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LABORATORIO DE BIOQUMICA GENERAL ING.

GUSTAVO HERNANDEZ SANDOVAL

Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$%

Titulacin Potenciometrica de Aminocidos A!ino Pot ntio! t"ic Tit"ation ISAAC CAMPUZANO1, MANUEL LEON1, LUISA MA TINEZ1, NATALIA SAL!A"O1, #E NAN"O SIE A1, A" IANA $IOLA1% ESUMEN& La titulaci&n $ un !'to#o (u con$i$t n la cuanti)icaci&n # una $oluci&n # una $u$tancia *o" ! #io # la " acci&n al (uili+"io, con ot"o co!*u $to cu-a conc nt"aci&n .olu! n $ conoc n. La$ titulacion $ /ci#o0+a$ $ *u # n " ali1a" !*l an#o co!*u $to$ in#ica#o" $ # l ca!+io # *H o ! #iant l u$o # un *ot nci&! t"o. Lo$ in#ica#o" $ !u $t"an l *unto # n ut"ali1aci&n ca!+ian#o # colo". Si $ !*l a un *ot nci&! t"o, $ *u # n o+t n " lo$ .alo" $ # *H # la $oluci&n (u $ $t' titulan#o, al a2" 2a" * (u 3o$ .ol4! n $ # titulant *a"a, *o$t "io"! nt , ! #iant una 2"/)ica 5*H .$ .olu! n a2" 2a#o6 o+t n " l *unto # (ui.al ncia.

PALA' AS CLA$ES& Titulaci&n, a!ino/ci#o$, *H, *unto i$o l'ct"ico.

A'ST ACT& Tit"ation i$ a ! t7o# con$i$tin2 in (uanti)-in2 a $olution o) a $u+$tanc t7"ou27 t7 (uili+"iu! " action 8it7 anot7 " co!*oun# 87o$ conc nt"ation an# .olu! a" 9no8n. Aci#0+a$ tit"ation$ can + * ")o"! # u$in2 co!*oun#$ o) c7an2 o) *H in#icato"$ o" +- u$in2 (E)*O "S& D 2"

a *ot ntio! t ". In#icato"$ $7o8 t7 n ut"ali1ation *oint c7an2in2 colo". :7 n u$in2 a *ot ntio! t ", -ou can 2 t t7 .alu $ o) *H o) t7 $olution + in2 tit"at # +- a##in2 $!all .olu! $ o) tit"ant )o" $u+$ (u ntl- +- a 2"a*7 5*H .$ .olu! a## #6 o+tain t7 (ui.al nc *oint.

, a!ino aci#$, *H, i$o l ct"ic *oint.

INTRODUCCIN 1
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Estudiante de Ingeniera de Alimentos, IV Semestre, Universidad de Crdoba, Facultad de Ingenieras, Programa de Ingeniera de Alimentos, Berastegui

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Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$% os amino!cidos son las unidades elementales constitutivas de las mol"culas denominadas #rotenas, con los cuales el organismo reconstitu$e #ermanentemente sus #rotenas es#ec%icas consumidas #or la sola accin de vivir& as #rotenas 'ue son los com#uestos nitrogenados m!s abundantes del organismo, a la ve( 'ue %undamento mismo de la vida, debido a la gran variedad de #rotenas e)istentes $ como consecuencia de su estructura, las #rotenas cum#len %unciones sumamente diversas, #artici#ando en todos los #rocesos biolgicos $ constitu$endo estructuras %undamentales en los seres vivos& *e este modo, act+an acelerando reacciones 'umicas 'ue de otro modo no #odran #roducirse en los tiem#os necesarios #ara la vida ,en(imas-, trans#ortando sustancias ,como la .emoglobina de la sangre, 'ue trans#orta o)geno a los te/idos-, cum#liendo %unciones estructurales ,como la 'ueratina del #elo-, sirviendo como reserva ,alb+mina de .uevo-, etc& El m"todo de titulacin #otenciom"trica !cido 0 base se %undamenta en 'ue los iones .idrgenos #resentes en una muestra como resultado de la disociacin o .idrlisis de solutos, son neutrali(ados mediante titulacin con un !lcali est!ndar& El #roceso consiste en la medicin $ registro del #otencial de la celda ,en milivoltios o #1- des#u"s de la adicin del reactivo ,!lcali est!ndarutili(ando un #otencimetro o medidor de #1& Para .allar la concentracin del analito se constru$e una curva de titulacin gra%icando los valores de #1 observados contra el volumen acumulativo ,ml- de la solucin titulante em#leada& a curva obtenida debe mostrar uno o m!s #untos de in%le)in ,#unto de in%le)in es a'uel en el cual la #endiente de la curva cambia de signo-& a titulacin de un !cido %uerte con una base %uerte se caracteri(a #or tres eta#as im#ortantes2 os iones .idronios est!n en ma$or cantidad 'ue los iones .idr)idos antes del #unto de e'uivalencia& os iones .idronios e .idr)idos est!n #resentes en concentraciones iguales, en el #unto de e'uivalencia& os iones .idr)idos est!n en e)ceso, des#u"s del #unto de e'uivalencia&

