Universidad Central de Venezuela. Facultad de Medicina Escuela de Medicina Luis Razetti Ctedra de Patologa General y Fisiopatologa.

PRINCIPIOS BASICOS DE GENETICA

Material Aprobado por la Catedra de Patologa General y Fisiopatologa. Preparadora Ad Honorem Brbara Ochoa

PRINCIPIOS BSICOS DE GENTICA CONSIDERACIONES GENERALES La mayora de las mutaciones generan una patologa, por ejemplo, el cncer de mama. La primera secuencia completa del genoma humano se obtuvo en 1999. Uno de los cromosomas ms pequeos es el cromosoma 21. La primera secuencia completa que se obtuvo fue la del cromosoma 22 en 1999. En el 2001 se publican los resultados del proyecto Genoma Humano, con un estimado de 20.00025.000 genes que codifican para 120.000 protenas. La mayora de los seres humanos tienen enfermedades que son causadas por mutaciones a nivel genmico; sin embargo la mayora de las enfermedades crnicas como: diabetes tipo 2, HTA, Alzheimer, son consideradas como enfermedades polignicas y multifactoriales que surgen de la interaccin entre factores genticos y factores ambientales. El estudio de los polimorfismos ha dado a conocer que muchas de las patologas se originan por la presencia de polimorfismos. Alrededor de los 25 aos de edad, 1 de cada 20 personas va a manifestar un tipo de irregularidad gentica; no todas las enfermedades, aunque sean hereditarias se van a manifestar a la edad infantil. Por ejemplo, la Enfermedad de Huntington es una enfermedad progresiva, la distrofia muscular congnita es una enfermedad progresiva; muchas veces sntomas aparecen en la juventud. Hay tipos de Alzheimer que son familiares y hereditarios, que son causados por mutaciones en el gen de la Apoprotena E y en el gen de unas protenas llamadas presenilinas. Sin embargo, la persona manifiesta los sntomas a una edad avanzada. A los 35 aos, 1/3 de la poblacin, pueden manifestar una enfermedad crnica de origen hereditario. La terapia gnica y el uso de clulas madres ha sido empleada para el tratamiento de algunas patologas y enfermedades hereditarias (como el dficit de adenosindeaminasa (ADA) en pacientes con Inmunodeficiencia Combinada Severa) con resultados satisfactorios, pero an siguen las investigaciones para su aplicacin a gran escala.

POR QU ESTUDIAR GENTICA EN MEDICINA?

Se ha encontrado una contribucin gentica importante en la etiologa de enfermedades relevantes. Existen ms de 1000 sitios cromosomales en los cuales una o varias mutaciones especficas producen enfermedades definidas. Por lo menos 1 de cada 12 embarazos es genticamente anormal a las 8 semanas.

Inclusive las enfermedades infecciosas podran tener un componente gentico.

La informacin gentica ha sido utilizada en varios aspectos:

Entender

mejor enfermedades.

la

patologa

de

las

Desarrollo de nuevas tcnicas diagnsticas.

Programas de despistaje gentico detectar individuos de alto riesgo. Consejo gentico. Terapia gnica. para

DIVISIN DE LAS ENFERMEDADES GENTICAS 1.- Afecciones de un solo gen (enfermedades monognicas), es decir, puede haber una mutacin en un solo gen, una protena deficiente y hay una patologa. Ejem: anemia falciforme, Fibrosis qustica, Sndrome de Marfan. 2.- Defectos cromosmicos: Generalmente tenemos nuestra cadena de ADN, conformada por 4 bases nitrogenadas: adenina, timina, citosina y guanina. Cuando se produce una mutacin en un solo gen, puede existir un cambio de bases (ejem.: citosina por timina) y producirse un cambio de la secuencia de ADN. Pero cuando hay un cambio de tipo cromosmico, nos referimos a cambios en un segmento muy grande de ADN. Recuerden que el genoma humano comprende 3x109 pares de bases, de las cuales slo el 5% codifica para protenas. ORGANIZACIN DEL ADN EN EL NCLEO CELULAR El ADN se empaqueta en asociacin con protenas denominadas histonas en unidades llamadas nucleosomas que son los que conforman los cromosomas. Cada segmento de un cromosoma tiene una gran cantidad de ADN, por lo tanto cuando se produce una enfermedad causada por un rearreglo cromosmico, se produce a consecuencia de una alteracin en un segmento. Ejem: Trisoma 21 (causante del Sndrome de Down).

