Está en la página 1de 6

Efectos de la descarga de peso miembro posterior y el envejecimiento en el musculo semimembranoso de rata y la misiona

Zhong Sheng , Dawn A. Lowe, y Ladora V. Thompson.Efectos de la descarga de peso miembro posterior y el envejecimiento en semimembranoso ratamuscular y la miosina . J Appl Physiol 101 : 873-880 , 2006 . Publicado por primera vez 11 de mayo 2006 , doi : 10.1152/japplphysiol.00526.2005.-hemos puesto a prueba la hiptesis de que la menor fuerza especfica (fuerza / de la seccin transversal rea) generada por las fibras de tipo II de ratas miembro posterior - no ponderadas como resultado de los cambios estructurales en la miosina ( es decir , un cambio en la relacin de puentes cruzados de miosina en los dbiles y fuertes de unin estado durante contraccin ) . Adems , se determin si estos cambios fueron dependiente de la edad . Las fibras del msculo semimembranoso de ratas adultas permeabilizadas y de edad joven , algunos de los cuales fueron ponderados hindlimb durante 3 semanas , se estudiaron por generacin de Ca2 y la fuerza? activado - velocidad de acortamiento sin carga mxima . Las fibras tambin se giran etiquetando especficamente a la miosina Cys707 para evaluar la distribucin estructural de las miosinas durante la contraccin isomtrica mxima usando espectroscopa de resonancia paramagntica electrnica . La isoforma de miosina de cadena pesada (MHC ) su expresin y la relacin de MHC a la actina se evaluaron en cada fibra .Las fibras de las ratas no ponderados generan 34 % menos fuerza especfica que las fibras de las ratas que soportan peso ( P ? 0,001 ) , independientemente de la edad.Anlisis de resonancia paramagntica electrnica mostraron que la fraccin de miosina dirige en el estado estructural de la unin fuerte durante en la contraccin fue 11 % menor en las fibras de las ratas no ponderados ( P ? 0,019) , independiente de la edad . Ms fibras de ratas no ponderados coexpresada en MHC II B - IIX en comparacin con las fibras de ratas que soportan peso ( P ?0,049) . la Descarga de peso inducida por una ralentizacin de la velocidad de acortamiento mximo sin carga y un aumento en la proporcin de MHC a la actina en las fibras slo a partir de ratas jvenes . Estos datos indican que las alteraciones en la distribucin estructural de miosina durante la contraccin y una prdida preferencial de actina contribuye a la debilidad muscular en la descarga de peso inducida . Por otra parte ,la edad de la rata tiene una influencia sobre algunos parmetros de los cambios en contractilidad del msculo que son inducidos por descarga de peso . la fuerza especfica , la suspensin posterior , la cadena pesada de la miosina ; espectroscopa electrnica de resonancia paramagntica Funcin del msculo esqueltico DISMINUYE siguientes perodos de descarga, denervacin, e inmovilizacin (5, 11, 23, 36). Al investigar los mecanismos subyacentes asociados con las prdidas inducidas por descarga de la contractilidad del msculo, a menudo se utiliza el modelo de roedor miembro posterior-no ponderado (HU) (1, 32, 38). HU es asociada con la disminucin de la masa y la fuerza (36) del msculo. La atrofia muscular contribuye a la prdida de resistencia, pero no puede ser la nica explicacin, ya que los cambios en la fuerza son proporcionalmente ms grande que los de rea de seccin transversal del msculo (36). Las Fibras musculares individuales de roedores no ponderados tambin demuestran una disminucin significativa en el rea de la seccin transversal y la capacidad de fuerza generadora en comparacin con las fibras de soporte de peso en roedores (1, 24, 33, 38, 39). La fuerza especfica de fibras permeabilizadas describe la relacin entre la capacidad de generacin de fuerza de las protenas contrctiles y tamao de las fibras. Varios estudios han demostrado que las fibras de miembros posteriores de los roedores no ponderados producen menos fuerza especficas que las fibras de sus homlogos de soporte de peso (1, 24, 33, 38, 39). Por lo tanto otros mecanismos fisiolgicos, tales como cambios intrnsecos de las fibras musculares , pueden estar contribuyendo a los cambios perjudiciales en la funcin muscular esqueltica con la descarga de peso. Debido a las fibras permeabilizadas no tienen membranas intactas, su generacin fuerza refleja la interaccin de la miosina y actina, sin contar los otros factores de excitacin-contraccin (por ejemplo, el retculo sarcoplsmico liberacin de calcio). Por lo tanto, parece que la reduccin de la capacidad de generacin de fuerzas inducidas por descarga de peso son el resultado de cambios intrnsecos (por ejemplo, la calidad) de las protenas contrctiles, protenas reguladoras, y ni los cambios en la ultra estructura del sarcmero. En dos estudios previos , nuestro laboratorio ha demostrado que cambios en el dominio cataltico de la miosina proporcionan una explicacin molecular para la debilidad muscular con el envejecimiento ( 22 , 23 ) . el electrn en espectroscopa de resonancia paramagntica ( EPR ) se utiliz para determinar los cambios relativos en la distribucin entre los dos estados estructurales de la miosina : unin fuerte (fuerza generadora ) y la dbil unin (sin generacin de fuerza ) . Hemos demostrado que la fraccin de cabezas de miosina en el estado estructural fuerte de unin ( de generacin de fuerza ) durante una contraccin isomtrica mxima fue 30 % ms baja en fibras de ratas de edad avanzada , que era comparable a la disminucin relacionada con la edad 27 % en la fuerza especfica ( 22 ) . as es posible que los cambios en la distribucin estructural de las miosinas pueden explicar la debilidad muscular o la reduccin en fuerza especfica asociada con descarga de peso tambin. Por lo tanto , en el presente estudio, hemos utilizado EPR para

