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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD- ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGÍA E INGENIERIA GUÍA DE

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD-

ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGÍA E INGENIERIA

ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGÍA E INGENIERIA GUÍA DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA Carmen Eugenia Piña

GUÍA DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA

Carmen Eugenia Piña López 1 Yurby Salazar Núñez 2 , Bibiana Ávila García 3

1 M. Sc. Ciencias Biológicas; M.Sc. Docencia Universitaria; Especialista en Nutrición Animal Sostenible; Especialista en Informática y Multimedia.

2 Bacterióloga Tutora José Acevedo y Gómez 3 Magistra en Educación. Especialista en planeación para la educación ambiental. Psicopedagoga Licenciada en Biología y química

GUIAS PARA PRÁCTICAS DE BIOLOGÍA GENERAL

INTRODUCCION

Las guías para las prácticas de biología, son un importante dispositivo de ayuda pedagógica

y didáctica en el proceso de formación profesional que inician los estudiantes de los programas de pregrado

Estas guías están descritas de manera clara y sencilla con el fin de que la ejecución práctica pueda hacerse completamente.

Antes de realizar la parte práctica se recomienda ver cada uno de los videos presentados en el curso de Biología en el link Multimedia, http://www.unad.edu.co/curso_biologia/multimedia.htm para hacerse una idea del material a utilizar y procedimiento a seguir lo cual le facilitará la comprensión y el desarrollo de la práctica

Actividades de Laboratorio

El componente práctico se desarrollará mediante laboratorios previamente apoyados en

vídeos didácticos introductorios y se complementará con observaciones en el laboratorio.

Los laboratorios se realizan de forma presencial en cada uno de los CEAD donde estén matriculados, con un tutor asignado por el director del Cead para tal fin.

La fecha de realización la determinan en cada CEAD y saldrá publicada en el Foro Noticias

del aula y en cada CEAD, motivo por lo cual hay que estar pendiente " leer diariamente" las noticias del foro, para que puedan hacer su inscripción

La realización de las prácticas de laboratorio es obligatoria para aprobar el curso.

Los informes de laboratorio de los estudiantes virtuales deben ser entregados al tutor de metodología tradicional con quien realicen el laboratorio. El Informe incluye las respuestas a las preguntas sobre la observación de los videos de preparación previa , el pre-informe y el desarrollo de las guías

El tutor tradicional con quien realizan el laboratorio debe calificar su proceso y su informe, y envía la nota al tutor virtual para sumarla con las notas obtenidas en las demás actividades y de esta manera se pueda dar la nota definitiva de su curso.

Las actividades en campus tienen un valor de 60% sobre la calificación del curso. El 60% equivale a 300 puntos, de los cuales 90 puntos corresponden a la nota enviada por el tutor tradicional.

La equivalencia es la siguiente por ejemplo para una nota de 4,5 enviada por el tutor tradicional:

Calificación de los laboratorios enviada por el tutor tradicional

Valor en

Puntos

5

90

4,5

X

X= (90 x 4,5) / 5= 81 puntos

El costo de los laboratorios está incluido en la matrícula

Nota:

No olviden colocar en el informe a entregar al tutor tradicional de laboratorio el

 

número del grupo colaborativo, el nombre de su tutor virtual, además de sus datos nombre

apellidos y código.

 
 

FORMATO PARA OBSERVACIÓN DE VIDEOS DE LABORATORIO.

   

Objetivos:

 

Identificar los temas, materiales, habilidades que podemos desarrollar con la observación de los videos y prácticas de laboratorio.

Instrucciones:

 

Esta actividad no reemplaza los laboratorios nos prepara para la realización de los mismos. Observe detenidamente cada uno de los videos de laboratorio relacionados en el material didáctico del curso de Biología. Responda las preguntas que se realizan para cada video de las experiencias de laboratorio. Con los compañeros de su grupo colaborativo compare las respuestas. Consolide en un solo documento los datos y preséntelos al tutor virtual

Recursos:

 

Videos de las experiencias:

 

1.

Vídeo: Normas generales de uso del laboratorio

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/videoseguridad.htm

2.

Video:_El microscopio parte 1

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_microscopio1.htm

 

Video: El microscopio parte 2

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_microscopio2.htm

3. Video: Célula parte 1 http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_celula-1.htm

 

Vídeo: Célula parte 2 http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_celula_2.htm

4. Vídeo: mitosis y meiosis parte 1

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_mitosis1.htm

Vídeo: mitosis y meiosis parte 2

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_mitosis2.htm

5.

Vídeo: biodiversidad microbiana parte 1

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/biodiversidad1.htm

 

Vídeo: biodiversidad microbiana parte 2

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/biodiversidad_2.htm

6.

Vídeo: tejidos vegetales

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_Tej_vegetales.htm

Preguntas: RESPONDA PARA CADA VIDEO.

 

1. ¿Cuál es el objetivo de esta práctica?

 

2. ¿Qué materiales necesita? ¿Los conoce todos? ¿Cuáles desconoce?

3. ¿Qué temas

del módulo puede relacionar con esta experiencia? Justifique su

respuesta.

 

4.

¿Qué habilidades cree que se pueden desarrollar al realizar ésta práctica de

laboratorio?

 

5.

¿Qué utilidad o

aplicaciones prácticas

puede derivar del conocimiento que se

desarrolla con estos laboratorios?

6.

Después de observar el video ¿Cuál es la conclusión a la que llega?

Formato elaborado por:

 

Esp. Bibiana Ávila García. Punto de contacto: 3004986704 – bibi.avila@gmail.com Tutora CEAD Barranquilla.

Recomendaciones Generales

Implementos que deben llevar al laboratorio

Bata Blanca, Guantes.

Papel absorbente, Paños de cocina

Jabón

Láminas y laminillas

Tapabocas.

Papel y lápiz para tomar apuntes

Antes de iniciar las prácticas usted debe haber leído el capítulo correspondiente en el curso de biología, observado los videos de preparación previa y resuelto las preguntas sobre la observación de videos y lo que se solicite en cada práctica

Forma de Evaluación

La evaluación se llevará a cabo por medio de las siguientes actividades

1. Participación en el foro colaborativo con la presentación del pre-informe sobre los

laboratorios, el cual incluye las respuestas a las preguntas sobre observación de videos y

las respuestas a los cuestionarios de cada práctica. Los puntos del pre-informe son:

Titulo

Objetivos

Resumen de la información teórica

Esquema o diagrama de flujo en orden riguroso por cada observación

Respuesta a cuestionario que encuentre en la guía de práctica

2. Evaluaciones parciales presenciales al iniciar algunas prácticas

3. Presentación de informes de prácticas realizadas en el laboratorio, el cual incluye

también el pre-informe

3. Resolución de cuestionarios para medir el rendimiento después de las prácticas

Aspectos mínimos que debe llevar un informe final (que se entregará al tutor tradicional para su calificación)

1. Titulo

2. Objetivos

3. Resumen de la información teórica

4. Esquema de pasos para las observaciones en el laboratorio o diagrama de flujo en orden

riguroso por cada observación

5.

Respuesta a cuestionario de cada práctica

5.

Descripción detallada de las observaciones

6.

Conclusiones

7.

Referencias bibliográficas

A

continuación encontrará una tabla con la descripción de la actividad a realizar y los

productos a entregar

Laboratorio 1 Normas de seguridad en el laboratorio.

Objetivo

Conocer y cumplir las principales normas de seguridad e higiene que se deben seguir en el laboratorio, con el fin de evitar posibles riesgos, tanto para las personas como para el medio ambiente.

