden servir para encapsular los frmacos activos y despus liberarlos cuando se encuentran en la corriente sangunea.

La farmacopea de los Estados Unidos Mejicanos (FEUM) define a la crema como una preparacin lquida o semislida que contiene el o los principios activos y aditivos necesarios para obtener una emulsin generalmente aceite en agua con un contenido de agua superior al 20%.

Son formas farmacuticas constituidas por dos fases, una lipoflica y otra acuosa. Tienen consistencia blanda y flujo newtoniano o pseudoplstico por su alto contenido acuoso.

Una diferencia entre la crema y la pomada es que la pomada fluye con dificultad y las cremas fluyen fcilmente, adems las pomadas son siempre monofsicas.

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2.6.2. Clasificacin Hidrfobas (Emulsiones W/O).

La fase continua o externa es la fase lipoflica debido a la presencia en su composicin de tensoactivos tipo W/O. Hidrfilas (Emulsiones O/W).

La fase externa es de naturaleza acuosa debido a la presencia en su composicin de tensoactivos tipo O/W, tales como jabones sdicos o de alcoholes grasos sulfatados y polisorbatos, a veces combinados en proporciones convenientes con tensoactivos tipo W/O.

2.6.3. Excipiente

Es el vehculo de la crema, es decir el ingrediente en el que se disuelven los principios activos, ste va a condicionar la forma de presentacin de la crema.

El excipiente suele estar compuesto por dos tipos de sustancias de diferente polaridad, una de ellas ms afn al agua y otra ms afn al aceite. Dependiendo de la piel a la que va dirigida la crema, variaremos la cantidad de cada una de ellas en la frmula, es decir, si la crema tiene un excipiente muy graso estar indicada para la piel ms seca y si el excipiente est carente de lpidos, la crema ser para la piel ms grasa, un excipiente equilibrado en estas dos fracciones ser porque la crema est indicada en piel normal.

2.6.3.1. Tipos de excipientes

El excipiente ms utilizado es el agua porque en ella se disuelven la mayora de principios activos que conocemos.

62

Sistemas W/O (Agua/Aceite)

1.- Excipientes hidrfobos: grasas oclusivas (vaselina, parafina, ceras, siliconas) 2.- Bases de absorcin (anhidras) 3.- Emulsiones W/O: Cremas refrescantes Medicamentos tpicos de alta penetracin Sistemas O/W (Aceite/Agua)

4.- Excipientes hidroflicos: vehculos sin grasa, materiales que en presencia de agua adquieren consistencia semislida)

5.- Bases emulgentes O/W (anhidras) 6.- Emulsiones O/W: cremas evanescentes

2.6.4. Principios activos

Los principios activos son las sustancias que aportan las propiedades de la crema, es lo que reivindica la crema. Por ejemplo: Hablamos de cremas hidratantes, anti envejecimiento, anticelultica. La calidad y la cantidad de cada principio activo son los responsables de la eficacia de las cremas.

2.6.5. Aditivos

Los aditivos nos proporcionan aquellas caractersticas que favorecen la estabilizacin de la crema, su durabilidad y conservacin, olor y color agradable. Estn presentes en cantidades muy pequeas, pero su presencia es imprescindible para la garanta de la crema.

2.6.6. Componentes y elaboracin de cremas

De acuerdo a Muoz et al. (s.f.), la piel es una membrana que acta en una gran parte de las actividades fisiolgicas que mantienen la homeostasis.
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Actuando como protectora del organismo, la piel est expuesta a las diversas condiciones del medio, microorganismos y sustancias qumicas que la daan o la hacen ms sensible y vulnerable.

Una gran cantidad de cremas y lociones para la piel y para el cabello son emulsiones de aceites y agua al ser aplicadas forman una pelcula protectora que disminuye la deshidratacin y dao causados por el medio y los microorganismos. Las cremas son mezclas de aceite en agua y otras sustancias (colorantes, fragancias y agentes humectantes) que hacen que el producto sea homogneo (Harry, 1962).

Actualmente existe una diversidad de tipos de cremas, adaptadas a cada tipo de piel y ambiente. Las cremas y lociones fluidas que tienen aspecto de leche cremosa son mezclas de aceites, grasas y ceras que forman un sistema estable o una emulsin de agua en aceite o de aceite en agua. Cuando los aceites se encuentran en mayor proporcin, se forma una crema acuo-oleosa, mientras que cuando los aceites estn en menor proporcin, las cremas se conocen como leoacuosas (Simmons, 2000).

Se conoce como emulsificacin la capacidad que el aceite tiene de mezclarse con el agua formando una mezcla uniforme, sin la presencia de grumos de grasa. La capacidad de emulsificacin de un aceite est relacionada con el tamao de sus componentes y su estructura (Harry, 1962).

Algunos de los emulsificantes usados en la industria tambin se utilizan para la elaboracin de cosmticos, como es la lecitina. Otros son elaborados y patentados por las empresas que desarrollan cosmticos de varios tipos. Por ejemplo, el emulsificante CREMOPHOR A 25, que se obtiene al reaccionar xido de etileno con alcoholes grasos saturados, permite elaborar soluciones coloidales y emulsiones de aceite en agua, que son las cremas y lociones; otro ejemplo es el PEG-y aceite de Castor soluble en parafina, que se obtiene al reaccionar xido de etileno con aceite de ricino, es ms usado es emulsiones y lociones con baja viscosidad del tipo agua en aceite, ambos no ionicos (BASF,
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2004). El Emulgade SE, es un emulsificante no inico elaborado a base de gliceril estearato, ceteareth-20, ceteareth-12, alcohol cetearlico y cetil palmitato, que se presenta en la forma granular de color blanco a levemente amarillo y olor caracterstico. Provee una consistencia ideal para la preparacin de lociones y cremas del tipo aceite en agua (Cognis, 2002).
Tabla 19. Emulsificantes usados en la industria

Emulsificante Lecitina Mono diglicridos Lactylated mono-/digliceridos Poliglicerol ster Poliglicerol glicol ster

Funcin Control de viscosidad Emulsificacin de aceite en agua Aeracin Inhibicin de formacin de cristales Aeracin

Fuente: Harry, 1962

Los agentes preservantes evitan que las cremas sufran ataque por lo microorganismos. Los preservantes ms usados son el metilparabeno (4-metil hidroxibenzoato) y el propilparabeno (4-propil hidroxibenzoato). El primero es aplicado a la fase acuosa y el segundo a la fase oleosa. Simmons (2000) recomienda usar una concentracin de 0,1 a 0,2% de metilparabeno y propilparabeno y, para perfumar la crema, adicionar de 6 a 8 gotas de perfume cuando la crema est entre 30 y 40 C.

El propilparabeno es un ster proplico neutro del cido p-hidroxibenzico, se presenta como un polvo fino, blanco, sin olor, sin sabor y atxico. Posee una amplia accin antibitica contra bacterias, hongos, levaduras. El metilparabeno es un ter metlico neutro del cido p-hidroxibenzico, se encuentra en la misma presentacin del propilparabeno y tambin es de amplia accin contra los microorganismos. Volp (s.f.) indica que las concentraciones mximas permitidas son de 0,8%.

En la elaboracin de cosmticos existen ciertas reglas que deben ser seguidas para garantizar la buena calidad y seguridad a los consumidores. En la Unin Europea, por ejemplo, rige la normativa 76/768/CEE, que dice que los cosmticos no deben perjudicar la salud del consumidor, y para que eso sea posible se recomienda no usar altas concentraciones de los preservantes, usar
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agua destilada reciente o desionizada pasada en filtro biolgico e ingredientes libre de contaminacin qumica y biolgica (Simmons, 2000). 2.6.7. Controles Fsicos de Cremas

Caractersticas organolpticas: su determinacin u observacin proporciona una primera impresin de la calidad del producto. Deben presentar aspecto homogneo, color y olor agradable o por lo menos aceptable y textura suave luego de la aplicacin va tpica. Una vez elaboradas las muestras se deben observar a diferentes intrvalos de tiempo (24 horas, 7, 15, 30, 41 das) con la finalidad de examinar: homogeneidad, textura, consistencia, color y olor.

Prdidas por evaporacin: Se realiza en el envase definitivo en virtud de que la formulacin contiene una proporcin importante de agua y componentes voltiles. Las determinaciones se realizan a partir de medidas de peso y la prdida se expresa porcentualmente (Herrez y Castellano, 1997).

Conductividad: La determinacin del signo de la emulsin es importante porque pueden ocurrir inversiones de fase que alteran las caractersticas y la estabilidad de la emulsin. El signo de la emulsin, es decir, la naturaleza de la fase externa, se puede determinar por medidas de la conduccin de la electricidad (Bustamante, 1993).

Estudio reolgico: La caracterizacin reolgica es fundamental en la investigacin y desarrollo de formas farmacuticas semislidas como las cremas, debido a que las propiedades reolgicas tienen una gran influencia en la estabilidad y en la textura de estos productos. Son vlidos varios procedimientos. En este estudio se consideran las determinaciones de extensibilidad y viscosidad debido a la relacin existente entre estos parmetros para definir dicho comportamiento.

Extensibilidad: Se realiza con un extensmetro, tomando como base el aumento de superficie que experimenta cierta cantidad de producto cuando se le somete a la accin de una serie de pesos crecientes (10, 20, 50 y 100 gramos) a intervalos fijos de tiempo (1 minuto), en condiciones normalizadas (temperatura ambiente +/- 2 C).

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Viscosidad: Para describir el comportamiento reolgico de la crema es necesario determinar la viscosidad con ayuda de un viscosmetro. Las medidas reomtricas generalmente consisten en el anlisis de los esfuerzos de corte a frecuencia constante.

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CAPITULO III DESARROLLO EXPERIMENTAL

3.1. GENERALIDADES

En ste captulo se determina el nmero de etapas del desarrollo experimental. El desarrollo de cada etapa es individual y comprende los objetivos, el fundamento, la identificacin de variables del proceso, la descripcin del procedimiento experimental y los recursos que se van a requerir para llevar a cabo cada etapa. 3.2. PLANIFICACION DE LA EXPERIMENTACIN

De acuerdo al objetivo general y objetivos especficos se determin que el desarrollo experimental se dividir en 4 etapas:

Primera etapa, consiste en la obtencin del aceite esencial de molle por el mtodo de arrastre con vapor evaluando los niveles planteados para las variables: porcentaje de humedad, tiempo y tamao de partcula.

Segunda etapa, consiste en la caracterizacin fsico-qumica del aceite esencial de molle.

Tercera etapa, consiste en la formulacin de una crema repelente de mosquitos, evaluando los planteados ptimos para las variables: fase acuosa, temperatura de mezcla y tiempo de agitacin.

Cuarta etapa, consiste en las pruebas de proteccin completa y


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comparacin con otros repelentes del mercado.

3.2.1. PLANIFICACION DE LA PRIMERA ETAPA

3.2.2. Objetivo

Obtener el aceite esencial de molle por el mtodo de arrastre con vapor evaluando los niveles planteados para las variables: porcentaje de humedad, tiempo y tamao de partcula.

3.2.3. Determinacin de las variables

3.2.3.1. Humedad Fundamento: Consiste en le eliminacin del agua de los frutos por calentamiento hasta que obtenga un peso constante, obtenindose el valor de la humedad por diferencia de pesada. Procedimiento: A los frutos del molle recin recolectado se le sacan todas las ramas y se le descascara mediante la tcnica de venteo, se lava y luego se pone al secador hasta obtener el porcentaje deseado de humedad en estudio.

