ANALISIS DE AGUAS

Mtodos de Muestreo Determinacin de la Demanda Bioqumica de Oxgeno DBO5 Determinacin de la Demanda Bioqumica de Oxgeno DBO5, Mtodo Respiromtrico Determinacin de la DQO Determinacin de la Demanda Qumica de Oxgeno DQO, Mtodo Simplificado Determinacin de Slidos Sedimentables SS Determinacin de los Slidos Suspendidos Totales SST Determinacin de Slidos Disueltos Totales TDS Determinacin de Tensoactivos Aninicos (Detergentes) Determinacin de Aceites y Grasas Determinacin de Coliformes Totales Determinacin de Coliformes Fecales Determinacin del pH Determinacin del Color Determinacin de la Turbidez

INTERPRETACION DE ANALISIS DE SUELOS

Interpretacin del Anlisis del Sodio en Suelos

INTERPRETACION DE ANALISIS DE AGUAS

Interpretacin de Anlisis de Aguas: Parmetros Ambientales Interpretacin de Anlisis de Aguas para Riego

ANALISIS DE NEMATODOS
Preparacin de la Muestra (Extraccin y Concentracin por el mtodo del tamizado)

CONTROL DE CALIDAD
Medicin de la Actividad de la Poliacrilamida (PAM) Determinacin de Acido Fosforoso en Fosfitos Determinacin de Acido Fosforoso y Fosfitos en Material Vegetal

METODOS DE MUESTREO
Metodos de Muestreo Foliar Muestreo Foliar en Rosas Muestreo en Foliar Clavel

MONTAJE NUEVO LABORATORIO

Laboratorio del ITP

TOMA Y PRESERVACIN DE MUESTRAS CDIGO GENERAL 1. INTRODUCCION La recoleccin de las muestras depende de los procedimientos analticos empleados y los objetivos del estudio. El objetivo del muestreo es obtener una parte representativa del material bajo estudio (cuerpo de agua, efluente industrial, agua residual, etc.) para la cual se analizaran las variables fisicoqumicas de inters. El volumen del material captado se transporta hasta el lugar de almacenamiento (cuarto fro, refrigerador, nevera, etc.), para luego ser transferido al laboratorio para el respectivo anlisis, momento en el cual la muestra debe conservar las caractersticas del material original. Para lograr el objetivo se requiere que la muestra conserve las concentraciones relativas de todos los componentes presentes en el material original y que no hayan ocurrido cambios significativos en su composicin antes del anlisis. En algunos casos, el objetivo del muestreo es demostrar que se cumplen las normas especificadas por la legislacin (resoluciones de las autoridades ambientales). Las muestras ingresan al laboratorio para determinaciones especficas, sin embargo, la responsabilidad de las condiciones y validez de las mismas debe ser asumida por las personas responsables del muestreo, de la conservacin y el transporte de las muestras. Las tcnicas de recoleccin y preservacin de las muestras tienen una gran importancia, debido a la necesidad de verificar la precisin, exactitud y representatividad de los datos que resulten de los anlisis. 2. TIPOS DE MUESTRAS 1. Muestra simple o puntual: Una muestra representa la composicin del cuerpo de agua original para el lugar, tiempo y circunstancias particulares en las que se realiz su captacin. Cuando la composicin de una fuente es relativamente constante a travs de un tiempo prolongado o a lo largo de distancias sustanciales en todas las direcciones, puede decirse que la muestra representa un intervalo de tiempo o un volumen ms extensos. En tales circunstancias, un cuerpo de agua puede estar adecuadamente representado por muestras simples, como en el caso de algunas aguas de suministro, aguas superficiales, pocas veces, efluentes residuales. Cuando se sabe que un cuerpo de agua vara con el tiempo, las muestras simples tomadas a intervalos de tiempo precisados, y analizadas por separado, deben registrar la extensin, frecuencia y duracin de las variaciones. Es necesario escoger los intervalos de muestreo de acuerdo con la frecuencia esperada de los cambios, que puede variar desde tiempos tan cortos como 5 minutos hasta 1 hora o ms. Las 001 Cdigo

variaciones estacionales en sistemas naturales pueden necesitar muestreos de varios meses. Cuando la composicin de las fuentes vara en el espacio ms que en el tiempo, se requiere tomar las muestras en los sitios apropiados. 2. Muestras compuestas: En la mayora de los casos, el trmino "muestra compuesta" se refiere a una combinacin de muestras sencillas o puntuales tomadas en el mismo sitio durante diferentes tiempos. Algunas veces el trmino "compuesta en tiempo ( timecomposite)" se usa para distinguir este tipo de muestras de otras. La mayor parte de las muestras compuestas en el tiempo se emplean para observar concentraciones promedio, usadas para calcular las respectivas cargas o la eficiencia de una planta de tratamiento de aguas residuales. El uso de muestras compuestas representa un ahorro sustancial en costo y esfuerzo del laboratorio comparativamente con el anlisis por separado de un gran nmero de muestras y su consecuente clculo de promedios. Para estos propsitos, se considera estndar para la mayora de determinaciones una muestra compuesta que representa un perodo de 24 h. Sin embargo, bajo otras circunstancias puede ser preferible una muestra compuesta que represente un cambio, o un menor lapso de tiempo, o un ciclo completo de una operacin peridica. Para evaluar los efectos de descargas y operaciones variables o irregulares, tomar muestras compuestas que representen el periodo durante el cual ocurren tales descargas. No se debe emplear muestras compuestas para la determinacin de componentes o caractersticas sujetas a cambios significativos e inevitables durante el almacenamiento; sino hacer tales determinaciones en muestras individuales lo ms pronto posible despus de la toma y preferiblemente en el sitio de muestreo. Ejemplos de este tipo de determinaciones son: gases disueltos, cloro residual, sulfuros solubles, temperatura y pH. Los cambios en componentes como oxgeno o dixido de carbono disueltos, pH, o temperatura, pueden producir cambios secundarios en determinados constituyentes inorgnicos tales como hierro, manganeso, alcalinidad, o dureza. Las muestras compuestas en el tiempo se pueden usar para determinar solamente los componentes que permanecen sin alteraciones bajo las condiciones de toma de muestra, preservacin y almacenamiento. Tomar porciones individuales del cuerpo de agua en estudio en botellas de boca ancha cada hora (en algunos casos cada media hora o incluso cada 5 min.) y mezclarlas al final del perodo de muestreo, o combinarlas en una sola botella al momento de tomarlas. Si las muestras van a ser preservadas, agregar previamente las respectivas sustancias a la botella, de tal manera que todas las porciones de la composicin sean preservadas tan pronto como se recolectan. Algunas veces es necesario el anlisis de muestras individuales. Es deseable, y a menudo esencial, combinar las muestras individuales en volmenes proporcionales al caudal. Para el anlisis de aguas residuales y efluentes, por lo general es suficiente un volumen final de muestra de 2 a 3 L. Para este propsito existen muestreadores automticos, que no deben ser empleados a menos que la muestra sea preservada; limpiar tales equipos y las botellas diariamente, para eliminar

el crecimiento biolgico y cualquier otro depsito. 3. Muestras integradas: Para ciertos propsitos, es mejor analizar mezclas de muestras puntuales tomadas simultneamente en diferentes puntos, o lo ms cercanas posible. Un ejemplo de la necesidad de muestreo integrado ocurre en ros o corrientes que varan en composicin a lo ancho y profundo de su cauce. Para evaluar la composicin promedio o la carga total, se usa una mezcla de muestras que representan varios puntos de la seccin transversal, en proporcin a sus flujos relativos. La necesidad de muestras integradas tambin se puede presentar si se propone un tratamiento combinado para varios efluentes residuales separados, cuya interaccin puede tener un efecto significativo en la tratabilidad o en la composicin. La prediccin matemtica puede ser inexacta o imposible, mientras que la evaluacin de una muestra integrada puede dar informacin ms til. Los lagos naturales y artificiales muestran variaciones de composicin segn la localizacin horizontal y la profundidad; sin embargo, estas son condiciones bajo las cuales las variaciones locales son ms importantes mientras que los resultados promedio y totales no son especialmente tiles. En tales casos se deben examinar las muestras separadamente antes que integrarlas. La preparacin de muestras integradas requiere generalmente de equipos diseados para tomar muestras de una profundidad determinada sin que se contaminen con la columna de agua superior. Generalmente se requiere conocer el volumen, movimiento, y composicin de varias partes del cuerpo de agua a ser estudiado. La toma de muestras integradas es un proceso complicado y especializado que se debe describir adecuadamente en el plan de muestreo. 3. CONTROL Y VIGILANCIA DEL MUESTREO, PRESERVACIN Y ANLISIS El proceso de control y vigilancia del muestreo, preservacin y anlisis ( chain-of custody procedure) es esencial para asegurar la integridad de la muestra desde su recoleccin hasta el reporte de los resultados; incluye la actividad de seguir o monitorear las condiciones de toma de muestra, preservacin, codificacin, transporte y su posterior anlisis. Este proceso es bsico e importante para demostrar el control y confiabilidad de la muestra no slo cuando hay un litigio involucrado, sino tambin para el control de rutina de las muestras. Se considera que una muestra est bajo la custodia de una persona si est bajo su posesin fsica individual, a su vista, y en un sitio seguro. Los siguientes procedimientos resumen los principales aspectos del control y vigilancia de las muestras. 1. Etiquetas. Para prevenir confusiones en la identificacin de las muestras, pegar al frasco de muestra antes de o en el momento del muestreo, papel engomado o etiquetas adhesivas en las que se anote, con tinta a prueba de agua, por lo menos la siguiente informacin: nmero de muestra, nombre del recolector, fecha, hora y lugar de recoleccin, y preservacin realizada. 1. Sellos. Para evitar o detectar adulteraciones de las muestras, sellar los recipientes con papel autoadhesivo, en los que se incluya por lo menos la siguiente informacin: nmero de muestra (idntico al nmero en la etiqueta), nombre del recolector, fecha y

1.

1.

1.

1.

1.

hora de muestreo; tambin son tiles los sellos de plstico encogible. Adherir el sello de tal manera que sea necesario romperlo para abrir el recipiente de la muestra, despus de que el personal muestreador ceda la custodia o vigilancia. Libro de campo. Registrar toda la informacin pertinente a observaciones de campo o del muestreo en un libro apropiado, en el que se incluya como mnimo lo siguiente: propsito del muestreo; localizacin de la estacin de muestreo, o del punto de muestreo si se trata de un efluente industrial, en cuyo caso se debe anotar la direccin y el nombre del representante de la empresa; tipo de muestra y mtodo de preservacin si es aplicable. Si se trata de una muestra de aguas residuales, identificar el proceso que produce el efluente. Estipular tambin la posible composicin de la muestra y las concentraciones; nmero y volumen de muestra tomados; descripcin del punto y mtodo de muestreo; fecha y hora de recoleccin; nmero(s) de identificacin del (los) recolector(es) de la muestra; distribucin y mtodo de transporte de la muestra; referencias tales como mapas o fotografas del sitio de muestreo; observaciones y mediciones de campo; y firmas del personal responsable de las observaciones. Debido a que las situaciones de muestreo varan ampliamente, es esencial registrar la informacin suficiente de tal manera que se pueda reconstruir el evento del muestreo sin tener que confiar en la memoria de los encargados. Guardar el libro en un sitio seguro. Registro del control y vigilancia de la muestra. Diligenciar el formato de control y vigilancia de cada una de las muestras o grupo de muestras, las cuales deben estar acompaadas de este formato; en l se incluye la siguiente informacin: nmero(s) de la(s) muestra(s); firma del recolector responsable; fecha, hora y sitio de muestreo; tipo de muestra; firmas del personal participante en el proceso de control, vigilancia y posesin de las muestras y las fechas correspondientes. Formato de solicitud de anlisis. La muestra debe llegar al laboratorio acompaada de una solicitud de anlisis; el recolector completa la parte del formato correspondiente a la informacin de campo de acuerdo con la informacin anotada en el libro de campo. La parte del formato correspondiente al laboratorio la completa el personal del laboratorio, e incluye: nombre de la persona que recibe la muestra, nmero de muestra en el laboratorio, fecha de recepcin, y las determinaciones a ser realizadas. Entrega de la muestra en el laboratorio. Las muestras se deben entregar en el laboratorio lo ms pronto que sea posible despus del muestreo, en el transcurso de dos das como mximo; si el tiempo de almacenamiento y preservacin es menor, debe planificarse el procedimiento para asegurar su entrega oportuna en el laboratorio. En caso de que las muestras sean enviadas por correo a travs de una empresa responsable, se debe incluir el formato de la compaa transportadora dentro de la documentacin del control y vigilancia de la muestra. La solicitud de anlisis debe estar acompaada por el registro completo del proceso de control y vigilancia de la muestra. Entregar la muestra a la oficina de recepcin en el laboratorio; el recepcionista a su vez debe firmar el formato de vigilancia y control, incluyendo la fecha y hora de entrega. Recepcin y registro de la muestra. En el laboratorio, el recepcionista inspecciona la condicin y el sello de la muestra, compara la informacin de la etiqueta y el sello con el registro o formato del proceso de control y vigilancia, le asigna un nmero o cdigo para su entrada al laboratorio, la registra en el libro del laboratorio, y la guarda en el cuarto o cabina de almacenamiento hasta que sea asignada a un analista. Asignacin de la muestra para anlisis. El coordinador del laboratorio asigna la

muestra para su anlisis. Una vez la muestra est en el laboratorio, el auditor y los analistas son responsables de su cuidado y vigilancia. 4. MTODOS DE MUESTREO 1. Muestreo manual: El muestreo manual requiere de un mnimo de equipo, pero para programas de muestreo a gran escala o de rutina puede ser excesivamente costoso y de manejo dispendioso. 2. Muestreo automtico: Los equipos de muestreo automtico pueden eliminar errores humanos, inherentes al muestreo manual, reducen los costos y permiten aumentar la frecuencia del muestreo. El muestreador no debe contaminar las muestras, es el caso de los recipientes plsticos incompatibles para almacenar muestras que contienen compuestos orgnicos y que solubilizan los componentes plsticos. En algunos casos un muestreador manual con recipiente de vidrio puede resultar ms adecuado. Programar el muestreador automtico de acuerdo con las especificaciones del mismo y las necesidades del muestreo, ajustar cuidadosamente las velocidades de la bomba y los tamaos de los tubos segn el tipo de muestra a tomar. 5. RECIPIENTES PARA LAS MUESTRAS Los recipientes para las muestras generalmente estn hechos de plstico o de vidrio, y se utilizan de acuerdo con la naturaleza de la muestra y sus componentes. Los recipientes de vidrio son inconvenientes para muestras destinadas a ser analizadas por metales traza; el vidrio libera silicio y sodio, a su vez, pueden adsorber trazas de metales contenidas en la muestra. Por otra parte los recipientes de plstico -excepto los teflonados (politetrafluoroetileno, TFE)- deben descartarse para muestras que contengan compuestos orgnicos, estos materiales liberan sustancias del plstico (por ejemplo, steres de ftalato del plstico) y a su vez disuelven algunos compuestos orgnicos voltiles de la muestra. Las tapas de los envases, generalmente de plstico, tambin pueden ser un problema, por lo que se debe usar empaques o sptum de metal o TFE. Para situaciones crticas, es adecuada la inclusin de un blanco del recipiente para demostrar la ausencia de interferencias. Usar los de vidrio para todos los anlisis de compuestos orgnicos voltiles, semivoltiles, plaguicidas, PCBs, aceites y grasas. 6. PRECAUCIONES GENERALES Uno de los requerimientos bsicos en el programa de muestreo es una manipulacin ausente de procesos de deterioro o de contaminacin antes de iniciar los anlisis en el laboratorio; en el muestreo de aguas, antes de colectar la muestra es necesario purgar el recipiente dos o tres veces, a menos que contenga agentes preservativos. Dependiendo del tipo de determinacin, el recipiente se llena completamente (esto para la mayora de las determinaciones de compuestos orgnicos), o se deja un espacio para aireacin o mezcla (por ejemplo en anlisis microbiolgicos); si el recipiente contiene preservativos no puede ser rebosado, lo cual ocasionara una prdida por dilucin. Excepto cuando el muestreo tiene como objetivo el anlisis de

compuestos orgnicos, se debe dejar un espacio de aire equivalente a aproximadamente 1% del volumen del recipiente, para permitir la expansin trmica durante su transporte. Cuando las muestras colectadas contienen compuestos orgnicos o metales traza, se requieren precauciones especiales, debido a que muchos constituyentes estn presentes en concentraciones de unos pocos microgramos por litro y se puede correr el riesgo de una prdida total o parcial, si el muestreo no se ejecuta con los procedimientos precisos para la adecuada preservacin. Las muestras representativas se pueden obtener slo colectando muestras compuestas en periodos de tiempo predeterminados o en diferentes puntos de muestreo; las condiciones de recoleccin varan con las localidades y no existen recomendaciones especficas que puedan ser aplicables en forma general. Algunas veces es ms informativo analizar varias muestras en forma separada en lugar de obtener una muestra compuesta, ya que es posible aparentar su variabilidad, los mximos y los mnimos. En trminos generales, la muestra colectada debe asegurar que los resultados analticos obtenidos representan la composicin actual de la misma. Los siguientes factores afectan los resultados: presencia de material suspendido o turbidez, el mtodo seleccionado para su remocin, los cambios fisicoqumicos en el almacenamiento o por aireacin. Por consiguiente es necesario disponer de los procedimientos detallados (como filtracin, sedimentacin, etc.) a los que se van a someter las muestras antes de ser analizadas, especialmente si se trata de metales traza o compuestos orgnicos en concentraciones traza. En algunas determinaciones como los anlisis para plomo, estos pueden ser invalidados por la contaminacin que se puede presentar en tales procesos. Cada muestra debe ser tratada en forma individual, teniendo en cuenta las sustancias que se van a determinar, la cantidad y naturaleza de la turbidez presente, y cualquier otra condicin que pueda influenciar los resultados. La seleccin de la tcnica para recolectar una muestra homognea debe ser definida en el plan de muestreo. Generalmente, se separa cualquier cantidad significativa de material suspendido por decantacin, centrifugacin o un procedimiento de filtracin adecuado. Para el anlisis de metales la muestra puede ser filtrada o no, o ambas, si se requiere diferenciar el total de metales y los disueltos presentes en la matriz. 7. NUMERO DE MUESTRAS Debido a las variaciones aleatorias tanto del procedimiento analtico como la presencia de un constituyente en el punto de muestreo, una muestra simple puede ser insuficiente para obtener el nivel deseado de incertidumbre. Si la desviacin estndar de todo el proceso es conocida, el nmero de muestras requeridas puede ser calculado a travs de la siguiente relacin: N>= (ts/U)^2

donde: N = nmero de muestras, t = prueba t de Student para un nivel de confiabilidad dado, s = desviacin estndar global, y U = nivel aceptable de incertidumbre.