Introducción

La bioseguridad, es la aplicación del conocimiento, de las normas y técnicas en el desarrollo de las prácticas que se realizan en el laboratorio para prevenir la exposición del personal y del medio ambiente a cualquier riesgo.

Los riesgos pueden estar relacionados con las propias instalaciones, con las muestras de origen biológico, con los procedimientos y manipulaciones que se realicen.

Para el desarrollo de esta práctica el estudiante debe observar el video normas de seguridad en el laboratorio y contestar las preguntas presentadas en el formato de observación del video

Principales Normas

Las principales normas a tener en cuenta para el desarrollo de prácticas en el laboratorio de Biología son las siguientes:

en la zona de trabajo del laboratorio no se debe consumir alimentos ni bebidas para

evitar riesgos de contaminación.

está prohibido fumar en el área del laboratorio o sus alrededores. Recordemos que

se trabaja con gas y que algunos químicos generan vapores inflamables.

No se deben llevar a la boca lápices, etiquetas o cualquier otro material utilizado

en el laboratorio.

se debe mantener el laboratorio limpio y aseado. Por consiguiente al terminar la

práctica se debe descontaminar la superficie de trabajo.

las manos se deben lavar después de manipular material infeccioso, así como al

abandonar el laboratorio.

todo estudiante debe hacer uso de la bata blanca, esto le protegerá la ropa del

contacto con reactivos y colorantes empleados en el laboratorio.

sólo se debe permitir el paso a la zona de trabajo del laboratorio a las personas

autorizadas. Durante el trabajo se mantendrán cerradas las puertas del laboratorio.

no se debe pipetear con la boca.

debe utilizarse siempre un dispositivo de pipeteo

todas las pipetas deben tener tapones de algodón para reducir la contaminación de

los dispositivos de pipeteo.

todo el personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con

materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes. Los guantes

deben ser desechados antes de salir del área de trabajo. Jamás se debe salir de la misma con los guantes puestos, ni con ellos se debe coger el teléfono.

marque y rotule adecuadamente las láminas. Deben llevar claramente escrito en un

lugar visible, el nombre o identificación del grupo de trabajo, practica realizada y fecha.

una vez concluida la práctica, proceda a organizar el sitio de trabajo, desinfectando

el mesón con toallas de papel humedecidas con hipoclorito de sodio o alcohol y dejando

tanto el material como el equipo utilizado limpio y en el lugar adecuado.

es importante conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen

en el laboratorio. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulación.

es necesario conocer el manejo de cada uno de los equipos existentes en el

laboratorio. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo después de

haberlos calentado con el fin de evitar roturas.

en neveras que no posean un sistema de protección antideflagración no deben

almacenarse reactivos que contengan compuestos volátiles inflamables como éter etílico.

los productos inflamables como gases, alcohol, éter, entre otros deben mantenerse

alejados de la llama del mechero. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos, se hará al baño María, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama.

se debe lavar muy bien la cristalería que se utilice. Preste atención y cuidado al

manipular cristalería mojada.

en el laboratorio habrá un recipiente plástico, para cristalería rota y para plásticos

que hayan estado en contacto con cultivos de células o virus. Por favor, deseche cada cosa en el envase apropiado.

mantenga despejadas las áreas. Trate de traer la menor cantidad posible de

pertenencias al laboratorio. Coloque sus pertenencias en un área designada o donde no

estorben.

Cuestionario para el pre-informe

1.1 ¿Que es bioseguridad?

1.2 ¿Cuáles serían para usted las normas básicas de bioseguridad en el laboratorio de

biología?

1.3 ¿Cómo puede usted evitar en el laboratorio daños a su salud?

1.4 Conclusiones

LABORATORIO 2: MICROSCOPÍA

Autoría: Carmen Eugenia Piña L

vídeo:_El microscopio parte 1

vídeo:_EL microscopio parte 2

OBJETIVOS:

Señalar los componentes mecánicos y ópticos que constituyen el microscopio.

Realizar montajes húmedos

Comprobar las propiedades que posee el microscopio.

Realizar correctamente el manejo del microscopio óptico

Calcular el diámetro del campo de visión

Comprobar los principios en que se basa la microscopía óptica.

Desarrollar en trabajo colaborativo el informe de laboratorio

Marco Teórico

Tipos de Microscopio

El Microscopio óptico simple

Constituido por una lente biconvexa única o lupa que hace converger los rayos luminosos que la atraviesan en un punto denominado foco y a una distancia focal muy corta.

El Microscopio óptico Compuesto

El microscopio se define como un instrumento óptico formado por un sistema de lentes:

objetivos y oculares que amplían los objetos extremadamente pequeños para posibilitar su observación. La lente del objetivo proporciona una imagen intermedia ampliada del objeto, es decir, funciona como una lente simple, y la lente del ocular que recoge la imagen dad por el objetivo y la aumenta.

El Microscopio electrónico

Este microscopio en lugar de una fuente de luz, utiliza un haz de electrones que se desplazan en el vacío y en línea recta. Con el microscopio electrónico es posible observar objetos muy pequeños como los virus que no pueden ser resueltos con el microscopio óptico. En el microscopio óptico en lugar de lentes se emplean campos magnéticos que enfocan los haces de electrones.

El Microscopio óptico Compuesto: componentes

A continuación se describen las partes que lo conforman:

Los objetivos : están localizados metálica, denominada revólver o portaobjetivos , que permite cambiarlos

Los objetivos: están localizados

metálica, denominada revólver o portaobjetivos, que permite cambiarlos fácilmente. Estos generan una imagen real, invertida y aumentada, esta imagen intermedia es captada

.

y sufre

en la parte inferior del tubo insertados en una pieza

una

nueva

ampliación

por

el

ocular.

insertados en una pieza una nueva ampliación por el ocular. Los objetivos más frecuentes son los

Los objetivos más frecuentes son los de 4X, 10X, 40X y 100X aumentos. Este último de 100x se llama de inmersión ya que para su utilización se necesita aplicar aceite de cedro sobre la preparación. Y se utiliza para observar láminas coloreadas completamente secas. El poder de aumento de cada objetivo se indica en el número grabado en la manga del lente. Generalmente el objetivo de 4X se encuentra marcado por un anillo rojo, el de 10X por un anillo de color amarillo, el de 40=x con un anillo de color azul y el de 100X con un anillo de color blanco

La abertura numérica se encuentra (A.N.) se encuentra grabada en la manga del objetivo, junto a la indicación del aumento.

0,30

En el objetivo de 10X

0,65

En el objetivo de 40X

1,30

En el objetivo de 100X

A

medida que aumenta la A.N. disminuyen las dimensiones de la lente frontal, montada en

la

base del objetivo. La lente del objetivo de 100x tiene el tamaño de una cabeza de alfiler

es mayor el poder de resolución. Además a medida que aumenta A.N. es mayor el poder de resolución. Cuanto mayor sea el poder de resolución del objetivo, será más clara la imagen

y aumentará la capacidad de poner de manifiesto detalles adyacentes muy cercanos,

separándolos y aclarándolos. El poder de resolución máximo de un buen microscopio es

aproximadamente 0,25 nanómetros, el poder de resolución del ojo humano es de milímetros.

el poder de resolución del ojo humano es de milímetros. Los oculares se denominan así porque

Los oculares se denominan así porque están muy cercanos al ojo. Su función es la de captar y ampliar la imagen formada en los objetivos. El poder de aumento del ocular se encuentra marcado en el ocular. Un ocular por 4 aumenta 4 veces la imagen que produce el objetivo. Un ocular por 6 la aumenta 6 veces. Un ocular por 10 la aumenta 10 veces Nunca se deben tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, se deben limpiar muy suavemente con un papel de óptica

0,25

El tubo óptico: es una cámara oscura unida mediante una cremallera. Tiene el revolver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior.

