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BLOQUE IV: MICROBIOLOGA


Antes de comenzar a investigar los microrganismos celulares es necesario abordar el estudio de un tipo de seres cuya organizacin est en la frontera entre el nivel molecular y el celular: los virus. Este tipo de organizacin se conoce con el nombre de Organizacin Acelular.

NIVEL DE ORGANIZACIN ACELULAR: LOS VIRUS


Los virus son seres de extraordinaria simplicidad. Su nivel de organizacin se encuentra en el lmite entre lo vivo y lo inerte, ya que, por un lado son capaces de reproducirse (caracterstica privativa de los seres vivos) mientras que, por otro, cuando estn fuera de las clulas, se pueden cristalizar igual que los minerales. Fueron descubiertos indirectamente, como agentes causantes de enfermedades, por el botnico ruso Ivanowski(1892), al estudiar la enfermedad del mosaico del tabaco. Este investigador comprob que el jugo extrado de las hojas enfermas segua transmitiendo la enfermedad incluso despus de atravesar filtros de porcelana de 0.4 a 0.2 micras (filtros que retienen las bacterias). Hasta esa fecha los seres vivos ms pequeos que se conocan eran las bacterias. No obstante, Ivanowski atribuy el resultado a una toxina segregada por la planta enferma. Se tuvo que esperar hasta 1898 para demostrar que responsable del mosaico del tabaco era un agente infeccioso y no una toxina. Se le dio el nombre de VTM. En 1953 Stanley logr aislar y cristalizar el VTM, demostrando que los cristales mantenan el poder infeccioso indefinidamente. Por ltimo la aplicacin del microscopio electrnico al estudio de los virus permiti conocer su ultra-estructura: los virus tienen un tamao no superior a 100 nm, son material gentico rodeados de una cubierta protectora y que poseen algunas enzimas; no tienen metabolismo y slo son capaces de reproducirse dentro de una clula utilizando para ello sus mecanismos metablicos. ESTRUCTURA DE LOS VIRUS Los virus presentan su estructura ms compleja cuando estn fuera de las clulas; entonces se denominan viriones y estn formados por dos tipos de componentes: 1.- Componentes principales: estn siempre presentes. cido nucleico: ADN o ARN pero nunca ambos. Proteinas: estructurales y, a veces, enzimticas. 2.- Componentes secundarios: aparecen slo en cierto tipo de virus. Lpidos Polisacridos La estructura de un virin est formada, en el caso ms complejo, por tres partes: 1.- El Genoma: es el cido nucleico, ADN o ARN. El ADN puede ser lineal o circular, monocatenario o bicatenario. El ARN es siempre lineal monocatenario o bicatenario. 2.- La Cpsida: es una cubierta de proteinas que rodea al ac. Nucleico, formada por subunidades llamadas capsmeros. La forma de los virus viene determinada por la disposicin de los capsmeros, dando lugar a los diferentes tipos estructurales de virus que luego estudiaremos. 3.- La Envoltura externa: formada por lpidos, polisacrios y proteinas tiene una

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estructura similar a la membrana plasmtica de las clulas. No la poseen todos los virus sino slo aquellos que infectan a clulas animales Ej.: paperas, rubeola, gripe, etc.. De acuerdo con la forma de la cpsida y con la presencia o no de envoltura, se diferencian cuatro tipos estructurales de virus: Icosadricos: la cpsida tiene forma de poliedro de veinte caras (icosaedro).Ej: polio, verrugas... (1 y 2) Helicoidales: los capsmeros se disponen helicoidalmente en torno al c. Nucleico. Ej.: VMT, rabia.... (4) Complejos: constan de una cpsida muy compleja en la que se distinguen tres partes: una cabeza icosadrica que incluye el ac. nucleico, una cola helicoidal que recubre un eje tubular rgido hueco, y una placa basal que presenta dos tipos de apndices: espinas (cortas y gruesas) y fibras caudales (largos y finos). Ej.: virus bacterifagos. (3) Pleiomrficos : virus recubiertos de envoltura externa cuyas cpsidas pueden ser de diverso tipo. Ej.: gripe, VIH,... (5)

