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Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ac (BioMerieux)

1.

HTLV I/II ELISA v4.0 (MP Diagnostics)

Agregar 100 uL de diluyente de espcimen a todos los pocillos, 1. Agregar 50 uL de conjugado diluido a todos los pocillos, inclusive al inclusive al control negativo. control negativo. Preparacin para 8 pocillos (dilucin 1:200). 2. Agregar 50 uL de control negativo al pocillo N 1. 5 uL Conjugado cc + 995 uL de Diluyente de Conjugado. 3. Agregar 50 uL de muestra (suero/plasma) del pocillo N 2 al N 8. 2. Agregar 50 uL de control negativo al pocillo N 1. 3. Agregar 50 uL de muestra (suero/plasma) del pocillo N 2 al N 8.
4. 5.

INCUBAR 60 5 MINUTOS A 37 C.

Lavar con Buffer diluido. Preparacin (dilucin 1:25). 5 mL Buffer cc + 120 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 240 mL de H2O destilada. 6. Agregar a todos los pocillos 100 uL de revelador. (TMB/H2O2) Preparacin para cada pocillo (dilucin 1:2). 50 uL TMB + 50 uL H2O2.
7. 8.

4. 5.

INCUBAR 60 5 MINUTOS A 37 C.

Lavar con Buffer diluido. Preparacin (dilucin 1:20). 5 mL Buffer cc + 95 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 190 mL de H2O destilada. 6. Agregar a todos los pocillos 100 uL de revelador listo para usar. (TMB/H2O2)
7.

INCUBAR 30 5 MINUTOS A t AMBIENTE y OSCURIDAD.

INCUBAR 30 5 MINUTOS A 37 C y OSCURIDAD.

Sacar y agregar a cada pocillo una gota de H2SO4 y leer dentro de los 8. Sacar y agregar a cada pocillo una gota de H2SO4 y leer dentro de los 10 minutos en espectrofotmetro a 450 nm y 620 nm. 15 minutos en espectrofotmetro a 450 nm y 620 nm.

Rosa de Bengala (Vircell)


1. 2. 3. 4. 5.

RPR-Nosticon II (BioMerieux)
1. 2. 3. 4. 5.

Depositar en cada crculo de la tarjeta provista 50 uL de muestra (suero nicamente) y 50 uL de control positivo. Agregar luego 25 uL de antgeno de Rosa de Bengala. Homogeneizar la muestra/control y el antgeno. Agitar durante 4 minutos en un agitador orbital tipo Kline. Luego leer e interpretar los resultados en forma visual.

Depositar en cada crculo de la tarjeta provista 50 uL de muestra (suero/plasma) y 50 uL de control positivo. Extender la muestra/controles por toda la superficie del crculo. Agregar luego 25 uL de antgeno RPR-Carbn. Agitar durante 8 minutos en un agitador orbital tipo Kline. Luego leer e interpretar los resultados en forma visual.

Monolisa HBsAg Ultra (BioRad)


1. 2. 3.

Monolisa HCV Ag/Ac Ultra (BioRad)

Agregar 100 uL de control negativo al pocillo N 1. 1. Agregar 100 uL de conjugado N 1, previamente homogeneizado por inversin, (R6: LISTO PARA USAR) a todos los pocillos, inclusive al Agregar 100 uL de muestra (suero/plasma) del pocillo N 2 al N 8. control positivo. Agregar 50 uL de conjugado previamente preparado y homogeneizado a todos los pocillos, inclusive al control negativo. 2. Agregar 50 uL de control positivo al pocillo N 1. (R6: Diluyente de Conjugado + R7: Conjugado Liofilizado) 3. Agregar 50 uL de muestra (suero/plasma) del pocillo N 2 al N 8.
4.

INCUBAR 90 5 MINUTOS A 37 C.
5.

4.

INCUBAR 90 5 MINUTOS A 37 C.

Lavar con Buffer diluido. Preparacin (dilucin 1:20). 5 mL Buffer cc + 95 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 190 mL de H2O destilada. 6. Agregar a todos los pocillos 100 uL de revelador. (TMB/H2O2) Preparacin para 8 pocillos (dilucin 1:11). 1.000 uL de R8: H2O2 + 100 uL de R9: TMB.
5. 7. 8.