El Brazo: es una columna perpendicular al pie. Puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo.

Platina

ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo. Platina Es una plataforma horizontal

Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un carro con un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento que permite mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa. Está dotado de una escala graduada para medir de forma precisa las observaciones.

El condensador: es un sistema de lentes convergentes

situadas bajo la platina, su

función es

la de concentrar la

luz generada por

la fuente de iluminación hacia la

preparación.

Diafragma-iris Es una cortinilla que regula la cantidad de luz que entra en el condensador,
Diafragma-iris Es una cortinilla que regula la cantidad de luz que entra en el condensador,
Diafragma-iris Es una cortinilla que regula la cantidad de luz que entra en el condensador,

Diafragma-iris Es una cortinilla que regula la cantidad de luz que entra en el condensador, eliminando los rayos demasiado desviados. Se acciona mediante una perilla. Esta situado debajo de la platina, inmediatamente debajo del condensador. La disminución del diafragma permite visualizar partes de protozoos u hongos se utiliza en las preparaciones frescas

protozoos u hongos se utiliza en las preparaciones frescas Tornillo Macrométrico: Se encuentra en la parte

Tornillo Macrométrico: Se encuentra en la parte inferior del microscopio. Sirve para alejar o acercar el tubo y la platina moviéndola de arriba hacia abajo y viceversa. Permite un enfoque aproximado o grueso de la muestra Tornillo micrométrico: Generalmente se encuentra incorporado al tornillo macrométrico. Sirve para dar claridad a la imagen al lograr un ajuste fino y preciso, mediante movimiento de la platina hacia arriba y hacia abajo de forma lenta. Ambos tornillos llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura.

La fuente de iluminación: se trata de una lámpara halógena de intensidad graduable. Esta situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualización.

Por último definimos el pie o base: sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En el se integra la fuente luminosa.

Poderes o capacidades del microscopio

Poderes o capacidades del microscopio Poder de aumento: Permite magnificar la imagen. Corresponde al aumento (A)

Poder de aumento: Permite magnificar la imagen. Corresponde al aumento (A) dado por la relación:

Tamaño de la imagen / tamaño del objeto. La ampliación es igual al producto del aumento del lente ocular por el del objetivo. Cada objetivo y cada ocular tienen grabado el número de veces que aumentan la imagen. Si la imagen del objeto, se hace aumentar 40 veces mediante el objetivo y enseguida 10 mediante el ocular, su

aumento total será 10X40=

400

¿Cómo se calcula el aumento de una muestra? Se multiplica el aumento que señala el ocular por el aumento del objetivo dando como resultado el aumento total de la muestra o número de veces en que el objeto se encuentra ampliado con respecto a su tamaño original. Aumento total = aumento del ocular X aumento del objetivo

Aumento total = aumento del ocular X aumento del objetivo Poder de definición Es la capacidad

Poder de definición

Es la capacidad del microscopio para formar imágenes nítidas y con contornos definidos

Poder de penetración o profundidad Permite visualizar los diferentes planos de una preparación y está
Poder de penetración o profundidad Permite visualizar los diferentes planos de una preparación y está

Poder de penetración o profundidad

Permite visualizar los diferentes planos de una preparación y está dado por el ajuste de precisión que se logra con el tornillo micrométrico.

Poder de resolución es la capacidad de presentar dos puntos que se encuentran muy cercanos entre sí como separados, lo cual permite observar detalles de los objetos que con el ojo humano no se podrían ver. El ojo humano no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una décima de milímetro. Con el Microscopio óptico, el poder separador máximo es de 0,2 décimas de micra. Mejora la visión unas 500 veces con relación a la del ojo humano

la visión unas 500 veces con relación a la del ojo humano En la imagen se

En la imagen se observan espacios blancos entre la tinta negra que a simple vista no serían vistos

entre la tinta negra que a simple vista no serían vistos En la imagen se observan

En la imagen se observan varias fibras de hilo que a simple vista no serían vistos

El poder de resolución depende de la longitud de onda ( λ ) y de

El poder de resolución depende de la longitud de onda ( λ ) y de la apertura numérica del objetivo (A.N.)

El Poder de resolución esta dado por la formula:

Poder de resolución= λ

2x A.N.

A.N: relaciona el ángulo de apertura de los rayos de luz, que provienen de la muestra, con el índice de refracción.

Principios generales de microscopía

Principios ópticos

Una lente sencilla (biconvexa) posee dos focos, uno a cada lado de la lente (F y F´). Cuando los rayos luminosos pasan a través de la lente se concentran en el foco. La distancia focal es la distancia entre el centro de la lente y el punto en donde convergen los rayos.

La distancia focal de una lente depende del índice de refracción del material del cual está hecha, y del medio que envuelve la lente. Por eso, es diferente la distancia focal de una lente en el agua, que esta misma en el aire. Como también es diferente la distancia focal de una lente de vidrio en comparación con una construida en plástico.

de vidrio en comparación con una construida en plástico.

http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/lenses/simplethinlens/index.html

Cuanto más pequeña es la distancia focal de una lente tanto mayor es su aumento. Si el objeto se coloca a distancia mayor del foco, se obtiene una imagen real invertida, mientras que si el objeto se localiza a una distancia menor del foco la imagen será virtual. A medida que se aleja el objeto del foco, la imagen se percibe más pequeña.

el objeto del foco, la imagen se percibe más pequeña. La distancia de trabajo focal de
el objeto del foco, la imagen se percibe más pequeña. La distancia de trabajo focal de

La distancia de trabajo focal de un objetivo, es el espacio que existe entre la superficie de la lente del objetivo y la laminilla, una vez se encuentre enfocada la preparación. A mayor aumento del objetivo la distancia de trabajo disminuye.

Como determinar la posición de los objetos observados

Los objetos que se observan en el campo microscópico se pueden localizar en relación con las manecillas del reloj.

Los objetos que aparecen en la parte inferior del fondo del campo microscópico se encuentran realmente en la parte superior.

Los objetos en el lado izquierdo del campo microscópico se encuentran realmente al lado derecho.

Desplazamiento del objeto

Si se mueve el portaobjetos hacia la derecha, el objeto examinado se desplazará hacia la izquierda. Si se mueve el portaobjetos hacia usted, el objeto examinado se alejará.

Formación de la imagen real invertida

Formación de la imagen real invertida http://www.edumedia-sciences.com/a301_l3-microscope.html Las imágenes se observan

http://www.edumedia-sciences.com/a301_l3-microscope.html

Las imágenes se observan invertidas por las lentes.

Refracción de la luz

Las imágenes se observan invertidas por las lentes. Refracción de la luz
Las imágenes se observan invertidas por las lentes. Refracción de la luz
Las imágenes se observan invertidas por las lentes. Refracción de la luz

La distancia focal de una lente depende del índice de refracción del material del cual esta hecha y del medio que envuelve la lente.

Cuando los rayos de luz se mueven en un medio homogéneo como el aire, se propagan en línea recta, pero cuando caen sobre la superficie de un medio de diferente densidad, a la del medio en el cual se venía propagando, cambian de dirección y de velocidad a estos cambios se les conoce como refracción de la luz.

Los rayos de luz procedentes de los objetos sumergidos en el agua se desvían al atravesar dos medios de diferente densidad (agua-aire), originando este efecto de refracción. Por ejemplo si introducimos un lápiz en un vaso con agua, el lápiz se verá cortado al pasar del agua al aire.

