PRACTICA N° 4 CULTIVOS MICROBIANOS UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS ARPASI ORDOÑO Dennys Alfredo dealfred_111@hotmail

.com RESUMEN: Los medios de cultivo constituyen la herramienta fundamental en los laboratorios de Microbiología, por lo que realizar pruebas de control de calidad a los medios preparados es vital, con el fin de comprobar si estos cumplen con sus especificaciones y si la metodología empleada en su preparación es satisfactoria. Teniendo así como objetivos: Establecer los fundamentos teóricos para la preparación de medios de cultivo, Aprender la clasificación y uso de los medios de cultivo y Preparar medios de cultivo y manejar adecuadamente la autoclave (olla a presión). Metodología: Esterilización y preparación de medio de cultivo (técnicas por disolución, puntos y exposición de placa). Los resultados obtenidos aun no son definidos, ya que no se observo si realmente crecieron los microorganismos. Pero si se llego a la conclusión de que existen diferentes maneras de cultivar o sembrar microorganismos, de acuerdo al uso y necesidad de los medios de cultivo, Para ello tenemos que saber los fundamentos teóricos para la preparación de medios de cultivo. Palabras Clave.- Cultivo microbiano, Disolución, Exposición, Plaqueado.

ABSTRACT The culture media are the fundamental tool in microbiology labs , so testing quality control is vital media prepared in order to check whether they meet your specifications and whether the methodology used in their preparation is satisfactory. Taking and objectives : To establish the theoretical foundations for the preparation of culture media , Learning classification and use of culture media and culture media Prepare and properly handle the autoclave ( pressure cooker ) . Methodology: Sterilization and preparation of the culture medium (by dissolution techniques, and plate exposure points). The results are not yet defined, since it was not observed if actually grew microorganisms. But if I conclude that there are different ways to cultivate or sow microorganisms, according to the use and need for culture media, for this we need to know the theoretical basis for the preparation of culture media. Keywords.- Microbial culture, Dissolution, Exhibition, plating.

2) No se absorben en el tracto digestivo. [1] Hubert (1987). así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. por ejemplo. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. Un cultivo es empleado como un método fundamental para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan enfermedades en medicina humana y veterinaria ( Restrepo et al. [2] . Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura. hongos y parásitos. un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos. sin embargo. 5) Proliferan in vivo e in vitro. 2003) A los cultivos microbianos originalmente se les designaba como prebióticos. 3) No dejan residuos en los tejidos animales.I. el N en forma de NH4. de NO3 o de NO2 o en forma de aminoácidos a los que se pueda tomar su grupo amino. y específicamente en microbiología. en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso deseado. por lo tanto. en 1989 la Administración de Fármacos y Alimentos (FDA de Estados Unidos de Norteamérica) estableció que no era adecuado el nombre de probiótico. se modificó la nomenclatura a “cultivos microbianos proporcionados directamente” o “cultivos microbianos” (González 1995). el C debe estar en forma de carbono orgánico para los heterótrofos y como CO2 para los autótrofos. La elaboración de medios de cultivo requiere proporcionar los elementos antes citados en una forma asimilable. Así. ni tóxicos. grado de humedad y presión de oxígeno adecuado. Jones y Thomas (1987) mencionan que los cultivos de levadura presentan varias características importantes: 1) No son patógenos. 7) Son estables a temperaturas elevadas y 8) No causan mutación. 6) Promueven el crecimiento de bacterias celulolíticas. INTRODUCCION En biología. 4) Se utilizan en pequeñas cantidades. tales como bacterias.

observándose para estos dos últimos casos una mayor diversidad en suelos de pH ácido. 37 (74%) de Huancavelica y 13 (26%) de Puno. hongos totales y hongos degradadores de petróleo se encontraron en sistemas rizosféricos de los pastos alemán y cabezón. (Chamorro A. establecidos en Gleysoles contaminados con derrame reciente. establecidos en Gleysoles contaminados con derrame reciente. bacterias degradadoras de petróleo. bacterias fijadoras de N atmosférico de vida libre. hongos totales y hongos degradadores de petróleo se encontraron en sistemas rizosféricos de los pastos alemán y cabezón. Se obtuvo mejores resultados por el método del papel filtro y aceite esencial no encapsulado. et al.7 cm. et al. bacterias degradadoras de petróleo. Las poblaciones de bacterias totales. 2008). ANTECEDENTES: Estos antecedentes. no se evidenció diferencias respecto al tipo de cultivo (levadura pura o mohos y levaduras presentes en tomate). Respecto al empleo del aceite esencial encapsulado se puede decir que no tuvo un efecto significativo ya que el medio de cultivo se encontraba con una humedad muy elevada. en Gleysol con derrame crónico y muy contaminado y en Gleysol no contaminado con petróleo. 32 (87%) de Huancavelica y 5 (13%) de Puno y 50 aislamientos de Azotobacter spp. 37 aislamientos de Actinomicetos. bacterias fijadoras de N atmosférico de vida libre. humedeciendo excesivamente las cápsulas de la β-ciclo dextrina diluyendo la liberación y acción del aceite esencial. no son exactos pero tiene similitud con nuestra practica ya q para estas investigaciones se utilizaron cultivos microbianos. 29 (46%) de Huancavelica y 34 (54%) de Puno.II. Se observa también un efecto de la variedad de papa sobre las poblaciones de estos microorganismos en la rizósfera. 2002). bacterias asimiladoras de N. Las poblaciones de bacterias totales. lo que confirma la influencia de los exudados de la planta sobre las poblaciones rizosféricas. bacterias asimiladoras de N. (Rivera M. con un halo de inhibición de 1. Del total de 17 muestras procesadas se obtuvieron 63 aislamientos de Bacillus spp. en Gleysol con derrame crónico y muy contaminado y en Gleysol no contaminado con petróleo. (Calvo P. et al. 2010)... .