OBJETIVOS 3
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Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$% Al %inali(ar la #r!ctica el estudiante debe ser ca#a( de2 Calcular en %uncin de los datos de titulacin, la concentracin de !cido4base en soluciones de un solo com#onente e)#resando el resultado de e'uivalencia $ #unto %inal& *eterminar e)#erimentalmente las di%erencias entre #unto de e'uivalencia $ #unto %inal& *eterminar e)#erimentalmente las di%erencias entre la titulacin de un !cido d"bil con una base %uerte $ un !cido %uerte con una base %uerte&

5eali(ar las curvas de titulacin #otenciom"tricas& MATERIALES Y METODOS

Materiales Potencimetro Vasos de #reci#itado ,67 $ 177 m Agitador magn"tico Bureta ,67 m 1 so#orte #ara bureta 1 varilla de vidrio 8aterial de #rueba2 soluciones de amino!cidos

Metodos 1& Calibrar el #otencimetro, con dos soluciones estandari(adas 3& *eterminar el #unto isoel"ctrico de un amino!cido& En un vaso de #reci#itados, medir 67 ml de una solucin de amino!cidos ,alanina, arginina $ as#!rtico-& 8edir el #1 inicial del amino!cido& 9& Proceder a titular con 1C 7,1 8 adicionando lentamente $ tomando el #1 des#u"s de cada adicin, .asta 'ue se .a$a consumido m!s de 17 ml de !cido&
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:& *esec.ar el titulado, lavar el vaso $ medir nuevamente 67 ml del mismo amino!cido $ re#etir el #rocedimiento con ;a<1 7,1 8& 6& En el caso del !cido as#!rtico se debe continuar adicionando ;a<1 .asta 'ue se .a$an consumido m!s de 37 ml de !lcali& =& Con los datos del #1 %rente al de los mili e'uivalentes de base o acido consumidos, .acer %iguras en las 'ue el #1 se gra%i'ue en las ordenadas $ en las abscisas, los mili 9

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Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$% e'uivalentes de acido ,.acia la i('uierda- $ !lcali ,.acia la derec.aconsumidos& >& A #artir de la %igura, determinar el #1 en el #unto isoel"ctrico ,#I- $ los valores de #? del amino!cido con acido $ con base&

RESULTADOS Y DISCUSION os resultados #ara esta #ractica se #resentan en %orma de tablas con los datos de volumen $ #1, con los cuales se construir!n las gra%icas de #1&

Resultados 7ml 3,:1 1ml 3,93 3ml 3,1@ 9ml 3,76 :ml 1,A@ 6ml 1,@6 =ml 1,>1 >ml 1,= @ml 1,69 Aml 1,:@ 17ml 1,:=

cido As !rtico 7ml >,== 1ml 6,=> 3ml :,1A 9ml 9,@@ :ml 9,== 6ml 9,66 =ml 9,:3 >ml 9,93 @ml 9,3: Aml 9,1@ 17ml 9,16

Ala"i"a 7ml 17,1 7 1ml A,@3 3ml A,@3 9ml A,=A :ml A,=7 6ml A,:@ =ml A,:7 >ml A,99 @ml A,11 Aml A,19 17ml A,76

