Crescimento de em funo da temperatura, pH, presso osmtica e concentrao de oxignio.

INTRODUO Os microorganismos so cultivados em meios que contm muitos nutrientes. Porm, necessrios levar em conta que as condies fsico-qumicas tambm so extremamente importantes e devem ser fornecidas para que haja um crescimento timo. Os microorganismos apresentam grandes diferenas com relao s condies fsicas requeridas para o crescimento. Algumas espcies crescem em temperaturas prximas ao ponto de congelamento da gua; outras crescem temperaturas acima dos 100C. O oxignio um gs que para algumas espcies essencial, e para outras txico. Para algumas espcies o pH neutro o ideal, entretanto, existem espcies que toleram valores que variam do alcalino ao cido. Desse modo, de suma importncia que os microbiologistas conheam as condies fsico-qumicas requeridas por uma determinada espcie bacteriana que est sendo objeto de estudo e que tais condies sejam ajustadas em laboratrio para satisfazer as necessidades especiais de crescimento dessa espcie em questo. Existem basicamente quatro condies principais que influenciam o meio fsico de um microorganismo, e portanto, podem alterar o ritmo do crescimento bacteriano, intensificando-o ou at mesmo bloqueando-o e so eles: temperatura, pH, concentrao de oxignio e presso osmtica. O cultivo bem sucedido dos vrios tipos de microorganismos requer uma combinao de nutrientes apropriados e de uma condio fsica apropriada. necessrio que o microbiologista conhea quais so as necessidades especficas, satisfazer tais necessidades e checar as culturas para averiguar se os microorganismos esto se desenvolvendo. Segundo Pelczar, Chan & Krieg (1997) a temperatura tem um grande influncia sobre o crescimento dos microorganismos, isto porque todos os processos de crescimento so dependentes de reaes qumicas que por sua vez so afetadas pela variao da temperatura. H microorganismos que toleram uma faixa maior de variao de temperatura; outros, entretanto, no so tolerantes. Por exemplo, a variao par a Bacillus subtilis de 8 a 53C, uma variao de 45C; para Neisseria gonorrhoeae de 30 a 40C, uma variao de apenas 10C. Geralmente, em temperaturas mais favorveis para o crescimento, o nmero de divises celulares por hora, chamado de taxa de crescimento, dobra para cada aumento de temperatura a 10C. Esse tipo de comportamento do crescimento bacteriano similar ao da maioria das reaes catalisadas por enzimas, evidenciando que o crescimento resultado de uma srie de reaes enzimticas, que tem o auge de sua atividade dentro de um valor de temperatura especfico. A temperatura na qual uma espcie de microorganismo cresce mais rapidamente a temperatura tima de crescimento. As temperaturas de crescimento mais importantes para qualquer microorganismo so a mnima, a tima e a mxima. A temperatura tima no a temperatura mediana entre as temperaturas mxima e mnima. A temperatura tima a que fica mais prxima do limite superior da variao de temperatura, isto porque a velocidade das reaes enzimticas aumentam de acordo com o aumento da temperatura at alcanar um ponto em que as enzimas so danificadas pelo calor e as clulas param de crescer. Os microorganismos, geralmente, so divididos em trs grupos, de acordo com a variao de temperatura na qual crescem melhor e so:

