Research In Surgery. Suplemento 5.

Julio 1990

La Eutanasia en los Animales de Laboratorio
Centro de Investigación. Hospital General Universitario de Valencia
La palabraeutanasiasignifica etimológicamente"muertesin dolor", yen sentidoaplicativo, "arte de sacrificar o mataranimalesde forma piadosa, evitandoel sufrimientofísico y psíquico".Obviamente, esto no se logra si el animal luchao presenta síntomas de miedo durantela maniobra empleada, o si recupera el conocimiento después del proceso. Sepodríacalificar de buenmétodode eutanasia aquélen el que sealcanza con rapidezel estadode inconsciencia y éstese mantienehastael momentode la muerte,es decir,la verdadera eutanasia suponeuna insensibilizaciónrápida, mantenida hasta que seproduzca la muerte. Segúnel Anexo 11 al artículo 5 de la Directiva del Consejode 24de Noviembrede 1986,respecto a la protecciónde los animalesutilizados para experimentación y otros fines científicos (86/609/CEE),en el punto 3.12. referente al Sacrificiohumanitariode los animales, seespecificaque: 3.12.1. Todo método humanitario de sacrificio de los animalesexige conocimientos que s6lo puedenadquirirse mediante unaformaci6nadecuada. 3.12.2. Sepuededesangraranimalesen estadode inconsciencia profundapero no convieneemplear,sin anestesia previa. ni los medicamentos queparalizan los músculos antesdeque seproduzcala inconsciencia.ni los de efecto curarizante, ni la electrocuci6n sin pasode corriente por el cerebro. No debe permitirsela eliminaciónde los cadáveres antes de quesobrevenga el rigor mortis. INTRODUCCION Los métodosde eutanasiamás sofisticadosseguidos paralos animalesdomésticos rara vez sonprácticosen el casode los animalessalvajes, o los animalesque no estén acostumbrados a estarencerrados o a sermanipulados. La eutanasia de animalesde laboratorioen generalresulta más difícil que en el casode los animalesde compai'lía o de granja. El proceso de eutanasia debe caracterizarse por ser: a) humanoy libre de dolor, temoro lucha; b) seguro para el personal de laboratorio; c) fácil derealizar; d) rápido ensuacción; e) apropiadopara la edad,especie, salud y númerode animales; t) fiable y reproducible; g) irreversible; h) libre de impactosambientales negativos; i) singranderroche de fánnacos; j) económico; k) libre de efectosquímicosa nivel tisular; 1) incapaz de inducir alteracioneshistológicas en el animalde estudio. La eutanasia en animales de laboratorio puede ser necesaria por la apariciónde dolor severo o prolongadoresultado de un experimento,por ser parte integral de un experimento agudo,o porque el animal haya sufrido un accidente, estéenfermoo porqueel/los animalesrebasan lasnecesi~es del laboratorio.

La eutanasia en generalpuede ser provocadade dos

modos:
-Por métodos fisicos: disparo, aturdimiento,desnucadoy otros. -Por sustancias qu{micas:utilizándosegeneralmente anestésicos sobredosificados.
Las técnicas de sacrificio varían según la especie y el propósito para el que se esté sacrificando al animal, es decir, el método de eutanasia será distinto si lo que queremos es eliminar al animal o si vamos a necesitar posteriormente el cuerpo para experimentar en él. Así, el pentobarbital sódico a altas concentraciones produce una congestión de los alveolos capilares, amén de una esplenomegalia congestiva y alteraciones a nivel del sistema enzimático microsomial hepático; además, este tipo de sustancias afectan al feto, estando contraindicadas para la realización de las histerectomías con el fin de producir animales SPF o gnotobióticos. A su vez, la T -66 produce edema pulmonar y necrosis endotraqueal de los pulmones, además de una edematización endotelial de los vasos glomerulares a nivel del riñón. Por otra parte, incluso el dióxido de carbono, componente natural del cuerpo, produce hemorragia alveolar focal y edema perivascularde los pulmones en ratas, al emplearse para inducir la eutanasia. En definitiva, cada agente químico induce una serie de efectos específicos, como por ejemplo alteraciones en las lecturas de valoración del sistema enzimático del hígado o de los citocromos.

