Está en la página 1de 31

Unidad 1.

Introduccin a la toxicologa

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


La forma en que los xenobiticos se trasladan a travs de las diferentes membranas son las siguientes:

1.7 Toxocintica
La toxocintica es el estudio del movimiento (traslado) de los xenobiticos dentro del organismo.1 El estudio de esta etapa comprende los procesos de absorcin, metabolismo, distribucin y excrecin de compuestos en los organismos vivos.1,2 Para iniciar el estudio de esta etapa, primeramente se revisarn los principios bsicos que son responsables del transporte de las sustancias a travs de las membranas biolgicas. a) b) c) d) e)

Difusin simple (transcelular, paracelular) Difusin facilitada Transporte activo Endocitosis/Exocitosis Filtracin por poros membranales

A
P

C,D C
P

E E

fluido extracelular membrana celular fluido intracelular membrana celular

Transporte a travs de las membranas biolgicas

clula
Un aspecto importante a considerar una vez que el xenobitico ha ingresado al organismo, es que tiene que atravesar varias membranas de los diferentes compartimentos biolgicos. 3

E E

xenobiotico ETAPA EXPOSICIN

A. Difusin simple transcelular. B. Difusin simple paracelular. C. Filtracin por poros membranales. D. Transporte activo o difusin facilitada. E. Endocitosis/Exocitosis.

Figura 1-10. Mecanismos de transporte para los xenobiticos


fluido extracelular absorcin fluido extracelular intersticial membrana capilar fluido extracelular plasmtico traslado del xenibiotico membrana capilar fluido extracelular intersticial membrana celular fluido intracelular membrana subcelular fluido intraorganelo intestinal membrana pulmonar piel

Hay una forma adicional de ingreso de sustancias, primordialmente en el intestino delgado. Este sistema se llama persorcin y se presentan cuando las clulas de las vellosidades se desprenden hacia el lumen, provocando una apertura por donde ingresan macromolculas o partculas, por ejemplo, partculas de almidn (Washington N., 2001).

La estructura de las membranas biolgicas determina su funcin y caractersticas. La ms importante, desde un punto de vista toxicolgico, es que son selectivamente permeables. Solamente ciertas sustancias son

Figura 1-9. Diferentes membranas que atraviesa un xenobitico

14
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


capaces de pasar a travs de ellas, dependiendo de las caractersticas fisicoqumicas que a continuacin se mencionan: Liposolubilidad Polaridad y carga elctrica de la molcula. Tamao de la molcula Similitud a sustancias endgenas. Donde:

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.

C: es la diferencia entre las concentraciones de los compartimentos separados por las membranas. P: es el coeficiente de reparto.

a) Difusin simple

Rm y Raq: son la resistencia de las membranas y de la capa acuosa contra la difusin de los xenobiticos.

Esta es la forma ms utilizada por la mayora de los xenobiticos para transportarse en los organismos vivos. Los factores que afectan la velocidad de este proceso son (Tabla 1-12): a) El gradiente de concentracin del compuesto en ambos lados de la membrana. b) Los parmetros que afectan la facilidad para que la molcula del xenobitico pueda moverse al interior lipoflico de la membrana: Coeficiente de particin (P) o Coeficiente de distribucin. Tamao molecular Grado de ionizacin.

La resistencia a la difusin depende primordialmente del grosor y la viscosidad de las capas membranales y slo ligeramente de la estructura del xenobitico. Por lo tanto, Rm y Raq pueden permanecer constantes para el transporte de una serie de xenobiticos en una membrana particular. Bajo estas condiciones, la ecuacin anterior predice que para cualquier concentracin del xenobitico, la velocidad del trasporte se incrementar exponencialmente con un incremento del coeficiente de particin.

Coeficiente de particin

Tabla 1-12. Factores que influyen en la difusin simple Factores Transcelular Paracelular Gradiente de concentracin + + Liposolubilidad + Tamao molecular + pKa + +

Expresa el grado de solubilidad en lpidos de un compuesto. Se define como la relacin de la concentracin de una sustancia, entre una fase orgnica, generalmente 1-octanol o cloroformo, y una fase acuosa, a un determinado valor de pH y temperatura, normalmente medidos a 25 o 37 C. Es importante para este parmetro que la molcula no presente carga elctrica (Thomas G., 2000).

Cuando todos los parmetros anteriores se integran, la velocidad con la cual una sustancia va a transportarse por las membranas biolgicas, se puede presentar mediante la siguiente relacin:

15
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Tabla 1-13. Relacin de la absorcin de barbitricos con su coeficiente de particin Barbitrico R1 R2 Log P % absorbido en (Cloroformo/agua) el colon de rata Barbital Etil Etil 0.7 12 Fenobarbital Etil Fenil 4.8 20 Ciclobarbital Etil ciclohexil 13.8 24 Pentobarbital Etil 1-metilbutil 28.0 30 Secobarbital Etil secbutil 50.7 40

El coeficiente de particin indica la facilidad con que una sustancia puede transportarse en las membranas biolgicas. Esta facilidad se reflejar en el porcentaje de xenobitico absorbido en el organismo biolgico en estudio. En vista de que los valores numricos obtenidos experimentalmente guardan diferencias de varios dgitos, se ha optado por manejarlos en escala logartmica; por lo que en la literatura aparece como log P.

Los valores de comparacin en los coeficientes de particin, hacen referencia a una serie de xenobiticos, estructuralmente relacionados (anlogos), como se ejemplific en la tabla anterior, en donde se equiparan una serie de compuestos que pertenecen a la familia de los barbitricos.

Dado que muchos xenobiticos son cidos o bases dbiles, se ha propuesto la inclusin del parmetro de coeficiente de distribucin (log D). En este se indica, en forma de subndice, el valor de pH de la fase acuosa a la que se realiz la determinacin: log DpH. En la fase acuosa se considera la porcin ionizada o no ionizada del cido o base que est en estudio.
Figura 1-11. Estructura comn para los barbitricos enlistados en la tabla 1-13.

Es necesario sealar que el aumento infinito del coeficiente de particin, para una serie de compuestos, no incrementar el porcentaje de Donde: X: Xenobitico absorcin para aquellos que sean los ms liposolubles; ya que cuando el valor de dicho parmetro aumenta, el % de absorcin disminuye.

Para ilustrar la utilidad del coeficiente de particin en la tabla siguiente se comparan el porcentaje de absorcin de diferentes barbitricos en el colon de ratas con el valor numrico de este parmetro.

Los

xenobiticos

que

son

muy

polares

hidroflicos

frecuentemente presentan propiedades pobres de transporte, mientras que aquellas muy lipoflicas, alcanzan solo un gradiente de concentracin pequeo. Para que las diversas sustancias puedan transportarse primero se tienen que solubilizar en el agua del compartimiento donde se encuentren presentes.

16
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Nitracepam Tetraciclina Teofilina 2.1 -1.4 0.0 Bien absorbido Absorcin irregular e incompleta Bien absorbido

Tamao molecular

Si la lipofilicidad se mantiene constante y el tamao molecular (radio cilndrico) se incrementa, entonces habr una menor facilidad para atravesar las membranas biolgicas debido a la resistencia por friccin o impedimento estrico que presenten las membranas. Las molculas de menor tamao pasan por filtracin. El tamao no debe ser mayor a 4 x 10 -4 m.
Figura 1-12. Relacin entre el coeficiente de particin y la velocidad en membranas.

De la grfica anterior se puede sealar que aquellas sustancias que presentan coeficientes de particin pequeos (muy hidroflico), se excretarn con cierta facilidad antes de alcanzar su sitio de accin; por otro lado, los de mayor valor de log P, se almacenarn en los depsitos lipoflicos del organismo. Empero, hay un coeficiente de particin "ideal" (Po), en donde el xenobitico que lo presente, tendr la mayor probabilidad de alcanzar su sitio de accin. En la tabla siguiente se muestran algunos valores de log P para varios xenobiticos y su grado de absorcin en el ser humano.
Tabla 1-14. Log P y absorcin oral de algunos xenobiticos Xenobitico log P absorcin en el humano Asprina -1.1 Bien absorbido Atropina 1.8 Bien absorbido Cafena 0.0 Bien absorbido Cloropromacina 3.4 Absorcin lenta pero completa Diacepam 2.7 Bien absorbido Morfina -0.1 Absorbido en un 60%

Grado de ionizacin
Muchas de las sustancias que presentan actividad biolgica son

cidos o bases dbiles, por lo que el grado de ionizacin que presenten a diferentes valores de pH va a cambiar de acuerdo a su valor de pKa.

Figura 1-13. Reacciones cido-base

Es el valor del pKa quien nos da una relacin del grado o fuerza de disociacin de un cido o base. Ejemplos de algunas sustancias con sus correspondientes valores de pKa, se presentan en la tabla 1-15.