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3.2.3.2. Tamao de partcula Fundamento: La influencia del tamao de la semilla es importante porque nos define la densidad del lecho, si se aplica una molienda influir en la velocidad de extraccin, aumentara la densidad del lecho en consecuencia las partculas de las semillas desintegradas formaran una masa porque sus tamaos seran menores, por lo tanto el vapor atravesara el lecho a travs de las grietas formadas en la masa por el vapor y la velocidad de extraccin disminuira y el tiempo de operacin aumentara para obtener un rendimiento ptimo. Procedimiento: Se colocan los frutos lavados y secos en el molino para granos a tres aberturas distintas de molienda 1, 2 y 3 mm, no se clasifica en mallas ya que al moler la semilla de molle esta se apelmaza y no permite una buena clasificacin lo que se hace es tomar medidas de las semillas molidas (largo, ancho y altura), y se saca un promedio de stas.
Tabla 20. Abertura del molino y dimensiones de la semilla

Abertura del molino (mm) 1 2 3

Espesor de semilla promedio (mm)

Largo de semilla promedio (mm)

Altura de la Tamao semilla promedio promedio de partcula (mm) (mm)

Fuente: Elaboracin propia

3.2.3.3. Tiempo de extraccin


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Fundamento: La influencia del tiempo de extraccin va a determinar en cuantos minutos se extrae la mayor cantidad de aceite esencial, y poder hacerlo rentable, ya que si se emplea mucho tiempo para extraerlo los costos se elevarn.

Procedimiento: Se va a extraer a tres diferentes tiempos de extraccin. 30 minutos 60 minutos 90 minutos

3.2.4. Determinacin del mtodo o diseo experimental En este caso se emplea el mtodo factorial completo con replica en el punto central. El diseo factorial es aquel en que se investiga todas las posibles combinaciones de los niveles en los factores en cada ensayo, los niveles representan los factores que pueden tomar las variables. 3.2.4.1. Determinacin del nmero de experimentos Metodo: Factorial con replica en el punto central N de ensayos: N= 2k =23=8 N de ensayos para eliminar errores experimentales: 3 en el punto central N de ensayos totales: 8+3= 11
Tabla 21. Factores y niveles del diseo experimental

Variables Humedad (%) Tamao de partcula (mm3) Tiempo de extraccin (min)

Mnimo 15 1 30

Niveles Central Mximo 20 25 2 60 3 90


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Fuente: Elaboracin propia

El diseo experimental se llevar a cabo tomando en cuenta las siguientes variables: Variables codificadas: X1: Humedad X2: Tamao de partcula X3: Tiempo de extraccin Variables naturales: Z1: Humedad Z2: Tamao de partcula Z3: Tiempo de extraccin Variable Respuesta: Y: Rendimiento de Extraccin
Tabla 22. Diseo factorial de la experimentacin

Variables codificadas Prueba N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 X1 -1 -1 -1 -1 1 1 1 1 0 0 0 X2 -1 -1 1 1 -1 -1 1 1 0 0 0 X3 -1 1 -1 1 -1 1 -1 1 0 0 0

Variables naturales Z1 15 15 15 15 25 25 25 25 20 20 20 Z2 1 1 3 3 1 1 3 3 2 2 2 Z3 30 90 30 90 30 90 30 90 60 60 60

Variable Respuesta Y Y Y1 Y2 Y3 Y4 Y5 Y6 Y7 Y8 Y9 Y10

Fuente: Elaboracin propia

Modelo matemtico que describe el experimento:

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3.2.5. Procedimiento experimental

Se resume en el siguiente diagrama de flujo:


Figura 7. Diagrama de flujo de la extraccin de aceite esencial de molle.

Fuente: Elaboracin propia.

3.2.5.1. Preparacin de la materia prima

La preparacin de la muestra, que fue recolectada de diferentes lugares de la Campia de Arequipa, fue tratada de la siguiente manera:

a) Recoleccin y Seleccin: Se recolectaron frutos maduros de diferentes lugares de la campia de Arequipa-Per, eliminndose las hojas y otras impurezas.
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b) Descascarado: Se separan las cscaras mediante frotacin directa con las manos, observndose la presencia de finos de cscara que son separadas de los frutos mediante el venteado. c) Desazucarado: El contenido de azcares, distribuidos en la superficie del fruto, son removidos por dilucin y frotacin manual del fruto en agua por 3 veces consecutivos. d) Secado: Para el secado de los frutos desazucarados se usa un secador industrial hasta obtener la humedad deseada dependiendo de la prueba de extraccin. e) Molienda: La molienda de la muestra seca obtenida se realiza utilizando una pequea mquina moledora de granos maraca Corona, a una abertura de 1, 2 y 3 mm. 3.2.5.2. Extraccin del aceite esencial.

a) Se arma el equipo de extraccin como se muestra en la fotografa de abajo.

Figura 8. Equipo de Extraccin por Arrastre de Vapor usado en laboratorio.

Fuente: Elaboracin Propia.

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a) Se carga el molle molido de manera que forme un lecho fijo compactado. b) Se llena el baln con agua. c) Se hace fluir el agua de refrigeracin del condensador cuando se empieza a formar el vapor de agua. d) Se recibe el aceite esencial en el florentino, tomando datos del tiempo que pasa por cada ml de aceite esencial que recibimos en el florentino. e) Desarmar y limpiar el equipo

75

3.3. PLANIFICACION DE LA SEGUNDA ETAPA

3.3.1. Objetivo Determinar las propiedades fisicoqumicas del aceite esencial de molle.

3.3.2. Procedimiento Experimental.


Tabla 23. Propiedades fisicoqumicas aceite esencial de molle a determinar

CARACTERSTICA COLOR SABOR DENSIDAD RELATIVA 20/20C INDICE DE REFRACCIN 20C SOLUBILIDAD EN ETANOL ml aceite/ml alc RESIDUO DE EVAPORACION DESVIACIN POLARIMETRICA 20C INDICE DE ACIDEZ INDICE DE PEROXIDO INDICE DE ESTER CROMATOGRAFIA DE GASES
Fuente: Elaboracin propia.

VALOR

Tabla 24. Mtodos INDECOPI Empleados

PROPIEDAD NDICE DE REFRACCION ROTACION OPTICA PRERACIN DE LA MUESTRA PARA ANLISIS DENSIDAD Y DENS. REL. SOLUBILIDAD EN ETANOL NDICE DE ACIDEZ NDICE DE STER RESIDUO POR EVAPORACIN NDICE DE PERXIDO

NORMA TECNICA 319,075 319,076 319.077 319,081 319,084 319,085 319.088 319.089 209.006

Fuente: Elaboracin propia

76

3.4. PLANIFICACION DE LA TERCERA ETAPA 3.4.1. Objetivo Formular una crema repelente de mosquitos, evaluando los niveles planteados para las variables: fase acuosa, temperatura de mezcla y tiempo de agitacin

3.4.2. Determinacin de variables En esta etapa de la experimentacin se consultaron varias formulaciones de crema y la que se presenta a continuacin result la ms viable ya que todos los insumos se venden en la ciudad de Arequipa y a costos accesibles.
Tabla 25. Componentes de la crema y su funcin

COMPONENTES Alcohol cetlico Emulgyn Acido esterico Metilparabeno Propilparabeno Vaselina lquida Aceite esencial de Schinus Molle Agua Propilenglicol Treitanolamina

FUNCIN Incrementador de consistencia Emulsionante Emulgente, incrementador de consistencia y estabilizador Conservador Conservador Vehculo oleoso Principio activo Vehculo acuoso Vehculo acuoso Regulador de pH

Fuente: Elaboracin propia

A continuacin se presentan los 3 parmetros principales para la elaboracin de cremas, los cuales vamos a variar para poder obtener una crema con las mejores caractersticas de calidad (viscosidad y extensibilidad). A partir de estos resultados se variar el porcentaje de aceite esencial incluido en la crema para obtener un repelente con un porcentaje de proteccin igual o mejor a los repelentes del mercado.

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3.4.2.1. Proporcin de las fase acuosa

Fundamento:

La fase acuosa est compuesta por el agua y todos los componentes solubles en ella como el propilenglicol. Fase oleosa: est compuesta por las grasas y todos los componentes liposolubles. En esta fase estn incluidos: Alcohol cetlico, cido esterico, emulgyn, metilparabeno, propilparabeno, vaselina liquida y el aceite esencial. El emulgente estabiliza estas dos fases a lo largo del tiempo, por lo que su porcentaje depender de la proporcin de las fases.

Procedimiento: Se variar la fase acuosa y en consecuencia los dems componentes de la crema segn la siguiente tabla:

Tabla 26. Formulaciones de la Crema Repelente

COMPONENTES Alcohol cetlico Emulgyn Acido esterico Treitanolamina Metilparabeno Propilparabeno Vaselina lquida Aceite esencial de Schinus Molle TOTAL FASE OLEOSA Agua Propilenglicol TOTAL FASE ACUOSA TOTAL

F1 (g) 16 5 6 0.01 0.17 0.03 6 6 39.21 54.79 6 60.79 100

F2 (g) 11 4 4 0.01 0.17 0.03 5 6 30.21 64.79 5 69.79 100

F3(g) 6 3 2 0.01 0.17 0.03 4 6 21.21 74.79 4 78.79 100

Fuente: Elaboracin propia.

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3.4.2.2. Temperatura de mezcla

Fundamento: Ambas fases deben tener una adecuada temperatura para que la emulsificacin sea homognea y deben encontrarse a la misma temperatura para evitar el choque trmico y que se solidifique la fase oleosa.

Procedimiento:

Se sometern ambas fases a bao mara a 50, 60 y 70 C.

3.4.2.3. Tiempo de agitacin

Fundamento Se debe agitar durante el mezclado ste tiempo de agitacin le dar a la emulsin una mayor homogeneidad y consistencia.

Procedimiento: El tiempo de mezcla se inicia cuando se mezclan la fase oleosa con la fase acuosa, este tiempo variar de 5, 10 y 15 minutos.

3.4.3. Determinacin del mtodo o diseo experimental

En este caso se emplea el mtodo factorial completo con replica en el punto central. El diseo factorial es aquel en que se investiga todas las posibles combinaciones de los niveles en los factores en cada ensayo, los niveles representan los factores que pueden tomar las variables. Para obtener la mejor formulacin se realiza un diseo de experimentos donde se analizan las principales variables del proceso de elaboracin de cremas teniendo como variables respuesta la viscosidad y extensibilidad, debido a que estas
79

propiedades reolgicas tienen una gran influencia en la estabilidad y en la textura de estos productos. Determinacin del nmero de experimentos N de ensayos:

Donde: N= n de ensayos I= n de niveles K=n de factores N= 23 = 8 ensayos N de ensayos para eliminar errores experimentales: N de Ensayos totales: 8 +3 = 11 ensayos

Tabla 27. Variables y Niveles de la 3ra Etapa

Variables Independientes Fase Acuosa (%) Temperatura de mezcla (C) Tiempo de agitacin (min)

Niveles
Mnimo Central Mximo

Variables dependientes Viscosidad (S) ndice de Extensibilidad (R)

60.79 50 5

69.79 60 10

78.79 70 15

Fuente: Elaboracin propia

El diseo experimental se llevar a cabo tomando en cuenta las siguientes variables: Variables codificadas: V1: Porcentaje de fase acuosa V2: Temperatura de mezcla V3: Tiempo de agitacin Variables naturales: W1: Porcentaje de fase acuosa
80

W2: Temperatura de mezcla W3: Tiempo de agitacin Variable Respuesta: S: ndice de Extensibilidad R: Viscosidad
Tabla 28. Diseo factorial de la experimentacin

Prueba N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Variables codificadas V1 V2 V3 -1 -1 -1 -1 -1 1 -1 1 -1 -1 1 1 1 -1 -1 1 -1 1 1 1 -1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Variables naturales W1 W2 W3 60.79 50 5 60.79 50 15 60.79 70 5 60.79 70 15 78.79 50 5 78.79 50 15 78.79 70 5 78.79 70 15 69.79 60 10 69.79 60 10 69.79 60 10

Variable Respuesta S S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11

Variable Respuesta R R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 R9 R10 R11

Fuente: Elaboracin propia

Modelos matemticos que describen el experimento:

3.4.4. Procedimiento experimental

Colocarse los implementos de seguridad e higiene para elaborar la crema: guantes, gorro, mascarilla y mandil.