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Existe una variabilidad considerable en cuanto a las dosis con efectos anestésicos y letales. La Exanguinación siempre serealizará con el animal anestesiado y después de haberpracticado un métodofísico. Algunos conllevan a la formación de magulladuras y hemorragias en el lugar de la herida y por esta razón pueden resultar inadecuados en cienos casos.en la tabla1 quedanreflejados otros. Captive bolt Descompresión Electrocución Exanguinación Decapitación Dislocac. no obstante. con lo cual es posible la recuperación respiratoria con posterioridad. no obstante. dos veces la dosis habitual suele producir parada respiratoria.La Eutanasiaen los Animales de Laboratorio El investigador debe verificar la defunción del animal. con el pentobarbital en ratones puede necesitarse el doble de cantidad que en el gato. utilizando la decapitación o la dislocación cervical. Cuando se emplean anestésicos. y tres veces dicha dosis suele producir la muerte de forma rápida y eficaz en animales no ventilados. Debe recordarse que algunos animales que sehallan en estadode paradacardíacapueden presentar una ventilación mínima. Métodos físicos de eutanasiaen mamíferos. o bien puedenno haber consumido todas sus reservas de oxígeno.. así como su uso o no en los mamíferos de sangre caliente. NR NR A NR NR NR NR A A A A A NR NR A A NR: No recomendado. sirven para examinar las víscerasabdominales. O bien asegurarsede que se ha producido parada cardíaca. METODOS FISICOS Los métodosfísicos másgeneralizados son los que a continuación pasaremos a describir. cuatro veces la dosis anestésica induce parada cardíaca en animales ventilados artificialmente. cervical NR NR NR NR Golpe cabeza Gato Ganado Perro NR A A A NR NR NR NR NR NR NR A NR A A NRA Jer~ Cabra NR ~ NR NR A NR NR NR NR A _A A -~ NR A A NR NR A NR NR NR NR NR NR A NR ~ NR A A Harnster Ratón NR NR NR ~ NR NR NR NR A A A A A A NR _A A A Mono Conejo Rata NR NR NRA A NR NR A A NR -~ NRA A Oveja NR NR A NR NR NR NR Cerdo Paloma Aves domésticas A NR NR NR NR A A A A NR ~ NR A A A NR 1~Q9omiz Aves acuáticas Mamíferos acuát. humanitarios y prácticos si se realizan adecuadamente.ej. aunque en OIIOS. Tabla l. es imprescindible realizarlos con seguridad y resolución. dimiento. A: Aceptable La Electrocuciónse acepta siemprey cuandose utilice un equiIXJ y un procesoespecíficopara tal fm. antes de desechar los restos. La toracotomía tras inducir la parada respiratoria asegura la irreversibilidad del proce- Los métodos físicos de sacrificio son rápidos. 46 I~y~ ~ I . p.

B) Agentesno inhaIatorios. como para el trabajador. no huele y es incoloro. En cuanto a las concentracionesde CO utilizadas. El animal secolocaen unajaula dejandoque se acostumbrea sunuevomedio. El CÜ2 es 1. es preciso quepasepor el cerebrodel animal unacorrientealternalo suficientemente potente. Despuésdel aturdimientoen los animalesmás grandes. Se almacena en balas como líquido bajo presión. Dióxido de Carbono Aunque hasta la actualidad se han utilizado otros agentes volátiles para la eutanasia de animales pequenos. En el casode los ratones. y la muene es rápida. el recelo y el sufrimiento del animal es mínimo. El efectoes tanrápido que la pérdida deconsciencia ocurreantesde que el animalseestrese. sin embargo. Cloroformo METODOS QUIMICOS La UFA W (The Universities Federation for Animals Welfare) ha realizado pruebas exhaustivas de los métodos químicos de eutanasiamás adecuados. Para conectar la salida de la válvula con el contenedor o cabina en el que el gas tiene que introducirse. El tracto respiratorio se ve seriamente afectado. Los animalesquedaninconscientes a los 40 s.las recomendaciones que se describen a continuación han sido aprobadas por el Scientific Advisory Committee. ésto. La mayoría de las balas llevan un aparato sencillo de cierre que se sustituye por un manómetro reductor antes de utilizarse. (tibIas ni y IV).Research In Surgery. se utiliza un tubo de plástico o de goma. Además. Si en nuestroestudio quisieramosrealizar una valoraciónde la hemoglobina. pueden 47 . produciéndose secreciones bronquiales y edema pulmonar.~ presentaalgunasdesventajas. Podemos hacer una división de los agentes químicos utilizados en eutanasia en dos categorías: A) Aquéllos que producenla acción por inhalación.Es precisoque el disparo penetre en el cerebro. Por otro lado.y teniendoen cuentaque éstees de un tamaflo relativamente pequeflo. Por otro lado. no se recomienda cuando sevaya a realizar un análisis lipídico de los tejidos del animal muerto. la UFA W recomienda el CO2 como el agente químico más adecuado tanto para el animal. dejande respirara los 2 min y la paradarespiratoriasobreviene de 5 a 7 min después. la heridainicial en la cabezaalcanzaalgunosde los principales vasossanguíneos y ocasiona unasalidaconsidernble de sangre. En cualquier caso. hámsters. Sin embargo. conejos. decapitación y aturdimiento Estos métodos sólo deben utilizarse para sacrificar animales que pueden manejarse con facilidad y que tengan el cráneo relativamente fino. no se debe pennitir que los sentimientos humanos influyan en la utilización de las técnicas más humanitarias. No es recomendable por ser hepatot6xicopara el personaly paralos mismosanimales. presenta riesgos en el laboratorio. Agentes Eter químicos inhalatorios La electrocución La electrocuciónpuederesultaro indolorao muy dolorosa siendo esencialestanto el conocimiento técnico comola habilidadpara el usoadecuado de estemétodo. Nonnalmente se utiliza en una cámara cerrada para sacrificar pequenosroedores. el desangrado debe acelerarse cortando los principalesvasossanguíneos del cuello. el aparatodebe dispararsecon el caflón situadofirmementecontrala cabeza del animal.es necesariosujetar fmnemente al animal. a) Eutanasia 12Qr C~ medianteuna bolsade ulástico. Conestemétodosedestruyeel cerebroy el estadode inconsciencia sealcanzainmediatamente. son a menudo menos angustiosas para el animal que otros procedimientos más complicados con el uso de productos químicos y otros medios.periquitos. o mediante una cabina especial disenada por la UFAW. los métodosque matanpasando la corriente por el corazón pero no por el cerebro no pueden sercalificadosde humanitarios. Aunque éstas puedan ser del desagrado del trabajador. Si sequiere lograr una electrocuciónhumanitaria. inevitablemente va a interferir en la interpretación de los cones histológicos. Es preciso cierta habilidad manual pero una vez se haya familiarizado el trabajador con la técnica. esevidenteque estemétodono debe utilizarse. Julio 1990 Desnucado. En el casode los gatos y perrosde tamañomedio. Monóxido de carbono La inhalaciónde CO causainmediatamente la muerte por combinarse con la hemoglobina eritrocitaria produciendo anoxemia. El animal seintroduceen una cámaray el CO se producirá por un motor de combustióno por la interacción química entre cristales de formato sódico y ácido sulfúrico. Esta pérdidade sangre acelerará la parnda cardíaca. La eutanasiapor CO2 puede realizarse bien en bolsa de plástico.ratas. Muchos autores dudan de que sea un método humanitario por provocar una irritación de piel y mucosas siendo altamente estresantepara el animal. Suplemento5. El disparo Existendos tipos: los que disparanun proyectil y lo que se suele denominar "martillo neumático" ("captive bolt). (tibIa ll). al ser un agente inflamable.5 veces más pesado que el oxígeno y no es combustible.enfocadoen la direccióncorrecta. es habitual que muchas personas no se presten a efectuar estos procedimientos y prefieran usar otros métodos. teniendo que extremar las precauciones sobre todo del destino de las bolsas en las que se hayan introducido los animales muertos.el cornzón seguirá latiendo hasta su debilitación por la hemorragia ~ionada. la bibliografíarecogedesde0.5 a 14 %.pichones y pollos.

