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Diagnstico Laboratorial
Diagnstico In Vivo Diagnstico In Vitro
Testes Cutneos
Classificao
Epicutneo - Teste contato (Patch)
screening para detectar IgE-especfica para diferentes alrgenos mais especfico que o I. D. embora menos sensvel O teste I. D. deve ser considerado quando a histria clnica de exposio forte e o Prick teste negativo Deve-se utilizar extratos j padronizados se possvel.
Testes Cutneos
Extratos para diagnstico
FDA - Unidades BAU (Bioequivalent Allergy Units) Quantidade diagnstico, para teste I. dimetro de do extrato que causa alergnico para fins resposta eritematosa, do de
Turkeltaub Turkeltaub PC, PC, Rastogi Rastogi SC, SC, Baer Baer H H et et al al - JACI JACI 1982; 1982; 70(5):342-52. 70(5):342-52.
Testes Cutneos
Reao imediata
Ppula
Resultado da liberao de histamina pelos mastcitos e ligao com os receptores de histamina na microcirculao, resultando no aumento da permeabilidade dos vasos.
Eritema
Resultado de vasodilatao neurognica Obs.: Estes resultados so comparados ao contrle negativo (diluente) e ao contrle positivo (histamina padronizada).
Turkeltaub Turkeltaub PC PC - Diagn Diagn Testing Testing of of Allerg Allerg Dis, Dis, Vol Vol 15 15 N N York; York; Nalcelbekker, Nalcelbekker, 2000, 2000, 53. 53.
Diagnstico Laboratorial
IgE Sensibilidade ao Teste
Antgenos In vitro RAST Complementar com I. D. Inadequado Aceitvel Aceitvel In vivo Prick (PK) Insuficiente In vivo Intradrmico (I. D.) Preferncia
Reaes sistmicas Veneno inseto Drogas Reaes sistmicas Ltex Alimentos Inalveis
Symposium # 3704 - Lab. Meth. For Allerg - Specif. IgE Ab. Goth A. A. A. A. I. Meeting - Denver, CO 2003. Robert G. Hamilton, PhD Johns Hopkins Univ.
adequadas Suspender medicaes, se possvel, que alteram o resultado Saber avaliar e tratar reaes sistmicas Ter medicaes e instrumentos apropriados para tal.
cardioverso, traqueotomia, injeo intracardaca de medicamentos: Pela raridade da necessidade desses procedimentos e o risco de serem efetuados em condies no-ideais, no necessrio que estejam imediatamente disponveis.
Aps qualquer procedimento e estabilizao do
e agulhas de grosso calibre (14). Epinefrina aquosa ( HCl 1:1.000 ). Amb e/ou oxignio. Equipamento para fluidoterapia endovenosa. Material para intubao. Anti-histamnico injetvel. Corticosterides intravenosos. Agentes vasopressores.
Diagnstico Laboratorial
In Vivo Prick Test
Objetivos
Avaliao de diferentes puntores Avaliao de extratos padronizados e no
Avalia o do Prick Test Avaliao Critrios de incluso: Pacientes de ambos os sexos, idades entre 10 e 65 anos, alrgicos aos aeroalrgenos. Critrios de excluso: Pacientes sob uso de medicao antihistamnica ou outra que possa interferir nas reaes, no alrgicos, portadores de imunodeficincia ou infeces vigentes.
Avalia o do Prick Test Avaliao Critrios de leitura: Controles - 15 minutos Alrgenos - 20 minutos. Reao positiva: ppula maior do que 3mm e maior do que a ppula do controle negativo CN. Resultado pela medida em milmetros do dimetro da ppula formada pelo teste. Os resultados obtidos so anotados no formulrio do teste.
