Patente de título de la aplicación

:
Preparación y uso de Pouteria Lucuma Extract

Resumen:
Un método de preparación de Pouteria lúcuma extracto fue desarrollado que comprende la extracción del aceite de la nuez. El aceite lúcuma tuerca (LNO) fue eficaz para inducir la migración celular, la regeneración del tejido y mejorar la cicatrización de heridas. El aceite de nuez de lúcuma proporciona un agente que es útil para el mantenimiento terapéutico o cosmético de la piel y el cuero cabelludo.

Reclamos:

1 Un método de preparación de un extracto de Pouteria lúcuma tuerca que comprende:. (A) moler una tuerca Pouteria lúcuma a un polvo, (b) extracción de los aceites de nuez de polvo con el líquido, y (c) retirar el fluido, para obtener un aceite. 2. El método de la reivindicación 1, que comprende además la preparación de una formulación farmacéutica que comprende el aceite de nuez. 3. El método de la reivindicación 1, que comprende además la preparación de una formulación cosmética que comprende el aceite de nuez. 4. El método de la reivindicación 1, en el que el fluido se selecciona del grupo que consiste en heptano y hexano.

5. El método de la reivindicación 4, en el que el líquido se elimina por evaporación. 6.El método de la reivindicación 4, en el que la proporción de polvo de tuerca a fluido es entre 1 g: 10 ml y 1 g: 100 ml, peso a volumen. 7. Un extracto de Pouteria lúcuma tuerca que comprende el aceite de nuez. 8. Una formulación cosmética que comprende el extracto de la reivindicación 9. La formulación de la reivindicación 8, que comprende además un antibiótico. 10. La formulación de la reivindicación 8, que comprende además una piel de la salud agente promotor. 11. La formulación de la reivindicación 10, en el que la salud de la piel agente promotor se selecciona del grupo que consiste en manteca de karité, un antioxidante, un retinoide, un humectante, un agente promotor de colágeno, una pantalla solar, un ácido alfa hidroxi, jojoba aceite, un extracto de seda, palmitato de isopropilo, metil parabeno y propil parabeno. 12. La formulación de la reivindicación 11, en el que el antioxidante se selecciona del grupo que consiste en vitamina A, vitamina C y vitamina E. 13. La formulación de la reivindicación 8, formulada como una crema, loción, gel, pasta o spray para aplicación a la piel o el cuero cabelludo. 14. Un método de curación de heridas que comprende administrar una dosis eficaz de un extracto de nuez de Pouteria lúcuma. 15. Un método de inducción de la migración celular, que comprende poner en contacto una célula con el extracto de la reivindicación 16. El método de la reivindicación 15, en donde la célula es un fibroblasto. 17. Un método de mejorar la regeneración de los tejidos que comprende poner en contacto un tejido capaz de regeneración con Pouteria lúcuma aceite de nuez, en el que el tejido se regenera a

una velocidad que es mayor que la exhibida por el tejido en ausencia del aceite de nuez. 18. Un método para promover la curación de la piel que comprende el contacto de la piel con una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación. 19. Un método de reducción de envejecimiento de la piel que comprende el contacto de la piel con una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación. 20. Un método de curación de una quemadura de la piel que comprende el contacto de la piel se queme con una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación 7 en una cantidad eficaz para promover la curación de la piel en un paciente en necesidad del mismo.

21. El método de la reivindicación 20, en el que la composición farmacéutica comprende además un antibiótico.

22. Un procedimiento para reducir, eliminar o prevenir una condición de la piel seleccionado del grupo que consta de acné, envejecimiento de la piel y la piel arrugada que comprende contacto con la piel con una formulación cosmética que comprende el extracto de la reivindicación

23. El método de la reivindicación 22 en el que la condición de la piel es la piel arrugada.

24. El método de la reivindicación 22 en el que la condición de la piel es el envejecimiento de la piel.

25. El método de la reivindicación 22, en contacto con la piel con el extracto de la reivindicación 7 resulta en un aumento relativo en la expresión de una proteína seleccionada del grupo que consiste de colágeno y elastina en una célula de la piel.

26. El método de la reivindicación 22, en el que la formulación cosmética comprende además una composición anti-acné.

en el que la composición anti-acné se selecciona del grupo que consiste en ácido salicílico. Más particularmente. Descripción: DECLARACIÓN DE CASOS RELACIONADOS [0001] Esta solicitud reivindica el beneficio de prioridad de la solicitud provisional de patente de EE. 30. ácido azelaico. permetrín. limo resorcinol. y una composición farmacéutica que comprende el extracto de la reivindicación 7 en la superficie inferior. Un parche transdérmico que comprende un material de almohadilla que tiene una superficie superior y una superficie inferior.27. clindamicina . peróxido de benzoilo. Pouteria lúcuma. 29. turba. eritromicina y sulfacetamida de sodio. un adhesivo sobre la superficie inferior.UU. el ácido retinoico. El método de la reivindicación 27. adapalene. los extractos se obtienen a partir de especies de Pouteria. El parche de la reivindicación 29. maíz. Aceites de soja. el azufre. 029 presentada 12 de noviembre 2008. por ejemplo. el ácido glicólico. El método de la reivindicación 26. que comprende además un antibiótico en la superficie inferior. ANTECEDENTES [0003] Los aceites comestibles de origen natural son algunos de los productos más consumidos en la industria alimentaria. 28. en el que la formulación cosmética comprende además un antibiótico. que se incorpora aquí por referencia en su totalidad. pero se sabe poco acerca de las composiciones de . el agua de turba. CAMPO [0002] La descripción se refiere a extractos de plantas para uso terapéutico. N º 61/199. canola y se encuentran entre los más consumidos en todo el mundo.

en el ojo del público. Los frutos son ovalados y de color amarillo en la madurez. se asocia con la pérdida no deseable de elasticidad. [0006] Además de los problemas de salud. los seres humanos también tienen problemas estéticos relacionados con su apariencia y la imagen que se proyecta. Mejorando el cuerpo el proceso natural de cicatrización de la herida sería deseable para acelerar los tiempos de recuperación después de la lesión. dado que los aceites vegetales son una fuente importante de ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) con propiedades que promueven la salud. A excepción de unas pocas plantaciones en Costa Rica. [0004] lúcuma. la fase proliferativa. también llamado lucmo o lúcuma. cicatrices en la piel se asocia con condiciones tan generalizados como el acné. a excepción de los que presentan los componentes nutricionales de la pulpa del fruto.menor cultivos conocidos. con una carne de color amarillo seco. es un árbol frutal originario de las tierras altas del oeste de Chile. Más allá de cicatrices en la piel asociado a la cicatrización inadecuada o subóptima. reduciendo así las complicaciones asociadas con heridas de la piel. Envejecimiento de la piel. incluyendo la presencia y composición de los aceites vegetales. pero comúnmente la pulpa del fruto se deshidrata y se utiliza como saborizante en postres y bebidas. y una fase de remodelación. incluyendo la curación quemaduras. entre varias otras propiedades de la piel que. Por otra parte. Esta relativa falta de conocimiento es sorprendente. el proceso natural de envejecimiento implica cambios en la estructura y función de la piel que muchos ven como la imposición de cambios perjudiciales en la propia imagen. la lúcuma no se cultiva fuera de su región endémica. . la industria cosmética y cuidado de la piel han sido durante mucho tiempo importantes sectores de comercio y continuará creciendo a medida que más cosmecéuticos eficaces se desarrollan. Perú y sur de Ecuador. Un paradigma de la curación de heridas divide el proceso en una fase inflamatoria. es una fuente frecuente de problemas estéticos. En consonancia con la realidad de las preocupaciones estéticas. el órgano más visible para los demás. la hidratación y el color. Hay pocos informes publicados sobre los componentes bioactivos que se encuentran en la lúcuma. Concomitante con este crecimiento es el aumento continuo en la investigación relacionada con la industria cosmética y cuidado de la piel. [0005] Se sabe comúnmente que la curación de heridas se produce como un proceso multietapa. por ejemplo. Además. una curación más rápida sería limitar el tiempo durante el cual las infecciones oportunistas puede afianzarse. La piel. Se pueden comer frescas.

la tuerca se seca primero y después se muele para el polvo. Una condición de clásico. En otra realización. incluyendo el acné. En una realización del método. arrugas. RESUMEN [0008] La divulgación satisface al menos una de las necesidades mencionadas anteriormente en la técnica de proporcionar composiciones que comprenden un extracto de planta terapéuticamente útiles en métodos terapéuticos para fines de curación. En algunas . el líquido se elimina por evaporación. por ejemplo. Ktze. que comprende moler la tuerca en un polvo. heptano o hexano. tales como la curación de heridas y quemaduras curación. existe en la técnica una necesidad de desarrollar nuevos productos terapéuticos y / o cosméticos y métodos para aumentar la velocidad y la eficacia de la curación de heridas y / o para abordar los problemas cosméticos con enfermedades de la piel tales como cicatrices. En algunas formas de realización.cambiar a peor con el tiempo. por ejemplo. [0007] Así pues. Los esfuerzos de los cosméticos cuidado de la piel / de la industria para hacer frente a estos problemas ha llevado al aumento de la investigación se ha señalado. el fluido. signos de envejecimiento de la piel. así como para reparar los defectos de la piel. Estas composiciones y métodos contribuir a un ahorro significativo en los costos de salud y / o cosméticos. extraer el polvo de la tuerca con el líquido y eliminación del fluido a obtener aceite de nuez de lúcuma (LNO). envejecimiento. mientras que la mejora de los procesos de curación y la elevación de la calidad de vida de los segmentos importantes de la población humana. el método comprende además la etapa de preparación de una formulación farmacéutica o cosmética que contiene el aceite de nuez. entre otros. la piel no deseada con frecuencia como una señal de paso de los años es la piel arrugada. que se añade al polvo de tuerca en una proporción que es entre 1 g: 10 ml y 1 g: 100 ml (peso tuerca: volumen de fluido). [0009] Un aspecto de la descripción proporciona un método para preparar un extracto de la tuerca de Pouteria lúcuma. en una realización relacionada. incluyendo la piel arrugada) y para mantener la piel saludable. y pérdida de elasticidad. ya que la industria se esfuerza por ofrecer al público productos que fiable y eficaz afectar la apariencia estética para mejorar. En una realización. heptano) y. y cosméticamente útil para mejorar la apariencia de la piel (por ejemplo. el líquido usado se selecciona del grupo que consiste de heptano y hexano (por ejemplo. Pouteria lúcuma O.