En la práctica de microscopía encontramos diferentes medios: aire, agua aceite de inmersión y vidrio, cuyos índices de refracción son 1.0, 1.33, 1.51, .1.54 respectivamente. Al observar una muestra a través del microscopio, los rayos de luz tienen que atravesar estos medios y son refractados cambiando su dirección.

estos medios y son refractados cambiando su dirección. Al aplicar el aceite inmersión se entre el

Al aplicar el aceite inmersión se entre el preparado y la lente, aceite de inmersión, que tiene un índice de refracción igual al de la lente y evita la refracción de los rayos luminosos.

Campo de Visión

que tiene un índice de refracción igual al de la lente y evita la refracción de
que tiene un índice de refracción igual al de la lente y evita la refracción de

El campo de visión de un microscopio es la zona circular que se observa al mirar la preparación bajo un determinado aumento. Para medir el campo de visión de un microscopio, se debe usar una unidad llamada micra. Una micra equivale a 0,0001 mm; en otras palabras, hay 1000 micras en un milímetro. El diámetro de este campo es su medida.

Para calcular el diámetro del campo de visión para un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos:

un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos: a) Recortar un cuadrado de 1 cm
un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos: a) Recortar un cuadrado de 1 cm

a)

Recortar un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado.

b)

Ponerlo sobre la abertura central del portaobjetos

C)

Observando por el ocular y con el objetivo de 4X, mover la muestra hasta lograr que la

línea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual

la línea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual d) Enfocar con el

d) Enfocar con el objetivo de menor aumento 4X hasta que se vea con claridad. Enfocar la

preparación quiere decir situarla a la distancia del objetivo que permite su observación nítida. Esta distancia s e conoce como distancia de trabajo y es tanto menor cuanto mayor es el poder de aumento del objetivo

e) Medir el campo visual haciendo coincidir una de las líneas del papel milimetrado con el

borde del campo de visión.

f) Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos

f) Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos líneas es un milímetro) y estimar aproximadamente la fracción sobrante, si la hay. El resultado será el diámetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular).

g) Si queremos calcular el diámetro del campo de visión para aumentos mayores, hay que tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo será menor, es decir, se verá menos de la muestra que estemos observando. De forma que, si el aumento es el doble, el campo será la mitad, si el aumento es el triple, el diámetro será la tercera parte, etc. (inversamente proporcionales). Por tanto, bastará con realizar un sencillo cálculo matemático para saber el nuevo diámetro.

Así se puede calcular los diámetros de objetos microscópicos, células, amibas, vistos.

Recuerde que aunque la escala está marcando mm usted lo leerá en micras.

Medida en mm (escala del portaobjetos)

1mm

0.1 mm

0.01mm

Equivalencia en µm 1000 µm 100 µm 10 µm
Equivalencia
en µm
1000 µm
100 µm
10 µm
mm 0.01mm Equivalencia en µm 1000 µm 100 µm 10 µm Tamaño de las marcas (divisiones)
mm 0.01mm Equivalencia en µm 1000 µm 100 µm 10 µm Tamaño de las marcas (divisiones)
mm 0.01mm Equivalencia en µm 1000 µm 100 µm 10 µm Tamaño de las marcas (divisiones)

Tamaño de las marcas (divisiones)

grandes

medianas

más pequeñas

Preparaciones

Las preparaciones pueden ser de varios tipos:

a. Frescas: Son montajes generalmente húmedos. La muestra se observa sin

modificar, diluida o concentrada. Permite observar la movilidad de los microorganismos

vivos. Se utiliza también para observar procesos como la mitosis, meiosis, la formación d

esporas.

Para realizar un montaje húmedo se debe verter una gota de agua o del líquido que contiene los microorganismos en el centro de una lámina portaobjetos y cubrirlo con una laminilla cubreobjetos. Para evitar la evaporación se puede sellar el espacio que hay entre el portaobjetos y el cubreobjetos con vaselina o alguna sustancia similar.

Frescas ligeramente modificadas: Las muestras se pueden diluir con agua o con agua con sal, esta última evita que la presión osmótica del medio no sea demasiado baja. Se puede aplicar un colorante o reactivo para observar mejor las estructuras.

b. Fijadas y teñidas: Se coloca una suspensión homogénea de microorganismos en

una gota de agua sobre el portaobjetos y se fija (mediante calor o agentes químicos) y después se tiñen mediante diferentes técnicas. Estas preparaciones se observan sin cubreobjetos y, habitualmente, con objetivos de inmersión.

Manejo del Microscopio

Para realizar las preparaciones se deben alistar los siguientes elementos.

MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR

Bata Blanca, Guantes. Papel absorbente, Paños de cocina Jabón Tapabocas. Papel y lápiz para tomar apuntes Resueltas las preguntas sobre la observación de videos y las que se solicite en cada práctica Agua estancada o de solución de tierra de infusorios Papel milimetrado Hilos de colores Tela de cuadros 2 centímetros Recorte de periódico con la letra asimétrica: Pude ser la letra e o la letra a Láminas portaobjetos, Laminillas (por grupo) papel absorbente

MATERIALES QUE LE SERÁN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO

Lamina con extendido coloreada Microscopio Aceite de inmersión Papel de Arroz o de óptica Alcohol isopropílico

Realización de Montaje húmedo

Tome con una pipeta agua estancada o de solución de tierra de infusorios Coloque la gota de agua estancada o de solución de tierra de infusorios sobre una lámina porta-objeto Tome una laminilla cubreobjetos, en posición oblicua, (45 grados) y apoyando una arista sobre la lámina al lado de la gota, déjela caer suavemente.

Manejo del microscopio

Encienda el microscopio Coloque el objetivo de menor aumento 4X Baje la platina completamente girando el tornillo macrométrico. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones Tome la lámina con la preparación fíjese que esté completamente seca en la parte inferior Coloque la lámina con la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas. Procure que la preparación quede centrada, girando el tornillo para desplazamiento del carro móvil

Gire el tornillo macrométrico en sentido contrario a las agujas del reloj para subir la platina hasta el tope. Debe hacerlo mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación. Cierre o abra el diafragma hasta una posición intermedia, accionando su perilla en sentido contrario a las agujas del reloj para que la luz no sea ni muy brillante ni demasiado tenue. Inicie la observación con el objetivo de 4X. Mirando a través de los oculares, separe lentamente el objetivo de la preparación con el tornillo macrométrico en sentido de las agujas del reloj. Hasta lograr observar la imagen Cuando se observe algo nítida la muestra, gire el tornillo micrométrico hasta obtener un enfoque fino Gire el revolver Coloque el objetivo de 10X Visualice con el objetivo de 10X y detalle las estructuras Gire el revolver y visualice con el objetivo de 40X enfoque con el tornillo micrométrico y detalle las estructuras Detalle como el campo se reduce y el alga y el protozoo se observan mejor.