enjuagar con abundante agua de la llave y al final con agua destilada.III..1 balanza .Plumón indeleble .2.Muestras de tierra.Lavar material con detergente líquido. OBJETIVOS:  Establecer los fundamentos teóricos para la preparación de medios de cultivo. . 4.Agar Saboraud .Muestras de hongos . .Materiales: .Trapo .1 probeta de 250 mL ..Agua destilada Figura 1 4.ESTERILIZADO: Se realiza el mismo proceso.1..1 matraz de 500 mL .Envolver las cajas de Petri y tubos de ensayo.1..1 espátula ..Aza de siembra . 3.2. MATERIAL Y METODOS: 4.  Aprender la clasificación y uso de los medios de cultivo..Secar el material de vidrio de preferencia en horno.Cinta Masking tape ..2 tubos de ensayo . si no es posible secar al aire.  Preparar medios de cultivo y manejar adecuadamente la autoclave (olla a presión) IV. utilizado en la anterior practica (preparación de medios y esterilización de materiales) 1.mecheros Bunsen .Métodos: 4. 5.Introducir los hisopos en un tubo y tapar con algodón. En las pipetas poner un filtro de algodón en la boquilla y envolver con papel Kraft. 2.5 placas petry .

luego taparlo con algodón y etiquetarlos. Figura 3. - Luego se empezó a colocar en las placas.Tapar el matraz y calentar hasta disolver totalmente durante 1 a 2 minutos.Leer cuidadosamente el membrete del medio de cultivo (leer las indicaciones para el preparado) 2. Para ellos se saco la muestra ya preparada con una pipeta. 5. Seguidamente se coloco la muestra en el centro de la placa y se cubrió con el agar preparado..EMPEZAMOS A PLAQUEAR..1L ---------------------120 ml X= 7. 3.2.3. A) Técnicas de disoluciones: Para ello se preparo una muestra.2. . 4.6.Disolver el medio en 100mL de agua destilada y una vez disuelto completar el volumen a 120mL. Procedemos a esterilizar todo. (Dejar reposar 1 a 2 minutos) 4.Calcular la cantidad necesaria para preparar 120 ml de Agar Saboraud Exactamente seria: 65g AS X ---------------------. 7.-PREPARACION DE MEDIO DE CULTIVO: 1.Alistar tubos de ensayo y vaciar equitativamente la solución.8 g AS Figura 2..Listo para ser esterilizado. aparte de tierra (1 g de tierra y 9ml de agua destilada) Figura 4.Identificar con nombre y marcar el volumen en el papel de las pipetas.2.. 4.....

. Destapar y exponer la placa al medio ambiente (durante 30 minutos) Figura 9 - Luego de todo el procedimiento. 2..Esterilizar la boca del matraz 4.Esterilizar los bordes. Luego cargar con hongos y empezar a colocar en distintos lugares ( en cada punto. 3.Figura 5 y 6..Vaciar a una placa 5..Alistar las placas. B) Técnica por Puntos ( se realiza en una muestra ya plaqueada) 1. esperar a que se gelifique el Agar.Hacer movimientos suaves Después de plaquear. como se muestra en la figura 8) Figura 7 y 8. Marcar con lapicero indeleble y Llevar a la incubadora .. C) Exposición de Placa (Agar Gelificado) - Después que quedo gelificado .

V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Bueno aun no se ha revisado los resultados.Figura 10. Sembrado por Puntos . esta claro que deberían quedarnos de este modo Figura 11. Figura 12. Pero de acuerdo a los pasos que hicimos. Sembrados por disoluciones.

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