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Determinacion del contenido de hierro en alimentos y/o frmacos

empleando un mtodo validado.


Fredy Alexander David Cd.: 20112150011; Miguel ngel Vela Suazo Cd.:
20112150132; Magda Roco Agudelo Cifuentes Cd.: 20112150126.
Anlisis Instrumental, Proyecto Curricular Licenciatura en Qumica, Universidad Distrital
Francisco Jos de Caldas.

RESUMEN: El proceso de cuantificacin de cualquier sustancia a travs de mtodos


instrumentales implica la estandarizacin y validacin previa del mtodo a emplear,
determinando algunos parmetros para que de tal manera se asegure la calidad de los
resultados en cuanto a precisin y exactitud, teniendo en cuenta no solo la
experimentacin sino tambin la respuesta que da el instrumento de medida y el proceso
de preparacin de la muestra y desarrollo de color; para de esta manera evaluar el efecto
de variables qumicas (estabilidad de la luz, concentracin de ligante) sobre la formacin
de un complejo para la cuantificacin espectrofotomtrica de hierro en muestras de
alimentos y/o frmacos.

La validacin de un mtodo es aquel


proceso por el cual se establece
mediante estudios de laboratorio que su
capacidad satisface los requisitos para
las
aplicaciones
deseadas;
esta
capacidad se expresa en trminos de
parmetros de anlisis, donde se tiene
en cuenta la linealidad, precisin
(repetibilidad
y
reproducibilidad),
exactitud, especificidad, sensibilidad,
entre otros, en dependencia del objetivo
que se persiga.
En la actualidad reviste gran importancia
la validacin de mtodos, procesos, etc.,
que permitan mayor confiabilidad en los
resultados, fundamentalmente cuando se
trabaja con la formacin de un complejo,
el cual posee variables qumicas
(estabilidad de la luz, concentracin de
ligante) que lo afectan y; donde es
necesario obtener datos y resultados
experimentales que demuestren la

aptitud para el uso que se destina; es por


ello, que nos trazamos como objetivo la
validacin
del
mtodo
espectrofotomtrico
que
permite
cuantificar el contenido de hierro en
muestras de alimentos y/o frmacos.
METODOLOGIA
Al comenzar la prctica el docente dio
una explicacin de la manipulacin del
espectrofotmetro
para
que
los
resultados de la prctica fueran tomados
y analizados correctamente. En primer
lugar se debi reconocer cul celda se
usara como celda de muestra y cual
para celda de referencia para todos los
anlisis realizados durante la prctica. Se
midi la transmitancia de HClO4 (1*10-3
M) en la celda de referencia, en la celda
de muestra la transmitancia de
K2Cr2O7/HClO4 (1*10-3 M) y nuevamente
en la celda de referencia la transmitancia

de K2Cr2O7/HClO4 (1*10-3 M) todas a la


misma longitud de onda de 350 nm.
Espectro de absorcin Cu+2. Se midi
el espectro de absorcin de Cu+2 en agua
midiendo la transmitancia de 500 a 800
nm cada 20nm por duplicado y luego se
midi su transmitancia esta vez cerca del
mximo de 800 a 840 nm cada 5nm,
medidas tomadas por duplicado.
Espectro de absorcin complejo
amoniacal. Se repiti el procedimiento
anterior
usando esta vez complejo
amoniacal Cu(NO3)2 de 400 a 700 nm
cada 20nm y cerca al mximo de 600 a
640 nm cada 5nm, medidas tomadas por
duplicado.
Curva calibracin Cu+2. Al realizar la
curva de calibracin se midi la
transmitancia de la solucin de Cu+2 en
agua a diferentes concentraciones,
teniendo como concentracin de las
solucin stock 0.0496 M tomando como
alcuotas 2ml, 4ml, 6ml, 8ml y 10ml todas
llevadas a 25ml en un baln aforado.

la solucin del complejo amoniacal


Cu(NO3)2 a diferentes concentraciones
tomando
alcuotas de 0,5ml, 1,0ml,
1,5ml, 2,0ml, y 2,5ml llevadas a 25 ml en
baln a forado.
Cuantificacin de Cu+2 en una
muestra salina. Se tomaron las
transmitancias a 810nm de una muestra
salina preparada previamente, por
triplicado. De igual forma se midi la
transmitancia de una solucin preparada
con una alcuota de 5ml de la muestra
salina con 2,5 ml de NH3 llevados a 25ml
en baln aforado a 610nm.
Cuantificacin de Cu+2 en una
moneda. Esta prueba se realiz igual
que el proceso anterior usando esta vez
una muestra de moneda con la digestin
previamente realizada sin NH3 a
transmitancia a para esta muestra 810nm
y la transmitancia de una alcuota de 2ml
de la muestra de la moneda ms 2,5 ml
de NH3 llevado a 25 ml en baln aforado
a 610nm la toma de transmitancias se
realizaron por triplicado.

