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INTRODUCCCION

Espectrometra de emisin

La espectroscopia de emisin atmica (AES) utiliza la medicin cuantitativa de la emisin ptica de tomos excitados para determinar la concentracin de la sustancia analizable. Los tomos del analito en la solucin son aspirados en la regin de excitacin donde son disueltos, vaporizados y atomizados por una llama, descarga o plasma. Estas fuentes de atomizacin a altas temperaturas proveen energa suficiente para promover los tomos a niveles de energa altos. Los tomos vuelven a niveles ms bajos emitiendo luz. El empleo de la espectroscopia de emisin por llama (FES), es de gran aplicacin en anlisis elemental. Puede ser usada para anlisis cuantitativo y cualitativo y es un mtodo de elemento simple. Sus usos ms importantes son la determinacin de sodio, potasio, litio y calcio en fluidos biolgicos y tejidos (2).

LUMINISCENCIA

El proceso de emisin de radiacin como consecuencia de la desactivacin de una molcula se denomina genricamente luminiscencia, mientras que el trmino fotoluminiscencia se refiere al caso particular en el que la excitacin tenga lugar por absorcin de fotones. Cuando la energa de excitacin es de otro tipo, se originan otras modalidades de luminiscencia: as, la quimioluminiscencia es un fenmeno anlogo a la fluorescencia, excepto en el hecho de que la energa de excitacin proviene de una reaccin qumica. Cuando la quimio-luminiscencia tiene lugar en un ser vivo, como por ejemplo, en la lucirnaga, recibe el nombre de bioluminiscencia. Por otra parte, la tribo-luminiscencia (del Griegro, tribo = frotar) se produce al liberarse la energa almacenada en ciertas sustancias cristalinas, como azcar, y como consecuencia de su rotura.

La fotoluminiscencia puede clasificarse, en principio, en fluorescencia y fosforescencia, segn el mecanismo mediante el cual la sustancia vuelve al estado fundamental, si bien, una distincin desde el punto de vista prctico se basa en el tiempo transcurrido entre la absorcin y la emisin.

La luminiscencia puede considerarse como una de las tcnicas analticas ms antiguas, pues su descubrimiento data del siglo XVI, cuando el fsico y botnico espaol Nicolas Monardes observ, en 1565, un misterioso matiz azulado en el agua almacenada en un recipiente construido con madera de la especie "Lignum nifriticum". Sin embargo, no fue hasta el siglo XIX en que el fsico ingls George Stokes estableci las bases de su utilidad analtica al describir los primitivos mecanismos de absorcin y emisin.

RESUMEN
Emisin de radiacin:

La radiacin

electromagntica se origina cuando las partculas excitadas

(tomos, iones o molculas) se relajan a niveles de menor cediendo su exceso de energa en forma de fotones. La excitacin puede producirse por diversos medios tales como los bombardeos con electrones u otras partculas elementales, que generalmente conduce a la emisin de rayos X; la exposicin de chispas de corriente alterna o al calor de la llama, un arco o un horno, la cual produce radiacin ultravioleta, visible o infrarroja; la irradiacin con un haz de radiacin electromagntica, que produce radiacin fluorescente, una radiacin qumica exotrmica, que produce quimioluminiscencia. La radiacin emitida por una fuente excitada se caracteriza adecuadamente por medio de un espectro emisin, que generalmente toma la forma de una representacin grafica de la potencia relativa de la radiacin emitida en funcin de la longitud de onda o la frecuencia.

LUMINISCENCIA

Cuando una especie qumica absorbe radiacin electromagntica ultravioleta o visible pasa a un estado electrnico excitado. Muchas sustancias en dicho estado disipan el exceso de energa en forma de calor, mediante colisiones con tomos o molculas vecinas, como ocurre en la espectrofotometra de absorcin. Sin embargo, un cierto nmero de especies pierde solo una parte de este exceso de energa en forma de calor, y emite la energa remanente en forma de radiacin electromagntica, de distinta frecuencia que la absorbida, y que puede utilizarse con fines analticos.