Se esteriliza todo el material de laboratorio a utilizar. Se pesa y se mide todas las cantidades de los componentes a usar para una presentacin de 100 g.

Se utilizarn 2 vasos de precipitado de 100 ml, en el primer vaso se pesa las


81

cantidades indicadas en la formulacin ya mencionada, formando as la fase oleosa (alcohol cetlico, cido esterico, vaselina lquida, parabenos, Emulgyn y aceite esencial) para ser fundidos a 50, 60 y 70C dependiendo de la prueba. En el segundo vaso se pesa el propilenglicol y agua luego se coloca a bao mara a 50, 60 y 70C. Finalmente se hace la mezcla de los dos vasos manteniendo la agitacin constante durante 5, 10 y 15 minutos dependiendo de la prueba, posteriormente se agrega la treitanolamina para alcalinizar la crema. Despus de obtener la crema se procede a pesar y envasar en los frascos (previamente lavados, esterilizados y rotulados). Luego se procede a realizar los controles fisicoqumicos a la crema: olor, color, peso especfico, pH, viscosidad y extensibilidad. El peso especfico es la relacin entre el peso de la crema y su volumen, para esto se utiliza una fiola de 10 cm3, se pesa primero la fiola vaca y luego con la crema y por diferencia se tiene el peso de la crema y luego se divide entre el volumen ya conocido de la fiola. Para la determinacin de la del pH se usar el Phmetro marca Oakton, esta prueba consiste en poner la varilla medidora en cada una de las once muestras y tomar resultados. Para la determinacin de la viscosidad se usar el viscosmetro Brookfield VD-II +, la prueba consiste en tomar la viscosidad de las once muestras poniendo cada frasco con muestra en el usillo del viscosmetro, manteniendo la temperatura lo ms constante posible y por medio del programa de ste equipo nos arrojara un resultado en centipoises para cada muestra. Para la determinacin de la extensibilidad o esparcimiento, se necesitan dos placas de vidrio y papel milimetrado y se aplica el siguiente procedimiento: o Colocar la placa inferior de vidrio sobre una hoja de papel milimetrado. Trazar diagonales en el papel. o Colocar una 1 0,1 g de emulsin sobre el punto de interseccin o Pesar la placa de vidrio superior de 10 cm2 o Poner la placa de vidrio de 10 cm2 sobre la formulacin
82

o Despus de 1 minuto, medir el dimetro (mm) de la circunferencia o elipse formada(dimetro inicial) o Comprimir con peso de 200 g por 1 minuto a 20 C o Medir el dimetro (mm) de extensibilidad del producto (dimetro final) o ndice de extensibilidad: Con los valores de los dos dimetros calcular el dimetro medio y a partir de ste, calcular la superficie del crculo formado (mm2)
Tabla 29. Formato para la recoleccin de datos de la tercera etapa

N PRUEBA

% FASE ACUOSA

TEMP. (C)

TIEMPO (min)

OLOR

COLOR

PESO ESPECIFICO

pH

EXTENSIBILIDAD (mm2)

VISCOSIDAD (cp)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

60.79 60.79 60.79 60.79 78.79 78.79 78.79 78.79 69.79 69.79 69.79

50 50 70 70 50 50 70 70 60 60 60

5 15 5 15 5 15 5 15 10 10 10
Fuente: Elaboracin propia

83

3.5.

PLANIFICACION DE LA CUARTA ETAPA

3.5.1. Objetivo Realizar las pruebas de proteccin y compararlo con otros repelentes del mercado

3.5.2. Fundamento

Prueba de Proteccin La proteccin del repelente es expresada con la siguiente frmula (Rueda et al. 1998) ( Donde: )

Nc = mosquitos totales que pican con repelente Ns = mosquitos totales que pican sin repelente

3.5.3. Determinacin de variables Para obtener el repelente con mayor porcentaje de proteccin se realiza un diseo de experimentos donde se analizan las variables ms significativas del proceso y sus interacciones, determinando as las principales causas de variacin y las mejores condiciones experimentales en la variable respuesta.

Tabla 30. Variables y Niveles-4ta Etapa

Variables Independientes Aceite Esencial usado en la formulacin (%) Gnero de persona

Niveles 6 (F1) 8 (F2) 10 (F3) Masculino (M) Femenino (F)

Variables dependientes

Porcentaje de proteccin

Fuente: Elaboracin propia

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3.5.4. Determinacin del nmero de experimentos Segn el nmero de variables y niveles, se realizarn las siguientes pruebas:

Tabla 31. Porcentajes de Proteccin

NUMERO DE PICADURAS CON Prueba N REPELENTE GNERO REPELENTE

NUMERO DE PICADURAS SIN REPELENTE

PORCENTAJE DE PROTECCION

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

4 hr

1 2 3 4 5 6

F1 F1 F2 F2 F3 F3

M F M F M F Fuente: Elaboracin propia

Para poder comparar el repelente que presente el mejor resultado, se determinarn los porcentajes de proteccin de tres principales repelentes del mercado. R1: Repelente en spray, tiene como principio activo DEET (Dietiltoluamida al 14.994%) R2: Repelente en crema, tiene como principio activo DEET (Dietiltoluamida pero no especifica concentracin) R3: Repelente en crema, tiene como principio activo

Butilacetilaminopropianato de etilo al 15%

85

Tabla 32. Porcentaje de proteccin para repelentes del mercado

Prueba N

REPELENTE

GNERO

NUMERO DE PICADURAS CON REPELENTE

NUMERO DE PICADURAS SIN REPELENTE

PORCENTAJE DE PROTECCION

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

4 hr

1 2 3 4 5 6

R1 R1 R2 R2 R3 R3

M F M F M F
Fuente: Elaboracin propia

3.5.5. Procedimiento experimental

Prueba de proteccin El lugar donde se realizarn las pruebas ser en el Molino de Sabandia en la ciudad de Arequipa, ya que ofrece las condiciones propicias para el estudio. El repelente se aplicar en las piernas descubiertas dado que es en esta parte del cuerpo donde se producen la mayor cantidad de picaduras por tener una mayor rea de exposicin La persona se aplicar el repelente solo en una pierna y la otra se expondr sin repelente, se contaran las picaduras en ambas piernas a las 1, 2, 3 y 4 horas. La persona que realiza la prueba se limpia la pierna con etanol al 70% w/w y la deja secar completamente para aplicar la siguiente formulacin.

3.5.6. RECURSOS PARA LA INVESTIGACIN.

3.5.7. Recursos Materiales. A) De Infraestructura:

Laboratorio de Servicios Industriales de la Escuela Profesional de Ingeniera Qumica de la Universidad Nacional de San Agustn.
86

B) Equipos, Materiales, Reactivos e insumos. a) Materiales: EQUIPO DE EXTRACCIN Generador de vapor 1 Baln de carga Condensador Separador Florentino 3 Soportes universales 3 pinzas 3 mangueras de jebe

EQUIPO DE VIDRIO 2 probetas de 100 ml 2 buretas de 25 ml 2 pipetas de 2 ml 1 bagueta 1 matraz Erlenmeyer 125 ml 1 embudo 3 vasos de precipitados de 250 ml 1 termmetros de 100C 1 fiola de 10 ml 2 envases de vidrio (color mbar) 2 placas de vidrio

a) Equipos: Caldern con resistencia elctrica Molino de granos Corona Hervidor elctrico Balanza analtica Mettler Toledo AB204 Analizador de humedad Chyo IB-30 Refractmetro porttil AB Secador Heraus, modelo 542301 Viscosmetro Brookfield modelo DV-II + Phmetro Oakton

b) Reactivos Sulfato de sodio Etanol 96% Hidrxido de potasio Fenolftalena. cido sulfrico cido actico glacial. Cloroformo. Ioduro de potasio. Tiosulfato de sodio
87

Almidn soluble.

c) Insumos Agua destilada Alcohol cetlico cido esterico Emulgador Metilparabeno Propilparabeno Treitanolamina Papel milimetrado

C) Recursos Econmicos. La investigacin fue financiada por los tesistas investigadores. 3.5.8. Recursos Humanos. La investigacin fue desarrollada por los tesistas:

Ramos Pealoza Heymi Tatiana. Reinoso Talavera Oswaldo Alfredo.

88

CAPITULO IV TRATAMIENTO E INTERPRETACION DE RESULTADOS

4.1.

Generalidades.

En ste captulo se recopila los resultados obtenidos de la parte experimental, dichos resultados son sometidos a procesos matemticos para permitir su validacin, lo cual se logra con tratamientos estadsticos adecuados, lo que nos permitir luego llevar a conclusiones valederas con la hiptesis planteada.

4.2.

Resultados de la primera etapa: Extraccin del aceite esencial de molle

4.2.1. Molienda del fruto del molle: En esta etapa de uso un molino para granos marca CORONA.

Figura 9. Molinos para granos

Fuente: Elaboracin propia

En esta etapa se ajust la abertura del molino para obtener 3 diferentes medidas de molle molido.
89

Tabla 33. Medidas de la semilla entera de Molle

N 1 2 3 4 5

Espesor (mm)

Largo (mm)

Altura (mm) 4 4 5 4 4

3 4 3 5 4 5 3.5 5 3.5 5 TAMAO PROMEDIO


Fuente: Elaboracin propia

Tamao de partcula (mm) 3.67 4.00 4.67 4.17 4.17 4.13

Tabla 34. Medidas de la semilla de Molle molida a una abertura de molino de 1mm.

N 1 2 3 4 5

Espesor (mm)

Largo (mm)

Altura (mm) 1 1 0.25 0.5 0.25

1 2 0.5 1 0.5 0.5 0.25 0.5 0.25 0.25 TAMAO PROMEDIO


Fuente: Elaboracin propia

Tamao de partcula (mm) 1.33 0.83 0.73 1.07 0.67 0.93

Tabla 35. Medidas de la semilla de Molle molida a una abertura de molino de 2mm.

N 1 2 3 4 5

Espesor (mm)

Largo (mm)

Altura (mm) 1 3.2 2 2 1.5

1 1.9 1 3.5 0.5 2 1.5 3 1.5 3.7 TAMAO PROMEDIO


Fuente: Elaboracin propia

Tamao de partcula (mm) 1.30 2.57 1.50 2.17 2.23 1.95

90

Tabla 36. Medidas de la semilla de Molle molida a una abertura de molino de 3mm.

N 1 2 3 4 5

Espesor (mm)

Largo (mm)

Altura (mm) 3 4 2.8 3 2.5

3 2.9 3.17 3 3.33 3 2.67 2.5 2.67 3 TAMAO PROMEDIO


Fuente: Elaboracin propia

Tamao de partcula (mm) 2.97 3.39 3.04 2.72 2.72 2.97

Figura 10. Semilla de molle entera.

Fuente: Elaboracin propia

Figura 11. Semillas de molle molidas a tres diferentes aberturas del molino.

Fuente: Elaboracin propia

91

4.2.2. Resultados obtenidos en la prctica

Tabla 37. Volumen de aceite esencial extrado en diferentes tiempos.

