Recuento de bacterias anaerobias mesfitas.

Para este ensayo se realizo el siguiente procedimiento, se preparo el agar que es SPC (Standard plate count), el cual utilizamos para 1,41g/60 ml de agua desinoisada para tres cajas de Petri y se llevo a ebullicin, luego lo esterilizamos en el autoclave a una temperatura de 121C durante 15 minutos de esterilizacin. _______________________________

Despus se prosigui a sembrar por profundidad adicionando 1 ml de la dilucin de 10-1,10-2, 103 en cajas de Petri previamente esterilizada. Luego se adiciona el medio de cultivo y con movimientos circulares homogenizamos la muestra con el medio de cultivo, finalmente rotulamos las cajas y las envolvemos en papel film y las dejamos en incubacin a 37C durante 24 horas. Posteriormente se hace lectura de las unidades formadoras de colonia.

Recuento de clostridium. Para esta prueba de utilizo el medio de cultivo SPS (sulfito polimixina sulfadiasina) utilizando 1.2g/30 ml de agua desionisada para tres tubos de ensayo, el medio de cultivo se mando a ebullicin y posteriormente a esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121C.

Luego se prosigue a tomar 1 ml de cada dilucin, sea de 10-1, 10-2, 10-3. Y son sometidas a proceso trmico de 80C durante 15 minutos, esto con el fin de activar al microrganismo. Pasado el periodo de tratamiento se hace un choque trmico con agua fra, se adiciona el medio en los tubos, homogenizndolo y dejando que gelifique. Luego se llevan los tubos a cmara de anaerobiosis entre 48 a 72 horas a una temperatura de 37C

Recuento de mohos y levaduras. En la prueba para determinacin de mohos y levaduras, se utiliz el medio de cultivo oxitetraciclina glucosa agar (OGY), donde se hicieron los clculos para tres cajas de Petri para cada dilucin. Durante el procedimiento se tomaron de a 1 ml de las diluciones 10-1, 10-2, 10-3. Que se adicionaron en las cajas de Petri y posteriormente se adiciono el medio de cultivo, homogenizndolo con movimientos circulares, se sellaron las cajas de Petri con papel vinipel y dejaron en incubacin a 25C de 5 a 7 das.

Recuento de coliformes y Escherichia Coli.

Esta prueba se utiliz el agar EMB (Eosin Methylene Blue Agar) el cual nos sirve para poder determinar las 2 cepas bacterianas ya que es un medio selectivo, se prepar el Agar utilizando 2.25g Agar EMB/60ml de agua desionizadase diluyo y se llev a ebullicin

Deteccin de Salmonella Spp. La determinacin de Salmonella se realiz utilizando agua Peptonada 4,5g/225ml al 10%, al cual se le adiciono 25g de muestra, este fue el Pre-Enriquecimiento, se dej en la incubadora por un periodo de 18-24h/37C. Pasado este periodo se prosigui a realizar el Enriquecimiento se toma o.1ml y se pasa al el medio Caldo Cistila el cual se prepar utilizando 23g Agar/10ml de agua desionizada la cual paso por autoclave para esterilizar. Esto se llev a incubacin a un periodo de 18-24h/37C. Pasado este periodo de continuo con la siembra la cual se efecta realizando la tcnica por estras con una asa bacteriolgica se introduce en el Enriquecimiento y se siembra en el medio seleccionado el cual fue se prepar 76g de HE (Hektoen) en 20 ml se diluyo y se llev a ebullicin lego se autoclavo. Por ltimo se llev a incubacin por un periodo de 18-24h/37C. Pasado este tiempo se realiz la lectura. Materiales 1 Erlenmeyer 5 tubos de enssayo 10 cajas Petri 1 Gradilla 1 vidrio de reloj 1 espatula Papel Kralf balanza analtica Mechero de bunse Atoclave