el aceite de nuez es al menos parcialmente disuelto en el fluido. por ejemplo. 1: 40. por ejemplo. la vitamina C o la vitamina E. 1:75. ó 1:100 (peso: volumen). 1:35. la formulación cosmética comprende un antibiótico. Cualquier fluido que se describe aquí se puede utilizar en el proceso de extracción en la preparación de una composición fitomedicinal. La divulgación comprende una variedad de fluidos para la preparación de los extractos de nuez de lúcuma. palmitato de isopropilo. La composición fitomedicinal y la formulación cosmética. Preferiblemente. 1:20. y compuestos orgánicos ligeramente polares tales como lineales o ramificados. acetato de etilo. el fluido es heptano. una composición fitomedicinal se proporciona que comprende un extracto de Pouteria lúcuma tuerca que comprende el aceite de nuez. metil paraben. un agente promotor de colágeno. diclorometano. acetonitrilo. alcanos. 1:65. por ejemplo humanos. 1:80. En algunas realizaciones. y cualquier fluido biocompatible puede ser usado en las composiciones fitomedicinales. 1:45. un ácido alfa hidroxilo. pasta o spray para aplicación. acetona. un extracto de seda. una pantalla solar. 1:95. 1:60. [0011] Según otro aspecto. . un humectante. 1:50. heptano o hexano. fluido.realizaciones. El antioxidante puede ser la vitamina A. 1:55. 1:25. loción. 1:85. cada uno puede ser formulado como una crema. por ejemplo. alcoholes primarios. o terciarios. tales como heptano o hexano. utilizado para la extracción. por ejemplo. la formulación cosmética comprende una piel de la salud agente promotor. un retinoide. y propil paraben. aceite de jojoba. 1:70. la descripción proporciona una formulación cosmética que comprende el aceite de nuez. isopropanol. Fluidos de ejemplo incluyen pero no se limitan a no polares compuestos orgánicos tales como cloroformo. disolvente. el añade al polvo de 1:15. metanol. un extracto de nuez Pouteria lúcuma que comprende el aceite de nuez se proporciona. secundarios. En algunas realizaciones. 1:90. un antioxidante. 1:30. En aún otras realizaciones. etanol y glicol. La salud de la piel agente promotor puede ser manteca de karité. así como dióxido de carbono supercrítico. [0010] Según otro aspecto. o solvatación del aceite de nuez de lúcuma. que son adecuados para la administración a mamíferos vivos. emulsión. gel. que pueden dar lugar. Fitomedicinales composiciones de acuerdo con la divulgación comprenden un extracto de nuez de lúcuma como se describe aquí. que se tuerca en una relación de aproximadamente 1:10. [0012] En otro aspecto. dispersión.

ácido retinoico. la célula es un fibroblasto. En un aspecto. [0016] Aún otro aspecto es un método para reducir. En un aspecto relacionado. la composición farmacéutica comprende además un antibiótico. En una realización relacionada. En algunas realizaciones. [0017] En otro aspecto. permetrín. eliminar o prevenir una condición de la piel seleccionado del grupo que consta de acné. tuerca lúcuma en una cantidad eficaz para promover la curación de la piel en un paciente en necesidad del mismo. ácido glicólico. azufre. En otro aspecto. la descripción incluye un método para promover la curación de la piel que comprende el contacto de la piel con una formulación que comprende el extracto de aceite de nuez. adapaleno. es decir. [0015] Todavía otro aspecto es un método de cicatrización de una quemadura de la piel que comprende el contacto de la piel se queme con una composición farmacéutica que comprende el extracto de P. otro aspecto es un procedimiento para estimular la curación de heridas que comprende administrar una dosis eficaz de la composición fitomedicinal de la divulgación (LNO). un extracto que comprende lúcuma aceite de nuez. se describe aquí un método de inducción de la proliferación celular por contacto una célula con LNO. la composición farmacéutica comprende además una piel de la salud agente promotor. En una realización preferida. en el que el apósito comprende una composición que comprende un aceite de nuez . limo resorcinol. la composición anti-acné puede ser ácido salicílico. eliminar o prevenir el envejecimiento de la piel o de la piel arrugada. [0014] Otro aspecto se refiere a un método de mejorar la regeneración de los tejidos en contacto con un tejido capaz de regeneración con aceite de P. turba.[0013] Sin embargo. En realizaciones atención a los métodos de reducir. tuerca lúcuma modo que el tejido se regenera a una velocidad que es más rápida que es exhibida por el tejido en ausencia de la tuerca aceite. la descripción proporciona un apósito para la entrega de una composición de la divulgación. envejecimiento de la piel y la piel arrugada que comprende contacto con la piel con una formulación cosmética que comprende el extracto descrito en la presente memoria. y puede inducir la expresión de colágeno y / o elastina. la formulación cosmética comprende además una composición anti-acné y / o un antibiótico. clindamicina. ácido azelaico. eritromicina y sulfacetamida de sodio. peróxido de benzoilo. agua turba. las formulaciones cosméticas de acuerdo con la divulgación antagonizar reducción en la expresión de colágeno y / o elastina. En un aspecto relacionado.

El porcentaje de cierre de la . (A) Cromatogramas de LNO 10 de dilución. [0019] Otras características y ventajas de la presente descripción se harán evidentes de la siguiente descripción detallada. La figura. 4 muestra un curso de tiempo de efecto in vivo de la cicatrización de heridas LNO. La figura. [0018] En otro aspecto. [0021] la figura. se dan a modo de ilustración solamente. que la descripción detallada y los ejemplos específicos. La figura 2 muestra los resultados de la cicatrización de heridas y modelos in vivo de regeneración. [0022] la figura. y una composición farmacéutica que comprende un aceite de nuez de lúcuma en la superficie inferior. un adhesivo sobre la superficie inferior. un parche transdérmico que comprende un material de almohadilla que tiene una superficie superior y una superficie inferior. La figura 2A muestra los resultados de un modelo de cicatrización de heridas. el parche comprende además un antibiótico. En una realización relacionada. tanto LNO y estándares se inyectaron a 100 mg / ml. y (B) mezcla industria alimentaria estándar de 37 FAMEs. La revelación puede entenderse mejor por referencia a las figuras de los dibujos en combinación con la descripción detallada de las realizaciones específicas aquí presentadas. aunque indican realizaciones preferidas de la descripción. Breve descripción de los dibujos [0020] El siguiente dibujo forma parte de la presente memoria descriptiva y se incluyen para ilustrar adicionalmente aspectos de la divulgación. 2B muestra los resultados cuando tailfin primordios de las larvas de pez cebra 5-días de edad (n = 6) fueron amputadas justo posterior a la notocorda. sin embargo. [0024] la figura. 3 proporciona un perfil cromatográfico de FAMEs de LNO analizados por GC-MS. 1 es un gráfico de barras de la migración de células de fibroblastos in vitro. porque varios cambios y modificaciones dentro del espíritu y alcance de la descripción serán evidentes para aquellos expertos en la técnica a partir de esta descripción detallada.de lúcuma. Se debe entender. [0023] la figura. Después de la aplicación de la composición tópica para el tejido comprometido. el tejido puede ser cubierto con un apósito.

Vehicle. Fotos de las heridas fueron tomadas en días alternos durante once días después de la piel heridas (DPSW). p = 0.5%. [0029] la figura. ANOVA de un factor seguido por el test de Dunnett para comparaciones se aplicó entre el grupo tratado y el vehículo. B. Los resultados se expresaron como media ± error estándar de nueve repeticiones (* p = 0. De izquierda a derecha: el tiempo cero (t = 0). ácido oleico (OA.4) y CGS (10 ug / ratón). [0027] la figura. Las imágenes digitales fueron tomadas 72 horas después de comenzar el experimento. Imágenes representativas de la progresión de la curación de heridas en ratones después de la aplicación diaria de LNO (500 y 1000 mg / mL).003. Cuantificación de la regeneración de la cola células endoteliales 48 horas después de la amputación (hpa) de la aleta caudal. n = 4). 6 ilustra el efecto sobre la regeneración de LNO aleta de la cola y la angiogénesis en larvas de pez cebra transgénico. (A) representativos micrografías fluorescentes de GFP-positivas las células endoteliales durante la regeneración de aleta de la cola inducida por 100 ug / ml de LNO (LNO 100). 9 ilustra el efecto de LNO en la migración de células de fibroblastos en el ensayo de rayado. 5 muestra la progresión de la cicatrización de la herida dérmica inducida por LNO. [0028] la figura. n = 3) o 10% fetal suero . Scratched fibroblastos fueron tratados con LNO 60 mg / ml (n = 3) o con concentraciones equivalentes de ácidos grasos puros (FAS). Los valores se presentan como media ± error estándar de cinco réplicas (* p <0. PBS pH 7. vehículo (carboximetilcelulosa 50. [0026] la figura. ácido linoleico (LA. 7 se establece el efecto dependiente de la dosis de LNO una repoblación aleta caudal endotelial de las larvas de pez cebra transgénico. Los resultados se expresaron como media ± error estándar de nueve réplicas.herida se evaluó durante 11 días de la aplicación tópica de LNO 200.05 vs vehículo). LNO 40 ug / mL (LNO 40) y LNO 60 ug / mL (LNO 60). El efecto de LNO sobre la migración de fibroblastos se evaluó usando la ORIS cell ® ensayo de migración como se describe en los Ejemplos. Humanos fibroblastos neonatales fueron marcados con la sonda fluorescente verde de calceína-AM. 8 muestra el efecto sobre la migración de LNO fibroblastos humanos.079 vs control). El aumento de la fluorescencia GFPpositivas las células endoteliales 48 horas después de la amputación (hpa) de aleta de la cola era dependiente de la dosis. [0025] la figura. 500 y 1000 g / ratón.