CLASIFICACIN DE LOS VIRUS Son muy variados los aspectos que se pueden considerar al clasificar los virus entre los que destacamos los siguientes: tipo de cido nucleico, forma de la cpsida, tipo de clula huesped, enfermedad producida, etc... Un aspecto importante es la especificidad de los virus, cada tipo ataca slo a un tipo de clula. La Tabla siguiente muestra la clasificacin actual ms aceptada.

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A continuacin se muestran microfotografas de algunos de estos virus:

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FUNCIONES DE LOS VIRUS Existe toda una polmica sobre el hecho de considerar a los virus como seres vivos o no. Esto se debe a que muestran caractersticas propias de la materia inerte y de la materia viva. Los virus fuera de la clula: son cristalizables, poseen slo un tipo de cido nucleico y no los dos que son indispensables en las clulas, muestran una estructura muy simple que los sita en el nivel de organizacin molecular ( son sistemas macromoleculares), no se nutren (no poseen metabolismo propio) y no se relacionan. Todo esto los igualara a la materia inerte. No obstante los virus son capaces de introducirse en las clulas y utilizar el metabolismo celular para multiplicarse, algo que es exclusivo de los seres vivos. Por todo ello se les considera seres en la frontera de la vida, entre lo vivo y lo inerte. CICLO VITAL DE LOS VIRUS El ciclo vital de un virus requiere una clula huesped de donde obtener materia y energa para sintetizar nuevos ac. Nucleicos y capsmeros. Los ciclos de multiplicacin varan de un tipo de virus a otro en cuanto a sus mecanismos de penetracin, forma de replicacin, etc.., no obstante siempre presenta las mismas fases: Fijacin o adsorcin, Penetracin, Eclipse, Ensamblaje y Liberacin. De todos los ciclos que existen vamos a estudiar slo dos: - El Ciclo de Multiplicacin de un Bacterifago : el fago T 2 en la bacteria Escherichia coli. - El ciclo de multiplicacin de un Retrovirus: el virus VIH causante del SIDA.

CICLO VITAL DEL FAGO T2 EN Escherichia coli

Este virus tiene una molcula de ADN doble circular y una cpsida compleja. Presenta dos formas de multiplicarse: - Ciclo ltico: en el que la bacteria es destruida. - Ciclo lisognico: en el que el virus se reproduce junto con la bacteria sin causarle dao. Vamos a estudiar con detalle el primero de ellos: Ciclo ltico Como en todos los ciclos de multiplicacin se dan las cinco fases: 1.- Fase de Fijacin: Inicialmente el virus se fija a receptores especficos de la pared de la bacteria mediante enlaces qumicos, y posteriormente clava sus espinas a la pared consiguiendo la fijacin mecnica definitiva. Una vez realizada esta fase la infeccin ya no se puede evitar.

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2.- Fase de Penetracin: El fago mediante enzimas lisozimas situadas en la placa basal, rompe los enlaces de la pared creando una zona de debilidad; luego pliega su vaina introduciendo el eje tubular rgido a travs de la pared, de modo que el ADN es inyectado directamente al interior de la bacteria. A partir de este momento el fago queda reducido a su ac. nucleico recibiendo el nombre de fago vegetativo. 3.- Fase de Eclipse: Esta fase recibe este nombre porque aparentemente no ocurre nada en el interior de la bacteria cuando realmente estn teniendo lugar todos los mecanismos de multiplicacin del virus. Inicialmente el ADN vrico, utilizando los mecanismos celulares, crea enzimas endonucleasas que van a destruir el cromosoma bacteriano. Posteriormente, mediante las enzimas celulares se duplica (para crear ADN hijos) y se transcribe y traduce para crear los capsmeros. 4.- Fase de Ensamblaje: Los capsmeros se renen formando las cpsidas, mientras que los ADN vricos se pliegan y penetran en las mismas, crendose los viriones hijos. 5.- Fase de Liberacin: En esta fase los viriones hijos mediante la accin de enzimas endolisinas producen la rotura o lisis de la pared bacteriana saliendo al exterior.

