TRABAJO COLABORATIVO 1 CULTIVO DE MAIZ (ZEA MAIZ)

GRUPO 303021-13

PRESENTADO POR STEFANY CUADROS PEREZ

TUTOR: GLORIA MARIA CIFUENTES

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD ECAPMA TECNOLOGIA AGROFORESTAL CULTIVOS DE CLIMA CALIDO CARTAGENA Octubre de 2013

FORMULACIN DEL PROBLEMA:

El cultivo de maz como muchos otros se ve afectado en muchas ocasiones por plagas y enfermedades, se conoce de la existencia de hongos como el Ustilago Maydis, el cual parasita especficamente al maz produciendo la enfermedad conocida como carbn de maz, la cual afecta de manera notoria el cultivos de maz formando agallas en cualquiera de los rganos de la planta, ya sea en las hojas, mazorcas, espigas florales, conllevando a la prdida casi total del fruto y la planta, y originando a su vez grandes prdidas econmicas. Cabe destacar, que para el carbn comn no existe control qumico y que para el carbn de la panoja, si bien existe la opcin de control qumico, esta es cara y requiere de sembradoras que tengan micro-granuladores, las cuales son de difcil acceso. La rotacin e cultivo tampoco es efectiva en este caso, ni siquiera en el mediano plazo, ya que el inoculo permanece activo en el suelo entre 6 a 7 aos, sobrevive el invierno en el suelo y en residuos o rastrojos. Las esporas se diseminan por viento y en el agua de riego a travs de la hilera.

Todo esto aunque primeramente afecta a los cultivadores de la regin, representa un porcentaje grande tambin en las perdidas a nivel nacional.

OBJETIVOS GENERAL Y ESPECFICOS: General: Crear una metodologa con la cual se pueda controlar o curar las partes afectadas en el cultivo de maz (zea mais), por el hongo ustilago maydis, utilizando mtodos biolgicos que promuevan el desarrollo sostenible. Especficos: Obtener de una planta de maz enferma su propia cura al sintetizar las fitoalexinas en que se forman en ella como mecanismo de defensa al ser expuestas al ataque del hongo Ustilago Maydis. Utilizar las fitoalexinas sintetizadas en la planta de maz enferma para controlar o curar el cultivo infectado y promover la produccin de productos para el control biolgico de plagas, generando un aporte para el desarrollo del equilibrio ambiental ya que puede sustituir plaguicidas causantes de grandes contaminaciones medio ambientales.

JUSTIFICACIN DE LA INVESTIGACIN: El cultivo del maz se encuentra actualmente en uno de los reglones ms importantes de la produccin agrcola colombiana y ms especficamente de la regin Caribe, dada su especial adaptacin a diversas condiciones agroclimticas y socioeconmicas su cultivo representa para la nacin un elemento crucial en el desarrollo agro empresarial del pas. Las prdidas generadas en los cultivos de maz al ser atacadas por el hongo de ustilagos maydis son devastadoras puesto que genera prdidas del 90 al 100% del fruto y la planta, adems los mtodos para el control de este son deficientes puesto que no existe control qumico y que para aquellos carbones que existe control qumico, son muy costosos y requieren tcnicas e instrumentos de difcil acceso. Otros mtodos como la rotacin de cultivo y la labranza tampoco son efectivos en este caso, ni siquiera en el mediano plazo, ya que el inoculo permanece activo en el suelo entre 6 a 7 aos, sobrevive el invierno en el suelo y en residuos o rastrojos. La sntesis de fitoalexinas en las plantas como respuesta inducida de defensa es una alternativa interesante y benfica para la prevencin y tratamiento de enfermedades provocadas por patgenos u otros agentes en las plantas, especficamente para este cultivo el ataque del hongo ustilagos maydis. Son muchas las caractersticas que hacen que la sntesis de las fitoalexinas se objeto de el desarrollo de muchas investigacin en pro del desarrollo de campos como el de la agroqumica, agrcola, de los productos naturales, la fitopatologa y la biotecnologa entre muchos otras ms, ya que estas al ser biodegradables pueden usarc como complemento o sustitucin de pesticidas sintticos que adems por ser de origen biolgico no dejan residuos que puedan originar problemas ambientales.

La importancia de las fitoalexinas desde el punto de vista biolgico, ecolgico, agronmico y fitoquimico, este articulo describe la naturaleza qumica de estos metabolitos, as como los factores de regulacin y mecanismos de accin .por lo tanto la presente revisin tiene como objetivos destacar el papel de las fitoalexinas productos de metabolitos secundarios y el potencial que re presentan Por sus caractersticas fngicas la sntesis de fitoalexinas con llevara ms adelante a la produccin a gran escala de fungicidas , pesticidas , abonos orgnicos entre otros .estos de gran importancias a nivel ambiental ya que por ser menos o casi nulos los problemas ambientales que generaran llevara a remplazar muchos de los plaguicidas y pesticidas que hoy en da estn siendo cuestionados por las grandes tasas de contaminacin que estn desencadenando , adems la aplicacin de las fitoalexinas en este tipo de productos se vera favorecida por que estas actan a bajas concentraciones , son anti fngicas y anti bactericidas ,son estructuras variadas lo que previene su resistencia , todas las plantas tienen la facultad potencial de producirlas y son fcil de sintetizar y transformar qumica o microbiolgicamente en un laboratorio.

