GAMETOGNESIS FEMENINA

Mar Mara Cecilia Lardone, MSc. MSc. INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MATERNO INFANTIL FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE CHILE Curso Biolog Biologa Carrera de Enfermer Enfermera, 2011

Clulas haploides y diploides en el ciclo de vida de eucariotas superiores

Las clulas en muchos animales y plantas proliferan (mitosis) en la fase diploide para formar un organismo multicelular Los gametos representan las nicas clulas haploides, las cuales se desarrollan desde clulas germinales diploides en las gnadas

Ensamble y desensamble del Complejo Sinaptonmico durante la Profase I

Paquiteno Ocurre el intercambio de material gentico entre cromosomas homlogos (crossing-over) Esta etapa puede persistir por das a semanas

Diploteno (Dictioteno) Los homlogos siguen unidos (quiasmas) Esta estapa persiste por aos en los ovocitos primarios de la mujer y ocurre una activa transcripcin de genes, lo cual es necesario para el crecimiento del ovocito y el desarrollo embrionario temprano

OVOGNESIS

GAMETOGENESIS FEMENINA OVARIO Funciones

Gametognica (Ovocitos) Endocrina
Estradiol- ProgesteronaAndrgenos

Esquema del ovario humano

Tertiary follicle

Corteza ovrica: epitelio germinal

Corteza ovrica: epitelio germinal

Recorrido de las clulas germinales primordiales en el humano

6 sem. post fecundacin

Ovogonias

Formacin del ovocito en ovario fetal

Ovario fetal humano 15 sem. gestacin Clulas en meiosis

Folculos primordiales en ovario de recin nacido

Cambio en el nmero de clulas germinales durante la vida fetal y postnatal

Inicio meiosis, detencin en Profase I

FOLICULOGNESIS

Foliculognesis
Primera etapa gonadotrofina-independiente: Reclutamiento inicial de cohortes de folculos primordiales Crecimiento de folculos pre-antrales de distintas cohortes Segunda etapa donadotrofina-dependiente: Reclutamiento de folculos pre-antrales tardos (folculos secundarios) de distintas cohortes (fase ltea tarda o inicial temprana) Seleccin de un folculo dominante y atresia de los folculos no seleccionados

FOLICULO PRIMARIO
> 60 m Ovocito en diploteno CG cambian de forma de planas a c cbicas Se forma la ZP Se inicia la s ) sntesis de E2 (aromatasa (aromatasa)

Proliferaci Proliferacin de las CG (4(4-5 capas) ZP gruesa Al final de esta etapa: Las c clulas mesenquim mesenquimticas del estroma rodean a la l lmina basal (teca presuntiva al final de esta etapa). Aparecen LHr y sintesis E2 (aromatasa ) (aromatasa) Expresi Expresin receptores de estr estrgenos (RE), andr andrgenos (RA) y FSH en CG El ovocito primario completa su crecimiento y diferenciaci diferenciacin (adquieren competencia mei meitica) tica)

FOLICULO SECUNDARIO (PRE(PRE-ANTRAL)

ovoplasma

Cl granulosa Vescula germinativa Lmina basal

CRECIMIENTO DEL OVOCITO

Por qu el gameto femenino es mucho ms grande que el masculino?
protenas (vitelo) Ribosomas tRNAs mRNAs (inactivos hasta despus de la fecundacin) factores morfogenticos factores protectores (enzimas de reparacin, filtros ultravioletas, pigmentos)

FOLICULO TERCIARIO Pre antral

Ovocito primario (diploteno de la meiosis I)
En el folculo terciario se han formado las clulas de la teca interna y las de la teca externa Formacin del antro (fluido folicular entre las CG): productos de secrecin de las CG y transudado de los capilares sanguneos que rodean a las clulas de la teca interna (TI), las cuales se activan e inician la sintesis de andrgenos en respuesta a LH (expresin de R-LH)

FOLICULO PRE-OVULATORIO (DE GRAAF)

5 6 das antes de la ovulacin
Ovocito primario (diploteno de la meiosis I)