L # Ar$i"i"a 7ml >,A6 1ml =,1= 3ml :,17 9ml 9,>@ :ml 9,6> 6ml 9,:1 =ml 9,97 >ml 9,33 @ml 9,1: Aml 9,7> 17ml 9,77

%lici"a TITULACIN CON &Cl

7ml

1ml

3ml

9ml

:ml

6ml

=ml

>ml

@ml

Aml

17ml :

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Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$% 3,:1 11ml 9,:A 3,=1 13ml 9,=1 3,=> 19ml 9,>: 3,>6 1:ml 9,A1 3,@@ 16ml 9,A@ 3,A@ 1=ml :,1> 9,71 1>ml :,39 9,16 1@ml :,93 9,39 1Aml :,9A 9,3: 37ml :,:> 9,:9

cido As !rtico 7ml 1ml 3ml 9ml :ml 6ml =ml >ml @ml Aml 17ml

Ala"i"a 7ml 17,1 @ 1ml 17,3 @ 3ml 17,9 @ 9ml 17,: : :ml 17,6 > 6ml 17,= A =ml 17,> 1 >ml 17,> A @ml 17,A 9 Aml 11,7 1 17ml 11,1 1

L # Ar$i"i"a 7ml >,A> 1ml @,99 3ml @,67 9ml @,=9 :ml @,>3 6ml @,@1 =ml @,@A >ml @,A: @ml @,A> Aml A,7: 17ml A,7@

%lici"a TITULACIN CON NaO&

Discusio"

CONSULTA a' 5egistrar en una tabla los resultados obtenidos 6


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Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$% ACIDO AS(ARTICO )* + , -./ M0 Titulacio" co" &Cl Titulacio" co" NaO&

ALANINA )* + , -./ M0 Titulacio" co" &Cl Titulacio" co" NaO&

L 1 AR%ININA )* + , -./ 20 Titulacio" co" &Cl Titulacio" co" NaO&

=
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%LICINA )* + , -./ M0 Titulacio" co" &Cl Titulacio" co" NaO&

3' *ibu/ar $ determinar el PI del amino!cido ACIDO AS(ARTICO Titulacio" co" &Cl PI C C 1,@A

Titulacio" co" NaO&

Bitulacin con !cido P?1 C 3,93 P?3 C 1,:= >


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Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$% Bitulacin con base P?1 C 3,=1 P?3 C :,:> PI C C 9,6:

c' *eterminar el PI de los aminoacidos 'ue a#arecen en la Babla ;D1 de la gua %lici"a PI C Ala"i"a PI C %luta2ico PI C &istidi"a PI C Treo"i"a PI C Lisi"a PI C As artico PI C C 3,>6 @
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C =,76

C =,1

C 9,36

C >,=

C =,6

C 17

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Titulacion Pot ncio! t"ica # A!inoaci#o$%

CONCLUSION os amino!cidos en disolucin, a #1 neutro, est!n #redominantemente ba/o la %orma de di#olo, esto se debe a 'ue los gru#os carbo)ilo $ amino se ioni(an, no #oseen carga el"ctrica neta& Esta #ro#iedad los .ace ca#aces de ace#tar o donar #rotones, #or lo 'ue al agregar una base o un !cido estos no cambian bruscamente de #1, es decir, %unciona como amortiguadores de disoluciones a un #1 determinado, en este caso a su #unto isoel"ctrico& Sin embargo, como amortiguadores %isiolgicos no son tan adecuados $a 'ue el #1 de los medios biolgicos es una constante %undamental #ara el mantenimiento de los #rocesos vitales& a accin en(im!tica $ las trans%ormaciones 'umicas de las c"lulas, #or e/em#lo, se reali(an dentro de unos estrictos m!rgenes de #1& En los .umanos los valores e)tremos com#atibles con la vida $ con el mantenimiento de %unciones vitales oscilan entre =,@ $ >,@E siendo el estrec.o margen de >,96 a >,:6 el de normalidad&

BIBLIO%RA4IA .tt#2FFciencia4basica4e)#erimental&netF#otenciometria&.tm .tt#2FFGGG&monogra%ias&comFtraba/os6AF#otenciometriaF#otenciometria3 &s.tml

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