Unidad 1.

Introducción a la toxicología

Departamento de Farmacia, Facultad de Química, UNAM.
La forma en que los xenobióticos se trasladan a través de las diferentes membranas son las siguientes:

1.7 Toxocinética
La toxocinética es el estudio del movimiento (traslado) de los xenobióticos dentro del organismo.1 El estudio de esta etapa comprende los procesos de absorción, metabolismo, distribución y excreción de compuestos en los organismos vivos.1,2 Para iniciar el estudio de esta etapa, primeramente se revisarán los principios básicos que son responsables del transporte de las sustancias a través de las membranas biológicas. a) b) c) d) e)

Difusión simple (transcelular, paracelular) Difusión facilitada Transporte activo Endocitosis/Exocitosis Filtración por poros membranales

A
P

B

C,D C
P

E E

fluido extracelular membrana celular fluido intracelular membrana celular

Transporte a través de las membranas biológicas

célula
Un aspecto importante a considerar una vez que el xenobiótico ha ingresado al organismo, es que tiene que atravesar varias membranas de los diferentes compartimentos biológicos. 3

A

C

E E

A

B

C

E

xenobiotico ETAPA EXPOSICIÓN

A. Difusión simple transcelular. B. Difusión simple paracelular. C. Filtración por poros membranales. D. Transporte activo o difusión facilitada. E. Endocitosis/Exocitosis.

Figura 1-10. Mecanismos de transporte para los xenobióticos
fluido extracelular absorción fluido extracelular intersticial membrana capilar fluido extracelular plasmático traslado del xenibiotico membrana capilar fluido extracelular intersticial membrana celular fluido intracelular membrana subcelular fluido intraorganelo intestinal membrana pulmonar piel

Hay una forma adicional de ingreso de sustancias, primordialmente en el intestino delgado. Este sistema se llama persorción y se presentan cuando las células de las vellosidades se desprenden hacia el lumen, provocando una apertura por donde ingresan macromoléculas o partículas, por ejemplo, partículas de almidón (Washington N., 2001).

La estructura de las membranas biológicas determina su función y características. La más importante, desde un punto de vista toxicológico, es que son selectivamente permeables. Solamente ciertas sustancias son

Figura 1-9. Diferentes membranas que atraviesa un xenobiótico

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capaces de pasar a través de ellas, dependiendo de las características fisicoquímicas que a continuación se mencionan: Liposolubilidad Polaridad y carga eléctrica de la molécula. Tamaño de la molécula Similitud a sustancias endógenas. Donde:

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ΔC: es la diferencia entre las concentraciones de los compartimentos separados por las membranas. P: es el coeficiente de reparto.

a) Difusión simple

Rm y Raq: son la resistencia de las membranas y de la capa acuosa contra la difusión de los xenobióticos.

Esta es la forma más utilizada por la mayoría de los xenobióticos para transportarse en los organismos vivos. Los factores que afectan la velocidad de este proceso son (Tabla 1-12): a) El gradiente de concentración del compuesto en ambos lados de la membrana. b) Los parámetros que afectan la facilidad para que la molécula del xenobiótico pueda moverse al interior lipofílico de la membrana: Coeficiente de partición (P) o Coeficiente de distribución. Tamaño molecular Grado de ionización.

La resistencia a la difusión depende primordialmente del grosor y la viscosidad de las capas membranales y sólo ligeramente de la estructura del xenobiótico. Por lo tanto, Rm y Raq pueden permanecer constantes para el transporte de una serie de xenobióticos en una membrana particular. Bajo estas condiciones, la ecuación anterior predice que para cualquier concentración del xenobiótico, la velocidad del trasporte se incrementará exponencialmente con un incremento del coeficiente de partición.

-

Coeficiente de partición

Tabla 1-12. Factores que influyen en la difusión simple Factores Transcelular Paracelular Gradiente de concentración + + Liposolubilidad + Tamaño molecular + pKa + +

Expresa el grado de solubilidad en lípidos de un compuesto. Se define como la relación de la concentración de una sustancia, entre una fase orgánica, generalmente 1-octanol o cloroformo, y una fase acuosa, a un determinado valor de pH y temperatura, normalmente medidos a 25 o 37 °C. Es importante para este parámetro que la molécula no presente carga eléctrica (Thomas G., 2000).

Cuando todos los parámetros anteriores se integran, la velocidad con la cual una sustancia va a transportarse por las membranas biológicas, se puede presentar mediante la siguiente relación:

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Tabla 1-13. Relación de la absorción de barbitúricos con su coeficiente de partición Barbitúrico R1 R2 Log P % absorbido en (Cloroformo/agua) el colon de rata Barbital Etil Etil 0.7 12 Fenobarbital Etil Fenil 4.8 20 Ciclobarbital Etil ciclohexil 13.8 24 Pentobarbital Etil 1-metilbutil 28.0 30 Secobarbital Etil secbutil 50.7 40

El coeficiente de partición indica la facilidad con que una sustancia puede transportarse en las membranas biológicas. Esta facilidad se reflejará en el porcentaje de xenobiótico absorbido en el organismo biológico en estudio. En vista de que los valores numéricos obtenidos experimentalmente guardan diferencias de varios dígitos, se ha optado por manejarlos en escala logarítmica; por lo que en la literatura aparece como log P.

Los valores de comparación en los coeficientes de partición, hacen referencia a una serie de xenobióticos, estructuralmente relacionados (análogos), como se ejemplificó en la tabla anterior, en donde se equiparan una serie de compuestos que pertenecen a la familia de los barbitúricos.

Dado que muchos xenobióticos son ácidos o bases débiles, se ha propuesto la inclusión del parámetro de coeficiente de distribución (log D). En este se indica, en forma de subíndice, el valor de pH de la fase acuosa a la que se realizó la determinación: log DpH. En la fase acuosa se considera la porción ionizada o no ionizada del ácido o base que esté en estudio.
Figura 1-11. Estructura común para los barbitúricos enlistados en la tabla 1-13.

Es necesario señalar que el aumento infinito del coeficiente de partición, para una serie de compuestos, no incrementará el porcentaje de Donde: X: Xenobiótico absorción para aquellos que sean los más liposolubles; ya que cuando el valor de dicho parámetro aumenta, el % de absorción disminuye.

Para ilustrar la utilidad del coeficiente de partición en la tabla siguiente se comparan el porcentaje de absorción de diferentes barbitúricos en el colon de ratas con el valor numérico de este parámetro.

Los

xenobióticos

que

son

muy

polares

o

hidrofílicos

frecuentemente presentan propiedades pobres de transporte, mientras que aquellas muy lipofílicas, alcanzan solo un gradiente de concentración pequeño. Para que las diversas sustancias puedan transportarse primero se tienen que solubilizar en el agua del compartimiento donde se encuentren presentes.

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en donde el xenobiótico que lo presente. Tabla 1-14.0 Bien absorbido Cloropromacina 3.1 Absorbido en un 60% Grado de ionización Muchas de las sustancias que presentan actividad biológica son ácidos o bases débiles. María Elena Bravo Gómez. entonces habrá una menor facilidad para atravesar las membranas biológicas debido a la resistencia por fricción o impedimento estérico que presenten las membranas. Relación entre el coeficiente de partición y la velocidad en membranas.4 Absorción lenta pero completa Diacepam 2. Perla Castañeda López.1 Bien absorbido Atropina 1. Log P y absorción oral de algunos xenobióticos Xenobiótico log P absorción en el humano Aspírina -1. por lo que el grado de ionización que presenten a diferentes valores de pH va a cambiar de acuerdo a su valor de pKa.4 0. se almacenarán en los depósitos lipofílicos del organismo. El tamaño no debe ser mayor a 4 x 10 -4 μm. UNAM. tendrá la mayor probabilidad de alcanzar su sitio de acción. En la tabla siguiente se muestran algunos valores de log P para varios xenobióticos y su grado de absorción en el ser humano.7 Bien absorbido Morfina -0.Unidad 1. Ejemplos de algunas sustancias con sus correspondientes valores de pKa.0 Bien absorbido Absorción irregular e incompleta Bien absorbido - Tamaño molecular Si la lipofilicidad se mantiene constante y el tamaño molecular (radio cilíndrico) se incrementa. Introducción a la toxicología Departamento de Farmacia. Figura 1-13. Nitracepam Tetraciclina Teofilina 2. se excretarán con cierta facilidad antes de alcanzar su sitio de acción. Las moléculas de menor tamaño pasan por filtración.8 Bien absorbido Cafeína 0. los de mayor valor de log P. De la gráfica anterior se puede señalar que aquellas sustancias que presentan coeficientes de partición pequeños (muy hidrofílico).1 -1. Francisco Sánchez Bartes . hay un coeficiente de partición "ideal" (Po). Reacciones ácido-base Es el valor del pKa quien nos da una relación del grado o fuerza de disociación de un ácido o base. Figura 1-12. Facultad de Química. se presentan en la tabla 1-15. por otro lado. 17 Profesores: Francisco Hernández Luis. Empero.