- Psicrfilos: microorganismos que crescem em baixas temperaturas (15 a 20C ou inferiores), sendo que alguns morrem quando expostos a temperatura ambiente em torno de 25C. Provavelmente, a maior taxa de crescimento se deve a existncia de um arsenal enzimtico mais eficiente nas reaes que ocorrem em temperaturas mais baixas. Tais microorganismos so, geralmente, encontrados em guas frias, oceanos e regies polares. - Mesfilos: so a maioria, crescendo melhor em temperaturas que variam de 25 a 40C. So representantes desse grupo algas, bactrias saprfitas, fungos, microorganismos parasitrios de humanos e animais e os microorganismos patognicos para o homem que crescem melhor em torno da temperatura corporal, que 37C. - Termfilos: so os microorganismos que crescem em torno de 40 a 85, mas o melhor crescimento se d entre 50 e 60C. Podem ser encontrados em reas vulcnicas, mistura de fertilizantes e em nascentes quentes. Neste grupo composto restritamente por organismos procariticos, no havendo clulas eucariticas que cresam em uma temperatura to elevada. O que explica tal fenmeno que as enzimas dos termfilos so produzidas mais rapidamente do que as enzimas dos mesfilos, por isso aquelas que so danificadas pelas altas temperaturas so rapidamente substitudas. O oxignio um gs presente no ar atmosfrico e tambm um fator muito importante para o crescimento bacteriano, pois de acordo com a espcie microbiana pode atuar impedindo ou intensificando o seu crescimento. Alm do gs oxignio, um outro gs que pode ser utilizado pelo microorganismo o dixido de carbono. Para algumas espcies o gs oxignio necessrio devido a sua relao a determinadas reaes qumicas, que se fazem essenciais a vida. Porm, para alguns microorganismos uma elevada concentrao de gs oxignio no se faz necessria, ou at sendo absolutamente dispensvel, devido a toxicidade do oxignio a esses microorganismos. De acordo com a resposta ao oxignio gasoso, os microrganismos so divididos em quatro grupos fisiolgicos: microrganismos aerbios, facultativos, anaerbios e microaerfilos. Microrganismos aerbios. Os microrganismos que normalmente requerem oxignio para o crescimento e podem crescer em uma atmosfera padro de 21% de oxignio so classificados como aerbios. Os aerbios adquirem mais energia dos nutrientes disponveis do que os microrganismos que no utilizam oxignio. Alguns aerbios podem crescer mais lentamente quando o oxignio limitado, ento cuidados devem ser tomados para fornecer o suprimento adequado de gs. Quando os microrganismos crescem na superfcie de um meio solidificado, isto geralmente no um problema. Entretanto, os microrganismos crescendo em meio lquido podem rapidamente utilizar o oxignio dissolvido na camada superficial do meio. Para prevenir este problema, as culturas lquidas de microrganismos aerbios so algumas vezes agitadas para aumentar o suprimento de oxignio dissolvido e produzir um estoque celular maior num tempo de incubao menor. Microrganismos facultativos. Os microrganismos facultativos so aqueles que crescem na presena do ar atmosfrico e podem tambm crescer em anaerobiose. Eles no requerem oxignio par ao crescimento embora possam utiliz-lo para a produo de energia em reaes qumicas. Sob condies anaerbias, eles obtm energia por um processo metablico chamado fermentao. Os membros da famlia bacteriana Enterobacteriaceae, tais como Escherichia coli, so facultativos, assim como muitas leveduras. Um exemplo a Saccharomyces cerevisiae, que uma levedura comum dos pes. Microrganismos anaerbios. Os microrganismos anaerbios so aqueles que podem ser mortos pelo oxignio, no podem crescer em presena do ar e no utilizam oxignio para as reaes de produo de energia. Alguns anaerbios podem tolerar
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baixas concentraes de oxignio, mas os anaerbios estritos so mortos por uma breve exposio ao gs. evidente a grande variedade de nveis de tolerncia ao oxignio entre os microrganismos anaerbios. O Clostridium perfringesn altamente tolerante ao oxignio, o Clostridium tetani moderamente tolerante ao oxignio e o Methanobacterium e o Methanospirillum so anaerbios estritos. O cultivo de bactrias anaerbias, o oxignio deve ser eliminado da atmosfera e para isso pode ser utilizada a cmara de anaerobiose ou atravs da jarra de anaerobiose. Microorganismos microaerfilos. So os microorganismos que podem utilizar o oxignio nas reaes qumica para a produo de energia. Porm, so organismos que no toleram nveis de oxignio (21%) presentes na atmosfera e normalmente crescem melhor em nveis de oxignio variando de 1 a 15%. Um exemplo de microorganismo microaerfilo Campylobacter jejuni, uma bactria que causa diarria em humanos e se localiza no intestino onde a concentrao do gs oxignio mais baixa. Como foi possvel observar at o presente momento, a temperatura e a concentrao de gs oxignio so fatores determinantes no controle das condies fsicas adequadas, porm o pH e a presso osmtica so condies que tambm devem ser consideradas quando analisado o crescimento bacteriano. O pH timo encontra-se no valor mediano da variao de pH sobre a qual o crescimento acontecer. O pH timo normalmente bem definido para cada espcie e diferentes espcies toleram diferentes valores de pH. A presena de microorganismos em guas de escoamentos de solos vulcnicos e de minas que podem atingir valores de pH entre 1 e 3, em guas de nascentes que o pH podem ter valores prximos a 10 e em oceanos que o pH que em torno de 8 demonstra a adaptabilidade das diferentes espcies aos diferentes valores de pH encontrados na natureza. Porm, para crescer bem em um meio cido ou bsico, um microorganismo deve ser capaz de manter o seu pH intracelular em torno de 7,5, independentemente do valor do pH do meio externo. Para contornar esse problema de grande variao de pH, fazendo com a clula tenha que enfrentar um ambiente muito cido ou muito alcalino necessrio que a clula possua a propriedade expulsar ou absorver ons hidrognio, para que dessa forma possa ter maior controle do pH externo, evitando a sua morte. Assim, o pH normalmente drasticamente alterado antes mesmo que o pH interno da clula seja afetado. Quando os microorganismos em crescimento ativo so cultivados em um meio de cultura, o pH do meio sofrer alterao medida que os compostos cidos ou alcalinos so produzidos. Esta mudana no pH pode ser to grande que o crescimento posterior inibido; tais variaes so prevenidas pela adio de um tampo ao meio. A presso osmtica a fora com a qual se move atravs da membrana citoplasmtica de uma soluo contendo uma baixa concentrao de substncias dissolvidas (solutos) para outra contendo uma alta concentrao de solutos. Quando as clulas microbianas esto em meio aquoso, no devem existir grandes diferenas na concentrao de soluo dentro e fora da clula, ou as clulas poderiam desidratar-se ou romper-se, levando-a, obviamente, morte celular. Em uma soluo isotnica, o fluxo de gua est em equlibrio e a clula cresce normalmente. Entretanto, quando o meio externo hipertnico, com uma concentrao de solutos mais alta do que no citoplasma da clula, a clula perde gua e seu crescimento inibido. O contrrio tambm pode ocorrer, ou seja, em meio hipotnico, com uma concentrao de solutos muito mais baixa do que na clula, a gua flui para o interior da clula e a rompe, inviabilizando o crescimento bacteriano. Estes que sero as condies fisicos-qumicas levadas em considerao, e de acordo com a variao desses fatores ser possvel avaliar o crescimento bacteriano, estabelecendo assim as curvas de crescimento para cada espcie bacteriana analisada. Tal determinao tem importncia considervel, pois de posse desses conhecimentos que o microbiologista pode ter um maior controle sobre a intensidade do crescimento bacteriano e nos casos que o crescimento apresentou-se pequeno ou nulo o

