Patente de título de la aplicación

:
Preparación y uso de Pouteria Lucuma Extract

Resumen:
Un método de preparación de Pouteria lúcuma extracto fue desarrollado que comprende la extracción del aceite de la nuez. El aceite lúcuma tuerca (LNO) fue eficaz para inducir la migración celular, la regeneración del tejido y mejorar la cicatrización de heridas. El aceite de nuez de lúcuma proporciona un agente que es útil para el mantenimiento terapéutico o cosmético de la piel y el cuero cabelludo.

Reclamos:

1 Un método de preparación de un extracto de Pouteria lúcuma tuerca que comprende:. (A) moler una tuerca Pouteria lúcuma a un polvo, (b) extracción de los aceites de nuez de polvo con el líquido, y (c) retirar el fluido, para obtener un aceite. 2. El método de la reivindicación 1, que comprende además la preparación de una formulación farmacéutica que comprende el aceite de nuez. 3. El método de la reivindicación 1, que comprende además la preparación de una formulación cosmética que comprende el aceite de nuez. 4. El método de la reivindicación 1, en el que el fluido se selecciona del grupo que consiste en heptano y hexano.

5. El método de la reivindicación 4, en el que el líquido se elimina por evaporación. 6.El método de la reivindicación 4, en el que la proporción de polvo de tuerca a fluido es entre 1 g: 10 ml y 1 g: 100 ml, peso a volumen. 7. Un extracto de Pouteria lúcuma tuerca que comprende el aceite de nuez. 8. Una formulación cosmética que comprende el extracto de la reivindicación 9. La formulación de la reivindicación 8, que comprende además un antibiótico. 10. La formulación de la reivindicación 8, que comprende además una piel de la salud agente promotor. 11. La formulación de la reivindicación 10, en el que la salud de la piel agente promotor se selecciona del grupo que consiste en manteca de karité, un antioxidante, un retinoide, un humectante, un agente promotor de colágeno, una pantalla solar, un ácido alfa hidroxi, jojoba aceite, un extracto de seda, palmitato de isopropilo, metil parabeno y propil parabeno. 12. La formulación de la reivindicación 11, en el que el antioxidante se selecciona del grupo que consiste en vitamina A, vitamina C y vitamina E. 13. La formulación de la reivindicación 8, formulada como una crema, loción, gel, pasta o spray para aplicación a la piel o el cuero cabelludo. 14. Un método de curación de heridas que comprende administrar una dosis eficaz de un extracto de nuez de Pouteria lúcuma. 15. Un método de inducción de la migración celular, que comprende poner en contacto una célula con el extracto de la reivindicación 16. El método de la reivindicación 15, en donde la célula es un fibroblasto. 17. Un método de mejorar la regeneración de los tejidos que comprende poner en contacto un tejido capaz de regeneración con Pouteria lúcuma aceite de nuez, en el que el tejido se regenera a

una velocidad que es mayor que la exhibida por el tejido en ausencia del aceite de nuez. 18. Un método para promover la curación de la piel que comprende el contacto de la piel con una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación. 19. Un método de reducción de envejecimiento de la piel que comprende el contacto de la piel con una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación. 20. Un método de curación de una quemadura de la piel que comprende el contacto de la piel se queme con una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación 7 en una cantidad eficaz para promover la curación de la piel en un paciente en necesidad del mismo.

21. El método de la reivindicación 20, en el que la composición farmacéutica comprende además un antibiótico.

22. Un procedimiento para reducir, eliminar o prevenir una condición de la piel seleccionado del grupo que consta de acné, envejecimiento de la piel y la piel arrugada que comprende contacto con la piel con una formulación cosmética que comprende el extracto de la reivindicación

23. El método de la reivindicación 22 en el que la condición de la piel es la piel arrugada.

24. El método de la reivindicación 22 en el que la condición de la piel es el envejecimiento de la piel.

25. El método de la reivindicación 22, en contacto con la piel con el extracto de la reivindicación 7 resulta en un aumento relativo en la expresión de una proteína seleccionada del grupo que consiste de colágeno y elastina en una célula de la piel.

26. El método de la reivindicación 22, en el que la formulación cosmética comprende además una composición anti-acné.

30. Aceites de soja. clindamicina . el agua de turba. que se incorpora aquí por referencia en su totalidad. Más particularmente. el azufre. Descripción: DECLARACIÓN DE CASOS RELACIONADOS [0001] Esta solicitud reivindica el beneficio de prioridad de la solicitud provisional de patente de EE. canola y se encuentran entre los más consumidos en todo el mundo. maíz. N º 61/199. 29. 28. ácido azelaico. y una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación 7 en la superficie inferior. limo resorcinol. en el que la formulación cosmética comprende además un antibiótico. El método de la reivindicación 27. eritromicina y sulfacetamida de sodio. peróxido de benzoilo.27. ANTECEDENTES [0003] Los aceites comestibles de origen natural son algunos de los productos más consumidos en la industria alimentaria. El parche de la reivindicación 29. un adhesivo sobre la superficie inferior. el ácido retinoico. 029 presentada 12 de noviembre 2008. adapalene. que comprende además un antibiótico en la superficie inferior. pero se sabe poco acerca de las composiciones de . Pouteria lúcuma.UU. por ejemplo. Un parche transdérmico que comprende un material de almohadilla que tiene una superficie superior y una superficie inferior. el ácido glicólico. El método de la reivindicación 26. turba. los extractos se obtienen a partir de especies de Pouteria. permetrín. CAMPO [0002] La descripción se refiere a extractos de plantas para uso terapéutico. en el que la composición anti-acné se selecciona del grupo que consiste en ácido salicílico.

es un árbol frutal originario de las tierras altas del oeste de Chile. es una fuente frecuente de problemas estéticos. Hay pocos informes publicados sobre los componentes bioactivos que se encuentran en la lúcuma. incluyendo la curación quemaduras. En consonancia con la realidad de las preocupaciones estéticas. reduciendo así las complicaciones asociadas con heridas de la piel. Concomitante con este crecimiento es el aumento continuo en la investigación relacionada con la industria cosmética y cuidado de la piel. la hidratación y el color. a excepción de los que presentan los componentes nutricionales de la pulpa del fruto. incluyendo la presencia y composición de los aceites vegetales. la fase proliferativa. Se pueden comer frescas. Mejorando el cuerpo el proceso natural de cicatrización de la herida sería deseable para acelerar los tiempos de recuperación después de la lesión. por ejemplo. Los frutos son ovalados y de color amarillo en la madurez. La piel. la industria cosmética y cuidado de la piel han sido durante mucho tiempo importantes sectores de comercio y continuará creciendo a medida que más cosmecéuticos eficaces se desarrollan. Además. la lúcuma no se cultiva fuera de su región endémica. dado que los aceites vegetales son una fuente importante de ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) con propiedades que promueven la salud. el proceso natural de envejecimiento implica cambios en la estructura y función de la piel que muchos ven como la imposición de cambios perjudiciales en la propia imagen. con una carne de color amarillo seco. se asocia con la pérdida no deseable de elasticidad. Perú y sur de Ecuador. una curación más rápida sería limitar el tiempo durante el cual las infecciones oportunistas puede afianzarse. pero comúnmente la pulpa del fruto se deshidrata y se utiliza como saborizante en postres y bebidas. y una fase de remodelación. Esta relativa falta de conocimiento es sorprendente. también llamado lucmo o lúcuma. el órgano más visible para los demás.menor cultivos conocidos. [0006] Además de los problemas de salud. Un paradigma de la curación de heridas divide el proceso en una fase inflamatoria. [0005] Se sabe comúnmente que la curación de heridas se produce como un proceso multietapa. Envejecimiento de la piel. [0004] lúcuma. Por otra parte. los seres humanos también tienen problemas estéticos relacionados con su apariencia y la imagen que se proyecta. A excepción de unas pocas plantaciones en Costa Rica. entre varias otras propiedades de la piel que. . en el ojo del público. Más allá de cicatrices en la piel asociado a la cicatrización inadecuada o subóptima. cicatrices en la piel se asocia con condiciones tan generalizados como el acné.

Los esfuerzos de los cosméticos cuidado de la piel / de la industria para hacer frente a estos problemas ha llevado al aumento de la investigación se ha señalado. En otra realización. que comprende moler la tuerca en un polvo. y pérdida de elasticidad. En algunas formas de realización. Ktze. y cosméticamente útil para mejorar la apariencia de la piel (por ejemplo.cambiar a peor con el tiempo. RESUMEN [0008] La divulgación satisface al menos una de las necesidades mencionadas anteriormente en la técnica de proporcionar composiciones que comprenden un extracto de planta terapéuticamente útiles en métodos terapéuticos para fines de curación. por ejemplo. En una realización del método. En algunas . en una realización relacionada. que se añade al polvo de tuerca en una proporción que es entre 1 g: 10 ml y 1 g: 100 ml (peso tuerca: volumen de fluido). por ejemplo. Estas composiciones y métodos contribuir a un ahorro significativo en los costos de salud y / o cosméticos. entre otros. ya que la industria se esfuerza por ofrecer al público productos que fiable y eficaz afectar la apariencia estética para mejorar. el fluido. el líquido se elimina por evaporación. incluyendo el acné. la tuerca se seca primero y después se muele para el polvo. el método comprende además la etapa de preparación de una formulación farmacéutica o cosmética que contiene el aceite de nuez. así como para reparar los defectos de la piel. el líquido usado se selecciona del grupo que consiste de heptano y hexano (por ejemplo. En una realización. [0009] Un aspecto de la descripción proporciona un método para preparar un extracto de la tuerca de Pouteria lúcuma. incluyendo la piel arrugada) y para mantener la piel saludable. [0007] Así pues. extraer el polvo de la tuerca con el líquido y eliminación del fluido a obtener aceite de nuez de lúcuma (LNO). Una condición de clásico. existe en la técnica una necesidad de desarrollar nuevos productos terapéuticos y / o cosméticos y métodos para aumentar la velocidad y la eficacia de la curación de heridas y / o para abordar los problemas cosméticos con enfermedades de la piel tales como cicatrices. tales como la curación de heridas y quemaduras curación. arrugas. Pouteria lúcuma O. la piel no deseada con frecuencia como una señal de paso de los años es la piel arrugada. envejecimiento. signos de envejecimiento de la piel. mientras que la mejora de los procesos de curación y la elevación de la calidad de vida de los segmentos importantes de la población humana. heptano) y. heptano o hexano.