Curva calibracin complejo amoniacal


Cu(NO3)2. Se midi las transmitancias de

RESULTADOS Y DISCUSIN

Espectro de absorcin del ion Cu2+

0.35
0.3

Absornancia

0.25
0.2
espectro de
absrocion

0.15
0.1

0.05
0
450

550

650

750

850

950

(nm)
Grfica 1. Espectro de absorcin del ion Cu2+

(nm)
500
520
540
560
580
600
620
640
660
680
700
720
740
760
780
800
820

%T1

T1

99
99,9
98,5
98
96
92
89
84,9
79,9
72,7
66
60,1
55,1
51,9
48,1
47
46,8

0,99
0,999
0,985
0,98
0,96
0,92
0,89
0,849
0,799
0,727
0,66
0,601
0,551
0,519
0,481
0,47
0,468

absorbancia
1
0,004364805
0,000434512
0,00656377
0,008773924
0,017728767
0,036212173
0,050609993
0,07109231
0,097453221
0,138465589
0,180456064
0,221125528
0,258848401
0,284832642
0,317854924
0,327902142
0,329754147

%T2

T2

99
98,9
98,2
97,5
95,2
92,1
88,9
84,5
79
73,1
66,2
60,1
55,3
51
48,5
47
46,2

0,99
0,989
0,982
0,975
0,952
0,921
0,889
0,845
0,79
0,731
0,662
0,601
0,553
0,51
0,485
0,47
0,462

absorbancia correccin
Correccin
2
absorbancia 1 Absorbancia 2
0,004364805 0,004081093
0,004081093
0,004803708 0,000406269
0,004491467
0,007888512 0,006137124
0,007375759
0,010995384 0,008203619
0,010280684
0,021363052 0,016576397
0,019974453
0,03574037 0,033858381
0,033417246
0,051098239 0,047320344
0,047776853
0,073143291
0,06647131
0,068388977
0,102372909 0,091118761
0,09571867
0,136082623 0,129465326
0,127237253
0,179142011
0,16872642
0,16749778
0,221125528 0,206752369
0,206752369
0,257274869 0,242023255
0,240552002
0,292429824
0,26631852
0,273421885
0,314258261 0,297194354
0,293831474
0,327902142 0,306588503
0,306588503
0,335358024 0,308320127
0,313559753

promedio
absorbancia
0,004081093
0,002448868
0,006756442
0,009242152
0,018275425
0,033637814
0,047548599
0,067430143
0,093418715
0,128351289
0,1681121
0,206752369
0,241287629
0,269870203
0,295512914
0,306588503
0,31093994

840
47 0,47 0,327902142
47 0,47 0,327902142 0,306588503
0,306588503
860
48 0,48 0,318758763
48 0,48 0,318758763 0,298039443
0,298039443
880 49,8 0,498 0,302770657 49,5 0,495 0,305394801 0,283090565
0,285544139
900
51 0,51 0,292429824
51 0,51 0,292429824 0,273421885
0,273421885
Tabla 1. Datos del espectro de absorcin del ion Cu2+

0,306588503
0,298039443
0,284317352
0,273421885

Espectro de absorcin del complejo


amoniacal de cobre (II)
0.6

Absorcion

0.5
0.4
espestro
complejo
amoniacal

0.3
0.2
0.1
0
350

450

550

650

750

(nm)

Grfica 2. Espectro de absorcin del complejo amoniacal de cobre (II)

(nm)
400
420
440
460
480
500
520
540
560
580
600

%T1

T1

Absorbancia

99
98,9
97
92,1
85
73
60,1
47,5
39,9
33,9
32,1

0,99
0,989
0,97
0,921
0,85
0,73
0,601
0,475
0,399
0,339
0,321

0,004364805
0,004803708
0,013228266
0,03574037
0,070581074
0,13667714
0,221125528
0,32330639
0,399027104
0,469800302
0,493494968

Absorbancia %T2
corregida
0,004081093
98
0,004491467 98,5
0,012368428 96,5
0,033417246
93
0,065993304 83,9
0,127793126
71
0,206752369
59
0,302291475 49,1
0,373090343 39,1
0,439263282 33,9
0,461417795 32,1

T2

Absorbancia

0,98
0,985
0,965
0,93
0,839
0,71
0,59
0,491
0,391
0,339
0,321

0,008773924
0,00656377
0,015472687
0,031517051
0,076238039
0,148741651
0,229147988
0,308918508
0,407823243
0,469800302
0,493494968