microbiologista estar apto a descobrir a condio fsica que no foi suprida adequadamente.

OBJETIVOS Atravs da realizao desses estudos tem-se como objetivos: - Avaliar o crescimento de E. coli, Klebsiella sp. e Staphylococcus aureus sob diferentes condies fsicas como: diferentes faixas de pH, concentraes de NaCl e sacarose, valores de temperatura e concentraes do gs oxignio; - Classificar as bactrias de acordo com suas exigncias atmosfricas e de temperatura; - Determinar as exigncias fsicas e relacionar os dados obtidos com o hbitat dos diferentes microorganismos utilizados. MATERIAIS E MTODOS Para realizar o experimento utilizou-se a bactria Shigella flexneri, que foi submetida a trs baterias de meio TSB distintas. Uma com o objetivo de avaliar a influncia do pH, e outras duas para determinar a influncia da concentrao de sacarose e da concentrao de NaCl no crescimento bacteriano. A bateria para verificar a influncia do pH era composta por nove tubos contendo meio TSB, omde submeteu-se a bactria a um valor diferente de pH: 2.0; 3.6; 4.4; 5.2; 6.0; 6.8; 7.6; 8.4 e 9.2 ; a segunda bateria, formada por sete tubos contendo meio TSB com concentraes diferentes de NaCl: 0.0%; 0.5%; 5.0%; 10.0%; 20.0%; 40.0% e 60.0%; a terceira bateria era composta por sete tubos contendo meio TSB, cada com concentraes diferentes de sacarose: 0.0%; 0.5%; 5.0%; 10.0%; 20.0%; 40.0% e 60.0%. A cada tubo das baterias inseriu-se 0,1 mL da cultura de Shigella flexneri., com auxlio de uma pipeta esterilizada. Tomuo-se o cuidado de etiquetar todos os tubos e os mesmos foram incubados por 48 horas temperatura de 37C. Numa etapa seguinte, utilizou-se quatro tubos contendo 2,5 mL de meio TSB cada um identificados como 4C, 24C, 37C e 55C, que so as temperaturas as quais os tubos foram, posteriormente, incubados. Em cada tubo, foi pipetado 0,1 mL da cultura. Por fim, pegou-se um tubo contendo meio TSA liqefeito e transferi-se 0,1 mL da cultura. O tubo foi incubado a 37C. Em todos os experimentos observou-se o crescimento bacteriano, anotando os fenmenos ocorridos aps 24 e 48 horas de incubao. RESULTADOS Os resultados obtidos esto relacionados nas tabelas abaixo:
Tab. 1 - Intensidade do crescimento em relao a variao do pH.