investigar en el subyacente mecanismo molecular de la debilidad de los msculos esquelticos asociados con la descarga de peso del msculo semimembranoso de la joven y las ratas viejas . La hiptesis de que la disminucin de la capacidad de generacin de fuerza de fibras a partir de ratas HU era debido a una disminucin de poblacin de cabezas de miosina en el estado estructural fuerte de unin ( de generacin de fuerza ) durante la contraccin muscular en relacin con las fibras de ratas que soportan peso . Se encontr una disminucin significativa en la unin fuerte de miosina con la descarga de peso pero no suficiente para explicar completamente la totalidad de la prdida de fuerza especfica . Riley y compaeros de trabajo ( 28 -31 ) han demostrado que causa una descarga de peso prdida preferencial de protenas de filamentos delgados , por lo que tambin mide el contenido de la actina y la cadena pesada de miosina ( MHC ) en las fibras a determinar si una prdida de una protena contrctil , con relacin a otra , contribuyeron a la prdida de fuerza especfica . Debido a las fibras de tipo II muestran los cambios relacionados con la edad en la contractilidad en mayor medida que las fibras tipo I y el msculo semimembranoso se compone principalmente de fibras de tipo II , en el presente se estudia tambin la hiptesis de que la disminuciones de descarga de peso inducida en la funcin de la miosina y distribucin estructural sera mayor en el grupo de mayor edad ( 3 , 16 bis , 21 , 36 ) . nuestros estudios anteriores sobre los cambios relacionados con la edad en la miosina se realizaron utilizando el Fischer 344 ? Brown Noruega ratas hbrida modelo F1. As, un objetivo secundario del presente estudio fue confirmar los cambios relacionados con la edad en funcin de la miosina y la distribucin estructural de las fibras de los msculos semimembranoso usando el modelo de rata Fischer 344 . El modelo de rata Fischer 344 representa un segundo tipo de modelo animal que es comnmente utilizado para estudiar el envejecimiento en ratas ( 20 )

Direccin para solicitudes de reimpresin y otra correspondencia: LV Thompson, Univ. de Minnesota, 420 Delaware St., SE, Minneapolis, MN 55455 (e-mail: thomp067@umn.edu). Los gastos de publicacin de este artculo fueron sufragados en parte por el pago de cargos por pgina. El artculo debe, por tanto, por la presente marcado "publicidad" de acuerdo con 18 USC Seccin 1734 exclusivamente para indicar este hecho.