Lavar con Buffer diluido. Preparacin (dilucin 1:20). 5 mL Buffer cc + 95 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 190 mL de H2O destilada. 6. Agregar a todos los pocillos 100 uL de conjugado N 2, previamente homogeneizado por inversin. (R7: LISTO PARA USAR)
7.

INCUBAR 30 5 MINUTOS A t AMBIENTE y OSCURIDAD.

INCUBAR 30 5 MINUTOS A 37 C.

Sacar y agregar a cada pocillo una gota de H2SO4 y leer dentro de los 8. Lavar con Buffer diluido. 9. Agregar a todos los pocillos 80 uL de revelador. (TMB/H2O2) 30 minutos en espectrofotmetro a 450 nm y 620 nm. Preparacin para 8 pocillos (dilucin 1:11). 1.000 uL de R8: H2O2 + 100 uL de R9: TMB.
10. INCUBAR 30 5 MINUTOS A t AMBIENTE y OSCURIDAD. 11. Sacar y agregar a cada pocillo una gota de H2SO4 y leer dentro de los

30 minutos en espectrofotmetro a 450 nm y 620 nm.

TPHA 100 (BioMerieux)


1.

Chagatest HAI Screening A-V (Wiener)

Preparar en un tubo de hemlisis una dilucin de 1:40 de la muestra 1. Preparar en un tubo de hemlisis una dilucin de 1:40 de la muestra a investigar (suero nicamente) y de los controles (R3: positivo y R4: a investigar (suero nicamente) y de los controles positivo y negativo con el diluyente de suero HAI A-V. Repetir este negativo) con el diluyente de suero R2 provisto con el equipo para tal procedimiento para todas las muestras a investigar. Preparacin del fin. Repetir este procedimiento para todas las muestras a investigar. Preparacin de la dilucin de la muestra: diluyente de suero HAI A-V: 10 uL de muestra + 390 uL de diluyente R2. 100 uL Solucin Proteica cc + 2.500 uL de Buffer HAI A-V. 2. Agregar 50 uL de las muestras diluidas y de los controles R3 y R4 en Preparacin de la dilucin de la muestra: pocillos distintos de la microplaca. 10 uL de muestra + 390 uL de diluyente de suero HAI A-V. 3. Agregar luego 50 uL de la suspensin de hemates/antgeno R1 2. Agregar 50 uL de las muestras diluidas y de los controles positivo y previamente homogeneizado a los pocillos a investigar. Dilucin final negativo en pocillos distintos de la microplaca. 1/80. 3. Agregar luego 25 uL de suspensin de hemates/antgeno HAI A-V previamente homogeneizado a los pocillos a investigar. 4. DEJAR EN REPOSO POR 60 5 MINUTOS A t AMBIENTE.
5.

LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA POCILLO.

4. 5.

DEJAR EN REPOSO POR 60 5 MINUTOS A t AMBIENTE.


LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA POCILLO.

Rosa de Bengala (SpinReact)


1. 2. 3. 4. 5.

RPR-Carbn (SpinReact)
1. 2. 3. 4. 5.

Depositar en cada crculo de la tarjeta provista 50 uL de muestra (suero nicamente) y una gota de control positivo. Agregar luego 25 uL de antgeno de Rosa de Bengala. Homogeneizar la muestra/control y el antgeno. Agitar durante 4 minutos en un agitador orbital tipo Kline. Luego leer e interpretar los resultados en forma visual.

Depositar en cada crculo de la tarjeta provista 50 uL de muestra (suero/plasma) y una gota de control positivo. Agregar luego 25 uL de antgeno de RPR-Carbn. Homogeneizar la muestra/control y el antgeno. Agitar durante 8 minutos en un agitador orbital tipo Kline. Luego leer e interpretar los resultados en forma visual.

HCV Ac Screening v4.0 (Dia.Pro)


1. 2.