Leitura 24 h 48 h

2,0 ++ ++

3,6 + +++

4,4 +++ +++

Variao do pH 5,2 6,0 6,8 +++ +++ +++ +++ +++ ++

7,6 + +

8,4 + +

9,2 + +

10,0 + +

Legenda: (-) = ausncia de crescimento (+) = crescimento discreto (++)= crescimento moderado (+++)= crescimento intenso

Com base nesses resultados pode-se observar que em E. coli a faixa de pH que evidenciou um crescimento intenso foi a estava entre 4,4 e 6,8. Em pH inferiores a 4,4 o crescimento foi moderado e em pH acima de 7,0 o crescimento foi discreto. Tais resultados foram basicamente os mesmos quando observados 24 e 48 horas aps a incubao, no apresentando diferenas significativas. Em relao a cultura de S. aureus foi observado que ocorreu ausncia de crescimento da cultura, nem aps 24 horas de incubao nem aps 48 horas de incubao. Quanto cultura de Klebsiella sp. foi observado que o crescimento mais intenso se deu entre a faixa de pH que varia entre o valor 5,0 e 7,0. Em valores de pH acima de 8,0 a cultura, aps 24 de incubao estabilizou o crescimento, apresentando apenas um crescimento discreto. Aps 48 de incubao, ao observar a cultura foi possvel observar que o crescimento, em meio alcalino, ou seja, com valores de pH acima de 7,0, houve um pequeno aumento na intensidade do crescimento, caracterizando-o como moderado.
Tab. 2 - Intensidade do crescimento de E. coli, S. aureus e Klebsiella sp de acordo com a variao da concentrao de NaCl adicionada.

Leitura 24 h 48 h Leitura 24 h 48 h Leitura 24 h 48 h

Concentrao de NaCl adicionada E. coli 0,0% 0,5% 5,0% 10,0% 20,0% 40,0% ++ ++ +++ ++ ++ +++ Concentrao de NaCl adicionada S. aureus 0,0% 0,5% 5,0% 10,0% 20,0% 40,0% ++ ++ ++ + ++ ++ ++ ++ Concentrao de NaCl adicionada Klebsiella sp. 0,0% 0,5% 5,0% 10,0% 20,0% 40,0% +++ ++ ++ +++ +++ ++ -

60,0% 60,0% 60,0% -

Atravs desses dados foi possvel observar que as culturas de E. coli e de Klebsiella sp. tiveram crescimento intenso entre as concentraes de 0,0% e 5,0% de NaCl, decaindo gradativamente quando submetidas em concentraes superiores a 10,0%, estabilizando num crescimento do tipo discreto, tanto quando observadas aps 24 e 48 horas de incubao . Quanto cultura de S. aureus o crescimento foi moderado entre as concentraes de 5,0 a 20% de NaCl. Com relao aos valores extremos, ou seja, abaixo de 0,5% e acima de 40,0% observou-se ausncia do crescimento da cultura, tanto aps 24 horas de incubao quanto aps 48 horas.
Tab. 3 - Intensidade do crescimento de E. coli, S. aureus e Klebsiella sp de acordo com a variao da concentrao de sacarose adicionada.

Concentrao de sacarose adicionada E. coli 0,0% 0,5% 5,0% 10,0% 20,0% 40,0% 60,0% ++ ++ ++ ++ ++ + +++ ++ ++ ++ ++ + + Concentrao de sacarose adicionada S. aureus Leitura 0,0% 0,5% 5,0% 10,0% 20,0% 40,0% 60,0% 24 h +++ +++ ++ ++ + 48 h ++ ++ ++ ++ +++ + Concentrao de sacarose adicionada Klebsiella sp. Leitura 0,0% 0,5% 5,0% 10,0% 20,0% 40,0% 60,0% 24 h ++ +++ + + + + + 48 h +++ +++ ++ ++ + + + Leitura 24 h 48 h