MTODOS Animales y protocolo de descarga de peso . Fisher 344 ratas machos , con edades comprendidas entre 8 -12 meses y 24 -25 meses, fueron asignados al azar a un control, un grupo de soporte de peso ( n ? 8 y 7 , respectivamente ) o un grupo de no ponderados (n ? 6 y 4 , respectivamente ) . Un grupo adicional de siete que soportan peso , ratas de 28 meses de edad, tambin fue estudiado . Todas las ratas se obtuvieron de la colonia mantenida por el envejecimiento de Veteranos de Minneapolis Exteriores. La Descarga de peso se llev a cabo utilizando un arns unido a los dos tercios proximales de la cola de la rata ( 1 ) . Despus de 3 semanas de descarga de peso , o de la actividad normal de la jaula para los grupos de control , las ratas se anestesiaron con pentobarbital sdico ( 55 mg / kg ip ) , y en el musculo semimembranoso se diseccionaron y se pesaron. Todos los procedimientos fueron aprobados por el Cuidado de Animales institucional y el empleo y se encontraban en conformidad con las directrices establecidas por la American Physiological Sociedad . la Preparacin de tejidos . Msculos semimembranoso se colocaron en un tampn relajante [ 7 mM de EGTA , 0,016 mM de CaCl2 , 5,6 mM de MgCl2 , 80 mM de KCl , 20 mM de imidazol ( pH 7,0 ) , 14,5 mM de fosfato de creatina , 4,8 mM ATP ] en hielo. Los haces de fibras ? 8 mm de largo y ? 1 mm en dimetro se formaron para los anlisis de una sola fibra contrctiles. Estos manojos estaban vinculados a piezas de tubos capilares y se almacenan en 50 % glicerol 50 % de tampn relajante para un mximo de 5 semanas en el ? 20 C ( 37 ) . Haces de fibras adicionales se permeabilizaron y se almacenaron a ? 20 C en tampn de glicerol fresco que contena DTT 0,1 mM para experimentos de EPR , como se descrito previamente ( 22 ) . Anlisis de una sola fibra. Segmentos de fibra individuales ( ? 2 mm de largo ) a partir de haces de permeabilizadas fueron aislado y estudiado a 25 C, como se describi en detalle previamente ( 37 ) . Segmentos de fibra se montaron en el tampn relajante , las longitudes de sarcmero se establece en 2,4 ? m,el dimetro era medido en tres lugares a lo largo de la longitud de la fibra y , a continuacin, se determin la fuerza isomtrica mxima . Velocidad de acortamiento sin carga mxima ( Vo ) se determin mediante la prueba de amplitud. En resumen, en el pico la fuerza isomtrica , fibras se acortaron rpidamente ( aflojado ) por 10 -20 % de la longitud de la fibra tal que la fuerza se redujo a cero . El tiempo entre cero se midi la fuerza y la fuerza de la reinerbanizacin. Este procedimiento fue hecho cinco a siete veces a diferentes distancias de amplitud . La amplitud de las distancias fueron entonces una regresin contra los tiempos correspondientes de fuerza de reconstruccin, y la pendiente de esa lnea (mm / s ) es reportada Asvo