0 2. Farmacología.8 Teofilina 8. Figura 1-15. Así.3 Ampicilina 2. México. el compuesto se encontrará mayoritariamente en forma no iónica. Perla Castañeda López. si el pH del medio es menor que el valor numérico del pKa entonces el compuesto se encontrará mayoritariamente en forma no iónica.5 Sulfadiazina 6.9 Anfotericina 5. Facultad de Química. Francisco Sánchez Bartes . Tabla 1-15. Distribución en fases orgánica y acuosa de ácidos carboxílicos 18 Profesores: Francisco Hernández Luis. O R OH O R O - agua O R OH diclorometano Así. Bases bioquímicas y patológicas.2 10. María Elena Bravo Gómez.5 0.1 Aspirina 3. 1984.4 Acetaminofén 9.6 Cafeína 0.6 Teobromina 10.11 Cocaína 8. iónica y su pKa de la siguiente manera. si el pH del medio es mayor que el pKa entonces. Segunda edición.5 Diazepam 3.6 base Figura 1-14.6 Tetrahidrocanabinol 10. Interamericana. UNAM.8 Nicotina 3.Unidad 1.5 Morfina 7.5 Anfetamina 9.5 Fenilbutazona 4.5 Ácidos + pH < pKa O R OH pKa pH > pKa O R O - + H pKa2 + (HB ) 8.0 3. pp.0 7. Formas iónica y no iónica de ácidos carboxílicos y aminas - Influencia del pH y el pKa en el grado de disociación de ácidos y bases débiles De acuerdo a la ecuación de Henderson-Hasselbalch para los ácidos y las bases podemos expresar la relación entre su forma no iónica.5 B Pentobarbital 8. Introducción a la toxicología Departamento de Farmacia.40.5-40.12 ácido R NH 3 + R NH2 + H + Bowman y Rand. Valores de pKa para algunos xenobióticos pka Bases pKa Anfóteros pKa1 (HA) Sacarina 1.

4 (100) La relación entre el pKa y pH va a jugar un papel importante debido a que al cambiar los valores del segundo se altera la relación iónica y no iónica del xenobiótico. Perla Castañeda López.17 3. Si se conoce el valor del pKa. Salicílico De manera general.0 96. Figura 1-16. UNAM. Tabla 1-16.0 0. el coeficiente de partición de la forma no iónica de un ácido o una base.04 6. Disociación del fenobarbital a diferentes valores de pH pH No ionizado (%) Ionizado (%) 2. Facultad de Química.75 12. María Elena Bravo Gómez. Jugo gástrico pH = 1 Plasma pH = 7. y el log D a un pH determinado.0 0.0 20. se acepta que la forma no ionizada (más lipofílica) de un ácido o una base es la que atraviesa la membrana.0 Relación de concentraciones en dos lados de una membrana biológica a diferentes valores de pH Un ejemplo de las relaciones anteriores.07 79. se puede relacionar con el pKa del mismo compuesto mediante las siguientes ecuaciones: Esta forma de transporte prácticamente no es utilizado por los xenobióticos.93 10. y no la forma iónica de la misma.53 28. Departamento de Farmacia. se calculo a diferentes valores de pH el porcentaje de la forma iónica y no iónica del fenobarbital cuyo pKa = 7. los resultados se presentan en la siguiente tabla.0 99.0 100. Francisco Sánchez Bartes .0 0. Por lo anterior.96 0.44.83 7.00 4. Introducción a la toxicología Con la ecuación anterior correspondiente a los ácidos. entonces se podrá calcular el valor de log P de la especie no ionizada (log PHA o log PB).25 99. Aunque esta última es más hidrosoluble.00 100. Los parámetros importantes a considerar son: Requiere de un acarreador Necesita de un gradiente de concentración No implica un gasto de energía Es un proceso saturable. Salicilato (1) Salicilato (1000 000) Ac. Salicílico (100) Ac.0 71. generalmente excede en varios órdenes de magnitud a la pérdida de solubilidad que se pudiese presentar por la misma conversión. el incremento en el coeficiente de partición al pasar de la forma iónica a la forma no iónica. Relación del ácido salicílico a diferentes valores de pH b) Difusión facilitada 19 Profesores: Francisco Hernández Luis.47 8. lo constituye el ácido salicílico y su distribución en dos compartimentos biológicos con valores de pH diferentes.Unidad 1.

Ejemplo: O O F Absorción a) b) c) Tracto gastrointestinal Tracto respiratorio Piel Para conocer la influencia de la absorción en la toxicidad de un xenobiótico. uno para bases y uno para compuestos neutros. María Elena Bravo Gómez. luego por la 20 Profesores: Francisco Hernández Luis. Este sistema es importante para la trasportación de macromoléculas y liposomas. UNAM. (DL50. Los aspectos relevantes a considerar en este tipo de transporte son: Requiere de un acarreador No necesita de un gradiente de concentración Requiere de un gasto de energía Es saturable La absorción es el proceso de transferencia de un xenobiótico desde su sitio de ingreso al organismo hasta su llegada a la circulación general. aminoácidos en los glóbulos rojos. Influencia de la ruta de administración en la toxicidad Pentobarbital Isoniacida Procaína Ruta de (DL50 mg/Kg) (DL50. se comparan sus valores de DL50 obtenidos por varias rutas de NH NH O N H O N H administración. d) Endocitosis/Exocitosis Invaginación que provoca una célula hacia una partícula sólida c) Transporte activo (fagocitósis) o pequeñas porciones de líquido (pinocitósis). En este órgano se han identificado 2 tipos de este transporte. uno para ácidos. Estructuras similares del Uracilo y el 5-Fluorouracilo El transporte activo juega un papel importante en la excreción de sustancias tóxicas por el riñón. Departamento de Farmacia. La vía intravenosa se reporta para establecer la toxicidad sin que intervenga el proceso de absorción. Francisco Sánchez Bartes . uno para compuestos ácidos y otro para compuestos básicos. Tabla 1-17. De los datos mostrados se desprende que el pentobarbital se absorbe con mayor eficacia por la vía intramuscular. Uracilo 5-Fluorouracilo Figura 1-17. Los sitios de absorción más importantes para los xenobióticos que ingresan al organismo son: Para que un xenobiótico pueda utilizar este transporte debe presentar una similitud estructural con alguna de las sustancias que se encuentran de manera natural en el organismo. Por lo que respecta al hígado. Perla Castañeda López. Facultad de Química.Unidad 1. administración mg/Kg) mg/Kg) oral 280 142 500 subcutánea 130 160 800 intramuscular 124 140 630 intraperitoneal 130 132 230 intravenosa 80 153 45 Datos de toxicidad en ratones. se han reportado 3 diferentes tipos de transporte activo. Introducción a la toxicología Ejemplo de compuestos que utilizan este tipo de trasporte: azúcares.

- Vaciamiento gástrico Área de absorción Transporte a través de las células (Liposolubilidad y tamaño de partícula del xenobiótico). Figura 1-18. - Inestabilidad química y metabolismo del xenobiótico a nivel de membrana intestinal y/o por la presencia de microflora. 21 Profesores: Francisco Hernández Luis. María Elena Bravo Gómez. tanto in vitro como in vivo. Velocidad de disolución y tiempo de desintegración de la forma farmacéutica - El pH de la porción gastrointestinal y el valor de pKa que presente el xenobiótico La disolución de los xenobióticos. es principalmente gobernado por la solubilidad acuosa de los mismos. Facultad de Química. La velocidad de disolución (R) de una sustancia en particular en un medio acuoso.Unidad 1. Factores que influyen en la absorción en el tracto gastrointestinal Los factores que afectan la absorción gastrointestinal sustancia son: - de una - Velocidad de disolución y tiempo de desintegración de la forma farmacéutica. Perla Castañeda López. a) Tracto gastrointestinal Es importante marcar que el término absorción gastrointestinal de xenobióticos implica la determinación de la concentración de la sustancia en plasma después de su ingreso por la ruta oral. Introducción a la toxicología subcutánea o la intra-peritoneal. son parecidas. y por último. es directamente proporcional a la solubilidad de la misma (S): R=K*S Donde K es una constante que refleja la velocidad de agitación en el medio de disolución. el proceso de absorción no decide el grado de toxicidad. Para la procaína la ruta donde que presenta el mayor riesgo de toxicidad es la intraperitoneal. la oral. Un término adicional es la “permeación” o traslado celular que implica el paso de un xenobiótico por una membrana plasmática. Si una sustancia se solubiliza con facilidad en agua (>1g/100mL) entonces se podrá disolver con facilidad logrando estar disponible para su posterior absorción. Departamento de Farmacia. en esta ruta. ya que los valores de las diferentes rutas de administración. UNAM. es donde se presenta el menor riesgo de intoxicación por esta sustancia. y también el área superficial de las partículas de la sustancia en cuestión. incluyendo la intravenosa. Francisco Sánchez Bartes . Puede anotarse que en la isoniacida.