MARCO TERICO: El cultivo de maz tiene sus orgenes en Amrica central. El maz (zea maz),fruto de la planta de maz la cual pertenece a la familia de las angiosperma de la clase monocotiledonea ,el cultivo de maz es uno de los renglones ms importantes de la produccin agrcola nacional, se encuentra difundido en todas las regiones del pas generando grandes ganancias en la agricultura nacional , ganancias que se estn viendo reducidas por el dao que sufren los cultivos al entrar en contacto con situaciones de estrs que pueden causar su muerte como lo son el ataque de hongos ,virus , bacterias, altas temperaturas y gentes qumicos. Desde muchos tiempo atrs se conoce de la existencia de hongos como el Ustilago Maydis, el cual parasita especficamente al maz produciendo la enfermedad conocida como carbn de maz, la cual afecta grandes cultivos de maz generando grandes prdidas econmicas (Agrios ,2005; Martnez-Espinoza et.al). Desde el punto de vista socioeconmico, el maz es producido en regiones altamente desarrolladas, con sistemas avanzados de tecnologa y buena productividad y tambin en regiones marginadas con sistemas tradicionales de produccin cuyo objetivo es el autoabastecimiento. En las regiones ms pobres y deprimidas el maz ha sido un soporte de la seguridad alimentaria, representa un seguro contra el hambre y una garanta de sostenibilidad para sobrellevar las crisis, tanto econmicas como sociales que padecen los agricultores de estas regiones Las fitoalexinas son metabolitos secundarios que segregan las plantas como mecanismo de defensa ante el ataque de un patgeno, se dice que se encuentran de diversa variedad qumica y su rango en el espectro abarca casi el cien por ciento de su totalidad. Algunos investigadores piensan que las plantas no poseen la maquinaria enzimtica necesaria para que se de la sntesis de sustancias como estas y por ello es necesario la presencia de los llamados inductores que pueden ser biticos (hongos, bacterias, virus, etc) o abiticos (daos mecnicos, agentes qumicos, estrs, etc.), estos actan como huspedes en las plantas (hospedadora). Estudios realizados demuestra que casi siempre los mejores inductores son los hongos y de acuerdo a la planta a la que ataquen se pueden obtener una gran diversidad de fitoalexinas.

La inoculacin del grano de maz con Ustilago Maydis como elitor bitico , permitir la sntesis y secrecin de metabolitos secundarios (fitoalexinas) en la presente investigacin se aislara la sustancia producida , se identificara y se realizara la respectiva sntesis , ello tambin se realizara utilizando como elitores abiticos la exposicin a altas temperaturas y etileno con el fin de determinar si se producen el mismo tipo de fitoalexina , o si la planta es capaz de producir diferentes tipos de ellas teniendo en cuenta el elitor utilizado.

METODOLOGA: MATERIAL VEGETAL: 5Kg de grano de maz (infectados con el hongo Ustilago Maydis)

MATERIALES: Vaso de precipitado Pipetas aforadas Pipetas milimetradas Balones aforados de 100mL Esptula Vidrio reloj Papel filtro Mortero Tubos de ensayo

REACTIVOS: Agua destilada estril Tween 20 Hipoclorito de sodio al 10% Etanol Sulfato sdico Cloroformo Acetato de etilo Etileno

EQUIPOS: Agitador elctrico Centrifugador Estufa elctrica HPLC

Metodologa: 1. Recoleccin de 5Kg de granos de maz infectados del hongo en cuestin. 2. Aislamiento e identificacin de fitoalexinas producidas en los granos de Maz, utilizando el hongo Ustilago Maydis como elitor. 2.1 .Obtencin del micelio del hongo (Ustilago Maydis) Tomamos los granos de maz infectados y los raspamos con el fin de obtener telioesporas del hongo, estas son colocadas en agua destilada con surfactante (Tween 20 2gotas/L), dejando en reposo durante 12h, luego filtramos la suspensin y centrifugamos el sedimento, el cual a su vez se desinfecta con hipoclorito de sodio al 10% por 3min y se lava 3 veces con agua destilada estril. Las telioesporas se mantienen en el surfactante hasta el momento de la siembra, para lo cual se separa a agua pura y se siembra 1ml de suspensin en agar agua al 2% a una temperatura comprendida entre 20-24C con fotoperiodo de 14h durante 6-8 das. 2.2 .Inoculacin del grano

Se seleccionan 2,5Kg del grano sano y se dejan en reposo en agua destilada por 24 h se lavan y se agitan por 15min con 15mL de hipoclorito de sodio al 4%lavando posteriormente con agua destilada estril (repetir 5 veces). Luego ponemos en contactos los granos con el hongo (Ustilago Maydis) inoculndolo a temperatura ambiente en ausencia de luz y presencia de humedad por 15 das. 2.3. Extraccin La extraccin se realizo por el mtodo de Keen y Ward. Se libera en fruto inoculado con lavado vigoroso con agua hasta depender el hongo presente. Para no extraer un metabolito del hongo se macera una parte en etanol, luego se coloca en un agitador durante 1 da (110RPM en 4Lde etanol) y luego se centrifuga por 30min. Para remover esporas y materia orgnica la fase acuoetanolica se concentra a presin reducida a 35C hasta 100mL, se extraen tres porciones de 50mL de acetato de etilo se unen y se desecan con sulfato sdico y se evapora el acetato de etilo a presin reducida.

2.4. Aislamiento e identificacin. Se realizara mediante HPLC

POSIBLES RESULTADOS. Obtencin de un compuestos qumico mediante sntesis biolgica, el cual sera utilizado como cura o tratamiento para el hongo ustilago maydis

BIBLIOGRAFA. Llanos, M. C., 1984. El Maz, su Cultivo y Aprovechamiento. Ediciones Mundi-Prensa. Castelln. 37 Madrid-1. Alba Stella Rivero Angarita (2001), Molculas activadoras de la induccin de resistencia incorporada a la agricultura sostenible. R. Garcias Mateos, R. Prez Leal (2003), Fitoalexinas: mecanismos de defensa en las plantas.