EMPAQUETAMIENTO DEL DNA

3.- Enfermedades multifactoriales. Son las ms comunes. Ejem: HTA, diabetes, cardiopatas. Estas patologas son el resultado de una interaccin entre factores genticos y factores ambientales. CONCEPTOS UTILIZADOS EN GENTICA GEN. Es una secuencia especfica de ADN que codifica una secuencia de ARN de transferencia o de ADN ribosomal para la sntesis de una protena. DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGA MOLECULAR

NUEVO ENFOQUE DEL DOGMA CENTRAL EN BIOLOGA MOLECULAR

FENOTIPO. Son el conjunto de caractersticas visibles u observables en un individuo, lo cual es el resultado de una contribucin del material gentico que tiene cada individuo y del componente ambiental. (Interaccin gen-ambiente) GENOTIPO Es la constitucin gentica de un individuo.

ESTRUCTURA DEL ADN Estructura tridimensional del ADN derivada de los trabajos de Watson y Crick (1953).

DNA MACRO MOLCULA DE INFORMACIN.

Estructura del ADN: est formado por una desoxirribosa, bases nitrogenadas: adenina con timina, citosina con guanina. Este ADN se empaqueta en cromosomas, y los cromosomas se empaquetan en todos los ncleos de todas las clulas. Tambin existe el ADN mitocondrial. El ADN mitocondrial es un ADN de doble cadena, la cadena externa se llama cadena pesada, y la cadena interna se denomina cadena ligera, el cual codifica para 38 genes y para ARN de transferencia y ARN ribosomal. La herencia de ADN mitocondrial es diferente a la herencia del ADN nuclear. El ADN mitocondrial proviene de la lnea materna. Existe una hiptesis de la evolucin del ADN que se llama la Proyecto de Eva mitocondrial: el ADN mitocondrial se hereda de la madre. En el espermatozoide, la mitocondrias estn en la cola; cuando el espermatozoide fecunda al vulo pierde la cola, y con ello pierde la mayor parte de las mitocondrias, adems la cantidad de mitocondrias de un espermatozoide es menor a las del vulo, por lo tanto siempre predomina lo que es el ADN mitocondrial, materno. Cuando se hace una fecundacin in vitro, el

espermatozoide no est perdiendo su cola de manera natural; esta es una de las maneras de explicar la herencia de ADN mitocondrial por va paterna, es una excepcin.

Human cheek cell viewed in brightfield (left) and labeled with Hoechst to stain the nuclear DNA blue and DiOC6 (Molecular Probes # D-273) to label cytoplasmic membranes green (right).

(Omega Optical Multi-dye Filter Set # XF50

El ADN mitocondrial codifica para las protenas que participan en la fosforilacin oxidativa; cuando se produce una enfermedad por una mutacin del ADN mitocondrial se afectan tejidos con metabolismo aerbico (msculo, cerebro, rin). Cuando hay una mutacin en el ADN mitocondrial interno, se da lo que se llama: heteroplasia o heteroplastia. Generalmente cuando se produce una mutacin en el genoma nuclear, se pierde un segmento del ADN y el fenotipo de los individuos afectados va a ser el mismo. Cuando se pierde un segmento de ADN mitocondrial, se va a producir una mutacin de 500pb (tengo entendido que son 5000pb) y se produce el sndrome de Kearns-Sayre y puede existir variaciones fenotpicas individuales.

MUTACIONES El 90% de las mutaciones se producen por errores de la replicacin. Mecanismos involucrados en la aparicin de mutaciones: 1.- Falla de replicacin. 2.- Falla en la actividad de las polimerasas (reparacin). 3.- Falla en otros mecanismos de reparacin.

MODIFICACIONES POSTRANSCRIPCIONALES: 1.- Poliadenilacin. 2.- Capping 3.- Splicing

Ejemplos: 1.- Se transcribe el intrn 1, 2 y 3.

2.- Se transcribe el intrn 1, 2 y 4 pero no el 3.

Por diferentes combinaciones obtenemos familias de protenas. Ejemplo: sntesis de la tropomiosina, la tropomiosina, de acuerdo al tejido donde se encuentre e inclusive dentro del mismo tejido, el msculo esqueltico, hay 2 formas. La tropomiosina del msculo liso se transcribe diferente al msculo esqueltico. Para una misma secuencia de ADN puede existir diferentes formas de una protena.
Alpha-Tropomyosin gene organization (rat) and seven alternative splicing pathways.