El clculo del nmero de muestras se puede consultar en la Figura 1060:1, pgina 123, Standard Methods, 1995.

TABLA 1. RECOMENDACIONES PARA EL MUESTREO Y PRESERVACIN DE MUESTRAS DE ACUERDO CON LAS MEDICIONES 1 Determinacin Recipiente2 Volumen Tipo de Preservacin4 mnimo muestra3 de muestra, mL P, V 100 Alcalinidad Boro Bromuro P, V 200 P 100 P, V 100 Carbono orgnico, V total s, c 100 Anlisis 28 d inmediato; o refrigerar y agregar H3PO4 o H2SO4 hasta pH<2 Agregar NaOH 14 d7 hasta pH>12, refrigerar en la oscuridad6 Agregar 100 mg 14 d7 Na2S2O3/L Anlisis inmediato s, c No requiere 28 d s, c No requiere 6 meses s Refrigerar 14 d s Refrigerar Almacenamiento mximo recomendado5

Acidez

14 d

Cianuro: Total

P, V 500

s, c

P, V Clorable Cloro, residual P, V 500 500

s, c s

Clorofila Cloruro Color Compuestos orgnicos:

P, V 500 P, V 50 P, V 500

s, c s, c s, c

30 d en oscuridad No requiere Refrigerar

la 30 d 28 d 48 h

P, V Sustancias activas al azul de metileno 250

s, c

Refrigerar

48 h

V(S), tapn Plaguicidas de TFE 1000

s, c

Refrigerar; 7 d hasta la extraccin agregar 1000 mg cido ascrbico/L si hay cloro residual Refrigerar; 40 d despus de extraer agregar H2SO4 hasta pH<2 Refrigerar; 14 d agregar HCl hasta pH<2; agregar 1000 mg cido ascrbico/L si hay cloro residual Refrigerar Refrigerar Anlisis inmediato Anlisis inmediato 28 d 48 h

P, V Fenoles 500 V, tapn de TFE 2 40

s, c

Purgables por purga y trampa

Conductividad DBO Dixido carbono Dixido de cloro DQO

P, V 500 P, V 1000 de P, V 100 P, V 500 P, V 100

s, c s s s s, c

Analizar lo ms 28 d pronto posible, o agregar H2SO4 hasta pH<2; refrigerar

Dureza Fluoruro Fosfato

P, V 100 P 300 V(A) 100

s, c s, c s

Agregar HNO3 6 meses hasta pH<2 No requiere 28 d

Para fosfato 48 h disuelto filtrar inmediatamente; refrigerar

Gas digestor de V, botella lodos de gases Grasa y aceite V, boca ancha 1000 calibrado 500 P (A), V(A) Cromo VI P (A), V(A) Cobre, colorimetra P (A), V(A) Mercurio Nitrgeno: P, V Amoniaco 500 s, c 500 s, c 300 s s, c

Agregar HCl 28 d hasta pH<2, refrigerar Filtrar8, HNO3 pH<2 agregar 6 meses hasta 24 h

Metales, general

Refrigerar

Agregar HNO3 28 d hasta pH<2, 4 C, refrigerar Analizar lo ms 28 d pronto posible, o agregar H2SO4 hasta pH<2; refrigerar Analizar lo ms 48 h (28 d para pronto posible o muestras cloradas) refrigerar Agregar H2SO4 28 d hasta pH<2, refrigerar Almacenamiento mximo recomendado5

P, V Nitrato P, V Nitrato nitrito Determinacin + 200 100

s, c

s, c

Recipiente2 Volumen Tipo de Preservacin4 mnimo muestra3 de muestra, mL

P, V Nitrito P, V Orgnico, Kjeldahl Olor V 500 Oxgeno, disuelto: G, botella DBO 300 Electrodo Winkler 500 100

s, c

Analizar lo ms 48 h pronto posible o refrigerar Refrigerar; 28 d agregar H2SO4 hasta pH<2 Analizar lo ms pronto posible; refrigerar

s, c

s Anlisis inmediato

La titulacin 8 h puede aplazarse despus de la acidificacin V 1000 P, V 50 V 500 s s s Anlisis inmediato Anlisis inmediato

Ozono pH Sabor

Analizar lo ms pronto posible; refrigerar Anlisis inmediato o usar sello de cera Refrigerar, congelar Refrigerar Refrigerar no 28 d 2-7 d, ver protocolo 28 d

Salinidad

V, sello de cera 240 P 200 P, V 200 P, V 100 P, V 100

Slica Slidos Sulfato Sulfuro

s, c s, c s, c s, c

Refrigerar; 7d agregar 4 gotas de acetato de zinc 2N/100 mL; agregar NaOH hasta pH>9 Anlisis inmediato

Temperatura

P, V

Turbidez

P, V 100

s, c

Analizar el 48 h mismo da; para ms de 24 h guardar en oscuridad, refrigerar Anlisis inmediato

Yodo

P, V 500

s, c

1 Para detalles adicionales ver el texto y los protocolos respectivos. Para las determinaciones no enumeradas, usar recipientes de vidrio o plstico; preferiblemente refrigerar durante el almacenamiento y analizar lo ms pronto posible. 2 P = plstico (polietileno o equivalente); V = vidrio; V(A) o P(A) = enjuagado con HNO 3 1+1; V(B) = vidrio, enjuagado con solventes orgnicos o secado en estufa. 3 s = simple o puntual; c = compuesta. 4 Refrigerar = almacenar a 4 C en ausencia de luz. La preservacin de la muestra debe realizarse en el momento de la toma de muestra. Para muestras compuestas, cada alcuota debe preservarse en el momento de su recoleccin. Cuando el uso de un muestreador automtico haga imposible la preservacin de cada alcuota, las muestras deben mantenerse a 4 C hasta que se complete la composicin. 5 Las muestras deben ser analizadas lo ms pronto posible despus de su recoleccin. Los tiempos listados son los periodos mximos que pueden transcurrir antes del anlisis para considerarlo vlido. Las muestras pueden dejarse por periodos ms prolongados solo si su monitoreo en el laboratorio ha demostrado que la muestra en estudio es estable durante un mayor tiempo. Algunas muestras pueden no ser estables por el periodo mximo dado en la tabla. Si se envan las muestras por correo, deben cumplir con las regulaciones de transporte de materiales peligrosos (consultar EPA Methods...) 6 Si la muestra est clorada, consultar su pretratamiento en el protocolo o en Standard Methods. 7 El mximo tiempo de almacenamiento es de 24 h si est presente el sulfuro, el cual se puede detectar mediante papel con acetato de plomo antes de ajustar el pH; si el sulfuro est presente, puede removerse por adicin de nitrato de cadmio en polvo hasta que se obtenga prueba negativa; despus se filtra la muestra y se adiciona NaOH hasta pH 12. 8 Para metales disueltos las muestras deben filtrarse inmediatamente en el sitio de muestreo, antes de adicionar el cido. 8. CANTIDAD DE MUESTRA Para la mayora de anlisis fsicos y qumicos tomar 2 L de muestra. Para determinados anlisis puede ser necesario un mayor volumen de muestra. Para pruebas qumicas, bacteriolgicas y microscpicas se deben tomar muestras por

separado debido a que los mtodos de recoleccin y manejo son diferentes. Colectar siempre un volumen de muestra suficiente en el recipiente adecuado que permita hacer las mediciones de acuerdo con los requerimientos de manejo, almacenamiento y preservacin. 9. PRESERVACIN DE LA MUESTRA Es prcticamente imposible la preservacin completa e inequvoca de las muestras de aguas residuales domsticas e industriales y de aguas naturales. Independientemente de la naturaleza de la muestra, nunca puede lograrse la completa estabilidad de todos sus constituyentes; en el mejor de los casos, las tcnicas de preservacin solamente pueden retardar los cambios qumicos y biolgicos, que continan inevitablemente despus de que la muestra se retira de su fuente. 1. Naturaleza de los cambios en la muestra: Los cambios qumicos son funcin de las condiciones fsicas y suceden en la estructura de ciertos constituyentes. Los cationes metlicos pueden precipitarse como hidrxidos, formar complejos con otros constituyentes, e incluso algunos, tales como aluminio, cadmio, cromo, cobre, hierro, plomo, manganeso, plata y zinc, se pueden adsorber en las superficies de los recipientes (vidrio, plstico, cuarzo, etc.). Bajo determinadas condiciones oxidantes o reductoras, los iones pueden cambiar de estado de valencia; otros constituyentes se pueden disolver o volatilizar con el paso del tiempo. Los cambios biolgicos que tienen lugar en una muestra pueden cambiar la valencia de un elemento o radical; los constituyentes solubles pueden convertirse en materiales orgnicamente enlazados a las estructuras celulares; o la ruptura de las clulas puede liberar el material celular hacia la solucin. Los ciclos del nitrgeno y del fsforo son ejemplos de la influencia biolgica en la composicin de la muestra. La actividad microbiolgica puede ser responsable de cambios en el contenido de nitrato-nitritoamonio, disminucin de la concentracin de fenoles y de la DBO, o de la reduccin del sulfato a sulfuro. 2. Intervalo de tiempo entre la toma y el anlisis de muestras: Los resultados analticos son ms exactos en la medida que el tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y su anlisis sea menor, hecho especialmente cierto cuando las concentraciones de los analitos estn en el orden de g/L. Para evaluar ciertos constituyentes y parmetros fsicos, se requiere su anlisis inmediato en el campo. Para las muestras compuestas se registra el tiempo en el momento de finalizar la operacin de composicin. Los cambios provocados por el crecimiento de microorganismos se retardan por almacenamiento de la muestra en la oscuridad y a baja temperatura (<4 C pero sin congelar). Registrar el tiempo transcurrido hasta el momento del anlisis de la muestra, y la tcnica de preservacin aplicada. 3. Tcnicas de preservacin: Los mtodos de preservacin incluyen las siguientes operaciones: control del pH, adicin de reactivos, uso de botellas mbar y opacas, refrigeracin, filtracin y congelamiento; y obran para: (a) retardar la accin biolgica, (b) retardar la hidrlisis de los compuestos o complejos qumicos, (c) reducir la volatilidad de los constituyentes, y (d) reducir los efectos de absorcin.

Para minimizar la volatilizacin o biodegradacin de los constituyentes, guardar la muestra a baja temperatura sin congelacin. Antes del envo al laboratorio, es preferible empacar las muestras en hielo triturado o en sustitutos comerciales del hielo; evitar el uso de hielo seco debido a que puede alterar el pH de las muestras, adems de que las congela y puede causar la ruptura de los recipientes de vidrio. Las muestras compuestas deben mantenerse a 4 C, con hielo o un sistema de refrigeracin, durante el perodo de composicin. Analizar las muestras lo ms pronto posible despus de su llegada al laboratorio; si esto no es posible se recomienda, para la mayora de muestras, almacenamiento a 4 C. La adicin de preservativos qumicos slo es aplicable cuando estos no interfieren con los anlisis a realizarse, y deben agregarse previamente a la botella de muestra de tal manera que todas las porciones de muestra se preserven de inmediato. En ocasiones, cuando se hacen diferentes determinaciones en una muestra es necesario tomar diferentes porciones y preservarlas por separado, debido a que el mtodo de preservacin puede interferir con otra determinacin. Todos los mtodos de preservacin pueden ser inadecuados cuando se aplican a la materia en suspensin. El formaldehdo afecta la mayora de anlisis qumicos y no debe usarse como preservativo. En la Tabla 1 se dan los mtodos de preservacin recomendados para varios constituyentes; la estimacin del volumen de muestra requerido para su anlisis; el tipo de recipiente sugerido; y el tiempo mximo de almacenamiento recomendado para muestras preservadas en condiciones ptimas. Sin embargo, es imposible dar las reglas absolutas para prevenir todos los cambios posibles; en cada protocolo de anlisis de las variables fisicoqumicas se encuentra la informacin correspondiente. La confiabilidad de una determinacin analtica se apoya en la experiencia y buen criterio de la persona que toma la muestra. 10. AFORO DE CAUDALES Y EFLUENTES Una vez determinados el tipo de descarga y ubicacin del sitio donde se va a realizar la caracterizacin, se disea el plan de aforo y muestreo. En la determinacin de caudales debe adoptarse la forma ms prctica de aforar dependiendo del tipo de descarga que se tenga; si se hace necesario adecuar el sitio de muestreo, se deben dar las instrucciones para la implementacin de la adecuacin. Los factores que se han de tener en cuenta en el momento de seleccionar un sistema de medicin son los siguientes:

Tipo de conducto y accesibilidad. El intervalo de medida debe cubrir con la mejor precisin posible, los caudales mximo y mnimo previstos tericamente. Si el punto de medida recoge aguas pluviales e interesa determinar su caudal, habr que tener en cuenta la lluvia mxima registrada cada en la zona. Economa de compra, instalacin y servicio, as como de fcil puesta en marcha, comprobacin y ajuste.

Posibilidad de recuperacin una vez finalizada la serie de medidas, para su aplicacin en otros puntos. Debido a que los vertidos de aguas residuales se hacen por gravedad, el mtodo seleccionado deber producir la mnima prdida posible de carga. Distancia mnima a la que se encuentran todos aquellos servicios generales precisos para el funcionamiento de todos los aparatos de medida (aire a presin, corriente elctrica, etc.). Mxima sencillez de manejo y lectura. Caractersticas del agua residual a medir, y su influencia en el equipo (corrosin, abrasin, ataque qumico, taponamiento, etc.). Como norma general, todas las partes en contacto con el lquido deben estar totalmente protegidas, y en aquellos casos en que se puedan desprender gases o vapores, los equipos y el personal se separan de su accin lo ms lejos que sea posible, o bien se dotan con la proteccin adecuada. En el caso de utilizacin de aparatos comerciales, se valorar la experiencia, garanta y servicio posventa del proveedor.