17
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Tabla 1-15. Valores de pKa para algunos xenobiticos pka Bases pKa Anfteros pKa1 (HA) Sacarina 1.6 Cafena 0.8 Nicotina 3.1 Aspirina 3.5 Diazepam 3.3 Ampicilina 2.5 Fenilbutazona 4.5 Morfina 7.9 Anfotericina 5.5 B Pentobarbital 8.11 Cocana 8.5 Sulfadiazina 6.4 Acetaminofn 9.5 Anfetamina 9.8 Teofilina 8.6 Tetrahidrocanabinol 10.6 Teobromina 10.5 cidos
+

pH < pKa
O R OH

pKa

pH > pKa
O R O
-

pKa2 + (HB ) 8.0 7.2 10.0 2.0 3.5 0.12

cido

NH 3 +

NH2

Bowman y Rand. Farmacologa. Bases bioqumicas y patolgicas. Segunda edicin. Interamericana. Mxico. 1984. pp.40.5-40.6

base
Figura 1-14. Formas inica y no inica de cidos carboxlicos y aminas

Influencia del pH y el pKa en el grado de disociacin de cidos y bases dbiles

De acuerdo a la ecuacin de Henderson-Hasselbalch para los cidos y las bases podemos expresar la relacin entre su forma no inica, inica y su pKa de la siguiente manera.
O R OH O R O
-

agua

O R OH

diclorometano

As, si el pH del medio es menor que el valor numrico del pKa entonces el compuesto se encontrar mayoritariamente en forma no inica.

As, si el pH del medio es mayor que el pKa entonces, el compuesto se encontrar mayoritariamente en forma no inica.

Figura 1-15. Distribucin en fases orgnica y acuosa de cidos carboxlicos

18
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Con la ecuacin anterior correspondiente a los cidos, se calculo a diferentes valores de pH el porcentaje de la forma inica y no inica del fenobarbital cuyo pKa = 7.44; los resultados se presentan en la siguiente tabla.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Si se conoce el valor del pKa, y el log D a un pH determinado, entonces se podr calcular el valor de log P de la especie no ionizada (log PHA o log PB).

Tabla 1-16. Disociacin del fenobarbital a diferentes valores de pH pH No ionizado (%) Ionizado (%) 2.0 100.0 0.00 4.0 99.96 0.04 6.0 96.17 3.83 7.0 71.53 28.47 8.0 20.07 79.93 10.0 0.25 99.75 12.0 0.00 100.0

Relacin de concentraciones en dos lados de una membrana biolgica a diferentes valores de pH


Un ejemplo de las relaciones anteriores, lo constituye el cido

saliclico y su distribucin en dos compartimentos biolgicos con valores de pH diferentes.


Jugo gstrico pH = 1 Plasma pH = 7.4 (100)

La relacin entre el pKa y pH va a jugar un papel importante debido a que al cambiar los valores del segundo se altera la relacin inica y no inica del xenobitico.
Salicilato (1) Salicilato (1000 000) Ac. Saliclico (100) Ac. Saliclico

De manera general, se acepta que la forma no ionizada (ms lipoflica) de un cido o una base es la que atraviesa la membrana, y no la forma inica de la misma. Aunque esta ltima es ms hidrosoluble, el incremento en el coeficiente de particin al pasar de la forma inica a la forma no inica, generalmente excede en varios rdenes de magnitud a la prdida de solubilidad que se pudiese presentar por la misma conversin. Por lo anterior, el coeficiente de particin de la forma no inica de un cido o una base, se puede relacionar con el pKa del mismo compuesto mediante las siguientes ecuaciones: Esta forma de transporte prcticamente no es utilizado por los xenobiticos. Los parmetros importantes a considerar son: Requiere de un acarreador Necesita de un gradiente de concentracin No implica un gasto de energa Es un proceso saturable.
Figura 1-16. Relacin del cido saliclico a diferentes valores de pH

b) Difusin facilitada

19
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Ejemplo de compuestos que utilizan este tipo de trasporte: azcares, aminocidos en los glbulos rojos.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


d) Endocitosis/Exocitosis
Invaginacin que provoca una clula hacia una partcula slida

c) Transporte activo

(fagocitsis) o pequeas porciones de lquido (pinocitsis). Este sistema es importante para la trasportacin de macromolculas y liposomas.

Los aspectos relevantes a considerar en este tipo de transporte son: Requiere de un acarreador No necesita de un gradiente de concentracin Requiere de un gasto de energa Es saturable La absorcin es el proceso de transferencia de un xenobitico desde su sitio de ingreso al organismo hasta su llegada a la circulacin general. Los sitios de absorcin ms importantes para los xenobiticos que ingresan al organismo son: Para que un xenobitico pueda utilizar este transporte debe presentar una similitud estructural con alguna de las sustancias que se encuentran de manera natural en el organismo. Ejemplo:
O O F

Absorcin

a) b) c)

Tracto gastrointestinal Tracto respiratorio Piel

Para conocer la influencia de la absorcin en la toxicidad de un xenobitico, se comparan sus valores de DL50 obtenidos por varias rutas de

NH

NH

N H

N H

administracin.
Tabla 1-17. Influencia de la ruta de administracin en la toxicidad Pentobarbital Isoniacida Procana Ruta de (DL50 mg/Kg) (DL50, (DL50, administracin mg/Kg) mg/Kg) oral 280 142 500 subcutnea 130 160 800 intramuscular 124 140 630 intraperitoneal 130 132 230 intravenosa 80 153 45
Datos de toxicidad en ratones. La va intravenosa se reporta para establecer la toxicidad sin que intervenga el proceso de absorcin.

Uracilo

5-Fluorouracilo

Figura 1-17. Estructuras similares del Uracilo y el 5-Fluorouracilo

El transporte activo juega un papel importante en la excrecin de sustancias txicas por el rin. En este rgano se han identificado 2 tipos de este transporte, uno para compuestos cidos y otro para compuestos bsicos. Por lo que respecta al hgado, se han reportado 3 diferentes tipos de transporte activo, uno para cidos, uno para bases y uno para compuestos neutros.

De los datos mostrados se desprende que el pentobarbital se absorbe con mayor eficacia por la va intramuscular, luego por la

20
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


subcutnea o la intra-peritoneal, y por ltimo, la oral, en esta ruta, es donde se presenta el menor riesgo de intoxicacin por esta sustancia. Para la procana la ruta donde que presenta el mayor riesgo de toxicidad es la intraperitoneal. Puede anotarse que en la isoniacida, el proceso de absorcin no decide el grado de toxicidad, ya que los valores de las diferentes rutas de administracin, incluyendo la intravenosa, son parecidas.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.

a) Tracto gastrointestinal
Es importante marcar que el trmino absorcin gastrointestinal de xenobiticos implica la determinacin de la concentracin de la sustancia en plasma despus de su ingreso por la ruta oral. Un trmino adicional es la permeacin o traslado celular que implica el paso de un xenobitico por una membrana plasmtica.
Figura 1-18. Factores que influyen en la absorcin en el tracto gastrointestinal

Los factores que afectan la absorcin gastrointestinal sustancia son: -

de una

Velocidad de disolucin y tiempo de desintegracin de la forma farmacutica.

Velocidad de disolucin y tiempo de desintegracin de la forma farmacutica

El pH de la porcin gastrointestinal y el valor de pKa que presente el xenobitico

La disolucin de los xenobiticos, tanto in vitro como in vivo, es principalmente gobernado por la solubilidad acuosa de los mismos. La velocidad de disolucin (R) de una sustancia en particular en un medio acuoso, es directamente proporcional a la solubilidad de la misma (S): R=K*S Donde K es una constante que refleja la velocidad de agitacin en el medio de disolucin, y tambin el rea superficial de las partculas de la sustancia en cuestin. Si una sustancia se solubiliza con facilidad en agua (>1g/100mL) entonces se podr disolver con facilidad logrando estar disponible para su posterior absorcin.

Vaciamiento gstrico rea de absorcin Transporte a travs de las clulas (Liposolubilidad y tamao de partcula del xenobitico),

Inestabilidad qumica y metabolismo del xenobitico a nivel de membrana intestinal y/o por la presencia de microflora.