despus de la normalizacin de la longitud de fibra ( longitud de fibra por segundo) . La correlacin coeficiente del ajuste de lnea recta era ? 0.98 . De cuatro a quince fibras de cada msculo se estudiaron , y sus valores ( la fuerza, la fuerza especfica , Vo ) se promediaron para representar la contractilidad de la fibra para que la rata . Despus de las mediciones de contractilidad , cada fibra se solubiliz en 20 ? L de tampn de muestra [ 24 mM de EDTA , 60 mM de Tris ( pH 6,8 ) , 1 % SDS , 5 % - mercaptoetanol , 15 % de glicerol , 2 mg / ml de bromofenol blue] y almacenados a ? 80 C. Se determin la expresin de la isoforma MHC por electroforesis en gel y tincin de plata ( 21 ) . Para determinar la relacin de MHC a la actina ( MHC / actina ) , ? 1 nl de volumen de fibra se calcul y luego se carg en un gel de segundo ( 3,5 % de acrilamida - apilamiento 12 % acrilamida separacin ) . Geles teidos fueron digitalizadas en un escner plano , y el software de anlisis de imgenes ( Sigma -Scan, Jandel Scientific ) fue utilizado para cuantificar los niveles relativos de MHC ( todas las isoformas ) y actina en cada fibra . Se evaluaron un total de 308 , fibras individuales permeabilizadas por la fuerza, Vo , MHC isoforma expresin y contenido MHC / actina. Espectroscopia EPR . Haces de fibras permeabilizadas fueron disecados an ms y se prepararon para los experimentos de EPR , mediante el etiquetado giro especficamente en la Cys707 ( SH1 ) con 0,5 mM de 4 - ( 2 yodoacetamido ) -2,2,6,6 - tetrametil - 1 - piperidiniloxi marcador de espn ( IASL ; Sigma ; Ref. 25 . ) . En pocas palabras , SH1 es un grupo sulfhidrilo reactivo que se encuentra en el dominio cataltico de la cabeza de la miosina , cerca de la regin " convertidora " que se cree que es para acoplar el sitio activo a los grandes cambios estructurales que generan la fuerza ( 22 ) . IASL es especfico del sitio y es un periodista de los cambios en Estados estructurales dbiles y fuertes dependientes de ATP ( 22 ) . Las fibras IASLlabeled se prepararon para la espectroscopia uniendo 7.0 de sutura a cada extremo del haz y tirando del paquete en un vaso el tubo capilar y colocndolo en una cavidad TE102 ( 4102ST/8838 ; Bruker Instrumentos , Billerica , MA ) perpendicular al campo magntico . uno de los extremos del haz de fibras se une a un transductor de fuerza ( SensoNor Ackers cepa de calibre 801 ; Aksjelskapet , Noruega ) , y el otro extremo fue estabilizado para mantener las fibras isomtrica . El tubo capilar dentro de la cavidad estaba en lnea con tubos y una bomba peristltica , tales que los tampones se hicieron fluir sobre las fibras a una velocidad de 2 ml / min a 22 C. la Fuerza se control durante la recogida espectros de EPR . De campo bajo EPR espectros se recogieron ( 3425 G de pico central, 38 G anchura de barrido , 5,0 G de pico - a - pico de modulacin de amplitud , y 16 mW microondas poder) bajo condiciones