y propil paraben. loción. acetonitrilo. 1:75. secundarios. la vitamina C o la vitamina E. disolvente. En aún otras realizaciones. palmitato de isopropilo. La salud de la piel agente promotor puede ser manteca de karité. . En algunas realizaciones. 1:45. 1:60. tales como heptano o hexano. por ejemplo. heptano o hexano. un ácido alfa hidroxilo. alcoholes primarios. 1:70. diclorometano. un extracto de nuez Pouteria lúcuma que comprende el aceite de nuez se proporciona. emulsión.realizaciones. 1:95. En algunas realizaciones. por ejemplo. dispersión. por ejemplo. [0010] Según otro aspecto. 1: 40. un antioxidante. un humectante. 1:90. utilizado para la extracción. la formulación cosmética comprende un antibiótico. 1:20. pasta o spray para aplicación. gel. un retinoide. un agente promotor de colágeno. y compuestos orgánicos ligeramente polares tales como lineales o ramificados. que pueden dar lugar. 1:65. Preferiblemente. por ejemplo. o terciarios. El antioxidante puede ser la vitamina A. aceite de jojoba. y cualquier fluido biocompatible puede ser usado en las composiciones fitomedicinales. Fitomedicinales composiciones de acuerdo con la divulgación comprenden un extracto de nuez de lúcuma como se describe aquí. acetato de etilo. [0012] En otro aspecto. que se tuerca en una relación de aproximadamente 1:10. 1:50. 1:80. La divulgación comprende una variedad de fluidos para la preparación de los extractos de nuez de lúcuma. fluido. cada uno puede ser formulado como una crema. por ejemplo humanos. 1:30. acetona. ó 1:100 (peso: volumen). La composición fitomedicinal y la formulación cosmética. una composición fitomedicinal se proporciona que comprende un extracto de Pouteria lúcuma tuerca que comprende el aceite de nuez. el añade al polvo de 1:15. así como dióxido de carbono supercrítico. que son adecuados para la administración a mamíferos vivos. el aceite de nuez es al menos parcialmente disuelto en el fluido. una pantalla solar. metil paraben. Cualquier fluido que se describe aquí se puede utilizar en el proceso de extracción en la preparación de una composición fitomedicinal. metanol. la descripción proporciona una formulación cosmética que comprende el aceite de nuez. [0011] Según otro aspecto. o solvatación del aceite de nuez de lúcuma. un extracto de seda. 1:55. Fluidos de ejemplo incluyen pero no se limitan a no polares compuestos orgánicos tales como cloroformo. 1:35. 1:85. el fluido es heptano. 1:25. etanol y glicol. la formulación cosmética comprende una piel de la salud agente promotor. alcanos. isopropanol.

[0015] Todavía otro aspecto es un método de cicatrización de una quemadura de la piel que comprende el contacto de la piel se queme con una composición farmacéutica que comprende el extracto de P. limo resorcinol. eliminar o prevenir el envejecimiento de la piel o de la piel arrugada. envejecimiento de la piel y la piel arrugada que comprende contacto con la piel con una formulación cosmética que comprende el extracto descrito en la presente memoria. la composición farmacéutica comprende además una piel de la salud agente promotor. adapaleno. En una realización preferida. la composición farmacéutica comprende además un antibiótico. y puede inducir la expresión de colágeno y / o elastina. las formulaciones cosméticas de acuerdo con la divulgación antagonizar reducción en la expresión de colágeno y / o elastina. En un aspecto relacionado. En algunas realizaciones. la descripción proporciona un apósito para la entrega de una composición de la divulgación. En un aspecto relacionado. turba. [0014] Otro aspecto se refiere a un método de mejorar la regeneración de los tejidos en contacto con un tejido capaz de regeneración con aceite de P. en el que el apósito comprende una composición que comprende un aceite de nuez . clindamicina. [0017] En otro aspecto. permetrín. En otro aspecto. azufre. [0016] Aún otro aspecto es un método para reducir. la célula es un fibroblasto. En una realización relacionada. la descripción incluye un método para promover la curación de la piel que comprende el contacto de la piel con una formulación que comprende el extracto de aceite de nuez. peróxido de benzoilo. se describe aquí un método de inducción de la proliferación celular por contacto una célula con LNO. la formulación cosmética comprende además una composición anti-acné y / o un antibiótico. un extracto que comprende lúcuma aceite de nuez. es decir. eritromicina y sulfacetamida de sodio. agua turba. tuerca lúcuma modo que el tejido se regenera a una velocidad que es más rápida que es exhibida por el tejido en ausencia de la tuerca aceite. eliminar o prevenir una condición de la piel seleccionado del grupo que consta de acné. ácido retinoico. ácido glicólico. ácido azelaico. En realizaciones atención a los métodos de reducir.[0013] Sin embargo. tuerca lúcuma en una cantidad eficaz para promover la curación de la piel en un paciente en necesidad del mismo. otro aspecto es un procedimiento para estimular la curación de heridas que comprende administrar una dosis eficaz de la composición fitomedicinal de la divulgación (LNO). la composición anti-acné puede ser ácido salicílico. En un aspecto.

Después de la aplicación de la composición tópica para el tejido comprometido. [0022] la figura. [0018] En otro aspecto. En una realización relacionada. El porcentaje de cierre de la . el tejido puede ser cubierto con un apósito. La figura 2 muestra los resultados de la cicatrización de heridas y modelos in vivo de regeneración. se dan a modo de ilustración solamente.de lúcuma. que la descripción detallada y los ejemplos específicos. un parche transdérmico que comprende un material de almohadilla que tiene una superficie superior y una superficie inferior. La figura. 4 muestra un curso de tiempo de efecto in vivo de la cicatrización de heridas LNO. La revelación puede entenderse mejor por referencia a las figuras de los dibujos en combinación con la descripción detallada de las realizaciones específicas aquí presentadas. 2B muestra los resultados cuando tailfin primordios de las larvas de pez cebra 5-días de edad (n = 6) fueron amputadas justo posterior a la notocorda. La figura. porque varios cambios y modificaciones dentro del espíritu y alcance de la descripción serán evidentes para aquellos expertos en la técnica a partir de esta descripción detallada. [0019] Otras características y ventajas de la presente descripción se harán evidentes de la siguiente descripción detallada. sin embargo. un adhesivo sobre la superficie inferior. y (B) mezcla industria alimentaria estándar de 37 FAMEs. (A) Cromatogramas de LNO 10 de dilución. [0021] la figura. Breve descripción de los dibujos [0020] El siguiente dibujo forma parte de la presente memoria descriptiva y se incluyen para ilustrar adicionalmente aspectos de la divulgación. el parche comprende además un antibiótico. [0023] la figura. La figura 2A muestra los resultados de un modelo de cicatrización de heridas. 3 proporciona un perfil cromatográfico de FAMEs de LNO analizados por GC-MS. [0024] la figura. 1 es un gráfico de barras de la migración de células de fibroblastos in vitro. aunque indican realizaciones preferidas de la descripción. y una composición farmacéutica que comprende un aceite de nuez de lúcuma en la superficie inferior. tanto LNO y estándares se inyectaron a 100 mg / ml. Se debe entender.

5 muestra la progresión de la cicatrización de la herida dérmica inducida por LNO. 500 y 1000 g / ratón. Humanos fibroblastos neonatales fueron marcados con la sonda fluorescente verde de calceína-AM. El aumento de la fluorescencia GFPpositivas las células endoteliales 48 horas después de la amputación (hpa) de aleta de la cola era dependiente de la dosis.05 vs vehículo). n = 4). p = 0. [0025] la figura.079 vs control). De izquierda a derecha: el tiempo cero (t = 0). Scratched fibroblastos fueron tratados con LNO 60 mg / ml (n = 3) o con concentraciones equivalentes de ácidos grasos puros (FAS). PBS pH 7. [0027] la figura. 6 ilustra el efecto sobre la regeneración de LNO aleta de la cola y la angiogénesis en larvas de pez cebra transgénico. [0029] la figura. vehículo (carboximetilcelulosa 50. Imágenes representativas de la progresión de la curación de heridas en ratones después de la aplicación diaria de LNO (500 y 1000 mg / mL). Fotos de las heridas fueron tomadas en días alternos durante once días después de la piel heridas (DPSW).4) y CGS (10 ug / ratón).5%. 8 muestra el efecto sobre la migración de LNO fibroblastos humanos. Las imágenes digitales fueron tomadas 72 horas después de comenzar el experimento. Los resultados se expresaron como media ± error estándar de nueve repeticiones (* p = 0. 7 se establece el efecto dependiente de la dosis de LNO una repoblación aleta caudal endotelial de las larvas de pez cebra transgénico. 9 ilustra el efecto de LNO en la migración de células de fibroblastos en el ensayo de rayado.herida se evaluó durante 11 días de la aplicación tópica de LNO 200. ácido oleico (OA. LNO 40 ug / mL (LNO 40) y LNO 60 ug / mL (LNO 60). B. ANOVA de un factor seguido por el test de Dunnett para comparaciones se aplicó entre el grupo tratado y el vehículo. (A) representativos micrografías fluorescentes de GFP-positivas las células endoteliales durante la regeneración de aleta de la cola inducida por 100 ug / ml de LNO (LNO 100). Vehicle. [0026] la figura. Cuantificación de la regeneración de la cola células endoteliales 48 horas después de la amputación (hpa) de la aleta caudal. [0028] la figura. ácido linoleico (LA. El efecto de LNO sobre la migración de fibroblastos se evaluó usando la ORIS cell ® ensayo de migración como se describe en los Ejemplos. n = 3) o 10% fetal suero . Los resultados se expresaron como media ± error estándar de nueve réplicas. Los valores se presentan como media ± error estándar de cinco réplicas (* p <0.003.