María Elena Bravo Gómez. es necesario puntualizar. por otro lado. y por tanto. Glándulas salivales Parotida Submandibular Sublingual Faringe Lengua Los valores de pH a lo largo del tracto gastrointestinal presentan variaciones. UNAM.Unidad 1. Este proceso puede acelerarse o retardarse según ciertas circunstancias. Además. y los compuestos básicos en el intestino delgado. Sin embargo. se espera que los compuestos ácidos se absorban en el estómago. Regiones y valores del pH del tracto gastrointestinal Tabla 1-18. ya que tendrán más tiempo para que una cantidad mayor de esta sustancia se logre solubilizar. su absorción se verá favorecida con un 22 Profesores: Francisco Hernández Luis. Factores que promueven o retardan el vaciamiento gástrico Promueven el vaciamiento gástrico Retardan el vaciamiento gástrico Soluciones buffer alcalinas Alimentos grasosos y viscosos Estados de ansiedad Estados de depresión Hambre Úlceras Hipertiroidismo Hipotiroidismo Alimentos fríos Alimentos calientes - Vaciamiento gástrico Determina el paso de alimentos del estómago hacia la parte superior del intestino delgado. se van a absorber también a nivel de intestino delgado. el intestino delgado presenta las condiciones óptimas de área de absorción y vascularización que permiten sea el sitio de absorción preferencial de la mayor parte de los nutrientes y xenobióticos. que las diferentes sustancias tanto básicas como ácidas. Francisco Sánchez Bartes . Tomando en cuenta solo las propiedades ácido-base y asumiendo que la absorción se dará por difusión simple. aquellos compuestos con velocidades de disolución altas. lo que afecta el comportamiento de los xenobióticos que poseen propiedades de ácidos débiles o bases débiles.5 Conducto biliar Cólon transverso Colón ascendente Colón Descendente pH = 5. Perla Castañeda López. Facultad de Química. ya que la mayoría de los xenobióticos son ácidos o bases débiles y el valor de pH de esta región anatómica (5-8 dependiendo de la zona) es adecuado para su absorción por difusión simple.8 Páncreas Estómago pH = 1-3 Conducto pancreático Duodeno pH = 5-6. Ano Figura 1-19. Hígado Vesícula biliar Cavidad oral Esófago pH =6. solo la forma no iónica será capaz de atravesar las membranas. Introducción a la toxicología pH de la porción gastrointestinal Departamento de Farmacia. un vaciamiento gástrico retardado favorecerá su proceso de absorción. Para los xenobióticos que tienen velocidades de disolución muy lenta.5-8 Ciego Apéndice Recto ileón pH =7-8 independientemente del valor del pH que aquí se manifieste.

5-8 15-48 h < 10 m. María Elena Bravo Gómez.5 3 5.02 5-6. el área de contacto del duodeno y yeyuno es la que determina la mayor cantidad de “permeación” del xenobiótico.9 1-2 h < 10 7 Íleon 4 100 7-8 2-3 h < 10 11 Colon 1. Áreas del intestino delgado para la “permeación” de xenobióticos Figura 1-22.3 0. UNAM. lo cual asegura que el xenobiótico absorbido se remueva rápidamente.Unidad 1. Francisco Sánchez Bartes .2 1-3 1.o. Perla Castañeda López. - Área de contacto El intestino delgado presenta mayor área de ingreso debido a la presencia de las vellosidades de la mucosa intestinal. Tabla 1-19.8 > 30 s ¿? 2 Estómago 0. Vellosidad intestinal y el ingreso de xenobióticos A pesar de que el tiempo de residencia del contenido gastrointestinal es mayor en el colon (Tabla 1-19). Tiempo de residencia del contenido gastrointestinal 2 Región Longitud Área (m ) pH Residencia m.: microorganismos Figura 1-20.5 > 5 min < 10 2 Yeyuno 3 100 6.2 0. El intestino tiene un excelente suplemento de flujo sanguíneo. Facultad de Química.02 6. Figura 1-21. - Transporte a través de las células 23 Profesores: Francisco Hernández Luis. logrando de esta forma mantener el gradiente de concentración (sink condition). Introducción a la toxicología vaciamiento gástrico acelerado. Departamento de Farmacia.5 h < 10 2 Duodeno 0. Capa serosa y muscular del intestino delgado Las diferentes sustancias que alcanzan el intestino delgado ingresan a través de las vellosidades intestinales que presentan un área mayor para que se realice este proceso. porque les ayudaría a ingresar al intestino delgado rápidamente para absorberse en mayor proporción.o (m) Esófago 0.3 0.

ejemplo de ello son presentados por el propranolol. Además de la descomposición por enzimas del organismo humano. Francisco Sánchez Bartes . Facultad de Química. ejemplos de este tipo de modificaciones lo presentan el isoproterenol (isoprenalina) y la O OH O OH OH Isoproterenol Propanolol S O S O NH N NH CH2 CH3 cloropromacina. duraznos. En algunos casos los compuestos logran transformarse en entidades con mayor actividad biológica. Los compuestos lábiles en el medio ácido. Cabe resaltar que algunos nitritos como el nitrito de Succinilsulfatiazol Figura 1-23. ejemplos de este tipo de xenobióticos son el Ftalilsulfatiazol O OH NH CH3 Alprenolol succinilsulfatiazol y el ftalilsulfatiazol. la cual es inestable en el medio ácido estomacal y libera cianuro. algunos compuestos pueden ser transformados por las enzimas secretadas por los microorganismos que viven como comensales en el intestino grueso. son destruidos por las enzimas proteolíticas digestivas. Perla Castañeda López.Unidad 1. se hidrolizan en el estómago con un valor de pH de 1. Otro ejemplo importante. Departamento de Farmacia. cerezas y almendras en la forma de amigdalina. vasopresina. María Elena Bravo Gómez. Sustancias que logran bioactivarse en el tracto gastrointestinal 24 Profesores: Francisco Hernández Luis. sodio se emplea como conservador de algunos alimentos cárnicos y puede representar un riesgo para la presentación de cáncer de colon. Estos aspectos ya han sido revisados al inicio de la presente unidad. es la formación por parte de la flora intestinal de nitrosaminas carcinogénicas a partir de aminas y nitritos no carcinogénicos[1. UNAM. O OH O O S O NH S N NH Un ejemplo de esto es la toxicidad de los glucósidos cianogénicos presentes en las semillas de manzanas. 2]. Introducción a la toxicología En este parámetro hay que considerar la liposolubilidad y el tamaño de partícula del xenobiótico. oxitocina. Péptidos como la insulina. En la membrana intestinal también se presentan enzimas que pueden transformar a los compuestos que presenten grupos funcionales susceptibles. alprenolol. tales como penicilina. CH3 CH3 - Inestabilidad química y metabolismo a nivel de membrana intestinal y/o por la presencia de microflora H3C NH OH OH H3C NH O La descomposición de los xenobióticos es un factor importante en la absorción gastrointestinal.

Facultad de Química. entonces son fagocitadas y transferidas directamente al sistema linfático donde pueden permanecer almacenadas por un periodo considerable de tiempo. Introducción a la toxicología b) Tracto respiratorio Departamento de Farmacia.Unidad 1. alrededor de 50 a 100 m2 en el hombre. Francisco Sánchez Bartes . Región nasofaringe: Partículas de 5 μm de diámetro o mayores Región traqueobronquial: Partículas de 2 a 5 μm de diámetro Región alveolar: Partículas menores o iguales a 1 μm. Estructuración del sistema respiratorio El grado de absorción depende de la solubilidad del compuesto gaseoso. Según sea el tamaño de partícula se irán reteniendo en la porción del sistema respiratorio. Perla Castañeda López. pueden ser disueltas y absorbidas al torrente sanguíneo. Para tales compuestos un incremento del flujo sanguíneo no afecta su velocidad de absorción. Si estas partículas no son fácilmente solubles. UNAM. 25 Profesores: Francisco Hernández Luis. Regiones básicas del tracto respiratorio y zonas sensibles que pueden afectar los procesos de absorción Debido a esta circunstancia anatómica de los alvéolos. María Elena Bravo Gómez. Tamaño de la partícula sólida y líquida Después que las partículas han sido depositadas en la región alveolar. la absorción desde el pulmón es muy rápida y eficiente. Compuestos muy solubles pueden ser absorbidos por un solo Los pulmones presentan una gran área de absorción. la barrera entre el aire en los alvéolos y la corriente sanguínea es tan delgada como el grosor de dos capas de células. presentan una excelente irrigación sanguínea y movimiento de respiración. Gases y vapores Figura 1-24. la única forma de incrementarla es aumentar la ventilación pulmonar. Regiones básicas: Región nasofaríngea Región traqueobronquial Región alveolar. La absorción de partículas puede ser controlable por la solubilidad y características de transferencia de la propia membrana.

Esto se debe a que la capa más externa se forma por células muertas o células empaquetadas con queratina. Introducción a la toxicología Para gases que son poco solubles en la sangre. La absorción por la piel implicará. pasan al Tabla 1-20. Este hecho se relaciona directamente con algunas sustancias tóxicas que pueden ser metabolizadas en la piel. Las evaluaciones realizadas en los laboratorios para xenobióticos 26 Profesores: Francisco Hernández Luis. por lo que la absorción de las mismas es potencialmente importante. Francisco Sánchez Bartes . Los factores que influyen el proceso de distribución de xenobióticos son: Propiedades fisicoquímicas del xenobiótico Gradiente de concentración del xenobiótico entre los diferentes compartimentos del organismo Riego sanguíneo que reciben los diferentes órganos y tejidos Unión del xenobiótico a proteínas sistémicas. expresa muchos citocromos P450 (al menos 13 CYP2) que tienen funciones críticas en el metabolismo de substratos endógenos y exógenos. soluciones. La abrasión de la piel puede incrementar la absorción porque se daña el estrato corneo. Sin embargo. se distribuirán por todo el cuerpo y serán diluidos por la sangre. disolventes. Es importante mencionar que la piel es el órgano metabolizante más grande y más accesible. en primera instancia. de allí al torrente sanguíneo. Un incremento en el grado de hidratación favorece la absorción. la vena porta será la responsable de acarrearlos hacia el hígado y c) Piel La piel está constantemente expuesta a sustancias extrañas tales como gases. Solubilidad de algunas sustancias en el plasma Insolubles Solubles Ligeramente solubles NOx NH3 X2 AsO3 HCl O3 CoCl SO2 PCl4 HF H2SO4 torrente sanguíneo. entonces el compuesto estará en la corriente sanguínea mayor. Para la mayoría de compuestos absorbidos por vía oral. aunque la piel presenta una gran superficie de exposición. María Elena Bravo Gómez. Una vez que los xenobióticos se encuentran en el torrente sanguíneo. a la sangre periférica. Perla Castañeda López.3 Unión a proteínas Un indicador importante acerca de los procesos de distribución con implicaciones toxicológicas es la interacción de xenobióticos con las proteínas plasmáticas y algunas macromoléculas en otros órganos y tejidos. UNAM. Facultad de Química. Los tóxicos atraviesan por difusión pasiva presentando propiedades de liposolubilidad. por otro lado. La mayoría de estos genes se expresan en la epidermis o queratinocitos. si la absorción fue por vía pulmonar.Unidad 1. La parte del sistema vascular en la cual el compuesto se encuentra dependerá del sitio de absorción. El torrente sanguíneo se satura rápidamente y la única forma de incrementar su paso a través de las membranas. Departamento de Farmacia. su estructura es tal que presenta una barrera. presentan una capacidad limitada de absorción. es incrementando el flujo sanguíneo. con escaso riego sanguíneo. Distribución Procesos de distribución Después de que los compuestos han sido absorbidos.