Absorbancia
corregida
0,008203619
0,006137124
0,014466962
0,029468443
0,071282567
0,139073444
0,214253369
0,288838805
0,381314732
0,439263282
0,461417795

promedio A
0,008488772
0,006350447
0,014969824
0,030492747
0,073760303
0,143907548
0,221700679
0,298878656
0,394568987
0,454531792
0,477456381

620 31,9 0,319 0,496209317 0,463955711


32 0,32 0,494850022 0,46268477 0,478767396
640
33 0,33 0,48148606 0,450189466
33 0,33 0,48148606 0,450189466 0,465837763
660 35,1 0,351 0,454692884 0,425137846 35,2 0,352 0,453457337 0,42398261 0,438719973
680
39 0,39 0,408935393 0,382354592
39 0,39 0,408935393 0,382354592 0,395644993
700 43,1 0,431 0,36552273 0,341763752
43 0,43 0,366531544 0,342706994 0,354619269
Tabla 2. Datos del espectro de absorcin del complejo amoniacal de cobre (II)
Tambin analizamos que la diferencia
entre los mximos de absorbancia (entre
[Cu(NH3)4]2+ y Cu(NO3)2) y esto se debe
a la estructura molecular de cada
compuesto, ya que las molculas del
complejo amoniacal poseen mayores
fuerzas intermoleculares que las de la
sal.

Al observar y analizar estos dos


espectros de emisin, encontramos que
las dos curvas tienen pendientes muy
inclinadas; en el complejo amoniacal de
cobre (II) al aproximarse al mximo de
absorcin, la diferencia entre valores de
absorbancia es menor comparada con
los valores de absorbancia del ion Cu2+
cuando se acercan al mximo y el
espectro de absorcin del ion Cu2+ se
presenta en un mayor intervalo en la
longitud de onda que en el complejo
amoniacal de cobre (II).

Absorbancia

Dilucin
2 mL-25
mL
0.6 4 mL -25
mL
6 mL -25
0.5 mL
8 mL -25
mL
0.4
10 mL25mL

Concentracin

Grafica 3. Curva de calibracin del ion


Cu2+
T
A
Absorbancia
corregida

%T

78,9
0.789del
0.102922
Curva 0,003968
de calibracion
ion Cu2+

0.096232

0.007936

61,9

0.619

0.208309

0.194768

0.011904

48

0,48

0.318758

0.298038

0.015872

37

0,37

0.431798

0.403731

0.01984

31,9

0,319

0.496209

0.463955
curva de
calibracion sin
2+
Tabla 3. Curva de calibracin para el ion Cu amoniaco

0.3

Linear (curva de
calibracion sin
amoniaco )

0.2

0.1

0
0

0.005

0.01
0.015
Concentracion (M)

0.02

0.025

curva de calibracion del complejo


amoniacal de cobre (II)
0.4
0.35

Absorbancia

0.3
curva de
calibracion de co
con amoniaco

0.25
0.2
0.15

Linear (curva de
calibracion de co
con amoniaco )

0.1
0.05
0
0

0.0005

0.001

0.0015

Concentracion (M)

Grafica 4. Curva de calibracin del


complejo amoniacal (II).
Dilucin

Concentracin

%T

Absorbancia

Absorbancia
corregida
0.133393

0,5 mL0.000992 72 0,72


0.142667
25mL
1,0 mL0.001984 61 0,61
0.214670
0.200716
25mL
2,0 mL0.003968 42 0,42
0.376750
0.352261
25mL
Tabla 4. Curva de Calibracin del complejo amoniacal (II).

Como puede notarse en las grficas,


la curva de calibracin de Cu+2 se puede

analizar correctamente puesto que los


valores
que
corresponden
a
la
transmitancia a la longitud de onda
medidos, dan un resultado eficaz para la
realizacin de la curva, mientras que los
resultados obtenidos para la curva de
calibracin del complejo amoniacal dan
una grfica no permite un clculo preciso
para el anlisis de la misma, este
resultado pudo haber ocurrir debido a un
error instrumental, humano o un error a
causa de la mala preparacin de
diluciones correspondientes a cada
medida de las transmitancias, usar las
celdas de manera correcta, y acomodar
el espectrofotmetro a la longitud de
onda correctas para cada anlisis.
La diferencia entre curvas de
calibracin, puede darse en primer lugar

por las molculas que componen cada


muestra, ya sea por la cantidad que se
encuentren en la muestra o por las
fuerzas inter e intramolescular que
actan entre ellas, la forma en que incide
la luz y hace reflejar cada espectro,
diferente para cada muestra, diferente
para cada concentracin.

BIBLIOGRAFA
Skoog, A. D., Holler, F.J., Nieman, T.A.
2001. Principios de anlisis instrumental.
MCGRAWHILL/ INTERAMERICANA DE
ESPAA, S. A. U. 122 a 196 pg.