1. Medicin volumtrica manual. La medicin del caudal se realiza de forma manual utilizando un cronmetro y un recipiente aforado. El procedimiento a seguir es tomar un volumen de muestra cualquiera y medir el tiempo transcurrido desde que se introduce a la descarga hasta que se retira de ella; la relacin de estos dos valores permite conocer el caudal en ese instante de tiempo. Se debe tener un especial cuidado en el momento de la toma de muestra y la medicin del tiempo, ya que es un proceso simultneo donde el tiempo comienza a tomarse en el preciso instante que el recipiente se introduce a la descarga y se detiene en el momento en que se retira de ella. Siendo Q = caudal en L/s, V = volumen en L, y t = tiempo en s, el caudal se calcula como: Q=V/t Este mtodo tiene la ventaja de ser el ms sencillo y confiable, siempre y cuando el lugar donde se realice el aforo garantice que al recipiente llegue todo el volumen de agua que sale por la descarga. Entre sus desventajas se cuenta que la mayora de veces es necesario adecuar el sitio de aforo y toma de muestras para evitar prdida de muestra en el momento de aforar; tambin se deben evitar represamientos que permitan la acumulacin de slidos y grasas. 2. Medicin en canales abiertos. El vertedero es un canal en el cual se coloca una represa cuyo rebosadero puede adoptar distintas formas; el lquido represado alcanzar distintas alturas en funcin del caudal, relacionadas por ecuaciones dependientes del tipo de vertedero, que puede ser rectangular, triangular o trapezoidal. Las ventajas de este tipo de vertederos radican en su fcil construccin, bajo costo, y buen rango de precisin en lquidos que no contengan slidos. Cuando la cabeza sobre un vertedero triangular es menor de 10 cm hay posibilidad de que se formen vacos, por lo tanto no se recomienda su uso. En los vertederos hay que tener especial cuidado debido a que estos al represar el agua van acumulando slidos y sustancias como grasas que interfieren en la calidad del agua y, en la

representatividad de la muestra. 3. Medicin por velocidad. Las canaletas se usan ms comnmente en canales abiertos donde:
o o o o o

La rata de flujo no pueda medirse adecuadamente por un vertedero. Haya una significante cantidad de partculas y otros materiales que podran llenar un vertedero. La capacidad de la cabeza hidrulica sea insuficiente para utilizar el vertedero. La velocidad de flujo de una canaleta puede ser establecida tal que, sedimentos y otros slidos pueden ser lavados a travs de ella. La instalacin de una canaleta puede ser relativamente ms cara que un vertedero. El diseo tpico de una canaleta debe incluir lo siguiente: las secciones rectas del canal deben estar corriente arriba de la entrada de la canaleta, el flujo debe ser bien distribuido a travs del canal, la velocidad corriente arriba del canal debe ser menor que la velocidad crtica, y la canaleta no debe estar sumergida y debe tener una descarga libre aguas abajo. 10.3.1. Tubo Venturi. Este medidor es una especie de tubo venturi abierto, que dispone de una garganta que produce una elevacin de nivel en funcin del caudal. Est formado por una seccin de entrada de paredes verticales convergentes y fondo a nivel, una garganta o estrechamiento de paredes paralelas y fondo descendente, y una seccin de salida con paredes divergentes y fondo ascendente. Los canales se definen por el ancho de la garganta; la canaleta debe ser construida rigurosamente con las dimensiones dadas, o de lo contrario su relacin cabeza-descarga de agua residual es invlida. Para la determinacin del caudal se precisa de la medicin de la altura del lquido, que se puede realizar de forma instantnea con slo una medida de altura. Sin embargo, existen diferentes tipos de instrumentos que permiten llevar a cabo esta medicin de forma continua, permitiendo determinar el caudal diario de una forma precisa, pudiendo acoplar esto a un indicador de registro grfico que se encarga de almacenar toda esta informacin. En las canaletas se pueden acoplar diferentes tipos de sensores que permiten registrar otro tipo de parmetros diferentes al caudal, como son pH y temperatura. El caudal se calcula como: Q = 4 W Han donde:

Q = Caudal, pies cbicos / segundo, Ha = altura del agua sobre la garganta, en pies, W = ancho de la canaleta en la seccin de la garganta, y n = 1,522 W0,026.
o

El tubo venturi tiene como ventajas: es autolavable, tiene una prdida de cabeza relativamente baja, el aumento de velocidad en la garganta impide la sedimentacin de partculas, tiene la habilidad de operar de forma aproximada sobre un intervalo amplio de descarga, tiene resistencia a los productos qumicos ya que se puede construir de diferentes materiales, y en el caso de instalaciones permanentes se puede construir en concreto vaciado. Su principal desventaja es que para la construccin se precisa de la adecuacin de un sitio de descarga, dado que debe poseer una inclinacin que permita la formacin de un flujo crtico en la garganta, y los costos de construccin van a depender de las caractersticas de la descarga, dado que estas influyen en el tipo de material de construccin como de las dimensiones en el diseo.

1. Otras tcnicas de medicin. Existen equipos de medicin electromagntica o por ultrasonido, que pueden ser consultados en la bibliografa. 9. QUMICO RESPONSABLE Elaboracin del Protocolo: Laboratorio de Qumica Ambiental Ideam Montaje de la Tcnica: Laboratorio de Qumica Ambiental Ideam 10. FECHAS Elaboracin del Protocolo: julio de 1997 Montaje de la Tcnica: Calibracin: Revisin:julio de 1997 11. REFERENCIAS Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. American Public Health Association, American Water Works Association, Water Pollution Control Federation. 19 ed., New York, 1995 Methods for Chemical Analysis of Water and Wastes. United States Environmental Protection Agency. Cincinnati, 1983.

12. BIBLIOGRAFA RODIER, J. Anlisis de Aguas: aguas naturales, aguas residuales, agua de mar. Omega, Barcelona, 1981. SAWYER, C.; McCARTY, P. Chemistry for Environmental Engineering. McGraw Hill, New York, 1996 ASOCIACION NACIONAL DE INDUSTRIALES. Manual de Caracterizacin de Aguas Residuales. ANDI, Medelln, 1997 GARAY, J., PANIZZO, L., LESMES, L.,RAMIREZ, G., SANCHEZ, J. Manual de Tcnicas Analticas de Parmetros Fsico-qumicos y Contaminantes Marinos. Tercera edicin. Centro de Investigaciones Oceanogrficas e Hidrogrficas. Cartagena, 1993

DEMANDA METODO DBO 5-das CDIGO GENERAL

BIOQUMICA

DE

OXGENO TRADICIONAL

007

Cdigo

1. SUMARIO Y APLICACIONES 1. La demanda bioqumica de oxgeno (DBO) es una prueba usada para la determinacin de los requerimientos de oxgeno para la degradacin bioqumica de la materia orgnica en las aguas municipales, industriales y en general residuales; su aplicacin permite calcular los efectos de las descargas de los efluentes domsticos e industriales sobre la calidad de las aguas de los cuerpos receptores. Los datos de la prueba de la DBO se utilizan en ingeniera para disear las plantas de tratamiento de aguas residuales. 2. La prueba de la DBO es un procedimiento experimental, tipo bioensayo, que mide el oxgeno requerido por los organismos en sus procesos metablicos al consumir la materia orgnica presente en las aguas residuales o naturales. Las condiciones estndar del ensayo incluyen incubacin en la oscuridad a 20C por un tiempo determinado, generalmente cinco das. Las condiciones naturales de temperatura, poblacin biolgica, movimiento del agua, luz solar y la concentracin de oxgeno no pueden ser reproducidas en el laboratorio. Los resultados obtenidos deben tomar en cuenta los factores anteriores para lograr una adecuada interpretacin.

3. Las muestras de agua residual o una dilucin conveniente de las mismas, se incuban por cinco das a 20C en la oscuridad. La disminucin de la concentracin de oxgeno disuelto (OD), medida por el mtodo Winkler o una modificacin del mismo, durante el periodo de incubacin, produce una medida de la DBO. 2. LIMITACIONES E INTERFERENCIAS 1. Existen numerosos factores que afectan la prueba de la DBO, entre ellos la relacin de la materia orgnica soluble a la materia orgnica suspendida, los slidos sedimentables, los flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o reducida, la presencia de compuestos azufrados y las aguas no bien mezcladas. Al momento no existe una forma de corregir o ajustar los efectos de estos factores. 2. DBO carboncea contra nitrogencea. La oxidacin de las formas reducidas del nitrgeno como amoniaco y nitrgeno orgnico, mediada por los microorganismos, ejercen una demanda nitrogencea, que ha sido considerada como una interferencia en la prueba; sin embargo, esta puede ser eliminada con la adicin de inhibidores qumicos. Cuando se inhiba la demanda nitrogencea de oxgeno, reportar los resultados como demanda bioqumica de oxgeno carboncea (DBOC5); cuando no se inhiba, reportar los resultados como DBO5. 1. Requerimientos de dilucin. Si el agua de dilucin es de baja calidad, su DBO aparecer como DBO de la muestra, efecto que ser amplificado por el factor de dilucin, y el resultado tendr una desviacin positiva. El mtodo de anlisis debe incluir agua de dilucin de verificacin y agua de dilucin como blanco para establecer su calidad, mediante la medicin del consumo de oxgeno con una mezcla orgnica conocida, generalmente glucosa y cido glutmico. La fuente del agua de dilucin puede ser: destilada a partir del agua de grifo, o agua libre de sustancias orgnicas biodegradables o bioinhibitorias tales como cloro o metales pesados. El agua destilada puede contener amoniaco o compuestos orgnicos voltiles; el agua desionizada tambin puede estar contaminada con compuestos orgnicos solubles lixiviados del lecho de la resina; el uso de destiladores con conductos o accesorios de cobre en las lneas de agua destilada pueden producir agua con cantidades excesivas de cobre, que acta como biocida. 3. TOMA Y PRESERVACIN DE MUESTRAS 1. Las muestras para determinacin de la DBO se deben analizar con prontitud; si no es posible, refrigerarlas a una temperatura cercana al punto de congelacin, ya que se pueden degradar durante el almacenamiento, dando como resultado valores bajos. Sin embargo, es necesario mantenerlas el mnimo tiempo posible en almacenamiento, incluso si se llevan a bajas temperaturas. Antes del anlisis calentarlas a 20C. 1. Muestras simples. Si el anlisis se emprende en el intervalo de 2 h despus de la reco-leccin no es necesario refrigerarlas; de lo contrario, guardar la muestra a 4C o menos; reportar junto con los resultados el tiempo y la

temperatura de almacenamiento. Bajo ningn concepto iniciar el anlisis despus de 24 h de haber tomado la muestra; las muestras empleadas en la evaluacin de las tasas retributivas o en otros instrumentos normativos, deben ser analizadas antes de que transcurran 6 h a partir del momento de la toma. 2. Muestras compuestas. Mantener las muestras a 4C o menos durante el proceso de composicin, que se debe limitar a 24 h. Aplicar los mismos criterios que para las muestras sencillas, contando el tiempo transcurrido desde el final del perodo de composicin. Especificar el tiempo y las condiciones de almacenamiento como parte de los resultados. 4. APARATOS 1. Botellas de incubacin para la DBO, de 250 a 300 mL de capacidad. Lavarlas con detergente, enjuagarlas varias veces, y escurrirlas antes de su uso. Para evitar la entrada de aire en la botella de dilucin durante la incubacin, se debe utilizar un sello de agua, que se puede lograr satisfactoriamente invirtiendo las botellas en un bao de agua o adicionando agua en el reborde cncavo de la boca de las botellas especiales para la DBO. Colocar una copa de papel o plstica o un capuchn metlico sobre la boca de la botella para reducir la evaporacin del sello de agua durante la incubacin. 2. Incubadora de aire o bao de agua, controlada termostticamente a 20 1C; excluir cualquier fuente luminosa para eliminar el proceso de produccin fotosinttica de OD. 5. REACTIVOS 1. Solucin tampn de fosfato: Disolver 8,5 g de KH 2PO4, 21,75 g de K2HPO4, 33,4 g de Na2HPO4.7H2O, y 1,7 g de NH 4Cl en aproximadamente 500 mL de agua destilada y diluir a 1 L. El pH debe ser 7,2 sin posteriores ajustes. Si se presenta alguna seal de crecimiento biolgico, descartar este o cualquiera de los otros reactivos. 2. Solucin de sulfato de magnesio: Disolver 22,5 g de MgSO 4.7H2O en agua destilada y diluir a 1 L. 3. Solucin de cloruro de calcio: Disolver 27,5 g de CaCl 2 en agua destilada y diluir a 1L. 4. Solucin de cloruro frrico: Disolver 0,25g de FeCl 3.6H2O en agua destilada, diluir a 1L 5. Soluciones cida y alcalina, 1 N, para neutralizacin de muestras custicas o cidas. 1) Acido. A un volumen apropiado de agua destilada agregar muy lentamente y mientras se agita, 28 mL de cido sulfrico concentrado; diluir a 1 L.

2) Alcali. Disolver 40 g de hidrxido de sodio en agua destilada y diluir a 1 L. 6. Solucin de sulfito de sodio: Disolver 1,575 g de Na 2SO3 en 1000 mL de agua destilada. Esta solucin no es estable y se debe preparar diariamente. 7. Inhibidor de nitrificacin: 2-cloro-6-(triclorometil)piridina. 8. Solucin de glucosa-cido glutmico: Secar a 103C por 1 h glucosa y cido glutmico grado reactivo. Disolver 150 mg de glucosa y 150 mg de cido glutmico en agua destilada y diluir a 1 L. Preparar inmediatamente antes de su uso. 9. Solucin de cloruro de amonio: Disolver 1,15 g de NH 4Cl en 500 mL de agua destilada, ajustar el pH a 7,2 con solucin de NaOH, y diluir a 1 L. La solucin contiene 0,3 mg de N/mL. 6. PROCEDIMIENTO 1. Preparacin del agua de dilucin. Colocar la cantidad de agua necesaria en una botella y agregar por cada litro, 1 mL de cada una de las siguientes soluciones: tampn fosfato, MgSO 4, CaCl2, y FeCl3. El agua de dilucin se puede inocular como se describe en 6.4; chequear y guardar como se describe en 6.2 y 6.3, de tal manera que siempre se tenga disponible. Llevar el agua de dilucin a una temperatura de 20C antes de su uso; saturarla con OD por agitacin en una botella parcialmente llena, por burbujeo de aire filtrado libre de materia orgnica, o guardarla en botellas lo suficientemente grandes con tapn de algodn, para permitir su saturacin. Emplear material de vidrio bien limpio para proteger la calidad del agua. Verificacin del agua de dilucin. Aplicar este procedimiento como una forma de verificacin bsica de la calidad del agua de dilucin. Si el agua consume ms de 0,2 mg de oxgeno/L se debe mejorar su purificacin o emplear agua de otra fuente; si se usa el procedimiento de inhibicin de la nitrificacin, el agua de dilucin inolculada, se debe guardar en un sitio oscuro a temperatura ambiente hasta que el consumo de oxgeno se reduzca lo suficiente para cumplir el criterio de verificacin. Confirmar la calidad del agua de dilucin almacenada que est en uso, pero no agregar semilla para mejorar su calidad. El almacenamiento no es recomendable cuando se va a determinar la DBO sin inhibicin de nitrificacin, ya que los organismos nitrificantes se pueden desarrollar en este perodo. Revisar el agua de dilucin para determinar la concentracin de amonio, y si es suficiente despus del almacenamiento; de lo contrario, agregar solucin de cloruro de amonio para asegurar un total de 0,45 mg de amonio como nitrgeno/L. Si el agua de dilucin no ha sido almacenada para mejorar su calidad, agregar la cantidad suficiente de semilla para producir un consumo de OD de 0,05 a 0,1 mg/L en cinco das a 20C. Llenar una botella de DBO con agua de dilucin, determinar el OD inicial, incubar a

20C por 5 das y determinar el OD final como se describe en 6.8 y 6.10. El OD consumido en este lapso no debe ser mayor de 0,2 mg/L y preferiblemente menor de 0,1 mg/L. Chequeo con glucosa-cido glutmico. Debido a que la prueba de la DBO es un bioensayo, sus resultados pueden estar muy influenciados por la presencia de sustancias txicas o por el uso de semillas de mala calidad. Muchas veces el agua destilada puede estar contaminada con cobre, o algunos inculos de aguas residuales pueden ser relativamente inactivos, y si se emplean tales aguas o inculos siempre se van a obtener bajos resultados. Controlar peridicamente la calidad del agua de dilucin, la efectividad de las semillas y la tcnica analtica, por mediciones de la DBO para compuestos orgnicos puros y muestras con adiciones conocidas. En general, para determinaciones de la DBO que no requieran una semilla adaptada, usar como solucin estndar de chequeo una mezcla de 150 mg de glucosa/L y 150 mg de cido glutmico/L. La glucosa tiene una velocidad de oxidacin excepcionalmente alta y variable, pero cuando es empleada con cido glutmico se estabiliza, y es similar a la obtenida con aguas residuales municipales. Si un agua residual contiene un constituyente mayoritario identificable, que contribuye a la DBO, usar este compuesto en remplazo de la mezcla de glucosa-cido glutmico. Determinar la DBO5 a 20C de una dilucin al 2% de la solucin estndar de chequeo glucosa-cido glutmico mediante las tcnicas descritas en los numerales 6.4 a 6.10. Evaluar los datos como se describe en la seccin de Precisin. Inoculacin. 1. Origen de las semillas o inculo. Es necesario que en la muestra est presente una poblacin de microorganismos capaces de oxidar la materia orgnica biodegradable. Las aguas residuales domsticas no cloradas, los efluentes no desinfectados de plantas de tratamiento biolgico, y las aguas superficiales que reciben descargas residuales contienen poblaciones satisfactorias de microorganismos. Algunas muestras no contienen una poblacin microbiana suficiente (por ejemplo, efluentes industriales sin tratamiento, aguas desinfectadas, efluentes con elevada temperatura o con valores extremos de pH), por tanto deben inocularse por adicin de una poblacin adecuada de microorganismos. La semilla o inculo preferible es el efluente de un sistema de tratamiento biolgico, en su defecto, el sobrenadante de aguas residuales domsticas despus de dejarlas decantar a temperatura ambiente por lo menos 1 h pero no ms de 36 h. Cuando se emplee el efluente de un proceso de tratamiento biolgico, se recomienda aplicar el procedimiento de inhibicin de la nitrificacin. Algunas muestras pueden contener materiales no degradables a las tasas normales de trabajo de los microorganismos; inocular tales muestras con

una poblacin microbiana adaptada, obtenida a partir de efluentes sin desinfectar de un proceso de tratamiento biolgico de aguas residuales. Tambin se puede obtener la semilla en el cuerpo de agua receptor del vertimiento, preferiblemente de 3 a 8 Km despus del punto de descarga. Cuando no se disponga de ninguna de dichas fuentes del inculo, desarrollar en el laboratorio una semilla adaptada, por aireamiento continuo de una muestra clarificada de agua residual domstica y adicin de pequeos incrementos diarios de aguas residuales. Para obtener la poblacin microbiana inicial, usar una suspensin de suelo, un lodo activado, o una preparacin a partir de semilla comercial. Ensayar el rendimiento de la semilla haciendo pruebas de la DBO en las muestras hasta obtener una poblacin satisfactoria. Si los valores de la DBO aumentan con el tiempo hasta un valor constante, se consideran como un indicio de la adaptacin sucesiva de la semilla o inculo. 1. Control de inculos. Determinar la DBO del material inoculante como si se tratara de una muestra. De este valor y del conocimiento del dato del agua de dilucin determinar el OD consumido. Hacer las diluciones necesarias hasta obtener una disminucin de por lo menos el 50% del OD. La grfica de la disminucin de OD expresada en miligramos por litro contra los mililitros de inculo, origina una recta cuya pendiente debe interpretarse como la disminucin de OD por mililitro de inculo. La intercepcin de la recta con el eje de los valores de reduccin del OD representa la disminucin del oxgeno provocada por el agua de dilucin, valor que debe ser inferior a 0,1 mg/L (ver 6.8). Con el objeto de corregir el valor de OD consumido por una muestra, se debe restar a ste el consumido por el inculo. El consumo de OD del agua de dilucin ms el inculo puede estar en el intervalo de 0,6 a 1,0 mg/L. En el numeral 6.6 se describen las tcnicas para adicin de material inoculante al agua de dilucin, para dos mtodos de dilucin de muestras. Blanco de agua de dilucin. Con el objeto de verificar la calidad del agua de dilucin sin inculo y la limpieza de los materiales, usar una porcin de la misma y llevarla junto con las muestras a travs de todo el procedimiento. El OD consumido por el agua de dilucin debe ser menor de 0,2 mg/L y preferiblemente no mayor de 0,1 mg/L. Pretratamiento de la muestra. 1. Muestras con alcalinidad custica o acidez. Neutralizar las muestras a pH entre 6,5 y 7,5 con una solucin de cido sulfrico (H 2SO4) o hidrxido de sodio (NaOH) de concentracin tal que la cantidad de reactivo no diluya la muestra en ms de 0,5%. La menor dilucin de muestra no debe afectar el pH dado por el agua de dilucin inoculada. 2. Muestras con compuestos residuales de cloro. Evitar las muestras que contengan cloro residual; tomarlas antes del proceso de cloracin; si la muestra ha sido clorada pero no presenta cloro residual detectable, inocular

3.