21
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


pH de la porcin gastrointestinal

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Glndulas salivales Parotida Submandibular Sublingual Faringe Lengua

Los valores de pH a lo largo del tracto gastrointestinal presentan variaciones, lo que afecta el comportamiento de los xenobiticos que poseen propiedades de cidos dbiles o bases dbiles. Tomando en cuenta solo las propiedades cido-base y asumiendo que la absorcin se dar por difusin simple, solo la forma no inica ser capaz de atravesar las membranas, y por tanto, se espera que los compuestos cidos se absorban en el estmago, y los compuestos bsicos en el intestino delgado. Sin embargo, es necesario puntualizar, que las diferentes sustancias tanto bsicas como cidas, se van a absorber tambin a nivel de intestino delgado, ya que la mayora de los xenobiticos son cidos o bases dbiles y el valor de pH de esta regin anatmica (5-8 dependiendo de la zona) es adecuado para su absorcin por difusin simple. Adems,
Hgado Vescula biliar

Cavidad oral

Esfago

pH =6.8

Pncreas

Estmago pH = 1-3
Conducto pancretico

Duodeno

pH = 5-6.5
Conducto biliar

Clon transverso Coln ascendente Coln Descendente

pH = 5.5-8
Ciego Apndice
Recto

ilen

pH =7-8

independientemente del valor del pH que aqu se manifieste, el intestino delgado presenta las condiciones ptimas de rea de absorcin y vascularizacin que permiten sea el sitio de absorcin preferencial de la mayor parte de los nutrientes y xenobiticos.

Ano

Figura 1-19. Regiones y valores del pH del tracto gastrointestinal Tabla 1-18. Factores que promueven o retardan el vaciamiento gstrico Promueven el vaciamiento gstrico Retardan el vaciamiento gstrico Soluciones buffer alcalinas Alimentos grasosos y viscosos Estados de ansiedad Estados de depresin Hambre lceras Hipertiroidismo Hipotiroidismo Alimentos fros Alimentos calientes

Vaciamiento gstrico

Determina el paso de alimentos del estmago hacia la parte superior del intestino delgado. Este proceso puede acelerarse o retardarse segn ciertas circunstancias.

Para los xenobiticos que tienen velocidades de disolucin muy lenta, un vaciamiento gstrico retardado favorecer su proceso de absorcin; ya que tendrn ms tiempo para que una cantidad mayor de esta sustancia se logre solubilizar; por otro lado, aquellos compuestos con velocidades de disolucin altas, su absorcin se ver favorecida con un

22
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


vaciamiento gstrico acelerado, porque les ayudara a ingresar al intestino delgado rpidamente para absorberse en mayor proporcin.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.

rea de contacto

El intestino delgado presenta mayor rea de ingreso debido a la presencia de las vellosidades de la mucosa intestinal.

Figura 1-21. reas del intestino delgado para la permeacin de xenobiticos

Figura 1-22. Vellosidad intestinal y el ingreso de xenobiticos

pesar de

que

el

tiempo

de

residencia

del

contenido

gastrointestinal es mayor en el colon (Tabla 1-19), el rea de contacto del duodeno y yeyuno es la que determina la mayor cantidad de permeacin del xenobitico.
Tabla 1-19. Tiempo de residencia del contenido gastrointestinal 2 Regin Longitud rea (m ) pH Residencia m.o (m) Esfago 0.3 0.02 6.8 > 30 s ? 2 Estmago 0.2 0.2 1-3 1.5 h < 10 2 Duodeno 0.3 0.02 5-6.5 > 5 min < 10 2 Yeyuno 3 100 6.9 1-2 h < 10 7 leon 4 100 7-8 2-3 h < 10 11 Colon 1.5 3 5.5-8 15-48 h < 10 m.o.: microorganismos

Figura 1-20. Capa serosa y muscular del intestino delgado

Las diferentes sustancias que alcanzan el intestino delgado ingresan a travs de las vellosidades intestinales que presentan un rea mayor para que se realice este proceso. El intestino tiene un excelente suplemento de flujo sanguneo, lo cual asegura que el xenobitico absorbido se remueva rpidamente, logrando de esta forma mantener el gradiente de concentracin (sink condition).

Transporte a travs de las clulas

23
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


En este parmetro hay que considerar la liposolubilidad y el tamao de partcula del xenobitico. Estos aspectos ya han sido revisados al inicio de la presente unidad.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


sodio se emplea como conservador de algunos alimentos crnicos y puede representar un riesgo para la presentacin de cncer de colon.
CH3 CH3

Inestabilidad qumica y metabolismo a nivel de membrana intestinal y/o por la presencia de microflora
H3C NH

OH OH H3C NH

La descomposicin de los xenobiticos es un factor importante en la absorcin gastrointestinal. Los compuestos lbiles en el medio cido, tales como penicilina, se hidrolizan en el estmago con un valor de pH de 1. Pptidos como la insulina, oxitocina, vasopresina, son destruidos por las enzimas proteolticas digestivas. En la membrana intestinal tambin se presentan enzimas que pueden transformar a los compuestos que presenten grupos funcionales susceptibles; ejemplos de este tipo de modificaciones lo presentan el isoproterenol (isoprenalina) y la
O OH O OH

OH

Isoproterenol

Propanolol

S O S O NH

NH CH2 CH3

cloropromacina. Adems de la descomposicin por enzimas del organismo humano, algunos compuestos pueden ser transformados por las enzimas secretadas por los microorganismos que viven como comensales en el intestino grueso, ejemplos de este tipo de xenobiticos son el
Ftalilsulfatiazol

O OH

NH

CH3

Alprenolol

succinilsulfatiazol y el ftalilsulfatiazol. En algunos casos los compuestos logran transformarse en entidades con mayor actividad biolgica, ejemplo de ello son presentados por el propranolol, alprenolol.
O OH O O S O NH S N

NH

Un ejemplo de esto es la toxicidad de los glucsidos cianognicos presentes en las semillas de manzanas, duraznos, cerezas y almendras en la forma de amigdalina, la cual es inestable en el medio cido estomacal y libera cianuro. Otro ejemplo importante, es la formacin por parte de la flora intestinal de nitrosaminas carcinognicas a partir de aminas y nitritos no carcinognicos[1, 2]. Cabe resaltar que algunos nitritos como el nitrito de

Succinilsulfatiazol

Figura 1-23. Sustancias que logran bioactivarse en el tracto gastrointestinal

24
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


b) Tracto respiratorio

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


la barrera entre el aire en los alvolos y la corriente sangunea es tan delgada como el grosor de dos capas de clulas.

Regiones bsicas del tracto respiratorio y zonas sensibles que pueden afectar los procesos de absorcin
Debido a esta circunstancia anatmica de los alvolos, la absorcin desde el pulmn es muy rpida y eficiente. Regiones bsicas: Regin nasofarngea Regin traqueobronquial Regin alveolar. Segn sea el tamao de partcula se irn reteniendo en la porcin del sistema respiratorio. Regin nasofaringe: Partculas de 5 m de dimetro o mayores Regin traqueobronquial: Partculas de 2 a 5 m de dimetro Regin alveolar: Partculas menores o iguales a 1 m.

Tamao de la partcula slida y lquida

Despus que las partculas han sido depositadas en la regin alveolar, pueden ser disueltas y absorbidas al torrente sanguneo. Si estas partculas no son fcilmente solubles, entonces son fagocitadas y transferidas directamente al sistema linftico donde pueden permanecer almacenadas por un periodo considerable de tiempo. La absorcin de partculas puede ser controlable por la solubilidad y caractersticas de transferencia de la propia membrana.

Gases y vapores
Figura 1-24. Estructuracin del sistema respiratorio

El grado de absorcin depende de la solubilidad del compuesto gaseoso. Compuestos muy solubles pueden ser absorbidos por un solo

Los pulmones presentan una gran rea de absorcin, alrededor de 50 a 100 m2 en el hombre; presentan una excelente irrigacin sangunea y

movimiento de respiracin. Para tales compuestos un incremento del flujo sanguneo no afecta su velocidad de absorcin; la nica forma de incrementarla es aumentar la ventilacin pulmonar.

25
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Para gases que son poco solubles en la sangre, presentan una capacidad limitada de absorcin. El torrente sanguneo se satura rpidamente y la nica forma de incrementar su paso a travs de las membranas, es incrementando el flujo sanguneo.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Distribucin

Procesos de distribucin
Despus de que los compuestos han sido absorbidos, pasan al

Tabla 1-20. Solubilidad de algunas sustancias en el plasma Insolubles Solubles Ligeramente solubles NOx NH3 X2 AsO3 HCl O3 CoCl SO2 PCl4 HF H2SO4

torrente sanguneo. La parte del sistema vascular en la cual el compuesto se encuentra depender del sitio de absorcin. La absorcin por la piel implicar, en primera instancia, a la sangre perifrica; por otro lado, si la absorcin fue por va pulmonar, entonces el compuesto estar en la corriente sangunea mayor. Para la mayora de compuestos absorbidos por va oral, la vena porta ser la responsable de acarrearlos hacia el hgado y

c) Piel
La piel est constantemente expuesta a sustancias extraas tales como gases, disolventes, soluciones, por lo que la absorcin de las mismas es potencialmente importante. Sin embargo, aunque la piel presenta una gran superficie de exposicin, su estructura es tal que presenta una barrera. Esto se debe a que la capa ms externa se forma por clulas muertas o clulas empaquetadas con queratina, con escaso riego sanguneo. Los txicos atraviesan por difusin pasiva presentando propiedades de liposolubilidad. La abrasin de la piel puede incrementar la absorcin porque se daa el estrato corneo. Un incremento en el grado de hidratacin favorece la absorcin.

de all al torrente sanguneo.