la jaula se coloca dentro de una bolsa de polietileno transparente aproximadamente cinco veces másgrandeque el volumen de la jaula. NR NR NR: No recomendado. La bolsa de plástico comenzaráa hincharsey cuando la mitad del volumende la misma estéocupado por el gas. Se coloca el animal o animales en una jaula dejando pasar un tiempo suficiente como para que se acostumbrea su nuevo ambiente. Cuando ésto ocurra. A: Aceptable 48 ~eio IQatc Ip~~ [9Yeia ~mB 1 I .perdiendoel conocimiento entrelos 10 y 20 s.los visonesy otros carnívorospequef\os. deben enjaularse individualmente. Los gatospueden tardarhasta 2 mino Cuandola bolsade plástico estéllena de gas. se retira el tubo y la boca de la bolsa se cierra atándole un elástico o una cinta. Se abre el gas para que entre paulatinamente. hay que dejar al animal otros 10 min en contacto con el gas. b) Eutanasia ~r CQ¡ utiliZ3ndo una cabina de eurnnasia de la UF A W -(fi2ura 1). esté fmnemente colocada.La Eutanasia en los Animales de Laboratorio colocarse varios animales (de la misma especie)en la misma caja siempreque hayasuficientesuperficiey que los animalesno luchenentresí. Los gatos (con la excepción de los jóvenes). El tiempo que puede transcurrir hastala inconsciencia varía segúnla distanciaentrela cabeza del animal y el suelode la jaula.pero sin presión.y retirary vaciarla jaula.pero debemantenerse bajo observaciónhastaque se note la ausenciatotal de respiración. ya que una entrada fuerte de gas produciría turbulencia.después de los cuales sepuedeabrir la bolsa. Hay que asegurarsede que la bandeja de tierra (o excrementos)de la cabina. Una vez se haya tranquilizadoel animal. En estos momentosel animalya estará inconsciente. Los ratonessuelenmantener la nariz muy cerca del suelo. Eutanasiaen mamíferos por inhalación de gases m A Ganado NR CÜ2 ~más A NR NR A NR Clorofomlo Nitrógeno Argón Cianida A NR NR NR NR NR NR ~~ NR NR NR NR ~ IJerbo ~ A NR A NR A A A A ~ NR NR NR NR NR NR NR NR NR IL:abra ~ NR NR I Cobav~ Ham~rel Ratón A A A NR NR NR A A NR A NR NR NR NR NR NR IMono NR A A NR NR NR A Rata A A A NR NR 1Cerdo ~ A A _A NR NR ~ ~ NR NR A A -~ NR Aves <!Q!!!-é~c~ Codorniz NR NR NR NR NR NR NR NR NR NR NR NR A A NR NR NR ~~~ticas A A NR ~ NR Mamíferos acuát. el animal se habrá narcotizado o estará inconsciente. El experimentador aprietala bocade la bolsa alrededordel tubo con una manoy con la otra gira la llave de la bala produciéndose unapaulatinaliberación del gas. La bolsase aprietacontralos ladosde la jaula y seintroduceel tuboelásticoqueconduceel CÜ2 por la bocade la bolsa. Se abre la rnpaderade la cabina deslizándola hacia fuera y se introduce el tubo de entrada del gas de modo que la punta descanse sobre la bandeja. Tabla ll.

Cabina Eutanásica -. y la jaula permanecerá dentro de la cabina durante otros 10 min. de forma que la holgura permitirá la salida del aire.Research In Surgery. Julio 1990 Figura 1.. y el nivel al que se extingue la cerilla indica la altura del gas. se desplaza el aire hacia arriba. Suplemento5. Deberemosobservar al animal hasta que deje de respirar.eo- - ~ ' Según se llene la cabina con el CO2. despuésde los cuales puede retirarse y vaciarse. cuando el nivel llegue a 5 cm del techo. El nivel del gas puede averiguarse introduciendo una cerilla encendida. Hay que observar al animal de cerca y cuando esté inconsciente se sigue introduciendo gas durante otros 1Ss. después de los cuales se retira el tubo y se cierra la tapadera de la cabina lo más herméticamente posible. el dióxido de carbono no es combustible. la jaula con el animal se coloca con cuidado dentro de la cabina descansándoloen la bandeja y e desliza la tapa del armario hacia el tubo. Cabinade eutanasia por CÜ2 ideadapor la UFAW. Tras el proceso quedará una cantidad de gas considerable en la cabina de forma que si se van a sacrificar más 49 " IC~ . Vista de frente ).