Observación con el objetivo de inmersión 100X

Se utiliza para la observación de muestras fijadas, no para muestras frescas

Coloque el objetivo de inmersión de manera que el orificio de la platina quede entre el objetivo de 100X y el de 40X Suba totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que aplicar el aceite Coloque una gota de aceite de inmersión sobre la preparación en el círculo de luz Coloque una lámina coloreada sobre la platina Ubique el objetivo el objetivo de 100x Suba la platina lentamente hasta que la lente toque la gota de aceite Observe la imagen con aumento de 100X En esta preparación se muestran eosinófilos un tipo de células sanguíneas coloreados con colorante de Wright Limpie el objetivo de inmersión con un papel especial para óptica y alcohol isopropílico Deje el objetivo de menor aumento en posición de trabajo

En la siguiente dirección encuentra un excelente ejercicio en línea sobre las partes del microscopio y su función.

http://personales.ya.com/geopal/g-b_1bach/ejercicios/act10tema6.htm

Cuestionario a resolver para el pre-informe

PROCEDIMIENTO

2.1 En la siguiente representación gráfica de un microscopio, reconozca y ubique cada una de las siguientes partes y su función

Tubo

Oculares

Brazo Objetivos de 4x, 10x, 40x y 100x Platina Condensador Fuente de iluminación Tornillo macrométrico y micrométrico Pie

de iluminación Tornillo macrométrico y micrométrico Pie 2.2 Clasifique en el cuadro las partes mecánicas y

2.2 Clasifique en el cuadro las partes mecánicas y ópticas del microscopio.

Partes mecánicas

Partes mecánicas Partes ópticas

Partes ópticas

Partes mecánicas Partes ópticas

2.3 Qué es un montaje húmedo.

2.4 Defina los tipos de montaje que se pueden hacer en el laboratorio.

2.5 Describa los pasos para la elaboración de un montaje húmedo.

2.6 ¿Qué debe hacerse para lograr una iluminación adecuada?

2.7 ¿Cómo se enfoca el microscopio al iniciar la observación?

2.9 ¿Con qué objetivo se logra un campo de visión más grande?

2.10 ¿Con qué objetivo se observan mejor los detalles de una imagen?

2.11 ¿Con el objetivo de mayor aumento se necesita menor o mayor iluminación de la que

se necesita con el de menor aumento?

2.12 ¿Qué función cumple el aceite de inmersión? ¿Con qué objetivo se utiliza?

2.13 ¿Cuál es el poder de aumento cuando se estén utilizando cada uno de los objetivos de

4X, 10X, 40X y el ocular de 10X?

2.14 ¿Cuáles son las propiedades del microscopio?

2.15 Defina los siguientes poderes o capacidades del microscopio

a. Poder de Aumento

b. Poder de definición

c. Poder de Resolución

d. Poder de Penetración de Foco o Campo

Preguntas adicionales para el informe final

2.15 Observe cuál es el valor de los oculares

2.16 Observe cual es el valor de cada uno de los objetivos

,

,

,

2.17 Calcule el aumento logrado para cada objeto observado en su práctica de laboratorio

(Al multiplicar el valor del ocular por el valor del objetivo se obtiene el aumento del tamaño del objeto que observamos).

3. Uso del microscopio

Organización del proceso paso a paso

Tome una gota de la muestra de agua estancada

 

Colóquela sobre una lámina portaobjetos, y cúbrala con una laminilla.

 

Retire

el

exceso de
exceso

exceso

de

agua

por

los

 

bordes,

   
 

usando

papel

 

absorbente.

 
 

Observe

el

   
   
     
 

Dibuje sus observaciones anotando el aumento utilizado

Dibuje sus observaciones anotando el aumento utilizado montaje

montaje

realizado

al

microscopio en 4x 10x y 40x.

 

3.1. De la muestra de agua estancada tome una gota y colóquela en una lámina portaobjetos, cubra con una laminilla.

3.2 Retire el exceso de agua por los bordes usando papel absorbente.

3.3 Observe el montaje realizado al microscopio con aumentos de 4x, 10x y 40x.

En el informe debe incluirse el siguiente cuadro que debe registrar las observaciones realizadas.

OBJETO

AUMENTO

DIBUJO

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES

OBSERVADO

UTILIZADO

Agua

4X

   

estancada

 

10X

   
 

40X

   

3.4 ¿Qué organismos pueden observarse en la gota de agua estancada?

3.5 ¿Son todos de igual tamaño y forma?

3.6 ¿Se observan organismos móviles o estáticos?

4. Comprobación de los poderes o capacidades del microscopio óptico

4.1 Realice un montaje húmedo con la letra asimétrica y obsérvela al microscopio siguiendo

los pasos anteriores.

4.2 Calcule el aumento del tamaño del objeto observado para cada objetivo del microscopio

con el cual le correspondió trabajar.

4.3 ¿Cómo se manifiesta el poder de aumento al observar la letra?

5. Realice un montaje húmedo con un centímetro cuadrado de papel milimetrado y obsérvelo al microscopio

5.1 Calcule el diámetro del campo de visión para un aumento de 4x en un cuadrado de 1

cm de lado de papel milimetrado.

Para calcular el diámetro del campo de visión para un determinado aumento hay que seguir

los siguientes pasos:

un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos: a) Recortar un cuadrado de 1 cm
un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos: a) Recortar un cuadrado de 1 cm

a)

Recortar un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado.

b)

Ponerlo sobre la abertura central del portaobjetos

C)

Observando por el ocular y con el objetivo de 4X, mover la muestra hasta lograr que la

línea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual

la línea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual d) Enfocar con el

d) Enfocar con el objetivo de menor aumento 4X hasta que se vea con claridad. Enfocar la

preparación quiere decir situarla a la distancia del objetivo que permite su observación nítida. Esta distancia s e conoce como distancia de trabajo y es tanto menor cuanto mayor es el poder de aumento del objetivo

e) Medir el campo visual haciendo coincidir una de las líneas del papel milimetrado con el

borde del campo de visión.

f) Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos

f) Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos líneas es un milímetro) y estimar aproximadamente la fracción sobrante, si la hay. El resultado será el diámetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular).

g) Si queremos calcular el diámetro del campo de visión para aumentos mayores, hay que tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo será menor, es decir, se verá menos de la muestra que estemos observando. De forma que, si el aumento es el doble, el campo será la mitad, si el aumento es el triple, el diámetro será la tercera parte, etc. (inversamente proporcionales). Por tanto, bastará con realizar un sencillo cálculo matemático para saber el nuevo diámetro.

Así se puede calcular los diámetros de objetos microscópicos, células, amibas, vistos.

5.2 Calcule el diámetro del campo de visión para

cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado.

aumentos de 10X, 40X del mismo

5.3 Compare la anchura del campo visual con cada uno de los tres objetivos

5.4 ¿Con cuál objetivo el campo de visión es mayor con el de mayor o menor aumento?

6. Realice un montaje húmedo con tres hebras de hilo superpuestas y obsérvelas al microscopio

6.1 Para las muestras de la letra, la hebra de hilo observadas determine:

a. ¿Cómo se manifiesta el poder de resolución?

b. ¿Cómo se manifiesta el poder de aumento?

c. ¿Cómo se manifiesta el poder de definición?

d. ¿Cómo se manifiesta el poder de penetración o profundidad?

6.2 ¿Cuál es la utilidad del microscopio?

6.3 ¿En qué montaje se observó mejor el poder de penetración?

7. Comprobación de los principios ópticos del microscopio

Después de observar la letra asimétrica, Conteste las siguientes preguntas:

7.1 ¿Al observar la letra asimétrica: ¿Se ve invertida, o en la misma posición en que estaría

si se viera a simple vista? ¿Parece como si se viera por un espejo?

7.2 ¿Al mover la preparación hacia la derecha. ¿Hacia dónde se mueve la imagen?

7.3 ¿Al alejara el portaobjeto o la muestra de usted hacia donde se nueve la imagen?

7.4 ¿Si la distancia focal es mayor el tamaño del objeto es mayor o menor?

8. Tome la lámina con el extendido coloreado y obsérvela en el microscopio enfocando primero con el objetivo de 10x, luego ponga una gota de aceite de inmersión sobre el extendido y ubique el objetivo de 100x.

Describa los detalles observados con cada objetivo.

Al finalizar el trabajo deje el microscopio en su correcta posición, limpie los objetivos, colóquele la funda y guarde en su puesto.