Una vez que los xenobiticos se encuentran en el torrente sanguneo, se distribuirn por todo el cuerpo y sern diluidos por la sangre. Los factores que influyen el proceso de distribucin de xenobiticos son: Propiedades fisicoqumicas del xenobitico Gradiente de concentracin del xenobitico entre los diferentes compartimentos del organismo Riego sanguneo que reciben los diferentes rganos y tejidos Unin del xenobitico a protenas sistmicas.

Es importante mencionar que la piel es el rgano metabolizante ms grande y ms accesible, expresa muchos citocromos P450 (al menos 13 CYP2) que tienen funciones crticas en el metabolismo de substratos endgenos y exgenos. La mayora de estos genes se expresan en la epidermis o queratinocitos. Este hecho se relaciona directamente con algunas sustancias txicas que pueden ser metabolizadas en la piel.3

Unin a protenas

Un indicador importante acerca de los procesos de distribucin con implicaciones toxicolgicas es la interaccin de xenobiticos con las protenas plasmticas y algunas macromolculas en otros rganos y tejidos. Las evaluaciones realizadas en los laboratorios para xenobiticos

26
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


en plasma, se basan en la cuantificacin, tanto del xenobitico libre como el enlazado. El conocimiento de la fraccin de xenobitico libre podra ser de mayor utilidad clnica para aquellos compuestos que estn fuertemente unidos a componentes del plasma, porque solamente el xenobitico libre es capaz de interaccionar en su sitio de accin para producir el efecto. La unin de xenobiticos a los componentes del plasma involucra primeramente a la albmina, 1-glicoprotena, u otras lipoprotenas. Aproximadamente 6.5% de la sangre es protena, de los cuales el 50% es albmina. Esta protena tiene un peso aproximado de 69000 D, y al pH de la sangre (7.4) presenta carga negativa. Los compuestos cidos se unen preferencialmente a esta macromolcula. Las sustancias bsicas se unen primariamente a la 1-glicoprotena, la cual tiene un peso molecular de 40000 D con 41% de carbohidratos, y est presente en el plasma a la concentracin de 0.08 g/10mL El tipo de interaccin molecular involucrada entre un xenobitico y las macromolculas del plasma, es de tipo in-in, puentes de hidrgeno, fuerzas de van der Waals y enlaces hidrofbicos. La presencia de grupos inicos en la estructura del xenobitico parece incrementar su afinidad hacia la albmina. Los compuestos en el plasma generalmente se presentan en equilibrio entre la forma enlazada y la forma libre.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Tabla 1-21. Unin de algunos xenobiticos a protenas plasmticas Unin a albmina Unin a lipoprotena Unin a 1-glicoprotena Ac. Acetilsaliclico Dipiridamol Amitriptilina (anticoagulante) (antidepresivo) Barbitricos Disopiramida Nortriptilina (anticolinrgico) (antidepresivo) Benzodiazepinas Etidocaina (anestsico local) Digitoxina Imipramina (antidisrtmico) (antidepresivo) Estreptomicina Lidocana Fenilbutazona Metadona (narctico) (antiinflamatorio) Fenitoina Peracina (psicotrpico) (antiepilptico) Penicilina Prazosin (simpatoltico) Probenecid (uricosrico) Propranolol Sulfonamidas Quinidina (anticolinrgico) Tolbutamida Verapamil (vasodilatador) Warfarina

El xenobitico unido a protena por su gran tamao est limitado a atravesar las membranas biolgicas, por lo que su distribucin en los tejidos desde la sangre se ver reducida.

Uno de los aspectos a considerar en el campo de la toxicologa es el que se presenta cuando ciertos compuestos llegan a desplazar a otras sustancias que se encuentran unidas a protenas. Este desplazamiento puede ocasionar: Aumento de la eficacia teraputica del frmaco desplazado Incremento de la toxicidad del xenobitico desplazado Redistribucin en varias partes del cuerpo del xenobitico desplazado Potenciacin de la actividad biolgica del xenobitico desplazado

En la siguiente tabla se presentan algunos xenobiticos que se unen significativamente a protenas plasmticas.

27
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Factores que influyen en los efectos txicos
Al estudiar el efecto txico de las diferentes sustancias, es

1.8 Toxodinmica
Las respuestas toxicolgicas provocadas por sustancias qumicas en los seres vivos son iniciadas por interacciones moleculares de las mismas con las clulas, los tejidos u otros componentes del organismo. Hay muchas formas por las cuales un agente qumico puede interferir con la bioqumica y fisiologa normal de las clulas. En este captulo se van a indicar cules son los sitios generales de accin txica de los compuestos y que ilustran al mismo tiempo, sus diferentes mecanismos de accin. Un aspecto importante a considerar en el campo de la toxicologa es que la manifestacin de un efecto biolgico por una sustancia, no es un evento simple. Algunas veces no basta que la sustancia alcance su sitio blanco para desencadenar el trastorno clnico, ya que podran presentarse diferentes alternativas que se indican en la siguiente figura. -

importante considerar de manera integral, varios factores que van a jugar un papel determinante y constituyen elementos necesarios para su evaluacin. Estos factores son: Las caractersticas de exposicin (aguda, crnica, ruta de ingreso, etc.) Las caractersticas de exposicin (aguda, crnica, ruta de ingreso, etc.) La dosis del compuesto (DL50, dosis fraccionada, etc.) La estructura molecular y propiedades fisicoqumicas e la sustancia (Log P, solubilidad, pKa) Tipo de efecto txico producido. Caractersticas genticas del organismo expuesto. (Figura 25)

etapa de exposicin

etapa toxocintica

protxico entrada del xenobiotico al organismo

reaccin primaria cambios bioqumicos (interaccin covalente o y fisiolgicos disociable con macromo- (cambios secundarios en lculas, membranas, etc.) composicin o morfologia) B1 MB1 MB2 MB3 X,Y, Z a, b, c amplificacin A, B, C biosntesis etapa toxodinmica

consecuencias para el organismo

Exposicin a haba (Vicia faba)

no txico no txico

Deficiencia congnita en Glucosa 6-fosfato deshidrogenasa

Favismo; hemlisis, anemia, hemoglobinemia*, hemoglobinuria

txico metabolismo excrecin

B2 B3

toxicidad del cambio (signos clnicos, sntobiolgico mas o sndromes)

*Hemoglobinemia: presencia de hemoglobina en plasma. Hemoglobinuria: presencia de hemoglobina en orina

Figura 1-26. Ejemplo de la importancia de las caractersticas genticas del organismo expuesto para presentar efectos txicos.

A, B, C, X, Y, Z, a, b, c: representan cambios indefinidos y no relacionados, los cuales pueden o no tener consecuencias. B1, B2, B3, MB1, MB2, MB3 son sitios diana (blancos) antes y despus de la modificacin por el agente txico. Tomado y adaptado de Trends Pharmacol. Sci. 1981; 2:228-231.

Tipo de efecto txico producido

Figura 1-25. Aspectos toxodinmicos integrados con algunos componentes toxocinticos

El tipo de efecto deseable o indeseable que una sustancia pueda presentar, en ocasiones se califican segn los intereses de quien lo est

28
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


evaluando. Ejemplo de esto, se presenta a continuacin con la atropina y la reserpina.
Efecto Deseado Indeseado Tabla 1-22. Efectos de la atropina Oftalmlogo Internista Midriasis Espasmoltico Espasmoltico Midriasis Tabla 1-23. Efectos de la reserpina Cardilogo Psiquiatra Hipotensin Sedacin Sedacin Hipotensin

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Tabla 1-25. Ejemplos de reacciones adversas menores de algunos xenobiticos Acidosis intestinal Anorexia Debilidad y fatiga Calambres Diarrea suave Vrtigo Desvanecimientos Euforia Sueo Fiebre (grado bajo) Hipo Dolor de cabeza Inflamacin de la lengua Nuseas, vmito Parestesia suave (glositis) Faringitis Infamacin gstrica Prurito anal Irritacin a la piel (ligera) Estreimiento Vaginitis

Efecto Deseado Indeseado

Para reportar reacciones adversas: http://www.cofepris.gob.mx/wb/cfp/farmacovigilancia_canal http://www.salud.gob.mx/unidades/cofepris/pyp/farmaco/Guia_estu dios_clinicos_1_1_.pdf