Sin embargo.p. y en consecuenciala cantidad que serequire añadir de la bala es menor. Si la bandeja se ensuciara de orina y excrementos. sin embargo.Esto suelecomplementarse con la posterior decapitación u otro procedimiento físico. el gas bajará al nivel más bajo posible y se hará inocuo por dispersión en el ambiente. La dosis letal puede considerarse como tres veces la dosis para anestesia.por tanto deberealizarseun examenmuy cuidadosodel cadávery si existieracualquierduda. Dislocación cervical Peces pequeftos y medianos pueden sacrificarse colocando un lápiz. Halo tano . Arg6n inhalat. Si la cabina es~ en una mesa por encima del nivel del suelo. ranasy otrospoiquilotermos. 60 mg/Kg 1-10 mi Cloralosa (sol. El tiempo de efectividad del fánnaco varía. 1-10 mI a saturación Eter. en la boca del animal. se sacaráy limpiará antes de procedera la realizaci6n de Ob"dS operaciones. y aún así resultar incompleta. Métodosquímicosde eutanasiaen vertebradosde sangrefría.) Metoxiflorano. Cuando hayamos tenninado el b"abajo. pero el efecto es a menudo inseguro. Debido a la absorción cutánea y los resultados irregulares encontrados. es mejor la vía intraperitoneal. Tabla ill.La EUlanasia en los Animales de Laboratorio animales sólo hay que rellenarlo hasta el nivel necesario y continuar según se describió anteriormente.se puedevaciar el gas sacando la bandeja. i.sat.ES i. o el dedo pulgar. Agentes químicos no inhalatorios Pentobarbita/ sódico El pentobarbital sódico es un barbinírico de actividad media y de utilización general tanto en anestesiacomo en la eutanasia. intracardíaca o intraperitoneal. para facilitar la administración y sobre todo en el caso de animales nerviosos y poco dóciles. Secci6n medular La sección medularpor delIásde la cabeza esunmétodo eficaz enpeces. sódico y HCI diluido) Pentobarbital Uretano (10-20 /fo sol. Al terminar la jornada. a saturación SóloreemDla. cuchillo. ANFIBIOS. Decapitación (tijeras. Agente Químico ¡ Vía en agua en agua en agua en agua enagua en agua en agua en agua en agua (saturación8.guillotina) Estemétodoresultaeficaz en el casode la eutanasia en anguilas. CO2 Nitr6geno. la bandeja debe retirarse y limpiarse.) y 10-20 10-30 10-30 15-30 20-40 20-40 100-120 100-200 15-30 15-20 ANFIBIOS y REPfll. pecesy reptiles pueden sacrificarse sencillamentecon un golpe fuerteen la parte posteriorde la cabeza. inhalat. y debe pasarse un pano humedecido con un detergente suave por el interior del armario. sujetando el pez con la otra mano. El polvo en cápsula puede administrarse oralmente.43ifo p/p a 15 °C) en agua Dosis 100-200 mg/l 20-25 mg/l 50-60 mg/l 80-95 mg/l 1. el o. En cuanto a la administración.Clorofonno.debeadministrarse unadosisadicional. pero el efectocompletodebe servisible en un tiempode 10 a 15 minoEl fánnaco induce una narcosis muy profunda. y desplazandola cabeza en sentido dorsal. PECES Y REPTILES Métodos Físicos Impactaci6n cervical (alurdimiento) La mayoría de los anfibios.lo cual. i.5-3 gIl 12-25 mg/l 15-20 mg/l 70-100 mg/l 20-30 ml/l > 400 ppm Tiempo de exposición (min) PECES MS222 Clorobutanol Estrilpiridina Uretano Hidrato de cloral Tribrometano1 Amobarbitol Secobarbital Dietil éter Di6xido de carbonoI (adici6n de Bicarb. si bien algunosinvestigadores prefierenprimero efectuar un golpeen la cabeza.. ésto generalmente no ocurre cuando se utiliza CO2 pudiéndose realizar varias operaciones seguidas sin tener que liberar el gas que tiene la cabina. la narcosis puede tardar dos horas o más.p. a personasde poca experienciapuede parecerla muerte. no se recomienda la administración subcutánea. puede realizarse por las vías intravenosa. 50 .p.

como el llevar guantes. Meto. La exposiciónmás prolongadaconducea la muerte. Campanas de inhalaci6n: Eter.Research In Surgery. Métodos de Inhalación Campana letal deDióxido de carbono Si estemétodo no va seguido de otro tipo de procedimiento físico.debeevitarseel contactodirectoentre el líquido inhaIatorioy el animal. como el alcohol y el formol. Halotano. Suplemento 5. serequiereuna exposiciónmásprolongada que enlos mamíferos para lograrla eutanasia. Julio 1990 Métodos Parenterales Vías intraperitoneal/intratorácica: Pentobarbital s6dico y otros barbitúricos El pentobarbital (60 mg¡kg) y otros barbitúricos pueden administrarse por vía intraperitoneal en la mayoría de las especiesde sangre fría. pero conllevael riesgode dejarexpuesto al personalde Iaboratorio. la muerte del animal debe ser perfectamente verificada. En todo caso. Agentcsfarmacol6gicos no inhalatorios parala eutanasia en mamíferos. El MS-222 en forma de 1-3 gil de agua en especies acuáticas reduce la movilidad antesde procedera ob'os métodosde eutanasiafísica. dado que el uretano es un carcinógeno. pero es de una gran eficacia. y no planteaproblemasde saludparael personal de laboratorio.Estemétodo resultamuy caro. Vía intrapleuroperitoneal: Clorhidrato de Procaína y clorbutanol Las serpientes pueden sacrificarse mediante una inyección de procaína (0. Tabla IV. Serequiere la adopción de precauciones. Este tipo de eutanasiaes relativamente rápido. como es el caso de las tortugas.rifluraro Víapercutánea: Uretano (Etil carbamato) y Metanosu/fatodetricaína (MS-222) Las especies acuáticas pueden sacrificarse colocando al animal en una disoluciónde uretanoal 1-2%. La administración intraperitoneal de soluciones saturadas de unos pocos mI de clorbutanol en ranas logra la eutanasia en pocos minutos. 51 .47 mg/kg) en la cavidad pleuroperitoneal. En algunas especies de sangrefría. Para inducir la eutanasiase pueden aftadir al agua muchosotros compuestos.