FUNDAMENTO TEORICO

Espectros de lneas: Los espectros de lneas en las regiones ultravioletas y visible se producen cuando las especies radianes son partculas atmicas individuales que estn muy separadas entre s, en estado gaseoso. Las partculas individuales en estado gaseoso se comportan como cuerpos independientes, y el espectro consiste en una serie de lneas agudas con anchuras de 10 -4 A aproximadamente.

Espectros de bandas: Los espectros de bandas se encuentran con frecuencia en fuentes espectrales que presentan radicales o pequeas molculas en estado gaseoso. Las bandas surgen a partir de numerosos niveles vibracionales cuantizados que se suponen al nivel de energa electrnico del estado fundamentales de una molcula.

Espectros continuos: La verdadera radiacin continua se produce cuando los slidos se calientan hasta la incandescencia. La radiacin trmica de esta clase, denominada radiacin del cuerpo negro, es caracterstica de la temperatura de la superficie de emisora ms que el material del que est compuesta la superficie. La radiacin del cuerpo negro se produce por innumerables oscilaciones atmicas y moleculares excitadas en el solido condensado por la energa trmica.(1)

hv1 hv2 hv3

Selector de longitud De onda (Monocromador O filtro)

Transductor

Salida

Equipo experimental diseado para medir emisin de la luz a una longitud de onda simple en cualquier intervalo de longitud de onda.

Tipos de espectroscopia de emisin:

TIPO DE ESPECTROSCOPIA

METODO DE ATOMIZACION

FUENTES DE RADIACION

MEDIANTE CALENTAMIENTO ARCO DE LA MUESTRA PORARCO ELCTRICO MUESTRA EXCITADA POR CHISPA CHISPA ELCTRICA DE ALTO VOLTAJE PLASMA DE ARGON MUESTRA CALENTADA POR PLASMA DE ARGN MUESTRA ASPIRADA E ATOMICA O EN LLAMA INTRODUCIDA EN LALLAMA, SE ATOMIZA DENTRO DE LA LLAMA RAYOS X NO NECESITA LAS MUESTRAS SE BOMBARDEAN CON ELECTRONES

MUESTRA

MUESTRA

MUESTRA

MUESTRA

MUESTRA

Espectroscopia de arco:

Las fuentes ms utilizadas en espectrografa de emisin son el arco de CC, el arco de Ca, y la chispa de Ca. Su misin consiste en evaporizar la muestra y provocar el paso de electrones a niveles energticos superiores. Se alcanzan temperaturas de 8.00K.El arco CC, se utiliza normalmente cuando se desea alcanzar una gran sensibilidad como sucede en la identificacin de elementos traza en las muestras; la oscilacin del arco constituye una dificultad para el trabajo cuantitativo; el arco de Ca es ms estable y reproducible. La chispa de Ca, proporciona energas de excitacin ms elevadas, es ms estable y reproducible y es generalmente la fuente preferida para el anlisis cuantitativo.

Los elementos metlicos pueden utilizarse como electrodos. Para el trabajo cualitativo se registra un espectro de hierro junto al del elemento desconocido. Tambin se registra el espectro de algn elemento cuya existencia en la muestra se sospecha. Se dispone de escalas para la medida exacta de las lneas espectrales y de tablas de longitudes de onda y de intensidades relativas de las lneas espectrales de un elemento. Para dar como positiva la identificacin de un elemento deben observarse al menos tres de sus lneas sensibles. La espectrografa de emisin cuantitativa exige un control de todas las variables como: condiciones de excitacin, tiempo de exposicin, trabajo de la pelcula. Con objeto de eliminar en lo posible pequeas variaciones de estos factores, se acostumbra aadir un patrn interno midiendo las intensidades de un par de lneas homologas formado por una lnea del elemento problema y otra del patrn interno. Los pares de lneas homologas deben tener longitudes de onda muy cercanas y ambos elementos deben presentar las mismas caractersticas de vaporizacin y anlogos potenciales de ionizacin; pequeas variaciones en las condiciones de excitacin o de trabajo de la pelcula afectaran a ambas lneas con la misma intensidad y la relacin entre sus intensidades ser constante. El resultante de la lnea espectral se mide con un densitmetro por comparacin de la transmitancia de la lnea con la de la zona de pelcula no expuesta adyacente a la lnea.