Morfología nuclear de la no-senescentes fibroblastos dérmicos fue alargada (flechas blancas). Newman-Keuls prueba de comparación múltiple).01 vs LPS. El efecto de LNO y AF se evaluaron como se describe en los Ejemplos. abscesos. Estas células se observaron bajo un aumento de × 100. LNO causó una disminución leve en las fibras de estrés (F-actina) y el aumento de la inmunoreactividad para vinculin. One way ANOVA. doblado. 13 muestra el efecto de LNO en la senescencia celular.bovino (FBS) como control positivo. fragmentada o de gran tamaño) se observó en los fibroblastos senescentes (flechas de color naranja). [0033] la figura. One way ANOVA. 11 establece el efecto de LNO en LPS inducido por la producción de óxido nítrico en células RAW 264. [0032] la figura. LPS aumentó significativamente la producción de NO en las células no estimuladas (control). En las células control. [0031] la figura.001 frente a LPS ** p <0. 10 muestra el efecto sobre la expresión de LNO vinculina y estrés formación de fibras en los fibroblastos. para el tratamiento de úlceras tróficas. Posteriormente. las células se tiñeron con naranja de acridina y se fotografiaron con un aumento de × 25.01 vs FBS. el fruto de lúcuma. o semilla. Los valores son el promedio de cuatro repeticiones ± error estándar (** p <0. El uso de una tuerca de lúcuma . y similares. Morfología anormal (globular. 12 muestra el efecto de LNO en la senescencia celular. LPS (1 mg / mL) se añadió a cada pocillo y se incubaron durante 8 horas. LNO disminución de LPS inducido por la producción de NO de una manera dependiente de la concentración. Newman-Keuls prueba de comparación múltiple). El extracto activo es útil para la cicatrización de heridas. Los resultados se expresan como media ± error estándar (*** p <0.7. por ejemplo. Células RAW fueron pretratados con vehículo solo o bien LNO durante 2 horas. la mayoría de los núcleos mostraron un fenotipo senescente no clásica con forma alargada nuclear y tamaño homogéneo. Núcleos de no senescente (control) y H 2 O 2 inducida por la senescencia (H 2 O 2 y H 2 O 2 + LNO). [0030] la figura. Descripción detallada [0034] La descripción proporciona un método de preparación de un extracto de la tuerca. quemaduras. incisiones quirúrgicas. Fibroblastos dérmicos humanos fueron tratados con LNO 60 mg / mL o del vehículo y con tinción doble con rodamina faloidina (rojo) y mAb anti-vinculina (verde).

extraer para tratar tales condiciones. es decir. heptano) los extractos de aceite de nuez de lúcuma (LNO) y medidas de la actividad en bioensayos de LNO varias pertinentes para la curación de heridas.6%). con su composición única de ácido graso. proporciona formas terapéuticas útiles que se preparan fácilmente. En un modelo murino de la cicatrización de heridas. [0036] El fruto de Pouteria lúcuma O. o mejorar un síntoma de una herida. o para mejorar o aliviar al menos un síntoma de dicha enfermedad. GC-MS análisis de los ésteres metílicos de ácidos grasos (FAMEs) derivados de LNO mostró cinco ácidos grasos principales.2% del contenido total de aceite de la tuerca de lúcuma. que no es comestible y que normalmente se desecha cuando el fruto es consumido o procesado. la composición de la que nunca se ha investigado. LNO también promueve la regeneración de la cola de aletas en larvas de pez cebra transgénico 48 horas después de la amputación. Esta descripción proporciona una descripción de la composición bioquímica y efectos farmacológicos .9%). comúnmente denominada como "lúcuma" en Chile y Perú. relativamente barato y segura. Para facilitar la comprensión de la descripción. el gasto de prevenir o tratar una herida. las siguientes definiciones se proporcionan expresas. Ktze. LNO promovió significativamente la migración de los fibroblastos humanos y la disminución de LPS inducido por la producción de NO en los macrófagos. Además. [0035] Se describe aquí la composición bioquímica de no polar orgánico (por ejemplo. LNO no mostraba efecto antibacteriano o anti-hongos. incluyendo la curación de quemaduras. y el tiempo perdido para herir recuperación. Los resultados indican que la curación de heridas y propiedades antiinflamatorias de LNO. o para prevenir o reducir la gravedad de dicha condición. Lucuma fruta consiste en un comestible parte carnosa exterior y una semilla interior duro. se utiliza beneficiosamente en una variedad de aplicaciones farmacológicas y de cosmética.9%) y ácido γ linolénico (2.9%). Lúcuma tuerca. ácido oleico (27. Los beneficios para el individuo son evidentes en la reducción del tiempo necesario para la recuperación de una herida. Fibroblastos LNO-tratados mostraron cambios en la expresión de vinculina y en la formación de fibras de estrés.9%). el ácido linoleico (38. es ampliamente consumido en estos países. Un adicional de 16 ácidos grasos se encuentran en concentraciones menores. También existe prácticamente ninguna información sobre los efectos de lúcuma en la salud humana. es rico en aceite. ácido palmítico (18. ácido esteárico (8. que en conjunto representan el 97. sin embargo. LNO mejorado significativamente cierre cutáneo herida. o tuerca.

se refiere a uno o más materiales de formulación adecuados para lograr o facilitar la entrega de un extracto de P.de Lucuma Nut Oil (LNO). o se encuentra dentro de las células de la planta. puede ser necesario para obtener la sustancia o composición de la planta o parte de planta. [0037] Tal como se utiliza aquí. mejorar la textura de la piel. y puede determinarse fácilmente por un experto en la técnica usando procedimientos convencionales para la administración sistemática de agentes terapéuticos. un exudado). la angiogénesis. lúcuma que es capaz de provocar un cambio medible en el tiempo de cicatrización de heridas. Tales . reponer los nutrientes esenciales de la piel. reducir tamaño de poro de piel. migración celular. como se entiende en la técnica. reducir las arrugas. reducir o retardar el envejecimiento de la piel. Una dosis eficaz de un extracto de nuez de Pouteria lúcuma es de entre aproximadamente 200 g por herida (o aplicación tópica) por día a aproximadamente 1. independientemente de si la sustancia o composición se encuentra externo a la planta (es decir. se encuentra dentro de la planta o parte de la planta pero fuera de las células de los mismos. el crecimiento de bacterias y hongos y cicatrización de heridas mediante el uso de varios in vivo y en modelos in vitro. o en general. Específicamente se describen aquí los resultados experimentales completos de GC-MS análisis de los ésteres metílicos de ácidos de LNO y resultados experimentales establecer el efecto de LNO sobre la inflamación. promover la piel sana. elasticidad reparación. [0039] Los términos "vehículo farmacéuticamente aceptable" o "vehículo fisiológicamente aceptable" tal como se utiliza aquí. lúcuma como una composición farmacéutica. [0038] El término "extracto" como se usa aquí significa una sustancia o composición obtenida de una fuente de planta o parte de planta. reparar o prevenir la decoloración. Químico y / o la acción física. reducir la flacidez de la piel. El valor exacto de una dosis eficaz varía en función de la sensibilidad y el tamaño de cada paciente. el término "dosis efectiva" significa una dosis que comprende un extracto de P. mejorar la hidratación de la piel. [0040] El término "salud de la piel agente promotor" significa cualquier composición conocida en la técnica para disminuir la inflamación.000 g por herida (o aplicación tópica) por día. mejorar la producción de colágeno. la senescencia celular. Una dosis eficaz ejemplar es de aproximadamente 500 g por herida / aplicación por día. mejorar el tono de la piel. reducir o eliminar el acné.

p 249-297 (1997). [0044] parches ejemplares incluyen (1) un parche de tipo matriz. Preferentemente. disminuyó lípidos de la superficie. y una susceptibilidad creciente a traumático púrpura o hematomas capa subcutánea de la piel muestra atrofia grasa en las mejillas y extremidades . (2) el parche de tipo depósito. cada vez más evidente. . [0041] "envejecimiento de la piel" tiene un significado aceptado en la técnica y se caracteriza por algunas o todas de las siguientes propiedades: Epidermis muestra una reducción progresiva en los melanocitos y células de Langerhans disminución de la densidad. y reducir el frotamiento mecánico. epidermis superior.agentes incluyen. ácidos alfa hidroxi. la microcirculación y el sudor disminuyen gradualmente dando lugar a disminución de la termorregulación y la disminución de la sensibilidad a quemar. incisión. Inc. reducir el tiempo de demora. Interpharm Press. extractos de seda. (Ghosh. aloe vera. y para minimizar la absorción en el sistema circulatorio. Estos parches son bien conocidos en la técnica y están disponibles generalmente en el mercado. antioxidantes. y en la dermis. con lo que la colocación del parche adyacente / composición a la superficie del tejido comprometido . vaselina. de tal manera que el parche se puede colocar sobre una herida. la disminución de la hidratación.. filtros solares. retinoides. C. palmitato de isopropilo. [0043] Como se usa en la presente memoria "parche" comprende una composición tópica de acuerdo con la divulgación y una capa de recubrimiento. pero no están limitados a. hay una pérdida progresiva de la elasticidad. glándulas nervios. avascular y menos densa. [0042] "piel arrugada" se le da el significado que ha adquirido en la técnica y se refiere a la piel en la que la elasticidad se ha reducido hasta tal punto que los pliegues o arrugas. vitaminas A. manteca de karité. sistemas de fármacos transdérmicos y tópica Entrega. promocionar absorción uniforme. dermis se vuelve relativamente acelular. incorporado aquí por referencia. agentes promotores de colágeno. y E. y (4)-drogas en la monolítico adhesivo de tipo parche. aceite de jojoba. metil parabeno y propil parabeno. El envejecimiento de la piel también se muestra cada vez mayor decoloración y pueden mostrar manchas cutáneas. o grabar. TK. et al. el parche está diseñado para maximizar el suministro de la composición a través del estrato córneo. lanolina.). (3) el laminado multi-fármaco en adhesivo de tipo parche.

al menos uno de los cuales es terapéuticamente activo en la promoción de la curación de heridas o quemaduras.[0045] El término "vendaje". jaimiqui M. y otros. P. "Vestir" incluye los revestimientos tales como un vendaje. por ejemplo. lo que proporciona una mayor comodidad. de la fruta de la planta. y para retrasar la senescencia. Estos apósitos permiten el enfriamiento del sitio del dolor. que es un extracto terapéuticamente útil de la tuerca. viridis). sandwicensis y especies del género Manilkara relacionada. pero no se limitan a. los cuales permiten calor y transporte de vapor. incluyendo sus muchos cultivares. campechina). El LNO comprende una pluralidad de compuestos. Mamey (P. y varios revestimientos inertes. El extracto de nuez que se conoce como un aceite en un sentido amplio. árbol Bully (P. El término "vendaje" también abarca revestimientos no tejidas o tejidas. y puede . El género Pouteria de plantas taxonómicamente se organizó dentro de la familia Sapotaceae de plantas con flores perteneciente a la Ericales orden. Frutao (P. Pouteria Petróleo [0048] Las composiciones de acuerdo con la divulgación comprender un aceite de Pouteria. tal como una planta de el género Pouteria. zapota van Royen). tales como plantas del género Manilkara. como se usa aquí. que puede ser porosa o no porosa. hypoglauca). en particular revestimientos elastoméricos. caimito). o semilla. multiforme). Curiola (P. una envoltura de película de plástico o de otra película no absorbente. especies de Pouteria tales como lúcuma (Pouteria lúcuma). [0046] El término "aceite lúcuma tuerca" o "LNO" se usa indistintamente con "aceite Pouteria" para referirse a la composición terapéutica que extrae de la tuerca de la fruta de una planta de la familia Sapotaceae de plantas. Negro manzana (P. torta). sapota). bidentata). significa una cubierta diseñada para proteger y administrar una composición o sobre o en la cubierta. así como ausubo (M. ramiflora). Abiu (P. canela manzana (P. Canistel (P. por ejemplo. Sapodilla (M. por ejemplo. La Planta de Pouteria [0047] La presente aceite terapéutico en las composiciones de acuerdo con la divulgación se obtiene de una planta del género Pouteria de plantas o de una planta en un género estrechamente relacionado con Pouteria. Pouteria lúcuma. Verde Sapote (P. australis).. en la promoción de la regeneración o bioregeneration. Las plantas adecuadas que sirven como fuentes de aceite de la terapéutica incluyen.

