Biodegradacin de Contaminantes Orgnicos Peligrosos: Introduccin

Jim Field, Universidad de Arizona, Dpto Ingeniera Qumica y Medioambiental

http://superfund.pharmacy.arizona.edu/outreach.html

Definiciones de Biodegradacin
Biodegradacin: transformacin catalizada biolgicamente de un compuesto a formas mas simple Mineralizacin: transformacin biolgica de un compuesto orgnico a formas minerales Cl
p.e. clorofenol a HCl y CO2 Tpicamente el compuesto utilizado como sustrato primario es mineralizado
OH

Cl- + CO2

Biotransformacin: Transformacin de contaminante por un proceso biolgico NO 2

Conversin de trinitrotolueno a triamino-toluene
O 2N NO 2 H 2N

NH 2

NH 2

Esquema General de Biodegradacin

Contaminante como Sustrato de Crecimiento (primario): Sustrato que sirve como fuente primaria de carbono y energa

Definiciones de Biodegradacin
Cosustrato, Cometabolismo: transformacin microbiana de un compuesto que no sirve como fuente primaria de carbono y energa
p.e. cooxidacin de cloruro de vinylo con monooxigenasa de metano MMO Otro compuesto sirve como sustrato primario (p.e. metano)
CH4 MMO
Cl O -

CO2

+ Cl

Aceptor de Electrones: Compuesto que recibe los electrones de la oxidacin del sustrato primario
Aceptores de electrones comunes

O2, NO3-, Fe3+, SO42-, CO2

Aceptor de electrones se O2 H2O; NO3- N2; Fe3+ Fe2+; reduce biolgicamente SO42- H2S; CO2 CH4

Definiciones de Biodegradacin
Donador de Electrones : El compuesto que dona electrones

(compuesto que se oxida)

Donador de Electrones se oxida CH3(CH2)nCH3 CO2

Tpicamente un compuesto orgnico

Ejemplo de reaccin de bioremediacin

Donador de Electrones oxidacin

CH3(CH2)nCH3 + O2 CO2 + H2O

reduccin Aceptor de Electrones

Terminologia: Aceptores de Electrones

Respiracin : Aceptor de electrones tiene origen fuera de clula Respiracin Aerbica: Reaccin biolgica que utiliza oxgeno como aceptor de electrones Respiracin Anaerbica: Microorganismos que utilizan otro aceptor de electrones en lugar de oxgeno
p.e. nitrato, sulfato, CO2 (reaccion anxica o anaerobia)

Fermentacin: El sustrato sirve como donador y aceptor de electrones (aceptor de electrones es interno)
Primero hay una oxidacin parcial a un producto intermedio oxidado Despues hay una reduccin del intermedio oxidado para regenerar los cofactores portadores de electrones

Esquema General de Fermentacin y Respiracin

Fermentacin
glucosa Compuesto orgnico
flujo de carbn flujo de electrones

Respiracin
Compuesto orgnico
flujo de electrones flujo de carbn

CO2

piruvato

Compuesto orgnico parcialmente oxidado

portador de NADH electrones

O2 NO3SO42-

H2O N2 H2S CH4

etanol

Compuesto orgnico reducido

CO2

anaerbica

Terminologia: Desclorinacin
Desclorinacin Reductiva : Una reaccin biolgica en que un grupo cloro es reemplazado por un grupo de hidrgeno
La reaccin involucra transferencia de 2 electrones

R-Cl + 2e- + 2H+ R-H + HCl Halorespiracin: Una reaccin biolgica en que un hidrocarburo clorado es utilizado como aceptor de electrones (respiracin anaerobia) para apoyar el crecimiento microbiano
Requiere donadores de electrones simples (p.e. H2)

H2
Cl C Cl C Cl Cl

HCl
Cl C Cl C Cl H

E' = 0.57 V

Esquema General de Biodegradacin

Contaminante como Aceptor de Electrones: Sustrato que sirve como aceptor de electrones de respiracin apoyando crecimiento

Torre de Electrones (Potencial de Reduccin)

Donadores de Electrones Aceptores de Electrones

Relacin G con E
Potencial de Reduccin Estandardizado (E) se puede utilizar para calcular el Cambio de Energia Libre de Gibbs Estandardizado (G)

G' = -n f E
E = E e aceptor - E e donador f = constante faraday, 96.48 kJ/Ve- eq n = # equivalentes electrones (e- eq) transferido