Espectroscopia de emisin atmica (EA)

Se utiliza en la medicin cuantitativa de la emisin ptica de tomos excitados para determinar la concentracin de la sustancia analizable. Los tomos del analito en la solucin son aspirados en la regin de excitacin donde son disueltos, vaporizados y atomizados por una llama, descarga o plasma. Estas fuentes de atomizacin a altas temperaturas proveen energa suficiente para promover los tomos aniveles de energa altos. Los tomos vuelven a niveles ms bajos emitiendo luz. Permite llevar a cabo un anlisis cuantitativo y cualitativo de entre 70 a 80 elementos. Los lmites de deteccin para muchos de estos elementos es de una parte por mil millones. Es necesario llevar a la muestra a un estado de vapor atmico. Este proceso, conocido como atomizacin, consiste en volatilizar la muestra y descomponerla en sus tomos

y quiz algunos iones gaseosos. Para la atomizacin de las muestras que se van a analizar se utilizan principalmente la atomizacin en flama (fotometra de llama) y la atomizacin en horno.

Los factores principales que determinan la magnitud de la emisin son: La distribucin energtica de niveles excitados Las probabilidades de transicin para emisin y absorcin El coeficiente de absorcin atmica Las caractersticas de la celda de atomizacin

Fotometra de llama

Es una tcnica de emisin que utiliza una llama como fuente de excitacin y un foto detector electrnico como dispositivo de medida. Se trata principalmente de un mtodo de anlisis cuantitativo y es uno de los mtodos ms sencillos y precisos para el anlisis de metales alcalinos, la mayor parte de los metales alcalinotrreos y algn otro elemento metlico. Tambin es posible realizar un anlisis cualitativo examinando todas las longitudes de onda del espectro de emisin (espectrofotometra de llama o fotometra de llama). Su aplicacin es limitada si se compara con la espectroscopia de emisin ordinaria, ya que la energa de la llama permite excitar nicamente de 30 a 50 elementos, siendo este nmero funcin del tipo de llama utilizada; Las llamas son coloraciones caractersticas que producen los compuestos sodio(amarillo), estroncio(rojo),y bario( verde) constituyen ensayos cualitativos corrientes de estos elementos. La muestra debe estar disuelta. La radiacin del elemento que interesa, cuya fuente de luz suele ser una lmpara de ctodo hueco, se dirige a travs de la flama que contiene el gas atmico. La solucin del analito se nebuliza por medio de un atomizador o nebulizador en finas gotitas y se lleva a la flama. El disolvente de las gotas se evapora de inmediato y las partculas de sal se descomponen en tomos, iones y electrones. Los tomos de la muestra absorbern la radiacin que emita el mismo tomo en la lmpara de ctodo hueco, con lo que sea tena la energa de la fuente. Mediante un monocromador se separa la lnea espectral del elemento que interesa de

cualquier otra radiacin que venga de la fuente o de la flama. La energa radiante de la fuente se transforma en corriente elctrica mediante un tubo foto multiplicador.

Otros tipos de epectroscopa atmica:

