Ovognesis

en

invertebrados

(ortpteros)

vertebrados (anfibios) (I).

Secciones histolgicas de ovario de saltamontes y de rana. Ovognesis.

1. ORTPTEROS
APARATO GENITAL FEMENINO El aparato genital femenino de ortptero est diseado por la evolucin para recibir y almacenar gametos masculinos y producir huevos, adems de para asegurar el encuentro de los dos tipos de clulas reproductivas recuperando en una clula el nmero cromosmico de la especie y posteriormente en el exterior de la hembra generar un individuo. La estructura del aparato reproductor femenino de insectos es variable, ya que ste es uno de los ms ampliamente diversificados. Los ms tpicos son los descritos a continuacin. Los ovarios son dos y simtricos respecto de un eje longitudinal. Cada uno de ellos est formado por estructuras tubulares denominadas ovariolas, cuyo nmero es especie-especfico. stas se arraciman confluyendo todas en un cliz propio de cada ovario y ste en un oviducto lateral que converge con el del otro ovario y ste a su vez en uno comn. Los oocitos en meiosis discurren por las ovariolas hasta el oviducto comn, que desemboca en la bursa copulatrix, donde son puestos en contacto con el esperma, almacenado y alimentado en la espermateca en espermatforos de cada cpula que haya realizado la hembra. As, los huevos de una misma puesta probablemente son fecundados por distintos machos. LA OVARIOLA La ovariola es la unidad funcional del ovario y consiste, en su estructura tpica, en el filamento terminal, germario, vitelario y pedicelo. Todo el ovario est inmerso en un tejido conjuntivo muy laxo. En el germario, por mitosis, se originan los oocitos primarios, que entran en el vitelario con sus clulas foliculares asociadas. El oocito debe almacenar nutrientes para el
Figura 1. Corte de un ovario de Locusta migratoria teido con hematoxilina-eosina. Las ovariolas muestran una disposicin polarizada en relacin al proceso de ovognesis, con el germario en la regin apical y el vitelario orientado hacia la regin basal, desembocando en los oviductos.

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

1/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

desarrollo, lo que implica que la velocidad de crecimiento sea elevada aunque est determinada en ltima instancia por el tipo de ovariola. Tipos de ovariolas Existen diferentes tipos de ovarios en funcin de las clulas nutritivas. Se dice que un ovario es panostico cuando no presenta clulas nutritivas especializadas. Las oogonias y los oocitos estn rodeados por un tejido prefolicular muy abundante en el borde posterior del germario. Cuando los oocitos tempranos pasan al vitelario son rodeados por los ncleos prefoliculares, entre los que aparecen membranas celulares, de modo que el oocito queda rodeado de un epitelio folicular, compuesto por clulas foliculares, que se ocupan de producir vitelo y verterlo al oocito. Cada folculo (clulas foliculares y oocito) est separado de folculos adyacentes mediante un tapn de clulas foliculares modificadas, tejido interfolicular. Este tipo de ovariola es caracterstica de rdenes primitivos de insectos (hemimetbolos) como el que nos ocupa, Ortoptera (Figura 2A). Otro tipo de ovario es el merostico, propio de holometbolos. Son aqullos que presentan clulas nutricias o trofocitos desempeando el papel de producir nutrientes para el oocito durante el desarrollo del embrin. Se pueden dividir en dos subtipos, telotrficos o acrotrficos y politrficos.

Figura 2. Reconstruccin esquemtica de los distintos tipos de ovariolas en la que se sealan las principales estructuras. A.- Ovariola de ovario panostico. B y C.- Ovariolas de ovario merostico; telotrfico o acrotrfico (B) y politrfico (C).

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

2/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

Figura 3. Detalle del germario en un corte de ovario de Locusta migratoria teido con hematoxilina-eosina. Se pueden distinguir los oocitos primarios que an estn cursando la meiosis, rodeados de clulas foliculares planas, as como el inicio del vitelario, con folculos en los que el citoplasma del oocito es an poco patente.