Sin embargo algunos efectos son verdaderamente indeseables cuando se presentan. Estos se denominan efectos adversos y se dividen en mayores o menores, segn logren poner en peligro la existencia del individuo.
Tabla 1-24. Ejemplos de reacciones adversas mayores que presentan algunos xenobiticos Colapso vascular perifrico Choque anafilctico Cardiopatas Atrofia de rganos y tejidos Coma Ulceraciones Cambios en la glucosa sangunea Cncer Pancreatitis (severos) Cambios en la presin arterial Convulsiones Teratognesis (severos) Exacerbaciones (lcera pptica, Hemorragias Mutaciones infecciones) Discrasias sanguneas (anemia Disfuncin renal Encelopata aplsica) Aumento severo de la libido Disfuncin heptica Bromismo Actividad psicomotora Depresin descontrolada respiratoria Reacciones en la piel (severa) Dao ocular irreversible Fotosensibilidad (severa) Inmunosupresin Reduccin severa de la libido Depresin tiroidea Depresin mental severa Toxicologa perinatal

Desde el punto de vista de la naturaleza de los efectos biolgicos estos se pueden clasificar de la siguiente manera
Tabla 1-26. Tipos de reacciones segn la naturaleza del efecto biolgico Reaccin Definicin Tipo A Pueden ser predichas de sus acciones farmacolgicas conocidas; frecuentemente se identifican como una exageracin del efecto farmacolgico. Son dependientes de la dosis administrada. Algunos ejemplos son: a) por sobredosis: hemorragia por anticoagulantes b) por efecto colateral: somnolencia por antihistamnicos de primera generacin; hemorragia por anti-inflamatorios no esteroidales. c) por efectos secundarios: hopopotasemia (baja concentracin del catin potasio) por algunos diurticos. Tipo B Tipo C No son predecibles del efecto farmacolgico. Muchas personas no presentas estas reacciones a ninguna dosis administrada. Reacciones que pueden ser predichas o racionalizadas en funcin de la estructura del compuesto administrado o de sus metabolitos.

Williams D.P.; Naisbitt, D.J. Toxicophores: Groups and metabolic routes associated with increased safety risk. Current Opinion in Drug Discovery and Development. 2002, 5, 104115

29
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Para fines de aplicacin regulatoria, las definiciones y

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Receptor para hidrocarburos aromticos policclios (receptor Ah) Receptores hormonales (dioxinas como el TCDD, goiestrgenos) Interferencia con las funciones de las membranas Membranas excitables: Flujo inico (saxitoxina, tetrodoxina, DDT) Fluidez de la membrana (disolventes orgnicos, etanol, anestsicos locales) Membranas en organelos Membranas lisosomales (tetracloruro de carbono) Membranas mitocondriales (organoestaos) Perturbacin en la homeostasis del calcio Alteraciones del citoesqueleto Activacin de fosfolipasas Activacin de proteasas Activacin de endonucleasas Toxicidad por prdida de clulas selectivas Desbalance hormonal y fisiolgico (prdida de neuronas dopaminrgicas; insuficiencia tiroidea) Alteraciones congnitas Alteraciones genticas no letales en clulas somticas Cncer Alteraciones congnitas.

caractersticas de las reacciones adversas se establecen en la NOM 220SSA1-2002.

Mecanismos de accin txica de los compuestos qumicos


Los mecanismos por los cuales algunos compuestos provocan sus efectos txicos se enlistan en la tabla 1-27. Esta lista se incrementar a medida que las investigaciones arrojen nuevos resultados.

A lo largo de todo el curso se irn presentando la mayora de los mecanismos mencionados con los ejemplos especficos de las sustancias que los utilizan y las consecuencias toxicolgicas que desencadenan. En el presente captulo slo mencionaremos a dos de ellos, la interferencia con la produccin de energa celular y la unin a biomolculas.

Interaccin normal
Tabla 1-27. Algunos mecanismos generales de la accin txica Unin a macromolculas Actividad enzimtica (arsnico, mercurio, organofosfatos, fluoroacetato de sodio) Protenas de transporte (monxido de carbono, nitritos) Interferencia con las funciones del sistema inmune. Peroxidacin de lpidos (tetracloruro de carbono, paraquat, ozono) Generacin de radicales libres Formacin de lpidos hidroperxidos. Estrs oxidante Disminucin de glutatin (acetaminofn) Oxidacin de grupos tioles en protenas. cidos nucleicos: ADN y ARN (agentes alquilantes, agentes intercalantes) Interferencia con la produccin de energa celular Inhibicin y desacoplamiento de la fosforilacin oxidativa (nitrofenoles) Inhibicin del transporte de electrones (rotenona, cianuro) Inhibicin del metabolismo de carbohidratos (fluoroacetato) Interferencia con las interacciones normales ligando-receptor Neuroreceptores y neurotransmisores (por ejemplo: benzodiazepinas, barbitricos, atropina, estricnina, LSD, organofosfatos, antihistaminas)
receptor
receptor

Interferencia por el xenobiotico


receptor receptor

ligando

xenobiotico

Figura 1-27. Interferencia con las funciones normales ligando-receptor

30
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Interferencia con la produccin de energa celular

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


HO NO 2 NC N NC NH

Inhibicin y desacoplamiento de la fosforilacin oxidativa La fosforilacin oxidativa es un proceso metablico que utiliza
NO 2 OCF 3

energa liberada por la oxidacin de nutrientes para producir ATP.

2,4-dinitrofenol

carbonilcianuro-p-trifluorometoxihidrazona (FCCP)
{[4-(trifluoromethoxi)fenil]hidrazono}malononitrilo

Inhibidores de la fosforilacin oxidativa (inhiben a la ATP sintetasa) Oligomicina (antibitico) Diciclohexilcarbodiimida (DCC)
O O O O Cl Cl Cl OH OH Cl OH Cl

NADP+
-2e- , 2H+ transporte de

ADP
dicumarol

pentaclorofenol

ATP sintetasa

Figura 1-29. Xenobiticos que provocan desacoplamiento de la fosforilacin oxidativa

electrones NADPH +H+


(proceso exotrmico)

ATP (proceso endotrmico)

Los agentes desacopladores ocasionan un corto circuito al provocar una corriente de protones a travs de las membranas mitocondriales, las cuales son impermeables de manera normal. Estos eventos desencadenan un incremento en el consumo de oxgeno y en la produccin de calor. En seres humanos, se presentan hipertermia, e incluye sntomas de respiracin rpida, nusea y coma. La muerte ocurre de manera rpida por hipertermia fatal.

Figura 1-28. Desacopladores de la fosforilacin oxidativa

Los agentes desacopladores permiten el transporte de electrones pero previenen la fosforilacin de ADP para convertirse en ATP. El primer agente desacoplante fue el herbicida 2,4-dinitrofenol. Muchos agentes desacopladores son cidos dbiles, lipoflicos y generalmente tienen un anillo aromtico. Entre los agentes desacoplantes conocidos se encuentran fenoles halogenados, nitrofenoles, dicumarinas, carbonilcianidas,

Inhibicin del transporte de electrones

fenilhidrazonas, salicilanilidas, atebrina (antimalrico) y arsenatos.

El in cianuro es uno de los agentes venenosos de ms rpida accin. Es fcilmente absorbido por todas las rutas, incluyendo la piel, las mucosas, y por inhalacin. La ingestin de pequeas cantidades de in cianuro o del gas cianuro de hidrgeno (HCN) provoca la muerte en

31
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


cuestin de minutos u horas, dependiendo de la ruta de exposicin. El qumico Karl Wilhelm Scheele, descubridor del HCN, muri al aspirar los vapores de este compuesto. El in cianuro forma parte de algunos venenos para ratas, polvos pulidores para plata y otros metales, soluciones fotogrficas, y productos para fumigacin. El cianuro tambin est presente en las semillas de manzanas, duraznos, cerezas y almendras en la forma de amigdalina, un glucsido cianognico o en frijoles y forrajes (sorgo).

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


OH H O H OH H HO HO H H H O H OH O CN NC Fe NC CN CN O NO 2 CN

H HO HO H

-2 2Na+

amigdalina

nitroprusiato de sodio

La amigdalina, un ingrediente del Laetrile (antineoplsico), est formada por glucosa, benzaldehdo y cianuro. El in cianuro puede ser liberado del glucsido por la accin de la -glucosidasa (emulsina), presente en la pulpa de las semillas trituradas y en la microflora intestinal de los mamferos. Por esta razn, la amigdalina puede ser ms txica por va oral que por va intravenosa.
Figura 1-30. Amigdalina y nitroprusiato de sodio

El cianuro ejerce su efecto txico al bloquear el transporte de electrones en la secuencia de citrocromos mitocondriales a-a3 como se muestra en la siguiente figura. Estos citocromos son referidos como citocromo oxidasa. El cianuro forma un complejo de coordinacin con el grupo hem del citocromo a3, con esto previene la unin del grupo hem con el oxgeno. Como resultado de la inhibicin por el cianuro, la transferencia de electrones del citocromo a3 hacia el oxgeno molecular es bloqueada y la clula muere.