La atomizacin en horno, o electro trmica se utiliza con un atomizador electrotrmico; se toman pequeos volmenes de muestra, normalmente unos microlitros, y se depositan en el horno. Con un programa de calentamiento progresivo se evapora el disolvente de la muestra, la materia orgnica se reduce a cenizas o carbn se produce vapor atmico. Es de uno a dos rdenes de magnitud ms sensible que la atomizacin en flama. Algunos mtodos de EA emplean flamas para los tomos excitados, los cuales emiten una radiacin caracterstica cuando regresan a su estado fundamental. En otros mtodos de EA se emplean atomizadores ms potentes como los del plasma

inductivamente acoplado (PIC) y los atomizadores de arco y de chispa. A diferencia de la absorcin atmica, la emisin atmica se pude aplicar al anlisis cualitativo. Con este mtodo se pueden registrar espectros completos, donde e identifican los elementos por las longitudes de onda de las lneas de emisin. En alguna poca, la emisin en flama se utiliz mucho en los laboratorios clnicos para determinar sodio y potasio Estas tcnicas se han reemplazado ahora por mtodos que utilizan electrodos selectivos para iones. De hecho, ahora es ms importante la espectrometra de emisin en plasma inductivamente acoplado que la de emisin en flama, y tambin es una fuente importante de iones para el anlisis por espectrometra de masas.

LUMINISENCIA

Para que una sustancia origine emisin foto-luminiscente es necesario que previamente tenga lugar la absorcin de radiacin electromagntica. A continuacin se ampliarn algunos conceptos relacionados con los procesos de absorcin y emisin de forma general, pero que son aplicables a las mencionadas transiciones >*.

La multiplicidad molecular, M, se define como:

M = 2S + 1

donde S es el nmero cuntico de espn de la molcula, y es la suma de los espines de cada uno de sus electrones.

Muchas molculas orgnicas tienen un nmero par de electrones, por lo que S=0 y M=1. A dicho estado se le denomina singulete. El estado energtico ms bajo (estado fundamental) deber ser uno en el cual todos los electrones estn apareados, y a dicho estado se le denomina estado singulete fundamental (figura 4.1.a.)

Cuando un electrn pasa a un nivel energtico superior puede ocurrir que conserve su espn, o que se produzca cambio de ste. En el primer caso se tiene un estado singulete excitado (figura 4.1.b.) y en el segundo, un

estado triplete, ya que, en estas condiciones, M=3, debido a que S=+1/2 +1/2 = 1 Las transiciones desde el estado singulete fundamental hasta el estado triplete son muy poco probables; normalmente es necesario pasar a travs del estado singulete excitado*.

* Las molculas con electrones desapareados (nmero impar de electrones) constituyen un


estado doblete y es el caso, por ejemplo, de radicales libres orgnicos.

Figura 4.1. Estados singulete y triplete.

En la figura 4.2. Se han representado parcialmente diferentes niveles de energa para una molcula fotoluminiscente.

El nivel S0 representa el estado singulete fundamental, mientras que S1 y S2 estados singulete excitados, y T1 el estado triplete. Por otra parte, superpuestos a cada nivel de energa electrnico hay una serie de niveles de energa vibracionales estrechamente espaciados, representados en la figura por v0, v1, v2, etc. Los niveles rotacionales no se han incluido porque no pueden resolverse con los espectrmetros convencionales.

Cuando una molcula absorbe radiacin se produce el paso desde el estado electrnico y vibracional fundamental a un estado electrnico excitado y cualquiera de los posibles estados vibracionales excitados. Este proceso de excitacin tiene lugar en un tiempo del orden de los 1015 segundos. En sistemas condensados, como cuando se opera en disolucin, el exceso de energa vibracional se pierde inmediatamente, como consecuencia de los choques entre las molculas excitadas y el disolvente. Este proceso recibe el nombre de relajacin vibracional. Adems, puede ocurrir que se pase a un estado electrnico de ms baja energa sin emisin de radiacin (S 2 a S1). Este proceso, denominado conversin interna, se produce cuando dos niveles de energa electrnicos estn suficientemente prximos para que haya un solpamiento de los niveles de energa vibracionales.

Los procesos de conversin interna y de relajacin vibracional transcurren en un tiempo muy pequeo (del orden de los 10 12 seg.)