SERODIA-Chagas (Fujirebio)

Agregar 200 uL de control negativo al pocillo N 1. 1. TCNICA N 1: Agregar 75 uL de diluyente de espcimen al pocillo a investigar considerado como N 1 y 25 uL al considerado como N 2 Agregar 200 uL de diluyente de espcimen del pocillo N 2 al N 8. y 25 uL al considerado como N 3. (DILSPE: verde) 3. Agregar 10 uL de muestra (suero/plasma) del pocillo N 2 al N 8. 2. TCNICA N 2: Preparar en un tubo de hemlisis una dilucin de 1:4 4. Agregar 50 uL de diluyente de ensayo a todos los pocillos, inclusive de la muestra a investigar (suero/plasma) con el diluyente de espcimen. Repetir este procedimiento para todas las muestras a al control negativo. (DILAS: incoloro) investigar. Preparacin de la dilucin de la muestra: 5. 25 uL de muestra + 75 uL de diluyente de espcimen. 3. Si se procede como lo indica la tcnica N 1 se agrega luego 25 uL de 6. Lavar con Buffer diluido. Preparacin (dilucin 1:20). muestra (suero/plasma) nicamente al pocillo asignado como N 1. 5 mL Buffer cc + 95 mL de H2O destilada. Si se procede como lo indica la tcnica N 2 se agrega a los pocillos 10 mL Buffer cc + 190 mL de H2O destilada. asignados como N 1 y N 2 25 uL de diluyente de espcimen. 7. Agregar a todos los pocillos 100 uL de conjugado. (LISTO PARA USAR) 4. Luego se transfiere 25 uL de las muestras diluidas previamente 8. preparada del tubo del pocillo N 1 al pocillo N 2 y 25 uL del pocillo N 2 al pocillo N 3. Desechar 25 uL de dilucin de la muestra del 9. Lavar con Buffer diluido. pocillo N 2/N 3 (dependiendo de la tcnica utilizada). 10. Agregar a todos los pocillos 100 uL de revelador listo para usar. 5. Agregar al pocillo asignado como N 1/N 2 (dependiendo de la (TMB/H2O2) tcnica utilizada) 25 uL de partculas de gelatina no sensibilizadas 11. INCUBAR 15 5 MINUTOS A t AMBIENTE y OSCURIDAD. (partculas de control) previamente reconstituida y homogeneizada. 12. Sacar y agregar a cada pocillo una gota de H2SO4 y leer dentro de los 6. Agregar al pocillo asignado como N 2/N 3 (dependiendo de la 20 minutos en espectrofotmetro a 450 nm y 620 nm. tcnica utilizada) 25 uL de partculas de gelatina sensibilizadas previamente reconstituida y homogeneizada. Dilucin final 1/32.

INCUBAR 45 5 MINUTOS A 37 C.

INCUBAR 45 5 MINUTOS A 37 C.

VIKIA HBsAg (BioMerieux)

1.

Agregar 75 uL de muestra (suero/plasma) en el pocillo del cassette.


2.

7. 8.

DEJAR EN REPOSO POR 120 5 MINUTOS A t AMBIENTE.


LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA POCILLO.

DEJAR EN REPOSO 15 MINUTOS A t AMBIENTE.

3.

LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA CASSETTE.

Hepanostika HBsAg Ultra (BioMerieux)


1. 2. 3.

SD HIV 1/2 3.0 (Standard Diagnostics)


1. 2.

Agregar 100 uL de control negativo al pocillo N 1. Agregar 50 uL de diluyente de espcimen del pocillo N 2 al N 8. Agregar 100 uL de muestra (suero/plasma) del pocillo N 2 al N 8.
4.

Agregar 10 uL de muestra (suero/plasma) en el pocillo del cassette. Agregar luego 4 gotas (120 uL aproximadamente) de diluyente de espcimen dentro del pocillo.
3.

INCUBAR 60 5 MINUTOS A 37 C. INCUBAR 60 5 MINUTOS A 37 C.

DEJAR EN REPOSO DE 5 a 20 MINUTOS A t AMBIENTE.

5.

Agregar, sin lavar, 50 uL de conjugado a todos los pocillos. (LISTO PARA USAR)
6.

4.

LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA CASSETTE.

SD Syphilis 3.0 (Standard Diagnostics)


1. 2.

Lavar con Buffer diluido. Preparacin (dilucin 1:25). 5 mL Buffer cc + 120 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 240 mL de H2O destilada. 8. Agregar a todos los pocillos 100 uL de revelador. (TMB/H2O2) Preparacin para cada pocillo (dilucin 1:2). 50 uL TMB + 50 uL H2O2.
7. 9.

Agregar 10 uL de muestra (suero/plasma) en el pocillo del cassette. Agregar luego 4 gotas (120 uL aproximadamente) de diluyente de espcimen dentro del pocillo.
3.

DEJAR EN REPOSO DE 5 a 20 MINUTOS A t AMBIENTE.

4.

LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA CASSETTE.