[0030] la figura. El uso de una tuerca de lúcuma . Estas células se observaron bajo un aumento de × 100.bovino (FBS) como control positivo. quemaduras. [0033] la figura. [0031] la figura. En las células control. LPS (1 mg / mL) se añadió a cada pocillo y se incubaron durante 8 horas. la mayoría de los núcleos mostraron un fenotipo senescente no clásica con forma alargada nuclear y tamaño homogéneo. Morfología nuclear de la no-senescentes fibroblastos dérmicos fue alargada (flechas blancas). las células se tiñeron con naranja de acridina y se fotografiaron con un aumento de × 25. LNO causó una disminución leve en las fibras de estrés (F-actina) y el aumento de la inmunoreactividad para vinculin.01 vs LPS. One way ANOVA. 10 muestra el efecto sobre la expresión de LNO vinculina y estrés formación de fibras en los fibroblastos. por ejemplo. para el tratamiento de úlceras tróficas.7. 13 muestra el efecto de LNO en la senescencia celular. fragmentada o de gran tamaño) se observó en los fibroblastos senescentes (flechas de color naranja).001 frente a LPS ** p <0. Newman-Keuls prueba de comparación múltiple). Células RAW fueron pretratados con vehículo solo o bien LNO durante 2 horas. LNO disminución de LPS inducido por la producción de NO de una manera dependiente de la concentración. Morfología anormal (globular. [0032] la figura. o semilla. El efecto de LNO y AF se evaluaron como se describe en los Ejemplos. y similares. Newman-Keuls prueba de comparación múltiple). Fibroblastos dérmicos humanos fueron tratados con LNO 60 mg / mL o del vehículo y con tinción doble con rodamina faloidina (rojo) y mAb anti-vinculina (verde). Los resultados se expresan como media ± error estándar (*** p <0. Descripción detallada [0034] La descripción proporciona un método de preparación de un extracto de la tuerca. Los valores son el promedio de cuatro repeticiones ± error estándar (** p <0.01 vs FBS. 12 muestra el efecto de LNO en la senescencia celular. Núcleos de no senescente (control) y H 2 O 2 inducida por la senescencia (H 2 O 2 y H 2 O 2 + LNO). El extracto activo es útil para la cicatrización de heridas. LPS aumentó significativamente la producción de NO en las células no estimuladas (control). One way ANOVA. abscesos. 11 establece el efecto de LNO en LPS inducido por la producción de óxido nítrico en células RAW 264. incisiones quirúrgicas. doblado. Posteriormente. el fruto de lúcuma.

las siguientes definiciones se proporcionan expresas.9%) y ácido γ linolénico (2. y el tiempo perdido para herir recuperación. ácido palmítico (18. LNO mejorado significativamente cierre cutáneo herida. Lúcuma tuerca. heptano) los extractos de aceite de nuez de lúcuma (LNO) y medidas de la actividad en bioensayos de LNO varias pertinentes para la curación de heridas. Además. o para mejorar o aliviar al menos un síntoma de dicha enfermedad. Los beneficios para el individuo son evidentes en la reducción del tiempo necesario para la recuperación de una herida. Un adicional de 16 ácidos grasos se encuentran en concentraciones menores. LNO también promueve la regeneración de la cola de aletas en larvas de pez cebra transgénico 48 horas después de la amputación. Lucuma fruta consiste en un comestible parte carnosa exterior y una semilla interior duro. es ampliamente consumido en estos países. Ktze. que no es comestible y que normalmente se desecha cuando el fruto es consumido o procesado. la composición de la que nunca se ha investigado. que en conjunto representan el 97.6%). el gasto de prevenir o tratar una herida. es decir. el ácido linoleico (38.9%). GC-MS análisis de los ésteres metílicos de ácidos grasos (FAMEs) derivados de LNO mostró cinco ácidos grasos principales. [0036] El fruto de Pouteria lúcuma O.9%).2% del contenido total de aceite de la tuerca de lúcuma. o para prevenir o reducir la gravedad de dicha condición. proporciona formas terapéuticas útiles que se preparan fácilmente. sin embargo. Los resultados indican que la curación de heridas y propiedades antiinflamatorias de LNO. relativamente barato y segura. se utiliza beneficiosamente en una variedad de aplicaciones farmacológicas y de cosmética. En un modelo murino de la cicatrización de heridas. También existe prácticamente ninguna información sobre los efectos de lúcuma en la salud humana.extraer para tratar tales condiciones. [0035] Se describe aquí la composición bioquímica de no polar orgánico (por ejemplo. LNO no mostraba efecto antibacteriano o anti-hongos. comúnmente denominada como "lúcuma" en Chile y Perú. incluyendo la curación de quemaduras. o mejorar un síntoma de una herida.9%). LNO promovió significativamente la migración de los fibroblastos humanos y la disminución de LPS inducido por la producción de NO en los macrófagos. con su composición única de ácido graso. o tuerca. Para facilitar la comprensión de la descripción. ácido oleico (27. ácido esteárico (8. Esta descripción proporciona una descripción de la composición bioquímica y efectos farmacológicos . Fibroblastos LNO-tratados mostraron cambios en la expresión de vinculina y en la formación de fibras de estrés. es rico en aceite.

reducir tamaño de poro de piel. Químico y / o la acción física. promover la piel sana. Una dosis eficaz ejemplar es de aproximadamente 500 g por herida / aplicación por día. [0037] Tal como se utiliza aquí.000 g por herida (o aplicación tópica) por día. independientemente de si la sustancia o composición se encuentra externo a la planta (es decir. el término "dosis efectiva" significa una dosis que comprende un extracto de P. Una dosis eficaz de un extracto de nuez de Pouteria lúcuma es de entre aproximadamente 200 g por herida (o aplicación tópica) por día a aproximadamente 1. la senescencia celular. reponer los nutrientes esenciales de la piel. mejorar la hidratación de la piel. reducir la flacidez de la piel. [0040] El término "salud de la piel agente promotor" significa cualquier composición conocida en la técnica para disminuir la inflamación.de Lucuma Nut Oil (LNO). migración celular. la angiogénesis. o se encuentra dentro de las células de la planta. mejorar el tono de la piel. reducir o retardar el envejecimiento de la piel. como se entiende en la técnica. lúcuma como una composición farmacéutica. puede ser necesario para obtener la sustancia o composición de la planta o parte de planta. Tales . o en general. se refiere a uno o más materiales de formulación adecuados para lograr o facilitar la entrega de un extracto de P. reducir las arrugas. mejorar la textura de la piel. El valor exacto de una dosis eficaz varía en función de la sensibilidad y el tamaño de cada paciente. elasticidad reparación. reparar o prevenir la decoloración. lúcuma que es capaz de provocar un cambio medible en el tiempo de cicatrización de heridas. se encuentra dentro de la planta o parte de la planta pero fuera de las células de los mismos. Específicamente se describen aquí los resultados experimentales completos de GC-MS análisis de los ésteres metílicos de ácidos de LNO y resultados experimentales establecer el efecto de LNO sobre la inflamación. el crecimiento de bacterias y hongos y cicatrización de heridas mediante el uso de varios in vivo y en modelos in vitro. [0038] El término "extracto" como se usa aquí significa una sustancia o composición obtenida de una fuente de planta o parte de planta. reducir o eliminar el acné. un exudado). mejorar la producción de colágeno. y puede determinarse fácilmente por un experto en la técnica usando procedimientos convencionales para la administración sistemática de agentes terapéuticos. [0039] Los términos "vehículo farmacéuticamente aceptable" o "vehículo fisiológicamente aceptable" tal como se utiliza aquí.

ácidos alfa hidroxi. Interpharm Press. y una susceptibilidad creciente a traumático púrpura o hematomas capa subcutánea de la piel muestra atrofia grasa en las mejillas y extremidades . metil parabeno y propil parabeno.. [0044] parches ejemplares incluyen (1) un parche de tipo matriz. lanolina. disminuyó lípidos de la superficie. [0042] "piel arrugada" se le da el significado que ha adquirido en la técnica y se refiere a la piel en la que la elasticidad se ha reducido hasta tal punto que los pliegues o arrugas. incorporado aquí por referencia. manteca de karité. [0041] "envejecimiento de la piel" tiene un significado aceptado en la técnica y se caracteriza por algunas o todas de las siguientes propiedades: Epidermis muestra una reducción progresiva en los melanocitos y células de Langerhans disminución de la densidad. y en la dermis. palmitato de isopropilo. aloe vera. sistemas de fármacos transdérmicos y tópica Entrega. [0043] Como se usa en la presente memoria "parche" comprende una composición tópica de acuerdo con la divulgación y una capa de recubrimiento. et al. El envejecimiento de la piel también se muestra cada vez mayor decoloración y pueden mostrar manchas cutáneas. promocionar absorción uniforme. vitaminas A. y E. retinoides. Inc. dermis se vuelve relativamente acelular. cada vez más evidente. (2) el parche de tipo depósito.). glándulas nervios. reducir el tiempo de demora. p 249-297 (1997). la microcirculación y el sudor disminuyen gradualmente dando lugar a disminución de la termorregulación y la disminución de la sensibilidad a quemar. (Ghosh. avascular y menos densa. y (4)-drogas en la monolítico adhesivo de tipo parche. . hay una pérdida progresiva de la elasticidad. C. filtros solares. extractos de seda. el parche está diseñado para maximizar el suministro de la composición a través del estrato córneo. vaselina. TK. con lo que la colocación del parche adyacente / composición a la superficie del tejido comprometido . epidermis superior. y reducir el frotamiento mecánico. la disminución de la hidratación. pero no están limitados a. y para minimizar la absorción en el sistema circulatorio. Estos parches son bien conocidos en la técnica y están disponibles generalmente en el mercado. (3) el laminado multi-fármaco en adhesivo de tipo parche. aceite de jojoba. antioxidantes. incisión.agentes incluyen. de tal manera que el parche se puede colocar sobre una herida. agentes promotores de colágeno. o grabar. Preferentemente.

que es un extracto terapéuticamente útil de la tuerca. La Planta de Pouteria [0047] La presente aceite terapéutico en las composiciones de acuerdo con la divulgación se obtiene de una planta del género Pouteria de plantas o de una planta en un género estrechamente relacionado con Pouteria. El género Pouteria de plantas taxonómicamente se organizó dentro de la familia Sapotaceae de plantas con flores perteneciente a la Ericales orden. australis). El extracto de nuez que se conoce como un aceite en un sentido amplio. Estos apósitos permiten el enfriamiento del sitio del dolor. zapota van Royen). Abiu (P. sandwicensis y especies del género Manilkara relacionada. Verde Sapote (P. canela manzana (P. por ejemplo. viridis). hypoglauca). tal como una planta de el género Pouteria. en particular revestimientos elastoméricos. y otros. Mamey (P. Sapodilla (M. "Vestir" incluye los revestimientos tales como un vendaje. ramiflora). Pouteria lúcuma. especies de Pouteria tales como lúcuma (Pouteria lúcuma). una envoltura de película de plástico o de otra película no absorbente. Curiola (P. Frutao (P. Pouteria Petróleo [0048] Las composiciones de acuerdo con la divulgación comprender un aceite de Pouteria. Las plantas adecuadas que sirven como fuentes de aceite de la terapéutica incluyen. árbol Bully (P. pero no se limitan a. campechina). que puede ser porosa o no porosa. como se usa aquí. por ejemplo. caimito). El LNO comprende una pluralidad de compuestos. sapota). jaimiqui M. bidentata). Canistel (P. y puede . o semilla. los cuales permiten calor y transporte de vapor.[0045] El término "vendaje". significa una cubierta diseñada para proteger y administrar una composición o sobre o en la cubierta. y varios revestimientos inertes. El término "vendaje" también abarca revestimientos no tejidas o tejidas. y para retrasar la senescencia. incluyendo sus muchos cultivares. Negro manzana (P. tales como plantas del género Manilkara. así como ausubo (M. P. [0046] El término "aceite lúcuma tuerca" o "LNO" se usa indistintamente con "aceite Pouteria" para referirse a la composición terapéutica que extrae de la tuerca de la fruta de una planta de la familia Sapotaceae de plantas. por ejemplo. en la promoción de la regeneración o bioregeneration. lo que proporciona una mayor comodidad.. torta). de la fruta de la planta. multiforme). al menos uno de los cuales es terapéuticamente activo en la promoción de la curación de heridas o quemaduras.