4.

5. 6.

el agua de dilucin; si hay cloro residual, declorar la muestra e inocular el agua de dilucin (ver 6.7). No ensayar las muestras que han sido decloradas, sin inocular el agua de dilucin. En algunas muestras, el cloro se elimina si se dejan 1 o 2 h a la luz, lo cual puede suceder durante el transporte y manejo de la muestra. Para muestras en las cuales el cloro residual no se disipa en un tiempo razonablemente corto, eliminar el cloro residual por adicin de solucin de Na 2SO3. El volumen de Na2SO3 requerido se determina en una porcin de 100 a 1 000 mL de la muestra, previamente neutralizada, por la adicin de 10 mL de cido actico 1 + 1 o H2SO4 1 + 50, 10 mL de solucin de yoduro de potasio (10 g KI/100 mL), por cada 1000 mL de muestra; el volumen resultante se titula con solucin de Na2SO3 hasta su punto final, determinado por el indicador almidn-yodo. Se agrega a la muestra neutralizada, el volumen relativo de solucin de Na 2SO3 determinado, se mezcla bien y se deja en reposo cerca de 10 a 20 minutos. Ensayar la muestra para determinar el cloro residual. (NOTA: Un exceso de Na2SO3 en la muestra, consume oxgeno y reacciona con ciertas cloraminas orgnicas que pueden estar presentes en muestras tratadas). Muestras contaminadas con sustancias txicas. Las muestras de aguas residuales provenientes de industrias, por ejemplo electroqumicas, contienen metales txicos. Estas muestras requieren de estudios especiales y deben ser tratadas antes de medirles la DBO. Muestras sobresaturadas con OD. En muestras procedentes de aguas muy fras o de aguas en que la produccin primaria es alta, los valores de OD a 20C suelen ser mayores de 9 mg de OD/L. Para prevenir prdidas de oxgeno durante la incubacin, llevar la temperatura de la muestra a 20C en una botella parcialmente llena, mientras se sacude fuertemente o se burbujea aire comprimido filtrado y limpio. Ajuste de temperatura de la muestra. Llevar las muestras a 20 1C antes de hacer las diluciones. Inhibicin de la nitrificacin. A las muestras contenidas en botellas de 300 mL se agregan 3 mg de 2-cloro-6-(triclorometil)-piridina (TCMP) o se puede agregar directamente al agua de dilucin para lograr una concentracin final de aproximadamente 10 mg de TCMP/L. (NOTA: Es posible que la TCMP se disuelva lentamente y permanezca flotando en la superficie de la muestra; algunas formulaciones comerciales se disuelven ms fcilmente pero no son 100% puras, por lo que se debe ajustar la dosificacin). Las muestras que requieren el procedimiento de inhibicin de la nitrificacin incluyen: efluentes tratados biolgicamente, muestras inoculadas con efluentes tratados biolgicamente, y aguas de ro, pero no se limitan necesariamente a estas. En el reporte de los resultados registrar el uso del procedimiento de inhibicin de la nitrificacin. Tcnica de dilucin. Los resultados ms acertados se obtienen con diluciones de muestra en las que los valores de OD residual son por lo menos 1 mg/L y un consumo de OD de por lo menos 2 mg/L despus de los 5 das de incubacin. La experiencia con muestras de diferente origen permiten optimizar el nmero de diluciones requeridas; la correlacin de la DQO con la DBO puede constituir una gua efectiva para la seleccin de las

diluciones ms convenientes. Si no se dispone de esta metodologa, se pueden emplear las diluciones de 0,0 a 1,0 % para efluentes lquidos industriales, 1 a 5 % para efluentes industriales no tratados y decantados, 5 a 25 % para efluentes con tratamiento secundario o biolgico, y 25 a 100 % para corrientes contaminadas. Las diluciones se efectan en probetas y luego se transfieren a las botellas de DBO, o se preparan directamente en las botellas. Cualquiera de los dos mtodos de dilucin puede combinarse con cualquier tcnica para medicin de OD. El nmero de botellas a ser preparadas para cada dilucin depende de la tcnica de anlisis del OD y del nmero de rplicas deseadas. Cuando sea necesaria la inoculacin, agregar la semilla directamente al agua de dilucin o a cada probeta o botella de DBO antes de la dilucin. La inoculacin en las probetas evita la disminucin de la relacin semilla:muestra cuando se hace un incremento en las diluciones. 1. Diluciones preparadas en probeta. Si se emplea el mtodo modificado de la azida para la medicin de OD, transvasar cuidadosamente el agua de dilucin -inoculada si es necesario-, hasta llenar la mitad de una probeta de 1 a 2 L de capacidad por medio de sifn para evitar la entrada de aire. Agregar la cantidad deseada de muestra cuidadosamente mezclada y diluir al nivel apropiado con agua de dilucin; mezclar bien con una varilla tipo mbolo y evitar la entrada de aire. Trasvasar la dilucin a dos botellas de DBO por medio de sifn. Determinar el OD inicial en una de estas botellas. Tapar hermticamente la segunda botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. Si se determina el OD por el mtodo de electrodo de membrana, transvasar la mezcla de dilucin a una botella DBO por medio de sifn. Determinar el OD inicial en esta botella, descartar el residuo y llenar nuevamente la botella con la muestra diluida. Tapar hermticamente la botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. 2. Diluciones preparadas directamente en botellas DBO. Con una pipeta de boca ancha agregar el volumen de muestra deseado a diferentes botellas para DBO de volumen conocido. Agregar, a cada botella o al agua de dilucin, las cantidades apropiadas de semilla; llenar las botellas con suficiente agua de dilucin, inoculada si es necesario, de tal manera que al insertar el tapn se desplace todo el aire, sin dejar burbujas. Para diluciones mayores de 1:100 hacer una dilucin preliminar en una probeta antes de hacer la dilucin final. Preparar dos botellas de cada dilucin cuando se empleen los mtodos yodomtricos de volumetra para la medicin del OD; determinar el OD inicial en una de las dos botellas, tapar hermticamente la segunda botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. Si se emplea el mtodo de electrodo de membrana para la medicin de OD, preparar solamente una botella de DBO por cada dilucin; determinar el OD inicial en esta botella y remplazar cualquier contenido desplazado con agua de dilucin para llenar la botella. Tapar hermticamente, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. Enjuagar el electrodo de OD entre determinaciones

para prevenir la contaminacin cruzada de las muestras. Determinacin del OD inicial. Si la muestra contiene sustancias que reaccionan fcilmente con el OD, es necesario determinar el OD antes de llenar la botella de DBO con la muestra diluida. Si el consumo de OD inicial es insignificante, el perodo entre la preparacin de la dilucin y la medida del OD inicial no es crtico. Emplear el mtodo modificado de la azida (mtodo yodomtrico) o el mtodo de electrodo de membrana, para determinar el OD inicial en todas las muestras diluidas, testigos y, si se considera necesario, en los controles de semilla. Incubacin. Incubar a 20 1C las botellas que contienen las diluciones, los controles de semilla, los blancos de agua de dilucin y los patrones de glucosa-cido glutmico. Hacer un sello de agua como se describe en 6.7. Determinacin del OD final. Determinar el OD en las muestras diluidas, los blancos y los patrones despus de 5 das de incubacin como se describe en 6.8. 7. CLCULOS 1. Cuando el agua de dilucin no ha sido inoculada: DBO5, mg/lt = (D1-D2)/P 2. Cuando el agua de dilucin ha sido inoculada: DB)5, mg/lt = {(D1-D2)-(B1-B2)*f }/P donde: D1 = OD de la muestra diluida inmediatamente despus de la preparacin, mg/L, D2 = OD de la muestra diluida despus de 5 d de incubacin a 20C, mg/L, P = fraccin volumtrica decimal de la muestra empleada, B1 = OD del control de semilla antes de la incubacin, mg/L (seccin 6.1.4), B2 = OD del control de semilla despus de la incubacin, mg/L (seccin 6.1.4), y f= proporcin de semilla en la muestra diluida a la semilla en el control de semilla = (% de semilla en la muestra diluida)/(% de semilla en el control de

semilla). 3. Si el material inoculante se agrega directamente a la muestra o a las botellas de control: f=(volumen de semilla en la muestra diluida)/(volumen de semilla en el control de semilla) 4. Si se ha inhibido la nitrificacin, reportar los resultados como DBO 5. 1. Los resultados obtenidos para las diferentes diluciones pueden ser promediados si se cumple con los requisitos de valores de OD residual de mnimo 1 mg/L y un consumo de OD de por lo menos 2 mg/L. Este promedio se puede hacer si no hay evidencia de toxicidad en las muestras menos diluidas o de alguna alteracin detectable. 2. En estos clculos no se hace correccin por el OD consumido por el blanco de agua de dilucin durante la incubacin. Esta correccin no es necesaria si el agua de dilucin cumple el criterio de blanco estipulado en el procedimiento. Si el agua de dilucin no cumple este criterio, la correccin es difcil y los resultados sern cuestionables. 8. PRECISIN 1. No existe un procedimiento aceptable para establecer la precisin y exactitud de la prueba de la DBO. El control de glucosa-cido glutmico prescrito est proyectado como un punto de referencia para la evaluacin de la calidad del agua de dilucin, la efectividad de la semilla, y la tcnica analtica. 2. Ochenta y seis analistas, pertenecientes a 58 laboratorios analizaron muestras de aguas naturales dosificadas con incrementos exactos de compuestos orgnicos, con valores promedios de DBO de 2,1 y 175 mg/L; su desviacin estndar fu de 0,7 y 26 mg/L, respectivamente. 3. Las pruebas realizadas en un laboratorio con una solucin de glucosa-cido glutmico de 300 mg/L, produjeron los siguientes resultados: Nmero de meses: 14 Nmero de triplicados: 421 Promedio recuperado mensualmente: 204 mg/L Desviacin estndar promedio mensual: 10,4 mg/L 4. Los estudios estadsticos de precisin y exactitud de las determinaciones de la DBO, realizados en ejercicios de intercalibracin que involucraron de 2 a 112 laboratorios, con diferentes analistas y semillas, en muestras sintticas

que contenan glucosa y cido glutmico en proporcin 1:1 en el intervalo de concentraciones de 3,3 a 231 mg/L, proporcionaron el promedio, X, y la desviacin estndar, S, a travs de las ecuaciones de regresin correspondientes: X = 0,658 (nivel agregado, mg/l) + 0,280 mg/L S = 0,100 (nivel agregado, mg/l) + 0,547 mg/L

Para el estndar primario de 300 mg/L, el promedio de DBO 5-d fue de 198 mg/L con una desviacin estndar de 30,5 mg/L.

5. Valores lmites de control: Debido a la gran variedad de factores que afectan las pruebas de la DBO en los estudios multilaboratorios y la consecuente disparidad en los resultados, se recomienda como valor lmite de control para laboratorios individuales una desviacin estndar ( 1S), la determinada en las pruebas interlaboratorios. Para cada laboratorio, establecer los valores lmites de control efectuando un mnimo de 25 anlisis de glucosa-cido glutmico (ver 6.3) en un perodo de algunas semanas o meses y calcular la media y la desviacin estndar. Emplear como valor lmite de control para futuros chequeos de glucosa-cido glutmico la media 3 desviaciones estndar; comparar los valores calculados para los ensayos de un solo laboratorio, presentados anteriormente, con los resultados interlaboratorios. Reevaluar los valores lmites de control si estos se ubican fuera del intervalo de 198 30,5 e investigar el origen del problema. Si la DBO medida para un patrn de glucosa-cido glutmico est fuera del intervalo aceptado, rechazar las pruebas hechas con tales semilla y agua de dilucin. 4. Iintervalo de trabajo: es igual a la diferencia entre el mximo OD inicial (7 a 9 mg/L) y el mnimo OD residual de 1 mg/L multiplicado por el factor de dilucin. Un lmite de deteccin ms bajo de 2 mg/L se establece para una disminucin del OD mnima de 2 mg/L. 9. QUMICO RESPONSABLE Elaboracin del Protocolo: Laboratorio de Qumica Ambiental Estandarizacin de la Tcnica: Laboratorio de Qumica Ambiental 10. FECHAS Elaboracin del Protocolo: julio 1997 Montaje de la Tcnica: Calibracin: Revisin:julio de 1997

11. REFERENCIAS Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. American Public Health Association, American Water Works Association, Water Pollution Control Federation. 19 ed., New York, 1995. pp 5-2 a 5-12. Methods for Chemical Analysis of Water and Wastes. United States Environmental Protection Agency. Cincinnati, 1983. 12. BIBLIOGRAFA RODIER, J. Anlisis de Aguas: aguas naturales, aguas residuales, agua de mar. Omega, Barcelona, 1981. SAWYER, C.; McCARTY, P. Chemistry for Environmental Engineering. McGraw Hill, New York, 1996 GARAY, J., PANIZZO, L., LESMES, L., RAMIREZ, G., SANCHEZ, J. Manual de Tcnicas Analticas de Parmetros Fsico-qumicos y Contaminantes Marinos. Tercera edicin. Centro de Investigaciones Oceanogrficas e Hidrogrficas. Cartagena, 1993

Dr.

Caldern

Laboratorios

Ltda.

Avda 13 No. 87-81 Tel/Fax 6222687, 6224985, 6225567, 2578443 Apartado Areo 24888 Bogot, D.C., Colombia South America www.drcalderonlabs.com E-Mail acaldero@cable.net.co DETERMINACION DE LA DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO DBO5 METODO RESPIROMETRICO Por: Felipe Caldern Senz y Margarita Pavlova. Bogot, Enero 15 de 2001; Rev. Enero31/2001; Rev. Septiembre 22 de 2004; Oct 21 de 2005; Mayo 9 de 2007 Dr. Caldern www.drcalderonlabs.com INTRODUCCION Laboratorios.

Los siguientes mtodos aunque son vlidos en cualquier tiempo y lugar se hacen en la ciudad de Bogot Colombia, ubicada a 2540 metros sobre el nivel del Mar y una Presin baromtrica de 560 mm Hg. Estas condiciones afectan la disponibilidad de oxgeno disuelto disuelto en el agua y por consiguiente las condiciones en las cuales se realiza la prueba de la Demanda Bioqumica de Oxgeno en 5 das DBO5. ANTECEDENTES Desde principios de los aos de 1900s se han utilizado varios metodos para determinar el ndice de respiracin de bacterias para evaluar la capacidad de una poblacin bacteriana de quitar sustancias de las aguas residuales (tratabilidad, o biodegradabilidad) y para determinar el efecto de las sustancias en las bacterias (inhibicin o toxicidad). La tentativa ms antigua para utilizar la absorcin directa para medir la demanda del oxgeno de las aguas residuales fue hecha por Adney en 1890. El desarroll un tipo de aparato manomtrico de presin constante en el cual l observaba el ndice de la absorcin del oxgeno por el agua contaminada. A una presin constante, la disminucin del volumen, debido a la absorcin del oxgeno fue observada por la distancia que una columna del agua sube un un tubo vertical, graduado, en forma de "u" que conectaba dos recipientes, uno llenado parcialmente de la muestra, y el otro que contena un volumen igual de agua. El aparato entero fue colocado a una temperatura constante en un bao de agua, y agitado peridicamente para mantener un exceso del oxgeno disuelto en la muestra. Aunque Adney encontr que este mtodo era exacto, l concluy que no era conveniente para el trabajo rutinario. Rideal y Burgess (1909) utilizaron el aparato, pero lo encontraron insatisfactorio debido a los escapes que se producan en el curso de la agitacin. Sugirieron que el mtodo de la dilucin, con la incubacin de las botellas cerradas con la medida del oxgeno disuelto tanto antes como despus de la incubacin por un mtodo modificado de Winkler era ms exacto. Este mtodo fue el precursor de la prueba estndar BOD5. Sierp (1928) y otros revivieron y modificaron el aparato de aireacin directa de Adney "para reducir el dispendioso trabajo del mtodo de la dilucin y para producir lecturas rpidas, directas y frecuentes". El respirometro de Warburg (1926) usado extensivamente por Don Bloodgood en la universidad de Purdue y por H. Huekelekian en la universidad de Rutgers fu una modificacin del " manmetro de sangre-gas" desarrollado por Haldane y Barcroft (1902). El trabajo pionero de Sawyer, de Nichols y de Rohlich (1939) en el estudio y el desarrollo de las curvas de la utilizacin del oxgeno en lodos

activados, fue hecho usando los dispositivos manomtricos que ellos desarrollaron para satisfacer su necesidad de utilizar muestras ms grandes y de sistemas mas hermticos - Estos sistemas, sin embargo, requeran la adicin manual de aire atmosfrico para suplir el oxgeno. Analistas expertos eran necesarios para funcionar y vigilar visualmente las lecturas del manmetro. La interpretacin era aburrida y dispendiosa ya que no existian aparatos automatizados para la manipulacin de los datos. John W. Clark en la universidad de estado de nuevo Mjico a fines de los aos 50 desarroll y report un dispositivo en el cual el oxgeno fue generado por una pila electroltica, que tambin funcion como un manmetro, asociado a un reactor cerrado. Cuando el dispositivo es accionado por la reduccin de la presin en el recipiente de la prueba causado por el retiro qumico del CO2 generado por la respiracin bacteriana, el oxgeno fue producido por una corriente controlada de corriente continua. El valor integrado de la corriente proporcion una indicacin del oxgeno consumido. Una de las primeras aplicaciones de aparato Voith-Sapromat (desarrollado por Popel en 1964) fue un procedimiento manual para evaluar el efecto de varios deshechos en degradacin de la peptona. Liebmann y Offhaus tambin colaboraron en procedimientos para determinar la DBO5 y la toxicidad de algunos elementos en el agua.