Tiempo (min) 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90

1 0 9 12 15.5 -------------

Volumen de aceite esencial extrado en cada extraccin (ml) 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 15 15.8 7 8.2 13 12.7 12.5 12 14.9 25.5 27.1 10.2 12.4 22.2 24 19.4 27.5 18.6 33.9 37.5 12.3 16 30.5 32.9 26.4 29.5 21.9 --44.4 --19.4 --39.6 30.6 34.4 24.3 --46.8 --21.6 --42.8 36.4 39 25.8 --48.6 --22.9 --44.1 40 41 27.1 --50.1 --24 --45.3 ----28.1 --51 --24.9 --46.3 ----29.1 --52 --25.8 --47.2 ----Fuente: Elaboracin propia

11 0 9 12 15.3 17.2 18.9 24.8 -------

Figura 12. Volumen de aceite esencial vs tiempo 60 Extraccin 1 50 Volumen de aceite (ml) 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 Tiempo de extraccion (min) Extraccin 2 Extraccin 3 Extraccin 4 Extraccin 5 Extraccin 6 Extraccin 7 Extraccin 8 Extraccin 9 Extraccin 10 Extraccin 11

Fuente: Elaboracin propia

Se puede apreciar que el mayor volumen de aceite esencial a los 30, 60 y 90 minutos se obtuvo en la extraccin 4, en la cual se tiene una de humedad del fruto del molle de 15%, tamao de partcula de 3 mm y tiempo de extraccin de 90 minutos.

92

Tabla 38. Rendimientos de aceite esencial extrado

Peso Tamao Tiempo de Humedad de de N de (%) partcula extraccin extraccin molle (g) (mm) (min)

Volumen Masa de de aceite volumen Rendimiento esencial extrado (%) extrado (g) (ml)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

700 700 700 700 700 700 700 700 700 700 700

15 15 15 15 25 25 25 25 20 20 20

1 1 3 3 1 1 3 3 2 2 2

30 90 30 90 30 90 30 90 60 60 60

15.5 29.1 33.9 52 12.3 25.8 30.5 47.2 40 41 24.8

13.01 24.43 28.46 43.65 10.33 21.66 25.6 39.62 33.58 34.42 20.82

1.86 3.49 4.07 6.24 1.48 3.09 3.66 5.66 4.8 4.92 2.97

Fuente: Elaboracin propia

Figura 13. Rendimiento vs Numero de extraccin 7 6 Rendimiento (%) 5 4 3 2 1 0 Extraccin 1 Extraccin 5 Extraccin 9 Extraccin 2 Extraccin 6 Extraccin 10 Extraccin 3 Extraccin 7 Extraccin 11 Extraccin 4 Extraccin 8 1.86 1.48 3.49 4.07 3.09

6.24 5.66 4.8 3.66 2.97 4.92

Fuente: Elaboracin propia

93

4.2.2.1.

Desarrollo del diseo factorial

Tabla 39. Datos experimentales para resolucin del sistema factorial lineal N de extraccin X1 Variables codificadas X2 X3 Variable Respuesta Y

Variables Naturales Z1 Z2 Z3

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

-1 -1 -1 -1 1 1 1 1 0 0 0

-1 -1 1 1 -1 -1 1 1 0 0 0

-1 1 -1 1 -1 1 -1 1 0 0 0

15 15 15 15 25 25 25 25 20 20 20

1 1 3 3 1 1 3 3 2 2 2

30 90 30 90 30 90 30 90 60 60 60

1.86 3.49 4.07 6.24 1.48 3.09 3.66 5.66 4.8 4.92 2.97

Fuente: Elaboracin propia

A continuacin se ejemplifica el procedimiento de trasformacin para la humedad: Calculo de promedio Calculo de Radio Cambio de variable H = (15+25)/2 = 20 R = (25-15)/2 = 5 X1= (Z1-20)/5

Tabla 40. Transformacin de variables

Variables Humedad (%) Tamao de partcula (mm) Tiempo de extraccin (min)

Smbolo H Tp te

Smbolo (modelo) Z1 Z2 Z3

Promedio 20 2 60

Radio 5 1 30

Fuente: Elaboracin propia

94

Frmulas utilizadas para los clculos: o Desviacin cuadrtica:

o Varianza estndar y residual:

Donde: Nf= Nmero de puntos factoriales Nc= Nmero de puntos centrales L= Numero de coeficientes o Desviacin estndar o Prueba t de Student Formula de Excel: =DISTR.T.INV (grados de libertad, probabilidad). o Efecto de curvatura

o Calculo de la F estadstica de Fisher

95

Calculo de la varianza o Varianza Estimada Promedio de puntos centrales (Y) Desviacin cuadrtica (SDC) Varianza (Se2) Desviacin estndar (Se) Grados de libertad 1 (n-k) Probabilidad del 95% tp (95%, 7) = 4.23 = 1.801 = 1.194 = 1.093 =5 = 0.05 = 2.36

Los valores de tj menores a tp no tienen significancia y no participan del diseo.

Tabla 41. Anlisis del diseo factorial lineal


Extraccin N

X0

X1

X2

X3

X1X2

X1X3

X2X3

Y calc.

Y-Ycalc

1 2 3 4 5 6 7 8 SumX2 SumX*Y Bj Sbj tj tp(95%;7) SIGNIFIC

1 1 1 1 1 1 1 1 8 29.55 3.69 0.39 9.56 2.36 SI

-1 -1 -1 -1 1 1 1 1 8 -1.77 -0.22 0.39 -0.57 2.36 NO

-1 -1 1 1 -1 -1 1 1 8 9.71 1.21 0.39 3.14 2.36 SI

-1 1 -1 1 -1 1 -1 1 8 7.41 0.93 0.39 2.40 2.36 SI

1 1 -1 -1 -1 -1 1 1 8 -0.21 -0.03 0.39 -0.07 2.36 NO

1 -1 1 -1 -1 1 -1 1 8 -0.19 -0.02 0.39 -0.06 2.36 NO

1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 8 0.93 0.116 0.39 0.30 2.36 NO

1.86 3.49 4.07 6.24 1.48 3.09 3.66 5.66

1.55 3.97 3.41 5.83 1.55 3.97 3.41 5.83

-0.31 0.48 -0.66 -0.41 0.07 0.88 -0.25 0.17

Sumatoria de cuadrados

1.801

Fuente: Elaboracin propia

Modelo matemtico generado.

96

Reemplazando las variables naturales en el modelo

Efecto de curvatura

Promedio de los experimentos factoriales Promedio de los puntos centrales Efecto de curvatura EC

= 3.694 = 4.23 = 0.536 = 0.592

El intervalo de confidencia est comprendido entre [1.128; -0.056] como el cero est comprendido en este intervalo el efecto de curvatura no es significativo. Determinacin de la bondad de ajuste

Desviacin cuadrtica (SDC) Varianza residual (Sr2) F estadstica de Fisher F de tablas

= 1.801 = 0.36 = 0.4 = 19.3

Existe bondad de ajuste ya que el F<Ftablas 0.4 < 19.3 Conclusin La ecuacin de regresin generada representa los datos

experimentales que le dieron origen y describe el sistema bajo estudio. Esta ecuacin en trminos de las variables originales es:

97

4.2.3. Discusin de la primera etapa.

En esta etapa se procedi primero a moler los frutos del molle mediante un molino para granos a tres diferentes aberturas 1, 2 y 3 mm, en esta etapa no se usaron mallas normalizadas para clasificar el tamao ya que el molle se rompe de una manera no uniforme y se apelmaza debido a la resina que se desprende en la molienda, lo cual dificultaba mucho el poder clasificarlo mediante la malla, las semillas una vez molidas pasaron a ser medidas aleatoriamente, dando resultados muy parecidos a la abertura fijada en el molino como se aprecia en las tablas 34, 35 y 36.

La influencia del tamao de la semilla es importante porque nos define la densidad del lecho, si se aplica una molienda mayor esto influira en la velocidad de extraccin, aumentara la densidad del lecho en consecuencia las partculas de las semillas desintegradas formaran una masa porque sus tamaos seran menores, por lo tanto el vapor atravesara el lecho a travs de las grietas formadas en la masa por el vapor y la velocidad de extraccin disminuira y el tiempo de extraccin aumentara para obtener un rendimiento aceptable.

Luego se procedi a la extraccin del aceite esencial variando el tamao de la semilla, la humedad de sta y el tiempo de extraccin, dando que para una humedad de 15%, con una tamao de partcula de 3mm y un tiempo de extraccin de 90 minutos, se obtiene el mayor rendimiento.

El tamao de la semilla optimo vendra a ser el de 3 mm ya que al molerlo hasta 1 mm, el rendimiento decae casi a la mitad (44.1 %), esto se puede apreciar en la extracciones 2 y 4 de la tabla 38.

Se desprende de la tabla 38 y figura 12 que la extraccin es violenta hasta los 40 minutos a partir de ah se vuelve lenta por lo cual nos permite determinar que el tiempo ptimo para la extraccin seria ste para poder minimizar los costos y hacer rentable el producto final.
98

Luego se desarroll el modelo factorial con replica en el punto central con el cual se hall el modelo matemtico que describe la extraccin dando:

Donde: : Tamao de partcula : Tiempo de extraccin.

Se desprende

de la ecuacin lineal que las variables que son

significativas para la extraccin del aceite esencial del fruto del molle son su tamao de partcula y el tiempo de extraccin siendo directamente proporcionales a ste.

Esto podra decir que si ponemos el molle con la semilla entera nos dara un mejor rendimiento pero esto no es as ya que al poner la semilla entera no se extrae nada de aceite ya que ste se encuentra encapsulado en la semilla, en la molienda realizada para reducir el tamao se debe limitar a slo quebrar la cscara mas no la semilla que se encuentra dentro de esta, pues el aceite esencial se encuentra entre ambas en estado libre.

Esta ecuacin se cumple para los lmites de los niveles planteados de las variables.

99

4.3.

Resultados de la segunda etapa: Caracterizacin del aceite esencial de molle En el Laboratorio de Servicios Industriales de la Escuela Profesional de Ingeniera Qumica de la Universidad Nacional de San Agustn, se realizaron los anlisis para la caracterizacin del aceite esencial de molle obtenido de la etapa anterior, segn las normas de INDECOPI (Ver Anexo N4).
Tabla 42. Propiedades Fisicoqumicas encontradas del Aceite Esencial de Molle.

PROPIEDAD
ASPECTO COLOR OLOR SABOR DENSIDAD RELATIVA 20/20C INDICE DE REFRACCIN 20C SOLUBILIDAD EN ETANOL ml aceite/ml alc RESIDUO DE EVAPORACION DESVIACIN POLARIMETRICA 20C (Solucin de 0.1 % en etanol absoluto) INDICE DE ACIDEZ (porcentaje como cido oleico) INDICE DE PEROXIDO (meq de O2 / Kg de muestra) INDICE DE ESTER

RANGO

Liquido lmpido y brillante De incoloro a amarillo plido Muy acentuado al olor de molle Astringente y picante 0,8404 1,4780 Hasta 80 % 8.02 +0.3 1,49 No se encontr 19.13

Fuente: Elaboracin propia.