Otra fuente potencial de in cianuro es el frmaco nitroprusiato de sodio (nitroferricianuro de sodio), el cual es utilizado en el tratamiento de la hipertensin. Sobredosis de este compuesto han provocado problemas de intoxicacin por cianuro.

Cit c+3

Entre los sntomas por intoxicacin por cianuro se presentan una rpida salivacin, dolor de cabeza, vrtigo y dificultad respiratoria. Tpicamente, el cianuro tiene un sabor amargo, adems de un olor a almendras. Se ha estimado que entre un 20% a 40% de la poblacin es genticamente incapaz de detectar el olor a cianuro.
Cit c+2

Cit a+2

Cit a3+3

H2O

Cit a +3 HCN

Cit a3+2

O2

HbO2

Figura 1-31. Mecanismo de accin del cianuro

El tratamiento para el envenenamiento con cianuros est dividido en tres etapas. Primero se administra nitrito de amilo (gas) por va

32
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


respiratoria, seguida por administracin intravenosa de nitrito de sodio. Estas sustancias oxidan al Fe(II) del grupo hem en la hemoglobina para generar la metahemoglobina. El in frrico de la meta-hemoglobina se combina con el cianuro del plasma, provocando una disociacin del cianuro que se encuentra unido en el citocromo a3. Despus de la administracin de nitritos, se administra tiosulfato de sodio va intravenosa; esta sustancia es un sustrato para la enzima rodanasa (tiosulfato sulfotransferasa) que cataliza la conversin del cianuro a tiocianato, el cual es excretado fcilmente.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


prximos captulos ilustraremos esta forma de accin con varios ejemplos, en el presente slo citaremos dos casos, la interferencia sobre el sistema inmune y la interaccin de una sustancia endgena con macromolculas biolgica.

C H 3 N H C 3 O Nitrito de amilo O
NaNO2

Cit a3
CN-1

NO2-1

CN-1

HbO2
S2O3-2

MetHb

CNMetHb

IV

+ CN-1 rodanasa

SCN-1

SO3-2

Figura 1-33. Unin reversible e irreversible a biomolculas

Figura 1-32. Etapas en el tratamiento contra el envenenamiento con cianuros

Otras sustancias que presentan un mecanismo de accin semejante al cianuro son las azidas y el sulfuro de hidrgeno (H2S).

Unin a biomolculas

Otro de los mecanismos de accin txica se presenta cuando los compuestos se unen a alguna macromolcula que desempee alguna funcin biolgica importante (enzimas, ADN, ARN, lpidos). Aunque en los
Figura 1-34. Molcula de la hemoglobina (Imagen tomada del Protein Data Bank 1GZX)

33
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Interferencia sobre el sistema inmune

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


La reaccin de Tipo I (anafilaxia) es inmediata, y esta mediada por la IgE (y en menor extensin por IgG4 en seres humanos) unida, va sus

El sistema inmune puede ser afectado por una amplia variedad de agentes txicos. Cuatro tipos de respuestas se pueden ocasionar: Hipersensibilidad. Respuesta incrementada a un xenobitico especfico con el consecuente dao tisular. Inmunosupresin. Efecto directo sobre rganos y clulas del sistema inmune que provoca una respuesta disminuida. Inmunoestimulacin. Incremento en la actividad de rganos o clulas del sistema inmune que puede provocar una respuesta inmunolgica incrementada. Autoinmunidad

receptores Fc, a basfilos o a membranas de clulas cebadas. La unin de antgenos a estas inmunoglobulinas, libera histamina, prostaglandinas, leucotrieneos y quimioatractores de neutrfilos y eosinfilos. Estos mediadores causan vasodilatacin, incrementan la permeabilidad capilar, bronco-

constriccin e inflamacin. La urticaria, el asma y la anafilaxia provocadas por frmacos se presentan por esta alteracin inmunolgica. Un ejemplo lo constituye la reaccin anafilctica a penicilina.

Tipo I

Tipo II

Tipo III

Tipo IV

Macromolcula (protena)
xenobiotico xenobiotico (hapteno)

X
componentes

respuesta inmunolgica

asma, rinitis alrgica, anafilaxia sistmica

discrasia sangunea por xenobiotico

enfermedad del suero, reaccin de Arthur

dermatitis por contacto, reaccin a la tuberculina

dermatitis por contacto

clula del sistema inmune

Figura 1-36. Reacciones de hipersensibilidad

Figura 1-35. Efectos de los xenobiticos sobre el sistema inmune

Las reacciones de hipersensibilidad se pueden provocar por los cuatro mecanismos mostrados en la figura 1-35.

34
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Tabla 1-28. Xenobiticos que causan hipersensibilidad Xenobiotico Tipo de reaccin aditivos de alimentos (colorantes azo, BHT, BHA) Tipo I anhdridos ftlicos Tipo I antimicrobianos (parabenos) Tipo IV berilio Tipo I, IV compuestos de platino Tipo I. cromo Tipo IV formaldehdo Tipo IV mercurio, oro Tipo II, III, IV nquel Tipo I, IV penicilina, quinina, tetraciclina Tipo I, II, III, IV resinas y plastizantes (tolueno, diisocianato) Tipo I, IV.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Finalmente, la reaccin de Tipo IV (hipersensibilidad mediada por clulas) a diferencia de las anteriores, es causada por la interaccin de antgenos con linfocitos T y no con anticuerpos. Los linfocitos T reconocen el antgeno y entonces reclutan otras clulas para provocar una respuesta inflamatoria al antgeno. La dermatitis por contacto al nquel es causada por este tipo de respuesta.

Para que un xenobitico provoque una respuesta inmune necesita ser metabolizado para formar un conjugado con una macromolcula (acarreador) que le dar sus caractersticas antignicas. Esto nos lleva a tomar en cuenta dos consideraciones que involucran la localizacin de dicha biotransformacin y las propiedades qumicas de los metabolitos generados. Si el xenobitico es predominantemente activado dentro de un rgano especfico, y sus metabolitos son altamente reactivos y de vida corta, la formacin del conjugado, y subsecuentes reacciones alrgicas, se presentaran en lugares bien localizados; ejemplo la hepatitis provocada por el halotano. En contraste, si el xenobitico es metabolizado en varios rganos, o es transformado en metabolitos con valores de vida media suficientes para trasladarse a sitios distantes, entonces se presentarn efectos mltiples en varios rganos y tejidos, por ejemplo, aquellas manifestadas por las respuestas de Tipo I y Tipo III.

La reaccin de Tipo II (citoltica) es iniciada cuando anticuerpos tales como la IgG, IgM, IgA, se unen a antgenos tisulares especficos. Ciertas clulas tienen receptores Fc, tales como las clulas K o ciertos macrfagos, que se unen a la porcin Fc de los anticuerpos enlazados y en consecuencia son activados y lisan las clulas blanco. Este proceso es conocido bajo el nombre de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (DAC). De manera similar el sistema complemento es activado cuando se enlaza de forma cruzada a la porcin Fc de dos molculas de IgG, o una molcula de IgM, cada una de las cuales est unida a la superficie celular. Varios frmacos, incluyendo las penicilinas, sulfonamidas y quinina pueden estimular la formacin de anticuerpos, y producir la lisis de glbulos rojos.

La reaccin Tipo III (precipitina txica) involucra la unin de anticuerpos con antgenos multivalentes. Ellos se forman en donde el antgeno se forma y se libera de la superficie celular. Esto provoca la deposicin de complejos anticuerpos / antgenos en la piel y membranas. La reaccin inmune a estos complejos puede causar inflamacin de la piel, articulaciones, riones, lupus eritematoso, reaccin de Arthus (Nicholas Maurice Arthus). Algunos de los xenobiticos reportados que manifiestan toxicidad sobre el sistema inmune ya sea por alteraciones humorales o celulares se presentan en la siguiente tabla.

35
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Tabla 1-29. Xenobiticos que presentan inmunidad humoral y/o celular Xenobitico Tox I Hm I C Xenobitico Tox I Hm acetaminofn T + alprenolol D salicilatos A, As, U + tolbutamida HA + relajantes A + alopurinol D, U musculares eritromicina H + cefamandol T + difenilhidantona H, SS + halotano H + clorpropamida HA + hidralazina DLE + metildopa HA, N, H + clanidanol HA + quinina, T + probenecid HA + quinidina penicilinas As, D, U, + + penicilamina N + A etiniloestradiol Th + procanamida DLE + ciclofosfamida A, U + amoxicilina HA + captopril U, D, Ne + +

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


El benceno causa linfocitopenia pero tambin afecta otros
IC + +

componentes de la mdula sea. El resultado funcional es una deficiencia en la inmunidad mediada por clulas. Los trabajadores expuestos al benceno presentan una baja inmunidad humoral, que se ha evidenciado por una disminucin del complemento y concentraciones de inmunoglobulinas.