que se utiliza cualquiera de los componentes de ácidos grasos de LNO. el término "aceite Pouteria" se usa en referencia a esos extractos. acetona. tejido u órgano. por ejemplo. Fluidos de ejemplo para la extracción de LNO son cloroformo. por ejemplo. diclorometano. o componentes purificados de la LNO (por ejemplo. heptano o hexano y. el fluido de extracción es un compuesto no polar orgánico o un fluido orgánico ligeramente polar que es líquida a temperatura ambiente. por ejemplo. alcanos. la piel. el fluido es un medio en el que la LNO es dispersable. los extractos se términos generales se conoce como aceites. Además. . a pesar de que algunos extractos de planta de acuerdo con la divulgación se obtienen de especies de los géneros relacionados con el género Pouteria. en forma aislada singular o en combinaciones de al menos dos de tales componentes. pero en otras realizaciones. ácido palmítico. tal como ácido linoleico. ácido esteárico y ácido γ linolénico. En algunas realizaciones. "aceite Pouteria" también se usa de manera intercambiable con "aceite de nuez lúcuma" o "LNO". tales como ácidos orgánicos. acetato de etilo. [0049] La descripción también proporciona el uso terapéutico o cosmético de los componentes de LNO y. el líquido es un disolvente para LNO. en contacto con una célula. [0050] Varios aspectos de la divulgación sobre los métodos para inducir la migración celular. el género Manilkara. envejecimiento de la piel o de piel arrugada. La tuerca de extractos de acuerdo con la divulgación no comparten la propiedad de ser al menos parcialmente soluble en disolventes orgánicos no polares. ácido oleico. eliminar o prevenir una condición de la piel tales como el acné. incluyendo curación de quemaduras. acetonitrilo. la promoción de la cicatrización de heridas. Fluido [0051] LNO se extrae de la nuez o semilla de una planta de acuerdo con la invención utilizando un fluido como se describe en la presente memoria. Como se ha señalado en otra parte de esta descripción. etanol. debido a que muchos de los extractos de nueces terapéuticamente beneficiosos se obtienen de especies del género Pouteria. por esa razón.incluir compuestos que no son aceites químicos. la promoción de la regeneración de tejidos y reducir. uno o más ácidos grasos). y similares. en las composiciones de acuerdo con la divulgación. los métodos comprenden poner una cantidad terapéuticamente o cosméticamente eficaz de un extracto que contiene LNO. Típicamente. hidratos de carbono. en particular. En general.

. El P.tales como heptano o hexano. presión atmosférica. En . y el fluido se elimina para obtener un aceite . agrietado y / o tamizado a un tamaño y forma apropiados. dióxido de carbono supercrítico. isopropanol. la extracción de la extracción de fluido. molino de martillo o dispositivo similar de reducción de tamaño. por ejemplo. el aceite de nuez se extrae del polvo por un fluido. Un rango de tamaño adecuado para partículas tuerca sobre molienda o pulverización es de 750 micras a 1 mm de diámetro. alcoholes primarios. diclorometano. otros alcoholes. La materia prima tuerca lúcuma se muele. aunque con frecuencia se lleva a cabo a 22 ° C a 65 ° C . [0054] El proceso de extracción se lleva a cabo típicamente a temperatura ambiente. por ejemplo cloroformo. lúcuma aceite de nuez descritos en este documento se extrae usando un fluido tal como heptano que proporciona extrajo LNO que no requiere un fraccionamiento adicional. Una variedad de líquidos puede ser utilizado para extraer el aceite de nuez de lúcuma. es todo lo que hay que hacer para producir la terapéutica o cosmética de acuerdo con la divulgación. se utiliza para reducir la tuerca lúcuma a un tamaño de partícula óptimo para la extracción de aceite con un fluido particular. aunque las partículas más pequeñas y más grande será funcional y son contemplados por la divulgación. picado. o desde 22 º C a 50 º C o de 22 ° C a 37 ° C. en ciertas realizaciones de los métodos de extracción. Además. roto. acetato de etilo. secundarios o terciarios tales como isopropanol. tales como heptano o hexano. aunque presiones elevadas o bajas también se contemplan para la práctica de los métodos de extracción. en su caso. y dióxido de carbono supercrítico. Después de la extracción. metanol. una combinación de compuestos en cualquier proporción puede funcionar como un fluido de extracción. acetona. en el que la tuerca de lúcuma se muele en un polvo. acetonitrilo. alcanos. pero el proceso es compatible con temperaturas elevadas en el intervalo de 22 º C a 100 º C. [0052] El proceso de extracción Pouteria [0053] Un método de acuerdo con la descripción es un método de preparación de un extracto de Pouteria lúcuma. etanol. el fluido a presión se pone en contacto con la tuerca de lúcuma o carne tuerca. pulveriza. y etanol. y de cadena lineal o ramificada. por ejemplo. Por ejemplo. roto. metanol. heptano y hexano. o heptano y cloroformo. Así. un molinillo de café. El proceso de extracción también se lleva a cabo típicamente a una presión uniforme. destrozado. o la carne de fluido y la tuerca o tuerca estará en comunicación de fluido dentro de un recipiente presurizado.

pomadas. maquillaje y máscaras. [0056] LNO que contienen extractos pueden ser adecuados para su uso sin más procesamiento. sulfacetamida de sodio . evaporación. lociones. maquillaje. prevenir o reducir la probabilidad de acné. y combinaciones de los mismos. vacío. incluyendo pero no limitado a evaporación rotatoria. ácido salicílico. Alternativamente. tales como las cremas de noche. ácido glicólico. reducir. que comprende excipientes. vehículos. Alternativamente. protectores solares. con aceptables (preferiblemente mínimo) efectos secundarios. aceites. cremas. Las formulaciones adecuadas piel pueden incluir líquidos tópicamente aceptables. eritromicina. [0055] Extractos de acuerdo con la descripción pueden ser administrados a mamíferos en una dosis efectiva que es capaz de mejorar la cicatrización de heridas. lociones para las manos. filtración. limo resorcinol. Otros compuestos terapéuticos también pueden ser incluidos en las composiciones de acuerdo con la divulgación. geles o sólidos convencionales. pero no se limitan a. clindamicina. con la composición que comprende LNO y. por ejemplo. parcial o sustancialmente completa. los extractos crudos se pueden procesar adicionalmente para reducir el volumen por cualquier técnica conocida. peróxido de benzoilo. azufre. liofilización.otras realizaciones. cremas cosméticas. Las . todos los cuales se describen a continuación en composiciones que abordan y vías de administración de las composiciones LNO. permetrín. agua turba. el extracto puede administrarse a mamíferos en una dosis efectiva que es capaz de mejorar la curación de quemaduras de la piel. turba. lociones bronceadoras fundación. bases y similares. la carne tuerca o tuerca y el fluido estará en comunicación de fluido en un recipiente a presión baja. por ejemplo. y similares. Una forma de realización ejemplar que ilustra la inclusión de un compuesto terapéutico adicional se refiere a composiciones tópicas que incluyen también un agente anti-acné. Otros usos para los extractos de la descripción incluyen la administración de una dosis eficaz para eliminar. ácido retinoico. aglutinantes. Es evidente que las composiciones de acuerdo con la descripción también puede incluir más de dos compuestos terapéuticos. adapaleno. y similares. Composiciones y vías de administración [0057] Las composiciones farmacéuticas y formulaciones cosméticas se administran por cualquier vía que proporciona una dosis eficaz para el sitio de acción deseado. ácido azelaico. por ejemplo. Ejemplos de agentes anti-acné incluyen.

de una emulsión o dispersión de un líquido o semi -consistencia líquida obtenida por dispersión de una fase grasa en una fase acuosa (0 / W) o viceversa (W / O). incluyendo el cuero cabelludo. microesponjas. de una suspensión oleosa o solución. incluyendo que contienen agua. de un polvo libre o compacto para ser utilizado como es o para ser incorporado en un medio fisiológicamente aceptable (excipiente). alfa hidroxi-o alfa-cetoácidos tales como los ácidos láctico pirúvico. perfumes. y similares. o glicólico. los absorbentes de olor. y pigmentos similares. aceite animal. celulosa. microesferas o microcápsulas.composiciones pueden contener otros ingredientes opcionales adecuados tales como vitamina A. Dependiendo del método de aplicación. En una realización. aceite mineral. o de dispersiones vesiculares de tipo iónico y / o no iónico. gelatina. vehículo cosméticamente aceptable puede incluir aquellos hechos con uno o más ingredientes apropiados indicados anteriormente. los conservantes. metil o propil parabeno. parafina y cera de ozoquerita. petrolato. o goma árabe. aloe vera. las formulaciones pueden tener la forma de una solución acuosa. [0058] La descripción proporciona una composición para uso cosmético para aplicación tópica a la piel. Los vehículos adecuados tópicamente aceptables incluyen agua. polímeros naturales. de una dispersión o emulsión de consistencia blanda. los antioxidantes (carotenoides). agentes . polioles. composiciones tópicas. vaselina. ungüentos de base acuosa. colágeno. aceite vegetal. de un (anhidro) acuoso o acuoso / alcohólicas u oleosas gel. las composiciones dispersables en agua o solubles en agua. tales como microcristalina. tales como liposomas. el vehículo es una composición de vehículo miscible en agua. electrolitos. C y E. aditivos hidrófilos o lipófilos. alcohólica o acuosa / alcohólica o suspensión. esta composición se puede proporcionar en cualquier forma de dosificación farmacéutica normalmente se utiliza en los campos cosmético y farmacéutico. tales como xanthanes. almidón. fluidos. polímeros sintéticos. [0059] Para la aplicación tópica a la piel. o también de microcápsulas o micropartículas. agua en aceite o emulsiones de aceite en agua. pero también puede incluir portador sostenida o retardada. ceras orgánicas e inorgánicas. las cargas. [0060] Las formulaciones según la descripción también pueden comprender adyuvantes convencionales en el campo cosmético o farmacéutico elegido entre agentes gelificantes hidrófilos o lipófilos o espesantes. lanolina. alcoholes. vaselina. Tal miscible en agua. geles o similares. que es miscible en agua.