El proceso de emisin de un fotn desde S1 a So recibe el nombre de fluorescencia, y ocurre inmediatamente despus de la excitacin (en aproximadamente 109 a 107 segundos), por lo cual, no es posible percibir visualmente la emisin de fluorescencia una vez eliminada la fuente de excitacin. Por otra parte, debido a la conversin interna y a los procesos de relajacin vibracional, la emisin de fotones fluorescentes desde estados electrnicos excitados superiores al primero son procesos muy poco probables. As, en relacin con la figura 4.2., la excitacin por radiacin a la longitud de onda 2 normalmente provoca fluorescencia de una longitud de onda 3, con exclusin de la transicin que resultara entre S2 y S0.

La desactivacin de un estado electrnico excitado por prdida de energa no radiante puede tener lugar mediante unos procesos de conversin interna, si los niveles vibracionales del estado fundamental se solapan con los del primer estado excitado, o por conversin externa, lo cual implica interaccin y transferencia de energa entre la molcula excitada y el disolvente u otros solutos.

Como se coment anteriormente, mientras una molcula est en un estado excitado, puede tener lugar un cambio de espn en un electrn, con lo que se adquiere el estado triplete. Este proceso de transformacin de un estado singulete a un estado triplete se denomina cruzamiento entre sistemas, y la probabilidad de que esto suceda aumenta si los niveles vibracionales se solapan.

Una vez adquirido el estado triplete, la molcula puede llegar al nivel vibracional inferior mediante procesos de relajacin vibracional, y

posteriormente emitir un fotn para retornar finalmente al estado fundamental. Esta emisin se denomina fosforescencia.

Debido a que las transiciones entre estados de diferentes multiplicidades estn "prohibidas", la emisin fosforescente se produce con un cierto retraso respecto a la absorcin (entre 103 y 10 segundos). Por ello, con frecuencia, puede ser observada a simple vista despus de cesar la radiacin de excitacin. Sin embargo, como consecuencia del mayor tiempo de vida del estado triplete, los procesos de desactivacin en forma de energa no radiante pueden competir ms eficazmente con la fosforescencia que con la fluorescencia. Por esta razn, la fosforescencia casi nunca se observa a temperatura ambiente, siendo necesario operar en condiciones criognicas para que se reduzca la probabilidad de desactivacin por choques*.

A modo de resumen, puede decirse que los procesos de desactivacin de una especie en forma de energa no radiante son los ms probables, seguidos de la emisin fluorescente, y los menos probables son los correspondientes a la fosforescencia. Esto hace que los mtodos

absorciomtricos sean ms numerosos que los fluorimtricos, y stos, a su vez, ms que los basados en el empleo de la fosforescencia.

* En poca relativamente reciente, ha sido posible observar fosforescencia a temperatura ambiente cuando la muestra se incorpora a una matriz slida.

PARTE EXPERIMENTAL

1. Objetivos

Comparar dos mtodos de calibracin para la determinacin de calcio en muestras de agua mineral comercial. Evaluar la influencia del agregado de agentes liberadores y buffers de ionizacin en el mecanismo de atomizacin de calcio en una llama de aireacetileno.

2. Instrumental

INSTRUMENTO DE ESPECTROFOTOMETRIA Un espectrofotmetro :es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos.

El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la

misma sustancia. Regularmente es llamado espectrmetro de emisin el cual permite la determinacin de metales, en proporciones diversas, hasta nivel de trazas por espectrometra de emisin atmica de llama. Tcnica muy sensible y especfica, con muy pocas interferencias. Las muestras a estudiar pueden ser lquidas (aguas de consumo o industriales, soluciones acuosas) o muestras slidas qumicamente disgregadas; hoy emplean redes de difraccin. Las distintas intensidades luminosas pueden emplearse para saber la concentracin de una sustancia qumica, por ejemplo midiendo en la zona de la doble raya amarilla del sodio. Que sean IR significa que estn preparados para funcionar en la parte de baja frecuencia, debajo del rojo (mayor longitud de onda, por encima de los 800 nanmetros, antiguamente denominados mili micrones, u 8000 angstrom).