Alternativamente.bien manualmente o bien con el emasculador de Burdizzo.. y una vez realizada la sección medular . es la dislocacióncervical.6 mm cada 10 cm. acto seguido.debido al nados a través de la cavidad bucal. según el caso. Metoxiflurano. destruyen los pájarosal final de un experimento en el que La fractura seproduceal cerrarlos forceps a nivel del se haya utilizado un patógeno. cualquier cuello del animal. y resulta rápidoy eficaz. La inconscienciase alcanza en un tiempo continuación se le da un golpe seco en la parte posterior mediode 30 a 45 s. a 5 cm y En las aves.El polvo desprendido bien se emplea con avesde mayor tamaño. tráquea y el esófago hastaque cesenlos movimientos etc. Las aves se colocaronen borde metálico. métodode sacrificio que disminuyala cantidadde polvo merece unaconsideración.no obstante a los dos min de haberintroducido los animales en la cámaraes convenienteañadir más CO2 (duranteunos 30 a 45 s) para reemplazarel gas que se Figura 2.y es de utilidad encasode 3. Se levanta el ave con las manos sujetándole por cualquierbolsade aire que puedahaberentre lasavesy/o las patas. y menoseficaz. no ser así seobstacularizaría la difusión del CÜ2 por la Un instrumento efectivo para estepropósito (figura 2) cámara. ~===~ der a la decapitación.25cmcon un orificio de salida del gas de 3. puede hacerse del siguiente modo: se requiere un b"Ozo de El procedimiento parasacrificaravesen la cámara de madera de 40 cm de largo x 5 cm de ancho x 1 cm de CO2 es el siguiente: se llena la cámarahasta30 cm del grosor. a sus plumas. cola y las plumas largas de las alas. A su vez. se sujetaal animal mgjkg puedeinyectarse con facilidad en la cavidadabdocon una mano. sirve evitaremosla aspiración de alimentodel buchehacia El métodoquesesueleemplearparasacrificarlasaves lasvías respiratorias.la jaula cm de grosor a los dos bordes de los restantes28 cm de se baja y se subevarias veces con el fin de desplazar madera.5 cm de ancho x 1 polea. o bien apretándolo contrael bordede una mesa. etc. si desprende por el batido de las alas. Sección medular con o sin exanguinación No obstante. La administracióndel pentobarbital por otrasvías este procedimiento sirve para la toma de muestrasde esmás difícil. de la cabeza (detrás de la crestaen su caso)con el borde del Paraasegurar que todaslasavesesténmuertas deberán aturdidor. ya que de posterior de la cabeza. sin necesidadde proceriesgode exposición queconllevan. La Impactación cervical tuberíarecorredos alturasdentro de la cámara. se clava una bordesuperior. se emplea un palo de madera con un re65 cm del suelo de la misma. permanecer los animales en la cámara. intracardíacao intramJJScular. Si ejercemos presiónsobrela Di6xido de carbono. cuchillo. intratorácica. 52 . por tanto. Barbitúricos El pentobarbital sódico a concentracionesde 100 En el casode avesde gran tamaño. intraperitoneal. la cabeza puede doblarsecon Métodos de Inhalación la mano en sentidocaudal. El tiempo de exposición al gas no debe ser menora 5 mino En cuanto a la utilización del éter. Halotano. Para aseguraruna distribución igualada del gas. se procede a la decapitación. Aturdidorde aves. halotano y metoxiflurano. resultabastante eficaz y ético.guillotina) Este procedimiento resulta rápido y eficaz en aves avespor inhalación de CÜ2 sepuede observar enla figura jóveneso de pequeñotamaño. se obtener muestras cerebrales. hayautilizado en el sacrificio.y se va introduciendoen la cámarade gas. bastarácon utilizar una bolsa de polietileno transparente(preferentemente de calibre 500) que se llenará de CO2 y se cerrará con un elástico. acoplóa la cámaraunatuberiade cobrede 1. pero el inconveniente de este Dislocación cervical (emasculador de Burdizzo) métodoes la gran pérdida de plumas y el polvo que se Este procedimiento es similar al método manual. semezclacon hidratode cloral y sulfatode magnesio para Las aves de menor tamaño puedenser sacrificadas inducir anestesia y eutanasia enaves. se forma un asa de 13 cm de largo. para efectuar un golpe seco sobre la parte unajaula de polipropileno con suelode rejilla.. torciendo el cuello.entre otros. Parasacrificaraves adultasde forma individual o una pequeftacantidad de polluelos. y se sobreextiende el cuello con la otra. minal. La cabinarecomendada por la UF A W para sacrificar Decapitación(tijeras. Eter.al menos5 min exanguinación. existen reticencias crecientes frente al Los principales vasos cervicales pueden ser seccioempleode cualquieragenteque no seael CÜ2.La Eutanasia en los Animales de Laboratorio AVES Métodos Físicos Dislocación cervical (manual) Métodos Parenterales Vias intravenosa. más.La jaula con los animalessealza con una barra de metal de 28 cm de largo x 0. como sonlos puedellevar organismos infecciosossobretodocuandose pavoso gansos. el pentobarbital sangre de forma inmediata.