de rigor , la relajacin y la contraccin en una E500 EleXsys (Bruker Instruments).los espectros obtenidos durante la contraccin isomtrica mxima se analizaron como un combinacin lineal de los espectros obtenidos durante el rigor y la relajacin, se ha descrito anteriormente ( 22 , 23 , 26 ) . En pocas palabras , para cada paquete , el espectro obtenido durante la contraccin isomtrica mxima ( VCon ) era analizado como una combinacin lineal de los espectros obtenidos durante el rigor y la relajacin con VCon ? xVRig ? ( 1 ? X) VREL , donde VRig ( rigor ) corresponde a todos los jefes de estado estructural fuerte de unin ( x ? 1 ) , y VREL (relajacin ) corresponde a todos los jefes de los dbiles vinculante estado estructural ( x ? 0 ) , tal como se muestra anteriormente y en la figura . 5 ( 22 , 23 , 26 ) . Por lo tanto para el espectro de contraccin , x se resolvi en cada una de las 1024 posiciones de campo para determinar la fraccin de cabezas de miosina en el estado estructural fuerte de unin , con x ? ( VCon ? VREL ) / ( VRig ? VREL ) . Dos a tres haces de cada msculo semimembranoso Se analizaron , y sus valores se promediaron para representar la fraccin de miosina fuerte vinculante para esa rata . Los anlisis estadsticos . Los efectos de la edad ( 6 meses y 24 -25 MO ) y 3 semanas de miembro posterior ( un) peso en la masa muscular , la contractilidad de la fibra, y los parmetros de la miosina se evaluaron mediante el uso de un ANOVA de dos vas . Cuando una interaccin significativa entre la edad y el (des ) ponderacin se encontraron , comparaciones por pares se hicieron con pruebas de Tukey . A un solo sentido ANOVA con pruebas post hoc de Tukey se utiliz para evaluar ms a fondo la masa muscular , la contractilidad de la fibra , y los parmetros de miosina de los tres grupos de edad de control de ratas , que soportan peso . Todos los anlisis estadsticos se realizaron usando SigmaStat versin 2.03 ( Systat Software ) . Los valores de los resultados son los medios SE. Las diferencias se consideraron significativa cuando P ? 0.05 . Se han usado medias de mnimos cuadrados para calcular las diferencias porcentuales reportados en los resultados RESULTADOS Efectos de HU (ANOVA de dos vas).la descarga de peso afectando la masa del msculo semimembranoso, pero el efecto dependa edad (Fig. 1, con una edad HU, P 0.018?). Entre el 24 a Ratas de 25 meses de edad, la masa muscular fue de 31% menor en el no ponderado de las ratas en los controles (P 0,05?), sin embargo, la masa muscular no fueron diferentes entre las ratas no ponderadas y control 6-mo de edad. el Cuerpo peso de las ratas de control fue 430 14 y 492 29 g en 6 meses y 24 - a grupos de 25 meses, respectivamente. Siguiendo la descarga de peso, los 6-mo de edad ratas pesaban 377 19 g, y el 24 - ratas de 25 meses de edad, pesaba 379 12 g (P 0,05). Cundo la masa del msculo semimembranoso se normaliz a la masa corporal