Uso Preferencial de Aceptores de Electrones Segn la Energa Libre Disponible

Esquema de Biodegradacin de Compuestos Xenobiticos

Primero: perdida de carcter xenobitico; Despus: metabolismo tpico
Compuesto Xenobitico Ruta Alta enzimas especificas catabolicas

monooxigenasas dioxigenasas hidrolasas dehidrogenasas amidasas transferasas

NH4+, Cl-, SO42-

Intermediario Metablico Ruta Baja acceptor de electrones O2, NO3-, SO42NAD(P)H ATP Productos Mineralizados Celulas, Crecimiento CO2, H2O

Razones para Resistencia a Biodegradacin 1

Estructura Qumica
Reaccin imposible termodinmicamente No se forma enlace entre enzima y sustrato (impedimento estrico ) Demasiado grande para acumulacin bacteriana

Biodisponibilidad
Baja solubilidad acuosa Adsorcin a partculas del suelo Absorcin a lquidos de fase no acuosos (NAPL) Contaminacin envejecida

Toxicidad
Directamente o por productos de biotransformacin

Razones por Resistencia a Biodegradacin 2

Competicin con Reaccin Qumica
Polimerizacin oxidativa a compuestos humicos inertes

Factor Ambiental Limitante

Concentracin de sustrato (contaminante) demasiado bajo Limitacin de nutriente, vitamina , aceptor de electrones o cosustrato Extremo en temperatura, humedad o pH

Microorganismo o Enzima
Biocatalizador no existe No enriquecimiento previo de microorganismos en el sitio

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte I: Tendencias Aerbicas
Aumento en el numero de grupos atractores de electrones
Tasas disminuyan con el aumento de grupos nitro (R-NO2) Tasas disminuyan con el aumento de grupos cloro (R-Cl) Tasas disminuyan con el aumento de grupos azo (R-N=N-R) Tasas disminuyan con el aumento de grupos sulfonato (R-SO3-) Eliminacin de Bifeniles Policlorados (PCBs) en Lodos Activados como Funcin de Grado de Cloracin (Tucker et al 1975)
Cl Cl

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte I: Tendencias Aerbicas (continuacin)
Posicin de grupo sustituyente
Carbn terminal () comparado con carbn o
R

R =Cl Cl fenoxy R= or o phenoxy

COOH R COOH

degradacin lenta slow degradation

degradacin rpida faster degradation

Ramificacin
Aumento en la ramificacin ---- aumenta la resistencia a biodegradacin Alkyl sulfonatos lineares biodegradable
SO3H

Alkyl sulfonatos ramificados poco biodegradable

SO3H

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte I: Tendencias Aerbicas (continuacin)
Peso Molecular de Polmeros No Hidrolizables
Como regla general, los polmeros con peso molecular > 1000- 3000 g/mol no son transportados al interior de las celulas bacterianas Ejemplo de plstico
polyethylene polypropylene polystyrene

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas
Aumento en el numero de grupos atractores de electrones aumentan la tasa de biotransformaciones reductivas
Aumentan las tasas con el aumento de grupos nitro (R-NO2) Aumentan las tasas con el aumento de grupos cloro (R-Cl) Aumentan las tasas con el aumento de grupos azo (R-N=N-R) Ejemplo: Nitroaromtico Tasa de reduccin de grupo nitro por extractos de clulas de Vielonella alcalescens en condiciones anaerbicas en funcin del numero de grupos nitro (McCormick et al 1976)

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas (continuacin)
105 rate (nmol (g VSS)-1 day-1)

Ejemplo: Disolvente Clorados Tasa de descloracin reductiva de disolventes clorados en lodo anaerobio (Van Eekert, 1999)

104 103 102 101 100 0 1 2 3 4 5 6 7 # Cl atoms

cloroetanos clorometanos cloroetenos

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas (continuacin)
Ejemplo: Aromticos Clorados Revisin de Literatura (Field et al 1995)

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas (continuacin)
Ausencia general de grupos sustituyentes oxigenados
Alcanos no sustituidos son muy resistentes a la biodegradacin anaerbica (especialmente alcanos con menos de 6 carbonos)
CH 4
m ethane metano butane butano ethene eteno

hexadecano hexadecane

OH

Biodegradacin anaerbica de compuestos aromticos en funcin del grado de sustitucin

OH Degradado muy rapido OH Sin Fase de Latencia tolueno COOH Degradados rapidos Pequeno Fase de Latencia Resistente a Degradacion Anaerobica benceno Degradado aveces Fase de Latencia Largo

pirogalol OH

fenol

benzoato

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

Tipos de Limitaciones en Biodisponibilidad
Compuesto hidrofbico con baja solubilidad acuosa Precipitado en suspensin Compuesto con Log P elevado se adsorbe a partculas del suelo o sedimento Adsorcin a partculas de suelo Compuesto con Log P elevado se absorbe en los fases lquidas no acuosas (NAPL) Absorcin por NAPL