Exons (red = constitutive, green = smooth muscle-specific, yellow = striated muscle-specific, and white = variable) are indicated with their encoded amino acids (numbered). Experimentally documented splicing pathways (solid lines) and others (dotted lines) inferred from nuclease protection mapping are shown. The smooth and striated exons encoding amino acids 39-80 are mutually exclusive, and there are alternate 3'-terminal exons as well. UT signifies untranslated regions.

Aproximadamente partes de los genes del genoma humano sufren splicing y desde un principio, cuando se comenzaron los estudios el genoma humano, se crea que estaba formado por 60.000 a 100.000 genes y se crea que haba de 60.000 a 100.000 genes porque se haban estudiado de 80.000 a 100.000 protenas. A la luz de los nuevos estudios genticos, se estima que el genoma humano est formado por 25.000- 30.000 genes que codifican para 120.000 protenas, lo cual demuestra que el mecanismo de splicing es un evento clave para generar diversidad dentro del genoma humano. De igual forma, se conoce que el cdigo gentico es universal, pero hay 64 codones que codifican para 20 aminocidos, es decir que un codn puede codificar para ms de 1 aminocido (el cdigo gentico es degenerado). Adems existen los codones de iniciacin y los codones de terminacin.

MUTACIN. Diferencias entre mutacin y polimorfismo. Una mutacin es todo cambio permanente en las bases del ADN que se pueden transmitir o heredar. Las mutaciones pueden ser de lnea somtica o de lnea germinal. CLULA GERMINAL VULO Y ESPERMATOZOIDE. CLULA SOMTICA CUALQUIER OTRA CLULA. La tasa de mutacin es muy alta, se estima que entre 10-3, 10-5 mutaciones por grupos por gametos por generaciones. Es decir, estamos mutando constantemente, pero en condiciones fisiolgicas esas mutaciones son corregidas.

Polimorfismo: son variaciones en el ADN que se presentan en la poblacin con una frecuencia superior al 1%. Los ms frecuentes son los llamados SNP (Single Nucleotide Polymorphism esnip): polimorfismo de un solo nucletico. Tambin pueden presentarse como consecuencias de inserciones y deleciones dentro de la secuencia de ADN. Los SNPs causan el 90% de todas las variaciones genticas humanas, aparece cada 1300pb en promedio, 2/3 de estos nucletidos simples o polimorfismo de nucletidos simples corresponden a sustitucin de una citosina por una timina. (C>T) Estas variaciones en el ADN pueden aumentar la susceptibilidad a enfermedades y determinar la respuesta a medicamentos. TIPOS DE MUTACIONES 1.- MUTACIN DE PRDIDA DE SENTIDO - Mutacin puntual. Consiste en el cambio de una base por otra (mutacin puntual), lo cual codifica para un aminocido diferente y puede alterar la estructura de la protena. -Mutacin silente. Ocurre un cambio de un nucletido por otro, pero esta variacin no modifica el tipo de aminocido, por lo tanto no altera la estructura de la protena; es silente porque no produce una patologa. Mutacin sin sentido.

Adems de cambiar una base por otra, puede ocurrir un cambio en un codn que es codificante para un aminocido por un codn de terminacin: UAA, UGA y UAG. En este caso, en vez de sintetizarse la protena completa, se sintetiza parte de la protena, y es probable que la protena pierda su funcin.

2.- MUTACIONES QUE CAMBIAN EL MARCO DE LECTURA (Frameshift) Generalmente son por insercin o delecin de una base. Si ocurre una insercin o una prdida de una base se cambia completamente la lectura ya que se van a leer tripletes diferentes.