En la figura 1. Masas de msculo semimembranoso de 6 -, 24 a 25 -, y las ratas de 28 meses de edad. Los valores son medias SE. Descarga de peso result en los msculos semimembranoso ms pequeos entre los 24 - a ratas de 25 meses de edad. Cuando los tres aos se consideraron los grupos, el envejecimiento de la masa muscular tambin se vieron afectados. HU, 3 semanas hindlimb sin ponderar. * Significativamente diferente de 24 - al grupo de control de 25 meses de edad. Significativamente diferente a 24 - con el grupo control de 25 meses de edad.

no se detect ningn efecto significativo de la descarga de peso ( independiente en la mayor de edad , P ? 0.630 ) . En general , HU afect significativamente la contractilidad de la fibra . Generacin de fuerza absoluta fue ms baja en las fibras de las ratas no ponderados, independiente de la edad (Fig. 2 ) . Del mismo modo , descarga de peso dio como resultado menor fuerza especfica , independiente de la edad (Fig. 3 ) . fuerza especfica fue 34 % menor en las fibras de las ratas no ponderados en comparacin con los de las ratas de control . Dependiendo de la edad, Vo era afectada por descarga de peso (Fig. 4 ) . Las fibras de los 6 meses de edad, ratas no ponderadas fueron significativamente ms lento que el de las fibras. En el Control de ratas de 6 meses de edad, y tambin fueron ms lentos que las fibras de la 24 - a ratas no ponderados de 25 meses de edad ( P 0,05 ? ) . Hubo un efecto principal significativo de descarga de peso en la fraccin de la miosina fuerte de unin en las fibras durante la contraccin , independiente de la edad ( figs. 5 y 6 ) . HU durante 3 semanas redujo el fraccin de la miosina fuerte de unin a partir de 0,340 +/- 0,015 a 0.296 +/- 0.010 en los 6 meses de edad, las ratas y de 0,299 +/- 0,011 a 0.276+/- 0.011 en el 24 - a ratas de 25 meses de edad , una reduccin global del 11 %. Estos datos indican que parte de la reducida capacidad de generacin de fuerza de las fibras tras descarga de peso fue una alteracin en la distribucin estructural de la miosina durante contraccin . La relacin de MHC / actina en las fibras que se evaluaron para la contractilidad se vio afectado por descarga de peso , dependiendo de la edad (Fig. 7 ) . Las fibras de los 6 meses de edad, las ratas no ponderados tenan ? 25 % mayor contenido de MHC , relativa a la actina , en comparacin con las fibras control de ratas de 6 meses de edad y tambin en comparacin con las fibras de el 24 - a ratas no ponderados de 25 meses de edad ( P 0,05 ? ) . Expresin de MHC de isoforma se determin en todas las fibras que los Se evalu la fuerza, fuerza especfica y Vo . Slo 2 de 308 fibras expresan MHC I , y las fibras fueron retirados de la base de datos . El porcentaje de fibras que expresa MHC isoformas IIB , IIX , IIX / IIA o IIA en cada semimembranoso msculo estudiado no se vio afectada por descarga de peso ( P 0,063 ? ; . figura 8 ) . Sin embargo , el porcentaje de fibras que coexpresaron que el MHC IIB / IIX en ratas no ponderada fue dos veces mayor que la en los controles ( P ? 0,049) , independientemente de la edad (interaccin , P ? 0.862 ) . Efectos de la edad ( ANOVA de una va ) . La masa del msculo semimembranoso se vio afectada significativamente por el envejecimiento en los tres aos grupos se han tenido en cuenta. Los 28 meses de edad, las ratas tenan msculos ms pequeos que el 24 - a 25 - MO ratas de edad ( fig. 1 ) . La masa del msculo semimembranoso normalizado de masa corporal fue no es diferente entre los grupos de edad ( P ? 0,873 ) . Generacin de la fuerza se vio afectada por la edad ( figs. 2 y 3 ) . Fuerza especfica fue de 25 y el 28 % ms bajo en fibras procedentes de ratas de 28 meses de edad, en relacin con las fibras de 6 - y 24 - a ratas de 25 meses de edad , respectivamente . Vo era insignificantemente afectados por la edad ( fig. 4 ) . Hubo una diferencia significativa efecto global del envejecimiento sobre la fraccin de la miosina fuerte de unin durante la contraccin ( fig. 6 ) . La fraccin de fuerte de unin miosina fue 21 % ms baja en fibras procedentes de ratas de 28 meses de edad, que en fibras de ratas de 6 meses de edad . El contenido de MHC / actina en las fibras no se vio afectada por el envejecimiento (Fig. 7). La expresin de MHC isoforma no se vio afectada por el envejecimiento cuando todos los tres grupos de edad fueron considerado (P? 0,062). Sin embargo, cuando slo el 6-meses de edad, 24 - a ratas de 25 meses de edad fueron considerados (ANOVA de dos vas), el porcentaje de fibras que coexpresado MHC II B / IIX era 2,6- veces mayor en las ratas de ms edad (P 0,012;?. Fig. 8).

figura 2. Fuerza absoluta generada por permeabilizan sola fibras de 6 -, 24 - y 25 -, y las ratas de 28 meses de edad. Los valores son medio SE. Descarga de peso result en semimembranoso fibras ms dbiles. Cuando se consideraron los tres grupos de edad, El envejecimiento tambin afecta negativamente a la generacin de fuerza. - significativamente diferente al grupo control de 6 meses de edad. Significativamente diferente a 24 - con el grupo control de 25 meses de edad.

figura 3. Fuerza especfica generada por permeabilizan sola fibras de 6 -, 24 - y 25 -, y las ratas de 28 meses de edad. Los valores son medio SE. Descarga de peso result en semimembranoso fibras ms dbiles. Cuando se consideraron los tres grupos de edad, envejecimiento tambin caus baja fuerza especfica que se generen. Diferencia significativa que el grupo control de 6 meses de edad. significativamente diferente a 24 - con el grupo control de 25 meses de edad.