Los primeros (Figura 2B) presentan cordones citoplasmticos entre el germario y el folculo hasta que se completa el desarrollo del oocito, son los cordones trficos. El segundo subtipo es el politrfico (Figura 2C), en el que acompaan al oocito tanto trofocitos como clulas foliculares. Existen casos bien conocidos como el de Drosophila y sus cmaras ovricas, y otros ms simples en dermpteros en los que slo un trofocito acompaa al oocito y estn ambos rodeados por clulas foliculares. Cuando el oocito est maduro, ha conseguido todo el vitelo necesario, las clulas nutricias degeneran y son reabsorbidas. En las ovariolas de un ovario de tipo panostico se puede observar cmo los folculos van creciendo paulatinamente de tamao debido a la acumulacin de vitelo procedente de las clulas foliculares por parte del oocito mediante pinocitosis. En consecuencia, el oolema presenta repliegues y microvellosidades que aumentan su superficie. Entre ambos tipos celulares existe una membrana vitelina, no apreciable al microscopio ptico, con dos tipos de componentes: los cuerpos de la membrana vitelina y el material granular, secretado tambin por las clulas foliculares y que mantiene asociados a los primeros entre s. DESARROLLO DE LA PRCTICA En la prctica se observarn secciones histolgicas de ovarios de hembras de saltamontes (ejemplares joven y adulto) teidas con trcrmico de Masson y con hematoxilina-eosina. En dichas secciones se observar la disposicin de las ovariolas en el

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

3/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

ovario, as como la estructura y disposicin de las clulas foliculares y del ovocito en las diferentes etapas de maduracin.

Figura 4. Fotografas de secciones de ovariola de saltamontes teida con hematoxilina-eosina. A.- Folculo. Ncleo muy patente en el centro del oocito, rodeado ste de clulas foliculares. Obsrvese el tapn folicular a la izquierda que separa un oocito de otro. B.- Clulas foliculares de un oocito inmaduro, de morfologa aplanada. C.Clulas foliculares de un oocito ms maduro, ms altas que las anteriores. D.- Clulas foliculares de un oocito maduro, muy altas y desarrolladas. Obsrvese el vitelo en forma de plaquetas vitelinas.

Figura 5. Fotografa de un tapn folicular (tincin con hematoxilina-eosina). A.- Seccin longitudinal. B.- Seccin transversal.

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

4/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

2. ANFIBIOS
APARATO GENITAL FEMENINO

Figura 6. A.- Especie ejemplo de estudio de oognesis en anfibios, Rana perezi. B.- Visin general de un corte de ovario de rana teido con tricrmico de Masson, en el que se observan folculos en distintos estados de maduracin, con los ms tempranos en la periferia, adems de vasos sanguneos. Obsrvese el epitelio germinal.

Al igual que en invertebrados, el ovario de anfibios est diseado para producir los gametos femeninos que se caracterizarn esencialmente por la acumulacin de vitelo, fundamental para las primeras etapas del desarrollo ontognico del individuo una vez ha tenido lugar la fecundacin. Los ovarios de anfibios son, de nuevo, estructuras pares situadas en el abdomen del animal y presentan forma lobulada, en cuyo interior se localizan los folculos en distintos grados de maduracin. Los folculos ms tempranos se sitan en la periferia del
Figura 7. Cortes de folculos teidos con tricrmico de Masson en distintos estados de maduracin. A.- Folculo muy temprano, con un oocito que posee muy poco vitelo y apenas dos nucleolos en el interior del ncleo. B.Folculo ms avanzado con algo ms de vitelo, todava homogneo, y un mayor nmero de nucleolos en el ncleo. C.- Este folculo presenta ya diferenciacin en su citoplasma, adems de una envoltura nuclear festoneada de forma caracterstica. Obsrvense los numerosos nucleolos. D.- Folculo muy maduro, con regiones diferenciadas claramente en su citoplasma, vitelo compactado en forma de plaquetas, envoltura nuclear festoneada y gran cantidad de nucleolos. http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

5/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

ovario, siendo de menor tamao y con una cantidad pequea de vitelo acumulado (Figura 6B). Estos folculos tambin se encuentran rodeados por clulas foliculares, con origen en el estroma, y que tendrn un papel menos importante en la produccin de vitelo al interior del oocito, dado que sta viene regulada hormonalmente desde el hgado va sangunea. A medida que los folculos maduran, se localizan ms internamente en el ovario, acumulan mayor cantidad de vitelo y aumentan de tamao (Figura 7). Las clulas foliculares que los rodean forman 2 3 capas (Figura 8A), si bien su morfologa no experimenta cambio alguno (continan siendo planas igual que en los folculos ms tempranos y a diferencia de ortpteros no forman tapones foliculares).