aceite de albaricoque y el aceite de oliva). de las arcillas . estearato de glicerilo o laurato. aceites sintéticos (por ejemplo. polímeros formadores de película. los polisacáridos tales como la hidroxipropilcelulosa. el aceite de vaselina. pueden ser introducidos en la fase grasa. ácido esteárico. arcillas y gomas naturales y se pueden citar. de alcoholes inferiores. de jojoba. polidimetilsiloxanos lineales o cíclicos. cera de arroz. Estos adyuvantes. [0063] Las formulaciones también pueden incluir líquidos. principios activos cosméticos y farmacéuticos con un efecto beneficioso sobre la piel o las fibras queratínicas (como las vitaminas) y materiales colorantes.neutralizantes. [0061] Las formulaciones también pueden comprender aceites minerales (por ejemplo. aceite de germen de trigo). que pueden o no ser solubles en el medio. propilenglicol o ciertos aceites cosméticos ligeros (African aceite de moringa. aceite de soja. en la fase acuosa y / o en las vesículas lipídicas y. o (alquilo) copolioles de dimeticona. ácido linoleico. estearato u oleato de sorbitol polioxietilenado. como gelificantes lipófilos. [0064] Las formulaciones también pueden incluir agentes gelificantes hidrófilos tales como polímeros de carboxi-vinilo (carbómero). cera de candelilla. los liposomas. por ejemplo. por ejemplo. aceite de Purcellin. aceite de aguacate. perfluoropoliéteres). el perhidroescualeno).01% a 20% o de 0. copolímeros acrílicos. tales como acrilato / alquil acrilato. aceite de almendra. feniltrimeticona). especialmente el etanol y el isopropanol. cera de abejas. Alcoholes grasos y ácidos grasos (por ejemplo. el aceite de emú. aceite de semilla de rosa mosqueta. en particular. Las cantidades de estos diferentes adyuvantes son las clásicamente utilizadas en el ámbito cosmético. aceites de silicona o ceras (por ejemplo. isoparafina hidrogenada). cera de carnauba. ciclometicona. cera de parafina o cera de polietileno. de color blanco (mineral) de aceite. tales como filtros solares. ésteres de ácidos grasos). los aceites animales (por ejemplo. los aceites fluorados (por ejemplo. ácido linolénico) se puede añadir a estos aceites y ceras. aceite de girasol. [0062] Las formulaciones también pueden incluir agentes emulsionantes. copolímeros poliacrilamidas. según su naturaleza.1% a 10% del peso total de la composición. los aceites vegetales (por ejemplo. agentes de bloqueo de UV. la fracción líquida de la manteca de karité. por ejemplo de 0.

: 74011-58-8). Mezlocilina (CAS Registro No. aminoglucósidos. la sílice hidrófoba tratada. aztreonam (Registro CAS No.: 79350-37-1). ticarcilina (Registro CAS No.: 10118-90-8). cefotaxima (Registro CAS No.: 4697-36-3).: 69-53-4). ácido nalidíxico (CAS No.: 65052-63-3 ).: 62587-73-9). glucopéptidos. Cefinetazole (Registro CAS No. Penicilina G (N º de registro CAS: 61-33-6).: 61477-96 -1). kanamicina (registro . carbenicilina ( registro CAS No. oxazalidiinones. Registro: 389-082). ceftazidima (Registro CAS No.: 92665-29-7). Enoxacina (Registro CAS No. cefixima (Registro CAS No. Cefonicida (Registro CAS No. pero no se limitan a.: 69712-56-7).: 56796-20-4). Amoxicilina (registro CAS No. del Registro : 73384-59-5). ampicilina (Registro CAS No. Imipenem (Registro CAS No. [0065] Las formulaciones pueden contener adicionalmente agentes antifúngicos o antibacterianos.: 25953-19-9). Azlocilina (Registro CAS No.: 121961-22-6).: 147-52-4). dalfopristina. quinupristina. cefamicinas. la etilcelulosa y sus mezclas. cefalosporinas. macrólidos.: 70458-96-7).: 26787-78-0).: 66-79-5). Lomefloxacina (Registro CAS No. Registro: 3116 -76-5). Loracarbef (Registro CAS No. minociclina (Registro CAS No. tetraciclina (Registro CAS No.: 37517-28-5). quinolonas. monobactamas. y fluoroquinolonas. amikacina (Registro CAS No. Cefazolina (CAS Registry No.: 55268-75-2).: 74431-23-5). linezolid (Zyvax). Cefetamet (Registro CAS No.: 35607-66 -0).modificadas como las bentonas. penicilinas. ofloxacina (Registro CAS No.: 78110-38-0).: 1403-66-3).: 51481-65-3). cefoperazona (Registro CAS No.: 7035603-5). Cefotetan (CAS Registry No.: 34787-01-4). Piperacilina (Registro CAS No.: 42540-409).25-0). sales metálicas de ácidos grasos.: 82419-36-1). tales como los estearatos de aluminio. gentamicina (CAS Registro No. cloxacilina (Registro CAS No. estreptograminas. ciprofloxacina (Registro CAS No. Cinoxacina (Registro CAS No. Registro: 564 . dicloxacilina (CAS No. Ceftizoxima (Registro CAS No. Agentes anti-bacterianos antibióticos incluyen.: 28657-80-9).: 61270-58-4). meticilina (Registro CAS N º: 61-32-5). cefoxitina (Registro CAS No. cefuroxima (Registro CAS No. Nafcilina (Registro CAS No.: 37091-660).: 85721-33-1). pero no se limitan a.: 88040-23-7).: 80210-62-4). doxiciclina (CAS No. Cefprozil (Registro CAS No. carbacephems. Ejemplos de agentes antibióticos incluyen. Cefaclor (Registro CAS No.: 63527-52-6). oxacilina (Registro CAS No. norfloxacina (Registro CAS No.: 153-61-7).: 60-54-8). ceftriaxona (CAS No.: 7255882-8). formiato de sodio cefamandol (Registro CAS No. Cefsulodin (Registro CAS No.: 68401-81-0).: 62893-19-0).: 79660-72-3). cefalotina (Registro CAS No.: 61-72-3). Cefpodoxime (Registro CAS No. cefepima (Registro CAS No. tetraciclinas. carbapenems.: 98079-51-7). fleroxacina (Registro CAS No.

Trimetoprim (CAS No. Netilmicina (Registro CAS No. caspofungina. [0068] Un parche transdérmico se puede emplear para entregar lúcuma composiciones de aceite de nuez a un sujeto. Co-amoxiclavuanate. Metronidazol (Registro CAS No.: 83905-01-5). Teicoplanina (Registro CAS No. crema o ungüento de una composición de acuerdo con la descripción se aplica directamente sobre la almohadilla de vestir u otro material apósito adecuado. la composición puede estar en la forma de un ungüento. griseofulvina. Erythromycin estolato (Registro CAS No. la pomada. clotrimazol.: 1404-90-6). flucitosina.: 12650-69-0). así como sus diversas sales. La almohadilla o material de vendaje se coloca sobre la herida o quemadura con el lado de contacto con el medicamento para heridas o quemaduras. pero no se limita a. [0066] agentes antifúngicos incluyen. un material de la almohadilla.: 13292-46-1).: 56-75-7).: 32986-56 . clindamicina (Registro CAS No. Erythromycin glucoheptonato (CAS No.: 3847-29-8).: 57-92-1). cefalexina (Registro CAS No. ácidos. la composición de la divulgación está destinada a ser aplicada por vía tópica y directamente a la herida o quemadura.: 114-07-8). Registro: 23067 . Alternativamente. pero no se limitan a.: 18323-44-9). anfotericina B. Registro: 738 . estearato de eritromicina (registro CAS No. . mupirocina (CAS Registro No. la composición puede también o alternativamente ser aplicado en forma de aerosol. pomada o crema que se extiende directamente sobre la herida y luego se cubre con un apósito estéril estándar o de otro material apósito adecuado.4).: 15686-71-2). eritromicina lactobionato (Registro CAS No.1).: 56391-56-1). Nitrofurantoína (Registro CAS No. rifampicina (Registro CAS No. itraconazol. Para quemaduras de primer grado y abrasiones leves. Sulfametoxazol (Registro CAS No. nitrato de miconazol. nistatina.: 723-46-6). ácido benzoico. vancomicina (Registro CAS No. claritromicina (Registro CAS No. y selenio sulfuro.: 61036-64-4). ácido salicílico.: 67-20-9).70-5).13-2).: 80214-83 . estreptomicina (Registro CAS No. Tobramicina (Registro CAS No.: 8063-07-8). eritromicina (CAS Registry No . Este último enfoque funciona mejor cuando se aplica vendaje para quemaduras graves y heridas superficiales.: 81103-11-9). El parche se incluyen. Roxithromycin (Registro CAS No.: 443-481). fluconazol. Cuando la herida es profunda. azitromicina (Registro CAS No. bases y otros derivados. cloranfenicol (CAS Registro No.CAS No. ketoconazol. clorhidrato de terbinafina. combinaciones de Piperacilina y Tazobactam.: 41342-53-4). Erythromycin etil succinato (registro CAS No.: 3521-62-8). o la quemadura grave. [0067] En general. el voriconazol.: 643-22-1).

y la composición terapéutica. tela de algodón. adherido) a la piel. Los materiales útiles táctil ofrecen un sustrato adecuado para el adhesivo y son suficientemente fuertes para resistir la eliminación de la piel. la . pero no se limitan a. La dosificación de agente disponible para la piel puede ser alterado mediante la alteración de la densidad de las aplicaciones discretas del agente primario a la superficie definida del parche. tela de rayón. pero también de una delgadez que será cómodo para el usuario y flexible en contacto con todas las superficies de la piel. La flexibilidad se consigue por la elasticidad en una cualquiera o todos los ejes del material. [0070] El material de la almohadilla es también preferiblemente transpirable. lo que permite que el aire pase a través del parche y en contacto con la piel. [0072] En algunas realizaciones. La composición farmacéutica está preferiblemente presente en una cantidad y una concentración tal que una dosis eficaz del agente se aplica a la piel durante el tiempo designado de que el parche permanece en contacto (por ejemplo. tela tetrón. Ejemplos de materiales flexibles incluyen. El material de la almohadilla también puede ser de un espesor suficiente para proporcionar resistencia a la almohadilla. En algunas realizaciones. el agente se puede aplicar al parche en lugares discretos. es decir. en algunas realizaciones es preferible que la almohadilla de ser permeable al agente. cuando se aplica a zonas de la piel que tiene alteraciones en los ángulos de la superficie (por ejemplo alrededor de la zona de la piel fosa nasal). sin embargo. tela de nylon o de espuma de plástico. La almohadilla es preferiblemente no estirable. en el eje plano del material. la almohadilla puede no transpirable. después de haber sido fijado a la piel mediante un adhesivo. En algunas realizaciones.adhesivo. [0071] Un adhesivo útiles en las composiciones y métodos de acuerdo con la divulgación es cualquier sustancia que mantiene el parche en contacto con la piel. la almohadilla proporciona un sustrato adecuado para la formación de aberturas en la misma. no elástico. el área de la sección transversal de cada solicitud de una superficie definida de la revisión. Sin embargo. El material de la almohadilla es preferiblemente flexible para adaptarse a contornos de la piel. [0069] El material de la almohadilla es lo suficientemente flexible para proporcionar una cierta comodidad para el sujeto. El material de la almohadilla es también preferiblemente no permeable al agente aplicado al parche.