4.3.1. Discusin de la segunda etapa.

A continuacin se presentan las propiedades fisicoqumicas obtenidas del aceite esencial en comparacin con los de la bibliografa:

100

Tabla 43. Comparacin de propiedades fisicoqumicas del aceite obtenido y de bibliografa MONTES, A., Y BANDINELLI, C., (33 Liq. lmpido y brillante Amarillo Plido Aromtico Ligeramente picante 0.8473 1.4956 0.8575 1.4887 0.556-0.366 0.9037 a pimienta Olor reminiscente de molle

PROPIEDAD

OBTENIDOS Liquido lmpido y brillante De incoloro a amarillo plido Muy acentuado al olor de molle Astringente y picante 0,8404 1,4780 Hasta 80 % 8.02 +0.3 1,49 No se encontr 19.13

MARTINEZ (17),

FRITZCHE, B., (35) Liq. ligeramente coloreado

SCHIMEL, E (37)

DAVIDSON Y MONTES (38), Liq. Oleoso, lmpido mbar claro

ASPECTO COLOR OLOR SABOR DENSIDAD RELATIVA 20/20C INDICE DE REFRACCIN 20C SOLUBILIDAD EN ETANOL ml aceite/ml alc RESIDUO DE EVAPORACION DESVIACIN POLARIMETRICA 20C (Solucin de 0.1 % en etanol absoluto) INDICE DE ACIDEZ (porcentaje como cido oleico) INDICE DE PEROXIDO (meq de O2 / Kg de muestra) INDICE DE ESTER

1.4790-1.4818 Hasta 90%

1.4921

+0.49245 0.285 2.4 - 2.5 0.4 1.5

20.5

10.5 8.3

14.0

15.53

101

La densidad relativa hallada se encuentra dentro del rango promedio obtenido por otros autores. El ndice de refraccin obtenido es menor al de los de bibliografa. En lo que respecta al ndice de acidez se presentan variaciones significativas entre todos los valores, igualmente en el ndice de ster ya que esto depende del promedio de triglicridos o cidos grasos presentes y esto vara de acuerdo al tipo de molle y la localizacin de ste. No se encontraron perxidos lo que significa que el aceite esencial no ha sufrido auto-oxidacin.

Luego se realiz la cromatografa de gases con deteccin de masas en el laboratorio de ensayo y control de calidad de la Universidad Catlica de Santa Maria (ver Anexo 3: Informe de ensayo), y se encontraron los siguientes componentes:

102

Tabla 44. Metabolitos


COMPONENTE FRMULA ESTRUCTURAL

secundarios encontrados en el aceite esencial extrado


CANTIDAD (%) FUNCIN OBSERVACIONES Y/O USOS

FRMULA EMPRICA

Alfa Felandreno

C10H16

45.34

Aromatizante Saborizante

Tiene aplicaciones industriales mayormente como un producto qumico para sntesis; participando en mezclas con otros metabolitos voltiles como el pineno y limoneno, para aromatizar bebidas, licores, perfumes, dentfricos, jabones y cremas cosmticas (Ortuo, 2006).

Beta Mirceno

C10H16

32.16

Anti-inflamatorio Sedante Analgsico Relajante muscular

Acta como anti-inflamatorio interfiriendo en la va de sealizacin inflamatoria de las prostaglandinas. Es el principio sedante del lpulo, ste se utiliza en herboristera y en las terapias naturales para conciliar el sueo. En animales de laboratorio estn claramente demostradas sus propiedades sedantes, hipnticas, anlagsicas y de relajante muscular. (Fundacin Canna)

103

Beta Felandreno

C10H16

11.54

Desinfectante Aromatizante Disolvente Fungicida

Forma parte de la trementina que es utilizada como desinfectante, aromatizante, disolvente en la industria de pinturas y barnices. Dispersante de pigmentos debido a que es una sustancia apolar en pinturas. Se utiliza como sustancia secante. Se le atribuyen virtudes fungicidas.

Alfa Pineno

C10H16

3.69

Repelente Antibitico Anti-inflamatorio Bronco-dilatador Desodorante

Es el terpeno ms ampliamente distribuido en la naturaleza. Forma parte del sistema qumico de comunicacin de los insectos y acta como repelente para estos. Tienen una amplia actividad antibitica, incluso frente a patgenos resistentes a los antibiticos. Una de las mayores actividades teraputicas que tienen es la de anti-inflamatorio, bloqueando la sealizacin inflamatoria de las prostaglandinas de manera similar al mirceno. Tambin tienen actividad como bronco-dilatador en humanos cuando vienen inhalados a bajas concentraciones Es un inhibidor de la acetilcolinoesterasa, pudiendo tener efectos favorables sobre la memoria. (Fundacin Canna) Est presente en la mayora de los olores de los frutos y de la madera; y se emplea como desodorante por su agradable olor a pino, y se encuentra en la mayora de los limpiadores y desodorantes de uso cotidiano (AiroCide, 2006)
104

Cariofileno

C15H24

2.59

Insecticida Antifngico Anti-inflamatorio Anti-coagulante

El xido de carofileno est implicado en el sistema de defensa de las plantas, actuando como insecticida y antifngico. El cariofileno y el C C actan conjuntamente en la defensa frente ataques de hongos. Adems, el xido de cariofileno ha demostrado efectividad clnica contra ciertos casos de infeccin fngica. El beta-cariofileno tiene propiedades antiinflamatorias actuando a dos niveles, uno a nivel de bloqueo de la va inflamatoria de las prostaglandinas, igual que el mirceno y el pineno. Debido a su accin sobre la va de las prostaglandinas, el cariofileno tiene propiedades anti-coagulantes sanguneas e, inesperadamente, tiene propiedades de protector gstrico. (Fundacin Canna)

Fuente: Elaboracin propia

105

A continuacin se presenta los componentes del aceite esencial obtenido y los hallados por los diferentes autores de la bibliografa:
Tabla 45. Comparacin de componentes del aceite esencial obtenido y de bibliografa
TESIS MOLLE RAMOS P. REINOSO T. MARTINEZ MONTES, A., Y BANDINELLI, C. GILDEMEISTER , E. y HOFFMANN, F BERNHARD, R., y WROLSTAD, R. SCHIMEL, E DAVIDSON Y MONTES TEJADA

Alfa Felandreno Beta Mirceno Beta Felandreno Alfa Pineno Cariofileno

Mirceno Fenoles

-pineno d--felandreno -felandreno Formiato de -Terpinol -Terpinol

y felandreno -Pineno

-pineno Mirceno -pineno -felandreno Limoneno p-cymeno

Felandreno Fenoles

-pineno -felandreno Oroetil Carvacrol (1.33%) Alcoholes totales en terpenol(15%)

- y felandreno Sabineno Terpineno Candineno Canfeno limoneno

El alfa y beta felandreno son los componentes mayoritarios y es comn en las caracterizaciones realizadas por otros autores a excepcin de Martinez.

Otro componente comn en todas las investigaciones es el alfa pineno y es el que acta como repelente.

En menor proporcin se identific cariofileno, en los datos de bibliografa ninguno de los autores lo obtuvo, que tiene propiedades insecticidas.

En nuestra caracterizacin no se encontr limoneno que es otro componente que acta como repelente y que se encuentra presente en la mayora de las caracterizaciones realizadas por los autores de la bibliografa.

106

4.4.

Resultados de la tercera etapa: Formulacin de la crema repelente.

4.4.1. Desarrollo del diseo factorial


Tabla 46. Toma de datos de la tercera etapa.

Prueba N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

Variables codificadas V1 V2 V3 -1 -1 -1 -1 -1 1 -1 1 -1 -1 1 1 1 -1 -1 1 -1 1 1 1 -1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Variables naturales W1 W2 W3 60 50 5 60 50 15 60 70 5 60 70 15 80 50 5 80 50 15 80 70 5 80 70 15 70 60 10 70 60 10 70 60 10

Viscosidad (cp) 20760 20440 20730 20300 16040 15560 15820 15440 18040 17640 18360

Extensibilidad (mm2) 955.26 816.87 695.13 643.55 2332.83 2022.85 3807.34 3204.44 2375.84 982.84 969.00

Fuente: Elaboracin propia

Tabla 47. Transformacin de variables

Variables Porcentaje de fase acuosa (%) Temperatura de mezcla (C) Tiempo de agitacin (min)

Smbolo

Promedio
70 60 10

Radio
10 10 5

Pfa (W1) Tm (W2) tag (W3)

Fuente: Elaboracin propia

4.4.2. Desarrollo del diseo factorial para la extensibilidad Calculo de la varianza o Varianza Estimada Promedio de puntos centrales (R) = 1442.56
107

Desviacin cuadrtica (SDC) Varianza estimada (Se2) Desviacin estndar (Se) Grados de libertad 1 (n-k) Grados de libertad 2 (C-1) Probabilidad del 95% tp (95%, 7)

= 858215.78 = 429107.89 = 808.27 =5 =2 = 0.05 = 2.36

Los valores de tj menores a tp no tienen significancia y no participan del diseo.

Tabla 48. Anlisis del diseo factorial lineal para la extensibilidad


Extraccin N 1 2 3 4 5 6 7 8 Sum X2 Sum X*Y Bj Sbj tj tp(95%,7) SIGNIF.

V0
1 1 1 1 1 1 1 1 8 14478.27 1809.78 285.77 6.33 2.36 SI

V1
-1 -1 -1 -1 1 1 1 1 8 8256.65 1032.08 285.77 3.61 2.36 SI

V2
-1 -1 1 1 -1 -1 1 1 8 2222.65 277.83 285.77 0.97 2.36 NO

V3
-1 1 -1 1 -1 1 -1 1 8 -1102.85 -137.86 285.77 -0.48 2.36 NO

V1V2
1 1 -1 -1 -1 -1 1 1 8 3089.55 386.19 285.77 1.35 2.36 SI

V1V3
1 -1 1 -1 -1 1 -1 1 8 -722.91 -90.36 285.77 -0.32 2.36 NO

V2V3
1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 8 -206.11 -25.764 285.77 -0.09 2.36 NO

E
955.26 816.87 695.13 643.55 2332.83 2022.85 3807.34 3204.44 Sumatoria de cuadrados

Ecalc
1163.9 1163.9 391.51 391.51 2455.7 2455.7 3228.1 3228.1

Ecalc-E (desv)
208.63 347.02 -303.62 -252.04 122.84 432.82 -579.29 23.61 858215.78

Fuente: Elaboracin propia

Modelo matemtico generado.

Reemplazando las variables naturales en el modelo

108

Efecto de curvatura

Promedio de los experimentos factoriales Promedio de los puntos centrales Efecto de curvatura EC

= 1809.784 = 1442.56 = -367.224 = 437.99

El intervalo de confidencia est comprendido entre [70.77; -805.22] como el cero est comprendido en este intervalo el efecto de curvatura no es significativo. Determinacin de la bondad de ajuste

Desviacin cuadrtica (SDC) Varianza residual (Sr2) F estadstica de Fisher F de tablas

= 858215.78 = 143035.96 = 0.33 = 19.3

Existe bondad de ajuste ya que el F<Ftablas 0.33 < 19.3 Conclusin La ecuacin de regresin generada representa los datos

experimentales que le dieron origen y describe el sistema bajo estudio. Esta ecuacin en trminos de las variables originales es:

109

4.4.3. Desarrollo del diseo factorial para la viscosidad Calculo de la varianza o Varianza Estimada Promedio de puntos centrales (R) Desviacin cuadrtica (SDC) Varianza estimada (Se2) Desviacin estndar (Se) Grados de libertad 1 (n-k) Grados de libertad 2 (C-1) Probabilidad del 95% tp (95%, 7) = 18013.33 = 43162.5 = 21581.25 = 360.74 =5 =2 = 0.05 = 2.36

Los valores de tj menores a tp no tienen significancia y no participan del diseo.

Tabla 49. Anlisis del diseo factorial lineal para la viscosidad


Extraccin N 1 2 3 4 5 6 7 8
Sum X2 Sum X*Y Bj Sbj tj tp(95%,7) SIGNIF.

