INSTITUTO TECNOLGICO DE LA PAZ

MICROBIOLOGIA, PRACTICA 14, 2013. AISLAMIENTO DE HONGO DEL SUELO BALLESTEROS SNCHEZ CORINA ALEJANDRA LABORATORIO DE BIOQUIMICA

Resumen.
Los hongos del suelo juegan un papel importante en los procesos del suelo de descomposicin que mineralizan y reciclan nutrientes de plantas. En la prctica realizamos el secado de la muestra, luego la preparacin de las diluciones, despus sembrar muestras de las diluciones en placas con diferentes medios se incubo y se procedi a la observacin de dichas placas para la identificacin del crecimiento obtenido macro y microscpicamente. principalmente para la mesofauna que habita en el suelo. En los ecosistemas agrcolas, los patgenos de plantas actan en el suelo y en la rizosfera, causando una notable reduccin en las cosechas y afectando su calidad. Segn Mayea y colaboradores en 1991; Giri y colaboradores en el 2005, los generos mas comunes en los suelos, tanto en genero como especie son los siguientes: Acrostalagmus, Aspergillus, Acremonium, Botrytis, Cephalosporium, Gliocladium, Monilia, Penicillium, Scopulariopsis, Spicaria, Trichoderma, Trichothecium, Verticillium, Alternaria, Cladosporium, Pillularia, Cylindrocarpon, Fusarium, Absidia,

Introduccin.
El suelo es un hbitat o ecosistema, y no un sustrato; esta caracterstica complica las definiciones y la metodologa, porque el suelo representa una mezcla compleja de fracciones orgnicas e inorgnicas con agua y organismos vivos. Los hongos del suelo juegan un papel importante en los proceso de descomposicin, mineralizacin y reciclado de nutrientes de las plantas. En el suelo, los hongos interactan con una compleja comunidad microbiana. Los hongos son una parte importante de la cadena alimenticia en el suelo,

Cunninghamella, Mortierella, Mucor, Rhizopus, Zygorynchus, Pythium, Chaetomium y Rhizoctonia. Agar de papa dextrosa: es un medio utilizado para la estimulacin de la formacin de conidias, en la preparacin de inculos de hongos miceliales. Se utiliza con frecuencia en microcultivos para observar las caractersticas morfolgicas. Agar nutritivo o caldo nutritivo, ya que es un medio relativamente simple, rico en fuentes de carbono y/o protenas (peptona), capaz de permitir el desarrollo de muchas bacterias hetertrofas y en corto tiempo. Agar Extracto de Malta: medio para la deteccin, aislamiento y enumeracin de levaduras y mohos. Waksman (1922) sugiri el uso de medios acidificados para el recuento de mohos del suelo y a partir de esta fecha los microbilogos de los alimentos adoptaron esta tcnica para el recuento de mohos y levaduras en alimentos. Sin embargo, pronto se hizo patente que el uso de medios con pH bajo, incluso por debajo de 4.

Microscopio Papel especial para ptica Pipetas de 1 ml esteriles Placas de petri esteriles portaobjetos varilla de dispersin tape transparante

Reactivos: tubos con 9 ml de agua destilada esteril. Alcohol al 70% Agar de papa y dextrosa (PDA) Medio Waksman Agar nutritivo a 45C Aceite de inmersin Azul de algodn- lactofenol

*Muestra: tierra.

Metodologa.
Secamos la muestra de tierra a 80C por 15 minutos, despus hicimos diluciones hasta la 10-5,de las diluciones 10-3, 10-4 y 10-5 se sembr 0.1 ml en medio de PDA y Waksman por el mtodo de dispersin con varilla. Luego de la dilucin 10-1 agregamos 1 ml a una caja de petri y agar nutritivo, homogenizamos. Todo se guardo en una caja de plstico, despus de las 72 horas de incubacin a temperatura ambiente checar las siembras y observar.

Material, Mtodos:
Materiales:

Reactivos

Balanza granataria Esptula Estufa de secado a 80 C Gradilla Mecheros de Fisher

Resultados.

Muestra 10-1 tierra. En agar nutritivo presento levaduras color claro, incontable.

Las muestras 10-4 y 10-5 tierra. En agar PDA no presento crecimiento.

Muestra 10-4 tierra. En agar waksman presento levaduras color claro que se pudieron contar con un total de 5.

Muestra 10-3 tierra. Se observa morfologa microscpica de levadura color claro definida.

Muestra 10-4 tierra. Se observo morfologa microscpica de levadura color claro. Muestras 10-3 tierra. En agar PDA observamos 1 levadura color amarilloso. Rhodotorul.

Muestra 10-3 tierra. waksman se observo color claro.

En agar levaduras

Discusin y Conclusin.
Es esta prctica la mayora de las cajas con medios de cultivo nos crecieron levaduras, al observarlas al microscopio pudimos identificarla como Rhodotorula, ya que presento las caractersticas ms parecidas a esa.

Para concluir la prctica nos sirvi para identificar el tipo de levaduras que obtuve del tipo de suelo que utilice en esta prctica, y observar tanto macro como microscpicamente a las levaduras.

2. Qu organismos crecieron sobre la muestra de suelo cubierta con agar? Levaduras de tipo Rhodotorula. 3. Porqu la acidificacin del medio de cultivo de Waksman? Waksman (1922) sugiri el uso de medios acidificados para el recuento de mohos del suelo y a partir de esta fecha los microbilogos de los alimentos adoptaron esta tcnica para el recuento de mohos y levaduras en alimentos. Sin embargo, pronto se hizo patente que el uso de medios con pH bajo, incluso por debajo de 4. Acidificacin de los suelos por los cultivos, depende de la forma como las races toman el nitrgeno. La acidificacin tambin es atribuible a la respiracin de los microorganismos y de las races; los procesos metablicos generan CO2 y cidos orgnicos solubles acidificantes, los cuales se comportan como cidos libres en el suelo. Por el efecto de la hidrlisis del CO2, a la presin que se alcanza en el suelo, el pH puede llegar a ser menor o cercano a 5.0.

Bibliografa.
http://www.unsa.edu.ar/biblio/rep ositorio/malim2007/4%20levadura s.pdf http://www.slideshare.net/flacosh abiles/levaduras-emergentes http://www.monografias.com/trab ajos15/micrococcaceae/micrococca ceae.shtml http://www.unalmed.edu.co/~esg eocien/documentos/Quimica%20d e%20los%20procesos%20pedoge neticos.pdf

Cuestionario.
1. Qu efecto tiene el calor en la germinacin de esporas de hongos? Efectos directos: el calor inhibe la germinacin o el crecimiento del tubo germinativo y produce daos sobre las hifas fngicas en crecimiento. - Efectos indirectos (induccin en el husped de resistencia a la infeccin): El calor puede contribuir a mantener o alargar la actividad antifngica de compuestos constituyentes de la piel de los ctricos (citral, quitinasas).