de los cuales el 50% es albúmina.4) presenta carga negativa. se basan en la cuantificación. Los compuestos en el plasma generalmente se presentan en equilibrio entre la forma enlazada y la forma libre. Tabla 1-21. la cual tiene un peso molecular de 40000 D con 41% de carbohidratos. por lo que su distribución en los tejidos desde la sangre se verá reducida. Este desplazamiento puede ocasionar: Aumento de la eficacia terapéutica del fármaco desplazado Incremento de la toxicidad del xenobiótico desplazado Redistribución en varias partes del cuerpo del xenobiótico desplazado Potenciación de la actividad biológica del xenobiótico desplazado En la siguiente tabla se presentan algunos xenobióticos que se unen significativamente a proteínas plasmáticas. 27 Profesores: Francisco Hernández Luis. Esta proteína tiene un peso aproximado de 69000 D. UNAM. y está presente en el plasma a la concentración de 0. porque solamente el xenobiótico libre es capaz de interaccionar en su sitio de acción para producir el efecto. fuerzas de van der Waals y enlaces hidrofóbicos. Facultad de Química. María Elena Bravo Gómez. La presencia de grupos iónicos en la estructura del xenobiótico parece incrementar su afinidad hacia la albúmina. Unión de algunos xenobióticos a proteínas plasmáticas Unión a albúmina Unión a lipoproteína Unión a α1-glicoproteína Ac. y al pH de la sangre (7. La unión de xenobióticos a los componentes del plasma involucra primeramente a la albúmina. Aproximadamente 6. Las sustancias básicas se unen primariamente a la α1-glicoproteína. Uno de los aspectos a considerar en el campo de la toxicología es el que se presenta cuando ciertos compuestos llegan a desplazar a otras sustancias que se encuentran unidas a proteínas. Los compuestos ácidos se unen preferencialmente a esta macromolécula. Introducción a la toxicología en plasma.08 g/10mL El tipo de interacción molecular involucrada entre un xenobiótico y las macromoléculas del plasma. Francisco Sánchez Bartes . El conocimiento de la fracción de xenobiótico libre podría ser de mayor utilidad clínica para aquellos compuestos que están fuertemente unidos a componentes del plasma. Perla Castañeda López. tanto del xenobiótico libre como el enlazado. puentes de hidrógeno. u otras lipoproteínas. Acetilsalicílico Dipiridamol Amitriptilina (anticoagulante) (antidepresivo) Barbitúricos Disopiramida Nortriptilina (anticolinérgico) (antidepresivo) Benzodiazepinas Etidocaina (anestésico local) Digitoxina Imipramina (antidisrítmico) (antidepresivo) Estreptomicina Lidocaína Fenilbutazona Metadona (narcótico) (antiinflamatorio) Fenitoina Peracina (psicotrópico) (antiepiléptico) Penicilina Prazosin (simpatolítico) Probenecid (uricosúrico) Propranolol Sulfonamidas Quinidina (anticolinérgico) Tolbutamida Verapamil (vasodilatador) Warfarina El xenobiótico unido a proteína por su gran tamaño está limitado a atravesar las membranas biológicas.5% de la sangre es proteína. es de tipo ión-ión. Departamento de Farmacia. α1-glicoproteína.Unidad 1.

ruta de ingreso. MB1. Francisco Sánchez Bartes . no es un evento simple.) La dosis del compuesto (DL50. Introducción a la toxicología Departamento de Farmacia. (Figura 25) etapa de exposición etapa toxocinética protóxico entrada del xenobiotico al organismo reacción primaria cambios bioquímicos (interacción covalente o y fisiológicos disociable con macromo. Tomado y adaptado de Trends Pharmacol. B1. Sci. crónica. hemólisis. Facultad de Química. etc. etc. Aspectos toxodinámicos integrados con algunos componentes toxocinéticos El tipo de efecto deseable o indeseable que una sustancia pueda presentar. Estos factores son: Las características de exposición (aguda. Hay muchas formas por las cuales un agente químico puede interferir con la bioquímica y fisiología normal de las células. los cuales pueden o no tener consecuencias. C. B. c amplificación A. MB2. dosis fraccionada. etc. Z a. - importante considerar de manera integral. Características genéticas del organismo expuesto. Hemoglobinuria: presencia de hemoglobina en orina Figura 1-26. anemia. Perla Castañeda López.(cambios secundarios en léculas. Z. En este capítulo se van a indicar cuáles son los sitios generales de acción tóxica de los compuestos y que ilustran al mismo tiempo. hemoglobinuria tóxico metabolismo excreción B2 B3 toxicidad del cambio (signos clínicos.8 Toxodinámica Las respuestas toxicológicas provocadas por sustancias químicas en los seres vivos son iniciadas por interacciones moleculares de las mismas con las células. X. hemoglobinemia*. a. b. Ejemplo de la importancia de las características genéticas del organismo expuesto para presentar efectos tóxicos. en ocasiones se califican según los intereses de quien lo está 28 Profesores: Francisco Hernández Luis. Factores que influyen en los efectos tóxicos Al estudiar el efecto tóxico de las diferentes sustancias. b. pKa) Tipo de efecto tóxico producido.) La estructura molecular y propiedades fisicoquímicas e la sustancia (Log P. Un aspecto importante a considerar en el campo de la toxicología es que la manifestación de un efecto biológico por una sustancia.) Las características de exposición (aguda. B2. ya que podrían presentarse diferentes alternativas que se indican en la siguiente figura. crónica. Algunas veces no basta que la sustancia alcance su sitio “blanco” para desencadenar el trastorno clínico.) composición o morfologia) B1 MB1 MB2 MB3 X. María Elena Bravo Gómez. Y.Y. C biosíntesis etapa toxodinámica consecuencias para el organismo Exposición a haba (Vicia faba) no tóxico no tóxico Deficiencia congénita en Glucosa 6-fosfato deshidrogenasa Favismo. síntobiológico mas o síndromes) *Hemoglobinemia: presencia de hemoglobina en plasma. c: representan cambios indefinidos y no relacionados. solubilidad. B3. B. etc. A. 1981. los tejidos u otros componentes del organismo. sus diferentes mecanismos de acción. MB3 son sitios diana (“blancos”) antes y después de la modificación por el agente tóxico. UNAM.Unidad 1. ruta de ingreso. varios factores que van a jugar un papel determinante y constituyen elementos necesarios para su evaluación. membranas. 2:228-231. Tipo de efecto tóxico producido Figura 1-25. es 1.

Tipo B Tipo C No son predecibles del efecto farmacológico. Efecto Deseado Indeseado Tabla 1-22. Algunos ejemplos son: a) por sobredosis: hemorragia por anticoagulantes b) por efecto colateral: somnolencia por antihistamínicos de primera generación. Estos se denominan efectos adversos y se dividen en mayores o menores.gob. Ejemplos de reacciones adversas mayores que presentan algunos xenobióticos Colapso vascular periférico Choque anafiláctico Cardiopatías Atrofia de órganos y tejidos Coma Ulceraciones Cambios en la glucosa sanguínea Cáncer Pancreatitis (severos) Cambios en la presión arterial Convulsiones Teratogénesis (severos) Exacerbaciones (úlcera péptica.Unidad 1.. frecuentemente se identifican como una exageración del efecto farmacológico. Francisco Sánchez Bartes . Ejemplo de esto. Williams D. UNAM.cofepris.mx/wb/cfp/farmacovigilancia_canal http://www. Reacciones que pueden ser predichas o racionalizadas en función de la estructura del compuesto administrado o de sus metabolitos. Toxicophores: Groups and metabolic routes associated with increased safety risk. Tabla 1-24. Introducción a la toxicología evaluando. Muchas personas no presentas estas reacciones a ninguna dosis administrada. c) por efectos secundarios: hopopotasemia (baja concentración del catión potasio) por algunos diuréticos. se presenta a continuación con la atropina y la reserpina. Son dependientes de la dosis administrada. Tabla 1-25.mx/unidades/cofepris/pyp/farmaco/Guia_estu dios_clinicos_1_1_. Efectos de la reserpina Cardiólogo Psiquiatra Hipotensión Sedación Sedación Hipotensión Departamento de Farmacia. Tipos de reacciones según la naturaleza del efecto biológico Reacción Definición Tipo A Pueden ser predichas de sus acciones farmacológicas conocidas. 2002. Facultad de Química. según logren poner en peligro la existencia del individuo. María Elena Bravo Gómez. Perla Castañeda López. Naisbitt.J.salud. 104115 29 Profesores: Francisco Hernández Luis. 5.gob. Ejemplos de reacciones adversas menores de algunos xenobióticos Acidosis intestinal Anorexia Debilidad y fatiga Calambres Diarrea suave Vértigo Desvanecimientos Euforia Sueño Fiebre (grado bajo) Hipo Dolor de cabeza Inflamación de la lengua Náuseas. Current Opinion in Drug Discovery and Development. D.pdf Sin embargo algunos efectos son verdaderamente indeseables cuando se presentan. hemorragia por anti-inflamatorios no esteroidales. Efectos de la atropina Oftalmólogo Internista Midriasis Espasmolítico Espasmolítico Midriasis Tabla 1-23.P. vómito Parestesia suave (glositis) Faringitis Infamación gástrica Prurito anal Irritación a la piel (ligera) Estreñimiento Vaginitis Efecto Deseado Indeseado Para reportar reacciones adversas: http://www. Hemorragias Mutaciones infecciones) Discrasias sanguíneas (anemia Disfunción renal Encelopatía aplásica) Aumento severo de la libido Disfunción hepática Bromismo Actividad psicomotora Depresión descontrolada respiratoria Reacciones en la piel (severa) Daño ocular irreversible Fotosensibilidad (severa) Inmunosupresión Reducción severa de la libido Depresión tiroidea Depresión mental severa Toxicología perinatal Desde el punto de vista de la naturaleza de los efectos biológicos estos se pueden clasificar de la siguiente manera Tabla 1-26.

