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ANTIBITICOS Y ANTIBIOGRAMA Antibiticos:

ACTIVIDAD PRCTICA N 9:

Segn Waksman, antibitico es toda sustancia qumica producida por organismos vivos tales como bacterias, hongos dbiles.

o plantas, que tienen poder de inhibir el desarrollo o destruir bacterias y otros microorganismos en soluciones

Clasificacin de los antibiticos:

1.- Naturales: Son sintetizados directamente por microorganismos.

2.- Semisintticos: Son aquellos que siendo sintetizados por microorganismos, se utiliza su ncleo-estructura y se modifican por agregacin de ciertos radicales qumicos (ej.: derivados de la penicilina G. tales como ampicilina, amoxicilina, cloxacilina).

3.- Sintticos: Este grupo lo constituyen todos aquellos antibiticos sintetizados por el hombre una vez que se ha conocido su forma estructural (ej.: cloramfenicol). Modo de accin de los antibiticos:

1.- BACTERIOSTTICO: Son inhibidores de la sntesis proteica y actan unindose a los ribosomas. Sin embargo, este presenta nuevamente la proliferacin. Ejemplo: Cloramfenicol, Eritromicina, Tetraciclina, Novobiocina.

enlace no es muy estrecho y cuando disminuye la concentracin del antibitico, ste se libera de los ribosomas y se

2.- BACTERICIDA: Se unen muy ntimamente con sus blancos celulares y no pueden eliminarse por dilucin. Ejemplo: Estreptomicina, Neomicina (por fuerte unin al ribosoma), Actinomicina, Mitomicina (por unin al DNA).

3.- BACTERIOLTICO: Inhiben la sntesis de la pared celular, como la Cicloserina y Penicilina, as como los agentes que actan sobre la membrana celular, como la Polimixina.

Medida de actividad de los antibiticos:

1.- Penicilina: La actividad de la penicilina se mide por su accin sobre la cepa H. de estafilococo o la cepa 209 de la penicilina que disuelta en 1ml. de diluyente, produce un halo de inhibicin de 24 mm. de dimetro.

Food and Drug Administration y se expresa en unidades Oxford. La unidad OxfordFlorey es la cantidad de 2.- Otros antibiticos: La actividad de todos los dems antibiticos distintos de la penicilina, se expresa en microgramos de droga pura cristalina. Una unidad Oxford de penicilina es igual a 0,6 microgramos de penicilina pura cristalizada.

Tipos de accin de agentes antimicrobianos -------- TOTALES _____ VIABLES

tiempo a) BACTERIOSTTICO b) BACTERICIDA

tiempo

tiempo c) BACTERIOLTICO

Principos del Antibiograma (o Mtodo por Difusin en Agar; o Mtodo de Kirby Bauer) Est basado en la propiedad que tienen los antibiticos de difundir a travs del agar, de modo que las cepas sembradas quedan en contacto con el antibitico. Los laboratorios comerciales han preparado discos especiales para este fin, llamados sensi-discos. Cada uno de ellos est marcado claramente por ambos lados con una sigla que indica el antibitico que contiene. Son estables, pero de duracin limitada.

Se pueden preparar discos en el laboratorio. Para esto se debe conocer la cantidad de lquido que absorbe cada disco esterilizado, preparando una dilucin de antibitico adecuada, para que el disco quede con una dosis determinada y til. Los discos se deben guardar en el refrigerador.

Protocolo: Se utilizan sensi-discos y se colocan en la superficie de una placa de agar previamente sembrada homogneamente con la cepa a estudiar. Luego se incuba la placa en la estufa durante 24hrs., tiempo despus del sensibles detienen su crecimiento a cierta distancia del disco (Fig. 1), de modo que se produce una zona circular de sensibilidad de la cepa y con el poder de disolucin del antibitico en el agar. concentracin del agar, el tiempo y temperatura de incubacin. cual se observan los resultados. Si la bacteria es resistente, crece al borde del mismo disco; en cambio, las bacterias inhibicin alrededor del disco, cuyo dimetro est en relacin con la concentracin de antibitico usado, con la Ejercen una gran influencia en los resultados obtenidos, el pH y la concentracin del medio, la cantidad de inculo, la

En trminos generales, existen escalas que se aplican a la lectura de los antibiogramas hechos con el mtodo de los discos de papel, una de las cuales es la siguiente:

Zona de Inhibicin 10 a 15mm de dimetro 25mm o ms de dimetro 15 a 25mm de dimetro 0 a 10mm de dimetro

Sensibilidad de la cepa Medianamente resistente Muy sensible Sensible Resistente

Dilucin en tubos: Permite determinar la concentracin mnima inhibitoria (CMI), que corresponde a la concentracin ms baja de un agente antimicrobiano capaz de inhibir o impedir el crecimiento de un microorganismo. La prueba se realiza utilizando una serie de tubos con medio de cultivo) usualmente Mueller Hinton, o Penassay que no interactan con los antibiticos) y concentraciones decrecientes de antibitico y un crecimiento en los tubos a travs de la turbidez. El primer tubo que no presenta turbidez, indica la CMI. inculo estndar del microorganismo objeto de la prueba. Se incuba a 35 - 37 C, durante 16 18 hrs. Se observa el