volumen de la cavidad (medida por la profundidad y el área de sección transversal) de la abertura que contiene el agente en una zona definida en la superficie del parche. por ejemplo. dependiendo del tipo y la profundidad de la herida o la gravedad de la quemadura. cuanto mayor es la densidad de aberturas. Así pues. mayor será la cantidad de agente disponible para la entrega a la piel. donde la contaminación bacteriana y fúngica normalmente ocurriría en ausencia de tratamiento. un espesor de un cuarto de pulgada de la composición farmacéutica. [0075] Los apósitos o parches están ventajosamente cambiado tres a cuatro veces al día. mayor será la profundidad de las aberturas en el revestimiento. sujeto o paciente en necesidad del mismo. Para las heridas muy contaminadas (que exhiben cantidades significativas de pus). pero la composición también puede aplicarse tan pronto como sea posible. mayor será la cantidad de agente disponible para la entrega a la piel. los cambios de apósito se puede realizar cada cuatro a seis horas. la licuefacción en la hidratación de la composición. también puede usarse para tratar quemaduras y . una composición farmacéutica de la divulgación se aplica a una herida o quemadura para cubrir la superficie lesionada completamente con. cuando un revestimiento se utiliza como una máscara en la adición de agente para el parche. La composición medicinal presente supuesto. para otras heridas o quemaduras. [0074] Así. a veces sólo una o dos veces por día. o el área de sección transversal de las aberturas. los cambios se llevan a cabo con menos frecuencia. y preferiblemente antes de 12 horas después de la lesión o postquemadura. Aderezo repetida diariamente o cambios de patch se continúan hasta que la herida o quemadura haya sanado. o cualquier combinación de estos parámetros. Tiempo de curación varía. Cambio de apósito-horarios dependen de la condición de la herida y los expertos en la técnica puede ajustar los horarios y sobre una base de caso por caso. [0073] La entrega de la composición terapéutica a la piel puede proceder por un procedimiento que incluye. heridas o quemaduras graves llanto. la difusión del agente de distancia desde el parche o la acción capilar de la composición desde el parche a la piel . [0076] Las composiciones farmacéuticas según la divulgación son eficaces en el tratamiento de una gran variedad de heridas y quemaduras a un mamífero. Del mismo modo. pero no se limitan a. la composición farmacéutica debe ser aplicado dentro de los primeros veinte minutos después de la quemadura o lesión. Preferiblemente.

Ejemplo 9 describe el efecto de LNO en prematura senescencia celular. Ejemplo 5 proporciona un metil éster de ácido graso (FAME) análisis de la composición de LNO. se describe aquí un método para promover la curación de la piel y / o regeneración de la piel por aplicación tópica a la piel de una formulación que contiene el extracto de aceite de nuez. y caldo . Ejemplo 1 describe la preparación de un extracto de Pouteria lúcuma tuerca. antioxidantes. los medios utilizados fueron agar LB y caldo LB. Ejemplo 4 describe el efecto del aceite de nuez de lúcuma (LNO) en la regeneración de tejidos en un ensayo de regeneración pez cebra aleta de cola.heridas en otros mamíferos. [0078] Los siguientes ejemplos ilustran realizaciones de la descripción. filtros solares y similares. Ejemplo 1 Lúcuma Nut Oil (LNO) Extracción [0079] En los experimentos descritos en este Ejemplo y los siguientes Ejemplos 2-9. Patata Dextrosa Agar (PDA). agentes promotores de colágeno. La formulación también puede apoyar la salud o la reparación del cuero cabelludo. En consecuencia. animales de granja. Ejemplo 6 describe ensayos de Griess para la producción de NO en los macrófagos inducidos por LPS como una medida de la influencia de LNO en los procesos inflamatorios. retinoides. caballos. y similares. tales como animales veterinarios. (Fisher Scientific). por ejemplo. que es el uso de LNO como un agente para contrarrestar el envejecimiento de la piel o para el tratamiento de quemaduras de la piel. Ejemplo 7 proporciona un análisis de la remodelación del citoesqueleto por tinción de inmunofluorescencia. En la medida en que los materiales específicos se mencionan. incluyendo perros. Ejemplo 2 proporciona resultados experimentales que muestran que Lúcuma tuerca de aceite (LNO) induce la migración celular de los fibroblastos en un ensayo in vitro. Ejemplo 3 describe el efecto de LNO en la curación de heridas y la regeneración in vivo en un modelo de ratón herida en la piel. [0077] Los datos descritos en este documento establecer otro aspecto de la divulgación. Ejemplo 8 describe los experimentos que revelan el efecto de LNO en bacterias y hongos. humectantes. es meramente para fines de ilustración y no está destinado a limitar las reivindicaciones. La formulación puede contener adicionalmente piel que promueven la salud agentes incluyendo. otros animales domésticos. gatos.

Pouteria lúcuma O. el heptano se eliminó a partir del extracto en vacío. obteniéndose un aceite amarillo que se almacenó a -20 º C protegido de la luz. [0083] Un ensayo in vitro de crecimiento de fibroblastos mostró que la tuerca lúcuma extrae aumento de la migración celular. placas de 96 pocillos eran de Costar. (Sin. [0081] Como alternativa. Frutos secos liofilizados se molieron finamente con un molinillo de café. como la migración celular se sabe que es una característica de la cicatrización de heridas. y la tuerca de carne resultante se liofilizó. Este proceso se repitió dos veces. Después de la extracción. El polvo fue desgrasada en una proporción de 1 g de polvo tuerca a 100 ml de heptano y se filtró con un papel de filtro cónico (Whatman). los frutos secos Lucuma.patata dextrosa (PDB) (Difco). [0080] cáscaras de madera se han retirado de las tuercas de Pouteria lúcuma. Antibióticos y antifúngicos utilizados en los experimentos incluyeron penicilinaestreptomicina (Cellgo) y la sal nitrato de econazol (Sigma # E4632). Diversos extractos de la fruta lúcuma y la tuerca (dentro de las semillas de un fruto carnoso) se examinaron en ensayos de migración de células in vitro. Ktze. 3T3) se cultivaron inicialmente hasta confluencia sobre una superficie de vidrio y un rasguño se hizo entonces en el centro de la placa. es decir. Todos los demás reactivos químicos se adquirieron de Sigma-Aldrich Co. Ejemplo 2 Lúcuma Aceite de Nuez induce la migración de fibroblastos in vitro [0082] La capacidad del extracto de aceite de nuez de lúcuma para influir o afectar el comportamiento de células eucariotas en forma de migración de fibroblastos de células se evaluó mediante un estándar in vitro en células de ensayo de migración en la técnica. La extracción se realizó bajo agitación suave. Las placas se trataron con suero bovino fetal (FBS) como control positivo o diversas concentraciones (10-40 mg / ml) de aceite de nuez de . Lúcuma obvota HBK) aceite de nuez se obtuvo mediante la extracción de 150 g de suelo tuerca lúcuma con 2.25 L de heptano durante 12 horas. Los fibroblastos (fibroblastos es decir. Heptano se eliminó del extracto resultante utilizando un evaporador rotatorio (Büchi) seguido de un Savant Speed Vac obteniéndose un aceite de color amarillo. protegida de la luz y a temperatura ambiente.

Las células se sembraron a una densidad de 1 × 10 4 células por pocillo en una placa de 24-pocillos y se incubaron durante 24 horas. Las células se trataron como sigue: DMEM +10% FBS + vehículo (0. Los tapones se retiraron entonces de la placa de 96 pocillos para crear una zona de detección de 2. control negativo). Las fotografías fueron tomadas de cada pocillo para medir el área inicial de la herida. incubadora con 5% de CO 2.06% de glicerol) + OA (18 mg / mL). una característica del proceso de cicatrización de la herida. las células se marcaron con . Brevemente. Los extractos de carne de nuez (referido como lúcuma aceite de nuez o extractos LNO). el aumento de la migración celular en el modelo de herida de una manera dependiente de la dosis (Figura 1). En consecuencia. Entonces 25.06% de glicerol) + LNO (60 mg / mL ). [0084] Humanos fibroblastos neonatales se mantuvieron en la Dulbecco Modificado Medio Eagle (D-MEM) +10% de suero fetal bovino (FBS) y se mantuvieron en un humidificado incubadora de 37 ° C con 5% de CO 2.lúcuma (LNO) extrae preparado según el Ejemplo 1. DMEM + vehículo (0.06% de glicerol) + LA (24 mg / mL) y DMEM + vehículo (0. los pocillos fueron fotografiadas de nuevo.000 células / pocillo fueron sembradas en una placa de 96 pocillos y se dejaron adherir al colágeno I placa recubierta durante 24 horas. La zona rayada se midió usando el software Photoshop CS Acrobat. y se trató con LNO o vehículo durante 72 horas. privadas de suero durante 24 horas. LNO aumento de la migración de células de fibroblastos de manera dependiente de la dosis. control positivo).3 mm de anchura). No se encontró actividad en la fruta o extracto de cáscara. DMEM + vehículo (0.06% de glicerol. [0085] El efecto de LNO sobre la migración de fibroblastos también se evaluó por el ensayo de Oris ® migración de células desde las tecnologías de Platypus de acuerdo con las instrucciones del fabricante.06% de glicerol. Cada monocapa fue herido arrastrando una punta de pipeta a través del fondo del pozo. Después de 24 horas de incubación. o hasta 100% de confluencia se alcanzó. en contraste. El medio se eliminó y las células se lavaron con 500 l de PBS dos veces para eliminar células desprendidas o residuos celulares. utilizando un borde recto como guía (aproximadamente 1.0 mm. y el porcentaje de cierre de la herida en cada punto de tiempo se obtuvo mediante la siguiente fórmula: (1 [tamaño actual herida / tamaño de la herida inicial]) x 100. LNO promueve la migración celular. Las placas se controlaron durante la migración celular en el área de la herida (% de cierre de heridas). DMEM + vehículo (0. fibroblastos neonatales humanos se mantuvieron en Dulbecco modificado del medio Eagle (D-MEM) +10% de suero fetal bovino (FBS) y se mantuvieron en un humidificado 37 ° C.