BOTELLA RESPIROMETRICA DE DR. CALDERON LABORATORIOS LTDA. FUNDAMENTOS

El Mtodo Respiromtrico, para la determinacin de la DBO5 se basa en medir el consumo de oxgeno, o la produccin de CO2, en una Botella Respiromtrica. Este objetivo se logra entre otras formas (Mtodo Manomtrico) midiendo la variacin de la presin en la botella, mediante un manmetro lo suficientemente sensible. Otros mtodos respiromtricos propiamente dichos miden la produccin de CO2 u otros gases como Metano, Anhdrido Sulfhdrico, etc. dentro de la botella. En el Mtodo Clsico, para la determinacin de la DBO5, se calcula la diferencia entre el Oxgeno Disuelto en la muestra o en una dilucin de la misma, entre el da 0 y el da 5. Este mtodo tiene muchas limitaciones, siendo una de las principales la pequea cantidad de oxgeno disponible en la muestra. Usualmente unos 10 mg/lt a nivel del mar, y menos de 7 mg/Lt a nivel de Bogot (2540 m.s.n.m.). Si tenemos en cuenta que la muestra deber terminar la prueba con al menos 1 mg/Lt, (algunas normas especifican terminar con al menos 2 mg/Lt) se observa que el oxgeno total disponible para la prueba ser alrededor de 5 mg/Lt. En el supuesto caso de que se trabajase con Botellas de 0.5 Lt de capacidad, la cantidad absoluta de oxgeno disponible sera de tan solo 2.5 mg. En la mayora de los Laboratorios usualmente se trabaja con Botellas de 300 ml., lo cual disminuye aun mas la cantidad de oxgeno disponible para la prueba. Esta pequea cantidad a determinar hace que pequeos errores en la manipulacin de la prueba produzcan grandes diferencias (errores) en el resultado. En el mtodo Respiromtrico, trabajando con botellas de 1 lt de capacidad, llenas con medio litro de muestra o dilucin de muestra, se cuenta hasta con 125 mg de Oxgeno, contenidos en el aire presente en la cmara superior de la botella. Y se puede contar aun con mayor cantidad de oxgeno en caso de trabajar con volmenes inferiores de muestra. En este caso, el oxgeno disuelto, fuere cual fuere su contenido inicial en la muestra (exceptuando muestras altamente sobresaturadas) no tiene casi incidencia en el resultado. Por lo general esta por debajo de 2.5 mg frente a los 125 mg presentes en la cmara superior. Esto es un error mximo del 2 %. ABSORCION DEL CO2 En el mtodo llamado mtodo manomtrico, se mide el vaco creado por el consumo de oxgeno causado por la muestra. Para que el mtodo basado en la medicin manomtrica del vaco causado en la botella funcione adecuadamente es necesario absorber el CO2 formado de alguna manera. De lo contrario no habra cambio de presin en las botellas ya que el volmen de CO2 producido podra ser igual o casi igual al volmen de Oxgeno consumido.

La absorcin del CO2 puede hacerse de varias maneras. 1. Adecuando el poder buffer de la solucin en ensayo para absorber la totalidad del CO2, en forma de Bicarbonato disuelto en el lquido y 2. Absorbiendo el CO2 mediante algn hidrxido alcalino en un recipiente apropiado en contacto con la fase gaseosa de la botella. En el presente artculo analizaremos ambas opciones aunque en principio consideramos que adecuar el poder buffer de la solucin de ensayo es especialmente adecuado para la determinacin de la Demanda Bioqumica de Oxgeno en 5 das en aguas y el mtodo de absorber el CO2 en un recipiente con reactivos especiales insertos en la botella respiromtrica es mas adecuado para la determinacin de la respiracin en muestras slidas como suelos, deshechos orgnicos, lodos secos etc. CAPACIDAD DE ABSORCION DIFOSFATO-MONOFOSFATO DE CO2 DEL SISTEMA

La cantidad de CO2 producida en el mtodo respiromtrico, al igual que la cantidad de oxgeno consumida, es relativamente mas grande que la producida en el mtodo clsico. Esto requiere entonces de una adecuacin del poder buffer de la solucin de ensayo. Para adecuar el poder buffer de la solucin de ensayo a las nuevas condiciones es necesario conocer la capacidad de absorcin del CO2 del sistema Difosfato-Monofosfato dentro del rango de pH permisible o compatible con un crecimiento adecuado de los microorganismos presentes en la muestra en ensayo. Como base terica para la absorcin del CO2 dentro del sistema tenemos la siguiente ecuacin: Na2HPO4 + CO2 + H2O -------------> NaHCO3 + NaH2PO4 (1) De acuerdo con la anterior reaccin 142 mg de Fosfato Disdico anhidro absorberan 44 mg de CO2 La anterior reaccin es reversible y a medida que procede hacia la derecha se va reduciendo el pH del medio de tal manera que esta misma condicin paraliza el desarrollo de la reaccin en un punto intermedio de la transformacin del Fosfato Disdico en Fosfato Monosdico. Creemos que no todo el Fosfato Disdico logra transformase en Fosfato Monosdico. Para saber que tanto CO2 logra capturar una solucin de Fosfato Disdico se llev a cabo el siguiente experimento: Se prepar una solucin de Fosfato Monosdico (NaH2PO4.H2O) de 2 gr/Lt. Se titul con NaOH 0.1 N hasta viraje incipiente de la Fenolftaleina (Aproximadamente pH = 8.5-9.0). En este punto la solucin se satur con CO2 permitiendo as que se desarrolle la

reaccin (1) en la mayor extensin posible. Acto seguido se expuls el CO2 libre mediante agitacin y barrido con aire. Despus se titul en reversa con NaOH 0.1 N nuevamente hasta viraje incipiente de la fenolftaleina. Se considera que la cantidad de CO2 fijado por el sistema es directamente proporcional a la cantidad de NaOH consumida en la segunda titulacin. Los datos del ensayo fueron los siguientes: Titulacin del Fosfato Monosdico Alcuota de solucin de Fosfato Monosdico = 25 ml Cantidad de NaOH 0.1 N usado en la titulacin inicial = 3.65 ml Esta cantidad coincide casi exactamente con la cantidad terica necesaria para la transformacin de todo el Fosfato Monosdico en Fosfato Disdico segn la ecuacin siguiente: NaH2PO4 + NaOH -------------------> Na2HPO4 + H2O Fijacin de CO2 Alcuota de solucin de Fosfato Monosdico = 50 ml Cantidad de NaOH 0.1 N usado en la titulacin inicial = 7.2 ml Saturacin con CO2 y eliminacin del Sobrante con Aire. Titulacin en reversa con NaOH 0.1 N = 4.5 ml De acuerdo con NaOH + CO2 40 gr de NaOH neutralizan 44 gr de CO2 la --------> ecuacin: NaHCO3

Entonces 4.5 ml de NaOH 0.1 N neutralizarn 4.5 x 4 x 44/40 = 19.8 mg de CO2 Lo cual quiere decir que los 100 mg de Fosfato Monosdico (50 ml de solucin de NaH2PO4.H2O de 2 gr/lt) utilizados, equivalentes a 87 mg de Fosfato Monosdico Anhidro y transformados en 102.9 mg de Fosfato Disdico anhidro tienen capacidad para absorber 19.8 mg de CO2 transformndolo en Bicarbonato de Sodio. Al comparar el resultado terico segn la ecuacin (1) con la cantidad resultante de este ltimo ensayo se hace evidente que no todo el Fosfato disdico utilizado inicialmente logra transformarse en Fosfato Monosdico. En consecuencia, la cantidad de Fosfato Disdico que se debe utilizar como Buffer en la prueba respiromtrica deber ser de como mnimo de 102.9 mg por cada 19.8 mg de CO2

Si en una botella de 1 Lt de capacidad con medio litro de muestra y con disponibilidad de 125 mg de Oxgeno se espera una produccin de 171.8 mg de CO2 se aconseja agregar 892.8 mg de Fosfato Disdico anhidro en calidad de buffer. (En la prctica agregar 1.000 gr) Nota: Esta cantidad de Fosfato en la prctica es cerca de 40 veces mas grande a la que se utiliza con el mtodo tradicional. ABSORCION DEL CO2 EN RECIPIENTE APARTE INSERTO EN LA BOTELLA CON HIDROXIDO DE SODIO Esta forma de absorber los gases tambien funciona adecuadamente y consiste en colocar en la cmara de aire encima del lquido, un recipiente perforado, en el cual se coloca hidroxido de sodio como material absorbente para el CO2. Este material absorbe rpidamente el CO2 producido. Se ha observado que la botella requiere algo de agitacin para la adecuada y rpida absorcin del CO2. De lo contrario la difusin del CO2 desde la parte inferior de la botella hacia el recipiente de absorcin puede resultar demasiado lenta. Para la Absorcin se debe tener en cuenta la siguiente ecuacin: 2 NaOH + CO2 -----------> Na2CO3 + H2O as quie 80 gr de NaOH absorbern 44 gr de CO2 Para una botella respiromtrica de 1105 ml de capacidad, llena de CO2 puro a 20 C, se requieren 1.105x0.8878x80/44 = 1.784 gr de NaOH y para una Botella normal con medio litro de muestra, suponiendo que se agotara completamente el oxgeno de la cmara y que se generan 125 x 44/32 = 171.8 mg de CO2 se requieren 171.8 x 80/44 = 312 mg de NaOH. En la prctica se recomienda colocar 1 gr de NaOH. RESUMEN DEL METODO Para Botellas de 1 lt en las cuales Alcuota mas Agua de Dilucin = 500 ml, el Oxgeno disponible en la Botella a la altura de Bogot se calcula como sigue: Densidad del aire a 20 C = 0.8878 gr/lt. = 1.2931 x 273/293X560/760 Contenido de Oxgeno en el aire = 21 % volumtrico. Peso del Aire disponible en la Botella = 0.44388 gr. Contenido de Oxgeno disponible en la botella = aproximadamente igual a 103 mg de O2 puro. Para Botellas de 500 ml llenas hasta 250 ml, la disponibilidad de Oxgeno ser aproximadamente de 51.5 mg.

De acuerdo con lo anterior, se podr entonces tomar la siguiente alcuota dependiendo de la DBO5 esperada: 1. Tomar una alcuota de muestra segn la DBO5 esperada as: DBO5 esperada Bot 1000 mg/lt mximo 32000 16000 8000 4000 2000 1000 500 250 100 50 Bot 500

Alcuota/Aforamiento Alcuota/Aforamiento ml/ml ml/ml 3/500 6/500 12/500 25/500 50/500 100/500 200/500 400/500 400/800 800/800 1.5/250 3/250 6/250 12/250 25/250 50/250 100/250 200/250 200/400 400/400

2. Colocarla en la probeta de aforamiento y agregarle agua destilada saturada de Oxgeno hasta un volmen cercano a los 400 ml. El Oxgeno presente en el agua de dilucin deber ser tenido en cuenta en los clculos finales ya que a grandes diluciones su valor alcanaza a ser muy significativo. 3. Agregarle 10 ml de Solucin A (Solucin Tampn de Fosfato Modificada 2X). 4. Agregarle 0.5 ml (10 gotas) de la Solucin B (Sulfato de Magnesio). 5. Agregarle 0.5 ml (10 gotas) de la Solucin C (Cloruro de Calcio). 6. Agregarle 0.05 ml (1 gota) de la Solucin D (Cloruro Frrico 10X). 7. Agregarle 0.5 ml (10 gotas) de Solucin Semilla Inculo de Agua Residual Urbana Fresca. 8. Completar a 500 ml con agua destilada y transferir a la botella respiromtrica. 9. Cerrar la Botella y conectar el Transductor. 10. Colocar la botella en la cmara de Incubacin, encima del agitador Magntico o de Vaivn. 11. Iniciar la agitacin, esperar que se homogenize la temperatura y tomar la primera lectura (L0). 12. Tomar una lectura cada 24 horas durante los siguientes 5 das. Anotar simultneamente el valor de la temperatura de la cmara de incubacin.

Simultneamente con lo anterior, se debe realizar un blanco y ese valor deber ser restado de los resultados de las muestras. PREPARACION DE REACTIVOS A. Solucin Tampn de Fosfato Modificada (2X). Pesar 43.5 gr de K2HPO4, 66.8 gr de Na2HPO4.7H2O y 3.4 gr de NH4Cl, disolver y aforar a 1 Lt. B. Solucin de sulfato de magnesio: Disolver 22,5 g de MgSO4.7H2O en agua destilada y diluir a 1 L. C. Solucin de cloruro de calcio: Disolver 27,5 g de CaCl2 anhidro o 36.5 gr de CaCl2.2H2O en agua destilada y diluir a 1Lt. D. Solucin de cloruro frrico (10X) : Disolver 2.5 g de FeCl3.6H2O en agua destilada, diluir a 1L. E. Solucin Patrn de Glucosa Acido Glutmico 50X: Disolver 7.5 gr de Glucosa y 7.5 gr de Acido Glutmico en 800 ml de agua destilada con ayuda de calor suave. Dejar enfriar y agforar a 1 lt con agua destilada. Guardar en nevera en frasco de color ambar. CALCULOS Para los clculos Utilizar el Software anexo. Clculo de la DBO5 OTROS DATOS Peso molecular Ponderado del Aire = 0.21 x 16 + 0.79 x 14 = 14.42 Densidad del Anhdrido Carbnico; D(aire=1) = 1.5291 DIAGRAMA

BIBLIOGRAFIA 1. Jenkins, D., "The use of manometric methods in the study of sewage and trade wastes," Waste Treatment, Pergamon Press, New York, 1960, pp99-125. 2. Montgomery, H.A.C., "The determination of biochemical oxygen demand by respirometric methods,"Water Res., 1/1:632-640, 1967. 3. Clark, John W., "Continuous Recording BOD Determination," Water and Sewage Works, 1960 p.107 . 4. Cadena, F. et al, "A Novel Approach to Simplified Respirometric Oxygen Demand Determinations", Proceedings of the 43rd Industrial Waste Conference, Purdue University, 1988. 5. Sawyer, C.N., (1958) "Effects of synthetic detergents on sewage treatment processes" Sewage and Industrial Wastes, 30 pp. 757-775. 6. Grady Jr., C.P.Leslie, Environmental Systems Engineering, Clemson University, Clemson, SC. 7. Gaudy Jr, Anthony F., University of Delaware, Newark, DE. 8. Graves, D.A., Lang, C.A., and Leavitt, M.E. "Respirometric Analysis of the Biodegradation of Organic Contaminants in Soil and Water", Applied Biochemistry and Biotechnology, Vol. 28/ 29 pp. 813 - 826 1991. 9. OECD (1981) OECD Guidelines for Testing of Chemicals, Section 3, Degradation and Accumulation, Method 301C, Ready Biodegradability: Modified MITI Test (I), Director of Information,

OECD, Paris France. 10. Magliette, R., (Merck, Sharpe & Dohme) Personal communications DEMANDA QUMICA DE OXIGENO Mtodo de reflujo abierto CDIGO GENERAL 008 Cdigo