En los seres humanos, el efecto de la inmunosupresin puede provocar un incremento de las infecciones bacteriales, virales y parasitarias. Por ejemplo las personas expuestas a bifenilos policlorados son ms susceptibles a sufrir infecciones respiratorias, mientras que los nios expuestos al plomo padecen de diarrea bacteriana.

Tox: toxicidad; I Hm: Inmunidad humoral; I C: inmunidad celular; A: anafilaxia; As: asma; D: dermatitis; H: Hepatitis; H.A.: anemia hemoltica; Ne: nefritis; N: neutropenia; T: trombocitopenia; Th: Trombosis; U: urticaria; DLE: Lupus eritematoso inducido por frmacos.
O

electrfilo + nuclefilo
R
1

enlace covalente
R O
1

La inmunosupresin se puede ocasionar por: a) Interferencia con el crecimiento celular o con su proliferacin, provocando una baja de la capacidad de dicho sistema b) c) Destruir directamente los componentes del sistema inmune. Distorsionar los mecanismos de reconocimiento por lo que reducen la respuesta inmune
quinona
O R

HS HN

S HN

O
2

O O R
2

cistena en una protena

aducto de cistena y quinona

Figura 1-37. Unin covalente Tabla 1-30. Sustancias que provocan inmunosupresin Xenobitico Xenobitico Antitumorales (6-mercaptopurina, Benceno azatioprina, ciclofosfamida, ciclosporina) Hidrocarburos aromticos policclicos Insecticidas (organoclorados, organofos-forados, carbamatos) Drogas (etanol, cannabinoides y Metales (plomo, mercurio, nquel, opiceos) cadmio) Organometlicos (metilmercurio)

36
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Tabla 1-31. Algunos nuclefilos y electrfilos Nuclefilos suave Carbn en dobles Azufre en tioles (glutatin enlaces polarizados y tiol en residuos de (quinonas, cetonas cistena). a,b-insaturadas) Electrfilo Carbn en epxidos, haluros de arilo. Carbocatin benclico Carbocatin alqulico duro Azufre en metionina Nitrgeno en amino primarios y secundarios de protenas. Nitrgeno en amino de purinas Oxgeno de purinas y pirimidinas Oxgeno en el fosfato de cidos nuclicos

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.

Figura 1-38. Concentracin letal 50 y viabilidad celular

Curtis D. Klassen, et al. Casarett and Doulls Toxicology. 6th ed. Mac Graw Hill, New York. 2001.p. 45

El trmino CL50 conceptualmente es similar al de la DL50. Sin embargo es importante distinguir el mbito de sus aplicaciones.

Los biomarcadores de citotoxicidad


El trmino de citotoxicidad se utiliza para denotar que un xenobitico ha ocasionado dao letal a una clula sin indicar el mecanismo de accin implicado. El parmetro que se utiliza para denotar la citotoxicidad de un xenobitico es la CL50 (concentracin letal cincuenta que representa la muerte del 50% de clulas expuestas a un compuesto en un rango de concentraciones. Grficamente este trmino se representa de la siguiente forma.

Tabla 1-32. la CL50 y la DL50

Parmetro CL50* DL50

Unidad mM, M, nM mg/Kg

Evaluacin In vitro In vivo

CL50: Concentracin letal media; DL50: Dosis letal media; *En algunos textos se puede indicar el mismo concepto como CI 50: Concentracin inhibitoria media, o CT50: Concentracin txica media.

El valor de la CL50 de compuestos se puede calcular mediante algunos software, ejemplo Master Plex (http://www.miraibio.com/elisacurve-fit) estructurado para manejar los datos arrojados por lectores de ELISA. Tambin existe un software disponible de la EPA: http://www.epa.gov/ordntrnt/ORD/NRMRL/std/qsar/qsar.html

Para el manejo de datos y el anlisis estadstico para determinar la CL50 se puede consultar:

37
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


http://www.biology.ed.ac.uk/archive/jdeacon/statistics/tress4.html#Transfor mationofdata

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Tabla 1-34.. Ejemplo de citotoxicidad en la lnea celular HeLa Compuesto GI50 (M) TGI (M) CL50 (M) Etopsido 3.56 40.18 87.54 Wellington K. W. et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry 2012, 20, 44724481.

Otros parmetros a evaluar in vitro sobre la exposicin de lneas celulares a xenobioticos en un determinado tiempo (ejemplo 24 h) son: GI (growth inhibitiion): Inhibicin del crecimiento; TGI: inhibicin total del crecimiento; CL50: concentracin letal.
Tabla 1-33. Evaluacin de los parmetros GI, TGI y CL50 en lnea celular Cantidad de clulas Cantidad de clulas Parmetro, inicial despus de 24 h 2 000 000 4 000 000 Control negativo (sin xenobiotico) 2 000 000 3 000 000 GI50 2 000 000 2 000 000 TGI 2 000 000 1000 000 CL50
http://www.cancer.gov/cancertopics/pdq/cam/cancell/HealthProfessional/page8

Para determinar la viabilidad celular se pueden utilizar diferentes indicadores para tal efecto.
Tabla 1-35. Sustancias usadas como biomarcadores de citotoxicidad Indicador Caracterstica Las sales de tetrazolio (MTT, amarillo) son convertidas a cristales de formazan ( prpura insolubles) por las MTT enzimas deshidrogenasas mitocondriales de las clulas vivas. Su comportamiento es similar al MTT solamente que su sal de tetrazolium formada es soluble en agua El rojo neutro es captado por las clulas (especficamente por los lisosomas y endosomas). Slo la clulas viables son capaces de retener el colorante. El colorante no es retenido por las clulas viables. En condiciones cidas la sulforodamina se une a los aminocidos bsicos de las protenas intracelulares de las clulas viables. En condiciones bsicas se disocia y se puede evaluar en el medio de cultivo por absorbencia a 564 nm.. Determina las protenas totales al ingresar a la clula La resazurina (azul no fluorescente) es reducida a resorufina (rojo fluorescente) por deshidrogenasas mitocondriales de la clulas viables. La resorufina se difunde al medio de cultivo donde es cuantificada.

XTT

La representacin grfica de los parmetros antes mencionados se presenta a continuacin.


Rojo neutro Azul de tripano

Sulforodamina

Azul Kenacida Resazurina (azul de alamar)

Putman K.P. et al. Toxicology in Vitro 2002, 16, 599-607.

Figura 1-39. GI, TGI y CL50

38
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Tabla 1-36. CL50 de xenobiticos en linfocitos de diferentes especies log CL50 DE* (CL50, M) Compuesto Humano Perro Rata Ratn 52.65 0.21 3.36 0.22 Fluorouracilo (>10000) (460) (2300) (>10000) Melfalan 2.28 0.11 2.14 0.11 2.29 0.28 1.92 0.18 (190) (140) (200) (84) Cisplatino 1.42 0.08 0.98 0.16 1.27 0.07 (26) (9.5) (>100) (18) Taxol 0.51 0.07 0.41 0.12 0.47 0.14 0.19 0.08 3.8 2.6 (2.9) (1.5) Prednisolona (>1000) (>1000) (>1000) (>1000)
*DE: desviacin estndar Hassan S.B. et al. Toxicology in Vitro 2007, 21, 1174-1181.

Figura 1-40. Indicadores de viabilidad celular

Otro de los mtodos para evaluar la citotoxicidad de xenobiticos es mediante el uso de lneas celulares. En este mbito se presentan dos grupos generales: las lneas primarias derivadas de clulas normales (ej. fibroblastos- clula del tejido conjuntivo) y las lneas secundarias obtenidas de tumores malignos (cancerosos). A continuacin se presenta algunas de las lneas comercialmente disponibles de la coleccin europea. Tambin existe la coleccin ATTC.
Tabla 1-37. The European Collection of Cell Cultures (ECACC) Attached Cell Lines Name Species and tissue of origin Morphology MRC-5 (Prod. No. Human lung Fibroblast 84101801) HELA (Prod. No. 93021013) Human cervix Epithelial VERO (Prod. No. 84113001) African Green Monkey Epithelial Kidney NIH 3T3 (Prod. No. Mouse embryo Fibroblast 93061524) L929 (Prod. No. 85011425) Mouse connective tissue Fibroblast CHO (Prod. No. 85050302) Chinese Hamster Ovary Fibroblast BHK-21 (Prod. No. Syrian Hamster Kidney Fibroblast 85011433) HEK 293 (Prod. No. Human Kidney Epithelial 85120602)

Figura 1-41. Ensayo MTT

Una de las clulas usadas para detectar la citotoxicidad de un xenobitico es el linfocito (clula sangunea mononucleada). Al respecto, se presenta a continuacin los datos comparativos de citotoxicidad en linfocitos de humano, perro, rata y ratn para ilustrarnos las diferentes

sensibilidades de esta evaluacin.