y en animales no anestesiados siempre que sea realizado por personal formado. intraperitoneal. Se asocia a dolor cuando se administra vía intraperitoneal. La inyección intraperitoneal se reserva para animales difíciles de manejar. intratorácica y otras pueden aplicarse en el caso de animales neonatoso anestesiados. La inyección intracardíaca puede emplearse en perros ya anestesiados.3 ml/kg) actúa como narcótico. GATOS y PERROS Métodos Parenterales Vfasinlravenosa. Cámara letal y mascarilla: Ha/otano y Metoxijlurano Estosagentessonde utilidad en gatosque puedenser difíciles de inmovilizar. Puesto que la densidad del CÜ2 es mayor que la del aire. iv) producirá parada respiratoria. VEas intravenosa. puesto que se produce la pérdida del sentido a los 90 s. Las vías intracardíaca. Julio 1990 Figura 3. Este es el método preferido en aquellos casos en los que debe evitarse el empleo de fármacos o agentes químicos. 53 . Cámarade eutanasia por CÜ2 para avesdisciíadapor la UFAW. la apertura de la cámaradererá estaren la parte superior. Métodos de Inhalación Di6xido de carbono (balas de gas. En el caso de cachorros y gatos pequenos. intraperitoneal. y/o tranquilizantes Estos agentes se emplean para la inmovilización de peITOS y gatos. en perros y gatos. Puede emplearse hielo seco en lugar de balas de gas. llena de gas. hielo seco) Se requieren altas concenb"aciones (al menos 40%.y encachorros. intratorácica e intracardfaca:Barbitúricos Tres veces la dosis anestésica de pentobarbital sódico (90-100 mg/kg. La vía intravenosa es la más recomendadaa esteefecto. El llenado de la cámara antes de introducir el animal aumenta la eficacia. Pueden a su vez combinarse con la administración subsiguiente de pentobarbital o la aplicación de medidas físicas tales como la exanguinación en animales queresultan dificiles demanejar. Este método es muy eficaz en los gatos. y dejando al animal dentro de la misma hasta 20 min después de inducida la parada respiratoria.Research In Surgery. Suplemento5. La premedicación con sedantes intramusculares o subcutáneos facilita la posterior inyección intravenosa de pentobarbital. ademásde ser un depresorrespiratorio en gatos y perros. y preferiblemente el 70%). pero en tal caso debe evitarse el contacto directo entre el animal y el hielo. El riesgo para el personal de laboratorio puede minimizarse mediante el empleode sistemas especiales de ventilación. puede emplearse una bolsa de plástico. narc6ticos. Vías intramuscular y subcutánea: Clorhidrato de ketamina. e intratorácica: T-61 Este fármaco (0. ~1Ucm -~ . y seguidamente cadíaca. y la muerte a los 5 min (con concentraciones por encima del 60%).No serecomiendan como agentes únicosen la inducciónde la eutanasia.