Facultad de Química.Unidad 1. ozono) Generación de radicales libres Formación de lípidos hidroperóxidos. la interferencia con la producción de energía celular y la unión a biomoléculas. agentes intercalantes) Interferencia con la producción de energía celular Inhibición y desacoplamiento de la fosforilación oxidativa (nitrofenoles) Inhibición del transporte de electrones (rotenona. goiestrógenos) Interferencia con las funciones de las membranas Membranas excitables: Flujo iónico (saxitoxina. nitritos) Interferencia con las funciones del sistema inmune. LSD. insuficiencia tiroidea) Alteraciones congénitas Alteraciones genéticas no letales en células somáticas Cáncer Alteraciones congénitas. Algunos mecanismos generales de la acción tóxica Unión a macromoléculas Actividad enzimática (arsénico. organofosfatos. tetrodoxina. anestésicos locales) Membranas en organelos Membranas lisosomales (tetracloruro de carbono) Membranas mitocondriales (organoestaños) Perturbación en la homeostasis del calcio Alteraciones del citoesqueleto Activación de fosfolipasas Activación de proteasas Activación de endonucleasas Toxicidad por pérdida de células selectivas Desbalance hormonal y fisiológico (pérdida de neuronas dopaminérgicas. estricnina. atropina. María Elena Bravo Gómez. UNAM. Ácidos nucleicos: ADN y ARN (agentes alquilantes. mercurio. En el presente capítulo sólo mencionaremos a dos de ellos. etanol. Esta lista se incrementará a medida que las investigaciones arrojen nuevos resultados. Interacción normal Tabla 1-27. Introducción a la toxicología Para fines de aplicación regulatoria. características de las reacciones adversas se establecen en la NOM 220SSA1-2002. Estrés oxidante Disminución de glutatión (acetaminofén) Oxidación de grupos tioles en proteínas. Mecanismos de acción tóxica de los compuestos químicos Los mecanismos por los cuales algunos compuestos provocan sus efectos tóxicos se enlistan en la tabla 1-27. Perla Castañeda López. Receptor para hidrocarburos aromáticos policíclios (receptor Ah) Receptores hormonales (dioxinas como el TCDD. Interferencia con las funciones normales ligando-receptor 30 Profesores: Francisco Hernández Luis. antihistaminas) receptor receptor Interferencia por el xenobiotico receptor receptor ligando xenobiotico Figura 1-27. las definiciones y Departamento de Farmacia. cianuro) Inhibición del metabolismo de carbohidratos (fluoroacetato) Interferencia con las interacciones normales ligando-receptor Neuroreceptores y neurotransmisores (por ejemplo: benzodiazepinas. Peroxidación de lípidos (tetracloruro de carbono. organofosfatos. fluoroacetato de sodio) Proteínas de transporte (monóxido de carbono. paraquat. Francisco Sánchez Bartes . DDT) Fluidez de la membrana (disolventes orgánicos. barbitúricos. A lo largo de todo el curso se irán presentando la mayoría de los mecanismos mencionados con los ejemplos específicos de las sustancias que los utilizan y las consecuencias toxicológicas que desencadenan.

e incluye síntomas de respiración rápida.. Introducción a la toxicología Interferencia con la producción de energía celular Departamento de Farmacia.4-dinitrofenol carbonilcianuro-p-trifluorometoxihidrazona (FCCP) {[4-(trifluoromethoxi)fenil]hidrazono}malononitrilo Inhibidores de la fosforilación oxidativa (inhiben a la ATP sintetasa) Oligomicina (antibiótico) Diciclohexilcarbodiimida (DCC) O O O O Cl Cl Cl OH OH Cl OH Cl NADP+ -2e. Desacopladores de la fosforilación oxidativa Los agentes desacopladores permiten el transporte de electrones pero previenen la fosforilación de ADP para convertirse en ATP. nitrofenoles.4-dinitrofenol. las mucosas. UNAM. Facultad de Química. salicilanilidas. María Elena Bravo Gómez. dicumarinas. Estos eventos desencadenan un incremento en el consumo de oxígeno y en la producción de “calor”. Francisco Sánchez Bartes . Xenobióticos que provocan desacoplamiento de la fosforilación oxidativa electrones NADPH +H+ (proceso exotérmico) ATP (proceso endotérmico) Los agentes desacopladores ocasionan un “corto circuito” al provocar una corriente de protones a través de las membranas mitocondriales. se presentan hipertermia. incluyendo la piel. Figura 1-28. Muchos agentes desacopladores son ácidos débiles. HO NO 2 NC N NC NH - Inhibición y desacoplamiento de la fosforilación oxidativa La fosforilación oxidativa es un proceso metabólico que utiliza NO 2 OCF 3 energía liberada por la oxidación de nutrientes para producir ATP. La ingestión de pequeñas cantidades de ión cianuro o del gas cianuro de hidrógeno (HCN) provoca la muerte en 31 Profesores: Francisco Hernández Luis. las cuales son impermeables de manera normal. 2H+ transporte de ADP dicumarol pentaclorofenol ATP sintetasa Figura 1-29.Unidad 1. Es fácilmente absorbido por todas las rutas. y por inhalación. Inhibición del transporte de electrones fenilhidrazonas. náusea y coma. atebrina (antimalárico) y arsenatos. El ión cianuro es uno de los agentes venenosos de más rápida acción. La muerte ocurre de manera rápida por hipertermia fatal. Perla Castañeda López. El primer agente desacoplante fue el herbicida 2. 2. En seres humanos. Entre los agentes desacoplantes conocidos se encuentran fenoles halogenados. carbonilcianidas. lipofílicos y generalmente tienen un anillo aromático.

Unidad 1. Facultad de Química. Mecanismo de acción del cianuro El tratamiento para el envenenamiento con cianuros está dividido en tres etapas. Departamento de Farmacia. Típicamente. Cit c+2 Cit a+2 Cit a3+3 H2O Cit a +3 HCN Cit a3+2 ½ O2 HbO2 Figura 1-31. El cianuro también está presente en las semillas de manzanas. María Elena Bravo Gómez. Francisco Sánchez Bartes . murió al aspirar los vapores de este compuesto. está formada por glucosa. Se ha estimado que entre un 20% a 40% de la población es genéticamente incapaz de detectar el olor a cianuro. un glucósido cianogénico o en frijoles y forrajes (sorgo). soluciones fotográficas. Como resultado de la inhibición por el cianuro. la transferencia de electrones del citocromo a3 hacia el oxígeno molecular es bloqueada y la célula muere. Primero se administra nitrito de amilo (gas) por vía 32 Profesores: Francisco Hernández Luis. Sobredosis de este compuesto han provocado problemas de intoxicación por cianuro. Figura 1-30. el cual es utilizado en el tratamiento de la hipertensión. Cit c+3 Entre los síntomas por intoxicación por cianuro se presentan una rápida salivación. dependiendo de la ruta de exposición. presente en la pulpa de las semillas trituradas y en la microflora intestinal de los mamíferos. descubridor del HCN. Perla Castañeda López. además de un olor a almendras. dolor de cabeza. la amigdalina puede ser más tóxica por vía oral que por vía intravenosa. el cianuro tiene un sabor amargo. Introducción a la toxicología cuestión de minutos u horas. con esto previene la unión del grupo hem con el oxígeno. OH H O H OH H HO HO H H H O H OH O CN NC Fe NC CN CN O NO 2 CN H HO HO H H -2 2Na+ amigdalina nitroprusiato de sodio La amigdalina. Estos citocromos son referidos como citocromo oxidasa. UNAM. Por esta razón. vértigo y dificultad respiratoria. El ión cianuro forma parte de algunos venenos para ratas. Otra fuente potencial de ión cianuro es el fármaco nitroprusiato de sodio (nitroferricianuro de sodio). El ión cianuro puede ser liberado del glucósido por la acción de la β-glucosidasa (emulsina). El cianuro forma un complejo de coordinación con el grupo hem del citocromo a3. cerezas y almendras en la forma de amigdalina. un ingrediente del Laetrile (antineoplásico). El químico Karl Wilhelm Scheele. Amigdalina y nitroprusiato de sodio El cianuro ejerce su efecto tóxico al bloquear el transporte de electrones en la secuencia de citrocromos mitocondriales a-a3 como se muestra en la siguiente figura. y productos para fumigación. polvos pulidores para plata y otros metales. duraznos. benzaldehído y cianuro.