Al terminar de desarrollar las prácticas usted debe ingresar al foro colaborativo del curso y participar con sus 4 compañeros de grupo colaborativo en la elaboración del informe de laboratorio respondiendo a las anteriores preguntas compare las respuestas de los 5 integrantes y consolidelas en un solo documento que enviarán al foro para la retroalimentación y calificación por parte de su tutor.

Laboratorio 3: La Célula

vídeo Célula parte 1 Vídeo Célula parte 2

OBJETIVOS:

Describir las diferentes formas y tamaños de las células

Identificar las diferentes estructuras y organelos que posee una célula, con base en la capacidad de ampliación del microscopio óptico.

Describir las diferentes formas y tamaños de una célula

Señalar las diferencias fundamentales entre una célula animal y una vegetal

Reconocer que una célula puede constituir un organismo.

MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR:

Bulbo de cebolla Allium cepa Papa Tomate Hojas de Elodea Laminas portaobjetos y Laminillas

Cuchilla o bisturí Pinza Tijeras pequeñas hisopos

MATERIALES QUE LE SERÁN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO:

1 caja de petri Aguja o asa recta Algodón Alcohol Lancetas Lugol Solución salina Aceto carmín Azul de metileno Safranina Colorante de Wright Microscopio

PROCEDIMIENTO:

Observación de tejido epidermal de cebolla

1. Tome la cebolla y sobre la epidermis de la misma

utilizando la cuchilla, haga un corte

2. Levante suavemente con la pinza una capa delgada y transparente de la parte interna,

éste es el tejido epidermal.

3. Extiéndalo sin invertirlo sobre una lámina porta objetos.

4. Coloque una gota de lugol sobre el tejido epidermal. O si prefiere adicione una gota de

agua.

5. Deje actuar el colorante lugol durante 5 minutos.

6. Acerque una laminilla, en posición oblicua, y apoyando una arista sobre la lámina al lado

de la gota, déjela caer suavemente sobre la gota.

7. Enseguida proceda a la observación de la preparación con pequeño aumento de 10x. Anote sus observaciones

8. A continuación revise la preparación con el objetivo de 40x .Anote sus observaciones

Observación de tejido parenquimatoso en un corte transversal de papa:

Elabore

un montaje para observación del tejido parenquimatoso en un corte transversal

de papa:

1. Tome el bisturí y haga un corte transversal de la papa, este corte debe ser tan fino que

la apariencia de la porción que obtenga sea transparente.

2.

En una caja de petri con agua, enjuague el corte para sacar el exceso de almidón,

contenido en las células de los tejidos de la papa.

3. Elabore un montaje húmedo como se indicó anteriormente.

4. Observe con el objetivo de 10x.

Anote sus observaciones

5. Observe el montaje con el objetivo de 40x

Observación de tejido epidermal y parénquima clorofílico en hoja de Elodea

Para observación de tejido epidermal y parénquima clorofílico utilice una hoja de Elodea:

1. Tome con la pinza una ramita de Elodea y corte con las tijeras una hojita.

2. Extiéndala sin invertirla sobre una lámina portaobjetos, adicione una gota de agua y

cúbrala con una laminilla.

3. Observe detenidamente a través del microscopio con aumento 10x, 40x y 100x. Anote sus observaciones

Observación de cromoplastos en pulpa de tomate

Para continuar realice un montaje con pulpa de tomate e identifique los cromoplastos:

1. Con una hoja de afeitar o bisturí, haga una incisión y separe la cáscara.

2. Extraiga una pequeña porción de pulpa con el extremo de una aguja y espárzalo sobre

un porta objetos seco. No adicione agua.

3. Coloque encima un cubreobjetos y comprima suavemente con los dedos hasta obtener

un completo aplastamiento del fragmento de pulpa de tomate.

4. Identifique las células con el objetivo de 10X

5. Seleccione el mejor grupo de células y luego pase al objetivo de 40x. Anote sus observaciones

Observación de células escamosas epiteliales

1.

Coloque una pequeña gota de solución salina en el centro del portaobjetos.

2.

Con un palillo raspe suavemente el interior de su mejilla, de abajo hacia arriba.

3.

Coloque el producto de este raspado en la gota de solución salina.

4.

Coloree con una gota de acetocarmin, azul de metileno o safranina.

6.

Coloque el cubre objetos y observe al microscopio con objetivo de 40x y 100x e identifique las células de forma irregular

Anote sus observaciones

Observación de células sanguíneas

A continuación realice un extendido para observación de células sanguíneas:

1. Desinfecte con un algodón humedecido en alcohol la punta del dedo anular o índice, deje secar el alcohol y con la lanceta, haga una punción en la yema del dedo.

2. Coloque una pequeña gota en una lámina portaobjetos limpia y seca.

3. Coloque otra lámina en ángulo agudo sobre la primera, acérquela a la sangre y deslice suavemente en forma continua hasta formar una capa o frotis delgado.

4. Deje secar la preparación al medio ambiente.

5. Una vez seca la lamina aplique sobre el frotis el colorante de Wright y déjelo actuar durante cuatro minutos. Con este procedimiento el colorante fijará la preparación.

6. Lave el exceso de colorante con agua de la llave y deje secar la lámina verticalmente.

7. Observe al microscopio con el objetivo de pequeño y mediano aumento e identifique los glóbulos rojos, leucocitos y plaquetas.

8. Posteriormente observe la preparación con el objetivo de 100X y detalle la forma de los

eritrocitos, plaquetas y neutro filos.

Anote sus observaciones

Formato de observaciones y datos importantes.

Epidermis de Cebolla. Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X sin colorante

10

X con colorante

40 X sin colorante

40

x con colorante

Parénquima de papa.

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X sin colorante

10

X con colorante

40 X sin colorante

40

x con colorante

Epidermis y parénquima de Elodea. Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X

40

X

Cromoplastos en pulpa de tomate.

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

10X

40

X

Células escamosas epiteliales. Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

40X

100

X

Células sanguíneas

Dibuje lo que observa y describa cómo son las células

40X

100

X

Conclusiones:

Deben estar relacionadas con la diferencia entre las células epidérmicas vegetales y parenquimatosas vegetales; diferencias entre las células animales y vegetales, (forma tamaño, distribución, entre otros)

Laboratorio 4: Mitosis y Meiosis

OBJETIVOS:

Manejar correctamente los materiales y reactivos específicos de la práctica.

Identificar cada uno de los periodos que comprende el ciclo celular

Relacionar cada cambio presente en las células meristemáticas, con las fases de la mitosis.

Reconocer los procesos de la meiosis con base en el material suministrado.

diferentes

MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR Bulbo de cebolla Allium cepa Bisturí Pinzas vaso desechable Palillos grandes Tijeras Papel de filtro

Portaobjetos Cubreobjetos Lanceta Esmalte transparente MATERIALES QUE LE SERÁN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO Pipeta Pasteur, Vaso de precipitado Cubeta de disección Aceto orceina Eosina Metanol Bisturí

PROCEDIMIENTO:

Para el desarrollo de esta practica utilice bulbos de cebolla, Allium cepa y realice preparaciones con la raíz de material fijado y teñido, una vez obtenidos los extendidos de células obsérvelos al microscopio óptico.

una pinza retire la capa externa marronacea o rosácea y lave con

abundante agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido tratadas para inhibir o retardar la germinación de las raicillas.

1. Con ayuda de

2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o

tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua.

3. Póngalo a germinar a 25°C o a temperatura ambiente durante 3 días, al cabo de estos

aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.