Existen dos tipos de aparatos: Fotmetro o Colormetro: Se caracterizan porque utilizan filtros que solo permiten el paso de una determinada longitud de onda. Espectrofotmetros: Utilizan cromadores. Con ellos se obtiene un haz de luz monocromtico cuya longitud de onda se vara a voluntad. Los monocroma dores pueden ser de dos tipos: prismas y redes de difraccin.

COMPONENTES DEL ESPECTROFOTMETRO

1. Fuente de luz: proporciona energa radiante en forma de luz visible o no visible. Tipos de lmparas:

Lmparas de filamento de tungsteno: se utilizan para longitudes de onda del espectro visible y el ultravioleta prximo. Son fuentes de un espectro continuo de energa radiante entre 360-950 nm.

Lmparas de filamentos de haluros de tungsteno: son de mayor duracin y emiten energa radiante de mayor intensidad.

Lmparas de Hidrgeno y Deuterio: producen un espectro continuo en la regin ultravioleta entre 220-360 nm.

Lmparas de vapores de Mercurio: Emiten un espectro discontinuo o espectro de lneas que se utilizan para calibracin de longitudes de onda, se emplean solo para espectrofotmetros y cromatografa HPLC.

Precauciones: Las subidas y bajadas bruscas de tensin producen sufrimiento de la lmpara y cambios en las lecturas de la Absorbancia. La lmpara tiene una vitalidad limitada y se debe vigilar para que funcione bien el aparato.

2. Rendija de entrada: tiene como funcin reducir al mximo la luz difusa y evitar que la luz dispersa entre en el sistema de seleccin de longitud de onda.

3. Monocromadores. Pueden ser:

Prismas: son fragmentos con forma de cua de un material que permite el paso de la luz. Ej. De vidrio para trabajar en el espectro visible o cuarzo para trabajar en el ultravioleta lejano.

Redes de difraccin: son un gran nmero de lneas paralelas situadas a distancias iguales entre s y son hendiduras sobre un vidrio o una superficie metlica. Cada una de estas hendiduras se comporta como un pequeo prisma.

4. Rendija de salida: tiene como funcin impedir que la luz difusa atraviese la cubeta de la muestra, que provocara desviaciones a la Ley de Beer. (04/10/01)

5. Cubeta: es el recipiente donde se coloca la muestra para la medicin. Pueden ser de distintos tipos y tamaos (cuadradas, rectangulares, redondas). Se obtienen mejores resultados usando cubetas de bordes paralelos. Si se utilizan cubetas redondas se deben marcar e introducir en el aparato siempre en la misma posicin. Suelen estar fabricadas en vidrio o en plstico.

6. Detector. Puede ser de dos tipos: a) Fotoclulas o clulas fotovoltaicas: Es una lmina de Cobre sobre la que se extiende una capa de Selenio o de xido de Cobre. A sto se le conoce como semiconductor. Sobre el semiconductor hay una capa de metal transparente que sirve de electrodo. La luz incide sobre el Selenio y ste desprende electrones, que pasan a la placa de Cobre originando una diferencia de potencial por existir carga negativa sobre el Cobre y positiva sobre el Selenio. El conjunto se conecta a un ampermetro que seala el paso de corriente. Caractersticas: son resistentes; econmicas; sensibles desde el ultravioleta hasta los 1.000 nm. de longitud de onda; no se requiere batera externa, ni vaco; la corriente producida es directamente proporcional a la Energa que llega y tienen efecto fatiga, es decir, que presentan una subida inicial de corriente, que luego decrece

progresivamente hasta el equilibrio. Por eso hay que esperar entre 30-60 segundos entre una lectura y otra. b) Fototubos multiplicadores:

Un fototubo multiplicador es un tubo que contiene un ctodo que emite electrones de forma proporcional a la Energa que incide sobre l. Tiene un nodo que recoge los electrones y la corriente se multiplica varias veces al chocar los electrones sobre sucesivos nodos que van teniendo un voltaje superior al precedente. La seal se amplifica en cientos o miles de veces. Caractersticas: el tiempo de respuesta es muy rpido, no tienen efecto fatiga tan altos como la anterior y son muy sensibles. 7. Medidor: son sistemas de lectura de la Energa elctrica que recoge el detector y que puede ser lectura directa (se utiliza una clula fotovoltaica) o puede ser amplificadores de seal como en el caso del fototubo multiplicador. Los actuales aparatos incorporan lectura digital y clculos automticos de concentraciones con relacin a las curvas de calibracin. 3. Calibracin

Se compararn dos mtodos de calibracin: curva de calibracin estndar con patrones acuosos y mtodo de agregado patrn de analito.