DISCUSIN El primer objetivo de este estudio fue determinar el grado en que alter la miosina distribucin estructural durante la contraccin contribuido a la disminucin de la fuerza especfica despus de 3 semanas de HU y para investigar si la edad afecta las malas adaptaciones. Nuestro hallazgos sugieren que las caractersticas intrnsecas relacionadas con fibra mecnica de puentes cruzados fueron alterados con descarga de peso como una sola fibra de la capacidad de generacin de fuerza y la estructura de la miosina se perjudicialmente alterado, independiente de la edad de rata. descarga de peso tambin indujo una disminucin de Vo en las fibras de tipo II y un aumento en la relacin de MHC / actina en las fibras de jvenes, pero no en los ratones ms viejos. Modelo HU y el msculo semimembranoso. Descarga de msculo esqueltico de los vuelos espaciales, inmovilizacin, y HU resultados en la atrofia muscular rpido y dramtico y la prdida de fuerza (7-9, 11, 36). Para estudiar los efectos de la mecnica descarga en los roedores y los mecanismos subyacentes para celulares la disfuncin muscular observada, el modelo de HU se ha usado efectivamente (43). HU resultados en la atrofia y prdida de resistencia en msculos y fibras compuestas de MHC de tipo I (7, 27). Aquellos cambios se producen rpidamente y se observan en muy corto perodos de descarga. Una extensa cantidad de literatura es disponibles en las respuestas de las fibras tipo I de descarga de peso, pero menos informacin se puede consultar en las fibras de tipo II. A corto plazo descarga (7-14 das) no parece alterar la contrctil funcin de las fibras tipo IIA de gemelos, plantar o extensor largo de los dedos de los msculos de ratas adultas, pero, en los estudios de reposo en cama y los vuelos espaciales de ms larga duracin (37 y 84 das), fibras de tipo II de los msculos vasto lateral han alterado la funcin contrctil (8, 9, 12, 17, 30, 40-42). Por ejemplo, 37 y 84 das de reposo en cama resultado atrofia de las fibras tipo II, disminucin de la fuerza (pico y la fuerza especfica), y ms lento velocidades (17, 40). El grado de adaptacin funcin contrctil en el tipo II fibras parece ser variable. Existe la variabilidad debido a que el estudios reportados examinan diferentes temas (por ejemplo, seres humanos, roedores, primates no humanos), los msculos (por ejemplo, vasto lateral, gastrocnemio), los modos de descarga de peso y la longitud de descarga de peso. Este estudio demuestra claramente que las fibras de tipo II a partir de msculo semimembranoso son sensibles a la eliminacin de los la carga de peso durante 3 semanas. Otros factores, adems del tipo de fibra se han atribuido a una (in) sensibilidad del msculo a la descarga, incluyendo su in vivo

. figura 4. La velocidad mxima sin carga acortamiento (Vo) de fibras permeabilizadas individuales de 6 -, 24 - y 25 -, y 28-meses de edad, ratas. Los valores son medias SE. Descarga de peso dio como resultado fibras lentas del msculo semimembranoso entre las ratas 6-moold. Entre las ratas que eran HU, 24 - a ratas de 25 meses de edad tenido fibras rpidas que las ratas de 6 meses de edad. * Significativamente diferente que el grupo de control de 6 meses de edad. # Significativamente diferente de lo 6 meses de edad, grupo de HU.

. figura 5. Representante de electrones por resonancia paramagntica (EPR) de los espectros de fibras musculares spin-etiquetados de control 6-mo de edad y ratas HU obtenidos durante condiciones de rigor (negro), la contraccin isomtrica mxima (azul) y la relajacin (rojo). En estas muestras, la fraccin de la miosina fuerte de unin era calculado en 0.360 +- 0,049 para el control y 0,274 +- 0,038 para el HU fibras (medio SD). La fraccin ms grande de la miosina fuerte de unin en el muestra de control puede ser visualizado en estos espectros como una mayor rea de "azul hashes "en comparacin con la de la muestra de HU.