4. Revise diariamente y

rellenar con agua cada 24 horas.

procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario

5. Cuando las raíces tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes

aproximadamente 2 – 3 mm a partir del ápice.

de raíz

de

6. colóquelas en una lámina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante aceto orceina o

eosina.

12. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con ayuda de la punta de

una lanceta, de unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raíz quede extendida.

13. Use papel de filtro para retirar el exceso de colorante realice una suave presión,

evitando que él cubre objetos resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se realice.

14. Selle todos los bordes del cubre objetos con esmalte transparente, para evitar que se

seque y de esta manera conservar la preparación durante varios días.

15. Coloque la preparación al microscopio e inicie la observación con el objetivo de 10x e

identifique las células.

16.

Cambie al objetivo de 40X para detallar las células. Observe los núcleos y cromosomas

en color rosáceo – morado.

17. Ubique el objetivo de

cada uno de los aumentos mencionados.

100 x

y anote sus observaciones anotando las diferencias en

18. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga células en interfase y

células en división y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis Realice dibujos de lo observado.

Para la observación de las diferentes fases de la meiosis trabaje con un pez macho:

1. Introduzca

el pez en una cubeta de disección y realice un corte rectangular desde el

ano hasta el opérculo y observe la musculatura.

2. Retire la musculatura y de esta manera quedan a la vista las vísceras del pez.

3. Con la pinza tome los testículos los cuales aparecen como cintas alargadas de color

blanco situadas en la parte superior de la cavidad abdominal desde la región occipital hasta el poro genital.

4. Coloque los testículos sobre una lámina portaobjetos.

5. Coloque encima una laminilla, realice una suave presión y observe al microscopio con

objetivo de menor y mayor aumento.

6. Anote sus observaciones.

Observaciones

Coloque la preparación al microscopio e inicie la observación con el objetivo de 10x e identifique las células.

con el objetivo de 10x e identifique las células. Escriba alguna anotación importante Cambie al objetivo

Escriba alguna anotación importante

Cambie al objetivo de 40X para detallar las células. Observe los núcleos y cromosomas en color rosáceo – morado. Dibujélos

Escriba alguna anotación importante Ubique el objetivo de mencionados. 100 x y anote las diferencias

Escriba alguna anotación importante

Ubique el objetivo de mencionados.

100 x

y anote las diferencias en cada uno de los aumentos

Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga células en interfase y células en división y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis Realice dibujos de las fases que distinga, tenga en cuenta la posición de los cromosomas para identificar las fases.

la posición de los cromosomas para identificar las fases. Conclusiones. REFERIDAS A LOS OBJETIVOS Laboratorio 5:

Conclusiones. REFERIDAS A LOS OBJETIVOS

Laboratorio 5: Diversidad de Microorganismos

Descripción

A través de esta práctica el estudiante podrá realizar una descripción macroscópica de las colonias bacterianas y de hongos, de microorganismos como protozoos y microalgas, además de adquirir destrezas en técnicas de tinción.

OBJETIVOS:

Reconocer en placas de cultivo diferentes tipos de microorganismos, en especial Colonias de bacterias y hongos.

Conocer y aplicar la técnica de tinción de Gram

Identificar bacterias Gram positivas y Gram negativas

Observar microscópicamente bacterias con endosporas (Bacillus)

Observar microscópicamente hongos.

Observar microscópicamente levaduras.

Observar microorganismos de fermentación ácido láctica y fermentación alcohólica a partir del kumis o yogurt.

Observar protozoarios y algas en muestras de agua

MATERIAL SUMINISTRADO

Cultivos de diversos hongos y bacterias en cajas de petri Cultivo de Bacillus Levadura de panadería Solución salina Agua destilada Coloración de Gram (cristal violeta, lugol, alcohol acetona y safranina) Verde de Malaquita Safranina 0.5% Lactofenol Azul de Metileno Rojo neutro Alcohol o Metanol Aceite de inmersión Mechero Asa recta y de argolla Papel de filtro Tubo de ensayo Papel de filtro Tubo de ensayo Microscopio Varilla de vidrio

MATERIAL QUE DEBEN LLEVAR Yogur casero o probiótico Agua estancada

Agua azucarada,

Tajada de pan

PROCEDIMIENTO:

Entre los principales grupos de microorganismos se encuentran: bacterias, hongos, algas y protozoarios.

Observación microscópica de colonias

1. realice una descripción macroscópica de las colonias bacterianas y de hongos entregadas

en las cajas de Petri. Haga un cuadro donde describa la forma (puntiforme, circular, rizoide, irregular y filamentosa), el borde (entero, ondulado o filamentoso), la

elevación (plana, elevada, convexa, crateriforme y acuminada) y la superficie (lisa o rugosa, mate o brillante, seca o cremosa, invasiva o superficial).

COLORACION DE GRAM

A partir de una

manera:

de las colonias de los cultivos dados realice un frotis de la siguiente

1. Tome una lamina portaobjetos limpia y en ella coloque una gota de solución salina.

2. Con un asa previamente esterilizada a la llama del mechero, obtenga una pequeña

muestra de las colonias observadas. Mézclela en la gota de solución salina que coloco en

el

portaobjetos.

3.

Déjela secar al aire libre y fíjela pasándola por la llama del mechero.

Posteriormente proceda a colorear con la tinción de gram de la siguiente manera:

1. Cubra la preparación con cristal violeta y déjela

corriente.

actuar por 1 minuto. Lave con agua

2. Cubra la preparación con lugol y déjelo actuar por 1 minuto. Lave con agua corriente.

3. Agregue alcohol acetona y déjelo actuar por 5 segundos. Lave con agua corriente.

4. Adicione safranina y déjela actuar por 30 segundos. Lave con agua corriente y ponga a

secar la lámina.

5. Ubique la lámina en el microscopio,

aumento y observe en detalle a mayor aumento.

localice las bacterias con el objetivo de menor

6. Identifique las células observadas. Anote sus observaciones.

OBSERVACION DE ESPORAS

A partir del cultivo en caja de petri marcado como

microorganismo.

Bacillus,

prepare un extendido del

1. Fije por calor y cubra todo el portaobjetos con una solución de verde de Malaquita.

2. Caliente hasta emisión de vapores y siga dicho calentamiento durante 3 minutos.

3. Lave con agua y cubra con solución de safranina. Deje actuar 30 segundos. Lave con

agua y deje secar la lámina.

4. Enfoque con el objetivo de inmersión y observe los bacilos y en su interior las esporas

ubicadas en un extremo. Anote sus observaciones.

BACTERIAS DE LA CAVIDAD BUCAL

1. Prepare una lámina portaobjetos limpia y sin grasa.

2. Tome un escotillón desechable, páselo por el borde de la encía en la parte que hace

contacto con los dientes.

3. La muestra extraída con el escotillón colóquela sobre una lámina portaobjetos.

4. Deje secar por sí sola la lámina durante unos minutos con el fin de definir el frotis.

5. Pase lentamente el portaobjetos a través de la llama del mechero, con esto se fija el

frotis.

6. Deje enfriar y coloree con la tinción de Gram como se indicó anteriormente.

7. Deje secar la lámina y ubique las células con el

observe con el objetivo de inmersión.

objetivo de menor aumento y luego

8. Tenga en cuenta que las bacterias Gram positivas toman coloración violeta y las Gram

negativas coloración roja. Anote sus observaciones.

OBSERVACION DE MOHOS

1. Prepare

pan, déjela por espacio de media hora al aire libre.

una solución de agua azucarada y agregue 20 gotas de esta a una tajada de

2. Almacénela

obsérvela diariamente.

en una bolsa plástica y ciérrela.

