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PREPARACION DE SOLUCIONES BUFFER

INTRODUCCION

I. OBJETIVOS 1.-Preparar y evaluar un sistema amortiguador de pH (buffer) 2.-Conocer los principios en los que se basa la preparacin y la accin de una solucin amortiguadora. 3.-Llevar acabo los clculos necesarios para preparar una solucin amortiguadora con ciertas caractersticas, y con estos datos preparar esta solucin. 4.- Verificar la estabilidad de la solucin amortiguadora en cuanto al cambio del pH. II. MARCO TEORICO Los denominados sistemas tampn o buffer representan la primera lnea de defensa que posee nuestro organismo ante los cambios desfavorables en el pH. Esto se debe a su capacidad de aceptar o ceder protones de manera tal de compensar los desequilibrios de nuestro medio interno, manteniendo los valores de pH dentro de un rango estricto. Las soluciones buffer estn constituidas por un cido dbil y su base conjugada. Ahora bien, que es un cido dbil? Si AH es un cido dbil significa que la unin AH no es vencida fcilmente por la interaccin de las especies qumicas A- y H+ con el agua. Por lo tanto AH se disociar parcialmente. En este caso A- es la base conjugada del cido AH ya que posee la capacidad de aceptar protones para convertirse en AH. La disociacin de un cido dbil esta se representa del siguiente modo: AH H+ + A- Si este cido fuera fuerte en una solucin acuosa lo encontraramos totalmente disociado, lo que significa que no encontraramos a la molcula AH como tal sino que existiran solamente portones (H+) y aniones A-. Sin embargo un cido dbil en solucin presentar no solo los mencionados iones sino tambin una concentracin de la molcula AH. La relacin entre las concentraciones de AH, y estn dadas por la Constante de Disociacin del cido (Ka) que es caracterstica de cada sustancia: [H+] [A-] Ka = ----------------- [AH] La tendencia de cualquier cido dbil a disociarse, es decir la fuerza del cido, est dada por la constante de disociacin. Cuanto mayor es Ka, ms disociado estar el cido en solucin y mayor ser su fuerza. El valor de pH en el cual el cido se encuentra disociado en un 50% se conoce como pKa.

Podemos calcularlo con la siguiente frmula: pKa = - log Ka El pKa sirve tambin como indicador de la fuerza del cido. En este caso a menor pKa, mayor ser el grado de disociacin del cido en solucin. Cuando trabajamos con cidos fuertes el clculo del pH se reduce a la expresin que enunciamos anteriormente. Sin embargo cuando trabajamos con soluciones buffer para calcular el pH utilizamos la ecuacin de Henderson-Hasselbach: pH = pKa + log [A-] ------- [AH] Es importante destacar que ecuacin de Henderson-Hasselbach es vlida para valores de pH cercanos al pKa del cido considerado. Sin embargo es extremadamente til en medicina ya que los valores de pH de los buffers de nuestro organismo siempre van a ser cercanos a sus respectivos pKa. En este punto debemos preguntarnos cuales son las caractersticas que hacen que un buffer sea til. En este sentido encontramos dos elementos. En principio debemos recordar que el pKa representa el valor de pH en el que un sistema buffer puede alcanzar su mxima capacidad amortiguadora. Cada sistema buffer tendr un valor de pKa caracterstico. Puesto que lo que pretendemos es mantener un pH alrededor de 7,40 sern buenos amortiguadores aquellos sistemas cuyo pKa est prximo a dicho valor. En segundo lugar debemos considerar que la concentracin de las soluciones buffer debe ser elevada, de lo contrario su capacidad sera agotada muy rpidamente. A continuacin describiremos los diferentes sistemas buffer que encontramos en nuestro organismo.