el término "aceite Pouteria" se usa en referencia a esos extractos. el líquido es un disolvente para LNO. acetonitrilo. la promoción de la regeneración de tejidos y reducir. heptano o hexano y. que se utiliza cualquiera de los componentes de ácidos grasos de LNO. ácido oleico. por ejemplo. alcanos. En algunas realizaciones. La tuerca de extractos de acuerdo con la divulgación no comparten la propiedad de ser al menos parcialmente soluble en disolventes orgánicos no polares. por ejemplo. el fluido es un medio en el que la LNO es dispersable. En general. Además. Como se ha señalado en otra parte de esta descripción. en particular.incluir compuestos que no son aceites químicos. acetona. tales como ácidos orgánicos. [0049] La descripción también proporciona el uso terapéutico o cosmético de los componentes de LNO y. y similares. tal como ácido linoleico. envejecimiento de la piel o de piel arrugada. la promoción de la cicatrización de heridas. por esa razón. el fluido de extracción es un compuesto no polar orgánico o un fluido orgánico ligeramente polar que es líquida a temperatura ambiente. en contacto con una célula. "aceite Pouteria" también se usa de manera intercambiable con "aceite de nuez lúcuma" o "LNO". o componentes purificados de la LNO (por ejemplo. hidratos de carbono. uno o más ácidos grasos). los métodos comprenden poner una cantidad terapéuticamente o cosméticamente eficaz de un extracto que contiene LNO. tejido u órgano. acetato de etilo. Fluido [0051] LNO se extrae de la nuez o semilla de una planta de acuerdo con la invención utilizando un fluido como se describe en la presente memoria. ácido palmítico. debido a que muchos de los extractos de nueces terapéuticamente beneficiosos se obtienen de especies del género Pouteria. los extractos se términos generales se conoce como aceites. a pesar de que algunos extractos de planta de acuerdo con la divulgación se obtienen de especies de los géneros relacionados con el género Pouteria. en las composiciones de acuerdo con la divulgación. etanol. [0050] Varios aspectos de la divulgación sobre los métodos para inducir la migración celular. diclorometano. incluyendo curación de quemaduras. eliminar o prevenir una condición de la piel tales como el acné. . en forma aislada singular o en combinaciones de al menos dos de tales componentes. pero en otras realizaciones. Típicamente. por ejemplo. el género Manilkara. Fluidos de ejemplo para la extracción de LNO son cloroformo. la piel. ácido esteárico y ácido γ linolénico.

lúcuma aceite de nuez descritos en este documento se extrae usando un fluido tal como heptano que proporciona extrajo LNO que no requiere un fraccionamiento adicional. en su caso. [0052] El proceso de extracción Pouteria [0053] Un método de acuerdo con la descripción es un método de preparación de un extracto de Pouteria lúcuma. una combinación de compuestos en cualquier proporción puede funcionar como un fluido de extracción. Un rango de tamaño adecuado para partículas tuerca sobre molienda o pulverización es de 750 micras a 1 mm de diámetro. destrozado. dióxido de carbono supercrítico. roto. en ciertas realizaciones de los métodos de extracción. Una variedad de líquidos puede ser utilizado para extraer el aceite de nuez de lúcuma. heptano y hexano. presión atmosférica. y etanol. roto. pulveriza. en el que la tuerca de lúcuma se muele en un polvo. acetonitrilo. es todo lo que hay que hacer para producir la terapéutica o cosmética de acuerdo con la divulgación. se utiliza para reducir la tuerca lúcuma a un tamaño de partícula óptimo para la extracción de aceite con un fluido particular. el aceite de nuez se extrae del polvo por un fluido. el fluido a presión se pone en contacto con la tuerca de lúcuma o carne tuerca. acetato de etilo. y dióxido de carbono supercrítico. aunque con frecuencia se lleva a cabo a 22 ° C a 65 ° C . isopropanol. pero el proceso es compatible con temperaturas elevadas en el intervalo de 22 º C a 100 º C. y el fluido se elimina para obtener un aceite . Además. un molinillo de café. El P.tales como heptano o hexano. diclorometano. molino de martillo o dispositivo similar de reducción de tamaño. por ejemplo. o la carne de fluido y la tuerca o tuerca estará en comunicación de fluido dentro de un recipiente presurizado. otros alcoholes. aunque presiones elevadas o bajas también se contemplan para la práctica de los métodos de extracción. secundarios o terciarios tales como isopropanol. La materia prima tuerca lúcuma se muele. picado. o heptano y cloroformo. o desde 22 º C a 50 º C o de 22 ° C a 37 ° C. Por ejemplo. metanol. alcoholes primarios.. por ejemplo. agrietado y / o tamizado a un tamaño y forma apropiados. la extracción de la extracción de fluido. acetona. Después de la extracción. Así. [0054] El proceso de extracción se lleva a cabo típicamente a temperatura ambiente. aunque las partículas más pequeñas y más grande será funcional y son contemplados por la divulgación. por ejemplo cloroformo. El proceso de extracción también se lleva a cabo típicamente a una presión uniforme. y de cadena lineal o ramificada. alcanos. metanol. En . tales como heptano o hexano. etanol.

vacío. todos los cuales se describen a continuación en composiciones que abordan y vías de administración de las composiciones LNO. vehículos. cremas cosméticas. Otros usos para los extractos de la descripción incluyen la administración de una dosis eficaz para eliminar. con aceptables (preferiblemente mínimo) efectos secundarios. con la composición que comprende LNO y. evaporación. Ejemplos de agentes anti-acné incluyen. que comprende excipientes. turba. Composiciones y vías de administración [0057] Las composiciones farmacéuticas y formulaciones cosméticas se administran por cualquier vía que proporciona una dosis eficaz para el sitio de acción deseado. limo resorcinol. y combinaciones de los mismos. tales como las cremas de noche. aceites. Alternativamente. maquillaje y máscaras. ácido retinoico. Alternativamente. [0056] LNO que contienen extractos pueden ser adecuados para su uso sin más procesamiento. prevenir o reducir la probabilidad de acné. Otros compuestos terapéuticos también pueden ser incluidos en las composiciones de acuerdo con la divulgación. incluyendo pero no limitado a evaporación rotatoria. sulfacetamida de sodio . agua turba. y similares. liofilización. la carne tuerca o tuerca y el fluido estará en comunicación de fluido en un recipiente a presión baja. [0055] Extractos de acuerdo con la descripción pueden ser administrados a mamíferos en una dosis efectiva que es capaz de mejorar la cicatrización de heridas. lociones. permetrín. peróxido de benzoilo. parcial o sustancialmente completa. azufre. maquillaje. geles o sólidos convencionales. cremas. Las formulaciones adecuadas piel pueden incluir líquidos tópicamente aceptables. bases y similares. lociones bronceadoras fundación. Una forma de realización ejemplar que ilustra la inclusión de un compuesto terapéutico adicional se refiere a composiciones tópicas que incluyen también un agente anti-acné. y similares. los extractos crudos se pueden procesar adicionalmente para reducir el volumen por cualquier técnica conocida. adapaleno. aglutinantes.otras realizaciones. ácido glicólico. pero no se limitan a. filtración. por ejemplo. eritromicina. ácido salicílico. pomadas. Es evidente que las composiciones de acuerdo con la descripción también puede incluir más de dos compuestos terapéuticos. ácido azelaico. reducir. Las . el extracto puede administrarse a mamíferos en una dosis efectiva que es capaz de mejorar la curación de quemaduras de la piel. protectores solares. clindamicina. por ejemplo. por ejemplo. lociones para las manos.

las cargas. esta composición se puede proporcionar en cualquier forma de dosificación farmacéutica normalmente se utiliza en los campos cosmético y farmacéutico. tales como microcristalina. polímeros naturales. ungüentos de base acuosa. alcohólica o acuosa / alcohólica o suspensión. incluyendo el cuero cabelludo. petrolato. el vehículo es una composición de vehículo miscible en agua. vaselina. o glicólico. lanolina. los conservantes. aceite vegetal. las composiciones dispersables en agua o solubles en agua.composiciones pueden contener otros ingredientes opcionales adecuados tales como vitamina A. alfa hidroxi-o alfa-cetoácidos tales como los ácidos láctico pirúvico. aceite mineral. metil o propil parabeno. colágeno. alcoholes. y pigmentos similares. las formulaciones pueden tener la forma de una solución acuosa. parafina y cera de ozoquerita. microesponjas. microesferas o microcápsulas. de una suspensión oleosa o solución. [0060] Las formulaciones según la descripción también pueden comprender adyuvantes convencionales en el campo cosmético o farmacéutico elegido entre agentes gelificantes hidrófilos o lipófilos o espesantes. composiciones tópicas. vehículo cosméticamente aceptable puede incluir aquellos hechos con uno o más ingredientes apropiados indicados anteriormente. los antioxidantes (carotenoides). [0058] La descripción proporciona una composición para uso cosmético para aplicación tópica a la piel. que es miscible en agua. agua en aceite o emulsiones de aceite en agua. de una emulsión o dispersión de un líquido o semi -consistencia líquida obtenida por dispersión de una fase grasa en una fase acuosa (0 / W) o viceversa (W / O). vaselina. En una realización. de un polvo libre o compacto para ser utilizado como es o para ser incorporado en un medio fisiológicamente aceptable (excipiente). aceite animal. celulosa. tales como xanthanes. Tal miscible en agua. y similares. o goma árabe. pero también puede incluir portador sostenida o retardada. gelatina. tales como liposomas. C y E. geles o similares. polímeros sintéticos. los absorbentes de olor. ceras orgánicas e inorgánicas. fluidos. [0059] Para la aplicación tópica a la piel. electrolitos. almidón. aloe vera. Los vehículos adecuados tópicamente aceptables incluyen agua. de un (anhidro) acuoso o acuoso / alcohólicas u oleosas gel. agentes . de una dispersión o emulsión de consistencia blanda. o también de microcápsulas o micropartículas. incluyendo que contienen agua. aditivos hidrófilos o lipófilos. perfumes. Dependiendo del método de aplicación. polioles. o de dispersiones vesiculares de tipo iónico y / o no iónico.