1. SUMARIO Y APLICACIONES 1. La demanda qumica de oxgeno (DQO) determina la cantidad de oxgeno requerido para oxidar la materia orgnica en una muestra de agua residual, bajo condiciones especficas de agente oxidante, temperatura y tiempo. 2. Las sustancias orgnicas e inorgnicas oxidables presentes en la muestra, se oxidan mediante reflujo en solucin fuertemente cida (H 2SO4) con un exceso conocido de dicromato de potasio (K 2Cr2O7) en presencia de sulfato de plata (AgSO4) que acta como agente catalizador, y de sulfato mercrico (HgSO4) adicionado para remover la interferencia de los cloruros. Despus de la digestin, el remanente de K2Cr2O7 sin reducir se titula con sulfato ferroso de amonio; se usa como indicador de punto final el complejo ferroso de ortofenantrolina (ferroina). La materia orgnica oxidable se calcula en trminos de oxgeno equivalente. 3. Para muestras de un origen especfico, la DQO se puede relacionar empricamente con la DBO, el carbono orgnico o la materia orgnica; la prueba se usa para controlar y monitorear despus que se ha establecido la correlacin. 4. El mtodo es aplicable a muestras de aguas residuales domsticas e industriales que tengan DBO superiores a 50 mg O 2/L. Para concentraciones ms bajas, tales como muestras de aguas superficiales, se puede usar el mtodo modificado para bajo nivel en un intervalo entre 5 y 50 mg O2/L. Cuando la concentracin de cloruro en la muestra es mayor de 2 000 mg/L, se requiere el mtodo modificado para las aguas salinas. 2. LIMITACIONES E INTERFERENCIAS 1. Los compuestos alifticos voltiles de cadena lineal no se oxidan en cantidad apreciable, en parte debido a que estn presentes en la fase de vapor y no entran en contacto con el lquido oxidante; tales compuestos se oxidan ms efectivamente cuando se agrega Ag 2SO4 como catalizador. Sin embargo, ste reacciona con los iones cloruro, bromuro y yoduro produciendo precipitados que son oxidados parcialmente. 2. Las dificultades causadas por la presencia de los haluros pueden superarse en buena parte, aunque no completamente, por acomplejamiento antes del proceso de reflujo con sulfato de mercurio (HgSO 4), que forma el haluro mercrico correspondiente, muy poco soluble en medio acuoso. Si bien se

especifica 1 g de HgSO4 para 50 mL de muestra, se puede usar una menor cantidad cuando la concentracin de cloruro sea menor de 2 000 mg/L, mientras se mantenga una relacin HgSO 4:Cl de 10:1. La tcnica no se debe usar para muestras que contengan ms de 2 000 mg de Cl /L; existen otros procedimientos diseados para determinar la DQO en aguas salinas. 3. El nitrito (NO2) tiene una DQO de 1,1 mg de O 2/mg de NO2-N, y como las concentraciones de NO2 en aguas rara vez son mayores de 1 o 2 mg NO 2N/L, esta interferencia es considerada insignificante y usualmente se ignora. Para evitar una interferencia significante debida al NO 2, agregar 10 mg de cido sulfmico por cada mg de NO2-N presente en el volumen de muestra usado; agregar la misma cantidad de cido sulfmico al blanco de agua destilada. 4. Las especies inorgnicas reducidas, tales como iones ferroso, sulfuro, manganoso, etc., se oxidan cuantitativamente bajo las condiciones de la prueba; para concentraciones altas de estas especies, se pueden hacer las correcciones al valor de DQO obtenido, segn los clculos estequiomtricos en caso de conocer su concentracin inicial. 3. TOMA Y PRESERVACION DE MUESTRAS 1. Colectar las muestras en botellas de vidrio preferiblemente; el uso de envases plsticos es permisible si se asegura la ausencia de contaminantes orgnicos. 2. Si la muestra tiene materia orgnica biolgicamente activa, el anlisis debe realizarse inmediatamente, aunque preservada a pH 2 por adicin de H2SO4 conc. (generalmente 2 mL de H 2SO4 conc./L de muestra) puede analizarse hasta siete das despus. 3. Las muestras que contengan slidos sedimentables deben mezclarse con un homogeneizador para obtener una muestra representativa. 4. En el anlisis de aguas residuales con alta DQO deben hacerse diluciones preliminares, para reducir el error inherente en la medida de pequeos volmenes de muestra. 4. APARATOS 4.1. Equipo de reflujo, constituido por balones o tubos de digestin de 500 o 250 mL de capacidad con boca 24/40 de vidrio esmerilado y condensador Liebig, West, Friedrichs, Allihn o equivalente, de 300 mm, con unin 24/40 de vidrio esmerilado, y una plancha de calentamiento con regulador de temperatura y potencia suficiente para producir al menos 1,4 W/cm 2 de superficie de calentamiento, o su equivalente. 5. REACTIVOS 1. Solucin estndar de dicromato de potasio, 0,0417M. Disolver 12,259 g de K2Cr2O7, grado estndar primario previamente secado durante 2 h a 103C,

en agua destilada y diluir a 1 000 mL en un baln volumtrico clase A. 2. Reactivo de cido sulfrico. Agregar con cuidado Ag 2SO4 grado reactivo o tcnico, en cristales o en polvo, sobre H 2SO4 concentrado en proporcin de 5,5g de Ag2SO4/Kg de H2SO4. Dejar en reposo 1 o 2 das para la disolucin del Ag2SO4. 3. Solucin indicadora de ferroina. Disolver 1,485 g de 1,10-fenantrolina monohidratada y 695 mg de FeSO47H2O en agua destilada y diluir a 100 mL. Esta solucin tambin se puede adquirir comercialmente. 4. Sulfato ferroso de amonio (FAS), 0,25 M. Disolver 98 g de Fe(NH4)2(SO4)26H2O en agua destilada; agregar 20 mL de H 2SO4 concentrado, enfriar y diluir a 1000 mL. Estandarizar esta solucin diariamente con una solucin estndar de K2Cr2O7 as: Diluir 10,0 mL de la solucin estndar de K 2Cr2O7 a aproximadamente 100 mL; agregar 30 mL de H2SO4 concentrado y enfriar. Titular con FAS en presencia de 0,10 a 0,15 mL (2 o 3 gotas) de indicador de ferroina. Molaridad del FAS = Volumen de K2Cr2O7 0.0417 M titulado, mL /Volumen del FAS empleado, mL* 0.25 5. Sulfato mercrico, HgSO4, en cristales o en polvo. 6. Acido sulfmico. Requerido solamente para eliminar la interferencia de nitritos. 7. Ftalato de potasio e hidrgeno estndar (biftalato de potasio, KHP). Triturar ligeramente y secar el biftalato de potasio (HOOCC 6H4COOK) hasta peso constante a 120C; disolver 425 mg en agua destilada y diluir a 1 000 mL. La solucin es estable por ms de tres meses si se conserva refrigerada; se debe verificar la presencia o ausencia de crecimiento biolgico, y en caso afirmativo descartarla. El biftalato tiene una DQO terica de 1,176 mg O 2/mg y la solucin tiene una DQO terica de 500 g O 2/mL. 6. PROCEDIMIENTO 1. Tratamiento de muestras con DQO > 50 mg O 2/L: Colocar 50,0 mL de muestra en un baln de reflujo de 500-mL (para muestras con DQO > 900 mg O2/L, usar una porcin ms pequea de muestra y diluirla a 50,0 mL); agregar 1 g de HgSO 4, en presencia de perlas de vidrio para controlar la ebullicin, y muy lentamente agregar 5,0 mL del reactivo de cido sulfrico, mientras se agita para disolver el HgSO 4. Enfriar y agitar para evitar la posible prdida de materiales voltiles; agregar 25 mL de solucin de K2Cr2O7 0,0417 M y mezclar. Acoplar el baln al condensador y abrir el flujo de agua refrigerante; agregar el remanente del reactivo de cido sulfrico (70 mL) a travs del extremo superior del condensador. Continuar la agitacin mientras se agrega el reactivo de cido sulfrico. PRECAUCIN: Agitar muy bien la mezcla de reflujo antes de suministrar calor para prevenir el sobrecalentamiento en el fondo del baln y la formacin de espuma. 2. Cubrir el extremo superior del condensador con un vaso pequeo para

prevenir la entrada de materiales extraos a la mezcla y dejar en reflujo durante 2 h. Enfriar y enjuagar el condensador desde la parte superior con agua destilada; desconectar el condensador y diluir la muestra al doble de su volumen con agua destilada. Enfriar hasta temperatura ambiente y valorar el exceso de K2Cr2O7 con FAS en presencia de 0,10 a 0,15 mL (2 o 3 gotas) de indicador de ferroina; aunque la cantidad de ferroina no es crtica, usar el mismo volumen para todas las titulaciones. Tomar como punto final de la titulacin el primer cambio ntido de color azul-verdoso a caf-rojizo; el color azul-verdoso puede reaparecer. El cambio de color no es tan marcado como en la titulacin del blanco de reactivos debido a la mayor concentracin de cido en la muestra. De la misma manera, someter a reflujo y titular un blanco que contenga los reactivos y un volumen de agua destilada igual al volumen de muestra. 3. Procedimiento alternativo para muestras con DQO-bajo: Seguir el procedimiento anterior, con dos excepciones: (i) usar K 2Cr2O7 estndar 0,00417 M, y (ii) titular con FAS 0,025 M. Tener cuidado extremo, ya que cualquier traza de materia orgnica en la vidriera o deposiciones desde la atmsfera pueden causar errores. Si se requiere un mayor aumento de la sensibilidad, concentrar un mayor volumen de muestra antes de la digestin por reflujo, de la siguiente manera: Agregar todos los reactivos a la muestra y reducir el volumen total a 150 mL mediante ebullicin en el baln de reflujo abierto a la atmsfera (sin acoplar el condensador). Calcular la cantidad de HgSO4 a ser adicionada (antes de la concentracin por ebullicin), basada en una relacin de peso HgSO4:Cl de 10:1, segn la cantidad de Cl presente en el volumen de muestra original. Hacer un blanco de reactivos mediante el mismo procedimiento. Esta tcnica tiene la ventaja de concentrar la muestra sin prdidas significativas de materiales voltiles fcilmente digestibles; los materiales voltiles difciles de digerir, tales como cidos voltiles, se pierden pero se consigue una mejora frente a mtodos de concentracin por evaporacin ordinarios. 4. Determinacin de la solucin estndar. Evaluar la tcnica y la calidad de reactivos realizando la prueba con una solucin estndar de ftalato cido de potasio. 7. CLCULOS DQO como mg de O2/lt = (A-B) x M x 8000/mL de Muestra donde: A = mL FAS usados para el blanco B = mL FAS usados para la muestra, y M = molaridad del FAS 8. PRECISIN

8.1. Un grupo de muestras sintticas preparadas con ftalato cido de potasio y NaCl se analizaron en 74 laboratorios. Para los valores de la DQO de 200 mg O2/L en ausencia de Cl, la desviacin estndar obtenida fue 13 mg/L (coef. de variacin 6,5 %); para los valores de la DQO de 160 mg O 2/L y 100 mg Cl/L, la desviacin estndar obtenida fue de 14 mg/L (coef. variacin, 10,8%). 9. QUMICO RESPONSABLE Elaboracin del Protocolo:Laboratorio de Qumica Ambiental Ideam Estandarizacin de la Tcnica: Laboratorio de Qumica Ambiental 10. FECHAS Elaboracin del Protocolo: julio de 1997 Montaje de la Tcnica: Calibracin: Revisin: julio de 1997 11. REFERENCIAS Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. American Public Health Association, American Water Works Association, Water Pollution Control Federation. 19 ed., New York, 1995. pp 5-12 a 5-16. Methods for Chemical Analysis of Water and Wastes. United States Environmental Protection Agency. Cincinnati, 1983. 12. BIBLIOGRAFA RODIER, J. Anlisis de Aguas: aguas naturales, aguas residuales, agua de mar. Omega, Barcelona, 1981. SAWYER, C.; McCARTY, P. Chemistry for Environmental Engineering. McGraw Hill, New York, 1996 GARAY, J., PANIZZO, L., LESMES, L., RAMIREZ, G., SANCHEZ, J. Manual de Tcnicas Analticas de Parmetros Fsico-qumicos y Contaminantes Marinos. Tercera edicin. Centro de Investigaciones Oceanogrficas e Hidrogrficas. Cartagena, 1993

DETERMINACION DE LA DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO EN AGUAS -DQO-METODO SIMPLIFICADO

Por: Felipe Caldern Senz Dr. Caldern Laboratorios www.drcalderonlabs.com Avda. 13 Bogot D.C., calderon@drcalderonlabs.com acaldero@cable.net.co y Margarita Ltda. Enero No. Colombia Pavlova 12/2001 87-81 S.A.

1a Rev Sept. 30/2002 El presente mtodo es derivado del mtodo standard, el cual se ha modificado de la siguiente manera: Se han dividido las cantidades por 5 y se utiliza un tubo de digestin de 25 x 300 mm, calentado en su parte inferior, en una placa de calefaccin apropiada, la cual produce condensacin en las paredes del tubo, no siendo necesario el uso del refrigerante de reflujo. Esto simplifica enormemente el procedimiento y permite correr simultneamente en una placa normal hasta 56 muestras. Se toman 10 ml de muestra que puede ser pura o diluida segn el valor esperado para la DQO. Se colocan en un tubo de digestin, se agregan 5 ml de solucin de K2Cr2O7 0.25 N (equivalentes a 1.25 ml de solucin 1 N + 3.75 ml de H2O) y acto seguido con mucho cuidado 15 ml de H2SO4. Se pone a digerir a una temperatura cercana al punto de ebullicin pero sin dejar hervir (aprox 150 C) 1 hora y 30 min. Se deja enfriar. Puede ser de un da para otro. Precaucin: La ebullicin prolongada puede hacer perder oxgeno al dicromato aunque no haya DQO en las muestras, falseando los resultados de la muestra e incluso del blanco. La reaccin que ocurre en presencia de materia orgnica es la siguiente: 2K2Cr2O7 + 8H2SO4 + 3C -----> 2K2SO4 + 2Cr2(SO4)3 + 8H2O + 3CO2 En ausencia de Materia Orgnica y por prolongada ebullicin puede ocurrir las siguiente reaccin: 2K2Cr2O7 + 8H2SO4 ----> 2K2SO4 + 2Cr2(SO4)3 + 8H2O + 3O2 La anterior reaccin da lugar a un falso consumo de Dicromato aun en ausencia de materia orgnica. De ah la importancia del control de temperatura durante la digestin.

Al otro da se diluye a 100 ml con agua, se agregan 2 a 3 gotas de Indicador de Difenilamina, 5 ml de H3PO4 conc. 85 % y se titula con Sulfato Ferroso-Amnico (FAS) 0.5 N CALCULOS De acuerdo con el standar para la determinacin del Carbn Orgnico, 1 ml de solucin de Dicromato 1N contiene 49.03 mg de K2Cr2O7 y oxida 3 mg de Carbn equivalentes a una DQO de 8 mg de Oxgeno. DQO; mg/lt = (1.25 - FAS 0.5N/2) x 8 x 1000/Alcuota mas genricamente: DQO; mg/lt = (ml Dicromato x Normalidad - ml de FAS x Normalidad ) x 8 x 1000/Alcuota A lo anterior se le debe restar el resultado de un Blanco, con lo cual la frmula queda transformada en la siguiente: DQO; mg/lt = (ml de FAS x Normalidad en el Blanco - ml de FAS x Normalidad en la muestra) x 8 x 1000/Alcuota PATRONAMIENTO El anterior mtodo se calibra con un patrn de Ftalato Acido de Potasio preparado como sigue: Ftalato de Potasio e hidrgeno estndar (biftalato de potasio, KHP). Triturar ligeramente y secar el biftalato de potasio (HOOCC6H4COOK) hasta peso constante a 120C; disolver 425 mg en agua destilada y diluir a 1000 mL. La solucin es estable por ms de tres meses si se conserva refrigerada; se debe verificar la presencia o ausencia de crecimiento biolgico, y en caso afirmativo descartarla. El biftalato tiene una DQO terica de 1,176 mg O2/mg y la solucin tiene una DQO terica de 500 m g O2/L. 10 ml de este Standard analizados deben dar un resultado DQO = 500 mg/lt 10 % de desviacin.

Dr.

Caldern

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Ltda.