funcin (por ejemplo , la extensin frente a la flexin ) , la participacin locomotor ( postural vs nonpostural ) , y la posicin durante la descarga de peso (abreviado vs longitud normal). El msculo semimembranoso es un flexor de rodilla / cadera extensor nonpostural involucrados en la locomocin , y estudios previos demuestran que los msculos postural - extensores son ms sensibles a la descarga en comparacin con el msculos nonpostural ( 11 ) . Este sesgo puede ser debido a una alteracin fundamental en el control motor con descarga ( 11 ) . Posicionamiento de la extremidad y la posicin de trabajo subsiguiente de la muscular puede desempear un papel en la sensibilidad del msculo con la descarga. Por ejemplo , Riley y compaeros de trabajo ( 28 ) mostraron una mayor reduccin de la fuerza especfica en las fibras de los msculos unloadedshortened ( sleo ) en comparacin con las fibras de los msculos sin carga nonshortened ( aductor ) . La articulacin de la cadera de un rata no cambi significativamente de pie al HU posicin , y la longitud del msculo aductor largo no lo hicieron cambio ( 28 ) . A partir de esos datos , podemos afirmar que la msculo semimembranoso se mantiene en su posicin normal in vivo longitud durante descarga de peso tambin. Efectos de la descarga de peso en la generacin de la fuerza de la fibra . En primer lugar, la fig. 6 destaca que la fraccin de cabezas de miosina a la actina obligado durante la contraccin de las fibras de los animales de control 6 - mo es de 34 %. Aunque el modelo de puentes cruzados Huxley predice que el fraccin de cabezas de miosina fuertemente vinculado a la actina debe ser ? 80 % , las investigaciones ms recientes han demostrado que el 80 % es un sobreestimacin ( 13 , 16 , 19 , 26 ) . Gracias a la tecnologa que puede medir directamente la rigidez y la fraccin de fuerte de unin cabezas de miosina en las fibras contratantes ( espectroscopia EPR ) , las fraccin de cabezas de miosina une a la actina durante la contraccin es en el rango de 30 - 40 % ( 13 , 19 , 26 ) . En el presente estudio , permeabilizacin de fibras tipo II del msculo semimembranoso de ratas no ponderados genera ? 35 % menos fuerza que las fibras de las ratas que soportan peso , independientemente de edad . La hiptesis de que esta reduccin de la capacidad de generacin de fuerza se debi a una disminucin de la poblacin de cabezas de miosina en el estado estructural fuerte de unin ( de generacin de fuerza ) durante contraccin del msculo . Los resultados de la espectroscopia EPR fundamentadas esta hiptesis : se encontr que la miosina fuerte de unin fue de 11% bajar en fibras a partir de ratas no ponderadas . As, los cambios estructurales en la miosina explicar alrededor de un tercio ( 11 del 34 % ) de la fuerza prdida debido a la descarga de peso . Anteriormente, hemos encontrado que la miosina cambios estructurales representaron esencialmente todo relacionada con la edad prdidas en la generacin de la fuerza, pero en el caso de la descarga de peso , otros factores que deben contribuir a la prdida de fuerza ( 22 , 23 , 35 ) . probablemente candidatos incluyen alteraciones en la cintica del calcio y / o un disminucin de la fuerza por puente cruzado . Basndonos en nuestra estadstica anlisis, los mecanismos subyacentes que contribuyen a la disminucin en la produccin de fuerza HUinduced probablemente similar entre ratas jvenes y viejas, ya que el descenso es independiente de la edad del animal . Efectos de la descarga de peso sobre la velocidad de fibra acortamiento . El cambio en la expresin de MHC isoforma puede haber contribuido a la disminucin general en la reduccin de la velocidad se observ , pero , cuando se compararon las fibras que slo expresan MHC II B , un 48 % decremento en Vo con descarga de peso persistido . As, llegamos a la conclusin que los factores , adems de MHC deben contribuir a la reduccin de unloadingrelated en las velocidades de contraccin . Se cree Vo estar limitado por la tasa de actomiosina desprendimiento de puente cruzado , un proceso que se ha demostrado que varan con MHC y de la cadena ligera de la miosina (MLC ) isoforma expresin ,

También podría gustarte