DELECCIN

INSERCIN

Las mutaciones denominadas de cambio de sentido, en las que se cambia una base por otra, son las ms comunes. En 2007 se describieron ms de 30.000; en segundo lugar se encuentran aquellas que codifican para un codn de terminacin y que generan una protena truncada; el ejemplo clsico de las mutaciones de cambio de sentido es la modificacin del triplete que codifica para el cido glutmico (la sustitucin de la TIMINA por ADENINA) , esto altera las propiedades fisicoqumicas de la molcula de hemoglobina dando lugar a la Anemia Drepanoctica o Falciforme. Codn GAG codifica para cido Glutmico (NORMAL: HbA) Codn GTG codifica para valina (ANORMAL: HbS)

ANEMIA DREPANOCITICA.
ATG GTG CAC CTG ACT CCT GAG GAG AAG TCT GCC GTT ACT ATG GTG CAC CTG ACT CCT GTG GAG AAG TCT GCC GTT ACT

Esta mutacin ocasiona que la hemoglobina A tenga menos afinidad por el oxgeno y que la forma del eritrocito cambia y sea diferente por la presencia de la hemoglobina S (eritrocitos en forma de media luna). En este tipo de anemia los eritrocitos son ms frgiles que los eritrocitos normales, por esto se rompen y duran solo 20 das en circulacin (anemia hemoltica). Debido a los cambios de forma del eritrocito en la microcirculacin se produce obstruccin lo cual origina las crisis vasooclusivas y las crisis dolorosas. . Lo interesante de la anemia drepanoctica, es que se origina de una mutacin que se ha mantenido en el tiempo, es bastante prevalente, unos 400 individuos aproximadamente. Esta prevalencia se debe a que la existencia de la hemoglobina S permite crear una resistencia a la malaria, por lo tanto la anemia drepanoctica generalmente se ve ms en el continente africano. Los heterocigotos con una mutacin, que no presentan el cuadro clnico de la anemia drepanoctica, resisten la re-infeccin por Plasmodium falciparum.

DAOS EN EL ADN Daos estructurales: si tenemos exceso de oxigeno reactivo en el ncleo de la clula, puede actuar en el ADN oxidndolo, sobre todo en aquellas regiones con un alto contenido de guanina. Si se pone 8-hidroxideoxiguanosina, que se usa como marcador de especies reactivas de oxgeno en clulas transferibles, daa no solo los exgenos sino los endgenos. Tambin las radiaciones beta, toxinas, mutgenos (quimioterapia), virus, etc, pueden causar daos a nivel del ADN, estos daos son anormalidades tpicas que pueden afectar: enlaces, una bases o varias bases. En el genoma existen protenas que pueden reconocer y reparar los errores; hay patologas que ocurren porque fallan las protenas que se encargan de reconocer y reparar estos errores. Lo mecanismos por los cuales funcionan estas protenas son (2): 1)Excisin de bases: el segmento es reconocido por una endonucleasa. 2)Sntesis de translesin: ocurre sobre lesiones en regiones ricas en timidina que no fueron reparadas, son lesiones pasadas; esta sntesis depende de una polimerasa (la 4 por ejemplo), la polimerasa repara los dmeros de timina. 3)Excisin de nucletidos.

Dao preoteico por alteraciones de los mecanismos de reparacin del ADN:

ENFERMEDADES RELACIONADAS

AT BS CS FA TTD WS XP

Ataxia-telangiectasia Sindrome de Bloom Sindrome de Cockayne Anemia de Fanconi Tricotiodistrofia Sindrome de Werner Xeroderma Pigmentoso

1)Xeroderma pigmentoso: autosmica recesiva; en esta patologa hay una deficiencia para reparar los daos causados por radiaciones ultravioletas, la frecuencia es de 1/250mil y los sntomas son: Quemaduras severas. Pecas a edades tempranas. Piel seca, bien escamosa. Queratosis. Ojos altamente sensibles a la luz. Hay un crecimiento ilimitado del vello corporal. Alta predisposicin a neoplasias (melanomas).

La patologa se da en tres fases, lo cual depende directamente del nivel de exposicin del individuo a la luz solar: 1ra fase: en un principio hay un aumento de pigmentacin. 2da fase: si el individuo no se protege de los rayos sol hay una atrofia de la piel, hay ms telangectasias e hiperpigmentacion de la piel. 3ra fase: es de malignidad donde el individuo va a desarrollar un melanoma. XPA en cromosomas 9. XPB en cromosoma 2 XPC en cromosoma 3.

Tipos de mutaciones en el xeroderma pigmentoso:

Las mutaciones en estas patologas, son porque hay un dao ultravioleta y el que va a reconocer este dimero es el XPC y si hay una mutacin del XPC no hay reconocimiento de ese dmero de

timidina y por lo tanto la mutacin no se repara. Cada vez que ocurre eso se van acumulando mutaciones en segmentos diferentes, aunque las mutaciones ms frecuentes son en la piel, porque es donde est expuesto a radiaciones ultravioletas; si por ejemplo: la mutacin es en XPG lo que esta alterado es la escisin de nucletidos, sin ella no hay excisin de la cadena daada, por lo tanto tambin se van a acumular las mutaciones.