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CICLO VITAL DEL VIH EN LINFOCITOS T4

El virus VIH presenta una envoltura externa con glucoprotenas (a), una cpsida mltiple (una exterior esfrica y otra interior troncocnica) (b) y dos molculas de ARN monocatenario (c) asociadas a enzimas entre las que destaca la retrotranscriptasa o transcriptasa inversa. Vamos a ver las fases de su ciclo de infeccin: 1.- Fase de Adsorcin: Las glucoprotenas de la envoltura vrica establecen contacto con receptores especficos de la membrana del linfocito.

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2.- Fase de Penetracin: El reconocimiento qumico induce la fusin de las membranas del linfocito y el virus quedando libre en el interior la cpsida vrica. Una vez dentro la cpsida se desorganiza dejando libre al ARN y sus enzimas en el citoplasma celular. 3.- Fase de Eclipse: Es la fase ms compleja. Inicialmente el ARN vrico, gracias a la retrotranscriptasa, da lugar a una copia en ADN, que se replica para formar una doble hlice y se inserta en el genoma celular, donde se comporta como un gen ms. Este ADN vrico utilizando la maquinaria celular se transcribe y se traduce originando nuevas copias de ARN vrico, protenas de la cpsida, enzimas y las glucoprotenas de la envoltura; stas ltimas sern depositadas sobre la membrana celular. 4. y 5.- Fase de Ensamblaje y Liberacin: Una vez construidos los componentes vricos tiene lugar su ensamblaje para formar los viriones, pero esta fase no se completa hasta despus de la liberacin. La salida de los viriones en formacin tiene lugar por mecanismos de exocitosis en un proceso de gemacin. Este proceso les permite adquirir la envoltura externa a partir de la membrana del linfocito que lleva asociadas las glucoprotenas.

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OTROS AGENTES INFECCIOSOS ACELULARES 1. LOS VIROIDES Estn asociados a ciertas enfermedades de plantas como la papa.Cada viroide est compuesto nicamente por una pequea molcula de ARN de forma circular y monocatenaria. La infeccin por viroides causa una atrofia en el crecimiento de la planta. La enfermedad ms conocida es la cadang-cadang que ha provocado la desaparicin de los cocoteros en muchas zonas del pacfico. 2. LOS PRIONES Los priones son nicamente molculas de protena. A pesar de carecer de ADN estas molculas son capaces multiplicarse dentro de las clulas. Se ha constatado que los priones son protenas con la misma secuencia de aminocidos que una protena normal pero que tienen una forma espacial diferente. Los priones son capaces de inducir que las protenas normales de la clula adopten la forma del prin.

Pr Pc normal

PrPc prin

Generalmente los priones son similares a protenas de la membrana de las neuronas, por lo que suelen provocar enfermedades neurodegenerativas como la encefalitis espongiforme bovina o enfermedad de las vacas locas y su variante humana: la enfermedad de Creutzfeld-Jakob.

Enfermedad
Scrapie Prionencefalopata transmisible del visn (TME) Chronic wasting disease (CWD) Encefalopata espongiforme de los bovinos (BSE) Encefalopata espongiforme de los felinos (FSE) Encefalopata de los ungulados Exticos (EUE) Kuru Creutzfeldt-Jakob disease (CJD) Sndrome de Gerstmann-StrausslerScheinker (GSS) Fatal familiar insomnia (FFI)

Husped natural
Ovejas y cabras Visn Mulos, ciervos y Alces Vacas Gatos Nyala y el gran Kudu Humanos Humanos Humanos Humanos

Prion
Scrapie prion TME prion CWD prion BSE prion FSE prion EUE prion kuru prion CJD prion GSS prion FFI