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PRCTICA 6 Hidrlisis de una protena y ensayos para protenas y aminocidos

Introduccin. Las protenas son polmeros biolgicos, se encuentran en todos los organismos vivos y todas se encuentran constituidas de muchas unidades de aminocidos unidos entre s en una cadena larga. Con propsitos de clasificacin, las cadenas con menos de 50 aminocidos se llaman pptidos, mientras que el trmino protena se utiliza para cadenas ms grandes.1 Un aminocido es un cido carboxlico que tiene un grupo amonio en el carbono Los conocimientos actuales de las protenas han sido obtenidos en gran parte fragmentndolas en trozos conocidos. El mtodo de ruptura es o una hidrlisis en medio cido o alcalino diluido, o una hidrolisis mediante enzimas. Los productos de descomposicin son casi por completo aminocidos y stos se consideran como los bloques con los que se forma la molcula de la protena3 Resumen. Se elaboraron de manera grupal cuatro soluciones, solucin de grenetina hidrolizada sin neutralizar (A), solucin de grenetina hidrolizada a pH neutro (B), solucin de grenetina sin hidrolizar (C), solucin de albumina (D); con el objetivo de realizar pruebas de identificacin. Para la primera experiencia de identificacin, se realiz una reaccin xantoproteca, la cual indica la presencia de aminocidos que poseen un grupo aromtico. En la segunda experiencia se realiz una reaccin de precipiotacin, donde se reconoce la presencia de aminocidos azufrados por la formacin de precipitados de sulfuro de plomo color gris o negro. En la tercera experiencia se realiz la reaccin de biuret, la cual es una reaccin

especfica para enlaces peptdicos ponindose en evidencia al tornar a un tono prpura debido a la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones cobre y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forman parte de los enlaces peptdicos, dando como negativa en donde hubiera aminocidos. En la cuarta experiencia se realiz una reaccin con ninhidrina, donde sta reacciona con los aminocidos que tengan el grupo amino libre La quinta experiencia se realiz con una reaccin de cido nitroso, donde igualmente que en la anterior reacciona con aminocidos que posean el grupo amino libre solamente que analizando distintas soluciones. En la sexta experiencia se estudi la accin reguladora de aminocidos, donde se utiliz la solucin B, realizando dos pruebas con un indicador distinto, una con fenolftalena y otra con solucin indicadora rojo congo. Y la ltima experiencia se realiz una cromatografa en placa fina donde se utilizaron dos aminocidos patrn y la solucin B colocando la placa en una cmara de cromatografa conteniendo una mezcla de acetato de etilo-cido actico 6:4, revelando con solucin de ninhidrina.

Discusin de resultados. Reaccin Xantoproteica: Observaciones: Primero estaba de un color amarillo, despus de ajustar el pH torno a un tono transparente. Primero estaba de un color amarillo, despus de ajustar a pH bsico torno a color naranja.

Sustrato: Solucin A.

La prueba dio positiva en el tubo donde estaba contenida la solucin C, que contiene grenetina sin hidrolizar, est no ha sido desnaturalizada, por lo que sigue siendo una protena como tal, ponindose de manifiesto por haber enlaces peptdicos; lo cual no hay en las dems soluciones ya que se desnaturalizaron al ser hidrolizadas y separarse en alfa aminocidos. Reaccin con Ninhidrina: Observaciones Tubo patrn negativo.

Sustrato Agua destilada Solucin B Solucin C Solucin D Sol. Aminocido Patrn.

Solucin D.

Debido a que la solucin A Reaccin con cido Nitroso: Observaciones: Tubo patrn-no hay burbujeo. Dio positiva, hay presencia de burbujeo Hay un poco de burbujeo. Ocurre una reaccin, pero no ocurre burbujeo.

Reaccin de Precipitacin: Observaciones:

Sustrato: Solucin A. Solucin D. D

Sustrato: Agua destilada. Solucin A. Solucin C. Solucin D.

Reaccin de Biuret: Observaciones: ste es el tubo patrn negativo (coloracin azul). De un tono transparente torn a color azul claro. De un tono transparente torn a morado. De un tono transparente torn a azul claro.

Sustrato: Agua destilada. Solucin A. Solucin C. Solucin D.

El tubo que contena a la solucin A (grenetina hidrolizada sin neutralizar) dio positivo debido a que la grenetina esta desnaturalizada en sus alfa aminocidos con grupo amino primario libres. La solucin C que contiene grenetina sin hidrolizar dio positivo ya que hay HCl en el tubo de ensayo y provoca la hidrolisis, dando como manifiesto burbujeo por la presencia de aminocidos con grupo amino primario libre.
Solucin

Accin Reguladora de aminocidos.


Indicador Color mL. Color

inicial Agua destilada Solucin B Rojo Congo Rojo Congo

HCl 0.1N

final

mL. NaOH 0.1N Agua destilada Solucin B Fenolftalena 0.1% Fenolftalena 0.1%

Cromatografa en placa fina:

Conclusiones. Las pruebas de identificacin se realizaron por medio de reacciones con los aminocidos, para observar si haba o no presencia de aminocidos.

Bibliografa. 1.-McMurry J., Qumica Orgnica, Ed. Cengage Learning, 8va. Edicin, Mxico, 2012, pp. 824-825. 2.-Yurkanis P., Qumica Orgnica, Ed. Pearson Prentice Hall, 5ta. Edicin, Mxico, 2008, pp.1017. 2.-Macy R., Qumica Orgnica Simplificada, Ed. Revert, Espaa, 1992, pp. 397.