Francisco Sánchez Bartes . ARN. próximos capítulos ilustraremos esta forma de acción con varios ejemplos. María Elena Bravo Gómez. la interferencia sobre el sistema inmune y la interacción de una sustancia endógena con macromoléculas biológica. lípidos). Unión a biomoléculas Otro de los mecanismos de acción tóxica se presenta cuando los compuestos se unen a alguna macromolécula que desempeñe alguna función biológica importante (enzimas. UNAM. el cual es excretado fácilmente. seguida por administración intravenosa de nitrito de sodio. en el presente sólo citaremos dos casos. Introducción a la toxicología respiratoria. Facultad de Química. Después de la administración de nitritos. El ión férrico de la meta-hemoglobina se combina con el cianuro del plasma. Perla Castañeda López. esta sustancia es un sustrato para la enzima rodanasa (tiosulfato sulfotransferasa) que cataliza la conversión del cianuro a tiocianato. ADN. provocando una disociación del cianuro que se encuentra unido en el citocromo a3. Aunque en los Figura 1-34.Unidad 1. Unión reversible e irreversible a biomoléculas Figura 1-32. Molécula de la hemoglobina (Imagen tomada del Protein Data Bank 1GZX) 33 Profesores: Francisco Hernández Luis. Estas sustancias oxidan al Fe(II) del grupo hem en la hemoglobina para generar la metahemoglobina. Etapas en el tratamiento contra el envenenamiento con cianuros Otras sustancias que presentan un mecanismo de acción semejante al cianuro son las azidas y el sulfuro de hidrógeno (H2S). se administra tiosulfato de sodio vía intravenosa. Departamento de Farmacia. C H 3 N H C 3 O Nitrito de amilo O NaNO2 Cit a3 CN-1 NO2-1 CN-1 HbO2 S2O3-2 MetHb CNMetHb IV + CN-1 rodanasa SCN-1 + SO3-2 Figura 1-33.

Un ejemplo lo constituye la reacción anafiláctica a penicilina. Francisco Sánchez Bartes . Tipo I Tipo II Tipo III Tipo IV Macromolécula (proteína) xenobiotico xenobiotico (hapteno) X componentes respuesta inmunológica asma. Estos mediadores causan vasodilatación. Respuesta incrementada a un xenobiótico específico con el consecuente daño tisular. a basófilos o a membranas de células cebadas. 34 Profesores: Francisco Hernández Luis. Inmunosupresión. bronco- constricción e inflamación. Incremento en la actividad de órganos o células del sistema inmune que puede provocar una respuesta inmunológica incrementada. María Elena Bravo Gómez. incrementan la permeabilidad capilar. Introducción a la toxicología Interferencia sobre el sistema inmune Departamento de Farmacia. leucotrieneos y quimioatractores de neutrófilos y eosinófilos.Unidad 1. UNAM. rinitis alérgica. La urticaria. Efectos de los xenobióticos sobre el sistema inmune Las reacciones de hipersensibilidad se pueden provocar por los cuatro mecanismos mostrados en la figura 1-35. reacción de Arthur dermatitis por contacto. Autoinmunidad receptores Fc. Inmunoestimulación. vía sus El sistema inmune puede ser afectado por una amplia variedad de agentes tóxicos. Efecto directo sobre órganos y células del sistema inmune que provoca una respuesta disminuida. reacción a la tuberculina dermatitis por contacto célula del sistema inmune Figura 1-36. y esta mediada por la IgE (y en menor extensión por IgG4 en seres humanos) unida. Reacciones de hipersensibilidad Figura 1-35. La unión de antígenos a estas inmunoglobulinas. Facultad de Química. La reacción de Tipo I (anafilaxia) es inmediata. libera histamina. prostaglandinas. el asma y la anafilaxia provocadas por fármacos se presentan por esta alteración inmunológica. Perla Castañeda López. anafilaxia sistémica discrasia sanguínea por xenobiotico enfermedad del suero. Cuatro tipos de respuestas se pueden ocasionar: Hipersensibilidad.

III. o una molécula de IgM. UNAM. y sus metabolitos son altamente reactivos y de vida corta. y producir la lisis de glóbulos rojos. se presentarían en lugares bien localizados. tetraciclina Tipo I. que se unen a la porción Fc de los anticuerpos enlazados y en consecuencia son activados y lisan las células blanco. Francisco Sánchez Bartes . entonces se presentarán efectos múltiples en varios órganos y tejidos. ejemplo la hepatitis provocada por el halotano. se unen a antígenos tisulares específicos. III. BHT. Ciertas células tienen receptores Fc. la reacción de Tipo IV (hipersensibilidad mediada por células) a diferencia de las anteriores. IV penicilina. En contraste. incluyendo las penicilinas. Esto provoca la deposición de complejos anticuerpos / antígenos en la piel y membranas. IV. Para que un xenobiótico provoque una respuesta inmune necesita ser metabolizado para formar un conjugado con una macromolécula (acarreador) que le dará sus características antigénicas. tales como las células K o ciertos macrófagos. Departamento de Farmacia. La dermatitis por contacto al níquel es causada por este tipo de respuesta. La reacción inmune a estos complejos puede causar inflamación de la piel. si el xenobiótico es metabolizado en varios órganos. Si el xenobiótico es predominantemente activado dentro de un órgano específico. riñones. IV resinas y plastizantes (tolueno. sulfonamidas y quinina pueden estimular la formación de anticuerpos. 35 Profesores: Francisco Hernández Luis. o es transformado en metabolitos con valores de vida media suficientes para trasladarse a sitios distantes. Ellos se forman en donde el antígeno se forma y se libera de la superficie celular. La reacción de Tipo II (citolítica) es iniciada cuando anticuerpos tales como la IgG. y subsecuentes reacciones alérgicas. Facultad de Química. IgA. Algunos de los xenobióticos reportados que manifiestan toxicidad sobre el sistema inmune ya sea por alteraciones humorales o celulares se presentan en la siguiente tabla. Este proceso es conocido bajo el nombre de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (DAC). reacción de Arthus (Nicholas Maurice Arthus). De manera similar el sistema complemento es activado cuando se enlaza de forma cruzada a la porción Fc de dos moléculas de IgG. lupus eritematoso. Introducción a la toxicología Tabla 1-28. Esto nos lleva a tomar en cuenta dos consideraciones que involucran la localización de dicha biotransformación y las propiedades químicas de los metabolitos generados. oro Tipo II. María Elena Bravo Gómez. es causada por la interacción de antígenos con linfocitos T y no con anticuerpos. II. articulaciones.Unidad 1. La reacción Tipo III (precipitina tóxica) involucra la unión de anticuerpos con antígenos multivalentes. diisocianato) Tipo I. Varios fármacos. Xenobióticos que causan hipersensibilidad Xenobiotico Tipo de reacción aditivos de alimentos (colorantes azo. cromo Tipo IV formaldehído Tipo IV mercurio. Los linfocitos T reconocen el antígeno y entonces reclutan otras células para provocar una respuesta inflamatoria al antígeno. IgM. Finalmente. cada una de las cuales está unida a la superficie celular. Perla Castañeda López. IV compuestos de platino Tipo I. quinina. la formación del conjugado. BHA) Tipo I anhídridos ftálicos Tipo I antimicrobianos (parabenos) Tipo IV berilio Tipo I. IV níquel Tipo I. por ejemplo. aquellas manifestadas por las respuestas de Tipo I y Tipo III.