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

Tasa de biodegradacin controlada por la tasa de disolucin

rTA = KLa(Cs Cb)

Donde:

Ecuacin de disolucin

rTA = tasa de disolucin (mg L-1 s-1): KL = coeficiente de transferencia de masas (m s-1) a = superficie especifica (m2 m-3) Cs = solubilidad acuosa mxima Cb = concentracin actual

Se asume que durante la biodegradacin: Cs-Cb = Cs es decir, que hay biodegradacion de alta afinidad Cb se aproxima cero

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

Tasa de biodegradacin controlada por la tasa de disolucin

rTA = KLa(Cs Cb)

concentracin acuosa de contaminante Cintica de disolucin

Concentracin

produccin de CO2 de contaminante

Tiempo

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

La Relacin de la Solubilidad Acuosa de Hidrocarburos Aromticos Policclicos (PAH) con la Biodegradacin de PAH despus de 1.5 aos de Bioremediacin

Toxicidad de Compuestos Hidrofbicos

Toxicidad a Membranas

Relacin de hidrofobicidad (Log P) y toxicidad (concentracin causante de 50% inhibicin a metanognesis (50% IC)) (Sierra et al. 1991)

Definiciones de Bioremediacin
Bioremediacin: La destruccin o transformacin por microorganismos de contaminantes peligrosos a compuestos menos peligrosos; con el fin de limpiar un sitio contaminado (u efluente) Bioremediacion de Intervencin Tcnica: La biodegradacin o biotransformacin se estimula por intervencin tcnica
Proveer nutrientes (p.e. N) y aceptores de electrones (p.e. O2), en algunos casos donadores de electrones o cosustratos Adicin de surfactantes para aumentar la biodisponibilidad En algunos casos aadir microorganismos (bioaugmentacin) para mejorar la biodegradacin

Definiciones de Bioremediacin
Bioremediacin Intrnsica: La biodegradacin o biotransformacin de
compuestos peligrosos sin intervencin tcnica. La tecnologia se limita al monitoreo y predicciones del procesos naturales. Tpicamente la ocurrencia de biodegradacin se demuestra en varios formas independientes Disminucin de la concentracin de contaminante Cambio en concentraciones de aceptores de electrones Aumento de la poblacin microbiana responsable por la degradacin Los procesos de bioremediacin intrnsicos suelen ser anaerbicos

Atenuacin Natural: El concepto de bioremediacin expandido para incluir otros procesos naturales adems de la biodegradacin (dilucin, adsorcin, volatilizacin, reacciones qumicas)

Bioremediacin de Intervencin Tcnica comparada con Bioremediacin Intrnsica

Interrelacin de Componentes que Determina el xito de Bioremediacin

Bioaugmentacin aadir microorganismos
d) a lid

Sustrato (Contaminante)
d da ili on sp d ) di io ida ( B bi l o M

Surfactantes, Cosolventes, Quelatos

bi a ad r eg d io (B

Microorganismos

Medio Ambiente

(Requisitos Fisiolgicos)

Factores Ambientales H2O, T, pH

Nutrientes N, P, vitaminas

Aceptores de electrones O2, NO3-

Donadores de Electrones/Cosustratos H2/CH4

Tipos de Bioremediacin
In Situ: El tratamiento de agua subterrnea o suelo sin excavar. Tpicamente se trata de la inyeccin de nutrientes y aceptores de electrones en pozos de infiltracion combinados con pozos de extraccin para controlar la zona hidrulica Bioventilacion: Una forma de bioremediacin in situ - Se inyecta y extrae aire en lugar de agua. Aplicado a zonas vadosas. Pilas Biolgicas: El tratamiento de suelos en pilas con suministro activo de aire, humedad y nutrientes. Tpicamente se aade un material poroso ligero para facilitar la aeracion. Barreras Biolgicas: Una trinchera para interceptar y tratar una pluma contaminada. La trinchera se rellena con materiales que estimulan la actividad biolgica.

In Situ Bioremediacin
Nutrientes, aire y/o aceptor de electrones alternativos Descarga

Tratamiento de agua Bomba

Tanque de mezcla

Pozo de inyeccin

Deposito subterrneo con fuga Pozo de extraccin

Nivel de agua subterrnea

Flujo de agua subterrnea

Bioventilacin

Pila Biolgica

Barrera Biolgica