A. Preparar cinco soluciones patrn de calcio comprendido entre 2 y 25 mg/l a partir de una solucin de 1000 mg Ca/l. B. Preparar tres soluciones de concentracin constante de Ca (10 mg/l) y concentracin creciente de fosfato (5, 10 y 100 mg/l). C. Preparar una solucin diluyendo adecuadamente la muestra de agua mineral comercial de tal manera que caiga en el mbito lineal de la curva de calibrado. D. Repita la preparacin de esta solucin (dilucin de la muestra), con el agregado de cloruro de potasio (2000 mg/l) y nitrato de lantano (2000 mg/l), respectivamente.

No olvide preparar los blancos de reactivo para cada caso. Teniendo en cuenta el mbito de linealidad y la concentracin de calcio en la muestra disear una curva de agregado patrn con un mnimo de cuatro puntos.

4. Procedimiento

A. Con la ayuda del personal docente y el manual de instrucciones del espectrmetro, utilizar una de las soluciones patrn (10 mg Ca/l) para seleccionar las condiciones generales de trabajo para la determinacin de calcio (longitud de onda, ancho de ranura, ganancia del sistema detector). Asimismo optimizar la relacin combustible-comburente de la llama y la altura de observacin. B. Una vez seleccionados los parmetros ptimos medir la intensidad de emisin para todas las soluciones. C. Desplazar el monocromador a una longitud de onda situada 1 nm por encima y por debajo de la longitud de onda de trabajo y repetir las mediciones de intensidad. El valor promedio de estos valores se considerar como la intensidad del fondo espectral. 5. Tratamiento de resultados

Calcular la concentracin de calcio en la muestra por ambas metodologas (curva de calibracin y mtodo de agregado patrn). Comparar crticamente. Expresar los resultados con sus

correspondientes lmites de confianza.

Comparar los resultados obtenidos en ausencia y presencia de cloruro de potasio y nitrato de lantano. Justificar las diferencias si las hubiera.

Calcular el lmite de deteccin y la sensibilidad (para el clculo del LD utilizar la medicin de la desviacin estndar para 10 lecturas sucesivas del blanco de reactivos).

Comparar los resultados obtenidos en ausencia y presencia de cloruro de potasio y nitrato de lantano. Justificar las diferencias si las hubiera.

Ley de Lambert-Beer:

Establece la relacin entre el grado de absorbancia de una solucin y otras dos variables: la concentracin del absorbente y la longitud del trayecto del haz de la luz recorre a travs de la solucin.

Segn esta ley, la absorbancia de una solucin es directamente proporcional a la concentracin y a la longitud del trayecto del paso de luz. O tambin, que la fraccin de la luz monocromtica incidente que es absorbida por una muestra es proporcional al nmero de tomos o de molculas encontrados en su camino.

A= log

=axbxc

Siendo A= absorbancia I= intensidad de la luz transmitida I0 =intensidad de la luz incidente a=coeficiente de absorbancia b= longitud del paso de luz en centmetros c= concentracin del absorbente

La

ley

de

Lambert-Beer

tambin

permite

determinar

los

mtodos

experimentales para averiguar la concentracin de una sustancia de inters en solucin. Ley de trasmitancia, T: Fraccin de radiacin incidente que consigue atravesar la muestra. Vara de 0 a 1