El animal se sujeta. Esteanestésico se empleafrecuentemente en primates de gran tarnafio. la exanguinación se realizará por aislamiento de la arteriacarótidao venipuntura vía intracardíaca. e intracardíaca: Pentobarbilal sódico El pentobarbial sódico (100 mg/Kg) puede administrarse sobre todo vía intravenosa e intraperitoneal. tras premedicación con clorhidrato de ketamina para facilitar el procedimiento. estético. ya quela guillotina por unalado espeligrosapara el personal. pero por otro lado es incompatible con la realizacióna Las cobayas pueden ser aturdidas con un golpe seco en posteriori de estudioshistológicosa nivel cerebral. Este método se utiliza cuando estécontraindicadoel uso de fármacos. Puerco fuertey secocon la mano. intratorácica. Jerbo. 5-50 ml/Kg. A su vez.El gaslíquido no debeentrar en contacto con el animal. además de ser un métododesagradable desde unpuntode vista.Algunas~rsonas rechazan este método por motivos estéticos. Métodos Parenterales Vía intravenosa: Aire El aire. Esta. La vía intravenosa es la primera elección si pueden utilizarse las venas auriculares. Hárnster.y consiste en golpear al conejo en la ROEDORES nuca con un objeto de metal o madera. además este tipo de Espíny Rata) eutanasia requierehabilidad y no asegura la muerte. Halo/ano. El pentobarbital sódico también puede administrarse por vía oral en los zorros. Métodos por Inhalación Cámara de eutanasia deDióxidode carbono Dióxido de carbono. toracotomía lmpactación cervical o exanguinación. produce una muerte rápida que puede ir acampanada de convulsiones. Cobaya. pero son de acceso más difícil y doloroso.o tras premedicaci6n con ketamina u otros agentes efectivas para los conejos. Vías intravenosa. y por último. Métodos de Inhalación CONEJOS Métodos Físicos Impactaci6n cervical Cámarao máscara de eulanasia para Eter. Tras anestesiarlos animales. como paso previo a la eutanasiacon pentobarbital sódicoo algúnanestésico de inhalación. el animal sequeda inconsciente al minuto. intratorácica o intracardíaca:Barbilúricos Los barbitúricos en general son sustancias controladas pero su coste no es elevado y normalmente están dispoExanguinación Métodos de Inhalación Dióxido de carbono y Nitrógeno El empleo del CÜ2 es como en el gato y el perro.Ratón. técnica también se puede realizartumbandolateralmente al animal encima de una mesa o superficieplana.por Métodos Fisicos ello. Este es el mejor agente utilizadoparala eutanasia por inhalación de gas. el nitrógeno en el hurón es muy eficaz. sejado debido a que es dificil de aplicar bien. por las patasa la altura de la cintura con una mano. Decapitación La utilización de este método se reserva para los estudios especiales enlos que los fármacosestán contraindicados. la vía intracardíaca puede ser dolorosa o lenta si se hace la inyección en el espacio pericardial. para inducir un estado anestésico previo a la eutanasia por otros métodos. Vfas intramuscular y subcutánea: Clorhidrato de ketamina nibles. a continuación se suele realizar una exan- 54 . Dislocación cervical Serecomienda paraconejosque pesen menosde 1 Kg. anestésicos. la vía intratorácica es útil si el animal ya est2anestesiado. El aturdimiento es un método generalmente desaconSu ventajaes la de que se evita el uso de un fármaco. intraperiloneal.o con un golpe (Chinchilla. intraperitoneal. opistotonos y dilatación pupilar. a menudova seguidode la decapitación. Metoxiflurano Las concentraciones del 40 al 100% son segurasy Estassust3ncias seempleanpara inducirla eutanasia a solas. Las vías intravenosa e intratorácica han sido recomendadas en el rorro.La Eutanasia en los Animales de Laboratorio HURONES Y ZORROS Métodos Parenterales Vfa intraperilonea/: Barbitúricos La administración intraperitoneal de pentobarbital sódico (100 mg/Kg) es de utilidad para la inducción de la eutanasia en estas especies. Halotanoo Metoxiflurano Los vaporespuedenirritar las mucosas y provocar un forcejeoporpartedel animal. la nuca. con la otra mano y se sobreextiende el cuello. el pentobarbial puede combinarse con otros agentes o procedimientos físicos tales como la exanguinación.y fallece a los 5 mino PRIMA TES Métodos Parenterales Vfasinrravenosa.la cabezase sujeta. No se recomienda en animales no anestesiados.

Research In Surgery. RUMIANTES (Terneros. Tambiénpuede utilizarse para otros animalesque pesen menosde 250 g. Dislocaci6ncervical manual Este método es muy satisfactorio para los ratones. Exanguinaci6n 55 . Ha/otano o Metoxiflurano Estos agentes se consideran satisfactorios pero pueden irritar las mucosas (ver otras especies). La inyección intravenosa es más difícil y larga pero es eficaz en manos de una persona con práctica en el manejo de ratones. Debe tenersela precaución de realizarse en una sala distinta a la que están el resto de animales a sacrificar. o un objeto de metalcontra la nuca. en estecaso es mejor que se realice la eutanasiacon CO2 que con barbitúricos u otros fánnacos para evitar el envenenamiento secundario de los animales y pájaros de los zoos. o necesitar más tiempo que una cámara. Esto se logra separando el animal del agente por medio de una pantalla de red metálica.Puedeque tambiénse disloquenlas vértebras torácicas. Un método alternativo para efectuar la eutanasiade los cobayas consiste en cogerlos por la cabezadesde la dirección cranealy dandoun chasquido rápido. hámsters y ratones que en las ratas. y el animal no presenta síntomas de lucha.humanitario.Este procedimientoesmás dificil de efectuaren los hámsters y las cobayasdebido a que el cuello es más corto. intraperitoneal. sobre todo con la administración de pentobarbital por vía intraperi tonea!. Se colocanlos dedospulgar e índice.y la piel del cuello y hombros es más flácida. Julio 1990 guinaci6n. Métodos Parenterales Vías intravenosa. la contusióncranealo el aturdimientoelécbico. pero puede que el personal de laboratorio lo considere desagradable. Disparo con "martillo neumático" (captive bolt) Los "captive bolt". Este método es más difícil de usar en los cobayas. Los roedores neonatos tienen más resistencia al CO2 que los animales mayores. un trozo de madera. La decapitación es desagradable y peligrosa para el operador pero su uso es corriente para los estudios farmacológicos. El paro respiratorio se induce con 150-200 mg/Kg por administración intraperitoneal. Es un métodopoco estético. Ninguno de estos agentes debe entrar en contacto con el animal en su forma líquida. No se recomiendacomo medio primariopara realizarla eutanasia.o un lápiz. Suplemento 5. puestoque puederealizarse la eutanasia simultánea de varios ratones. intratorácica e intracardíaca:BarbitlÚicos El pentobarbital sódico es el agente que se utiliza más corrientemente. Ganado. Cámara de Eter. en 30 s se produce un paro cardíaco. Estos métodos se uúlizan más bien en mataderos en los que se sacrifican un gran número de animales. Métodos por Inhalación Cámara de dióxidode carbono Este es un método seguro.to al cráneo y enfocado hacia el centro del cerebro. bien penetrantes o no-penetrantes. se disparan por medio de pólvora o aire comprimido. la cual puede cargarse anteriormente y abrirse desde arriba. económicoy La exanguinación se utiliza de manerasecundaria al disparocon "martillo neumático". Pueden colocarse las jaulas en una cámara grande o en una bolsa de plástico que luego se llena de CO2' Este último método puede utilizar más CO2. El éter es explosivo y está contraindicado si se están realizando estudios de lípidos. Decapitaci6n por guillotina Se reserva únicamente en aquellos casos en los que se contraindican los fármacos.comounlatigazo. Hay que examinar los animales cuidadosamente para asegurar el paro cardíaco.toracotomía.u otro procedimiento. La ruta intraperitoneal es más fácil si se úene que efectuar la eutanasiaa varios animales a la vez o si el animal es difícil de manejar.Esta técnicase utiliza principalmente en ratas jóvenes. La efectividad del métodopuedeverificarseseparando los tejidoscervicales. Dislocaci6n cervical con un emasculador de Burdizzo rápido. ratas u otros animales pequeftos. que se considera ideal para los roedores. Estemétodo tambiénse utiliza en ratonesy otros animalespequeliosoLas ratas puedenenvolverseen una toalla antesde darles un golpe en la nucao contrauna pila o mesa. Algunos laboratorios guardan los roedores sobrantes para los parques zoológicos locales. No debe dispararse la pistola si el animal mueve la cabeza. Los recipientes que se utilizan para efectuar la eutanasia de los roedores con éter deben ser preferentementede cristal en vez de plástico. Los electrodos deben colocarsepara que pase la corriente por el cerebro. El coste y la exposición del personal son las desventajas de estos agentes.y además deberealizarlo siempre personal entrenado.Cabras y Ovejas) Métodos Físicos La Electrocución o Aturdimiento Eléctrico Estos métodos parecen ser más aceptables con las especies bovinas y equinas. La cámara debe situarse en un área bien ventilada. y sobre todo debe limpiarse el material y el banco utilizado cada vez que se sacrifique un animal. los músculos del cuello son más fuertes. El halotano es el más rápido. Este método es aceptable en un matadero. El animal debe estar correctamente sujeto y el canón de la pistola debe situarse en ángulo ra. ratas y jerbos. Las t&:nicas en las que la corriente pasa por el corazón en vez de por el cerebro no se consideran humanitarias.apretandofmnementecontrauna superficiedura como una mesapara realizarla maniobra. La.~vías intratorácicas e intracardiales pueden resultar dolorosas y serecomiendan sólo para animales a los que se haya administrado un sedante.