El benceno causa linfocitopenia pero también afecta otros IC + + componentes de la médula ósea. mercurio. Facultad de Química. U + amoxicilina HA + captopril U. Ne + + Departamento de Farmacia. T + probenecid HA + quinidina penicilinas As. N: neutropenia. As: asma. T: trombocitopenia. U musculares eritromicina H + cefamandol T + difenilhidantoína H. Perla Castañeda López. I Hm: Inmunidad humoral. H + clanidanol HA + quinina. carbamatos) Drogas (etanol. UNAM. provocando una baja de la capacidad de dicho sistema b) c) Destruir directamente los componentes del sistema inmune. Tox: toxicidad. I C: inmunidad celular. + En los seres humanos. Francisco Sánchez Bartes . D: dermatitis. H. níquel. DLE: Lupus eritematoso inducido por fármacos. O electrófilo + nucleófilo R 1 → enlace covalente R O 1 La inmunosupresión se puede ocasionar por: a) Interferencia con el crecimiento celular o con su proliferación. Sustancias que provocan inmunosupresión Xenobiótico Xenobiótico Antitumorales (6-mercaptopurina. N. + + penicilamina N + A etiniloestradiol Th + procaínamida DLE + ciclofosfamida A. A: anafilaxia. ciclofosfamida. Benceno azatioprina. El resultado funcional es una deficiencia en la inmunidad mediada por células. Introducción a la toxicología Tabla 1-29. SS + halotano H + clorpropamida HA + hidralazina DLE + metildopa HA. Distorsionar los mecanismos de reconocimiento por lo que reducen la respuesta inmune quinona O R + HS HN O S HN O O 2 O O R 2 cisteína en una proteína aducto de cisteína y quinona Figura 1-37. Xenobióticos que presentan inmunidad humoral y/o celular Xenobiótico Tox I Hm I C Xenobiótico Tox I Hm acetaminofén T + alprenolol D salicilatos A. U.: anemia hemolítica. Ne: nefritis. Th: Trombosis. virales y parasitarias.Unidad 1. María Elena Bravo Gómez. opiáceos) cadmio) Organometálicos (metilmercurio) 36 Profesores: Francisco Hernández Luis. D. As. el efecto de la inmunosupresión puede provocar un incremento de las infecciones bacteriales. H: Hepatitis. U + tolbutamida HA + relajantes A + alopurinol D. cannabinoides y Metales (plomo. organofos-forados. Los trabajadores expuestos al benceno presentan una baja inmunidad humoral. ciclosporina) Hidrocarburos aromáticos policíclicos Insecticidas (organoclorados. mientras que los niños expuestos al plomo padecen de diarrea bacteriana. U: urticaria.A. D. Unión covalente Tabla 1-30. Por ejemplo las personas expuestas a bifenilos policlorados son más susceptibles a sufrir infecciones respiratorias. que se ha evidenciado por una disminución del complemento y concentraciones de inmunoglobulinas.

Nitrógeno en amino de purinas Oxígeno de purinas y pirimidinas Oxígeno en el fosfato de ácidos nucléicos Departamento de Farmacia. Concentración letal 50 y viabilidad celular Curtis D. ejemplo Master Plex (http://www. o CT50: Concentración tóxica media. 2001. 45 El término CL50 conceptualmente es similar al de la DL50. Tabla 1-32. Facultad de Química. nM mg/Kg Evaluación In vitro In vivo CL50: Concentración letal media. a. María Elena Bravo Gómez. μM. la CL50 y la DL50 Parámetro CL50* DL50 Unidad mM.p. El valor de la CL50 de compuestos se puede calcular mediante algunos software. Algunos nucleófilos y electrófilos Nucleófilos suave Carbón en dobles Azufre en tioles (glutatión enlaces polarizados y tiol en residuos de (quinonas. Perla Castañeda López. Introducción a la toxicología Tabla 1-31. Klassen.miraibio. UNAM. También existe un software disponible de la EPA: http://www.b-insaturadas) Electrófilo Carbón en epóxidos.gov/ordntrnt/ORD/NRMRL/std/qsar/qsar. Gráficamente este término se representa de la siguiente forma.epa. Mac Graw Hill. DL50: Dosis letal media.Unidad 1. et al. Casarett and Doull´s Toxicology. Carbocatión bencílico Carbocatión alquílico duro Azufre en metionina Nitrógeno en amino primarios y secundarios de proteínas. haluros de arilo. Sin embargo es importante distinguir el ámbito de sus aplicaciones. New York. cetonas cisteína). Francisco Sánchez Bartes . *En algunos textos se puede indicar el mismo concepto como CI 50: Concentración inhibitoria media.com/elisacurve-fit) estructurado para manejar los datos arrojados por lectores de ELISA. El parámetro que se utiliza para denotar la citotoxicidad de un xenobiótico es la CL50 (concentración letal cincuenta que representa la muerte del 50% de células expuestas a un compuesto en un rango de concentraciones. 6th ed. Los biomarcadores de citotoxicidad El término de citotoxicidad se utiliza para denotar que un xenobiótico ha ocasionado daño letal a una célula sin indicar el mecanismo de acción implicado.html Para el manejo de datos y el análisis estadístico para determinar la CL50 se puede consultar: 37 Profesores: Francisco Hernández Luis. Figura 1-38.

56 40. 20. Su comportamiento es similar al MTT solamente que su sal de tetrazolium formada es soluble en agua El rojo neutro es captado por las células (específicamente por los lisosomas y endosomas). TGI y CL50 en línea celular Cantidad de células Cantidad de células Parámetro. CL50: concentración letal. Tabla 1-33.54 Wellington K. GI. TGI y CL50 38 Profesores: Francisco Hernández Luis. La resorufina se difunde al medio de cultivo donde es cuantificada. 599-607. Otros parámetros a evaluar in vitro sobre la exposición de líneas celulares a xenobioticos en un determinado tiempo (ejemplo 24 h) son: GI (growth inhibitiion): Inhibición del crecimiento.. et al.P.uk/archive/jdeacon/statistics/tress4. Sólo la células viables son capaces de retener el colorante. Rojo neutro Azul de tripano Sulforodamina Azul Kenacida Resazurina (azul de alamar) Putman K. En condiciones básicas se disocia y se puede evaluar en el medio de cultivo por absorbencia a 564 nm. TGI: inhibición total del crecimiento. inicial después de 24 h 2 000 000 4 000 000 Control negativo (sin xenobiotico) 2 000 000 3 000 000 GI50 2 000 000 2 000 000 TGI 2 000 000 1000 000 CL50 http://www. Tabla 1-35. Perla Castañeda López. Evaluación de los parámetros GI.. 16. Toxicology in Vitro 2002.html#Transfor mationofdata Departamento de Farmacia.ac. Tabla 1-34. El colorante no es retenido por las células viables. María Elena Bravo Gómez. Ejemplo de citotoxicidad en la línea celular HeLa Compuesto GI50 (μM) TGI (μM) CL50 (μM) Etopósido 3.ed. Figura 1-39. Determina las proteínas totales al ingresar a la célula La resazurina (azul no fluorescente) es reducida a resorufina (rojo fluorescente) por deshidrogenasas mitocondriales de la células viables. UNAM. W. Facultad de Química.biology. 44724481. Introducción a la toxicología http://www. et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry 2012.18 87. En condiciones ácidas la sulforodamina se une a los aminoácidos básicos de las proteínas intracelulares de las células viables. amarillo) son convertidas a cristales de formazan ( púrpura insolubles) por las MTT enzimas deshidrogenasas mitocondriales de las células vivas.cancer.gov/cancertopics/pdq/cam/cancell/HealthProfessional/page8 Para determinar la viabilidad celular se pueden utilizar diferentes indicadores para tal efecto. Francisco Sánchez Bartes . Sustancias usadas como biomarcadores de citotoxicidad Indicador Característica Las sales de tetrazolio (MTT. XTT La representación gráfica de los parámetros antes mencionados se presenta a continuación.Unidad 1.

85011425) Mouse connective tissue Fibroblast CHO (Prod. No.07 (26) (9. CL50 de xenobióticos en linfocitos de diferentes especies log CL50 ±DE* (CL50.14 0.11 2. Ensayo MTT Una de las células usadas para detectar la citotoxicidad de un xenobiótico es el linfocito (célula sanguínea mononucleada). UNAM.28 1. se presenta a continuación los datos comparativos de citotoxicidad en linfocitos de humano. No. A continuación se presenta algunas de las líneas comercialmente disponibles de la colección europea. No. Introducción a la toxicología Departamento de Farmacia. The European Collection of Cell Cultures (ECACC) Attached Cell Lines Name Species and tissue of origin Morphology MRC-5 (Prod.92± 0. Tabla 1-37.08 3.6 (2. 39 Profesores: Francisco Hernández Luis. No. No. También existe la colección ATTC.21 3. Mouse embryo Fibroblast 93061524) L929 (Prod. Figura 1-40. μM) Compuesto Humano Perro Rata Ratón 52. No. Al respecto. Facultad de Química.42 ± 0.47 ± 0. No.65 ± 0.41 ± 0. Perla Castañeda López. fibroblastos.B.07 0. 85050302) Chinese Hamster Ovary Fibroblast BHK-21 (Prod. Tabla 1-36. Indicadores de viabilidad celular Otro de los métodos para evaluar la citotoxicidad de xenobióticos es mediante el uso de líneas celulares.22 Fluorouracilo (>10000) (460) (2300) (>10000) Melfalan 2. rata y ratón para ilustrarnos las diferentes sensibilidades de esta evaluación.12 0. Syrian Hamster Kidney Fibroblast 85011433) HEK 293 (Prod. perro.Unidad 1. 1174-1181. 93021013) Human cervix Epithelial VERO (Prod.98± 0. Human lung Fibroblast 84101801) HELA (Prod.27 ± 0.16 1.18 (190) (140) (200) (84) Cisplatino 1.36 ± 0. 84113001) African Green Monkey Epithelial Kidney NIH 3T3 (Prod.célula del tejido conjuntivo) y las líneas secundarias obtenidas de tumores malignos (cancerosos). Toxicology in Vitro 2007.19 ± 0.5) Prednisolona (>1000) (>1000) (>1000) (>1000) *DE: desviación estándar Hassan S.9) (1. Francisco Sánchez Bartes .29 ± 0. 21.28± 0. En este ámbito se presentan dos grupos generales: las líneas primarias derivadas de células normales (ej.11 2.8 2.08 0.51 ± 0.14 ±0.5) (>100) (18) Taxol 0. No. María Elena Bravo Gómez. et al. Human Kidney Epithelial 85120602) Figura 1-41.