Guárdela

en un lugar oscuro a 30°C y

3. Cuando el pan

solución de lactófenol.

esté enmohecido, coloque

en un portaobjetos una pequeña gota de

4. Luego con un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2 cm toque la

superficie del pan enmohecido.

5. Pegue la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos.

Elimine el colorante sobrante con un papel de filtro.

6. Observe al microscopio con objetivo de 40X e identifique el micelio y las hifas.

El procedimiento anterior también puede hacerlo con frutas u hortalizas dañadas que presenten en su superficie mohos. Anote sus observaciones.

OBSERVACION DE LEVADURAS

1. Tome

contenga agua con azúcar.

un poco de levadura de panadería y colóquela

en

un tubo

de ensayo

que

2. Incube a 37°C durante 15 minutos esto producirá el desarrollo de las levaduras.

3. Con una varilla

portaobjetos. Deje secar al aire

de vidrio tome

una gota del cultivo anterior y extiéndala

en

el

4. Adicione dos gotas de azul de metileno y deje actuar durante tres minutos

5. Coloque una laminilla y elimine el exceso de colorante con papel de filtro.

6. Observe al microscopio e identifique las levaduras por su forma ovalada.

Observe que algunas presentan gemaciones. Anote sus observaciones.

BACTERIAS DEL YOGUR

1. Tome una lámina portaobjetos y en ella coloque una gota de agua destilada.

2. Con un asa de

colocada en el portaobjetos.

argolla,

obtenga una gota de yogur y mézclela

con

la gota de agua

3. Deje secar completamente la lámina. Pásela 3 veces por la llama del mechero. Tenga

cuidado de no sobre calentar la muestra.

4. Cubra la preparación con alcohol o metanol por unos segundos para eliminar la parte

grasa.

5. Escurra el alcohol y deje secar al aire. Luego cubra el extendido con

durante 2 minutos. Lave el exceso de colorante y deje secar.

azul de metileno

6. Enfoque el microscopio con el objetivo de mayor aumento e identifique los estreptococos

y los lactobacilos. Anote sus observaciones.

BACTERIAS DEL SUELO

1. Entierre horizontalmente un portaobjetos

déjela allí durante 5 días.

en la tierra de una maceta o de un jardín,

2. Transcurrido este tiempo saque la lamina y fíjela pasándola tres veces por la llama del

mechero.

3. Limpie los bordes del portaobjetos y la parte que no va a teñir.

4. Luego coloree la lamina con safranina al 0.5% durante 1 minuto. Lave el exceso de

colorante y deje secar.

5. Observe al microscopio con el objetivo de mayor aumento y anote sus observaciones.

ALGAS Y PROTOZOOS

1. Tome una muestra de agua estancada con un cuentagotas y deposítela en el centro de

un portaobjetos. Coloque un cubreobjetos.

2. Observe la preparación al microscopio. Mueva lentamente la preparación, e identifique

las algas y los protozoos.

3. Añada unas gotas de rojo neutro por el borde del cubre para que penetre en la

preparación y puedas ver los microorganismos, que por su transparencia son difíciles de

observar.

4. Anote sus observaciones.

CONTENIDO DEL INFORME:

portada

objetivos

diligenciamiento de los formatos para cada uno de los diagramas:

FORMATO #1

bacterias tinción Enfoque Enfoque forma Gran Gram Observaciones 40X 100X (-) (-) FORMATO #2 hongos
bacterias
tinción
Enfoque
Enfoque
forma
Gran
Gram
Observaciones
40X
100X
(-)
(-)
FORMATO #2
hongos
tinción
Enfoque
Enfoque
Estructuras
nombre
Observaciones
40X
100X
FORMATO #3
levaduras
tinción
Enfoque
Enfoque
Reproducción
Observaciones
40X
100X

(Utilice lápices de colores)

Análisis de resultados

conclusiones

bibliografía

Laboratorio 6: Tejidos Vegetales

Laboratorio 6: Tejidos Vegetales

º Vídeo: tejidos vegetales

Descripción

Esta práctica permite a los estudiantes comprobar la diversidad y especuialización de los tejidos vegetales , además de adquirir la habilidad para realizar cortes a mano alzada

OBJETIVOS:

Comprobar la diversidad y especialización de las células vegetales y sus agrupaciones en tejidos.

Adquirir habilidad en la elaboración de cortes a mano alzada y en coloración

Agudizar el sentido de la observación de las estructuras vegetales, aspecto importante para comprender la morfología vegetal.

MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR

Hoja de lirio Hoja de olivo Hoja de Elodea Rama de hiedra Bulbo de cebolla Tomate Papa Pera Raíces de cebolla Lápiz de madera de cedro Bisturí o cuchilla Pinza Láminas portaobjetos y Laminillas

MATERIAL SUMINISTRADO Fluoroglucina Acido clorhídrico Verde brillante Microscopio

PROCEDIMIENTO:

En esta práctica vegetales.

observe a través del microscopio la morfología de los

TEJIDO PROTECTOR

distintos tejidos

1. Tome una hoja de lirio y con un bisturí haga una pequeña incisión en el limbo

2. Con ayuda de una pinza levante la capa externa para obtener una lámina fina.

3. Coloque la lámina fina obtenida

en el

portaobjetos y agregue una gota agua.

4. Enfoque al microscopio con objetivo de 10x y 40x. Identifique los ostiolos y los cloroplastos. Anote sus observaciones.

Observe otro ejemplo de tejido epidérmico realizando un montaje con cebolla como se explico en la práctica de la célula.

Observe al microscopio con el objetivo de menor aumento e identifique la forma de las células epiteliales. Con el objetivo 40X identifique los nucleolos.

Otro ejemplo de tejido protector puede observarlo en la hoja de olivo.

Raspe el envés de una hoja de olivo.

Coloque el raspado en una lámina y adicione una gota de agua.

Observe los pelos escamiformes con forma de sombrilla. Anote sus observaciones

TEJIDO PARENQUIMÁTICO DE ALMACENAMIENTO.

Realice un montaje con pulpa de tomate como se explicó en la práctica de la célula. Observe al microscopio y anote sus observaciones.

Realice un montaje con el raspado de papa como se indico en la práctica de la célula. Observe al microscopio y anote sus observaciones.

Realice un montaje con la hoja de Elodea al microscopio y anote sus observaciones.

TEJIDOS MECÁNICOS O DE SOSTÉN.

como se indico en prácticas anteriores. Observe

Raspe con un cuchillo o bisturí una parte pequeña de mesocarpio de pera y colóquela un portaobjetos.

en

Cubra la muestra con fluoroglucina durante 2 minutos.

Elimine el exceso y cubra con ácido clorhídrico.

Coloque una lámina portaobjetos y observe el microscopio con objetivo de 40x. Anote sus observaciones.

TEJIDOS CONDUCTORES

Realice un corte longitudinal y fino de un lápiz de madera de cedro. Coloque las virutas en un portaobjetos, adicione agua. Coloque una laminilla y observe al microscopio.

Realice finos cortes perpendiculares del pecíolo de la hiedra, a la dirección del tallo; mínimo cuatro cortes.

Deposítelos en una lámina y adicione verde brillante durante 5 minutos. Lave con agua corriente.

Cubra la lámina con fluoroglucina durante 2 minutos.

Transcurridos

los 2 minutos elimine el exceso de colorante.

Cubra con ácido clorhídrico, coloque un cubreobjetos y observe al microscopio. Anote sus observaciones.

TEJIDO MERISTEMATICO

Realice un montaje con la raíz de la cebolla como se indico en la práctica de mitosis. Observe las células que se encuentran en mitosis.