cera de parafina o cera de polietileno. en la fase acuosa y / o en las vesículas lipídicas y. aceite de soja. perfluoropoliéteres). [0061] Las formulaciones también pueden comprender aceites minerales (por ejemplo. de color blanco (mineral) de aceite. [0064] Las formulaciones también pueden incluir agentes gelificantes hidrófilos tales como polímeros de carboxi-vinilo (carbómero). según su naturaleza. tales como acrilato / alquil acrilato. el aceite de emú. los aceites fluorados (por ejemplo. Estos adyuvantes. [0063] Las formulaciones también pueden incluir líquidos. los aceites animales (por ejemplo. de jojoba. en particular. la fracción líquida de la manteca de karité.neutralizantes. tales como filtros solares. cera de abejas. aceites sintéticos (por ejemplo. ácido linolénico) se puede añadir a estos aceites y ceras. [0062] Las formulaciones también pueden incluir agentes emulsionantes. agentes de bloqueo de UV. ciclometicona. aceite de almendra. feniltrimeticona). los polisacáridos tales como la hidroxipropilcelulosa. los liposomas. de alcoholes inferiores. de las arcillas . aceites de silicona o ceras (por ejemplo. propilenglicol o ciertos aceites cosméticos ligeros (African aceite de moringa.1% a 10% del peso total de la composición. aceite de semilla de rosa mosqueta. que pueden o no ser solubles en el medio. aceite de albaricoque y el aceite de oliva). por ejemplo.01% a 20% o de 0. o (alquilo) copolioles de dimeticona. isoparafina hidrogenada). aceite de girasol. especialmente el etanol y el isopropanol. cera de arroz. estearato u oleato de sorbitol polioxietilenado. ácido esteárico. cera de candelilla. polímeros formadores de película. polidimetilsiloxanos lineales o cíclicos. ácido linoleico. estearato de glicerilo o laurato. copolímeros acrílicos. como gelificantes lipófilos. arcillas y gomas naturales y se pueden citar. copolímeros poliacrilamidas. aceite de aguacate. por ejemplo de 0. por ejemplo. cera de carnauba. los aceites vegetales (por ejemplo. Alcoholes grasos y ácidos grasos (por ejemplo. principios activos cosméticos y farmacéuticos con un efecto beneficioso sobre la piel o las fibras queratínicas (como las vitaminas) y materiales colorantes. el perhidroescualeno). aceite de germen de trigo). ésteres de ácidos grasos). pueden ser introducidos en la fase grasa. aceite de Purcellin. Las cantidades de estos diferentes adyuvantes son las clásicamente utilizadas en el ámbito cosmético. el aceite de vaselina.

: 55268-75-2). gentamicina (CAS Registro No. estreptograminas.: 7035603-5).: 69-53-4). macrólidos.: 7255882-8). Amoxicilina (registro CAS No. ceftazidima (Registro CAS No.: 153-61-7). Mezlocilina (CAS Registro No. Cefprozil (Registro CAS No. Ceftizoxima (Registro CAS No. oxacilina (Registro CAS No. Cefinetazole (Registro CAS No. formiato de sodio cefamandol (Registro CAS No. Loracarbef (Registro CAS No.: 10118-90-8). tales como los estearatos de aluminio. tetraciclinas. Nafcilina (Registro CAS No. tetraciclina (Registro CAS No. amikacina (Registro CAS No. carbapenems. cefuroxima (Registro CAS No. pero no se limitan a. linezolid (Zyvax).: 85721-33-1).: 70458-96-7). quinolonas. Cefetamet (Registro CAS No. ciprofloxacina (Registro CAS No.: 42540-409). norfloxacina (Registro CAS No. dicloxacilina (CAS No. Azlocilina (Registro CAS No. doxiciclina (CAS No. Registro: 389-082). ticarcilina (Registro CAS No. kanamicina (registro .: 34787-01-4). ofloxacina (Registro CAS No. ampicilina (Registro CAS No.25-0). cefixima (Registro CAS No.: 65052-63-3 ). Agentes anti-bacterianos antibióticos incluyen.: 51481-65-3).: 78110-38-0). aminoglucósidos. cefoxitina (Registro CAS No. fleroxacina (Registro CAS No. sales metálicas de ácidos grasos.: 63527-52-6). cefalosporinas. Cefsulodin (Registro CAS No.: 69712-56-7).: 88040-23-7). y fluoroquinolonas. carbenicilina ( registro CAS No.: 1403-66-3).: 62587-73-9). la sílice hidrófoba tratada.: 60-54-8). dalfopristina.modificadas como las bentonas.: 74011-58-8).: 98079-51-7). cefepima (Registro CAS No.: 79350-37-1).: 61270-58-4).: 35607-66 -0). Registro: 564 .: 121961-22-6).: 56796-20-4). minociclina (Registro CAS No. glucopéptidos.: 79660-72-3).: 61-72-3). carbacephems.: 62893-19-0). Enoxacina (Registro CAS No. ácido nalidíxico (CAS No.: 92665-29-7). Cinoxacina (Registro CAS No. oxazalidiinones. Imipenem (Registro CAS No.: 26787-78-0). monobactamas. Registro: 3116 -76-5). [0065] Las formulaciones pueden contener adicionalmente agentes antifúngicos o antibacterianos. Cefazolina (CAS Registry No. quinupristina.: 82419-36-1). Cefaclor (Registro CAS No. Penicilina G (N º de registro CAS: 61-33-6).: 4697-36-3). cefotaxima (Registro CAS No.: 37517-28-5).: 61477-96 -1). aztreonam (Registro CAS No.: 37091-660). cloxacilina (Registro CAS No. Piperacilina (Registro CAS No. Cefonicida (Registro CAS No. del Registro : 73384-59-5).: 147-52-4). pero no se limitan a.: 68401-81-0). Cefotetan (CAS Registry No. cefalotina (Registro CAS No.: 28657-80-9). Cefpodoxime (Registro CAS No. penicilinas. Lomefloxacina (Registro CAS No.: 80210-62-4).: 66-79-5).: 74431-23-5). meticilina (Registro CAS N º: 61-32-5). ceftriaxona (CAS No. la etilcelulosa y sus mezclas. Ejemplos de agentes antibióticos incluyen. cefamicinas. cefoperazona (Registro CAS No.: 25953-19-9).

ácido salicílico. y selenio sulfuro. [0068] Un parche transdérmico se puede emplear para entregar lúcuma composiciones de aceite de nuez a un sujeto. la pomada. Metronidazol (Registro CAS No. La almohadilla o material de vendaje se coloca sobre la herida o quemadura con el lado de contacto con el medicamento para heridas o quemaduras.: 56391-56-1). ácidos. El parche se incluyen. Cuando la herida es profunda. mupirocina (CAS Registro No. rifampicina (Registro CAS No. o la quemadura grave. clorhidrato de terbinafina.1). Tobramicina (Registro CAS No. [0067] En general. Trimetoprim (CAS No.4). ketoconazol.: 56-75-7).: 57-92-1).: 3521-62-8). Registro: 738 . Registro: 23067 . Alternativamente.: 41342-53-4). la composición de la divulgación está destinada a ser aplicada por vía tópica y directamente a la herida o quemadura. Erythromycin glucoheptonato (CAS No. itraconazol. Erythromycin etil succinato (registro CAS No. estreptomicina (Registro CAS No. Erythromycin estolato (Registro CAS No.: 443-481). la composición puede también o alternativamente ser aplicado en forma de aerosol.: 12650-69-0). cefalexina (Registro CAS No.CAS No.: 1404-90-6).13-2). nitrato de miconazol. pero no se limita a. bases y otros derivados. así como sus diversas sales. fluconazol. Co-amoxiclavuanate. combinaciones de Piperacilina y Tazobactam. Este último enfoque funciona mejor cuando se aplica vendaje para quemaduras graves y heridas superficiales. crema o ungüento de una composición de acuerdo con la descripción se aplica directamente sobre la almohadilla de vestir u otro material apósito adecuado. Sulfametoxazol (Registro CAS No. eritromicina lactobionato (Registro CAS No.: 61036-64-4).: 723-46-6). clindamicina (Registro CAS No. cloranfenicol (CAS Registro No.: 13292-46-1). Teicoplanina (Registro CAS No. Nitrofurantoína (Registro CAS No.: 81103-11-9). el voriconazol. Netilmicina (Registro CAS No. flucitosina. . eritromicina (CAS Registry No .: 643-22-1). caspofungina. clotrimazol.: 114-07-8).: 83905-01-5).: 80214-83 .: 32986-56 . un material de la almohadilla. pero no se limitan a. [0066] agentes antifúngicos incluyen. Para quemaduras de primer grado y abrasiones leves. pomada o crema que se extiende directamente sobre la herida y luego se cubre con un apósito estéril estándar o de otro material apósito adecuado. vancomicina (Registro CAS No. griseofulvina. ácido benzoico.: 18323-44-9).: 8063-07-8).: 15686-71-2). anfotericina B.: 3847-29-8).70-5). la composición puede estar en la forma de un ungüento.: 67-20-9). claritromicina (Registro CAS No. Roxithromycin (Registro CAS No. nistatina. estearato de eritromicina (registro CAS No. azitromicina (Registro CAS No.

[0070] El material de la almohadilla es también preferiblemente transpirable. y la composición terapéutica. tela de nylon o de espuma de plástico. Ejemplos de materiales flexibles incluyen.adhesivo. cuando se aplica a zonas de la piel que tiene alteraciones en los ángulos de la superficie (por ejemplo alrededor de la zona de la piel fosa nasal). no elástico. Los materiales útiles táctil ofrecen un sustrato adecuado para el adhesivo y son suficientemente fuertes para resistir la eliminación de la piel. tela de algodón. El material de la almohadilla es también preferiblemente no permeable al agente aplicado al parche. en el eje plano del material. La flexibilidad se consigue por la elasticidad en una cualquiera o todos los ejes del material. La almohadilla es preferiblemente no estirable. El material de la almohadilla es preferiblemente flexible para adaptarse a contornos de la piel. después de haber sido fijado a la piel mediante un adhesivo. La dosificación de agente disponible para la piel puede ser alterado mediante la alteración de la densidad de las aplicaciones discretas del agente primario a la superficie definida del parche. La composición farmacéutica está preferiblemente presente en una cantidad y una concentración tal que una dosis eficaz del agente se aplica a la piel durante el tiempo designado de que el parche permanece en contacto (por ejemplo. tela de rayón. [0071] Un adhesivo útiles en las composiciones y métodos de acuerdo con la divulgación es cualquier sustancia que mantiene el parche en contacto con la piel. [0072] En algunas realizaciones. En algunas realizaciones. lo que permite que el aire pase a través del parche y en contacto con la piel. El material de la almohadilla también puede ser de un espesor suficiente para proporcionar resistencia a la almohadilla. la almohadilla proporciona un sustrato adecuado para la formación de aberturas en la misma. pero no se limitan a. sin embargo. adherido) a la piel. tela tetrón. pero también de una delgadez que será cómodo para el usuario y flexible en contacto con todas las superficies de la piel. en algunas realizaciones es preferible que la almohadilla de ser permeable al agente. Sin embargo. la almohadilla puede no transpirable. la . es decir. el agente se puede aplicar al parche en lugares discretos. [0069] El material de la almohadilla es lo suficientemente flexible para proporcionar una cierta comodidad para el sujeto. el área de la sección transversal de cada solicitud de una superficie definida de la revisión. En algunas realizaciones.