et al. Med.. Clin Invest. Exp. 186:1615-1620 (1997).. 5. Ejemplo 3 En Vivo y Curación de Heridas Heridas-Skin Regeneration [0086] El extracto LNO del Ejemplo 1 se usó adicionalmente en dos modelos in vivo para evaluar la curación de heridas y la regeneración.0 mM y la migración a la zona de exclusión se midió por microscopía fluorescente.. es decir. En el ensayo de curación CD-1 de ratón escisión herida. también en el vehículo. et al. un grupo experimental y un grupo control positivo. J. Los resultados demostraron que LNO promovió la migración de fibroblastos humanos en la zona de exclusión (Figura 8). Brevemente. cada descripción de incorpora aquí como referencia).5% de carboximetilcelulosa en PBS). un punzón de 12 mm de la piel se utiliza para crear una herida en ratones y los ratones se dividieron en tres grupos. la región de los hombros y la espalda de cada animal se afeitó y un afilado punzón (diámetro interno 12 mm) se utiliza para eliminar de la piel.968. una específica de adenosina A 2 Un agonista del receptor ofrecen comercialmente por Tocris. Inmediatamente después de la herida. [0087] ensayos de curación de la herida se realizaron por MDS Pharma Services. incluyendo el panículo carnoso y los tejidos adherentes. ver Patente de EE. LA y OA son el AF importante de LNO.UU. Estos resultados demostraron que el efecto de curación de heridas de LNO no puede explicarse por la única presencia de LA o OA. 4A... de acuerdo con el protocolo describen en otra parte (Kapoor.697). J. En este experimento. La zona de la herida se trazó sobre láminas de plástico en los días 3. como las concentraciones equivalentes de estos AG puro no fueron capaces de reproducir el efecto de LNO en la migración celular (figura 9).. grupos de 5 machos CD-1 ratones que pesen 22 ± 2 g se utilizaron para este ensayo. las heridas se trataron durante diez días con vehículo (0. 118:3279-3290 (2008). aceite de nuez de lúcuma (LNO) (200 ug / ratón) en vehículo. N º 4. 7.Calceína AM 4. LNO disminuyó el tiempo requerido para el cierre de heridas (Figura 4A). MDSPS pruebas de código 1115924.. Montesinos . Taiwan. un grupo de control negativo. Bajo anestesia con éter. La mediana del tiempo requerido para el cierre de heridas (CT 50) se muestra en la figura. Los efectos de LNO oleico frente puro (OA) y ácidos linoleico (LA) se compararon en fibroblastos rayados. o el control positivo CGS-21680 (CAS120225-54-9 . Los datos establecen que el LNO disminuyó el tiempo requerido para el cierre de heridas (CT) versus el control del vehículo. 9 y 11 y se cuantificaron mediante .

84 0. versus vehículo (ANOVA de un factor seguido por prueba de Dunnett) Ejemplo 4 En la curación de heridas y la regeneración Vivo-Tailfin Amputación Primordial [0089] Un modelo de aleta de cola en la curación de heridas y la regeneración in vivo también se utilizó para evaluar la capacidad de un extracto de aceite de lúcuma tuerca para promover la curación de heridas apropiado.58 ± 0. que fue significativamente mayor que la del vehículo y comparable con el control positivo. Herida datos de cierre o curación de heridas obtenidos en estos experimentos se presentan en la Tabla 1.1 * una hora a la que se cierra el 50% de la herida de la piel. MS-222) and placed in 2% agar Petri dishes. En este modelo transgénico. [0088] La aplicación tópica de LNO en las heridas dérmicas de DC-1 ratones mostraron las importantes propiedades cicatrizantes de LNO. CGS agonista de la adenosina. lo que permite el seguimiento de la cicatrización de heridas en tiempo real mediante la observación directa de la angiogénesis. Surgical blades were used to amputate tailfin primordia just posterior to the notochord.04 ± 0. b error estándar * p <0. Larvae . LNO o vehículo se aplicaron tópicamente inmediatamente después de la lesión y una vez al día a partir de entonces para un total de 10 días consecutivos. Version 30).04% 3-amino benzoic acid ethylester (tricaine. y los resultados de estos ensayos también proporcionan información sobre las propiedades angiogénicas de LNO.34 ± 0.3 * LNO 1000 g / ratón 6.2 * LNO 200 ug / ratón ± 6.4 CGS 10 ug / ratón 6. Los animales tratados mostraron casi 100% cierre de la herida después de 10 días de la administración tópica de LNO (figuras 4 y 5).86 ± 0. TABLA-US-00001 CUADRO 1 cierre de la herida dérmica expresada como tiempo medio de cierre (CT 50) Tratamiento CT 50 a ± SE b (días) Vehículo de 7.el uso de un analizador de imagen (Life Science Resources VISTA. Forty-eight-hour-old or five-day-old zebrafish larvae (AB strain) were anesthetized in 0.2 LNO 500 ug / ratón 5.05. El pronunciado in vivo de cicatrización de heridas efecto de LNO (Tabla 1) se explica por su relación única de AF y por los efectos potenciadores de varios anti-inflamatoria conjuntos combustibles contenidos en el LNO. el promotor fli1 impulsa la expresión de la proteína verde fluorescente (GFP) en todas las células endoteliales vasculares.

A 1 μL aliquot of the diluted sample was injected into a heated (250° C. These effects were dose-dependent (FIG. The effects of LNO were analyzed and compared to the positive control CGS-21680 (2-p-(2Carboxyethyl)phenethylamino-5'-N-ethylcarboxamidoadenosine). This extract was diluted 1:10 twice for further analysis. Photographs of regenerating tailfins were taken at 24 and 48 hours post-amputation using a Scion CFW-1310C color digital camera with an Olympus SZ4060 zoom stereo microscope. the fin fluorescent area was normalized against the total fin area. hold 2 minutes./minute to 240° C.25 μm film). Results are presented in Table 2.25 mm ID×0. ramp 2° C. The carrier gas was helium flowing at 1 mL/minute. hold 10 minutes. dried under a stream of nitrogen and reconstituted in 100 μL of methylene chloride. and +EI ionization of 70 eV. These results are in agreement with the data from CD-1 mice and indicate that LNO is not only a wound healing agent. CAS120225-54-9) or LNO (10-100 μg/mL in water) and incubated at 28° C. Oven conditions were: 100° C. . ramp 5° C. Samples were gently stirred in a tabletop incubator for 5 minutes at 120 rpm and then centrifuged for 3 minutes at 2100×g. [0090] Taken together. hold 1 minute. 7). Example 5 GC -MS Analysis of LNO [0091] For fatty acid methyl ester (FAME) analysis. Vials were cooled in an ice bath and 2 mL hexane added./minute to 200° C. Mass spectra from 40 to 550 m/z were acquired using a dual-stage quadrupole with source at 250° C.were placed in 24-well plates containing either water (control). 6B. hold 8 minutes.. the experimental results presented in Examples 3 and 4 indicate that the nut oil extracted from lucuma has significant activity in enhancing wound healing processes. it is also a promoter of the formation of new blood vessels in wounded areas. shown in FIG. For this assay. a 100 μL aliquot of LNO was added to 1 mL methanolic HCl and heated for 1 hour at 100° C. establish that LNO increased the amount of regenerative tissue versus both non-treated and positive control larvae. CGS-21680 (50 μg/mL. A 37-component food industry fatty acid mixture at 100 μg/mL each was injected for verification.) split (50:1) injector and separated on an SGE BPX70 (highly polar cyanopropyl polysilphenylsiloxane) capillary column (60 m×0. ramp 5° C. The results. gently shaken every 15 minutes for 1 minute. Primordia re-growth was measured using fluorescence microscopy and image analysis of fluorescent endothelial cells. The organic phase was transferred to a new vial./minute to 150° C.

and γ-linolenic acid (C18:3) (Table 2.24 pentadecanoic acid methyl pentadecanoate 15:0 24. 14) 0.65 (cis-13.04 heneicosanoic acid methyl heneicosanoate 21:0 47. 5.34 0.34 eicosenoic acid methyl eicosenoate 20:1 45.1 behenic acid methyl behenate 22:0 50.17 (cis.42 0.33 0.6% LNO from ground lucuma nut powder. Several of the FAs from LNO have been reported as potentially relevant in maintaining healthy skin and in improving lipid metabolism in humans.04 lignoceric acid methyl lignocerate 24:0 58.51 (cis-9.43 1 All peak areas integrated and summed. Both GLA and its metabolites can prevent uncontrolled inflammation damage to healthy cells that severely impair the wound healing process. 3 RT = retention time in minutes (see FIG.01 eicosapentoic acid methyl eicosapentanoate 20:5 55. TABLE -US-00002 TABLE 2 Chemical composition of lucuma nut oil % Fatty Acid Methyl Area 1 Fatty Acid Ester (FAME) Carbon 2 RT 3 38.83 8.92 2.16 0.99 (cis-6.01 0. eg 16:0 represents the completely saturated palmitic acid. 17) 0.14 decanoic acid methyl decanoate 10:0 10. Ejemplo 6 . stearic (C18:0). 2 Total carbon number and unsaturation (if any).58 0. there were five as yet unidentified FAs.02 0. FIG.02 octanoic acid methyl octanoate 8:0 7.04 ? ? ? 46.77 0. palmitic (C16:0).88 0.01 ? ? ? 47. 16) 0. In addition.05 erucic acid methyl erucate (cis-13) 22:1 52.85 linoleic acid methyl linoleate 18:2 40.03 ? ? ? 55.63 palmitic acid methyl palmitate 16:0 28.07 ? ? ? 25.11 heptadecanoic acid methyl heptadecanoate 17:0 32.42 myristic acid methyl myristate 14:0 20.18 18.29 (cis-9) 0. GC/MS analyses of fatty acid methyl esters (FAMEs) indicated that the most abundant FAs in LNO were linoleic (C18:2). Linoleic and oleic acids have been reported as wound healing agents potentially acting as modulators of skin inflammation. None of the unknowns contributed significantly to fatty acid composition of the LNO. 3).60 0.24 0.90 0.08 ? ? ? 45.76 0.50 0. 9.07 eicosadienoic acid methyl eicosadienoate 20:2 47.61 arachidic acid methyl arachidate 20:0 44.94 stearic acid methyl stearate 18:0 36.75 0. 11.02 ? ? ? 60.[0092] The heptane extract from lucuma nut yielded 2.21 0. 14. Area of each FAME was divided by summed peak area of all FAMEs to calculate % area.04 docosadienoic acid methyl docosadienoate 22:2 52. 3).85 0. 12) 27.1 lauric acid methyl laurate 12:0 14.01 ? ? ? 63.17 (cis-11. 8.85 oleic acid methyl oleate (cis-9) 18:1 38. Another bioactive molecule detected in LNO was γ-linolenic acid (GLA).01 ? ? ? 47.93 γ linolenic acid methyl γ-linolenate 18:3 42.90 0. oleic (C18:1).17 palmitoleic acid methyl palmitoleate 16:1 30. 12) 0.09 (cis-11) 0.