Lectura del CIM

CIM

ANTIBITICOS ANTIBACTERIANOS Antibitico Penicilina Carbonicilina Amoxicilina Estreptomicina Cloramfenicol Clortetraciclina (Aureomicina) (Terramicina) Tetraciclina Eritromicina Oleandomicina Cefalotina Lincomicina Bacitracina externo) (Es algo txica y de uso Neomicina Oxitetraciclina

Penicillium notatum Penicillium chrysogenum


Semi-sinttica Semi-sinttica

Aislado de:

Bacterias Gram (+), gonococos, Trep. pallidium Pseudomonas y otras bacterias Gram (-) y Gram (+)

Actividad sobre:

Streptomyces griseus Streptomyces venezuelae Streptomyces aureofaciens Streptomyces rimosus


Sinttico

Proteus mirabilis, Neisseria meningitidis Mycobacterium tuberculosis y bacterias Gram (-), includas
Salmonellas Bacterias Gram (+) y Gram (-), Rickettsias, Chlamydias,

Salmonella tyhosa y otras Salmonellas

Bacterias Gram (+) y Gram (-), Rickettsias, Chlamydias Bacterias Gram (+) y Gram (-), Rickettsias Bacterias Gram (+) y Gram (-), Rickettsias Bacterias Gram (+) Bacterias Gram (+)

Streptomyces erythreus Streptomyces antibioticus


Semi-sinttica

Streptomyces lincollensis Bacillus subtilis

Listeria, Moraxella, Neisseria, Pasterella, Shigella Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae


Bacterias Gram (+)

(De uso local por ser algo txica) Polimixina B y E (Algo txicas) Novobiocina Vancomicina Ristocetina A y B Kanamicina Gentamicina

Streptomyces fradiae

Bacterias Gram (-) y cido alcohol resistentes

Bacillus polimyxa

Algunas bacterias Gram (+), incluso resistentes a penicilina, algunas cepas de Proteus, Pseudomonas y otras bacterias Gram (-)

Streptomyces niveus Streptomyces orientalis Noccardia lurida Streptomyces kanamyceticus Micromonoespora prpura Micromonoespora echinospora

Cocaceas Gram (+), incluso resistentes a penicilina, algunas cepas de Proteus y otras bacterias Gram (-) Cocaceas Gram (+), incluso resistentes a penicilina Pneumococo, estreptococos, incluso resistentes a penicilina

Mycobacterium tuberculosis, Staphylococcus aureus


Bacterias Gram (+) y Gram (-)

ANTIBITICOS ANTIFNGICOS. Antibitico Aislado de: Actividad sobre: Hongos levaduriformes Hongos levaduriformes y algunos miceliados productores de micosis sistmicas Hongos productores de tias (dermatofitos) Hongos productores de esporotricosis, micetomas micticos, cromomicosis Hongos productores de candidiasis, cryptococosis, esporotricosis

Streptomyces noursei Anfotericina B Streptomyces nodosus


Nistatina Griseofulvina Fluorocitosina Clotrimazol (Uso local)

Penicillium griceofulvum
Sinttico Sinttico

TABLA DE INTERPRETACIN DE LAS MEDIDAS DE LAS ZONAS O HALOS DE INHIBICIN. Antibitico Potencia del disco Dimetro del halo en mm. Resistente Ampicilina 10 ugr. Sensibilidad intermedia 21 28 12 - 18 9 12 13 17 14 17 13 16 14 17 10 14 11 12 14 18 13 16 21 28 12 21 9 11 12 14 13 16 15 19 10 11 10 13 Sensible

Estafilococus

G (-), enterococos Haemophylus Bacitracina Cloramfenicol Eritromicina Gentamicina Kanamicina Lincomicina Oxacilina Ac. nalidxico Neomicina Penicilina G Otros Estafilococus Polimixina B Estreptomicina Sulfamidina Tetraciclina Vancomicina Cloxacilina Sulfametoxazol Trimetoprim E. coli Estafilococus Ps. aeruginosa Estreptomicina Clindamicina Nitrofurantona Amikasina 10 ugr. 2 ugr. 300 ugr. 23,75 ugr. 1,25 ugr. 10 U 30 ugr. 15 ugr. 10 ugr. 30 ugr. 2 ugr. 1 ugr. 30 ugr. 30 ugr. 10 U 10 U 300 U 10 ugr. 300 ugr. 30 ugr. 30 ugr.

20 o menos 11 o menos 8 o menos 12 o menos 13 o menos 12 o menos 13 o menos 9 o menos 10 o menos 13 o menos 12 o menos 20 o menos 11 o menos 8 o menos 11 o menos 12 o menos 14 o menos 9 o menos 9 o menos

29 o ms 14 o ms 20 o ms 13 o ms 18 o ms 18 o ms 17 o ms 18 o ms 15 o ms 13 o ms 19 o ms 17 o ms 29 o ms 22 o ms 12 o ms 15 o ms 17 o ms 19 o ms 12 o ms 14 o ms

27 o menos 32 o menos 26 o menos 11 o menos 14 o menos 14 o menos 11 o menos 12 14 15 16 15 16

28 o ms 33 o ms 27 o ms 15 o ms 17 o ms 17 o ms 14 o ms