6 4 2 0
ALK-Lancet ALK-Lancet DUOTIP DUOTIP
p<0,01 p<0,01
ALKO ALKO
Puntores
10 10 8 8
Ppula - mdio mm
6 6
p<0,01
4 4 2 2 0 0
Padronizado Padronizado 60 60 g g Der Der p p 100 100 BU/ml BU/ml ALK-ABELL ALK-ABELL
Lt: Lt: UO945 UO945
No No Padronizado Padronizado 50.000 50.000 PNU/ml PNU/ml FDA FDA Allergenic Allergenic
Lt: Lt: 04BB00050 04BB00050
n=10 n=10
Ppula - mdio mm
4 4 2 2 0 0
No No Padronizado Padronizado 50.000 50.000 PNU/ml PNU/ml FDA FDA Allergenic Allergenic
Lt: Lt: 04BB0059 04BB0059
Diagnstico laboratorial
Teste IN VITRO IgE Total IgEEspecfica IgG4 Especfica Histamina Liberada Sulfitoleucotrieno Ag - Especfico Protenas granulares dos eosinfilos Triptase dos mastcitos Citoquinas do TH2
ALERGIA
N egativos verd ad eiros E sp ecif icid ad e = N egativos verd ad eiros + Pos itivos falsos
X 100
E fic in cia =
Positivo s ve rd ade iro s + Ne ga tivos ver dad eir os T otal de p ositivos + To tal de ne gativ os
X 100
Diagnstico laboratorial
IgE srica total
No reflete a produo total No reflete a sua fixao nos receptores especficos tissulares Nveis elevados no so patognomnicos de atopia H pacientes alrgicos com nveis normais H variaes nestes nveis na dependncia de estmulos antignicos Modificaes dos nveis pela imunoterapia Clculo para aplicao de anti-IgE
ALERGIA
Diagnstico laboratorial
IgE srica especfica
Inalantes Drogas Alimentos Venenos de insetos Substncias ocupacionais
ALERGIA
IgE Especfica
Diagnstico laboratorial
Indicaes para realizar o RAST
Dermografismo importante Doena cutnea (D. A.) No poder retirar anti-histaminico Reaes atpicas para alimentos
ALERGIA
No IgE mediada
Enterocolite proteica alimentar Proctite proteica alimentar Enteropatia proteica alimentar Doena celaca
Triptase:
Dosagem ideal: 1 a 2 horas aps a ingesto ou 30-60 min aps o inicio da reao. Diminui em 30-90 min. Beta-triptase armazenada nos grnulos o marcador da ativao do mastcito. Tolera congelamento, mesmo em crises graves no se eleva muito.
Obrigado
Diagnstico Laboratorial
Na prtica da alergia clnica
Hemograma VHS Protena C reativa Imunoglobulinas - IgG A M E (total / especfica) Subclasses de IgGs. (Estudo funcional) Estudo do complemento (CH50 C3 C4 INHC1E) Estudo da fagocitose (NBT) Exame de urina Estudo radiolgico Estudo imagem abdominal (Asplenia) Testes cutneos Hipersensibilidade imediata Hipersensibilidade tardia
Diagnstico Laboratorial
Linfcitos - Testes Funcionais
Resposta ps-vacinal (Ex.: ttano, Pneumovax, etc) (Ex.: Elispot) - Estuda citocina e imunoglobulina individual secretada pelo linfcito
Secreo de imunoglobulinas
Diagnstico Laboratorial
Linfcitos - Testes Funcionais Linfcito T Que finalidade? Determinar competncia em infeces recorrentes Avaliar hipersensibilidades Tipo IV (CMI) Monitorar efeitos supressivos de drogas ou doenas (Ex.: HIV)
Diagnstico Laboratorial
Linfcitos - Testes Funcionais Linfcito T - Testes in vivo
Testes cutneos (DTH) - usados para: Determinar se o paciente j teve contato prvio com a infeco ou vacinao Ex.: PPD Determinar incapacidade (anergia) ou hipersensibilidade de resposta para antgenos de memria (Recall Ag) (SK/DN, Candidina, Tricofitina, Tuberculina, etc) Avaliao para testes de contato - D. contato (DNCB)
Diagnstico Laboratorial
Linfcitos - Testes Funcionais Linfcito T in vitro e ex- vivo Finalidades: A - Avaliao das subpopulaes B - Avaliao da proliferao / ativao para mitgenos e Ag. Memria (Recall Ag.)
Diagnstico Laboratorial
Citometria de fluxo para citocinas intra-celulares Determina nmero e percentagem de clulas respondedoras
Diagnstico Laboratorial
Monitorar ativao recente (Ex.: Cylex kit) Monitorizao de imunosupresso de transplante Gerao de ATP
Diagnstico Laboratorial
Diagnstico Laboratorial
Linfcitos - Testes Funcionais Linfcito T in vitro e ex- vivo - Mtodos Avanados
Elispot
CTL por liberao de cromio (MHC restrito) Deteco de CTL por ensaio de tetramero Citotoxicidade NK e ADCC (MHC no restrito)
Diagnstico Laboratorial
Mtodos celulares avanados: Ausncia de estandartizao dos mtodos Estabilidade do sangue quando enviada para o laboratrio especializado Materiais de referncia de difcil acesso Outros?