X0 1 1 1 1 1 1 1 1
8 145090 18136.25 127.54 142.20 2.36 SI

X1 -1 -1 -1 -1 1 1 1 1
8 -19370 -2421.25 127.54 -18.98 2.36 SI

X2 -1 -1 1 1 -1 -1 1 1
8 -510 -63.75 127.54 -0.50 2.36 NO

X3 -1 1 -1 1 -1 1 -1 1
8 -1610 -201.25 127.54 -1.58 2.36 SI

X1X2 1 1 -1 -1 -1 -1 1 1
8 -170 -21.25 127.54 -0.17 2.36 NO

X1X3 1 -1 1 -1 -1 1 -1 1
8 -110 -13.75 127.54 -0.11 2.36 NO

X2X3 1 -1 -1 1 1 -1 -1 1
8 -10 -1.250 127.54 -0.01 2.36 NO

S calc.

S-Scalc -1.25 -83.75 28.75 56.25 -123.75 -46.25 96.25 73.75

20760 20759 20440 20356 20730 20759 20300 20356 16040 15916 15560 15514 15820 15916 15440 15514 Sumatoria de cuadrados

43162.5

Fuente: Elaboracin propia

110

Modelo matemtico generado.

Reemplazando las variables naturales en el modelo

Efecto de curvatura

Promedio de los experimentos factoriales Promedio de los puntos centrales Efecto de curvatura EC

= 18136.25 = 18013.33 = -122.92 = 195.48

El intervalo de confidencia est comprendido entre [72.57; -318.39] como el cero est comprendido en este intervalo el efecto de curvatura no es significativo. Determinacin de la bondad de ajuste

Desviacin cuadrtica (SDC) Varianza residual (Sr2) F estadstica de Fisher F de tablas

= 43162.5 = 7193.75 = 0.33 = 19.30

Existe bondad de ajuste ya que el F<Ftablas

0.33 < 19.30

111

Conclusin

La

ecuacin

de

regresin

generada

representa

los

datos

experimentales que le dieron origen y describe el sistema bajo estudio. Esta ecuacin en trminos de las variables originales es:

112

Tabla 50. Recoleccin de datos de la tercera etapa

N MUESTRA

% FASE ACUOSA

TEMP. C

TIEMPO Min

COLOR

OLOR

PESO ESPECFICO

pH

EXTENSIBILIDAD (mm2)

VISCOSIDAD (cp)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

60 60 60 60 80 80 80 80 70 70 70

50 50 70 70 50 50 70 70 60 60 60

5 15 5 15 5 15 5 15 10 10 10

Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino Blanquecino

caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle caracterstico del molle

0.9338 0.8507 0.9317 0.9361 0.9571 0.9474 0.9312 0.9413 0.9246 0.9472 0.9383

5.64 5.07 3.38 4.65 3.52 3.43 7.15 6.49 6.67 5.42 5.68

955.26 816.87 695.13 643.55 2332.83 2022.85 3807.34 3204.44 2375.84 982.84 969.00

20760 20440 20730 20300 16040 15560 15820 15440 18040 17640 18360

Fuente: Elaboracin propia

113

4.4.4. Discusin de la tercera etapa.

En esta etapa se prepararon 11 muestras de cremas a diferentes temperaturas de mezcla, tiempos de agitacin y porcentajes de fase acuosa como se presenta en la tabla 49.

Luego a estas once muestras se les someti a ensayos de viscosidad y extensibilidad, para la viscosidad se utiliz el viscosmetro Brookfield modelo DV-II +, las once muestras se colocaron en el usillo del viscosmetro, estos resultados se aprecian en la tabla 49.

Para la prueba de extensibilidad se utiliz el mtodo detallado en el captulo 3, en el procedimiento experimental de sta etapa, estos resultados se aprecian en la tabla 49, de ac se desprende que a medida que se aumentan las tres variables la viscosidad disminuye y la extensibilidad aumenta.

Se aprecia que la viscosidad y extensibilidad son inversamente proporcionales, se buscar la crema con menor viscosidad y por lo tanto con mayor extensibilidad, esto para que la presentacin de la crema sea de fcil aplicacin y minimizar el consumo de materia prima en la elaboracin del repelente y por lo tanto hacerlo ms econmico pero sin descuidar el porcentaje de proteccin que ste debe tener para ser competitivo con los del mercado.

Se determina que la muestra nmero 8, con 80 % de fase acuosa, 70 C de temperatura de mezcla y 15 min de agitacin es la que presenta mejor viscosidad y extensibilidad y es la que se elige para proseguir con la pruebas de porcentaje de proteccin, en las cuales se vara la cantidad de aceite esencial en la crema.

Luego se hacen controles fisicoqumicos a las 11 muestras, como olor y color que para todas son olor caracterstico a molle y el color

114

blanquecino, luego se procede a determinar el peso especfico de cada muestra con ayuda de una picnmetro de 10 ml y una balanza analtica y por ltimo el Ph, todos estos resultados se aprecian en la tabla 49. Vemos que el peso especfico se mantiene casi constante para todas las muestras y as tambin el pH que tiende a ser un poco acido.

Luego se procede a desarrollar el diseo factorial con replica en el punto central para la extensibilidad, dndonos un modelo matemtico lineal:

De este modelo se desprende que las variables significativas son el porcentaje de fase acuosa y la temperatura de mezcla, a medida que se aumentan estos la crema tendr una extensibilidad mayor. Esta ecuacin se cumple para los lmites de los niveles planteados de las variables.

Luego se procede a desarrollar el diseo factorial con replica en el punto central para la viscosidad, dndonos un modelo matemtico lineal:

De este modelo se desprende que las variables ms significativas son el porcentaje de fase acuosa y el tiempo de agitacin, a medida que se aumenten stos la viscosidad disminuir. Esta ecuacin se cumple para los lmites de los niveles planteados de las variables.

115

4.5.

Resultados de la cuarta etapa: Pruebas de proteccin y comparacin con otros repelentes del mercado

4.5.1. Pruebas con Repelentes del mercado.


Tabla 51. Porcentajes de Proteccin de los repelentes del mercado

NUMERO DE PICADURAS CON Prueba N REPELENTE GNERO REPELENTE

NUMERO DE PICADURAS SIN REPELENTE

PORCENTAJE DE PROTECCION

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

4 hr

1 2 3 4 5 6

R1 R1 R2 R2 R3 R3

M F M F M F

0 0 0 0 0 0

0 0 0 0 0 0

1 1 0 0 2 1

3 1 2 0 3 1

6 4 5 3 4 6

20 13 17 10 16 18

33 27 29 23 32 28

48 39 41 37 50 44

93.75 97.44 95.12 100 94 97.73

Fuente: Elaboracin propia

4.5.2. Pruebas con la crema formulada

Tabla 52. Porcentajes de Proteccin de las cremas formuladas

NUMERO DE PICADURAS CON Prueba N REPELENTE GNERO REPELENTE

NUMERO DE PICADURAS SIN REPELENTE

PORCENTAJE DE PROTECCION

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

1 hr

2 hr

3 hr

4 hr

4 hr

1 2 3 4 5 6

F1 F1 F2 F2 F3 F3

M F M F M F

0 0 0 0 0 0

3 0 0 0 0 0

3 3 2 1 0 0

4 3 2 1 1 1

2 3 4 3 3 4

15 10 14 12 9 15

25 24 26 22 19 28

45 31 40 34 36 41

91.11 90.32 95 97.06 97.22 97.56

Fuente: Elaboracin propia

116

4.5.3. Comparacin de los porcentajes de proteccin de las formulaciones y repelentes del mercado.

Tabla 53. Comparacin de repelentes formulados con repelentes del mercado


PORCENTAJE DE REPELENTE GENERO DE LA PERSONA PROTECCION

4 hr

R1 R1 R2 R2 R3 R3 F1 F1 F2 F2 F3 F3

M F M F M F M F M F M F

93.75 97.44 95.12 100 94.0 97.73 91.11 90.32 95.0 97.06 97.22 97.56

Fuente: Elaboracin propia

Donde: R1: Repelente en spray, tiene como principio activo DEET (Dietiltoluamida al 14.994%) R2: Repelente en crema, tiene como principio activo DEET (Dietiltoluamida pero no especifica concentracin) R3: Repelente en crema, tiene como principio activo Butilacetilaminopropianato de etilo al 15% F1: Formulacin en crema con 6 % de aceite esencial de molle F2: Formulacin en crema con 8 % de aceite esencial de molle F3: Formulacin en crema con 10 % de aceite esencial de molle

En estos resultados se aprecia que las formulaciones tienen igual a mejor porcentaje de repelencia que los repelentes del mercado en estudio.

117

Figura 14. Porcentaje de proteccin para diferentes repelentes 102 100 98 96 94 92 90 88 86 84 R1 R2 R3 Masculino F1 Femenino F2 F3 97.44 95.12 93.75 94 91.11 90.32

100 97.73 95 97.06 97.56 97.22

Fuente: Elaboracin propia

4.5.4. Discusin cuarta etapa.

Las pruebas para calcular el porcentaje de proteccin se realizaron en el Molino de Sabanda ya que presentaba las condiciones idneas como hbitat de mosquitos.

Para ambas personas se aplic el repelente en evaluacin en una pierna dejando la otra pierna expuesta.

Durante las dos primeras horas se observa que los mosquitos sobrevuelan el rea de la pierna con repelente, llegando a posarse en algunos casos pero sin producir picadura alguna, a excepcin de la prueba con F1 que pasada la primera hora se produce la primera picadura. En la pierna sin repelente se producen las picaduras desde desde el primer minuto de exposicin, observndose durante las 4 horas que la persona de gnero masculino sufre mayor nmero de picaduras a comparacin de la persona de gnero femenino, esto se debe a que cada persona posee una repelencia natural.
118

Ante estos resultados podemos decir que R1, R2, R3, F2 y F3 tienen una proteccin completa de 2 horas.

Se obtuvo el mayor porcentaje de proteccin con R2 (Repelente en crema, tiene como principio activo DEET) alcanzando un 100%., ste resultado se dio para la persona de gnero femenino, quien no present ninguna picadura durante las 4 horas de pruebas, alcanzando un total de 37 picaduras en la pierna sin repelente.

En el caso de la crema formulada, se obtuvieron porcentajes de 97.06% y 95 % para F2 (concentracin al 8%) en las persona de gnero femenino y masculino respectivamente, para F3 (concentracin al 10%) se obtuvieron porcentajes de 97.56 % y 97.06 % para las personas de gnero femenino y masculino respectivamente, igualando y en otros casos superado el de los repelentes de mercado, slo para F1 el porcentaje de proteccin es inferior a la de los repelentes de mercado en ambos gneros.

Se concluye que la formulacin idnea para un repelente en crema que iguale en porcentaje de proteccin a los del mercado es F3, que tiene en su composicin 10 % de aceite esencial de molle.

119

CAPITULO V COSTOS DE LA INVESTIGACIN


5.1. Fuente de financiamiento

5.1.1. Costos Directos Los costos directos, comprenden los costos por materia prima, equipos e instrumentos, reactivos, materiales, anlisis qumicos e imprevistos.

Tabla 54. Resumen Costos Directos.

RUBRO

COSTO SUB TOTAL (S/.)

Equipos instrumentos. Materiales Reactivos Insumos Muestra (Molle) Anlisis Imprevistos considerados por equipos e instrumentos TOTAL

0 164.8 13.5 30.20 30 215 0 453.5

Fuente: Elaboracin propia.

120

5.1.2. Costos Indirectos

Los costos indirectos comprenden los costos por servicios y suministros, gastos administrativos, investigacin bibliogrfica e imprevistos.
Tabla 55. Costos

Indirectos. COSTO SUB TOTAL (S/.) 80 1000 200 100 1380

RUBRO Servicios y suministros Gastos administrativos Investigacin bibliogrfica Imprevistos considerados por gastos administrativos TOTAL

Fuente: Elaboracin propia

5.2. INVERSIN.

El monto total de la inversin en la presente investigacin fue de:

- Costos Directos - Costos indirectos Inversin

: : :

453.50 1380.00 1833.50 nuevos soles

5.3. FINANCIAMIENTO.

El financiamiento de la presente investigacin fue asumida en forma total por los tesistas.