39
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


HEPG2 (Prod. No. 85011430) BAE-1 (Prod. No. 88031149) Suspension Cell Lines Name NSO (Prod. No. 85110503) U937 (Prod. No. 85011440) Namalwa (Prod. No. 87060801) HL60 (Prod. No. 98070106) WEHI 231 (Prod. No. 85022107) YAC 1 (Prod. No. 86022801) U 266B1 (Prod. No. 85051003) SH-SY5Y (Prod. No. 94030304) Human Liver Bovine aorta Epithelial Endothelial

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.

Species and tissue of origin Mouse myeloma Human Hystiocytic Lymphoma Human Lymphoma Human Leukaemia Mouse B-cell Lymphoma Mouse Lymphoma Human Myeloma Human neuroblastoma

Morphology Lymphoblastoidlike Lymphoblastoid Lymphoblastoid Lymphoblastoidlike Lymphoblastoid Lymphoblastoid Lymphoblastoid Neuroblast Tabla 1-38. Ejemplos de aplicacin de la CL50 medido con MTT Lnea celular Compuesto Tiempo, h CI50, M K562 Quinifurilo 24 2 0.90 (leucemia-humana) 12 12 2.20 Nitracrina 24 0.12 0.07 6 2.2 0.06 P388 Quinifurilo 24 1.1 0.20 (leucemia-ratn) Nitacrina 24 0.16 0.06 6 0.5 0.13 NIH3T3 Quinifurilo 24 1.2 0.17 (fibroblasto-ratn) 12 11 2.10 Nitacrina 24 0.13 0.04 12 1.4 0.20
Cada valor de CL50 representa (M DE) de dos a cinco series de experimentos completamente independientes con cinco a 6 repeticiones para cada serie. Marcelo M. Rosas, et al. Pharmacological Research 2003, 48, 369375

Figura 1-42. Evaluacin de la actividad citotxica

Estas determinaciones tienen diferentes puntos finales end point. En otros mtodos se utiliza la presencia de protenas totales o de alguna enzima intracelular como biomarcador; ejemplo la lactato

40
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


deshidrogenasa (LDH). La presencia de las protenas o de la enzima indica que las clulas se rompieron.

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.

cido lctico NAD formazn (rojo) 490 nm


+

LDH

cido pirvico NADPH + H+ 30 a 60 min tetrazolium INT (amarillo)

diaforasa

Figura 1-43. Reaccin para evaluar la actividad LDH

Algunas ventajas de este mtodo son: no utiliza material radiactivo operativamente sencillo de llevar a acabo el tiempo de reaccin es corto (30-60 min) no requiere centrifugacin la absorbencia correlaciona con las clulas lisadas datos reproducibles

En la tabla 1-39 se presentan algunos datos de la citotoxicidad del CdCl2 evaluada por distintos mtodos en dos diferentes lneas celulares.

Figura 1-44. Determinacin de lactato deshidrogenada como biomarcador de citotoxicidad

41
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


Tabla 1-39. CL50 de lneas hepticas expuestas a CdCl2 3h 5h 8h 24 h HTC Rojo neutro MTT protena LDH HepG2 Rojo neutro MTT protena LDH
300 M 7.88 500 M 1.96 100 M 0.84 100 M 8.39 80 M 1.90 40 M 3.53 300 M 1.01 200 M 2.25 80 M 1.26 40 M 6.53 20 M 3.31 100 M 14.47 200 M 2.25 80 M 16.11 8 M 0.21 15 M 5.02 10 M 0.02 5 M 5.35

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


Nivel bioqumico Activacin gnica Requerimiento de sntesis protica Liberacin de enzimas lisosomales Activacion de enzimas no lisosomales Activacion de caspasas Cambio en el citoesqueleto Niveles de ATP requeridos

Presente Presente Ausente Presente Presente Presente Alto

Ausente Ausente Presente Presente Ausente Presente Bajo

M ESM (error estndar medio) (n = 3). Anlisis con t-student. Fotakis G. Toxicology Letters 2006, 160, 171177.

En trminos generales, la muerte de una clula se puede presentar ocasionada por apoptosis o por necrosis
Tabla 1-40. Caractersticas de apoptosis y necrosis Caractersticas Apoptosis Necrosis Estimulo Fisiolgico o patolgico Patolgico Ocurrencia Clulas nicas Grupo de clulas Reversibilidad Limitada Limitada Nivel celular Forma de la clula Adhesin entre clulas Fagocitsis por otras clulas Inflamacin exudativa Nivel de organlos Menbrana Citoplasma Permeabilidad mitocondrial Ncleo Figura 1-45. Cambios celulares durante la apoptosis

Contraccin y formacin de cuerpos apoptticos Alterada desde el principio Presente Ausente

Abultamiento con posterior desintegracin Alterada al final del evento Ausente Presente

Otro ejemplo lo constituye la muerte ocasionada por aminotriptilina, un antidepresivo tricclico a clulas de fibroblastos.

Presenta forma de ampollas Abultado en las ltimas etapas Presente Cariorrexis

Ampollas previas a la lsis Abultados al inicio del evento Presente Carilisis

42
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.


3. Paul Baldrick. Toxicokinetics in preclinical evaluation. Drug Discovery Today 2003, 8, 127-133. 4. Mckter H. What is Toxicology and how does toxicity occur? Best Practice and Research Clinical Anaesthesiology 2003, 17, 5-27. 5. Stuart Creton, Richard Billington, Will Davies, Matthew P. Dent, Gabrielle M. Hawksworth, Simon Parry, Kim Z. Travis. Application of toxicokinetics to improve chemical risk assessment: Implications for the use of animals. Regulatory Toxicology and Pharmacology 2009, 55, 291299. 6. Stuart Creton, Shakil A. Saghir, Michael J. Bartels, Richard Billington, James S. Bus, Will Davies, Matthew P. Dent, Gabrielle M. Hawksworth, Simon Parry, Kim Z. Travis. Use of toxicokinetics to support chemical evaluation: Informing high dose selection and study interpretation. Regulatory Toxicology and Pharmacology 2012,62, 241247. 7. David J. Spurgeon, Oliver A.H. Jones , Jean-Lou C.M. Dorne, Claus Svendsen, Suresh Swain, Stephen R. Strzenbaum. Systems toxicology approaches for understanding the joint effects of environmental chemical mixtures. Science of the Total Environment 2010, 408, 37253734. 8. Kuei-Meng Wu, Hanan Ghantous, Debra B. Birnkrant Current regulatory

Determinacin de apoptosis en fibroblastos despus de una exposicin a amitriptilina por -caspase 3 (1:100, Cell Signalling Technology, USA) . La fluorescencia del citoplasma indica actividad de la caspasa 3 y su ausencia en el control (sin amitriptilina) A. (C y D) condensacin nuclear visulaizada con tincin Hoechst (flecha) Moreno-Fernndez A.M. et al. Toxicology 2008, 243, 5158.

Figura 1-46. Apoptosis causada por amitriptilina

En

caso

de

informacin

sobre

el

dao

toxicolgico

de

toxicology perspectives on the development of herbal medicines to prescription drug products in the United States. Food and Chemical Toxicology 2008, 46, 26062610. 9. Luis G. Valerio Jr. In silico toxicology for the pharmaceutical sciences. Toxicology and Applied Pharmacology 2009, 241, 356370.

contaminantes en organismos del suelo, agua y aire se puede consultar el sitio ECOTOX Data Base de la Environmental Protection Agency (EPA): http://cfpub.epa.gov/ecotox/

Bibliografa
1. Curtis D. Klassen, et al. Casarett and Doulls Toxicology. 6th ed. Mac Graw Hill, New York. 2001. 2. A. Wallace Hayes. Principles and Methods of Toxicology. 5 th ed. CRC Press. Canada. 2007.

10. Eric V. Granowitz, MD, Richard B. Brown, MD. Antibiotic adverse reactions and drug interactions. Critical Care Clinics 2008, 24 421 442. 11. Ferner R.E., TF Butt T.F. Adverse drug reactions. Medicine 2012, 40, 370-374.

43
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

Unidad 1. Introduccin a la toxicologa


12. Simon Scott, Jonathan Thompson. Adverse drug reactions. Anaesthesia and Intensive Care Medicine 2011, 12, 319-323. 13. Jacques Descotes. Importance of immunotoxicity in safety assessment: a medical toxicologists perspective. Toxicology Letters 2004, 149 103 108. 14. Wim H. De Jong , Henk Van Loveren. Screening of xenobiotics for direct immunotoxicity in an animal study. Methods 2007, 41, 38

Departamento de Farmacia, Facultad de Qumica, UNAM.

44
Profesores: Francisco Hernndez Luis, Mara Elena Bravo Gmez, Perla Castaeda Lpez, Francisco Snchez Bartes

También podría gustarte