Ocurre un aumento considerable de tamao (25mm) a expensas del aumento del antro y de la proliferacin de las CG y TI (5-8 capas) Formacin de las clulas del cmulo ooforo (CC) CG expresan receptores de LH

Interaccin entre las clulas de la teca interna y las clulas de la granulosa (teora de las 2 clulas)
Clula de la teca interna
LH R-LH

Clula de la granulosa
FSH R-FSH

ATP Colesterol cAMP cAMP

ATP LH R-LH

Progesterona

Aromatasa
Andrgeno Andrgeno Estrgeno

Vaso sanguneo

Lmina basal

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COMUNICACION BIDIRECCIONAL ENTRE EL OVOCITO Y LAS CELULAS DE LA GRANULOSA ES ESENCIAL PARA EL CRECIMIENTO Y DESARROLLO DEL OVOCITO Y DEL FOLICULO

CC al ovocito Kit-L

Gap junction purinas, pirimidinas, aa, metabolitos, AMPc

Factores secretados por el ovocito a las CC GDF-9, GDF-9B BMP-6 ..etc

Reclutamiento folicular inicial y cclico

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Folculo dominante
Dentro de una cohorte de folculos antrales el folculo dominante es el que se distingue por su tamao, alcanza el mayor ndice mittico en sus clulas de la granulosa (CG) Aquel que sintetiza mayor cantidad de estrgenos producto de una mayor adquisicin de receptores de FSH que conduce a una mayor expresin de la enzima aromatasa (enzima que convierte andrgenos a estrgenos) La mayor adquisicin de receptores de LH en las CG, permite una mayor concentracin de cAMP, contrarestando la disminucin del aporte de FSH Factores intraovricos producidos por las CG amplifican la accin de la FSH Es decir, requiere de la accin de LH y FSH, as como de la interaccin funcional de las CG y de la clulas de la teca interna (TI), y que se denomina teora de las dos clulas

Neurona secretora de GnRH

Eje hipotlamo-pituitaria-ovario (HPO)

Estradiol

FSH

LH

Una elevada concentracin de estradiol induce el pico preovulatorio de LH Estradiol en concentraciones relativamente bajas tiene un efecto inhibidor sobre el eje HPG
Cuerpo lteo

Folculo atrsico

Folculo en desarrollo Folculo Dominante

ovulacin

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Rol de AMPc en la mantencin del primer reposo meitico

INACTIVO

COMPLEJO CUMULOCUMULO-CORONACORONA-OVOCITO ANTES Y DESPUES DEL ALZA DE LH

EL PEACK DE LH OCURRE 24 A 36 HORAS ANTES DE LA OVULACION

CIERRE DE UNIONES GAP ENTRE LAS CELULAS DEL CUMULO (CC) Y LA CORONA RADIADA (INHIBIDORES DE LA MEIOSIS NO PUEDEN ACTUAR) REACTIVACION DE LA MEIOSIS (3-4 HORAS ANTES DE LA OVULACION) Y DETENCIN EN METAFASE II SINTESIS DE GLICOSAMINOGLICANOS POR LAS CC LLEVA A LA EXPANSION DE ESTAS CELULAS

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COMPLEJO CUMULO-OVOCITO
1er Corpsculo Polar

Clulas del Cmulo

Metafase II Grnulos Corticales Zona pelcida

Membrana Plasmtica

Constitucin cromosmica : Vida frtil Nmero : :

23, X <24 hrs 1/ciclo/mes

Metafase II

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(CGP)

Ovognesis
Durante la semana 4-5 de embarazo: las clulas germinales primordiales (CGP) migran al primordio gonadal (futura gnada) del embrin Las CGP diferencian en OVOGONIAS, las cuales proliferan y finalmente entran en meiosis (diploteno de la profase I) La entrada en meiosis gatilla que clulas pre-granulsicas rodeen a las ovogonias y se inicie la FOLICULOGNESIS