Com base nos dados obtidos, verifica-se que a cultura de E. coli teve um crescimento moderado numa grande faixa de variao de concentrao de sacarose, que varia de 0,0% at 20,0%, aps 24 e 48 horas. Acima da concentrao de 40,0% verificou-se que aps 24 e 48 horas de incubao houve crescimento discreto da cultura. Em concentrao de 60,0% foi verificado que aps 24 horas de incubao, o crescimento foi ausente e aps 48 horas de incubao o crescimento foi discreto. Em relao a cultura de S. aureus o crescimento foi mais intenso nas concentraes entre 0,5 e 10,0% de sacarose, apresentando um pequeno declnio aps 48 horas de incubao, apresentando um crescimento moderado. A cultura de Klebsiella sp. teve um crescimento intenso na variao entre 0,0 e 0,5% e apresentou crescimento discreto na faixa de concentrao que varia entre 5,0 e 60,0% de sacarose, observadas aps 24 horas de incubao. Aps de 48 horas de incubao, nas concentraes de 0,0% e 0,5% de sacarose o crescimento foi intenso, em concentraes de 5,0 a 10,0% o crescimento foi moderado e nas concentraes entre 20,0 e 60,0% o crescimento foi discreto.
Tab. 4 - Intensidade do crescimento de E. coli, S. aureus e Klebsiella sp. de acordo com a variao da temperatura.

Variao de temperatura E.coli Leitura 4C 24C 37C 55C 24 h + ++ ++ 48 h + +++ ++ Variao de temperatura- S. aureus Leitura 4C 24C 37C 55C 24 h + 48 h ++ ++ Variao de temperatura Klebsiella sp. Leitura 4C 24C 37C 55C 24 h +++ ++ + 48 h + +++ ++ +

Observando a tabela acima, podemos notar que nas observaes realizadas aps 24 e 48 horas de incubao, as culturas de E.coli apresentaram um crescimento mais intenso numa faixa de variao de temperatura entre 24C e 37C. A 4C o crescimento foi discreto e a temperatura de 55C o crescimento foi ausente. Nas culturas de S. aureus foi observado crescimento discreto apenas na cultura que foi incubada a temperatura de 24C (temperatura ambiente). As demais culturas submetidas as temperaturas de 4C, 37C e 55C apresentaram ausncia de crescimento. Aps 48 horas de incubao, ocorreu moderado crescimento s temperaturas de 24C e 37C. Sob temperaturas extremas, o crescimento foi nulo. Em cultura de Klebsiella sp. o crescimento mais intenso se deu a temperatura de 24C (ambiente). A temperatura de 4C, aps 24 horas de incubao o crescimento foi ausente e aps 48 horas, o crescimento foi discreto. O crescimento tambm foi discreto sob a temperatura de 55C.
Tab. 5 Crescimento bacteriano de acordo com as exigncias atmosfricas.

Influncia da concentrao de oxignio - E. coli Atravs da realizao do procedimento j descrito, foi possvel observar um crescimento intenso na superfcie do meio solidificado TSA , caracterizado pela presena de colnias isoladas com colorao branca. Houve um crescimento moderado no meio, e na base houve ausncia de crescimento. Influncia da concentrao de oxignio - S. aureus Ocorreu um crescimento intenso na superfcie do meio solidificado TSA , caracterizado pela presena de colnias isoladas com colorao branca. Houve um crescimento moderado no meio, e na base houve ausncia de crescimento. Influncia da concentrao de oxignio - Klebsiella sp. Houve um crescimento moderado no meio, havendo a presena de colnias de colorao branca. Na base houve ausncia de crescimento. 6