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SLIDOS SUSPENDIDOS TOTALES Secados a 103-105C CDIGO GENERAL 009 Cdigo

1. SUMARIO Y APLICACIONES

1. Los slidos suspendidos totales o el residuo no filtrable de una muestra de agua natural o residual industrial o domstica, se definen como la porcin de slidos retenidos por un filtro de fibra de vidrio que posteriormente se seca a 103-105C hasta peso constante. 2. Una muestra bien mezclada se pasa a travs de un filtro estndar de fibra de vidrio, previamente pesado, y el residuo retenido se seca a 103-105C hasta peso constante. El incremento de peso del filtro representa el total de slidos suspendidos. 3. Si el material suspendido tapona el filtro y prolonga la filtracin, la diferencia entre los slidos totales y los slidos disueltos totales puede dar un estimativo de los slidos suspendidos totales. 4. Este mtodo es aplicable a aguas potables, superficiales, y salinas, aguas residuales domsticas e industriales y lluvia cida, en un intervalo de 4 a 20 .000 mg/L. 2. LIMITACIONES E INTERFERENCIAS 1. Debido a que un residuo excesivo en el filtro puede formar una costra que impide el paso del agua, limitar el tamao de muestra de tal manera que se obtengan como mximo 200 mg de residuo. 2. El taponamiento del filtro prolonga la filtracin y puede producir resultados altos debido a la excesiva retencin de slidos coloidales. 3. Para muestras con elevado contenido de slidos disueltos, enjuagar muy bien el filtro para asegurar la remocin del material disuelto. 3. TOMA Y PRESERVACIN DE MUESTRAS 1. Eliminar de la muestra partculas flotantes grandes o aglomerados dispersos de material no homogneo. 2. Usar frascos de plstico o de vidrio resistente, en los que el material en suspensin no se adhiera a las paredes del recipiente. 3. Realizar el anlisis tan pronto como sea posible. 4. Refrigerar la muestra a 4C hasta el momento del anlisis para minimizar la descomposicin microbiolgica de los slidos. Antes de iniciar el anlisis, llevar las muestras a temperatura ambiente. 5. Es preferible no almacenar las muestras por ms de 24 h; bajo ningn concepto guardar las muestras por ms de 7 das. 4. APARATOS

1. Filtros circulares de fibra de vidrio, sin aditivos orgnicos. Aparato de filtracin: puede ser uno de los siguientes, adecuado para el filtro seleccionado: a) Embudo con filtro de membrana. b) Crisol Gooch, de 25 a 40 mL de capacidad, con su respectivo adaptador. c) Aparato de filtracin con recipiente y disco fritado grueso (40- a 60 m) como soporte del filtro. Erlenmeyer con tubuladura lateral, de suficiente capacidad para el tamao de muestra seleccionado. Discos de aluminio o de acero inoxidable, de 65 mm de dimetro, para pesar. Desecador, con desecante e indicador coloreado de humedad o indicador instrumental. Estufa para secado, para operar en el intervalo de 103 a 105C. Balanza analtica, con precisin de 0,1 mg. Bomba de vaco. Agitador magntico con barra agitadora de tefln. Pipetas de punta ancha. 5. REACTIVOS 1. Agua destilada Tipo III., agua destilada y desmineralizada. 6. PROCEDIMIENTO

1. Preparacin del filtro de fibra de vidrio: Insertar el filtro circular en el aparato de filtracin con el lado rugoso hacia arriba, aplicar vaco y lavar el filtro con tres porciones sucesivas de 20 mL de agua destilada; continuar la succin hasta remover todas las trazas de agua, y descartar el filtrado. Remover el filtro y transferirlo a un disco para pesaje, con el cuidado necesario para prevenir que el filtro seco se adhiera al disco; el material que se adhiera al disco debe agregarse al filtro para evitar errores. Tambin se puede pesar el filtro seco junto con el disco tanto antes como despus de la filtracin; si se emplea un crisol Gooch, remover y pesar este junto con el filtro. Secar en una estufa a 103-105C por 1 h (si se van a determinar slidos voltiles, secar a 550C por 15 min. en un horno). Dejar enfriar en un desecador y pesar. Repetir el ciclo de secado, enfriado, desecado y pesado hasta obtener peso constante, o hasta que la prdida de peso sea menor del 4% o de 0,5 mg de la pesada anterior, lo que sea menor. Guardar el filtro en un desecador hasta que se vaya a emplear. 2. Seleccin del filtro y tamao de muestras: Tomar una alcuota de muestra que produzca entre 10 y 200 mg de residuo seco. Si se emplean ms de 10 minutos para completar la filtracin, aumentar el tamao del filtro o disminuir el volumen de muestra; para muestras no homogneas tales como agua residuales, usar un filtro grande que permita filtrar una muestra representativa. 3. Anlisis de muestras. Ensamblar el filtro al aparato de filtracin e iniciar la succin; humedecer el filtro con una pequea cantidad de agua destilada para fijarlo. Mientras se agita la muestra con un agitador magntico, tomar una alcuota con pipeta y transferirla al filtro. Lavar el residuo con tres porciones sucesivas de 10 mL de agua destilada, y se deja secar completamente entre lavados; continuar la succin por tres minutos despus de completar la filtracin. Las muestras con alto contenido de slidos disueltos pueden requerir lavados adicionales. Remover cuidadosamente el filtro del aparato de filtracin y transferirlo al disco de pesaje; si se usa un crisol Gooch, removerlo de su adaptador. Secar en una estufa a 103-105C, mnimo durante 1 h; dejar enfriar en un desecador hasta temperatura ambiente y pesar. Repetir el ciclo de secado, enfriado, desecado y pesado hasta obtener peso constante o hasta que la prdida de peso sea menor del 4% o de 0,5 mg del peso anterior, lo que sea menor. Las determinaciones por duplicado deben coincidir hasta en un 5% de su promedio. 7. CLCULOS mg de slidos suspendidos totales/l = (A-B) x 1000/Volumen de Muestra, ml donde: A = peso del filtro + residuo seco, mg, y B = peso del filtro, mg

8. PRECISIN 1. En un estudio hecho por dos analistas con cuatro series de 10 determinaciones cada una, la desviacin estndar fue de 5,2 mg/L (coef. variacin 33%) para un nivel de concen-tracin de 15 mg/L; 24 mg/L (10%) para 242 mg/L, y 13 mg/L (0,76%) para 1707 mg/L. 2. En un laboratorio individual se realizaron anlisis por duplicado de 50 muestras de aguas naturales y aguas residuales con una desviacin estndar de 2,8 mg/L. 9. QUMICO RESPONSABLE Elaboracin Protocolo: Laboratorio de Qumica Ambiental Ideam Estandarizacin de la Tcnica: Laboratorio de Qumica Ambiental 10. FECHAS Elaboracin Protocolo: julio de 1997 Montaje de la Tcnica: Calibracin: Revisin: julio de 1997 11. REFERENCIAS Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. American Public Health Association, American Water Works Association, Water Pollution Control Federation. 19ed., New York, 1995. pp 2-53 a 2-58 Methods for Chemical Analysis of Water and Wastes. United States Environmental Protection Agency. Cincinnati, 1983. 12. BIBLIOGRAFARODIER, J. Anlisis de Aguas: aguas naturales, aguas residuales, agua de mar. Omega, Barcelona, 1981. SAWYER, C.; McCARTY, P. Chemistry for Environmental Engineering. McGraw Hill, New York, 1996 GARAY, J., PANIZZO, L., LESMES, L., RAMIREZ, G., SANCHEZ, J, Manual de Tcnicas Analticas de Parmetros Fsico-qumicos y Contaminantes Marinos. Tercera edicin. Centro de Investigaciones Oceanogrficas e Hidrogrficas. Cartagena, 1993

pH CDIGO GENERAL 003 Cdigo

1. SUMARIO Y APLICACIONES 1. El principio bsico de la medida electromtrica del pH se fundamenta en el registro potenciomtrico de la actividad de los iones hidrgeno por el uso de un electrodo de vidrio y un electrodo de referencia, o un electrodo combinado. La fuerza electromotriz (fem) producida por el sistema electroqumico vara linealmente con el pH y puede verificarse por la obtencin de una grfica de pH vs. fem para diferentes soluciones de pH conocido. El pH de la muestra se determina por interpolacin. 2. El mtodo es aplicable a aguas potables, superficiales, y salinas, aguas residuales domsticas e industriales y lluvia cida. 2. LIMITACIONES E INTERFERENCIAS 1. El electrodo de vidrio est libre de interferencias debidas a color, turbidz, material coloidal, oxidantes, reductores o alta salinidad, excepto para interferencias del ion sodio en soluciones de pH mayor de 10; este error se reduce con la utilizacin de electrodos especiales ("error bajo de sodio, low sodium error"). 2. Las capas de materiales aceitosos presentes en algunos tipos de aguas pueden disminuir la respuesta del electrodo. Se limpian suavemente con un pao o mediante lavado con detergente y enjuague con agua destilada. Puede ser necesario un tratamiento adicional con HCl 1+9 para remover la pelcula remanente. 3. Las mediciones de pH varan con la temperatura en dos formas: por efectos mecnicos causados por cambios en las propiedades de los electrodos y por efectos qumicos producidos por alteracin de las constantes de equilibrio. En el primer caso, se incrementa la pendiente de la ecuacin de Nernst con el aumento de temperatura y los electrodos requieren de un mayor tiempo para lograr el equilibrio trmico. Este efecto provoca cambios significativos en el pH. Debido a que los equilibrios qumicos afectan el pH, los estndares para preparar las soluciones tampn tienen pH especfico a la temperatura indicada. 4. Reportar siempre la temperatura a la cual se mide el pH. La mayora de los instrumentos de medida del pH estn equipados con compensadores de temperatura que corrigen los errores del primer tipo, pero la medicin slo puede mostrar el pH a la temperatura de la medida.

3. TOMA Y PRESERVACIN DE MUESTRAS 1. Las muestras deben ser analizadas inmediatamente, preferiblemente en el campo despus de obtener la muestra. 2. Las aguas de alta pureza y las aguas que no estn en equilibrio con la atmsfera, estn sujetas a cambios cuando se exponen a la atmsfera, por lo cual los frascos de muestra deben llenarse completamente y mantenerse sellados hasta el anlisis. 4. APARATOS 1. El instrumento de medida del pH est constituido por un potencimetro, un electrodo de vidrio, un electrodo de referencia y un mecanismo compensador de temperatura; cuando se sumergen los electrodos en la solucin problema se completa el circuito. Muchos medidores de pH pueden realizar lecturas en escalas de pH o de milivoltios; algunos tienen expansin de escala que permite hacer lecturas de 0,001 unidades de pH, pero la mayora de instrumentos no son tan precisos. Para trabajos de rutina usar instrumentos con exactitud y reproducibilidad de 0,1 unidades de pH en un rango de 0 a 14 y equipados con un compensador de temperatura. 2. Electrodo de referencia, consiste en una semicelda que provee un potencial de electrodo constante; los ms comnmente usados son electrodos de calomel y plata: cloruro de plata. Seguir las recomendaciones del fabricante para el uso y cuidado del electrodo de referencia. Llenar los electrodos no sellados con el electrolito correcto hasta el nivel debido y asegurarse de que la unin est humedecida. 3. Electrodo de vidrio. El electrodo sensor es un bulbo de vidrio especial que contiene una concentracin fija de HCl o una solucin tamponada de cloruro en contacto con un electrodo de referencia interno. Los electrodos combinados incorporan los electrodos de vidrio y de referencia en uno solo. Utilizar un electrodo especial de error bajo de sodio, " low sodium error", que puede operar a altas temperaturas para mediciones de pH mayores de 10, los electrodos estndar de vidrio producen valores bajos. Para medir pH inferiores a 1 emplear una membrana lquida, los electrodos estndar de vidrio producen valores altos. 4. Vasos. Usar preferiblemente vasos de polietileno o de tetrafluoroetileno (TFE, tefln). 5. Agitador. Usar un agitador magntico con barra agitadora recubierta de TFE o un agitador mecnico con hlice recubierta en plstico. 5. REACTIVOS 1. Preparacin General. Calibrar el sistema de electrodos con soluciones tampn estndar de pH conocido. Debido a que las soluciones tampn se pueden deteriorar como resultado del crecimiento de mohos o por contaminacin, es necesario prepararlas frescas para trabajos de precisin.

2.

3.

4.

5.

Se pesan las cantidades de reactivos especificadas en la Tabla 1, se disuelven en agua destilada, a 25C y se diluyen a 1000 mL. Esto es particularmente importante para las soluciones tampones de borato y carbonato. El agua destilada, hervida y fra debe tener una conductividad menor de 2 mhos/cm. A 50 mL agregar una gota de la solucin saturada de KCl para usar en el electrodo de referencia. Si el pH de esta solucin de prueba est entre 6,0 y 7,0, se puede usar para preparar las soluciones estndar. Para preparar las soluciones estndar, consultar en el " Standard Methods" las condiciones de temperatura, tiempo, precauciones de secado de los reactivos y los pH de las soluciones tampn estndar a temperaturas diferentes de 25C. Por ejemplo, el KH 2PO4 se debe secar a una temperatura entre 110C y 130C por 2 horas, el hidrato tetraoxalato de potasio, no se debe calentar a ms de 60C, y las otras sales tampn especificadas no se deben secar. La regla general es seleccionar y preparar las soluciones tampn clasificadas como estndares primarios, mostradas en la Tabla 1; reservar los estndares secundarios para situaciones extremas encontradas en mediciones de las aguas residuales. Para uso rutinario, almacenar las soluciones tampn y las muestras en botellas de polietileno. Reemplazar las soluciones tampn cada cuatro semanas. Solucin saturada de tartrato cido de potasio. Agitar vigorosamente un exceso (5 a 10 g) de cristales finos de KHC 4H4O6 con 100 a 300 mL de agua destilada, a 25C, en una botella con tapn de vidrio. Separar por decantacin o filtracin la solucin clara del material no disuelto. Preservar, para dos meses o ms, por adicin de un cristal de timol (8 mm de dimetro) por cada 200 mL de solucin preparada. Solucin saturada de hidrxido de calcio. Calcinar CaCO 3 bien lavado y de bajo grado alcalino, en una cpsula de platino por ignicin durante 1 hora a 1000C. Enfriar e hidratar, adicionando lentamente agua destilada mientras se agita, calentar a ebullicin, enfriar, filtrar y recoger el Ca(OH) 2 slido en un filtro de vidrio fritado de porosidad media. Secar a 110C, enfriar y pulverizar hasta obtener grnulos finos y uniformes. Agitar vigorosamente un exceso de estos grnulos con agua destilada en una botella de polietileno tapada. Despus de mezclar, alcanzar la temperatura de 25 C. Con la ayuda de un equipo de filtracin al vaco, filtrar el sobrenadante a travs de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media y usar el filtrado como la solucin tampn. Descartar la solucin tampn cuando el CO 2 atmosfrico cause la aparicin de turbidez.

6. Soluciones auxiliares: NaOH 0,1N; HCl 0,1N; HCl 5N (diluir cinco volmenes de HCl 6N en un volumen de agua destilada), y solucin cida de fluoruro de potasio (disolver 2 g de KF en 2 mL de H 2SO4 concentrado y diluir a 100 mL con agua destilada). TABLA 1. PREPARACIN DE SOLUCIONES ESTANDAR DE pH Solucin Estndar (molalidad) pH a 25 C Peso de necesarios/1000 reactivos mL de

solucin acuosa a 25 C Estndares Primarios: Tartrato cido de potasio (saturado a 3,557 25C) Citrato dicido de potasio 0,05 Biftalato de potasio 0,05 3,776 4,004 11,41 g KH2C6H5O7 10,12 g KHC8H4O4 3,387 g KH2PO4 + 3,533 g Na2HPO4** 1,179 g KH2PO4 + 4,303 g Na2HPO4* > 7 g KHC4H4O6*

Fosfato dicido de potasio 0,025 + 6,863 fosfato cido de sodio 0,025 Fosfato dicido de potasio 0,008 695 + 7,415 fosfato cido de sodio 0,030 43 Borato de sodio decahidratado (brax) 9,183 0,01 Bicarbonato de sodio 0,025 + carbonato 10,014 de sodio 0,025 Estndares Secundarios : Tetraoxalato de potasio dihidratado 1,679 0,05 Hidrxido de calcio (saturado a 12,454 25C) * Solubilidad aproximada

3,80 g Na2B4O7.10H2O**

2,092 g NaHCO3 + 2,640 g Na2CO3

12,61 g KH3C4O8.2H2O

> 2 g Ca(OH)2*

** Preparar con agua fresca, hervida y enfriada (libre de bixido de carbono) 6. PROCEDIMIENTO

6.1. Calibracin instrumental 1. En cada caso se deben seguir las instrucciones del fabricante para el manejo del pH metro y para el almacenamiento y preparacin de los electrodos para su uso. Las soluciones recomendadas para perodos cortos de almacenamiento de los electrodos varan con el tipo de electrodo y el fabricante, pero generalmente tienen una conductividad mayor de 4000 mhos/cm. El agua del grifo es un mejor sustituto que el agua destilada, pero un tampn de pH 4 es mejor para el electrodo de vidrio sencillo y una solucin saturada de KCl es preferible para un electrodo de referencia de calomel y Ag/AgCl. Para un electrodo combinado es preferible una solucin saturada de KCl. Mantener los electrodos hmedos retornndolos a la solucin de almacenamiento mientras que el instrumento no est en uso. Antes de usarlos, retirar los electrodos de la solucin de almacenamiento, enjuagarlos y secar con un papel suave, colocar en la solucin tampn inicial, y ajustar el punto isopotencial. Seleccionar un segundo tampn que est en un rango de 2 unidades del pH de la muestra y llevar el tampn y la muestra a la misma temperatura, la cual puede ser la temperatura ambiente, una temperatura fija tal como 25C, o la temperatura de una muestra fresca. Retirar los electrodos del primer tampn, enjuagarlos abundantemente con agua destilada, secarlos y sumergirlos en el segundo tampn. Registrar la temperatura de medicin y ajustar el indicador de temperatura en el pHmetro hasta que el equipo indique el valor de pH del tampn a la temperatura de anlisis (esto es el ajuste de pendiente). 2. Utilizar el valor de pH de las tablas para el tampn usado a la temperatura del ensayo. Retirar los electrodos del segundo tampn, enjuagarlos abundantemente con agua destilada y secarlos. Sumergirlos en un tercer tampn por debajo de pH 10, aproximadamente tres unidades de pH de diferencia con el segundo; la lectura estar dentro de 0,1 unidades para el pH del tercer tampn. Si la respuesta del pH-metro muestra una diferencia mayor de 0,1 unidades de pH con respecto al valor esperado, buscar averas o fallas de los electrodos o el potencimetro. 3. El propsito de la estandarizacin es ajustar la respuesta del electrodo de vidrio al instrumento. Cuando se hacen mediciones de pH slo ocasionalmente, se debe calibrar el instrumento antes de cada medicin. Cuando se hacen mediciones frecuentes y el instrumento es estable, la calibracin se puede hacer con menor frecuencia. Si los valores de pH de las muestras varan ampliamente, se debe hacer una calibracin para cada muestra con un tampn que tengo un pH dentro del intervalo de 1 a 2 unidades con respecto a la muestra. 6.2. Tratamiento de la muestra. Establecer el equilibrio entre los electrodos y la muestra agitndola para garantizar la homogeneizacin; agitar lentamente para minimizar la incorporacin de dixido de carbono. Para muestras tamponadas o con alta fuerza inica, acondicionar los electrodos despus de lavarlos dejndolos dentro de la muestra por un minuto. Secar, sumergir en una porcin fresca de la misma muestra y leer el pH. Con soluciones diluidas o dbilmente tamponadas, equilibrar los electrodos

sumergindolos en tres o cuatro porciones sucesivas de muestra. Tomar una muestra fresca para medir el pH. 8. PRECISIN 1. Con un cuidadoso uso del pH metro y con buenos electrodos, se puede lograr una precisin de 0,02 unidades de pH y una exactitud de 0,05. Sin embargo, el lmite de exactitud bajo condiciones normales es de 0,1 unidades de pH, especialmente para mediciones en agua y soluciones dbilmente tamponadas. Por esta razn, reportar los valores de pH con aproximacin a 0,1 unidades de pH. 2. El anlisis electromtrico de una muestra sinttica de pH 7,3 realizado por 30 laboratorios se obtuvo con una desviacin estndar de 0,13 unidades de pH. 9. QUMICO RESPONSABLE Elaboracin del Protocolo: Laboratorio de Qumica Ambiental Ideam Estandarizacin de la Tcnica:Laboratorio de Qumica Ambiental Ideam 10. FECHAS Elaboracin del Protocolo: julio de 1997 Montaje de la Tcnica: Calibracin: Revisin:julio de 1997 11. REFERENCIAS Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. American Public Health Association, American Water Works Association, Water Pollution Control Federation. 19ed., New York, 1995. pp 4-65 a 4-69 Methods for Chemical Analysis of Water and Wastes. United States Environmental Protection Agency. Cincinnati, 1983. 12. BIBLIOGRAFA RODIER, J. Anlisis de Aguas: aguas naturales, aguas residuales, agua de mar. Omega, Barcelona, 1981. SAWYER, C.; McCARTY, P. Chemistry for Environmental Engineering. McGraw

Hill, New York, 1996 GARAY, J., PANIZZO, L., LESMES, L., RAMIREZ, G., SANCHEZ, J. Manual de Tcnicas Analticas de Parmetros Fsico-qumicos y Contaminantes Marinos. Tercera edicin. Centro de Investigaciones Oceanogrficas e Hidrogrficas. Cartagena, 1993

COLOR
(Unidades de Platino Cobalto; UPC) Es una medida del Color que le confieren al agua los materales contaminantes. Para su medicin se utiliza la escala de Hazen.