la licuefacción en la hidratación de la composición. mayor será la profundidad de las aberturas en el revestimiento. [0074] Así. cuanto mayor es la densidad de aberturas. Para las heridas muy contaminadas (que exhiben cantidades significativas de pus). Preferiblemente. sujeto o paciente en necesidad del mismo. cuando un revestimiento se utiliza como una máscara en la adición de agente para el parche. [0076] Las composiciones farmacéuticas según la divulgación son eficaces en el tratamiento de una gran variedad de heridas y quemaduras a un mamífero. Aderezo repetida diariamente o cambios de patch se continúan hasta que la herida o quemadura haya sanado. La composición medicinal presente supuesto. los cambios de apósito se puede realizar cada cuatro a seis horas. o cualquier combinación de estos parámetros. por ejemplo. mayor será la cantidad de agente disponible para la entrega a la piel. dependiendo del tipo y la profundidad de la herida o la gravedad de la quemadura. donde la contaminación bacteriana y fúngica normalmente ocurriría en ausencia de tratamiento. heridas o quemaduras graves llanto. o el área de sección transversal de las aberturas. una composición farmacéutica de la divulgación se aplica a una herida o quemadura para cubrir la superficie lesionada completamente con. también puede usarse para tratar quemaduras y . la difusión del agente de distancia desde el parche o la acción capilar de la composición desde el parche a la piel . [0073] La entrega de la composición terapéutica a la piel puede proceder por un procedimiento que incluye. Cambio de apósito-horarios dependen de la condición de la herida y los expertos en la técnica puede ajustar los horarios y sobre una base de caso por caso. para otras heridas o quemaduras. y preferiblemente antes de 12 horas después de la lesión o postquemadura. a veces sólo una o dos veces por día. [0075] Los apósitos o parches están ventajosamente cambiado tres a cuatro veces al día. pero no se limitan a. mayor será la cantidad de agente disponible para la entrega a la piel.volumen de la cavidad (medida por la profundidad y el área de sección transversal) de la abertura que contiene el agente en una zona definida en la superficie del parche. Así pues. un espesor de un cuarto de pulgada de la composición farmacéutica. la composición farmacéutica debe ser aplicado dentro de los primeros veinte minutos después de la quemadura o lesión. los cambios se llevan a cabo con menos frecuencia. Tiempo de curación varía. pero la composición también puede aplicarse tan pronto como sea posible. Del mismo modo.

En la medida en que los materiales específicos se mencionan. [0077] Los datos descritos en este documento establecer otro aspecto de la divulgación. Ejemplo 5 proporciona un metil éster de ácido graso (FAME) análisis de la composición de LNO. Ejemplo 2 proporciona resultados experimentales que muestran que Lúcuma tuerca de aceite (LNO) induce la migración celular de los fibroblastos en un ensayo in vitro. antioxidantes. Ejemplo 1 describe la preparación de un extracto de Pouteria lúcuma tuerca. Ejemplo 7 proporciona un análisis de la remodelación del citoesqueleto por tinción de inmunofluorescencia. incluyendo perros. Ejemplo 3 describe el efecto de LNO en la curación de heridas y la regeneración in vivo en un modelo de ratón herida en la piel. tales como animales veterinarios. gatos. [0078] Los siguientes ejemplos ilustran realizaciones de la descripción. humectantes. y similares. La formulación puede contener adicionalmente piel que promueven la salud agentes incluyendo. caballos. agentes promotores de colágeno. se describe aquí un método para promover la curación de la piel y / o regeneración de la piel por aplicación tópica a la piel de una formulación que contiene el extracto de aceite de nuez. otros animales domésticos. Ejemplo 4 describe el efecto del aceite de nuez de lúcuma (LNO) en la regeneración de tejidos en un ensayo de regeneración pez cebra aleta de cola. En consecuencia. que es el uso de LNO como un agente para contrarrestar el envejecimiento de la piel o para el tratamiento de quemaduras de la piel. y caldo . es meramente para fines de ilustración y no está destinado a limitar las reivindicaciones. por ejemplo. Ejemplo 8 describe los experimentos que revelan el efecto de LNO en bacterias y hongos. Patata Dextrosa Agar (PDA). La formulación también puede apoyar la salud o la reparación del cuero cabelludo. Ejemplo 6 describe ensayos de Griess para la producción de NO en los macrófagos inducidos por LPS como una medida de la influencia de LNO en los procesos inflamatorios.heridas en otros mamíferos. animales de granja. Ejemplo 1 Lúcuma Nut Oil (LNO) Extracción [0079] En los experimentos descritos en este Ejemplo y los siguientes Ejemplos 2-9. Ejemplo 9 describe el efecto de LNO en prematura senescencia celular. retinoides. filtros solares y similares. los medios utilizados fueron agar LB y caldo LB. (Fisher Scientific).

y la tuerca de carne resultante se liofilizó. Heptano se eliminó del extracto resultante utilizando un evaporador rotatorio (Büchi) seguido de un Savant Speed Vac obteniéndose un aceite de color amarillo. Los fibroblastos (fibroblastos es decir. es decir. [0080] cáscaras de madera se han retirado de las tuercas de Pouteria lúcuma.patata dextrosa (PDB) (Difco). placas de 96 pocillos eran de Costar. [0083] Un ensayo in vitro de crecimiento de fibroblastos mostró que la tuerca lúcuma extrae aumento de la migración celular. 3T3) se cultivaron inicialmente hasta confluencia sobre una superficie de vidrio y un rasguño se hizo entonces en el centro de la placa. obteniéndose un aceite amarillo que se almacenó a -20 º C protegido de la luz. Ejemplo 2 Lúcuma Aceite de Nuez induce la migración de fibroblastos in vitro [0082] La capacidad del extracto de aceite de nuez de lúcuma para influir o afectar el comportamiento de células eucariotas en forma de migración de fibroblastos de células se evaluó mediante un estándar in vitro en células de ensayo de migración en la técnica. el heptano se eliminó a partir del extracto en vacío. Diversos extractos de la fruta lúcuma y la tuerca (dentro de las semillas de un fruto carnoso) se examinaron en ensayos de migración de células in vitro. Las placas se trataron con suero bovino fetal (FBS) como control positivo o diversas concentraciones (10-40 mg / ml) de aceite de nuez de . Todos los demás reactivos químicos se adquirieron de Sigma-Aldrich Co. Después de la extracción. los frutos secos Lucuma. El polvo fue desgrasada en una proporción de 1 g de polvo tuerca a 100 ml de heptano y se filtró con un papel de filtro cónico (Whatman). protegida de la luz y a temperatura ambiente. La extracción se realizó bajo agitación suave. Lúcuma obvota HBK) aceite de nuez se obtuvo mediante la extracción de 150 g de suelo tuerca lúcuma con 2. (Sin. Frutos secos liofilizados se molieron finamente con un molinillo de café. Ktze. Este proceso se repitió dos veces. Antibióticos y antifúngicos utilizados en los experimentos incluyeron penicilinaestreptomicina (Cellgo) y la sal nitrato de econazol (Sigma # E4632). como la migración celular se sabe que es una característica de la cicatrización de heridas.25 L de heptano durante 12 horas. [0081] Como alternativa. Pouteria lúcuma O.

En consecuencia.06% de glicerol) + LNO (60 mg / mL ). La zona rayada se midió usando el software Photoshop CS Acrobat. DMEM + vehículo (0.06% de glicerol) + LA (24 mg / mL) y DMEM + vehículo (0. fibroblastos neonatales humanos se mantuvieron en Dulbecco modificado del medio Eagle (D-MEM) +10% de suero fetal bovino (FBS) y se mantuvieron en un humidificado 37 ° C. o hasta 100% de confluencia se alcanzó. LNO promueve la migración celular.3 mm de anchura). Las células se sembraron a una densidad de 1 × 10 4 células por pocillo en una placa de 24-pocillos y se incubaron durante 24 horas. Brevemente. los pocillos fueron fotografiadas de nuevo. y se trató con LNO o vehículo durante 72 horas.lúcuma (LNO) extrae preparado según el Ejemplo 1. privadas de suero durante 24 horas. Las células se trataron como sigue: DMEM +10% FBS + vehículo (0.000 células / pocillo fueron sembradas en una placa de 96 pocillos y se dejaron adherir al colágeno I placa recubierta durante 24 horas. [0085] El efecto de LNO sobre la migración de fibroblastos también se evaluó por el ensayo de Oris ® migración de células desde las tecnologías de Platypus de acuerdo con las instrucciones del fabricante. LNO aumento de la migración de células de fibroblastos de manera dependiente de la dosis. una característica del proceso de cicatrización de la herida. Los tapones se retiraron entonces de la placa de 96 pocillos para crear una zona de detección de 2. Entonces 25. las células se marcaron con . Después de 24 horas de incubación. DMEM + vehículo (0.06% de glicerol. Las placas se controlaron durante la migración celular en el área de la herida (% de cierre de heridas).0 mm. utilizando un borde recto como guía (aproximadamente 1.06% de glicerol) + OA (18 mg / mL). el aumento de la migración celular en el modelo de herida de una manera dependiente de la dosis (Figura 1). incubadora con 5% de CO 2. Las fotografías fueron tomadas de cada pocillo para medir el área inicial de la herida. El medio se eliminó y las células se lavaron con 500 l de PBS dos veces para eliminar células desprendidas o residuos celulares. No se encontró actividad en la fruta o extracto de cáscara.06% de glicerol. y el porcentaje de cierre de la herida en cada punto de tiempo se obtuvo mediante la siguiente fórmula: (1 [tamaño actual herida / tamaño de la herida inicial]) x 100. DMEM + vehículo (0. Cada monocapa fue herido arrastrando una punta de pipeta a través del fondo del pozo. Los extractos de carne de nuez (referido como lúcuma aceite de nuez o extractos LNO). en contraste. control positivo). [0084] Humanos fibroblastos neonatales se mantuvieron en la Dulbecco Modificado Medio Eagle (D-MEM) +10% de suero fetal bovino (FBS) y se mantuvieron en un humidificado incubadora de 37 ° C con 5% de CO 2. control negativo).