(ed. Calvo Bermúdez D. Puede utilizarse la ruta intraperitoneal o puede administrarse la ketamina antesde la inyección intravenosa para facilitar la administración de pentobarbital. C. Esto puede combinarse con la exanguinación. El caftóndebedirigirsehaciael cerebrodesdeun punto centrailigeramente por arribade la líneaentrelos ojos. Sainz. L. 554-561. Preanesthesia.M. (eds. sulfato de magnesio (15 g). New York. In: Fox. Y pentobarbitaI sódico (6. Disparo con "martillo neumático" Método pór Inhalación Cámara deEutanasia: Dióxidode carbono Seha utilizado el CO2 en concentraciones del 65-90% para inmovilizar y narcotizar los cerdos durante varios añosen los mataderos con un éxito variable.London. El paro cardiorespiratorio también puede inducirse con efectividad con la administración endovenosa de una solución de hidrato de cloral (30 g). and Loew.) (1983). In: The UFAW HandbooK on the Care and Managament o/ Laboratory Animals. and Ray. Bolant Hernández MA.) (1982).D.). 158-166. Métodos por Inhalación Máscara o Cono de Eutanasia: Halotano y Metoxifl ur ano Vias intramuscular y subcutánea: Hidrocloruro de Sepuedepracticarla eutanasia enlas ovejas(corderos) ketamina o cabras(cabritos)pequeftos. Este método se utiliza únicamentecuando estécon- BIBLIOGRAFIA Clifford. J. (eds.) 4th ed. (1972). Scott. Laboratory Anima/s. intraperitoneal. GimenoForner L.. Cejalvo Lapeña L. Green. pp 237-241. situándoles la cabezaen un Este es un tranquilizante excelentepara el cerdo y cono o máscara. Métodos Parenterales Vfas inlravenosa. B./NC.. pp. 253-258. En: Animales de LAboratorio.de cualquier forma suele ser un método de utilidad para los cerdos pequeftos en el laboratorio. WN.G. Garc{a de Osma. (1978). Academic Press. Anesthesia.Este métodono serecomienda para los facilita la inyección intravenosa del pentobarbitalo la animales másgrandes eutanasia por mediosfísicos u otros mediosquímicos. traindicado el usode fánnacos. Livingstone. In: Animal Anesthesia. Madrid. ovejas y cabras que se utilicen en la investigación quirúrgica.J. Laboratory Animal Medicine. Métodos elúanásicosespecialmente recomendados en los animales de laboratorio. J L. D.M. BJ. Analgesia and Elúhanasia. Gime1lO F orner J M.. pp.C. intratorácica e inlracardfaca:Barbitúricos El pentobarbital sódico (100 mg/Kg) es un agente anestésico muy útil para el cerdo. P. toracotomía y otros medios.La Eutanasiaen los Animales de Laboratorio Métodos Parenterales Vfaintravenosa: Barbitúricos El pentobarbitaI sódico (100 mg/Kg) inyectado vía yugular es rápido y bien tolerado por los terneros.LTD. Uoris Cars( 56 . UFAW (eds. Cohen. Instituto de InvestigacionesAgrarias. Churchill. F.6 g) en 1000 mI de agua. Es difícil administrar este agente vía intravenosa en cerdos pequeiios. CERDO Métodos Físicos AturdimientoEléctrico Este método seha mostradoefectivo cuandosetiene disponibleun equipamiento especial. pp.H. y Compaire. Euthanasia.

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