Para su medicin se adopta el mtodo de E. Merck Darmstadt. Todos los derechos pertenecen a : E. Merck, Darmstadt. E. Merck, 64271 Darmstadt, R.F.A., tel. (06151) 720, telex 419328-0 em d 7.91144.2194/01-202177 span 4 Aquaquant 14421 5-150 Hazen

PRINCIPIO DEL METODO

Se determina mediante colorimetra ptico-visual de la coloracin amarillenta de aguas frente a patrones de platino-cobalto simulados segn Hazen. 1. Aquaquant Color 14421. Graduacion: 0 - 5 -10 - 20 -30 - 40 - 50 - 70 - 100 - 150 Hazen. 1.1. Determinacin de la coloracin aparente del agua.

Orientar el envase abierto de tal modo que los tubos se encuentren a mano izquierda. Si no se indica otra cosa, llenar el tubo exterior con respecto al operador con agua incolora lmpida hasta la marca, como solucin en blanco. Llenar el tubo interior hasta la marca con la muestra de agua a medir. Introducir la parte de los crculos de color de la escala desde la derecha en la ranura del fondo de la caja y correrla hasta que salga por el lado izquierdo, rotulado. Hacer coincidir la coloracin del agua en el tubo interior con el crculo de color por debajo del blanco en el tubo exterior, de modo que mirando desde arriba se aprecie un color lo mas parecido posible. Leer el resultado en la parte de la escala que sobresale en el lado derecho de la caja (en caso de que no se encuentre el color de la muestra problema en la escala, vase 3.). La medida corresponde a la coloracin aparente del agua, que tratndose de muestras lmpidas es tambin la coloracin efectiva del agua. 1.2. Determinacin de la coloracin efectiva del agua . Tratndose de aguas turbias, se mide primero la coloracin aparente del agua (coloracin efectiva + substancias turbias), tal como se describe en el apartado anterior. A fin de determinar la coloracin efectiva del agua, se filtra otra muestra idntica por el embudo filtrante, que se encuentra en el fondo del bloque comparador, y se mide de acuerdo con 1.1. a) Llenar el tubo interior hasta la marca con la muestra de agua. b) Llenar el tubo exterior con agua incolora lmpida. c) Comparar el color. Agua no filtrada = Agua filtrada = coloracin efectiva. coloracin aparente.

A fin de conseguir un filtrado lo mas rpido posible, la placa filtrante del embudo es relativamente gruesa, de 50 um de tamao mximo de los poros. Esto debe tenerse en cuenta al comparar con otros mtodos en los que a veces se prescriben filtros de poro estrecho. (De todos modos, la eleccin de la porosidad del filtro es emprica para cada mtodo, dado que hay una transicin continua el tamao de partculas entre las substancias enturbiadoras y colorantes.) El material retenido por el embudo filtrante ha de lavarse con agua lmpida despus del empleo, aadiendo mezcla crmica (art. 2499) en caso necesario. No es posible substituir el filtro de frita de vidrio por el papel de filtro corriente, ya que este puede absorber los colorantes. Las muestras han de medirse lo mas pronto posible despus de su toma. En caso de almacenamiento inevitable, se recomienda emplear recipientes oscuros.

2. Colorimetra 2.1. Mtodo. Se compara la coloracin del agua con una serie de patrones de color, que por unidad de medida simulan 1 ppm de platino como PtCI 62 y 0,5 ppm de cobalto como Co+2 , en un tubo de 165 mm de altura de capa. 2.2. El sistema de valoracion de colores segun HAZEN . A Aunque una colorain amarilla, generalmente regional, no sea de por s un criterio de calidad para enjuiciar la aptitud como agua potable, el consumidor exige que el agua sea incolora. Hace 100 aos ya se procuraba atribuir, mediante patrones (p.ej. los colores mas o menos correctos de la reaccin de Nessler), determinados valores a los matices de color del agua. Hazen (1892) (5.1.) finalmente logr introducir el sistema de patrones de platino-cobalto, que sigue emplendose en la actualidad. El fundamento lo constituye el cloroplatinato amarillo, estable en solucin, correspondiendo 1 unidad de Hazen a 1 ppm de Pt. Dado que esta tonalidad amarilla no coincida con los tonos de amarillo-naranja parduscos existentes en el agua, se aadieron 0,5 ppm de Co2+ por 1 ppm de Pt, como componente roja adicional. Este mtodo sencillo y prctico de valoracin del color forma parte de la mayora de los procedimientos estandar del anlisis del agua (5.2.). 2.3. El mtodo de determinacin ptico-visual en comparacin con la medida instrumental. Al menos cuando se requiera un mtodo rpido normalizado, la colorimetra optico-visual es superior en varios aspectos a la medida espectrofotomtrica. As, no es posible crear una escala de valoracin

universal con base instrumental, ya que solo son plenamente comparables las medidas fotomtricas del mismo aparato o, en el mejor de los casos, las realizadas con el mismo tipo de aparato. En el intervalo de color amarillo de 400 - 450 nm que aqu interesa, determinados tipos de fotmetros, sobre todo los sencillos, a menudo difieren mucho unos de otros. Aunque sea posible definir las condiciones de medida longitud de onda, anchura del valor medio espectral de cada aparato, esto no permite hacer comparaciones entre laboratorios equipados con instrumentos diferentes. Otro problema es que la mayora de los fotmetros estn limitados a cubetas de longitud de capa mxima entre 10 y 50 mm, por lo que de los colores de hasta unas 20 unidades Hazen, mas frecuentes en el agua, resultan valores muy bajos, a menudo inferiores al limite de error y por tanto inservibles. A este respecto hay que mencionar finalmente que una posible turbidez puede tener un efecto dispersor de luz, generalmente dependiente del tipo de instrumento, la cual origina resultados fuertemente falseados en sentido positivo y no puede corregirse fotomtricamente por compensacin del valor en blanco. Es cierto que esto ocurre tambin en los sistemas pticos, pero estos tienen la ventaja de que el ojo puede distinguir entre turbidez y color, cosa que no logra el instrumento. 3. Medida de colores especiales Un inconveniente aparente del mtodo de Hazen es su orientacin hacia una serie de colores fija, aunque sea la mas frecuente. Esto se tiene en cuenta en su definicin original (5.1.). As, la unidad Hazen se refiere exclusivamente a la componente amarilla de PtCI2(2-) es decir, la tonalidad presente puede igualarse por la adicin limitada de otros colores al patrn de platino. En el presente test se procede como sigue: 3.1. Tonos amarillos que tiran a pardo y verde. Intensificar los colores de referencia, llenando el tubo exterior, que encima de los crculos de color (tubo en blanco), con solucin azul de sulfato de cobre. Esta se obtiene de una solucin madre de 400 ppm (1,57 g de CuSO4 5H2O por litro, art. 2790), diluyendo convenientemente. 3.2. Tonos amarillos que tiran a rojo. Empleo anlogo de una solucin roja de 400 ppm de Co . (1,91 g de CoSO4 7H2 O por litro, art. 2556). 3.3. Tcnica. El tubo interior se llena hasta la marca con la muestra de agua, mientras que el tubo exterior contiene agua incolora solamente hasta

la altura de unos 11 cm. En estas condiciones ha de procurarse ajustar la muestra a un tono amarillo que (en cuanto sea comparable) sea de 1 a 2 valores inferior a la intensidad del color. Seguidamente se aade al tubo exterior, mediante bureta o pipeta aforada, la cantidad necesaria de solucin madre de 400 ppm de cobre y/o cobalto para simular lo mas perfectamente posible la tonalidad de la muestra y se completa con agua incolora. Siendo el volumen de relleno del tubo de 40 ml, 1 ml de solucin madre 400 ppm da una concentracin efectiva de 400:40 = 10 ppm, es decir, la cantidad de unos 12 ml, aun existente en el tubo, permite compensar colores extraos de unas 120 ppm de Cu + Co. En caso de rebasarse este valor, se recomienda trabajar con soluciones madre de 4000 en lugar de 400 ppm. 3.4. Especificacin de los resultados Resultado y Especificacin Ejemplo 1. Muestra sin compensacin de color adicional. Medida: 30 Hazen (30 ppm de Pt, 15 ppm de Co). 30 Hazen, por el test Aquaquant 14421 Color. Ejemplo 2. Muestra con 40 Hazen con adicin de 8,0 ml de Cu 400 ppm al tubo de referencia. 40 Hazen con 40 ppm de Pt/20 ppm de Co+ 80 ppm de Cu, por el test Aquaquant 14421 Color. Dado que en el ejemplo 1 se trata de la combinacin de colores estndar, no es necesario especificar, mientras que en el caso de colores modificados, como en el ejemplo 2, hay que indicar toda la f rmula de colores. 4. Presencia y origen de color en el agua Las coloraciones del agua pueden clasificarse como sigue: Naturales de origen mineral ~ hierro Naturales de Origen Animal ~ urocromos Naturales de Origen Vegetal ~ cidos hmicos Artificiales de origen aguas industrial ~ Aguas residuales Una subdivisin ulterior resulta de la diferenciacin entre coloracin aparente (coloracin total de solucin y suspensin) y coloracin efectivo (coloracin de la solucin solamente). Al contrario de la coloracin natural que se limita casi exclusivamente a las tonalidades amarillas y pardas, la coloracin artificial puede presentar prcticamente de todas las tonalidades. Sin embargo, debido a la dilucin estas son generalmente apenas perceptibles como efecto de color, aunque se trate de aguas industriales fuertemente contaminadas. Otro factor de color que no es de esperar en aguas

normales es el de origen animal, resumido frecuentemente por el trmino colectivo de urocromo y cuyas causas (estircol liquido, aguas residuales comunales brutas) se reconocen por el olor y por valores elevados de N, P, CI y SO 4. La coloracin mineral del agua, originada por hierro(lll) hidrolizado y sedimentos finos en general, suele presentarse en forma de coloides o suspensiones y por tanto como coloracin aparente del agua. Tambin pueden separarse por filtracin las algas flotantes, generalmente verdes, que pertenecen a los factores de color vegetales. El factor de color efectivo mas importante y que suele presentarse sin otros, lo constituyen los as llamados cidos de color (color acids), que son extractos del suelo y de fragmentos muertos de plantas, capaces de acidificar el agua hasta un pH 4 y caractersticos de aguas procedentes de regiones ricas en humus o en vegetacin. Entre estas regiones se cuentan las zonas templadas fras y hmedas y la zona caliente y hmeda de vegetacin cerca del ecuador. En las vecinas y mas secas zonas mediterrneas y sabaneras son mas raras las aguas coloreadas, mientras que faltan totalmente en la zona desrtica situada en medio. En las zonas templadas del centro y norte de Europa, de Norteamrica, etc., predomina la formacin de humus, dado que el proceso de descomposicin a las temperaturas relativamente bajas no puede hacer frente a la acumulacin del material vegetal. La causa principal de la coloracin del agua en este caso es que esta se filtra por la capa de humus. Cuando esta ltima se compone casi exclusivamente de material vegetal muerto, como es el caso en los terrenos pantanosos, siendo adems el principal portador del agua, las aguas coloreadas son cosa corriente. En las zonas ecuatoriales, que constituyen la segunda regin en presencia de aguas coloreadas, la humedad y las elevadas temperaturas intensifican el crecimiento vegetal, que sin embargo puede formar solamente capas delgadas debido al proceso de descomposicin igualmente rpido y la pronta utilizacin de las componentes del humus por las plantas. La gran acumulacin de fragmentos vegetales en descomposicin se pone de manifiesto en el caso extremo, el bosque de lluvia tropical, que con 20 kg/m2/a produce aproximadamente 50 veces la cantidad de materia orgnica muerta de un bosque caducifolio o de conferas centroeuropeo. Son caractersticas de estas regiones las aguas negras de los ros y arroyos de all de una coloracin amarilla dorada a menudo, que se debe a la gran cantidad de partes de plantas (hojas, corteza, ramos) en descomposicin, en parte tambin vivas, y no tanto a la capa delgada de humus. Independientemente de las zonas climticas, el material vegetal puede proceder tambin de la propia agua. As, incluso los estanques de agua cementados a menudo son coloreados por los productos de descomposicin hidrosolubles pardo amarillentos de las algas de temporada muertas.

Son componentes de los cidos de color gran numero de cidos polihidroxi y metoxi-carboxlicos y quinonas macromoleculares, de peso molecular entre 1000 y 100 000 (5.3., 5.4., 5.5.). Mediante ligandos potenciales, tales como grupos 0,0'- dihidroxi, stos pueden tambin adicionar metales, de modo que en aguas coloreadas conteniendo hierro (numerosas aguas negras tropicales) puede haber hierro complejado. La alcalinizacin de las aguas coloreadas se acompaa generalmente de intensificacin del color, que se debe a efectos de indicador de los colorantes y a veces tambin a la precipitacin de hidrxidos de hierro. Por consiguiente, es indispensable conocer el valor del pH en todo anlisis colorimtrico. Tratndose de aguas residuales, se tiende a efectuar una medida adicional al pH constante de 7,6 (5.2.2., pags. 392-394). 5. Bibliografia 5.1. HAZEN A., Am. Chem. J. 14, 300 310 (1892). 5.2.1. Ausgewahlte Methoden der Wasser- untersuchung. VEB Gustav Fischer Verlag, Jena (1971). 5.2.2. StandardMethods for theExamination of Water and Wastewater, 13th Ed. American Public Health Association, Washington (1971). 160 162,392-394. 5.2.3. Analysis of Raw, Potable and Waste Waters. Her Majesty's Stationary Office, London (1972). 26-28. 5.3. KNORR M., GRAF W. y KLATTE O. J. Arch. Hyg. Bakteriol. 147, 108 134 (1963). 5.4. CHRISTMAN R. F. y GHASSEMI M. J. Am. Water Works Assn. 58, 723-741 (1966). 5.5. GHASSEMI M. y CHRISTMAN R.F. Limnology and Oceanography 13, 583-597 (1968).

MEDICION DE LA TURBIDEZ DE UN LIQUIDO MEDIANTE EL MEDIDOR DE TURBIDEZ HANNA HI 93703 PRINCIPIO DE OPERACION. El HI 93703 se ha diseado para realizar medidas segn el estndar internacional de la ISO 7027. El instrumento funciona pasando un haz de luz infrarroja a travs de un frasco que contiene la muestra a medir. La fuente de luz es un LED infrarrojo de alta emisin con una longitud de onda pico en 890 nm,. Esto asegura de que la interferencia causada por las muestras coloreadas es mnima. Un sensor, colocado a 90 con respecto a la direccin de la luz, detecta la cantidad de luz dispersada por las partculas sin disolver presentes en la muestra. El microprocesador convierte tales lecturas en valores FTU *.

Segn lo observado arriba, la unidad de FTU es igual a la unidad de NTU. Sin embargo, hay otras unidades conocidas para la medida de la turbidez: Unidad de la turbidez de Jackson (JTU) basada en el viejo mtodo de la vela de Jackson, y unidad de Slice (mg/L de SiO2). Para su referencia la tabla de conversin entre estas unidades de medida se muestra abajo.

JTU JTU FTU/NTU SiO2(mg/L) 1 0.053 0.4

FTU/NTU 19 1 7.5

SiO2(mg/L) 2.5 0.13 1

*1 FTU =1 NTU