una específica de adenosina A 2 Un agonista del receptor ofrecen comercialmente por Tocris. incluyendo el panículo carnoso y los tejidos adherentes. LNO disminuyó el tiempo requerido para el cierre de heridas (Figura 4A). Taiwan. también en el vehículo.. 9 y 11 y se cuantificaron mediante .. MDSPS pruebas de código 1115924. En el ensayo de curación CD-1 de ratón escisión herida.. Montesinos .5% de carboximetilcelulosa en PBS). Bajo anestesia con éter. 118:3279-3290 (2008). et al.. J. un grupo experimental y un grupo control positivo. de acuerdo con el protocolo describen en otra parte (Kapoor. [0087] ensayos de curación de la herida se realizaron por MDS Pharma Services. 186:1615-1620 (1997). cada descripción de incorpora aquí como referencia). Ejemplo 3 En Vivo y Curación de Heridas Heridas-Skin Regeneration [0086] El extracto LNO del Ejemplo 1 se usó adicionalmente en dos modelos in vivo para evaluar la curación de heridas y la regeneración.697).968. grupos de 5 machos CD-1 ratones que pesen 22 ± 2 g se utilizaron para este ensayo. La mediana del tiempo requerido para el cierre de heridas (CT 50) se muestra en la figura. Los datos establecen que el LNO disminuyó el tiempo requerido para el cierre de heridas (CT) versus el control del vehículo. las heridas se trataron durante diez días con vehículo (0. 4A.UU.. N º 4. la región de los hombros y la espalda de cada animal se afeitó y un afilado punzón (diámetro interno 12 mm) se utiliza para eliminar de la piel. un grupo de control negativo. et al. Brevemente. En este experimento. Exp. o el control positivo CGS-21680 (CAS120225-54-9 . 7. un punzón de 12 mm de la piel se utiliza para crear una herida en ratones y los ratones se dividieron en tres grupos.. es decir. Estos resultados demostraron que el efecto de curación de heridas de LNO no puede explicarse por la única presencia de LA o OA. como las concentraciones equivalentes de estos AG puro no fueron capaces de reproducir el efecto de LNO en la migración celular (figura 9). Los resultados demostraron que LNO promovió la migración de fibroblastos humanos en la zona de exclusión (Figura 8). ver Patente de EE. J.Calceína AM 4. aceite de nuez de lúcuma (LNO) (200 ug / ratón) en vehículo. Clin Invest.. La zona de la herida se trazó sobre láminas de plástico en los días 3. LA y OA son el AF importante de LNO. Los efectos de LNO oleico frente puro (OA) y ácidos linoleico (LA) se compararon en fibroblastos rayados.0 mM y la migración a la zona de exclusión se midió por microscopía fluorescente. 5. Med. Inmediatamente después de la herida.

2 * LNO 200 ug / ratón ± 6.04% 3-amino benzoic acid ethylester (tricaine. Herida datos de cierre o curación de heridas obtenidos en estos experimentos se presentan en la Tabla 1.04 ± 0. lo que permite el seguimiento de la cicatrización de heridas en tiempo real mediante la observación directa de la angiogénesis. TABLA-US-00001 CUADRO 1 cierre de la herida dérmica expresada como tiempo medio de cierre (CT 50) Tratamiento CT 50 a ± SE b (días) Vehículo de 7. que fue significativamente mayor que la del vehículo y comparable con el control positivo. y los resultados de estos ensayos también proporcionan información sobre las propiedades angiogénicas de LNO. Surgical blades were used to amputate tailfin primordia just posterior to the notochord.2 LNO 500 ug / ratón 5.34 ± 0. [0088] La aplicación tópica de LNO en las heridas dérmicas de DC-1 ratones mostraron las importantes propiedades cicatrizantes de LNO. versus vehículo (ANOVA de un factor seguido por prueba de Dunnett) Ejemplo 4 En la curación de heridas y la regeneración Vivo-Tailfin Amputación Primordial [0089] Un modelo de aleta de cola en la curación de heridas y la regeneración in vivo también se utilizó para evaluar la capacidad de un extracto de aceite de lúcuma tuerca para promover la curación de heridas apropiado.4 CGS 10 ug / ratón 6. El pronunciado in vivo de cicatrización de heridas efecto de LNO (Tabla 1) se explica por su relación única de AF y por los efectos potenciadores de varios anti-inflamatoria conjuntos combustibles contenidos en el LNO. Los animales tratados mostraron casi 100% cierre de la herida después de 10 días de la administración tópica de LNO (figuras 4 y 5).84 0.05.1 * una hora a la que se cierra el 50% de la herida de la piel.86 ± 0.58 ± 0. Larvae . el promotor fli1 impulsa la expresión de la proteína verde fluorescente (GFP) en todas las células endoteliales vasculares.el uso de un analizador de imagen (Life Science Resources VISTA. b error estándar * p <0. LNO o vehículo se aplicaron tópicamente inmediatamente después de la lesión y una vez al día a partir de entonces para un total de 10 días consecutivos.3 * LNO 1000 g / ratón 6. En este modelo transgénico. Version 30). Forty-eight-hour-old or five-day-old zebrafish larvae (AB strain) were anesthetized in 0. CGS agonista de la adenosina. MS-222) and placed in 2% agar Petri dishes.

This extract was diluted 1:10 twice for further analysis. [0090] Taken together. establish that LNO increased the amount of regenerative tissue versus both non-treated and positive control larvae. Mass spectra from 40 to 550 m/z were acquired using a dual-stage quadrupole with source at 250° C./minute to 150° C.25 mm ID×0. The organic phase was transferred to a new vial. For this assay.25 μm film). Oven conditions were: 100° C. hold 10 minutes. Results are presented in Table 2. ramp 5° C. hold 2 minutes. . Vials were cooled in an ice bath and 2 mL hexane added. CAS120225-54-9) or LNO (10-100 μg/mL in water) and incubated at 28° C. The carrier gas was helium flowing at 1 mL/minute. and +EI ionization of 70 eV. 7).) split (50:1) injector and separated on an SGE BPX70 (highly polar cyanopropyl polysilphenylsiloxane) capillary column (60 m×0./minute to 200° C. A 1 μL aliquot of the diluted sample was injected into a heated (250° C. The results. ramp 2° C. Photographs of regenerating tailfins were taken at 24 and 48 hours post-amputation using a Scion CFW-1310C color digital camera with an Olympus SZ4060 zoom stereo microscope. the fin fluorescent area was normalized against the total fin area. These results are in agreement with the data from CD-1 mice and indicate that LNO is not only a wound healing agent./minute to 240° C. shown in FIG. 6B. These effects were dose-dependent (FIG. a 100 μL aliquot of LNO was added to 1 mL methanolic HCl and heated for 1 hour at 100° C. The effects of LNO were analyzed and compared to the positive control CGS-21680 (2-p-(2Carboxyethyl)phenethylamino-5'-N-ethylcarboxamidoadenosine). Example 5 GC -MS Analysis of LNO [0091] For fatty acid methyl ester (FAME) analysis. hold 1 minute. hold 8 minutes. Samples were gently stirred in a tabletop incubator for 5 minutes at 120 rpm and then centrifuged for 3 minutes at 2100×g. Primordia re-growth was measured using fluorescence microscopy and image analysis of fluorescent endothelial cells.were placed in 24-well plates containing either water (control). ramp 5° C. CGS-21680 (50 μg/mL. the experimental results presented in Examples 3 and 4 indicate that the nut oil extracted from lucuma has significant activity in enhancing wound healing processes. A 37-component food industry fatty acid mixture at 100 μg/mL each was injected for verification.. dried under a stream of nitrogen and reconstituted in 100 μL of methylene chloride. it is also a promoter of the formation of new blood vessels in wounded areas. gently shaken every 15 minutes for 1 minute.

24 0. Both GLA and its metabolites can prevent uncontrolled inflammation damage to healthy cells that severely impair the wound healing process.93 γ linolenic acid methyl γ-linolenate 18:3 42.85 linoleic acid methyl linoleate 18:2 40.77 0. palmitic (C16:0).17 (cis-11.11 heptadecanoic acid methyl heptadecanoate 17:0 32. 17) 0.42 0.05 erucic acid methyl erucate (cis-13) 22:1 52.60 0. and γ-linolenic acid (C18:3) (Table 2. Linoleic and oleic acids have been reported as wound healing agents potentially acting as modulators of skin inflammation. GC/MS analyses of fatty acid methyl esters (FAMEs) indicated that the most abundant FAs in LNO were linoleic (C18:2). there were five as yet unidentified FAs.88 0.07 ? ? ? 25.90 0.02 0.04 lignoceric acid methyl lignocerate 24:0 58. 14) 0.04 docosadienoic acid methyl docosadienoate 22:2 52.43 1 All peak areas integrated and summed. 14. 5. 3).92 2.75 0.85 oleic acid methyl oleate (cis-9) 18:1 38.94 stearic acid methyl stearate 18:0 36.76 0.50 0.99 (cis-6.65 (cis-13. oleic (C18:1).61 arachidic acid methyl arachidate 20:0 44.01 ? ? ? 47.24 pentadecanoic acid methyl pentadecanoate 15:0 24. 12) 27.16 0.03 ? ? ? 55. 2 Total carbon number and unsaturation (if any).18 18.33 0.34 eicosenoic acid methyl eicosenoate 20:1 45. None of the unknowns contributed significantly to fatty acid composition of the LNO.85 0.01 eicosapentoic acid methyl eicosapentanoate 20:5 55.02 ? ? ? 60.02 octanoic acid methyl octanoate 8:0 7.17 palmitoleic acid methyl palmitoleate 16:1 30. TABLE -US-00002 TABLE 2 Chemical composition of lucuma nut oil % Fatty Acid Methyl Area 1 Fatty Acid Ester (FAME) Carbon 2 RT 3 38.6% LNO from ground lucuma nut powder.01 ? ? ? 47. Area of each FAME was divided by summed peak area of all FAMEs to calculate % area. 3 RT = retention time in minutes (see FIG. 12) 0.83 8.58 0. In addition.04 ? ? ? 46.01 ? ? ? 63.01 0.63 palmitic acid methyl palmitate 16:0 28. FIG.08 ? ? ? 45. 8. stearic (C18:0). 16) 0. Several of the FAs from LNO have been reported as potentially relevant in maintaining healthy skin and in improving lipid metabolism in humans. Another bioactive molecule detected in LNO was γ-linolenic acid (GLA). Ejemplo 6 .90 0.[0092] The heptane extract from lucuma nut yielded 2. 11. eg 16:0 represents the completely saturated palmitic acid.1 lauric acid methyl laurate 12:0 14.07 eicosadienoic acid methyl eicosadienoate 20:2 47. 9.34 0.17 (cis.04 heneicosanoic acid methyl heneicosanoate 21:0 47.42 myristic acid methyl myristate 14:0 20.1 behenic acid methyl behenate 22:0 50.51 (cis-9.21 0.09 (cis-11) 0.14 decanoic acid methyl decanoate 10:0 10.29 (cis-9) 0. 3).

and the LPS-stimulated macrophage behavior. After 8 hours. LNO produced a moderate but significant decrease in the concentration of nitric oxide (FIG. the results from the in vivo mice wounding assay. Inc. et al. Cells were pre-treated for 2 hours with LNO prior to incubation with LPS at 1 μg/mL for 8 hours. serum-starved for 24 hours. Biol. was performed according to the protocol described elsewhere (Park. Louis.. The RAW264. Leukoc. in 24-well plates.7 cells were plated at a density of 0. Briefly. humidified incubator containing 5% CO 2 . establish that LNO modulates the inflammatory process in a manner that accelerates the wound healing process. St. 1% naphthaleneethylenediamine dihydrochloride in 5% H 3 PO 4 ). samples were read at 540 nm using a BIOTEK micro-plate spectrophotometer.4×10 5 cells/well in a 24-well plate and grown for 24 hours. 54:119-124 (1993)). J.LNO Decreases NO Production in Macrophages [0093] Murine RAW264. After incubation for 15 minutes at room temperature in darkness.). and treated with LNO 60 .7 macrophages were obtained from the American Type Culture Collection (ATCC).. 11). Cells were stimulated with 1 μg/mL LPS (Sigma-Aldrich. RAW264.4×10 5 cells/well. Ejemplo 7 Immunofluorescence Staining [0095] Cells were seeded into 24-well plates containing glass coverslips. which provides a measure of nitrite in the culture medium. Mo. The Griess assay.7 cells were cultured in DMEM. LNO did not show any cytotoxic effect at the concentrations used in our studies as evaluated by the MTT viability assay.. The decrease in nitric oxide production after LNO application was dose dependent. and maintained in a 37° C. supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum. conditioned media (50 μL) was removed and immediately mixed with 50 μL of Griess reagent (10% sulfanilamide. with minor modifications. Taken together. [0094] The Griess assay was performed to indirectly measure nitric oxide production by LPS-induced macrophages. RAW macrophages were plated at a minimum density of 0. Cells were subcultured by scraping plates when cells reached 90% confluency. the transgenic zebrafish larvae tailfin regeneration assay. Stock solutions of LNO and triptolide (positive control) were added to the medium 2 hours before LPS stimulation.