Leukoc. LNO did not show any cytotoxic effect at the concentrations used in our studies as evaluated by the MTT viability assay. serum-starved for 24 hours. with minor modifications.. [0094] The Griess assay was performed to indirectly measure nitric oxide production by LPS-induced macrophages. establish that LNO modulates the inflammatory process in a manner that accelerates the wound healing process. samples were read at 540 nm using a BIOTEK micro-plate spectrophotometer. 1% naphthaleneethylenediamine dihydrochloride in 5% H 3 PO 4 ).). was performed according to the protocol described elsewhere (Park. After 8 hours.4×10 5 cells/well.4×10 5 cells/well in a 24-well plate and grown for 24 hours. Ejemplo 7 Immunofluorescence Staining [0095] Cells were seeded into 24-well plates containing glass coverslips. the transgenic zebrafish larvae tailfin regeneration assay. 11). The decrease in nitric oxide production after LNO application was dose dependent. Louis.. Cells were pre-treated for 2 hours with LNO prior to incubation with LPS at 1 μg/mL for 8 hours. LNO produced a moderate but significant decrease in the concentration of nitric oxide (FIG. Cells were subcultured by scraping plates when cells reached 90% confluency. RAW macrophages were plated at a minimum density of 0. The Griess assay. and treated with LNO 60 . Stock solutions of LNO and triptolide (positive control) were added to the medium 2 hours before LPS stimulation. Cells were stimulated with 1 μg/mL LPS (Sigma-Aldrich. The RAW264.. RAW264. Taken together.7 macrophages were obtained from the American Type Culture Collection (ATCC). et al. humidified incubator containing 5% CO 2 . in 24-well plates.7 cells were plated at a density of 0. and maintained in a 37° C. Briefly. conditioned media (50 μL) was removed and immediately mixed with 50 μL of Griess reagent (10% sulfanilamide. Biol. and the LPS-stimulated macrophage behavior. which provides a measure of nitrite in the culture medium. supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum. 54:119-124 (1993)). the results from the in vivo mice wounding assay. After incubation for 15 minutes at room temperature in darkness.LNO Decreases NO Production in Macrophages [0093] Murine RAW264. Mo. Inc. St.7 cells were cultured in DMEM. J.

and Saccharomyces cerevisiae (ATCC # 201459). Washington. American Society for Microbiology.. Wayne. Staphylococcus aureus (ATCC # 12600). [0096] The results showed that LNO at 60 μg/mL induced a mild decrease in stress fiber formation and increased the expression of vinculin (FIG. Vol. For inhibition experiments. E. American Society for Microbiology. WJ Hausler. 1985. These results are consistent with the finding that LNO increased cell migration by increasing vinculin expression and mildly decreasing stress fiber formation in fibroblasts. cerevisiae. Comm. cerevisiae was Potato Dextrose Agar (PDA). Cat F7053) 1/200 or Rhodamine Phalloidin 140 nM (Cytoskeleton Inc). [0098] The minimal inhibitory concentration (MIC) values were determined by broth dilution assay. aureus were grown on LB agar plates at 37° CE aerogenes and M. The medium for the growth of S. Cells were washed again for at least 20 minutes with PBS and then mounted in 80% glycerol PBS. Stds. For staining of stress fibers and vinculin. The descriptions are incorporated herein by reference The above-identified microorganisms were grown for 24 hours in broth .. ABEH Lennette. in Manual of Clinical Microbiology. 17. rhodococcus DK17 were grown on LB agar plates at 30° CS cerevisiae was grown on PDA plates at 30° C. Mycobacterium rhodococcus DK17. DC and CLSI Ferraro. and HJ Shadomy. coli and S. 4th ed. The medium for the growth of all bacteria was LB agar at 37° C. Cells were washed with PBS and then blocked with 3% (wt/vol) BSA in PBS for 1 hour. Editor. and the cells were incubated overnight at 4° C. Cells were washed with PBS and then permeabilized for 2-5 minutes. thus favoring cell motility. cells were fixed with ice cold 4% paraformaldehyde in PBS for 15 minutes and permeabilized with ice cold 0.μg/mL or vehicle for 24 hours. 1997: Natl.5% (vol/vol) Triton X-100 in PBS for 5 minutes at room temperature. Vinculin mAb FITC-Conjugate (Sigma. LB broth was used for all bacteria and Potato Dextrose Broth (PDB) was used for testing S. Susceptibility tests: microdilution and macrodilution broth procedures. diluted in 3% BSA (wt/vol) in PBS was applied. using a method modified from Jones et al. Ejemplo 8 LNO Effects on Bacteria and Fungi [0097] The bacteria and fungi studied were Escherichia coli DH5α (ATCC # 47093). Lab. 10). Enterobacter aerogenes (ATCC # 13048). Jr. Clin. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically.

Cells were then fixed in ice-cold methanol for 5 minutes and stained with Acridine orange. Media inoculated with the preferred microorganism (5×10 5 cells/mL) was added to each well of a 96-well plate containing 10-1000 μg/mL of LNO. These anomalous morphological features are hallmarks of the aging process in senescent cells. incubator with 5% CO 2 For induction of premature senescence. the effect of LNO on cellular senescence was assessed by studying the changes in nuclear morphology of H 2 O 2 -induced senescent fibroblasts. Among other characteristics. non-senescent cells (control) . cells display several changes in their phenotype. No significant inhibitory effect was observed up to the concentration of 1000 μg/ml of LNO. The plate was then incubated at 30° C. In the experiments described in this Example. The inhibitory effect of LNO on the growth of the tested organism was evaluated using a MultiDetection Microplate Reader (Synergy HT. The MIC was defined as the lower concentration of the compound to inhibit growth of microorganisms compared to the growth of the untreated control. alterations in nuclear morphology are characteristic of senescent cells. [0102] By fluorescence microscopy. or 37° C. Globular. H 2 O 2 (100 μM)+LNO 60 μg/mL.cultures. Fluorescent microphotographs of cell nuclei were taken with an Olympus 1×51 microscope coupled to a CWF 1310C camera (Scion Corporation). After the treatments. fragmentized or oversized nuclei are frequently found in senescent cells. fibroblasts were trypsinized. Three days after seeding. passaged normally. folded. or just culture medium for 1 hour. and incubated in fresh complete medium for another 7 days. Biotek) at 600 nm (absorbance). the cells were treated with the culture medium containing H 2 O 2 (100 μM). exponentially growing fibroblasts were inoculated at a cell density of 5×10 5 in 50 mm dishes. Example 9 LNO Effects on Premature Cellular Senescence [0100] During cellular senescence. [0099] All bacteria and fungi were tested in triplicate over the range of 10 μg/mL to 1000 μg/mL LNO concentrations. (depending on the microorganism) for 24 hours. [0101] Human neonatal fibroblasts (Cascade Biologics Catalog Number: C-004-5C) were maintained in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)+10% fetal bovine serum (FBS) and were kept in a humidified 37° C.

especially in immunocompromised individuals. the results of these experiments show that LNO prevents dermal fibroblasts from entering into premature senescence. play an important role in inflammatory processes. the major components of LNO. fibroblast migration. which are characteristic features of the senescent phenotype (FIGS. Another important aspect in the treatments of cutaneous wounds is the possibility of bacterial and fungi infections. prolonged inflammation and severe scar formation. Colonized or infected wounds tend to develop an abnormally prolonged inflammatory state which generates large amounts of nitric oxide. Disclosed herein are the results of experiments establishing that LNO. including investigations of such relevant events as fibroblasts migration. including natural fatty acids (FAs) consisting mainly of linoleic acid. 12 and 13). [0104] Wound closure is a highly coordinated sequence of molecular events involving inflammation. Fatty acids (FAs). and angiogenesis. cells treated with H 2 O 2 displayed lower cell density and abnormal nuclear morphology. palmitic acid. LNO displayed a pronounced wound-healing effect. thus improving perfusion of wounded areas. such as oversized and folded nuclei. stearic acid and γ-linolenic acid. In a transgenic zebrafish model. it also increased new GFP-positive endothelial cells. a composition comprising a mixture of fatty acids obtained as an extract from the nut of a South American fruit. particularly polyunsaturated fatty acids (PUFAs).showed increased cell density. bacterial and fungal growth and nitric oxide production. both in mice and transgenic zebrafish larvae. revascularization. reepithelialization. promotes wound healing. Infected skin wounds are frequently associated with delayed wound closure. . extracellular matrix (ECM) remodeling bacterial and fungal growth. This finding indicates that FAs in LNO increase vessel sprouting. Angiogenesis is known to be important in the formation of granulation tissues and supply of oxygen to wounded tissues. as they are metabolic precursors of several key mediators of inflammation. Conversely. classical elongated nuclear shape and homogeneous nuclear size. The effect of LNO on the wound healing process was investigated. Several cytokines and nitric oxide are important mediators of this process. 12 and 13. such as eicosanoids. LNO not only accelerated wound healing. Thus. This effect was not found using pure LA and OA. orange arrows). oleic acid. lipoxins and resolvins. [0103] LNO is disclosed herein as a new source of compounds. Cells treated with H 2 O 2 +LNO showed fewer cells with senescent nuclear abnormalities compared with H 2 O 2 -treated cells (FIGS.

During the wound healing process. Wound Repair Regen. As focal adhesions are important for fibroblast migration and adhesion. The above-described embodiments are not intended to limit the claims in any way. The data indicate that the wound healing effect of LNO observed in mice and transgenic zebrafish larvae is produced by increasing fibroblasts migration. LNO contains a unique combination of natural. et al. Oral Sci. talin.. In fact. NJ US Patent applications by RUTGERS. During cell migration. vinculin and stress fibers play a key role in the integrin-mediated interaction of fibroblasts with the ECM. Fibrillar adhesions are located centrally in migrating cells and contain fibronectin and tensin. focal adhesion kinase (FAK) and tyrosine-phosphorylated proteins. Further. FAs. J. promoting angiogenesis and modulating nitric oxide production. indicating that a precursor-product relationship between the three types of matrix adhesion is necessary for optimum cell migration. A mild disassembly of stress fibers and increased expression of vinculin in focal adhesion has been shown to be important for cell migration. making the total extract more effective than. it has been disclosed that fibroblasts from wounded areas increase expression of vinculin and the increased expression is correlated with a higher migratory capacity (van Beurden.[0105] The data from cell migration experiments led to the conclusion that the in vivo wound healing effect of LNO is related to the increase in the migration capacity of fibroblasts. vinculin. Patent applications by Ilya Raskin. The entire disclosure of all publications cited herein are hereby incorporated by reference. focal complexes. pharmacologically active compounds. α-actinin. Integrins are key players in fibroblast interaction with ECM and with other cells. LNO has been shown herein to antagonize cellular senescence. integrins nucleate three distinct matrix adhesions in fibroblastic cells. Therefore. changes in the expression of focal adhesion proteins in fibroblasts treated with LNO were expected. van Beurden. eg. focal adhesions and fibrillar adhesions. β1 integrins can translocate from focal complexes to focal adhesions and ultimately fibrillar adhesions. [0106] Numerous modifications and variations of the disclosure are possible in view of the above teachings and are within the scope of the claims. Eur. 113:153158 (2005)). 14:66-71 (2006). the individual FAs it contains. eg. Manalapan. Focal complexes contain paxillin.. ie. THE STATE UNIVERSITY OF NEW JERSEY ..

sheet or filament bases.Patent applications in class Web. compositions of bandages. or dressings with incorporated medicaments .

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