No. 85110503) U937 (Prod. Facultad de Química.5 ± 0. No. et al. No. Species and tissue of origin Mouse myeloma Human Hystiocytic Lymphoma Human Lymphoma Human Leukaemia Mouse B-cell Lymphoma Mouse Lymphoma Human Myeloma Human neuroblastoma Morphology Lymphoblastoidlike Lymphoblastoid Lymphoblastoid Lymphoblastoidlike Lymphoblastoid Lymphoblastoid Lymphoblastoid Neuroblast Tabla 1-38. h CI50. 87060801) HL60 (Prod. Francisco Sánchez Bartes . μM K562 Quinifurilo 24 2 ± 0. No.07 6 2. Rosas. No. 85011440) Namalwa (Prod.06 6 0. UNAM.4 ± 0. María Elena Bravo Gómez. 88031149) Suspension Cell Lines Name NSO (Prod.2 ± 0. ejemplo la lactato 40 Profesores: Francisco Hernández Luis.2 ± 0.20 Nitracrina 24 0. Evaluación de la actividad citotóxica Estas determinaciones tienen diferentes puntos finales ó “end point”. Marcelo M. Introducción a la toxicología HEPG2 (Prod. 369–375 Figura 1-42. 85051003) SH-SY5Y (Prod.90 (leucemia-humana) 12 12 ± 2.06 P388 Quinifurilo 24 1.20 Cada valor de CL50 representa (M ± DE) de dos a cinco series de experimentos completamente independientes con cinco a 6 repeticiones para cada serie.1 ± 0. Perla Castañeda López. No. Ejemplos de aplicación de la CL50 medido con MTT Línea celular Compuesto Tiempo.04 12 1. 86022801) U 266B1 (Prod. No. En otros métodos se utiliza la presencia de proteínas totales o de alguna enzima intracelular como biomarcador.20 (leucemia-ratón) Nitacrina 24 0.12 ± 0. No. No.17 (fibroblasto-ratón) 12 11 ± 2.10 Nitacrina 24 0. 85022107) YAC 1 (Prod.16 ± 0. 94030304) Human Liver Bovine aorta Epithelial Endothelial Departamento de Farmacia. Pharmacological Research 2003. 85011430) BAE-1 (Prod.13 NIH3T3 Quinifurilo 24 1. No.Unidad 1.13 ± 0. 98070106) WEHI 231 (Prod. 48.

Departamento de Farmacia. La presencia de las proteínas o de la enzima indica que las células se rompieron. UNAM. Determinación de lactato deshidrogenada como biomarcador de citotoxicidad 41 Profesores: Francisco Hernández Luis. Reacción para evaluar la actividad LDH Algunas ventajas de este método son: no utiliza material radiactivo operativamente sencillo de llevar a acabo el tiempo de reacción es corto (30-60 min) no requiere centrifugación la absorbencia correlaciona con las células lisadas datos reproducibles En la tabla 1-39 se presentan algunos datos de la citotoxicidad del CdCl2 evaluada por distintos métodos en dos diferentes líneas celulares. Francisco Sánchez Bartes . María Elena Bravo Gómez.Unidad 1. ácido láctico NAD formazán (rojo) 490 nm + LDH ácido pirúvico NADPH + H+ 30 a 60 min tetrazolium INT (amarillo) diaforasa Figura 1-43. Introducción a la toxicología deshidrogenasa (LDH). Perla Castañeda López. Facultad de Química. Figura 1-44.

25 80 μM ± 16. Análisis con t-student.96 100 μM ±0.53 300 μM ±1. UNAM. 160.11 8 μM ± 0.02 10 μM ±0. Francisco Sánchez Bartes .39 80 μM ±1. un antidepresivo tricíclico a células de fibroblastos. Facultad de Química. 171–177. Nivel bioquímico Activación génica Requerimiento de síntesis protéica Liberación de enzimas lisosomales Activacion de enzimas no lisosomales Activacion de caspasas Cambio en el citoesqueleto Niveles de ATP requeridos Presente Presente Ausente Presente Presente Presente Alto Ausente Ausente Presente Presente Ausente Presente Bajo M ± ESM (error estándar medio) (n = 3). En términos generales.26 40 μM ±6.90 40 μM ±3. Presenta forma de ampollas Abultado en las últimas etapas Presente Cariorrexis Ampollas previas a la lísis Abultados al inicio del evento Presente Cariólisis 42 Profesores: Francisco Hernández Luis. CL50 de líneas hepáticas expuestas a CdCl2 3h 5h 8h 24 h HTC Rojo neutro MTT proteína LDH HepG2 Rojo neutro MTT proteína LDH 300 μM ± 7. Fotakis G.25 80 μM ±1. María Elena Bravo Gómez.02 5 μM ± 5. Toxicology Letters 2006.Unidad 1. la muerte de una célula se puede presentar ocasionada por apoptosis o por necrosis Tabla 1-40.88 500 μM ±1. Perla Castañeda López.21 15 μM ± 5.31 100 μM ± 14.47 200 μM ±2.84 100 μM ±8.01 200 μM ± 2. Características de apoptosis y necrosis Características Apoptosis Necrosis Estimulo Fisiológico o patológico Patológico Ocurrencia Células únicas Grupo de células Reversibilidad Limitada Limitada Nivel celular Forma de la célula Adhesión entre células Fagocitósis por otras células Inflamación exudativa Nivel de organélos Menbrana Citoplasma Permeabilidad mitocondrial Núcleo Figura 1-45. Cambios celulares durante la apoptosis Contracción y formación de cuerpos apoptóticos Alterada desde el principio Presente Ausente Abultamiento con posterior desintegración Alterada al final del evento Ausente Presente Otro ejemplo lo constituye la muerte ocasionada por aminotriptilina. Introducción a la toxicología Tabla 1-39.53 20 μM ± 3.35 Departamento de Farmacia.

MD. Stuart Creton. Michael J. Brown. Spurgeon. Hanan Ghantous. Luis G. 5 th ed. Will Davies. 40. Stürzenbaum. Granowitz. 6th ed. Valerio Jr. 5-27. 24 421– 442. Paul Baldrick. 243. Perla Castañeda López. 2.E. Ferner R. 2606–2610. Richard Billington. Matthew P. Richard Billington. Bus. MD. Oliver A. Jones . Principles and Methods of Toxicology. Dent. 241–247. Hawksworth. Medicine 2012. Mückter H. Science of the Total Environment 2010. Apoptosis causada por amitriptilina En caso de información sobre el daño toxicológico de toxicology perspectives on the development of herbal medicines to prescription drug products in the United States. Hawksworth. 8. 55. Toxicology and Applied Pharmacology 2009. 46. Matthew P. Gabrielle M. Introducción a la toxicología Departamento de Farmacia.H.M. Stuart Creton. Cell Signalling Technology. Kuei-Meng Wu. Travis. 127-133. Kim Z. Use of toxicokinetics to support chemical evaluation: Informing high dose selection and study interpretation. 370-374. 8.M. Birnkrant Current regulatory Determinación de apoptosis en fibroblastos después de una exposición a amitriptilina por -caspase 3 (1:100. Systems toxicology approaches for understanding the joint effects of environmental chemical mixtures. Toxicokinetics in preclinical evaluation. 9. Facultad de Química. Casarett and Doull´s Toxicology. 2007. Jean-Lou C. Regulatory Toxicology and Pharmacology 2012.F. 3. Dorne. Saghir. Stephen R. Curtis D. Adverse drug reactions. 7. In silico toxicology for the pharmaceutical sciences. Debra B. New York. et al. (C y D) condensación nuclear visulaizada con tinción Hoechst (flecha) Moreno-Fernández A. 5. 51–58. Critical Care Clinics 2008. 6. 17. Mac Graw Hill. 43 Profesores: Francisco Hernández Luis.62. Francisco Sánchez Bartes . La fluorescencia del citoplasma indica actividad de la caspasa 3 y su ausencia en el control (sin amitriptilina) A. Canada. Bartels. 10. Antibiotic adverse reactions and drug interactions. CRC Press. David J. Simon Parry.gov/ecotox/ Bibliografía 1. 408. Will Davies. 356–370. Eric V. Simon Parry. 291–299. 241. Klassen. Travis. agua y aire se puede consultar el sitio “ECOTOX Data Base” de la Environmental Protection Agency (EPA): http://cfpub. Dent. 11. Shakil A.. Application of toxicokinetics to improve chemical risk assessment: Implications for the use of animals. Drug Discovery Today 2003.Unidad 1. 3725–3734. Regulatory Toxicology and Pharmacology 2009. Suresh Swain. James S. 2001. contaminantes en organismos del suelo. 4. Figura 1-46. UNAM. USA) . What is Toxicology and how does toxicity occur? Best Practice and Research Clinical Anaesthesiology 2003. Kim Z. Food and Chemical Toxicology 2008. Gabrielle M. Wallace Hayes.epa. Richard B. TF Butt T. et al. Claus Svendsen. María Elena Bravo Gómez. A. Toxicology 2008.

319-323.Unidad 1. Henk Van Loveren. María Elena Bravo Gómez. Anaesthesia and Intensive Care Medicine 2011. Wim H. Screening of xenobiotics for direct immunotoxicity in an animal study. UNAM. Adverse drug reactions. Facultad de Química. Jacques Descotes. 13. 41. Introducción a la toxicología 12. Methods 2007. Perla Castañeda López. De Jong ¤. Toxicology Letters 2004. Francisco Sánchez Bartes . 14. 44 Profesores: Francisco Hernández Luis. 12. Simon Scott. 3–8 Departamento de Farmacia. Jonathan Thompson. 149 103– 108. Importance of immunotoxicity in safety assessment: a medical toxicologist’s perspective.

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