SD Syphilis Fast 3.0 (Standard Diagnostics)


1. 2.

Agregar 10 uL de muestra (suero/plasma) en un tubo de hemlisis. Agregar luego 4 gotas (120 uL aproximadamente) de diluyente de 10. Sacar y agregar a cada pocillo una gota de H2SO4 y leer dentro de los espcimen dentro del tubo y homogeneizar. 15 minutos en espectrofotmetro a 450 nm y 620 nm. 3. Introducir la tira en el tubo con las flechas hacia abajo.

INCUBAR 30 5 MINUTOS A t AMBIENTE y OSCURIDAD.

WL Check Chagas (Wiener)


1. 2.

4.

DEJAR EN REPOSO DE 5 a 20 MINUTOS A t AMBIENTE.

Agregar 40 uL de muestra (suero/plasma) en el pocillo del cassette. 5. LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA TIRA. Agregar luego 3 gotas (100 uL aproximadamente) de diluyente de espcimen dentro del pocillo.

3. 4.

DEJAR EN REPOSO DE 25 a 35 MINUTOS A t AMBIENTE.

LUEGO LEER E INTERPRETAR EN FORMA VISUAL CADA CASSETTE.

Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ac (BioMerieux)

Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ac (BioMerieux)

Valor del control negativo: A 450 nm debe ser 0.250. Lmite de decisin o Cut-Off: Valor de CN + 0.100.
Hepanostika HBsAg Ultra (BioMerieux)

Preparacin de Buffer de lavado (dilucin 1:25). 5 mL Buffer cc + 120 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 240 mL de H2O destilada.
Hepanostika HBsAg Ultra (BioMerieux)

Valor del control negativo: A 450 nm debe ser 0.100. Lmite de decisin o Cut-Off: Valor de CN + 0.040.
HTLV I/II ELISA v4.0 (MP Diagnostics)

Valor del control negativo: A 450 nm debe ser 0.100. Lmite de decisin o Cut-Off: Valor de CN + 0.250.
Monolisa HBsAg Ultra (BioRad)

Preparacin de Buffer de lavado (dilucin 1:25). 5 mL Buffer cc + 120 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 240 mL de H2O destilada.
HTLV I/II ELISA v4.0 (MP Diagnostics)

Valor del control negativo: A 450 nm debe ser 0.080. Lmite de decisin o Cut-Off: Valor de CN + 0.050.
HCV Ac Screening v4.0 (Dia.Pro)

Preparacin de Buffer de lavado (dilucin 1:20). 5 mL Buffer cc + 95 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 190 mL de H2O destilada.
Monolisa HBsAg Ultra y HCV Ag/Ac (BioRad)

Valor del control negativo: A 450 nm debe ser 0.050. Lmite de decisin o Cut-Off: Valor de CN + 0.350.
Monolisa HCV Ag/Ac Ultra (BioRad)

Preparacin de Buffer de lavado (dilucin 1:20). 5 mL Buffer cc + 95 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 190 mL de H2O destilada.
HCV Ac Screening v4.0 (Dia.Pro)

Valor del control positivo: A 450 nm debe ser 0.800. Lmite de decisin o Cut-Off: Valor de CP/4.

Preparacin de Buffer de lavado (dilucin 1:20). 5 mL Buffer cc + 95 mL de H2O destilada. 10 mL Buffer cc + 190 mL de H2O destilada.

ESTABILIDAD DEL BUFFER DE LAVADO UNA VEZ DILUIDO Hepanostika HBsAg Ultra y Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ac (BioMerieux)

La solucin de lavado diluida es estable por 15 das de 2 C a 8 C.


Chagatek ELISA Recombinante y Chagatek ELISA (BioMerieux)

La solucin de lavado diluida es estable por 15 das de 2 C a 8 C.


Monolisa HBsAg Ultra y Monolisa HCV Ag/Ac Ultra (BioRad)

La solucin de lavado diluida es estable por 15 das de 2 C a 8 C.


Chagas Ac Screening v3.0 y HCV Ac Screening v4.0 (Dia.Pro)

La solucin de lavado diluida es estable por 7 das de 2 C a 8 C.


HTLV I/II ELISA v4.0 (MP Diagnostics)

La solucin de lavado diluida es estable por 15 das de 2 C a 8 C.


Chagatest HAI Screening A-V (Wiener)

El diluyente de suero HAI es estable por 5 das de 2 C a 8 C.