Etapa Fetal

Etapa post-puberal

El crecimiento del ovocito se inicia con el reclutamiento de folculos primordiales (diploteno profase I) RECLUTAMIENTO INICIAL En la mujer, la formacin del gameto maduro ocurre de manera cclica despus de la menarquia (primera menstruacin).
cigoto

El gameto maduro es un ovocito secundario detenido en Metafase II. La meiosis se completa slo despus de la fecundacin

FECUNDACIN HUMANA
Mar Mara Cecilia Lardone, MSc. MSc. INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MATERNO INFANTIL FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE CHILE Curso Biolog Biologa Carrera de Enfermer Enfermera, 2011

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Eventos de la fecundacin
4. Reaccin Acrosomal 3. Unin zona pelcida 2. Penetracion cumulus 6. Activacin del ovocito 5. Fusin de membranas

1. Capacitacin

Cmulo osforo

Capacitacin del espermatozoide

Aumento de la motilidad del flagelo Adquisicin de capacidad para realizar la reaccin acrosomal
aumento de la fluidez de la membrana aumento concentracin intracelular de Ca++ y AMPc aumento de la fosforilacin de protenas en residuos de tirosina

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Polimerizacin fibras de actina en la MP y la membrana acrosomal externa Unin de PLC a la MP

Modificaciones en la membrana del espermatozoide

Aumento de Formacin de microdominios: lipdicos ( fluidez) proteicos ( fluidez) Aumento de la fluidez de las membranas (disminucin de la razn colesterol/fosfolpidos) Exposicin de molculas necesarias para la unin a la ZP, reaccin acrosomal y fusin con el oolema

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Hiperactivacin de los espermatozoides

Interaccin espermatozoide clulas del cmulo

Espermatozoides Capacitados Hiperactivados Actividad Hialuronidasa PH20

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Unin a la zona pelcida

Unin inicial ZP3 ZRK induce RA (exocitosis) ZP2 Acrosina, PH20 unin secundaria Reconocimiento especieespecifica

3 glicoprotenas sulfatadas
ZP1 homodmeros ZP2 y ZP3 hterodmeros

Reaccin acrosomal

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Fusin con el oolema

Reproduction (2004) 127 423-429

Biocell (Mendoza) v.29 n.3 Mendoza ago./dic. 2005

Fusin con el oolema: candidatos para protenas de fusin

Reproduction (2004) 127 423-429

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Activacin del ovocito

Reaccin cortical Reanudacin de la meiosis Formacin de los proncleos femeninos y masculinos

La fertilizacin del ovocito por el espermatozoide gatilla el aumento citoslico de Ca ++

MBOTC, 5th edition

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Activacin del ovocito: Reaccin cortical

REACCIN CORTICAL EN UN OVOCITO DE RATN

BLOQUEO DE LA POLIESPERMIA

MBOTC, 5th edition

Activacin del ovocito: Reanudacin de la meiosis

Duplicacin del DNA en fase S

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Formacin de los proncleos

En la fecundacin se unen los gametos femeninos (ovocito II) y masculino (espermatozoide). Al entrar el espermatozoide, se activa el ovocito II, termina la meiosis y se elimina el segundo corpsculo polar. Los procesos que ocurren durante las primeras horas son: 1- Duplicacin del DNA de cada gameto haploide 2- Singamia: aproximacin de los proncleos de cada gameto, pero sin fusin de membranas nucleares Cigoto 18 horas post-incubacin de los gametos

Cuerpos polares I y II zona pelcida

proncleos

2.5

Unin de los proncleos

MBOTC, 5th edition

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Unin de los proncleos

MBOTC, 5th edition

Desarrollo temprano del embrin humano

El embrin se va dividiendo, originando duplicacin de los blastmeros: 2 clulas (a las 26 horas) 4 clulas (38 h) 8 clulas (72 h)
EMBRIN DE 4 CLULAS

EMBRIN DE 8 CLULAS

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Fertilizacin In vitro

Fertilizacin in vitro

Inyeccin intracitoplasmtica del espermatozoide (ICSI)

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