121

CONCLUSIONES
1. Se obtuvo el aceite esencial de los frutos del rbol de molle mediante el mtodo de arrastre con vapor, se analizaron las variables del proceso: humedad, tamao de partcula y tiempo de extraccin, el mximo rendimiento que se obtuvo fue de 6,24 % a un tamao de partcula de 3mm, humedad del 15 % y tiempo de extraccin de 90 minutos.

2. Se desarroll el modelo factorial con replica en el punto central con el cual se hall el modelo matemtico que describe el rendimiento de la extraccin dando:

Donde: : Tamao de partcula : Tiempo de extraccin.

Las variables que son significativas para la extraccin del aceite esencial del fruto del molle son su tamao de partcula y el tiempo de extraccin siendo directamente proporcionales a ste.

3. Se realiz la caracterizacin fisicoqumica del aceite esencial de acuerdo a las normas establecidas por INDECOPI:

122

PROPIEDAD
ASPECTO COLOR OLOR SABOR DENSIDAD RELATIVA 20/20C INDICE DE REFRACCIN 20C SOLUBILIDAD EN ETANOL ml aceite/ml alc RESIDUO DE EVAPORACION DESVIACIN POLARIMETRICA 20C (Solucin de 0.1 % en etanol absoluto) INDICE DE ACIDEZ (porcentaje como cido oleico) INDICE DE PEROXIDO (meq de O2 / Kg de muestra) INDICE DE ESTER

RANGO

Liquido lmpido y brillante De incoloro a amarillo plido Muy acentuado al olor de molle Astringente y picante 0,8404 1,4780 Hasta 80 % 8.02 +0.3 1,49 No se identific 19.13

Tambin se incluye la cromatografa de gases para determinar los compuestos que lo conforman, siendo los mayoritarios: Alfa Felandreno (45.34%), beta-Mirceno (32.16%), beta-felandrano (11.54%), alfapineno (3.69%), cariofileno (2.59%). El componente activo determinado es alfa pineno, este es el causante de la repelencia sobre los mosquitos del aceite esencial de molle.

4. Se prepar la crema repelente, analizando las variables de: porcentaje de la fase acuosa, tiempo de agitacin y temperatura de mezcla, teniendo como variables respuesta la viscosidad y extensibilidad, la crema con mejores resultados fue la N8 que tiene un porcentaje de fase acuosa del 80 %, con una viscosidad de 15440 cp y una extensibilidad de 3204.44 mm2.

5. Se desarroll el diseo factorial con replica en el punto central para la extensibilidad, dndonos un modelo matemtico lineal:

123

Las variables significativas son el porcentaje de fase acuosa y la temperatura de mezcla, a medida que se aumenten estos la crema tendr una extensibilidad mayor. Esta ecuacin se cumple para los lmites de los niveles planteados de las variables.

6. Se desarroll el diseo factorial con replica en el punto central para la viscosidad, dndonos un modelo matemtico lineal:

Las variables ms significativa son el porcentaje de fase acuosa y el tiempo de agitacin, a medida que se aumenten stos la viscosidad disminuir. Esta ecuacin se cumple para los lmites de los niveles planteados de las variables.

7. Se realizaron las pruebas de porcentaje de proteccin para la muestra que obtuvo los mejores resultados de viscosidad y extensibilidad (prueba n8) a diferentes porcentajes de aceite esencial: 6, 8 y 10 %. Tambin se realizaron las pruebas de porcentaje de proteccin para tres distintos repelentes del mercado y estos seis repelentes se probaron en hombres y mujeres. Se alcanza un porcentaje de proteccin de 97.56 % de la formulacin al 10 % de aceite esencial (F3), superior a otros porcentajes de otros repelentes de mercado R1 y R3 pero todava por debajo de R2, es por esto que nuestro producto es competitivo en el mercado y se podra comercializar en el futuro generando empleos directos e indirectos para el pas.
124

RECOMENDACIONES

Elaborar un anteproyecto en otras investigaciones para la instalacin de una planta de repelentes a base del aceite esencial de molle.

Evaluar la crema repente como posible crema analgsica ya que en la composicin del aceite se hall el Beta Mirceno en un 32 % y ste tiene un efecto analgsico comprobado.

La semilla de molle no se debe moler demasiado ya que esto ocasiona problemas en la extraccin al formarse una goma en el aceite.

Se debe dejar secar la semilla de molle al sol ya que esta se hace ms manejable en la molienda al no apelmazarse demasiado.

Evaluar el uso de los residuos de molle de la extraccin como abono orgnico.

Evaluar el uso de fragancias en la crema repelente ya que el olor a molle es bastante intenso.

125

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128

ANEXOS

129

ANEXO N1 Ensayos de Laboratorio para la Caracterizacin del aceite esencial del fruto del molle

130

1. Determinacin de la densidad y densidad relativa del aceite esencial


Peso del picnmetro vaco Peso del picnmetro ms agua destilada (P1) Peso del picnmetro ms aceite esencial (P2) Volumen del picnmetro Densidad a 20C: = 50 ml = 81.3658 g = 39.5908 g = (P) g

89.2134

Densidad Relativa:

2. Determinacin del ndice de Refraccin


Se utiliz el refractmetro porttil AB dando como resultado 1.4780.

3. Determinacin de la solubilidad en etanol


Hasta 80%.
Tabla 56. Determinacin de la solubilidad en etanol.

N 1 2 3

Volumen de etanol (ml) 96% 90% 85% 80% 75% 0.1 0.1 0.35 0.35 0.5 0.3 0.4 0.8 1.0 1.2 3 4.5 8.2 14 >20

Caracterstica Turbio Opalescente (Lechozo) Claro

Fuente: Elaboracin propia

131

4. Residuo de Evaporacin
Siguiendo el procedimiento de la norma Indecopi:

Donde: P= El peso en gramos de la muestra de ensayo P1= El peso de gramos del residuo de evaporacin

5. Desviacin Polarimtrica.
Este ensayo se hizo en el laboratorio de ensayo y control de calidad de la Universidad Catlica de Santa Mara de Arequipa, dando como resultado: Desviacin Polarimtrica (20C) (Solucin de 0.1 % en etanol absoluto)

+0.3

6. Determinacin del ndice de acidez


Muestra tomada: Muestra titulante: KOH 0.1 N

Una vez preparada la solucin titulante llenamos la bureta y enrazamos, luego agregamos dos gotas de fenoltaleina en la muestra de aceite esencial, y luego se procede a titular hasta que aparezca un color rosado constante es aqu donde anotamos el gasto.

132

Donde: V: volumen gastado P: Peso del aceite en g IA: ndice de acidez

7. Determinacin del ndice de ster.


Siguiendo el procedimiento de la norma Indecopi:

Donde: p = Peso en gramos de la muestra tomada V= Volumen en mililitros de cido clorhdrico utilizado para la determinacin V1=volumen en mililitros de cido clorhdrico utilizado en la prueba en blanco. IA= Valor del ndice de acidez

133

ANEXO N2 Ensayo de laboratorio para la determinacin de humedad de la semilla de molle

134

Determinacin de humedad

Principio El mtodo para determinar la cantidad de agua presente en la muestra se basa en la prdida de peso de la muestra por calentamiento en una estufa, refiriendo su peso al peso total de la muestra y expresada como porcentaje.

Aparatos 1.- Estufa que alcance 150C 2.- Balanza analtica

Procedimiento - Pesar en un crisol previamente tarado de 1 a 1,5 g. de muestra bien mezclada. - Colocar el crisol con la muestra en la estufa y mantener la temperatura a 105C durante 4 horas, el periodo de tiempo comienza cuando se tiene la temperatura deseada. - Despus del tiempo requerido, transferir el crisol al desecador y esperar a que alcance la temperatura ambiente (20 min. aproximadamente). - Pesar en la balanza analtica - Volver a colocar la muestra en la estufa nuevamente por 30 minutos. - Sacar de la estufa, enfriar nuevamente en el desecador y pesar - Continuar con la desecacin hasta peso constante

Clculos Determinar el contenido de humedad a partir de la prdida de peso de la muestra. %Humedad= (M1-M2) x 100 M

135

M1= peso del crisol mas muestra hmeda M2= peso del crisol mas muestra seca M= peso de la muestra FUENTE: Tcnicas de laboratorio para el anlisis de alimentos Pearson, D

136

ANEXO N3 Informes de Ensayos

137

138

139

ANEXO N4 Normas Tcnicas Usadas

140

NORMA TECNICA ACEITES ESENCIALES: DETERMINACIN DE LA DENSIDAD Y DE LA DENSIDAD RELATIVA ITINTEC 319.077 Aceites Esenciales. Preparacin de la Muestra para Anlisis. ITINTEC 319.079 Aceites Esenciales. Muestras. 1.- OBJETO 1.1 La presente Norma establece el mtodo para determinar la densidad y la densidad relativa de los aceites esenciales, lquidos a la temperatura de 20C. DEFINICIONES Y CLASIFICACIN Densidad a 20C de un aceite esencial.- Es la relacin entre el peso (masa) de un volumen dado de aceite esencial y su volumen, determinados a 20C. 2.1.1 Esta cantidad se expresa en gramos por mililitro y su smbolo es 2.1.2 . Todas las pesadas se hacen en aire. 3.- MTODOS DE ENSAYO 3.1 Principio del mtodo 3.1.1 Esta Norma requiere de valores con una precisin de tres cifras decmales: Se usa un picnmetro para pesar volmenes iguales del lquido en ensayo, con el objeto de obviar el uso de grandes cantidades de ste. Extraccin de

2.2.1

3.2 Aparatos 3.2.1 3.2.2 3.2.3 Balanza analtica, con una precisin de 0.5 mg. Bao de agua, mantenido a 20C 0,2C. Embudos y sifones para picnmetros.

141

Picnmetro de 50 ml, 25 ml 10ml de capacidad, de acuerdo al volumen de aceite esencial disponible. 3.2.5 Termmetro normalizado, dividido en quintos o dcimos de grados Celsuis para determinaciones de temperatura entre 10C y 30C. 3.3 Procedimientos 3.3.1 La preparacin de la muestra para el anlisis se efecta segn la Norma ITINTEC 319.077. 3.3.2 Se lava cuidadosamente el picnmetro, se escurre, se enjuaga sucesivamente con etanol y eter dietlico y se seca el interior por medio de una corriente de aire seco. 3.3.2.1 Se seca la parte externa del picnmetro con una tela seca o un papel de filtro y se inserta el tapn. 3.3.2.2 Se coloca el picnmetro en la balanza y se le deja durante 30 minutos, luego se pesa. 3.3.3 Se llena el picnmetro con agua destilada aproximadamente 20C y recientemente hervida, teniendo cuidado de evitar la presencia de burbujas de aire. 3.3.3.1 Se coloca el picnmetro en un bao de agua a 20C 0.2C durante 30 minutos. Se comprueba la temperatura del bao de agua por medio del termmetro normalizado y se enrasa con agua destilada hasta la marca. 3.3.3.2 Se inserta el tapn al picnmetro y se seca la parte exterior con una tela seca o un papel de filtro. 3.3.3.3 Se coloca el picnmetro en la balanza, y se deja durante 30 minutos, luego se pesa con el contenido (P1). 3.3.4 Se vaca, el picnmetro, se lava con etanol y despucon etanol y despus con eter dietlico y se seca por medio de una corriente de aire seco.