Figura 8. Detalle de la regin perifrica de folculos de rana en corte teidos con tricrmico de Masson. A.Obsrvense dos capas de clulas foliculares claramente diferenciadas y un vitelo parcialmente homogneo en el interior del oocito. B.- En esta imagen se aprecian dos folculos adyacentes aparentemente en el mismo estado de maduracin. Se observa diferenciacin en el citoplasma y el vitelo, compactado en forma de plaquetas. Distnganse perfectamente la membrana vitelina entre el oocito y las capas de clulas foliculares.

Al mismo tiempo, el citoplasma del oocito se diferencia en tres regiones en funcin de la acumulacin de orgnulos (Figura 9). As, es posible observar una regin cortical ms externa, una regin medular inmediatamente por debajo y una ltima regin, ms cercana al ncleo, que recibe el nombre de citoplasma activo.

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

6/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

Figura 9. Reconstruccin fotogrfica del corte de un folculo de rana maduro teido con tricrmico de Masson. A.- Visin general. Obsrvese la diferenciacin citoplasmtica. B.- Detalle de (A) en el que se aprecian claramente tres zonas: i) plaquetas vitelinas; ii) citoplasma activo; iii) ncleo del oocito. C.- Detalle de (B) en el que se observan: 1) clulas foliculares; 2) membrana vitelina; 3) crtex celular; 4) plaquetas vitelinas.

Otra caracterstica tpica de los folculos de anfibios es que, a medida que el oocito madura, en su ncleo (clsicamente denominado vescula germinal) se produce un fenmeno denominado amplificacin gnica, en el cual se transcriben masivamente los cistrones ribosomales, por lo que se pueden observar gran cantidad de nucleolos extracromosmicos dispersos por el ncleo (Figura 9A-B y 11A). Por contra, no se observan con esta tincin los cromosomas; estos cromosomas, clsicamente llamados plumulados (lampbrush chromosomes), se encuentran en el estadio meitico de diplotene, muy decondensados, y son tambin caractersticos de anfibios. Alcanzado cierto grado de maduracin (cierto volumen de vitelo acumulado), el vitelo se compacta adoptando estructura paracristalina en forma de plaquetas vitelinas (Figura 10), si bien stas presentan una morfologa ms regular y diferente a la observada en ortpteros, adems de un tamao menor. El proceso de ovognesis en anfibios dura aproximadamente unos tres aos, siendo el ltimo periodo en el que se produce el aumento ms significativo de tamao de los huevos, los cuales llegan a tener hasta unos 2-3 mm de dimetro en el momento de la puesta. Estos huevos son de tipo heterolecito y presentan una pigmentacin diferencial caracterstica que define dos polos: animal y vegetal (o vegetativo) (Figura 11B). Adems de los folculos, en su estructura histolgica el ovario presenta un fino epitelio que lo recubre, adems de numerosos vasos sanguneos de distinto calibre en su estroma.

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

7/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

Figura 10. Detalle de la regin perifrica de un folculo de rana en corte teido con tricrmico de Masson. A.Difernciense: i) capa de clulas foliculares; ii) membrana vitelina; iii) crtex celular; iv) vitelo compactado en plaquetas. B.- Detalle de (A) en el que se aprecian las plaquetas vitelinas de estructura paracristalina. Obsrvese el cristal en el interior de stas.

Figura 11. A.- Detalle del ncleo de un folculo maduro en corte de ovario de rana teido con tricrmico de Masson. Obsrvense el lmite festoneado y los nucleolos en el interior. B.- Huevo maduro de rana. La polarizacin del vitelo y los pigmentos es evidente.

DESARROLLO DE LA PRCTICA En esta segunda parte se estudiarn secciones histolgicas de ovario de rana teidas con tricrmico de Masson. En estas preparaciones se analizar la disposicin de los folculos dentro del ovario y el proceso de maduracin de stos, as como el consiguiente aumento de tamao debido a la progresiva acumulacin de vitelo que dar lugar finalmente a su compactacin en forma de plaquetas vitelinas. stas se observarn con detalle con el fin de establecer diferencias con respecto a las encontradas en oocitos maduros de saltamontes. Igualmente se analizarn las diferencias morfolgicas visibles en el citoplasma de los oocitos maduros de rana.

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

8/9

Prctica 3. Ovognesis en ortpteros y anfibios

Cuestiones. 1.- Realizar un dibujo de una ovariola de saltamontes y sealar en l todos los elementos morfolgicos estudiados en la prctica. 2.- Realizar un dibujo de un ovario de rana y sealar en l todos los elementos morfolgicos estudiados en la prctica.

http://www.uam.es/departamentos/ciencias/biologia/citologia/practica3.htm

9/9