III. MATERIALES 5 tubos de ensayo 1 gradilla para tubos de ensayo Pipetas de 1ml Pipetas de 10 ml Vasos de precipitado de 50 ml 5 tiras de indicador de PH universal 1 potenciometro para PH

REACTIVOS Na2HPO4 0.15 molar

KH2PO4

0.15 molar

Azul de bromotimol NaOH 0.4 N HCL 0.4 N Buffer referencia pH 4 Buffer referencia pH

IV. PROCEDIMIENTO 1. Preparacin de los reactivos: Na2HPO4 0.15 molar: Preparar 50 ml de Na2HPO4 al 0.15 M KH2PO4 0.15 molar: Preparar 50 ml de KH2PO4 al 0.15 M.

NaOH 0.4 N: Preparar 20 ml de NaOH al 0.4 N. HCL 0.4 N : Preparar 20 ml de HCL al 0.4 N.

2. Medir el PH usando las tiras de indicador de PH universal , introduciendo la tira en cada uno de ellos:

Na2HPO4 = 3 KH2PO4 = 5 NaOH = 14 HCL = 1

3. Rotular los 5 tubos de ensayo. Marcarlos del 1 al 5 4. En cada tubo de ensayo Colocar con ayuda de la pipeta, las soluciones y cantidades exactas. Tambin usar la pipeta para el acido KH2PO4 y otra diferente para la sal Na2HPO4 5. Medir correctamente todos los tubos, para que tengan un volumen final de 10 ml, pero el Ph en cada uno ser diferente. Tubo N 1 Na2HPO4 9.7 KH2PO4 0.3 PH: Esperado 8.2

2 3 4 5

7.1 6.1 5.0 2.7

2.9 3.9 5.0 7.3

7.2 7.0 6.8 6.4

6. Introducir una tira de indicador universal de PH en cada uno de los tubos(1,2,3,4 y 5) A cada uno de los tubos del experimento, agregar 2 gotas de indicador azul de bromotimol, que es un indicador de pH que en solucin acida se vuelve amarillo, en solucin bsica azul y neutra de color verde, mezclar bien y anotar los colores desarrollados en cada uno de los tubos. Los tubos que tengan un PH mas alcalino, deben de desarrollar un color azul marino intenso y a medida que el PH se va a haciendo menos alcalino, y se aproxima al neutro o hacia el acido, el color azul va desvanecindose, para convertirse en verde de varios tonos hasta amarillo(solo si el PH es muy acido) 7. EFECTOS DE UN BUFFER PARA OPONERSE A LOS CAMBIOS DE PH Con una tira de indicador universal tomar el PH de la solucin de NaOH 0.4 N,asi mismo con la solucin de HCL 0.4 N. Al tubo N 3 ,retirar 5 ml usando una pipeta limpia y transferir a un nuevo tubo de ensayo. Rotularlo con 3b; al tubo original marcado como tubo N3 (tubo 3a) A los 5ml del tubo 3a, aadir gota a gota con una pipeta,solucin de NaOH 0.4N,contar las gotas requeridas para que el color de la solucin del tubo N 3a sea igual al tubo N 1. A los 5ml del tubo 3b, aadir gota a gota con una pipeta, solucin de HCL 0.4N,contar las gotas requeridas para que el color de la solucin del tubo N 3b sea color amarillo intenso. A los 6ml del tubo N1 original, aadirles con cuidado, gota a gota con una pipeta, solucin 0.4N y contar el numero de gotas necesarias para obtener el color amarillo intenso. NUMERO TOTAL DE GOTAS: Tubo N1 37gotas HCL Tubo 3a 8 gotas NaOH Tubo 3b 15 gotas HCL

V. RESULTADOS VI. CONCLUSIONES VII. RECOMENDACIONES VIII. ANEXOS

IX. BIBLIOGRAFIA Fisiologa del ejercicio - Pgina 396 autor Jos Lpez Chicharro, Almudena Fernndez Vaquero. ioqui i. e s.ull.es practicas .pdf .slideshare.net angeldejesusheredia preparacion-de- uffer