The medium for the growth of all bacteria was LB agar at 37° C. DC and CLSI Ferraro. LB broth was used for all bacteria and Potato Dextrose Broth (PDB) was used for testing S. These results are consistent with the finding that LNO increased cell migration by increasing vinculin expression and mildly decreasing stress fiber formation in fibroblasts. and Saccharomyces cerevisiae (ATCC # 201459). Mycobacterium rhodococcus DK17.. E. using a method modified from Jones et al. 17. WJ Hausler. [0096] The results showed that LNO at 60 μg/mL induced a mild decrease in stress fiber formation and increased the expression of vinculin (FIG. 1997: Natl. Washington. Cat F7053) 1/200 or Rhodamine Phalloidin 140 nM (Cytoskeleton Inc). cells were fixed with ice cold 4% paraformaldehyde in PBS for 15 minutes and permeabilized with ice cold 0. Stds. in Manual of Clinical Microbiology. ABEH Lennette. and HJ Shadomy. cerevisiae was Potato Dextrose Agar (PDA). The descriptions are incorporated herein by reference The above-identified microorganisms were grown for 24 hours in broth . Ejemplo 8 LNO Effects on Bacteria and Fungi [0097] The bacteria and fungi studied were Escherichia coli DH5α (ATCC # 47093). Wayne. diluted in 3% BSA (wt/vol) in PBS was applied. Vol. Editor. The medium for the growth of S. cerevisiae. American Society for Microbiology. For inhibition experiments. Cells were washed with PBS and then blocked with 3% (wt/vol) BSA in PBS for 1 hour. Susceptibility tests: microdilution and macrodilution broth procedures. Vinculin mAb FITC-Conjugate (Sigma. thus favoring cell motility. Comm. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. For staining of stress fibers and vinculin. Lab. Jr. Cells were washed again for at least 20 minutes with PBS and then mounted in 80% glycerol PBS.μg/mL or vehicle for 24 hours. aureus were grown on LB agar plates at 37° CE aerogenes and M. 4th ed. 1985. coli and S. Enterobacter aerogenes (ATCC # 13048). rhodococcus DK17 were grown on LB agar plates at 30° CS cerevisiae was grown on PDA plates at 30° C. Cells were washed with PBS and then permeabilized for 2-5 minutes. and the cells were incubated overnight at 4° C.5% (vol/vol) Triton X-100 in PBS for 5 minutes at room temperature. [0098] The minimal inhibitory concentration (MIC) values were determined by broth dilution assay. Clin. American Society for Microbiology. 10).. Staphylococcus aureus (ATCC # 12600).

[0099] All bacteria and fungi were tested in triplicate over the range of 10 μg/mL to 1000 μg/mL LNO concentrations. the cells were treated with the culture medium containing H 2 O 2 (100 μM). These anomalous morphological features are hallmarks of the aging process in senescent cells. H 2 O 2 (100 μM)+LNO 60 μg/mL. fragmentized or oversized nuclei are frequently found in senescent cells. and incubated in fresh complete medium for another 7 days. [0101] Human neonatal fibroblasts (Cascade Biologics Catalog Number: C-004-5C) were maintained in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)+10% fetal bovine serum (FBS) and were kept in a humidified 37° C. The plate was then incubated at 30° C. Three days after seeding. Example 9 LNO Effects on Premature Cellular Senescence [0100] During cellular senescence. or 37° C. the effect of LNO on cellular senescence was assessed by studying the changes in nuclear morphology of H 2 O 2 -induced senescent fibroblasts. The inhibitory effect of LNO on the growth of the tested organism was evaluated using a MultiDetection Microplate Reader (Synergy HT. Biotek) at 600 nm (absorbance). Among other characteristics. cells display several changes in their phenotype. fibroblasts were trypsinized. folded. or just culture medium for 1 hour. incubator with 5% CO 2 For induction of premature senescence. Cells were then fixed in ice-cold methanol for 5 minutes and stained with Acridine orange. After the treatments. Globular. non-senescent cells (control) .cultures. exponentially growing fibroblasts were inoculated at a cell density of 5×10 5 in 50 mm dishes. Fluorescent microphotographs of cell nuclei were taken with an Olympus 1×51 microscope coupled to a CWF 1310C camera (Scion Corporation). No significant inhibitory effect was observed up to the concentration of 1000 μg/ml of LNO. [0102] By fluorescence microscopy. alterations in nuclear morphology are characteristic of senescent cells. The MIC was defined as the lower concentration of the compound to inhibit growth of microorganisms compared to the growth of the untreated control. passaged normally. (depending on the microorganism) for 24 hours. Media inoculated with the preferred microorganism (5×10 5 cells/mL) was added to each well of a 96-well plate containing 10-1000 μg/mL of LNO. In the experiments described in this Example.

the major components of LNO. both in mice and transgenic zebrafish larvae. 12 and 13. play an important role in inflammatory processes. Fatty acids (FAs). it also increased new GFP-positive endothelial cells. 12 and 13). In a transgenic zebrafish model. and angiogenesis.showed increased cell density. bacterial and fungal growth and nitric oxide production. LNO displayed a pronounced wound-healing effect. Another important aspect in the treatments of cutaneous wounds is the possibility of bacterial and fungi infections. Disclosed herein are the results of experiments establishing that LNO. oleic acid. reepithelialization. extracellular matrix (ECM) remodeling bacterial and fungal growth. such as eicosanoids. Cells treated with H 2 O 2 +LNO showed fewer cells with senescent nuclear abnormalities compared with H 2 O 2 -treated cells (FIGS. stearic acid and γ-linolenic acid. Several cytokines and nitric oxide are important mediators of this process. Conversely. particularly polyunsaturated fatty acids (PUFAs). lipoxins and resolvins. especially in immunocompromised individuals. as they are metabolic precursors of several key mediators of inflammation. Thus. a composition comprising a mixture of fatty acids obtained as an extract from the nut of a South American fruit. promotes wound healing. thus improving perfusion of wounded areas. which are characteristic features of the senescent phenotype (FIGS. revascularization. fibroblast migration. [0103] LNO is disclosed herein as a new source of compounds. including investigations of such relevant events as fibroblasts migration. palmitic acid. Angiogenesis is known to be important in the formation of granulation tissues and supply of oxygen to wounded tissues. the results of these experiments show that LNO prevents dermal fibroblasts from entering into premature senescence. . This finding indicates that FAs in LNO increase vessel sprouting. prolonged inflammation and severe scar formation. Infected skin wounds are frequently associated with delayed wound closure. cells treated with H 2 O 2 displayed lower cell density and abnormal nuclear morphology. [0104] Wound closure is a highly coordinated sequence of molecular events involving inflammation. The effect of LNO on the wound healing process was investigated. classical elongated nuclear shape and homogeneous nuclear size. orange arrows). Colonized or infected wounds tend to develop an abnormally prolonged inflammatory state which generates large amounts of nitric oxide. including natural fatty acids (FAs) consisting mainly of linoleic acid. LNO not only accelerated wound healing. such as oversized and folded nuclei. This effect was not found using pure LA and OA.

vinculin and stress fibers play a key role in the integrin-mediated interaction of fibroblasts with the ECM. it has been disclosed that fibroblasts from wounded areas increase expression of vinculin and the increased expression is correlated with a higher migratory capacity (van Beurden. Focal complexes contain paxillin. the individual FAs it contains. Manalapan. In fact. focal adhesion kinase (FAK) and tyrosine-phosphorylated proteins. Oral Sci. making the total extract more effective than. The data indicate that the wound healing effect of LNO observed in mice and transgenic zebrafish larvae is produced by increasing fibroblasts migration. eg. J. Therefore. van Beurden. The above-described embodiments are not intended to limit the claims in any way. Integrins are key players in fibroblast interaction with ECM and with other cells. During the wound healing process. pharmacologically active compounds.. integrins nucleate three distinct matrix adhesions in fibroblastic cells. Wound Repair Regen. LNO contains a unique combination of natural. changes in the expression of focal adhesion proteins in fibroblasts treated with LNO were expected. THE STATE UNIVERSITY OF NEW JERSEY . A mild disassembly of stress fibers and increased expression of vinculin in focal adhesion has been shown to be important for cell migration. promoting angiogenesis and modulating nitric oxide production. vinculin. Fibrillar adhesions are located centrally in migrating cells and contain fibronectin and tensin. indicating that a precursor-product relationship between the three types of matrix adhesion is necessary for optimum cell migration. Further. eg. NJ US Patent applications by RUTGERS. FAs. β1 integrins can translocate from focal complexes to focal adhesions and ultimately fibrillar adhesions. 113:153158 (2005)). focal adhesions and fibrillar adhesions. focal complexes. The entire disclosure of all publications cited herein are hereby incorporated by reference. LNO has been shown herein to antagonize cellular senescence. 14:66-71 (2006). talin. et al. Patent applications by Ilya Raskin. [0106] Numerous modifications and variations of the disclosure are possible in view of the above teachings and are within the scope of the claims.. ie. As focal adhesions are important for fibroblast migration and adhesion. Eur. During cell migration..[0105] The data from cell migration experiments led to the conclusion that the in vivo wound healing effect of LNO is related to the increase in the migration capacity of fibroblasts. α-actinin.

sheet or filament bases.Patent applications in class Web. or dressings with incorporated medicaments . compositions of bandages.

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