XERODERMA PIGMENTOSO
Resulta de defectos celulares en los mecanismos de reparacin de dao causado por la luz ultravioleta.

Sensibilidad excesiva a luz solar. Piel seca y escamosa. Degeneracin neurolgica progresiva. Enanismo

Desarrollo sexual inmaduro.

2) Sndrome de Cockayne: envejecimiento prematuro. Herencia Mendeliana: son caractersticas que se transmiten completas y sin cambios y constituyen caracteres dominantes y recesivos (que no se expresan). Son aquellas que son causadas por un gen mutante nico que tiene grandes efectos en el fenotipo y que tienen un patrn de herencia descrita en los experimentos de Mendel; para que una mutacin sea heredada debe ocurrir el cigoto, no puede ser en una clula somtica, tiene que ser en una clula nuclear (en el vulo o en el espermatozoide), por lo tanto se expresa en todo el individuo, en cambio s es en clulas somticas solo se va a expresar en ellas la mutacin.

Se definen las enfermedades Mendelianas como aquellas causadas por un gen mutante nico, que tiene un gran efecto sobre el fenotipo y se heredan siguiendo un patrn simple, similar o idntico al que Mendel describi en sus experimentos.

Ms de 5 mil fenotipos humanos se heredan de esa manera (herencia mendeliana); la mayora son autosmicas dominantes, menos del 10% estn ligados al cromosoma X. CONCEPTOS BSICOS Alelo: cada una de las formas alternativas de un gen. Heterocigoto: cuando los dos alelos son diferentes. Homocigoto: cuando los dos alelos son iguales. Heterocigoto compuesto: ejemplo: la anemia drepanocitica. Tengo el gen A: alelo a y alelo b, dentro de la cadena del a tengo una mutacin y en el b otra mutacin diferente, esto es un heterocigoto compuesto, es dentro del mismo gen. Doble heterocigoto

CONCEPTOS.
GATCAG GATGAG Homocigoto: GATCAG GAACAG

Dos alelos idnticos. Heterocigoto: Dos alelos diferentes. Heterocigoto compuesto: Dos alelos mutantes diferentes en un locus determinado. Doble heterocigoto: Un alelo mutante en dos locus diferentes.

Dominante: enfermedades que se manifiestan en los heterocigotos. Recesivo: se manifiestan solo en individuos homocigotos para el alelo mutado. La construccin de un rbol genealgico es importante porque permite saber si la enfermedad es autosmica, si est ligado a cromosomas sexuales y permite ver si la enfermedad es hereditaria o no. Smbolos utilizados: Circulo= mujer, si esta relleno est manifestando la patologa, si tiene una raya es que la persona falleci. Un tringulo= aborto espontneo.

La caracterstica de los rboles genealgicos autosmicos dominantes es: 1. Principalmente es que afectan indistintamente a mujeres y hombre. 2. Generalmente un padre est enfermo con la patologa porque si no es as no se transmite la enfermedad. 3. Es una herencia de tipo vertical, en todas las generaciones hay un individuo que est afectado. En muy pocas patologas autosmicas dominantes se va a encontrar un individuo homocigoto pues padecen a edades tempranas o en tero. La progenie de esas patologas es 50/50.

I 1

II

III
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

IV 1 2 3 4 5 6 7 8

12

13

14 15

16

17

18

V 1 2 3

A square with the right hand corner blackened ( ) represents an affected male. A circle with a dot in the centre ( ) represents a carrier female. An unblackened square ( ) represents an unaffected male. Symbols with diagonal lines through them represent individuals who are deceased. Double line circles or squares symbolise the family members from whom blood samples have been collected.

Conceptos asociados a enfermedades autosmicas dominantes: 1)Penetrancia: es la posibilidad de que al tener la mutacin se presente el fenotipo asociado a la enfermedad. Ejemplo: Neoplasias endocrinas mltiples que se caracterizan por hiperplasia de la paratiroides, adenomas pancreticos e hipofisarios, y est asociada a mutaciones en el gen NEM1; cuando valora la penetrancia a los 10 aos de edad es de 7%, pero cuando se hace a las 60 aos es del 100%, es decir, la penetrancia tambin depende de la edad. La penetrancia a veces tambin depende de factores ambientales; el cncer de mama est asociado a mutaciones en muchos genes supresores tumorales, entre ellos braca 1 y braca 2, sin embargo si la mujer ha amamantado, ha tenido hijos, etc, eso disminuye la penetrancia de la mutacin.