T=

%T=

x 100

Ley de Absorbancia. A: cantidad de radiacin absorbida

A=-Log T =log p0/p

PROBLEMAS DE APLICACIN

A. Una solucin que contiene 6.23ppm de KMnO4 presenta una transmitancia de 0.195 en una celda de 1cm a 520nm .Calcule la absortividad molar del KMnO4 a 520nm 6.23ppm*((1mgr/lt)/(1ppm)) = (6.23mgr/lt)*10^-3gr/1mgr=6.23*10^-3 ((6.23*10^-3gr)/(158gr/mol))/(1lt)=3.94*10^-5M A= -Log (T) A=-Log (0.195)=0.71 A=EbC 0.71=E*(1cm)(3.94*10^-5 mol/lt) E=18020.30457 Mol*Lt/cm

B. Una disolucin patrn de Ni 4.00*10^-5 M se coloca en una cubeta de longitud de paso ptico de 1cm. La absorbancia a 592nm es 0.446

B.1) Calcule la Absortividad

A=EbC 0.1446=E(1cm)(5.00*10^-5 M) E=8920 Mol*Lt/cm B.2) Si un problema de Ni tiene una absorbancia de 0.125 a la misma .Cual es la concentracin de la muestra de Ni A=EbC 0.125=(8920Mol*Lt/Cm)*(1cm)*C C=1.401*10^-5 Mol*Lt/cm

C. Se desea analizar vitamina B1 en un preparado comercial de 2.000 g por el mtodo del tiocromo. Se extrae con HCl y fosfatasa y se diluye a 100 mL. Se purifica una alcuota de 15 mL pasndola por una columna cromatogrfica, y por causas inherentes al proceso se diluye a 25 mL. De la anterior solucin, se forman dos porciones de 5 mL, una de ellas se trata con ferricianuro y ambas se aforan a 10 mL para examen fluorimtrico. Una solucin de referencia de 0.2 ppm de tiamina se somete al mismo tratamiento que la muestra problema, con excepcin de que la porcin introducida en la columna conserva su volumen original. Se toman dos alcuotas de 5 mL y una se oxida y ambas se aforan a 10 mL. Se mide la

fluorescencia de ambas muestras dando lugar a intensidades de fluorescencia de 18 y 13 unidades de fluorescencia,

respectivamente. Calcular los ppm de vitamina B1 en la muestra.

Como el tratamiento del patrn y de la muestra problema son idnticos, salvo la dilucin de 15 a 25 mL en la columna cromatogrfica, hacemos referencia a la concentracin de patrn de 0.2 ppm de tiamina, que da una fluorescencia de 13 unidades. Por tanto, 18 unidades de fluorescencia se corresponden a una concentracin de tiamina de:

18*0.2/13 = 0.2769 ppm

Esta concentracin debe ser corregida por la exclusiva dilucin cromatogrfica que sufre la muestra problema. Luego la concentracin de tiamina en los 100 mL es:

0.2769 * 25/15 = 0.4615 ppm (mg/L)

Para obtener los mg de tiamina en la muestra, se multiplica la concentracin por el volumen expresado en litros:

mg de tiamina en 100 mL o 2 gramos de muestra = 0.4615 (mg/L) * 0.1 L = 0.04615 mg.

Para obtener los ppm (mg analito / Kg muestra) de tiamina en la muestra:

ppm de tiamina en la muestra = 0.04615 (mg) / 2x10-3 Kg = 23.1 ppm (mg/Kg o g/g)

ANEXOS

TABLA N 1

TABLA N 2

TABLA N 3

BIBLIOGRAFA:

Skoog, D. A.; West, D. M.; Holler, F. J. y Crouch, S. R.: Qumica Analtica. Mc Graw Hill, 7ed,Mxico, 2004. pp 572, 573, 648, 651; G-4.

Harris, C. D. Anlisis Qumico Cuantitativo. Grupo Iberoamericana, Mxico, 1992

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Skoog, D. A.; West, D. M.; Holler, F. J. y Crouch, S. R.: Qumica Analtica. Glosario. Mc Graw Hill,7ed, Mxico, 2004. G-4