3.2.4

142

3.3.5 Se llena el picnmetro con el aceite esencial, que debe estar aproximadamente 20C, evitando la presencia de burbujas de aire. 3.3.5.1 Se vuelve a colocar el picnmetro en el bao de agua a 20C 0.2C y se le deja durante 30 minutos. Se enrasa con aceite esencial hasta la marca y se procede como en 3.3.3.2 y 3.3.3.3 obtenindose un peso (P2) 3.4 Expresin de resultados 3.4.1 Sea: P1 P2 el peso, en gramos, del picnmetro vaco el peso, en gramos, del picnmetro lleno con agua destilada a 20C el peso, en gramos, del picnmetro lleno con aceite esencial a 20C

3.4.2 La densidad 20, en gramos por mililitro, se da por la siguiente frmula:

3.4.3 La densidad relativa siguiente:

se da por la frmula

3.4.4 la densidad relativa siguiente:

se da por la frmula

3.5 Precisin de los resultados


La densidad

la

densidad de un

relativa aceite

y esencial

la se

densidad

relativa

143

expresan con una precisin de por lo menos tres cifras decimales. NORMA TCNICA NACIONAL ACEITES ESENCIALES: DETERMINACIN DEL NDICE DE REFRACCIN 1. OBJETO 1.1 La presente Norma establece el mtodo para determinar el ndice de refraccin de los aceites esenciales. 2. DEFINICIONES Y CLASIFICACIN 2.1 ndice de refraccin de un aceite esencial.- Es la relacin del seno del ngulo de incidencia al seno del ngulo de refraccin de un rayo luminoso de longitud de onda determinada, que pasa del aire al aceite esencial mantenido a una temperatura constante. 3. MTODO DE ENSAYO 3.1 Principio del mtodo. 3.1.1 Consiste en la medicin del ngulo de refraccin del aceite esencial mantenido en condiciones de transparencia e isotropismo, siendo la longitud de onda de la luz de 689.3 mm (*), que corresponde a la lnea D del sodio y siendo la temperatura de 20C (Nota 1). Nota 1.- Cuando el aceite esencial no se encuentra al estado slido a 20C de 30C, segn el valor presumido de su punto de fusin. 3.2 Aparatos 3.2.1 Refractmetro clsico que permite la lectura directa de los ndices de refraccin comprendidos entre 1,3000 y 1,7000 con precisin de 0,0002 y calibrado de manera a obtener, a la temperatura de 20C, los siguientes ndices de refraccin. (Nota 2). Nota 2.de una conocido 1,3380 1,5811 Ciertos aparatos se pueden graduar por medio lmina de vidrio de ndice de refraccin de acuerdo a las indicaciones del fabricante. para el agua destilada para el benceno de uso crioscpico
144

1,6585

para el bromo - naftaleno

(*) Conocido tambin como el micrn. 3.2.2 Dispositivo regulador de la temperatura, que en una temperatura, que mantiene el aparato en una temperatura constante a 0.2C. 3.2.3 Fuente luminosa.- Luz de sodio (longitud de onda 589,3 mm) o, si el refractmetro est provisto de un dispositivo ptico compensador, luz difusa de da o de una lmpara elctrica. 3.3 Procedimiento. 3.3.1 Preparacin laboratorio. de la muestra destinada al

Se efecta de acuerdo a la Norma correspondiente. 3.3.2. Determinacin.3.3.2.1 Se verifica que la temperatura a la cual se efecta las mediciones, no difiera ms de 2C de la temperatura de referencia y que se mantenga constante a 0.2C durante la operacin. 3.3.2.2 Se lleva el aceite esencial a una temperatura aproximadamente igual a aquella en que se debe hacer la medicin y se coloca en el dispositivo del aparato. 3.3.3. Se espera a que la temperatura se estabilice y se efecta entonces la lectura. 3.3.3.1 Sea el valor de la lectura a la temperatura

t, el ndice de refraccin a la temperatura de referencia t, es dado por la siguiente frmula.

3.3.3.2 En general y salvo indicaciones contrarias, se menciona a=0,0004. 3.3.3.3 El ndice de refraccin del aceite esencial se expresa por un nmero con cuatro decimales.
145

3.3.4 Informe 3.3.4.1 El informe debe, adems de los resultados, mencionar todas las condiciones del ensayo, los detalles del procedimiento no previstos en la Norma o facultativos, as como todos los incidentes que puedan influir en los resultados.

146

NORMA TCNICA NACIONAL ACEITES ESENCIALES: DETERMINACIN DE LA SOLUBILIDAD EN ETANOL Normas a Consultar ITINTEC 319.075 ITINTEC 319.077 ITINTEC 319.079 Aceites Esenciales. Determinacin del Indice de Refraccin Aceites Esenciales. Preparacin de la muestra para Anlisis. Aceites Esenciales. Muestras. Extraccin de

1.- OBJETO 1.1 La presente Norma establece el determinacin de la solubilidad esenciales en diluciones de etanol. mtodo de de aceites

2.- DEFINICIONES Y CLASIFICACIN 2.1 Aceite esencial soluble en V o ms volmenes de etanol de graduacin dada t.- Es aquel cuya solucin clara en V volmenes de etanol de graduacin dada t, permanece igual despus de la adicin posterior de etanol de la misma concentracin, hasta completar un total de 20 volmenes del etanol empleado. Aceite esencial soluble en V volmenes de etanol en graduacin dada t que se enturbia al diluir.Es aquel cuya solucin clara en V volmenes de etanol de graduacin dada t se enturbia y permanece as despus de la adicin gradual de etanol de la misma concentracin hasta un total de 20 volmenes del etanol empleado. Aceite Esencial soluble en V volmenes de etanol se graduacin dada t, que se enturbia en V volmenes (V<20).- Es aquel cuya solucin clara en V volmenes de etanol de graduacin dada t se enturbia y permanece as despus de la adicin

2.2

2.3

147

gradual de etanol de la misma concentracin hasta un total de Vvolmenes del etanol empleado. 2.4 Aceite esencial soluble, con opalescencia.- Es aquel cuya solucin alcohlica al ser diluda muestra una tonalidad azul, siendo este color similar al del patrn de opalescencia recientemente preparado de acuerdo con 4.4.2.

3.- EXTRACCIN DE MUESTRAS Y RECEPCIN 3.1 4.4.1 Se realizar de acuerdo a lo indicado en la Norma ITINTEC-319.079. MTODOS DE ENSAYO Preparacin de la muestra a ensayar

4.1.1 Se realiza de acuerdo a lo indicado en la Norma ITINTEC319.077. 4.2 Principio del Mtodo

4.2.1 A la temperatura de 20C se adiciona progresivamente, al aceite esencial, una solucin acuosa de etanol de concentracin adecuada y conocida y se observa el grado de solubilidad. 4.3 Aparatos

4.3.1 Bureta de 25 ml 50ml, graduada al 0.1 ml. 4.3.2 Probeta de 25 ml 30 ml de capacidad, con tapa esmerilada. 4.3.3 Bao de temperatura constante, mantenido a 20C 0,2C. que pueda ser

4.3.4 Termmetro calibrado, graduado en quintos o dcimos de grados Celsius, que permita la determinacin de temperaturas entre 10C y 30C. 4.4 Reactivos

4.4.1 Soluciones diludas de etanol.Se usa normalmente soluciones de 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90 y 95% (V/V). Para preparar estas
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soluciones se debe usar el etanol ms puro posible y segn las directivas dadas en la Tabla. Se controla su concentracin con un alcoholmetro, un densmetro o por medida del ndice de refraccin. 4.4.2 Solucin patrn para opalescencia.- A 50 ml de una solucin 0,0002 N de cloruro de sodio, se aade 0,5 ml de solucin 0.1 N de nitrato de plata y una gota de cido ntrico concentrado (d20=1.38 g/ml). Se agita la solucin y se deja en reposo por cinco minutos. 4.5 Procedimiento

4.5.1 Se coloca dentro de una probeta (4.3.2) 1 ml de aceite esencial, medido con una pipeta, pesado con una exactitud de 5 mg 1. 4.5.2 Se coloca la probeta y su contenido en el bao de temperatura constante (4.3.3) mantenido a 20C 0.5C. 4.5.3 Usando la bureta (4.3.1), se aade la solucin diluida de etanol de concentracin conocida (4.4.1) el cual se debe haber llevado previamente a una temperatura de 20C 0.5C en incrementos de 0.1 ml hasta que el aceite se disuelva completamente, agitando frecuente y vigorosamente durante la adicin del solvente. Cuando la solucin sea perfectamente clara, se anota el volumen de la solucin de etanol (4.4.1) aadido. 4.5.4 Se contina aadiendo el solvente en incrementos de 0.5 ml hasta llegar a 20 ml y se sigue agitando despus de cada adicin. Si la solucin se pone turbia u opalescente antes de haber agregado un volumen total de 20ml de etanol, se anota el volumen en el momento en que aparece la turbidez u opalescencia, y eventualmente el volumen en el cual desaparece (V) 4.5.5 Si no se obtiene una solucin clara despus de aadir 20 ml de solvente, se repite el

Cuando el estado fsico del aceite esencial no permite utilizar una pipeta, se pesa 1 g 0,005 g del mismo. En este caso los resultados se deben expresar en peso y volumen.

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procedimiento con la siguiente concentracin ms alta de la solucin de etanol dada en la Tabla. 4.6 Expresin de resultados

4.6.1 S: V es el volumen, en ml, de solucin de etanol a la dilucin t necesaria para obtener una solucin clara; Es el volumen, en ml, de solucin de etanol a la dilucin t, que produce turbidez, seguida de claridad, si ello ocurre; es el volumen, en ml, de solucin de etanol a la dilucin t, en el cual desaparece la turbidez.

La solubilidad del aceite esencia en la solucin diluda de etanol de concentracin t ser. El volumen en V volmenes, con turbidez entre V y V volmenes. 4.6.2 Exactitud de los resultados.- Se expresan los valores V, V y V por nmeros hasta con un decimal. Si la solucin no es completamente clara sino slo opalescente, se anota si la opalescencia es mayor que, igual a menor que aquella de la solucin patrn (4.4.2). 4.7 Informe

4.7.1 El informe del ensayo debe mencionar, adems de los resultados, el mtodo empleado, el mtodo de expresin de resultados, cualquier particularidad observada durante las determinaciones y cualquier detalle no sealado en esta Norma o considerada como opcional, pero que pueda haber afectado los resultados.

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TABLA Diluciones de etanol en volumen y en peso


Diluciones: ml de etanol en 100 ml de la mezcla (%v/v) a 0.1% Volumen de agua destilada a 20C que debe ser aadido a 100 ml de etanol al 95% (v/v) a la misma temperatura con una tolerancia entre 0.5C, para la preparacin de las diluciones correspondientes ml 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 95,8 77,9 62,9 50,2 39,1 29,5 20,9 13,3 6,4 0,0 46 51,1 56,4 61,9 67,6 73,4 78,6 86 92,7 100 54 48,9 43,6 38,1 32,4 26,6 20,4 14 7,3 0 0,9316 a 0,9320 0,9214 a 0,9213 0,9105 a 0,9110 0,8990 a 0,8994 0,8868 a 0,8873 0,8740 a 0,8745 0,8604 a 0,8610 0,8604 a 0,8466 0,8303 a 0,8309 0,8123 a 0,8131 0,9300 a 0,9304 0,9198 a 0,9202 0,9089 a 0,9094 0,8974 a 0,8973 0,8852 a 0,8857 0,8725 a 0,8730 0,8589 a 0,8595 0,8445 a 0,8451 0,8288 a 0,8294 0,8109 a 0,8117 1,3590 1,3698 1,3614 1,3625 1,3633 1,3640 1,3648 1,3648 1,3645 1,3638 Peso de etanol 95% (v/v) Peso del agua a ser aadida Lmites de la Densidad Relativa y la densidad aparente ndice de refraccin a 20C

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