2)Expresividad variable.

Expresividad variable.
La expresividad se refiere a la naturaleza de la severidad del fenotipo. Es comn en enfermedades autosmicas dominantes que afectan varios rganos. Ej. Sndrome de Marfan.

Gen de la fibrilina que es el componente de las microfibrillas extracelulares.

Sindrome de marfan: se produce por mutaciones en el cromosoma 15, lo ms caracterstico es: 1. Muscular: hper flexibilidad 2. Esqueltica: altos, huesos ms grandes de lo normal 3. Patologa cardiaca o vascular: dilatacin de la aorta. El gen de la fibrilina se asocia a todas las microfibrillas del tejido conectivo, tendones, tejido seo, etc; estos sistemas estn afectados y dan la clnica de la patologa; cuando la protena es anormal se incorpora a la microfibrilla y el tejido conectivo no es estructuralmente normal, es ms laxo, resiste menos la presin y es por eso que vemos la sintomatologa clnica. En el 2003 se descubri que se asocia a factor de crecimiento tumoral beta (TFG-); la fibrilina inhibe la expresin de ese factor; en modelos animales donde se sobreexpresa el factor de crecimiento tumoral hay lesiones valvulares y articas iguales a las del Sndrome de Marfn por lo que en la literatura actual se dice que las lesiones vasculares y articas del sndrome de Marfan estn asociadas con la funcin de la fibrilina ms que con el hecho de que una fibrilina anormal causa un tejido conjuntivo anormal, y eso se debe a la sobreexpresin de ese factor y que hay unas seales de transduccin que afectan el tejido vascular. El Sndrome de Marfn se caracteriza por dos mecanismos : 1. El mecanismo directo en el tejido conectivo. 2. El mecanismo donde hay una sobreexpresin de la va de sealizacin del factor de necrosis tumoral beta. Se dice que la especificidad es variable en el sndrome de Marfan porque las alteraciones del gen de fibrilina 1 depender de donde este la alteracin; si la mutacin destruye uno de los puentes de disulfuro en el gen se dice que resulta en la secrecin de fibrilina por lo que causa un efecto clnico diferente, ahora si hay una mutacin sin sentido que son las que hacen que se pierda un codn prematuro por lo que la protena se trunca y nada ms se sintetiza la mitad de la fibrilina

total porque como es una protena autosmica dominante la mutacin solo est en un alelo, el otro alelo es normal, por eso es solo la mitad de la fibrilina. Un 50% de la protena da un espectro de la patologa. Si hay ausencia de la fibrilina esto quiere decir que es dominante para el alelo, la repercusin artica, anomalas esquelticas y la repercusin cardaca es tan grande que lo ms probable es que no llegue a trmino el feto. Hay otras variantes como que la mutacin ocurri en la clula somtica, es decir, despus de que se est replicando, posterior a la unin del vulo con el espermatozoide, por lo cual habr tejido con fibrilina normal y tejido con fibrilina mutada, por lo cual depende del tejido donde est la mutacin se expresara la patologa.

Caractersticas de las mutaciones autosmicas recesivas: 1. Herencia de tipo horizontal, en una sola generacin est el individuo enfermo. 2. Afecta indistintamente hombres y mujeres. 3. Alguno de los padres no va a estar afectado, pero tiene que ser portador. 4. El individuo debe tener los dos alelos mutados para presentar la enfermedad.

Ejemplos: Padre y madre portadores: el 25% de posibilidad de tener un individuo enfermo, 50% de tener hijos sanos, 25% de que sea totalmente normal y no se manifieste la patologa. Madre portadora y padre no portador: 100% sanos, 50% portador y 50% sin la mutacin. Individuo enfermo y un individuo sano: 100% sanos y 100% portador. Individuo enfermo y un individuo portador: 50% con la enfermedad, 50% portadores sanos.

Ejemplos de patologas autosmica recesiva: Fibrosis qustica. Galactosemia. Anemia drepanoctica. Fenilcetonuria.