DISCUSSO E CONCLUSO Primeiramente, devemos analisar os valores obtidos sobre o pH. Em culturas de E. coli e Klebsiella sp. observou-se que houve uma faixa de maior intensidade no crescimento com relao ao valor do pH que variou entre 5,0 e 7,5.Possivelmente, entre esses valores encontra-se o pH timo, onde observado o maior crescimento populacional num menor espao de tempo. Segundo Pelczar, Chan & Krieg as diferentes espcies so adaptadas ao crescimento em vrios valores de pH. E essa adaptao inclui possuir um aparato gnico e metablico capaz de fazer com o pH interno se mantenha constante independentemente do pH externo. Em condies mais extremas de pH, os microorganismos devem possuir tal aparato para que possam sobreviver nos mais diversos ambientes, por isso deve haver esse tipo de adaptao. Com relao, a cultura de S. aureus no ocorreu crescimento em nenhum dos valores de pH e esse fato deve estar associado a algum erro de inoculao da cultura, incubao ou outros, sendo necessria uma anlise mais detalhada dessa cultura, o que no foi possvel. Com relao a concentrao de NaCl adicionada observado que tanto as culturas de E. coli quanto Klebsiella sp. suportam uma concentrao de at 5,0%, acima esse valor o meio tornou-se hipertnico, fazendo com as clulas, provavelmente, desidratassem e o crescimento foi inibido. Em cultura de S. aureus, suportou at a concentrao de 20,0%, acima desse valor o crescimento foi inibido, devido a desidratao. Com relao a concentrao de sacarose, pode-se dizer que a sacarose um dos aucares que amplamente utilizado pelos microorganismos como fonte de carbono. Dessa forma, o crescimento ocorreu moderadamente em quase todas as concentraes. Em S. aureus o crescimento ausente em 0,0% evidencia a necessidade de sacarose para as reaes metablicas que conduzem ao crescimento. Porm, em concentraes muito elevadas pode causar inibio do crescimento, devido a diferena de presso osmtica, ocasionando uma elevada sada de gua nas clulas. A temperatura um fator que tem grande influncia sobre o crescimento bacteriano. Na verdade, a temperatura um fator que est associado diretamente a velocidade das reaes qumicas do microorganismo. Isso se deve ao fato de que tais reaes so catalisadas por enzimas especficas, que tem a sua atividade aumentada ou diminuda de acordo com a temperatura. Porm, a temperatura no deve exceder ao valor de temperatura tima (To), pois a partir da as enzimas so danificadas pelo calor, perdem sua atividade e as clulas param de crescer. As culturas de E. coli e Klebsiella sp. tiveram um melhor crescimento numa faixa de temperatura que varia entre 24C (temperatura ambiente) at 37C, aproximadamente. Segundo Pelczar, Chan e Krieg (1997), a Klebsiella sp. possui temperatura tima por volta de 35 a 37C e esse dado confere com aquilo que obtivemos atravs do experimento. A cultura de S. aureus revelou melhor crescimento em temperatura de 24C, contrariando a literatura que diz que seu crescimento timo est entre 35 e 40C. importante ressaltar que, E. coli, S. aureus e Klebsiella sp. so bactrias que geralmente esto associadas a rgos de animais de sangue quente como intestino, pele e mucosas. Os resultados indicaram que, quanto as exigncias atmosfricas, nenhuma das bactrias apresentou ausncia de crescimento em toda a extenso do tubo. Segundo Pelczar, Chan & Krieg a E. coli um microorganismo facultativo. Podemos verificar, atravs do experimento, que tanto E. coli, S. aureus e como Klebsiella sp. cresceram intensamente na superfcie do meio, onde o teor de oxignio era grande, mas tambm em reas mais profundas do tubo, onde a concentrao de era extremamente pequena ou at nula. Dessa forma, podemos confirmar que E. coli, e Klebsiella sp. so microorganismos facultativos, ou seja, so aqueles que crescem na presena do ar atmosfrico e tambm podem crescer em anaerobiose. Segundo Pelczar, Chan e Krieg (1997) microorganismos S. aureus so considerados como anaerbios facultativos e isso
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indica que so microorganismos que preferencialmente vivem em ambientes anaerbios, mas toleram baixas concentraes de oxignio. Isso provavelmente se deve ao fato de que tais organismos desenvolveram mecanismos protetores contra as formas txicas de oxignio, que so: radical superxido e radical hidroxila. Desenvolveram a produo da enzima superxido dismutase, que elimina os radicais superxidos convertendo-os rapidamente em perxido de hidrognio. Tal substncia, que txica, pode ser metabolizado por catalase ou por peroxidase. Portanto, atravs da anlise dos resultados obtidos, foi possvel concluir que existem inmeros fatores fsicos que influenciam o crescimento bacteriano, podendo essa influncia ser negativa ou positiva. Alguns fatores, como temperatura, pH, presso osmtica e concentrao de oxignio, so de grande influncia sobre o meio e devem ser considerados quando se lida com manuteno de culturas de microorganismos. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS LIEBER, S. R., 1999. Roteiro de aula prtica n5 Efeito da temperatura, presso osmtica e concentrao de oxignio. Fac. Cincias Biolgicas, Exatas e Experimentais Universidade Mackenzie. PELCZAR, M.; REID,R. & CHAN, E.C.S., 1997. Microbiologia: Conceitos e Aplicaes. Volume I. Edta. Makron Books do Brasil. 2 edio. PELCZAR, M.; REID,R. & CHAN, E.C.S., 1997. Microbiologia: Conceitos e Aplicaes. Volume II. Edta. Makron Books do Brasil. 2 edio. pH,