En una enfermedadad autosmica recesiva, si dos personas heterocigotos se unen la proporcin de tener un hijo ser: 25% de que sea enfermo, 50% de que haya portador y 25% de que la persona sea genticamente normal Fibrosis qustica Patologa descrita en los aos de 1700, por un cirujano alemn. Adagio sobre la enfermedad: A los nios cuando se les besaba en la frente y saban salados, se crea que estos estaban embrujados y que iban a morir pronto, lo cual haca referencia a personas con fibrosis qustica Es una enfermedad que es bastante comn, 1 de cada 25 personas es portadora, afectando a 2.500 Se defina anteriormente que una enfermedad descendiente de europeos, es decir de raza blanca La caracterstica principal de la Fibrosis qustica es una excesiva cantidad de Na y Cl en sudor, adems de alteraciones pulmonares, pancreticas, intestinales e infertilidad. El defecto gentico de la Fibrosis qustica est en el gen CFTR, (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator), que est en el cromosoma 7, 7q31.2 (cromosoma 7, brazo largo, segmento 31.2). Hay muchsimas mutaciones, de hecho hay ms de 1400 mutaciones diferentes en este gen, gen relativamente grande. Todas estas mutaciones conducen a patologa; sin embargo la mutacin ms frecuente es la mutacin deltaF508: significa que hay una delecin de fenilalanina en la posicin 508 del gen. (Delta quiere decir que hay delecin). G542x: mutacin sin sentido en la posicin 542 cambia la glicina por un codn de terminacin.

El CFTR es un canal de cloro que adems conduce hipotiocianato y pirocianato. Cuando hay una mutacin lo que sucede es que la protena no se pliega correctamente, es decir, la protena pareciera estructuralmente normal, pero le falta un aminocido, y esto afecta la estructura terciaria y cuaternaria de la protena. Recuerden de bioqumica que la protena tiene que ir desde el ribosoma hasta la membrana. Y por qu es una protena de membrana? Porque es un transportador. Bueno, en la medicin de esa protena transmembrana, la protena se destrua, entonces la protena nunca llega a membrana, nunca progresa el canal. Otro tipo de mutaciones consisten en que se sintetiza un codn de terminacin, lo cual produce protenas que no son funcionales (las protenas son de poca longitud). Esta protena utiliza ATP. Si hay una mutacin en el dominio de enlace de ATP, el canal no abre ni cierra. Esto es otro defecto estructural que puede tener el canal de cloro. Si hay una mutacin en el dominio que forma el canal, tambin hay una alteracin de apertura y cierre del canal.

FIBROSIS QUISTICA.
Afecta 1/2500 nios

descendientes europeos Excesiva cantidad de Na+ y Cl- en el sudor. Afeccin pulmonar, pancreatica, intestinal, etc.

Dnde se expresa el canal? En clulas epiteliales del pulmn, en la piel, gondas y pncreas. En la piel, el canal cuando no funciona, hace que se acumule cloro en la superficie de la piel y como el in cloro es negativo, hay una diferencia de potencial de membrana, haciendo que salga Na+. Acumulndose Na+ y Cl-, formando sal, razn por la cual los nios presentan un sabor salado. El test para el diagnstico de la fibrosis qustica consiste en una la prueba de medicin de los electrolitos en sudor. En el epitelio pulmonar, el canal funciona al revs, la acumulacin de Cl- va a ser en la clula epitelial. Uno tiene Cl- dentro de la clula epitelial, el Na y agua pasa dentro de la clula, el moco de los bronquios es espeso y deshidratado causando una insuficiencia respiratoria que se va desarrollando durante aos en los pacientes con fibrosis qustica. El Cl- es transportado por el canal igual que el hipotiocianato, que es muy importante como agente bactericida. En el epitelio pulmonar el hipotiocianato no est en la luz sino que queda colapsado en las clulas igual que el Cl-, por lo cual aumenta la susceptibilidad a infecciones en pacientes con fibrosis qustica.

Principales manifestaciones clnicas: Dolor profuso (por acumulacin de Cl-). Bronquiectasia (por acumulacin de moco, obstruccin). Insuficiencia respiratoria. Infecciones respiratorias severas y repetidas.

Lo que ocurre en el pncreas es muy parecido a lo que ocurre en el epitelio respiratorio. Funciones del pncreas: 1. Produccin de enzimas digestivas para la absorcin intestinal. 2. Absorcin de nutrientes. Estos pacientes presentan sindromes de malaabsorcin intestinal, cuadros de pancreatitis aguda y deficiencia pancretica endocrina (disminucin de la secrecin de insulina). Deficiencia de calcio y fsforo: En los pacientes con fibrosis qustica suele haber deficiencia del crecimiento del tejido seo. Deficiencia de vitamina A: Hay problemas visuales, con aparicin frecuente de la ceguera nocturna.

PATOLOGAS LIGADAS AL CROMOSOMA X Se afectan principalmente los pacientes masculinos. Las mujeres generalmente son portadoras.

Al realizar un cruce entre una mujer portadora con un hombre sano las posibilidades son: 50% de tener una nia portadora, 50% que el varn sea afectado con la patologa y .50% de tener fallas Cuando una mujer sana se une con un hombre que tiene la patologa: todos los nios sern sanos y las hembras sern portadoras. Es decir, en este cruce no hay nios enfermos. Habamos dicho que las muchachas generalmente no padecan de enfermedades ligadas al cromosoma x, debido a la inactivacin selectiva del cromosoma X. 1) La inactivacin del cromosoma X necesita de un gen denominado XIC 2) Una regin pseudoautosmica: contiene una zona denominada SHOX (regula el crecimiento y el desarrollo).

Cundo se puede expresar una enfermedad ligada al cromosoma X en la mujer? a)Cuando hay un error en la inactivacin b)Cuando sea homocigoto o mujer con Sx Turner Ejemplos de enfermedades Ligadas al cromosoma X: Cretinismo. Hemofilia. Daltonismo. Trisoma del X (por ejemplo trisoma del par 21-sindrome de Down). Sndrome del X frgil (conocido como sndrome de Martin-Bell), es un trastorno hereditario que ocasiona retraso mental, siendo la segunda causa gentica del mismo, superada por el sndrome de Down.

Este trastorno se produce por una mutacin de 3 letras del cdigo del ADN, en un defecto del gen FMR1. La protena FMRP, producto del gen FMR1, falta en los pacientes afectados. sta se expresa en el cerebro, especficamente en las neuronas, en los testculos, en la placenta y en los linfocitos. Caractersticas del Sndrome de X frgil: Deficiencia intelectual. Cara alargada. Orejas alargadas y prominentes. Testculos aumentados de volumen. Debilidad muscular.

Mecanismo molecular: El gen tiene una deficiente inactivacin de transcripcin Normalmente en el gen hay un triplete CGG que se repite. Hay individuos que tienen entre 50 y 230 repeticiones, esto se conoce como premutacin, porque generalmente estos individuos van a dar origen a mutacin concreta que es ms de 230 repeticiones. La metilacin del promotor mCG: produce una inhibicin de la transcripcin lo cual a su vez conlleva a la sobreexpresin del triplete CGG. En los individuos con este triplete, la protena no se transcribe y se producen las manifestaciones clinicas.

EJERCICIO PRCTICO: Con 20 pacientes a travs de biologa molecular quiero saber cul posee la mutacin en el Sindrome del X frgil: 1. Toma de sangre. 2. Extraigo el ADN. 3. PCR con iniciadores especficos para el gen en estudio 4. Gel de agarosa, para ver la migracin. Notando que los ms pesados que son los que poseen la mutacin estar arriba del gel y el triplete menos pesado estar abajo(dependiendo de las cargas) 5. Estudios de cariotipo y citogentica: Cuando el gen se metila, el cromosoma se retrae. Cuando se hace citogentica se ve la retraccin, otra forma de diagnstico. Enfermedades ligadas al cromosoma Y Solamente ocurre en el cromosoma afectado. Las mujeres son normales. No existe estado portador, porque los hombres son XY.

El Y mutado del pap, si tiene un hijo varn de dnde va a tener el hijo el cromosoma Y? Del pap, o sea que si el pap expresa la patologa, el hijo tambin, de lo contrario no. Ejemplos de enfermedades Ligadas al cromosoma Y: Azoospermia: es la disminucin en la cantidad de espermatozoides, por la mutacin del cromosoma Y. Existen mutaciones en el cromosoma SRY (determinante del sexo masculino, responsable del crecimiento de las gnadas). Si no hay SRY no hay gnadas. Es ms, si hay una completa ausencia del gen SRY puede haber un sndrome donde hay una mujer, pues fenotpicamente es mujer, pero cuando se hace el seguimiento es XY (Sndrome de Choit)

LIGADO AL CROMOSOMA Y